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Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento PROTOCOLO PARA DIAGNÓSTICO DA BRUCELOSE Diagnóstico Sorológico O diagnóstico sorológico da brucelose bovina e bubalina será feito por médico veterinário habilitado, bem como por laboratórios credenciados. Antígenos Deverão ser utilizados somente aqueles aprovados e controlados pelo MAPA. Os antígenos deverão ser transportados e conservados em temperatura de, no mínimo, +2ºC e de, no máximo, +8ºC, bem como protegidos da luz solar direta. Identificação dos Animais Os animais serão identificados individualmente, quer por tatuagem, quer por outra forma, inclusive pelo Registro Genealógico; poderão também ser identificados pelo método definido para o programa de rastreabilidade do MAPA. Testes Teste do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) Material • Antígeno para AAT • Soros a testar • Pipetas de Bang • Micropipetador de 30 µL ou de volume ajustável • Ponteiras • Placas com quadrados de 4 cm delimitados 91
92 • Misturadores de plástico ou de metal • Caixa com luz indireta para leitura • Soro controle positivo • Soro controle negativo • Agitador de placas (opcional) Precauções na execução do teste 1) O antígeno, quando não estiver em uso, precisa permanecer sempre entre 2ºC e 8ºC. Em caso de sua utilização para realizar um pequeno número de testes, dividi-lo em alíquotas e retirar da geladeira apenas a quantidade a ser utilizada a cada dia, evitando, assim, a perda de sensibilidade pelo constante resfriamento/aquecimento do antígeno. 2) A temperatura de execução desejável será em torno de 22ºC ± 4ºC, devendo-se evitar temperaturas muito abaixo ou muito acima desse valor. 3) As placas, os misturadores e as pipetas devem ser limpos com água corrente logo após o uso. Imergi-los em uma solução de detergente neutro por duas horas ou, de preferência, durante a noite. Em seguida, lavá-los em água corrente e, na seqüência, em água destilada. Secar em estufa ou à temperatura ambiente. 4) Antes de utilizar os misturadores nos próximos soros a serem testados, limpá-los em água destilada e enxugá-los em papel toalha. 5) Soros excessivamente hemolisados devem ser desprezados, porque podem apresentar resultados falso-positivos. 6) Em todos os testes devem ser simultaneamente testados soros controle positivo e negativo. Técnica 1) Equilibrar os soros e o antígeno à temperatura ambiente, por, pelo menos, 30 minutos. Caso os soros estejam congelados, o período de equilíbrio à temperatura ambiente deve ser maior. Homogeneizar os soros antes de realizar a prova.
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PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE E ERR
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Mecanismos de Transmissão No anima
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do serviço de defesa oficial, resp
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Capítulo XVI Da Certificação de
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sanitária animal, imunologia e té
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Assessoria de Comunicação Social
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