ANNALES MASTERS 1 MAI 2006 / 2007

M1 GMC – Microbiologie moléculaire 1 – UE MSVS 2030– Session de mai 2007– Documents non autorisés –Sujet proposé par N. Leblond – Durée conseillée 30 min.Chez de nombreux eucaryotes, l’antizyme est une enzyme qui régule le taux de polyamines(putrescine, spermidine et spermine) produits de dégradation de l’ornithine. Chez lesmammifères, l’antizyme est produite par un mécanisme de frameshift.Afin d’en étudier in vitro la fréquenceKaramysheva et al (1995) génèrent leplasmide C3 portant la constructionprésentée en (A) et étudie la synthèseprotéique par incorporation de méthioneS 35 et SDS-page.Question 1 : Donner la définition du FS.Nécessite il des signaux spécifiques ?Question 2 : Dans cette expériencecomment mesureriez vous son efficacité ?La synthèse des protéines Term (de 257aa) et FS (de 416 aa) en présence de laprotéine eRF1 et en présence (+) ou enabsence (-) de eRF3.Question 3 : Quel est le rôle des protéineseRF1 et eRF3 ? Interpréter les résultatsobtenus en B et C.Dans un second temps, Karamysheva et al rajoutent à leur système un ARNt Tyr suppresseur decodon UAG. La protéine attendue (RT1) résulte d’un mécanisme de translecture au niveau ducodon UAG 258 suivi de la terminaison au codon UAG 282. Le produit RT2 résulte d’unmécanisme de translecture au niveau des codons UAG 258 suivi de la terminaison au codonUAG 282.Question 4 : Qu’est ce que la translecture ?Question 5 : Interprétez les résultats ci-dessous D et E..