Cahier d'Exercices en Biochimie - Faculté de médecine Saint-Antoine

Cahier d'Exercices en Biochimie / PCEM1 Biologie Moléculaire / 145. OUTILS DE BIOLOGIE MOLÉCULAIRE5.1 Compléter la séquence palindromique :A G A T ? ? ? ?? ? ? ? ? ? ? ?5.2 Etablir une séquence d'acide nucléique sur laquelle une endonucléase de restriction seraactive.Si cette séquence était présente dans l'ADN d'une bactérie, serait-elle systématiquementcoupée par l'endonucléase correspondante?5.3 Parmi les séquences suivantes, quelles sont celles qui seront pas coupées par uneendonucléase de restriction et pourquoi :a. G A A T T Cb. G T A T A Cc. G T A A T Cd. C A A T T G5.4 Qu'est-ce qu'un ADN recombiné ? Comment l'obtient-on ? Que peut-on en faire ?5.5 Dans les techniques du génie génétique:a. Quelles sont les principales caractéristiques de la sonde utilisée dans une réactiond'hybridation?b. Quelles sont les principales étapes de la constitution d'une banque d'ADNc?5.6 Qu'est-ce que le polymorphisme de taille ?5.7 Si vous souhaitez isoler un clone contenant un élément cis-régulateur, choisiriez-vous unebanque génomique ou une banque cDNA ?Justifiez votre réponse.Comment pouvez-vous préparer la banque que vous avez choisi d'utiliser ?5.8 Séquençage d'un ADN par la technique de Sanger:a. Expliquez en quelques lignes le principe de la technique.b. Soit représenté ci-dessous sur la ligne, un segment d'ADN monobrin. Son séquençage esteffectué par la technique de Sanger, avec une amorce XY. En examinant le schémareprésentant une partie de l'autoradiogramme du gel de migration, écrire :• la séquence nucléotidique lue directement sur ce schéma du film.• la séquence réelle du segment d'ADN monobrin correspondant.A G C T3''sens demigration5''Faculté de Médecine Saint-Antoine