Rapport 1056 In vitro.pdf - Svenska EnergiAskor AB

VÄRMEFORSK
(samma resultat ska kunna uppn[s flera g[nger fXr samma prov i samma laboratorium)
3) enkel (proceduren ska inneh[lla s[ f[ steg som mXjligt) 4) tolkningsbar (d.v.s.
resultaten m[ste kunna korreleras vRl med resultat fr[n in vivo fXrsXk) 5) heltRckande
(d.v.s. till[ta analys av ett s[ brett spektra som mXjligt av fXroreningar, jordar etc) 6)
konsekvent (d.v.s. testresultaten ska XverensstRmma med processer som fXrutsp[tts
utifr[n kunskaper om jordkemi och speciering av fXroreningen).
HGSGH E-55.[+.5-.& *2$ZY2%
Existerande metoder som bygger p[ mRnniskans fysiologi kan delas upp i tv[ typers (i)
statiska metoder som utfXrs i bRgare eller (ii) dynamiska metoder som genomfXrs i
genomflXdes-reaktorer a39b. Den senare varianten tar hRnsyn till den gradvisa
tXmningen av intagna fXdoRmnen i mag-tarmkanalen. Endast ett f[tal dynamiska
tekniker har utvecklats, varav en s[dan Rr TIM (se nedan). En in vitro metod som
simulerar mRnniskans upptag av fXroreningar, kan inneh[lla mellan 1-3 segment, dessa
Rr munh[la, magsRck och tunntarm. De flesta metoder Rr statiska mag-tarmmodeller,
som simulerar fXroreningens vRg fr[n munnen till tunntarmen a28b.
Den kemiska sammansRttningen i mag-tarmkanalen Rr komplicerad och sv[rt att
efterlikna, eftersom den varierar med individens [lder, hRlsa m.m. FXrekomst av fXda i
mag-tarmkanalen, d.v.s. om personen har Rtit eller Rr fastande p[verkar ocks[ de
kemiska fXrh[llandena. Grrn a16b har identifierat n[gra fXrh[llanden som anses sRrskilt
viktiga att efterlikna i en in vitro metod:
! Buffrad sur miljX i den simulerade magsRcken (pHc2)
! Buffrad svagt basisk miljX i den simulerade tarmdelen (pH>7)
! Aeroba fXrh[llanden fXljt av anaeroba fXrh[llanden fXr att simulera mag-
respektive tarmdel.
! Tillsatser av enzymer, proteiner och galla.
! NRrvaro av mat (t.ex. mjXlkpulver) fXr att simulera fXda.
! LRmplig verkningstid i varje delmoment, fXrslagsvis 3 timmar i magdelen, 10 h i
tarmdelen.
! L/S>100 fXr stabilitet, d.v.s. andel vRtskevolym i fXrh[llande till massa fast
material i fXrsXket > 100.
FXrh[llandet mellan vRtska och fast fas i tillgRngliga metoder varierar fr[n 2,5:1 till
5000:1. FXr att spegla den i mag-tarmsystemet hos ett 2-3 [r gammalt barn, bXr L/SfXrh[llandet
vara ca 100:1 a39b.
Det finns i dagslRget ingen in vitro metod som omfattar samtliga ovan nRmnda punkter.
Vanligtvis inkluderas inte heller mikrobiell aktivitet i mag-tarmsystemet eller aktiv
transport av fXroreningar i en in vitro studie. :ven dessa faktorer kan vara viktiga fXr
upptag av fXroreningar och innefattas i in vivo data. D[ ingen metod kan efterlikna den
mRnskliga matsmRltningsfysiologin i sin helhet blir valet av testmetod en kompromiss
mellan Rmnets kemiska egenskaper, matsmRltningsfysiologin, praktiska begrRnsningar
och resultatens tilltRnkta anvRndningsomr[de. Tabell 2 visar en sammanstRllning av
n[gra befintliga in vitro metoder. Metodernas konstruktion och tillRmpningsomr[de
beskrivs mer detaljerat lRngre fram. FXr att en in vitro metod ska vara relevant att
10