Bioveiligheid in het laboratorium - VIB

Laboratoriumvoorzieningen
Dezelfde standaard laboratoriumvoorzieningen als voor E.coli zijn voldoende. Het verdient
echter aanbeveling open handelingen met gisten uit te voeren in een veiligheidskabinet.
Gisten kunnen gedurende lange tijd in de lucht overleven en kunnen op deze wijze allerlei
kweken besmetten. Daarnaast is er bij gesensibiliseerde mensen kans op een allergische
reactie na blootstelling aan gist of zijn sporen. Daarom wordt gistwerk vaak in een apart
lokaal gedaan.
Afval
Op dezelfde manier als voor E. coli dient alle afval dat genetisch gemodificeerde gisten
bevat geïnactiveerd of ontsmet te worden.
Bijzonderheden
Ook hier geldt dat bij het kloneren van een gen dat codeert voor een schadelijk genproduct
zoals een toxine, de risicoklasse omhoog gaat en dat alle bijbehorende maatregelen
moeten worden opgetrokken naar dat niveau.
Werken met genetisch gemodificeerde cellijnen
Inschaling
De inschaling van dierlijke of menselijke cellijnen is niet eenvoudig. De bepalende factor is
of de cellen schadelijke biologische agentia kunnen produceren, en dan met name virussen.
Ten eerste dient een onderscheid te worden gemaakt tussen primaire cellen en ‘established
cell lines’. De minimum inschaling van primaire cellen is L2. Bij established cell
lines moet vastgesteld worden of ze eventueel een virus zouden kunnen produceren.
Daarbij moet rekening gehouden worden met virale sequenties die in de vector aanwezig
zijn. Enkele voorbeelden:
Cellijn Virale Vector (dient Inschaling* Inschalings- Opmerking
sequenties slechts als regel**
in cellijn voorbeeld)
Primaire onbekend niet relevant L2 - Inschaling kan pas ommuizen-
laag als aangetoond
cellijn is dat de cellen geen
schadelijke biologische
agentia produceren
NIH-3T3 geen SV40ori vector L1 4, e of j kans op vorming
van virus is nul
HELA E6E7 genen SV40ori vector L1 4, e of j combinatie virale
uit HPV sequenties in cellijn
en vector kan geen
virus opleveren
Werken met enkele veelgebruikte laboratoriumorganismen 39