Comparaison de trois méthodes pour la détection de Mycoplasma et ...

4.3.3 Matériel
Kit Mycoplasma DUO
Etuve à 37 °C
Echantillons
4.3.4 Préparation des échantillons
Centrifuger les urines 5 min à 1500 rpm 7
4.3.5 Protocole
Avec la bouteille compte gouttes, distribuer 4 gouttes dans les 3 cupules du bas : U ≥10 4 ,
D, H ≥10 4 . 7
Mettre le culot d’urine dans le milieu de suspension et distribuer à l’aide d’une micropipette
4 gouttes dans les cupules du haut : U, X, H, et une goutte dans la cupule D. 7
Avec une autre micropipette, bien homogénéiser le contenu de la cupule D et distribuer
respectivement 1 goutte dans la cupule U ≥10 4 et H ≥10 4 . 7
Recouvrir la microplaque avec un film adhésif.
Incuber 24h à 37 °C, puis prolonger de 24h si nécessaire. 7
4.3.6 Interprétation des résultats
La première lecture après 24h est définitive dans le cas des titres forts. La deuxième
lecture à 48h permet de confirmer les négatifs, de révéler les titres faibles ou de révéler
les souches à titre fort avec un métabolisme lent. 7
Négatif : Absence de changement de couleur
Positif à Ureaplasma : Virage de(s) cupule(s) U uniquement
Positif à Mycoplasma : Virage de(s) cupule(s) H uniquement
Positif aux deux : Virage de(s) cupule(s) U et H.
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