Comparaison de trois méthodes pour la détection de Mycoplasma et ...

Cycling Cy5
Les contrôles positifs émettent aussi un signal dans ce Cycling. L'ADN bactérien
recherché est donc reconnu par la sonde.
Si les échantillons ne donnent aucun signal dans ces Cycling cela veut dire qu'ils ne
possèdent pas l'ADN recherché. Pour pouvoir valider la négativité de ces derniers, il faut
que l’échantillon positif soit détecté dans FAM. JOE et Cy5 et que le contrôle négatif ne
soit pas détecté.
Limite de détection de la PCR a été calculée avec différente concentrations :
Concentration (copies/µl) CT Concentration calculée (copies/ µl)
1 1000 19.90 1403.89
2 500 51.46 349.82
3 50 23.88 40.16
4 100 22.77 108.49
5 10 25.26 1.68
6 5 ---------- -----------------------------------------------------
Nous pouvons voir que la détection est faite jusqu’à 10 copies pas µl. En dessous de cette
concentration, il faudrait concentrer l’échantillon pour qu’il soit détecté.
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