03.04.2013 Views

Department of Animal Production Technology Faculty of Agricultural Technology

Department of Animal Production Technology Faculty of Agricultural Technology

Department of Animal Production Technology Faculty of Agricultural Technology

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

อุปกรณและวิธีการ<br />

1. ตัวอยางที่ใชทดลอง<br />

กระเพาะแพะ 1 กระเพาะ จากโรงฆาแพะ อําเภอหนองจอก จังหวัด<br />

กรุงเทพมหานคร<br />

2. การแยกและการจัดจําแนกเชื้อจุลินทรียจากกระเพาะแพะ<br />

2.1 วิธีการแยกแบคทีเรีย<br />

นําตัวอยางที่ใชทดลอง<br />

ตัวอยางละ 1 กรัม นํามาทํา dilution จนไดสารละลายที่มี<br />

−5 5<br />

ความเขมขน 10 จากนั้นนํา<br />

loop ที่ทําการฆาเชื้อแลวจุมลงในสารละลายที่มีความเขมขน<br />

10<br />

แลวทําการ cross streak ลงบนอาหาร PDPA (Potato Dextrose Peptone Agar) จนไดโคโลนีเดียวๆ<br />

ทํา single streak (pure culture) จากนั้นทําการยอมสีแกรมแลวถายรูปภายใตกลองจุลทรรศน<br />

พรอม<br />

ระบุ isolate<br />

−<br />

2.2 วิธีการแยกเชื้อรา<br />

2.2.1 วิธี Soil plate techniques<br />

นําตัวอยางที่ใชทดลอง<br />

ตัวอยางละ 0.0025 กรัม ใสลงใน plate แตละ plate แลวเท<br />

อาหาร GANA (glucose-ammonium nitrate agar) ทับลงไป จากนั้นบมไวที่อุณหภูมิหอง<br />

(25 องศา<br />

เซลเซียส) เปนเวลา 7 วัน สังเกตโคโลนีที่เกิดขึ้น<br />

แลวทําการแยกใหเปนเชื้อบริสุทธิ์<br />

(pure culture)<br />

บนอาหาร PDA หลังจากนั้นทําสไลด<br />

เพื่อศึกษาลักษณะทางสัณฐานวิทยา<br />

และทําการจัดจําแนก<br />

ชนิด พรอมถายรูปภายใตกลองจุลทรรศน<br />

2.2.2 วิธี Soil dilution plate techniques<br />

นําตัวอยางที่ใชทดลอง<br />

ตัวอยางละ 1 กรัม นํามาใสลงบน plate ที่มีอาหาร<br />

PDA<br />

วางตัวอยางใหทั่ว<br />

plate จากนั้นบมไวที่อุณหภูมิหอง<br />

(25 องศาเซลเซียส) เปนเวลา 5-7 วัน สังเกต<br />

โคโลนีที่เกิดขึ้นแลวทําการแยกเชื้อใหบริสุทธิ์<br />

(pure culture) หลังจากนั้นทําสไลด<br />

เพื่อศึกษา<br />

ลักษณะทางสัณฐานวิทยา และทําการจัดจําแนกชนิด พรอมถายรูปภายใตกลองจุลทรรศน<br />

2.3 วิธีการแยกแอกติโนมัยซิน<br />

นําตัวอยางที่ใชทดลอง<br />

ตัวอยางละ 1 กรัม นํามาทํา dilution จนไดสารละลายที่มี<br />

−5 5<br />

ความเขมขน 10 จากนั้นนํา<br />

loop ที่ทําการฆาเชื้อแลวจุมลงในสารละลายที่มีความเขมขน<br />

10<br />

แลวทําการ cross streak ลงบนอาหาร YSA (Actinomycetes Modifide Yeast Starch Agar (YSA)<br />

medium) จนไดโคโลนีเดียวๆ ทํา single streak (pure culture) จากนั้นทําการยอมสีแกรมแลวถายรูป<br />

ภายใตกลองจุลทรรศน พรอมระบุ isolate<br />

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!