Cahier d'Exercices en Biochimie - FacultÃ© de mÃ©decine Saint-Antoine

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Cahier d'Exercices en Biochimie / PCEM1 Biologie Moléculaire / 22V o F o d. fait intervenir une ADN-ligaseV o F o e. l'élongation par la Taq-polymérase sefait à 72°C.41 La méthode d'amplification génique in vitro(méthode PCR) possède toutes lescaractéristiques suivantes sauf une laquelle?V o F o a. Elle utilise des cycles successifsd'amplificationV o F o b. Deux amorces oligonucléotidiques desynthèse situées de part et d'autre de laséquence à amplifier sont nécessaires.V o F o c. Chaque cycle comporte les étapessuivantes : dénaturation de l'ADN,hybridation des amorces, copie par l'ADNpolymérase.V o F o d. L'ADN polymérase utilisée est la Taqpolymérase, enzyme stable à 90°C.V o F o e. Le taux d'amplification y augmente defaçon linéaire selon la formule y=2n où nest le nombre de cycles d'amplifications42 Les sites de restrictionV o F o a. n'existent que chez les eucaryotes.V o F o b. n'existent que chez les procaryotes.V o F o c. sont des sites de l'ADN reconnusuniquement par les enzymes de restrictionprovenant de la même espèce.V o F o d. sont très utiles pour l'analyse et leclonage des ADN.V o F o e. sont des sites de l'ADN reconnus etclivés par les enzymes de restrictionquelle que soit l'organisme d'où ellesproviennentV o F o c. reconnaissent le plus souvent despalindromes.V o F o d. coupent l'ADN simple brin.V o F o e. peuvent couper un ADN circulaire.46 Une banque d'ADN génomique est:V o F o a. une collection de clones d'ADNrecombinant dont la somme recouvre enprincipe la totalité des séquences d'ungénome donné.V o F o b. une collection de clones d'ADNrecombinant contenant exclusivement desséquences géniques.V o F o c. une collection d'ADN génomiqueprovenant d'espèces différentes.V o F o d. un laboratoire où l'on dépose des clonescartographiés.V o F o e. une collection de données deséquences introduites dans un ordinateur.47 L'autoradiographie d'un gel de polyacrylamideréalisée pour déterminer la séquence d'unfragment d'ADN selon la méthode de Sanger estreprésentée ci-contre. Chaque indication figurant sur leschéma en haut du gel: G, A, T, C correspond àl'incubation en présence d'un des 4 didéoxynucléotidestriphosphate .Quelle est la séquence de 5' vers 3' dufragment d'ADN matrice?43 Les enzymes de restrictionV o F o a. sont d'origine bactériennesV o F o b. reconnaissent des séquencesspécifiques dans l'ADN.V o F o c. hydrolysent l'ADN provenantd'espèces différentes.V o F o d. hydrolysent le plus souvent l'ADN auniveau des bases méthylées.V o F o e. hydrolysent l'ADN simple brin.44 Un ADNc est:V o F o a. une séquence fabriquée in vitro pourdes besoins expérimentaux.V o F o b. une séquence ne contenant aucuneinformation autre que celle qui estprésente dans un ARN messager matureV o F o c. une séquence contenant l'ensembledes exons et des introns.V o F o d. une séquence dont on peut déduireune séquence polypeptidique.V o F o e. une séquence naturellement présentedans le génome humain.45 Les enzymes de restrictionV o F o a. interviennent dans la réplication.V o F o b. ont une fonction chez les bactériesd'où on les extrait.V o F oV o F oV o F oV o F oV o F oa. 5'-TACCTAGACATTGGTACCC-3'b. 5'-GGGTACCAATGTCTAGGTA-3'c. 5'-ATGGATCTGTAACCATGGG-3'd. 5'-CCCATGGTTACAGATCCAT-3'e. 5'-TACCTACACATTGGTACCC-3'48 Indiquer si les assertions suivantes sont vraies oufausses .V o F o a - Si un certain nombre de bactéries ontété transfectées efficacement, elles auront,en général, toutes inséré un fragmentd’ADN différent, transmis à toutes lescellules de la descendance de chacune,Faculté de Médecine Saint-Antoine
Cahier d'Exercices en Biochimie / PCEM1 Biologie Moléculaire / 23formant alors une petite colonie dans laboîte de culture.V o F o b - Une banque d’ADN génomiquecontient des échantillons de toutes lesséquences d’ADN d’un organismeV o F o c - L’avantage des clones de cDNA estqu’ils contiennent la séquence complèted’un gène.V o F o d - Si chaque cycle de PCR permet dedoubler la quantité d’ADN synthétisé aucours du cycle précédent, 10 cyclesV o F opermettent théoriquement une amplificationde 1024 foise.- une banque d’ADNc contient deséchantillons de tous les gènes exprimésd’un organisme.ANNEXE I .1erNucléotideUCAGCODE GENETIQUE2èmeNucléotideU C A GPhe Ser Tyr Cys“ “ “ “Leu “ Stop Stop“ “ Stop Trp“ Pro His Arg“ “ “ ““ “ Gln ““ “ “ “Ileu Thr Asn Ser“ “ “ ““ “ Lys ArgMet “ “ “Val Ala Asp Gly“ “ “ ““ “ Glu ““ “ “ “3èmeNucléotideUCAGUCAGUCAGUCAGFaculté de Médecine Saint-Antoine
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