Anais do I Seminário do Projeto Temático - Escola de Engenharia ...
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O Brasil é um <strong>do</strong>s maiores produtores <strong>de</strong> etanol, processo que é responsável pela<br />
geração <strong>de</strong> um resíduo <strong>de</strong>nomina<strong>do</strong> vinhaça. Este resíduo apresenta valores eleva<strong>do</strong>s <strong>de</strong> DQO<br />
(Demanda Química <strong>de</strong> Oxigênio), presença <strong>de</strong> matais pesa<strong>do</strong>s, e baixo pH. A vinhaça <strong>de</strong>ixa a<br />
coluna <strong>de</strong> <strong>de</strong>stilação a elevadas temperaturas (85°C - 90°C), sen<strong>do</strong> necessário seu<br />
resfriamento para que processos mesófilos ocorram. Assim, a possibilida<strong>de</strong> <strong>de</strong> realizar a<br />
produção <strong>de</strong> hidrogênio em condições termofílicas po<strong>de</strong>ria ser mais viável. (ROSSETTO,<br />
1987; Wilkie et al. 2000).<br />
Os microrganismos envolvi<strong>do</strong>s na produção <strong>de</strong> hidrogênio po<strong>de</strong>m atuar em ampla<br />
faixa <strong>de</strong> temperatura. A maioria <strong>do</strong>s estu<strong>do</strong>s tem si<strong>do</strong> realizada em temperaturas mesófilas.<br />
Entretanto, o emprego <strong>de</strong> bactérias termófilas no processo po<strong>de</strong> ser bastante atrativo, pois<br />
esses microrganismos são capazes usar ampla faixa <strong>de</strong> resíduos e produzir menor varieda<strong>de</strong> <strong>de</strong><br />
metabólitos durante o processo <strong>de</strong> geração <strong>de</strong> H 2 . Além disso, temperaturas mais elevadas<br />
po<strong>de</strong>m favorecer o a termodinâmica das reações.<br />
Microrganismos mesófilos, os quais são capazes <strong>de</strong> produzir hidrogênio via fermentação,<br />
incluem bactérias anaeróbias estritas, como, por exemplo, bactérias <strong>do</strong> gênero Clostridium, e<br />
anaeróbias facultativas, como Enterobacter (Ntaikou et al. 2010).<br />
Estu<strong>do</strong>s recentes têm reporta<strong>do</strong> a produção biológica <strong>de</strong> hidrogênio em temperaturas<br />
termófilas e hipertemófilas. Os microrganismos termófilos que têm si<strong>do</strong> emprega<strong>do</strong>s nesses<br />
processos incluem espécies pertencentes aos gêneros Caldicellulosiruptor,<br />
Thermoanaerobacterium, Thermotaga, Caloramator (Sigurbjörnsdóttir, 2009; Ntaikou et al.<br />
2010).<br />
Diante <strong>do</strong> exposto, o objetivo <strong>de</strong>sse trabalho foi enriquecer consórcios microbianos<br />
capazes <strong>de</strong> crescer e produzir hidrogênio a partir <strong>de</strong> vinhaça <strong>de</strong> cana-<strong>de</strong>-açúcar a 37°C e 55°C.<br />
Material e Méto<strong>do</strong>s<br />
Inóculo<br />
O inóculo utiliza<strong>do</strong> para o enriquecimento <strong>do</strong>s consórcios microbianos foi lo<strong>do</strong> granular <strong>de</strong><br />
reator anaeróbio utiliza<strong>do</strong> no tratamento <strong>de</strong> água residuária <strong>de</strong> abate<strong>do</strong>uro <strong>de</strong> aves (Avícola<br />
Dakar, Tiête, SP/Brasil). O lo<strong>do</strong> anaeróbio foi previamente cultiva<strong>do</strong> em meio <strong>de</strong> cultivo<br />
sintético com sacarose (2 g DQO.L -1 ) em pH inicial 5,5 a 37°C e 55°C. Quan<strong>do</strong> foi observa<strong>do</strong><br />
produção <strong>de</strong> hidrogênio no biogás, o lo<strong>do</strong> foi submeti<strong>do</strong> ao tratamento térmico (90º C –<br />
10 minutos), according Kim et al. (2006). O tratamento térmico foi realiza<strong>do</strong> por duas vezes<br />
para a completa eliminação das arquéias metanogênicas. Estes ensaios foram realiza<strong>do</strong>s em<br />
frasco <strong>de</strong> 0,5 L com volume reacional <strong>de</strong> 0,25 L e 20 % <strong>de</strong> lo<strong>do</strong> (v/v). To<strong>do</strong>s os ensaios foram<br />
realiza<strong>do</strong>s em triplicata. Os frascos foram incuba<strong>do</strong>s à 37°C e 55°C, sem agitação.<br />
Enriquecimento <strong>do</strong>s consórcios microbianos mesófilos e termófilos<br />
Após o tratamento térmico, o lo<strong>do</strong> foi cultiva<strong>do</strong> em meio <strong>de</strong> cultura com vinhaça diluída<br />
(2 g DQO.L -1 ). Os ensaios foram realiza<strong>do</strong>s em frascos <strong>de</strong> 1 L, com volume reacional <strong>de</strong> 0,8 L<br />
e 20 % (v/v) <strong>de</strong> lo<strong>do</strong> pré-trata<strong>do</strong>. N 2 (100%) foi fluxiona<strong>do</strong> no headspace <strong>do</strong>s frascos para<br />
manter as condições anaeróbias. Nesta fase, foram usa<strong>do</strong>s <strong>do</strong>is frascos: um <strong>de</strong>les foi manti<strong>do</strong><br />
a 37°C e o outro a 55°C. Esta etapa <strong>do</strong> trabalho, <strong>de</strong> aumento da biomassa e adaptação da<br />
mesma à vinhaça durou aproximadamente 2 meses. Durante este perío<strong>do</strong>, o meio <strong>de</strong> cultivo<br />
<strong>do</strong>s reatores foi troca<strong>do</strong> duas vezes por semana com a finalida<strong>de</strong> <strong>de</strong> suprir os microrganismos<br />
com substrato e remover os metabólitos produzi<strong>do</strong>s.<br />
O substrato – vinhaça <strong>de</strong> cana-<strong>de</strong>-açúcar<br />
A vinhaça utilizada como substrato para os ensaios <strong>de</strong> produção <strong>de</strong> hidrogênio foram<br />
coletadas na Destilaria Nova Era, localizada no município <strong>de</strong> Ibaté, Ibaté, SP/Brasil. Depois<br />
da coleta, a vinhaça foi mantida congelada. Antes <strong>de</strong> ser utilizada, a vinhaça foi centrifugada a<br />
10.000 rpm a 4°C por 5 minutos com objetivo <strong>de</strong> separar a fração sólida da líquida. O