Tillverkning av DNA-konstrukt med hjälp av enzymatiska metoder

More documents

Recommendations

Info

11 1 µl RE2-handtag (539 pmol DNA-bas) 7.5 µl Anti-DIG inmärkta polystyrenkulor (2,17 µm 0,1% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 8.5 µl 15 % ficoll-lösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 12 1 µl RE2-handtag 10 µl Anti-DIG inmärkta polystyrenkulor (2,17 µm 0,1% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 6 µl 15 % ficoll-lösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 13 1 µl RE2-handtag (539 pmol DNA-bas) 15 µl Anti-DIG inmärkta polystyrenkulor (2,17 µm 0,1% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 1 µl 15 % ficoll-lösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye Tabell L-2 redovisar uträknade värden på den relativa mängden DNA-molekyler i respektive brunn efter ovan utförda gelelektrofores. Tabell L-2: Uträknade värden på den relativa mängden DNA-molekyler i respektive brunn Bana 3 4 5 6 7 9 10 11 12 13 Relativ 67,8 75,7 82,8 84,0 85,7 29,3 35,8 45,1 48,7 66,8 mängd DNAmolekyler i brunn (%) Titrering av DNA-handtag skapade med PCR-metoden I Tabell L-3 visas innehåll i de olika brunnarna på den 1 % agarosgelen. Tabell L-3: Prover som laddades på 1 % agaros. Provnummer Innehåll 1 5 µl O’RangeRuler 500 bp DNA Ladder (0, 5 µg/µl) 1 µl Sybrgold (2x) 14 µl 15 % ficollösning 2 0,6 µl PCR1 (539 pmol DNA-bas) 1 µl streptavidinkulor (2,1 µm 0,5% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 15,4 µl 15 % ficollösning2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 3 0,6 µl PCR1-handtag (539 pmol DNA-bas) 0,5 µl streptavidininmärkta polystyrenkulor (2,1 µm 0,5% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 15,9 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 4 0,6 µl PCR1-handtag (539 pmol DNA-bas) 1 µl streptavidininmärkta polystyrenkulor (2,1 µm 0,5% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 15,4 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 5 0,6 µl PCR1-handtag (539 pmol DNA-bas) 1,5 µl streptavidininmärkta polystyrenkulor (2,1 µm 0,5% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 14,9 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 43
6 0,6 µl PCR1-handtag (539 pmol DNA-bas) 2 µl streptavidininmärkta polystyrenkulor (2,1 µm 0,5% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 14,4 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 7 0,6 µl PCR1-handtag 3 µl streptavidininmärkta polystyrenkulor (2,1 µm 0,5% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 13,4 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 8 0,6 µl PCR1-handtag (539 pmol DNA-bas) 4 µl streptavidininmärkta polystyrenkulor (2,1 µm 0,5% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 12,4 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 9 0,6 µl PCR2 (539 pmol DNA-bas) 1 µl Anti-DIG inmärkta polystyrenkulor (2,17 µm 0,1% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 12,4 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 10 0,6 µl PCR2-handtag (539 pmol DNA-bas) 0,5 µl Anti-DIG inmärkta polystyrenkulor (2,17 µm 0,1% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 15,9 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 11 0,6 µl PCR2-handtag (539 pmol DNA-bas) 1 µl Anti-DIG inmärkta polystyrenkulor (2,17 µm 0,1% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 15,4 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 12 0,6 µl PCR2-handtag (539 pmol DNA-bas) 1,5 µl Anti-DIG inmärkta polystyrenkulor (2,17 µm 0,1% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 14,9 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 13 0,6 µl PCR2-handtag (539 pmol DNA-bas) 2 µl Anti-DIG inmärkta polystyrenkulor (2,17 µm 0,1% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 14,4 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 14 0,6 µl PCR2-handtag (539 pmol DNA-bas) 3 µl Anti-DIG inmärkta polystyrenkulor (2,17 µm 0,1% w/v) 1 µl Sybrgold (2x) 13,4 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 15 0,6 µl PCR2-handtag (539 pmol DNA-bas) 4 µl Anti-DIG inmärkta polystyrenkulor (2,17 µm 0,1% w/v) 1 ul Sybrgold (2x) 12,4 µl 15 % ficollösning 2 µl 6X Orange DNA Loading Dye 44
Page 1 and 2: Tillverkning av DNA-konstrukt med h
Page 3 and 4: Sammandrag Mekaniska studier av ens
Page 5 and 6: Begreppslista Anti-DIG Anti-digoxig
Page 7 and 8: Innehåll 1 Inledning 1 1.1 Syfte .
Page 9 and 10: 2-3 NAD + -beroende ligering . . .
Page 11 and 12: Figur 1-2: Översträckning av kär
Page 13 and 14: konstruera samt verifiera DNA-konst
Page 15 and 16: H 2N HO NH 2 adenosin __ P O OH P R
Page 17 and 18: 2.3.1 Polymeraskedjereaktion Polyme
Page 19 and 20: påverkas av en kraft [43]. Intensi
Page 21 and 22: varefter denna späddes 2x, 4x, 8x
Page 23 and 24: 4.3.3 Verifiering av linjära DNA-s
Page 25 and 26: Kyvetterna placerades i ett tempere
Page 27 and 28: Figur 5-3: Verifiering av linjära
Page 29 and 30: 5.3 Verifiering av biotin- och DIG-
Page 31 and 32: applicera kraft på DNA-konstruktet
Page 33 and 34: 5.5 Analys av kärnan med överlapp
Page 35 and 36: istabiliteten med hjälp av längre
Page 37 and 38: [21] György A. Marko-Varga och Pet
Page 39 and 40: A Förbrukningsmaterial Material so
Page 41 and 42: Kärna med överlappssekvens för P
Page 43 and 44: D Förinfärgning med Sybrgold I Ta
Page 45 and 46: F Rening av DNA Reningen utförs me
Page 47 and 48: H Beredning av dNTP-mix I Tabell H-
Page 49 and 50: J Verifikation för att linjära DN
Page 51: L Titrering av DNA-handtag med poly
Page 55 and 56: N Smältkurvsanalys Smältkurvsanal
Page 57 and 58: %% dna molekylerna ndna=0.1e-12 % m

Tillverkning av DNA-konstrukt med hjälp av enzymatiska metoder

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?