UNIVERSITA DEGLI STUDI DELLA TUSCIA DI VITERBO ...

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Indice 1 1.0.0 Premessa Introduzione 7 1.1.0 Stato red-ox, ossidanti, antiossidanti 1.1.1 Gli ossidanti 1.1.2 Gli antiossidanti 8 8 9 1.2.0 Stress ossidativo, danno ossidativo e patologie 11 1.3.0 Modulazione nutrizionale dello stress ossidativo 11 1.3.1 Ipotesi lipidica 12 1.3.2 Ipotesi antiossidante 13 1.3.3 Il paradosso francese 13 1.4.0 I composti fenolici (CF) 1.4.1 I polifenoli: struttura, classificazione e vie biosintetiche 14 14 1.4.2 Attività biologica 17 1.4.3 Attività antiossidante 18 1.4.4 Gli acidi idrossicinnamici 20 1.4.5 Biocinetica degli acidi idrossicinnamici 23 1.4.6 Assorbimento e metabolismo intestinale 23 1.4.7 Escrezione urinaria degli acidi idrossicinnamici 25 1.4.8 Biodisponibilità degli acidi idrossicinnamici 26 2.0.0 Ipotesi e scopi 33 3.0.0 Materiali e metodi 37 3.1.0 Matrice alimentare 37 3.2.0 Metodi studio in vitro 37 3.2.1 Estrazione dall’alimento per l’analisi dellaTAC 3.2.2 Misura del Potere Antiossidante Totale (TRAP Total Radicaltrapping Antioxidant Paramiter) 37 38 3.2.3 Misura del Potere Riducente Totale (FRAP Ferric reducing/antioxidant power) 40 II pagin a
3.2.4 Misura dei composti fenolici 42 3.2.6 Misura della vitamina C 42 3.3.0 44 3.4.0 Disegno di Studio in vivo Metodi per lo studio in vivo 45 3.4.1 Estrazione da plasma di acido clorogenico 45 3.4.2 Metodo di identificazione e quantificazione 46 3.5.0 Studio ex vivo su cellule 48 3.5.1 Colture cellulari 48 3.5.2 Vitalità cellulare, misurazione del GSH intracellulare e perossidazione lipidica 49 3.5.3 Determinazione dell’apoptosi tramit% Annessina V-FITC 51 3.6.0 Modello in vitro del plasma ossidato studio in vitro 52 3.7.0 Sostanze chimiche 54 4.0.0 Risultati 52 4.1.0 Carotenoidi 57 4.2.0 Vitamina C 57 4.3.0 Capacità antiossidante totale 58 4.4.0 Composti fenolici 59 4.5.0 Identificazione, calibrazione e limite di rivelabilità dell’acido clorogenico 62 4.6.0 Analisi del contenuto di polifenoli nel plasma 62 4.7.0 Potenziale antiossidante del carciofo in vivo 67 4.8.0 Misura della citotossicità negli epatociti 69 4.9.0 Induzione di morte cellulare H2O2 69 4.11.0 Misura dei valori di GSH e MDA 71 4.12.0 Citotossicità indotta da AE nelle cellule HepG2 73 4.13.0 Apoptosi indotta dal trattamento con AE nelle cellule HepG2 74 4.14.0 4.15.0 Capacità antiossidante totale misurata come FRAP dell’estratto e del ChA Modello sperimentale in vitro 76 4.16.0 Effetto delle 3 diverse concentrazioni di ChA sulla capacità antiossidante 77 4.17.0 Effetto delle 3 diverse concentrazioni di estratto sulla capacità 79 antiossidante 5.0.0 Discussione e conclusioni 81 5.0.0 Bibliografia 93 Lista tabelle III 75
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