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QUANTA Lite ENA Profile EIA - inova

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MetodologíaAntes de empezar1. Atemperar a temperatura ambiente• El kit está diseñado para trabajar a temperatura ambiente (20-24°C).• Sacar el kit de su embalaje y dejar a temperatura ambiente durante aproximadamente 60 minutos.Los pocillos no deben sacarse de su embalaje antes de alcanzar la temperatura ambiente.Nota: Este kit puede mantenerse a temperatura ambiente hasta 1 semana.2. Componentes del kitMezclar con cuidado cada componente del kit antes de usar.3. Tampón de lavado (Concentrado 40x)Diluir la solución de lavado HRP 1:40 añadiendo el contenido del envase con concentrado a 975 ml de agua destiladao desionizada. Si no va a utilizar toda la placa, puede preparar una cantidad menor de solución de lavado añadiendo2.0 ml del concentrado a 78ml de agua destilada para cada 16 pocillos que vayan a utilizarse. El tampón diluido esestable 1 semana a 2-8°C, si no se va a utilizar el kit entero dentro de las tiempo, se pueden diluir volúmenes máspequeños. Si se forman agregados o hay cualquier signo de contaminación bacteriana, descartarlo y preparalo denuevo.4. Manipulación de las tiras y el marcoRecordar que cada muestra de paciente requiere una tira completa de 8 pocillos, colocar el número necesario depocillos en el contenedor de tiras. Desde la posición del pocillo A1 rellenar las columnas de izquierda a derecha.Mientras se manipula la placa, apretar los cantos largos del marco para evitar que los pocillos se salgan. Nota:Devolver inmediatamente a la bolsa los pocillos no utilizados con los desecantes y cerrar fuertemente con el fin deminimizar la exposición a la humedad.Tener cuidado de no punzar o rasgar la bolsa.ADVERTENCIA: La exposiciónde los pocillos a la humedad o contaminación por polvo u otras partículas conlleva a una degradación delantígeno llegando a obtener resultados imprecisos y potencialmente falsos.5. Dilución de la muestraDiluir 10µL de cada muestra con 1000µL de diluyente (1:101) y mezclar bien. Nota: Las muestras diluidas debenemplearse en las 8 horas siguientes. Nota: Los controles positivo y de cut-off están listos para el uso y norequieren dilución.Procedimiento de EnsayoMantener la misma secuencia de dispensación durante todo el test.1. Adición de la muestraUtilizando una tira completa para cada muestra, aplicar 100µL de control cut-off listo para el uso en la fila A y controlpositivo en la fila B de todas las tiras. Añadir 100µL de muestra diluida (1:101) a los 6 pocillos restantes de cada tira.Nota: Las muestras deben aplicarse lo más rápido posible para minimizar la deriva del análisis, y poner en marcha elcronómetro después de la adición de la última muestra.Incubar 30 minutos a temperatura ambiente.2. LavadoEl proceso de lavado es crítico y requiere una atención especial. Un mal lavado de la placa puede dar lugar aresultados poco precisos, con escasa precisión y valores de fondo elevados. Tras la incubación sacar la placa y lavarlos pocillos 3 veces con 200-300µL de tampón de lavado por cada pocillo. Lavar la placa con un lavador de placasautomático o manualmente según las siguientes indicaciones. Si se realiza el lavado automático, invertir la placa alfinal del lavado y sacudir los pocillos sobre papel absorbente.Las placas pueden lavarse manualmente según sigue:a. Verter el contenido de placa al fregadero.b. Sacudir los pocillos sobre papel absorbente seco.c. Echar en cada pocillo 200-300µL de tampón de lavado utilizando un pipeta multicanal.d. Con cuidado agitar la placa sobre una superficie plana.e. Repetir a-d dos veces.f. Repetir a y b.3

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