QUANTA LiteTM dsDNA - inova

ResultadosControl de calidadUna muestra de suero que contenga autoanticuerpos de células esteroideas debe mostrar una tinción de color verdebrillante fluorescente del citoplasma de los portaobjetos de corteza suprarrenal.Un control negativo debe mostrar una tinción de color verde pálido en todos los tejidos, pero sin fluorescenciaperceptible.Si el aspecto de los controles no es el que se describe, el ensayo debe considerarse inválido y, por consiguiente,deberá repetirse.Interpretación de los resultadosConsultar las referencias 3 para ver ejemplos de imágenes en color de este patrón. Los resultados se notifican comopositivos o negativos.N.B.: cada laboratorio debe establecer el valor límite en el que se considera que un resultado positivo es clínicamentesignificativo.Limitaciones del Procedimiento1. La calidad de la fuente de luz, los filtros y la óptica de los microscopios de fluorescencia influirá en lasensibilidad del kit. El funcionamiento del microscopio depende de un correcto mantenimiento, especialmentedel enfoque de la lámpara de vapor de mercurio y el reemplazo de la misma una vez transcurrido el período detiempo recomendado.2. Otros autoanticuerpos, especialmente los antimitocondriales, pueden estar ocultos o confundirse conanticuerpos antisuprarrenales. Por este motivo, el suero que produzca tinción de las secciones suprarrenalestambién debe analizarse en secciones de hígado, riñón y estómago.3. No se ha evaluado la idoneidad del uso con reactivos IFA de otros fabricantes, sin embargo, no debe excluirsesu empleo.4. Este ensayo por sí solo no es válido para el diagnóstico. También deben tenerse en cuenta los demás factores,incluidos la historia clínica de los pacientes y otros resultados serológicos o biópsicos.Resumen del procedimiento1. Dejar que el medio de montaje alcance la temperatura ambiente.2. Diluir PBS con agua destilada.3. Diluir el suero de paciente 1/5 con PBS.4. Dejar que los portaobjetos de sustrato alcancen la temperatura ambiente (18-28°C).5. Aplicar 50-100μL de controles positivos y negativos y suero de paciente diluido a los pocillos correspondientes.6. Incubar en una cámara húmeda durante 30 minutos.7. Lavar durante 5-10 minutos en PBS.8. Secar con material absorbente el contorno de los pocillos y cubrirlos inmediatamente con una gota deconjugado.9. Incubar tal como se describe en el paso 6.10. Lavar tal como se describe en el paso 7.11. Montar.12. Examinar el portaobjetos en el microscopio de fluorescencia.Referencias1. Irvine W.J. Adrenalitis, hypoparathyroidism and associated diseases, in Samter M. (ed) ImmunologicalDiseases, ed 2. Boston, Little, Brown & Co. pp. 1278-1295, 1978.2. Weller T.H. Coons A.H. (1954). Fluorescent antibody studies with agent of Varicella and Herpes Zosterpropagated in vitro. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 86, 789-794.3. Bradwell A.R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies (Third Edition). Publ. The Binding Site Ltd.,Birmingham, UK4. Protein Reference Handbook of Autoimmunity (3 rd Edition) 2004. Ed. A. Milford Ward, G.D. Wild. Publ. PRUPublications, Sheffield. 14.NOVA Lite es una marca deINOVA Diagnostics, Inc.3