Etapa 2

genei tinta PSA, posibil pe calea MAP-kinazelor sau calea Akt. Expansiunea clonala a celulelor cu diferentiere
neuroendocrina joaca un rol important in dezvoltarea CaP insensibil hormonal.
In incercarea de a identifica o posibila cauza virala a CaP, au fost studii care au raportat ca un tip de virus
cunoscut ca determina leucemii si sarcoame la animale s-a gasit si in celulele maligne din CaP. Dovezile furnizate
precum ca XMRV este prezent in celulele maligne au aratat ca virusul este un gamaretrovirus, un retrovirus simplu
izolat prima data in 2006. gamaretrovirusurile determina cancer la animale, dar nu se stia ca fac acest lucru si la
oameni. Studiile s-au limitat pana in prezent la tesutul prostatic normal. Retrovirusurile insera o copie a propriului
ADN in cromozomii celulelor infectate. O astfel de insertie cateodata apare adiacent unei gene ce regleaza
cresterea celulara, intrerupe cresterea normala a celulei, determinand o proliferare rapida celulara, ce poate
dezvolta cancer. Acest mecanism al carcinogenezei e urmat in general de gamaretrovirusuri. Un alt studiu a
aratat ca susceptibilitatea la infectia cu XMRV nu este crescuta de vreo mutatie genetica, asa cum s-a raportat
anterior.
Au fost studii care au investigat profilul molecular al CaP cu grad inalt (Gleason 3 / 4) . Cea mai supraexprimata
gena a fost Hepsina, o serin-proteaza asemanatoare tripsinei cu domeniu catalitic orientat extracelular. Antigenul
membranar specific de prostata este cea de-a doua gena supraexprimata, si astfel s-au identificat 22 de gene
supraexprimate si 64 subexprimate, inclusiv loci lor de pe cromozomi.
Alte studii au demonstrat ca lungimea totala a tumorii a specimenelor de biopsie este o variabila importanta de
prognostic, in stransa legatura cu supravietuirea generala, fata de varsta pacientului, nivelul seric al PSA, scorul
Gleason si fractia fragmentelor cu tumora. Masuratoarea necesita un efort extramodest pentru patologi, valori
peste 20 mm jucand un rol important la pacientii cu CaP.
In aceasta faza s-a analizat un lot de ..... pacienti din cele 3 spitale de urologie partenere in acest proiect.
De la P1 au fost 50 pacienti
Examenul histopatologic.
Fragmentele prelevate au fost supuse examenului histopatologic, atât cele de la nivelul tumorii cât şi ale
organelor excizate.
Am efectuat examenul histopatologic pe cele 40 de cazuri puse în lucru. Etapele parcurse au fost
următoarele:
• Recoltarea şi fixarea fragmentelor în formol neutru soluţie 10% (pH-7)
• Spălare cu apă de robinet
• Deshidratare prin trecerea fragmentelor prin mai multe băi de alcooluri cu concentraţii crescătoare
(70 0 , 90 0 , 85 0 , 100 0 ): pentru clarificare, piesele au fost trecute prin trei băi de benzen pentru eliminarea
alcoolului din ţesut
• Impregnarea în parafină topită s-a făcut la cald, în termostat (55-56 0 C) şi a fost urmată de includerea
în blocuri
• Secţionarea blocurilor de parafină la microtom a urmărit obţinerea unor secţiuni de 4-5 microni
grosime
• Etalarea secţiunilor pe lame degresate şi tratate cu albumină Mayer a fost urmată de uscarea
acestora la termostat (37 0 C)
• Deparafinarea lamelor s-a făcut în trei băi de benzen, iar hidratarea în trei băi de alcool etilic, în
concentraţii descrescătoare
• Secţiunile destinate studiului morfologic au fost colorate:
1. hematoxilină-eozină:în toate cazurile, nucleii şi structurile bazofile sunt colorate în albastru violet,
iar citoplasmele în roz-roşu
2. tricromul van Gieson: în toate cazurile evidenţiază fibrele de colagen în roşu
3. albastru alcian la pH-1 în toate cazurile evidenţiază mucinele acide în albastru, mucinele neutre
în roşu, şi cele mixte, acide şi neutre în purpuriu
• deshidratarea lamelor colorate s-a făcut în trei băi de alcool etilic în concentraţii crescătoare, iar
clarificarea în trei băi de benzen
• montarea preparatelor a fost făcută în balsam de Canada, ca mediu anhidru
• lamele au fost examinate la microscopul Nikon.
Prepararea tesutului prostatic. Prostata imediat obtinuta dupa prostatectomie radicala, si fragmente vor fi
detasate dupa disectie sagitala. Sectiunile vor fi colorate cu hematoxilina-eozina pentru a identifica zonele care
contin stromal, vezicule seminale, prostata normala, BPH, HGPIN sau adenocarcinom prostatic.
Din registrele Departamentului de Anatomie Patologica al Institutului Clinic de Boli Digestive si Transplant
Hepatic Fundeni au fost selectate 25 de cazuri diagnosticate cu carcinom prostatic si tratate chirurgical in Clinica
de Urologie a Institutului Clinic Fundeni.
In baza de date au fost introduse: numele si prenumele pacientilor; varsta; codul numeric personal; numarul foii
de observatie; diagnosticul clinic preoperator; tipul interventiei chirurgicale; dimensiunile tumorii; culoarea si
consistenta tesutului tumoral; diagnosticul microscopic.
14