Lunds Universitets Ekologiska - Institutionen för naturgeografi och ...

Modellerade och uppmätta kväveflöden i energiskog som bevattnas med avloppsvatten3.3.3 LaborationsarbeteProverna förvarades i frysrum, ca ett dygn, varefter de tinades för att lustgasen i provenskulle kunna undersökas genom gaskromatografi (gaskromatograf: 3300/3400 Varian,porapak Q-kolonn, temp 50° C. Detektor temp. 310° C, 63 Ni ECD). För att få ut de frusnaproverna ur rören spolades dessa med varmt vatten och proverna överfördes sedan till250 ml flaskor. Vatten motsvarande polycarbonrörets volym samt 7 ml formalin (40procentig) tillsattes och ett tätslutande lock med butylsepta förslöt flaskorna. Formalintillsattes då det hämmar bakteriernas aktivitet. Provet tinades ytterligare i mikrovågsugnför att få en homogen blandning med en temperatur på 25°C. Proverna skakades tvåminuter i en skakmaskin (Turbula) för att frigöra gasen från jordprovet och frambringagasjämvikt i flaskan. Sedan sattes de i ett vattenbad (Grant 5540-D) i fem minuter för attbibehålla temperaturen på 25°C. Därefter fylldes en 1 ml spruta med gas från gasfasen iflaskan och injicerades i gaskromatografen vilken påvisade mängden lustgas. För attberäkna antalet mol lustgas användes allmänna gaslagen. De framtagna lustgasvärdenastuderades och bearbetades sedan statistiskt.Acetyleninhiberingsmetoden är ett av få fungerande sätt att mäta denitrifikation. En avmetodens fördelar är att det är lätt att mäta den ansamlade lustgasen (N 2 O) med hjälp avgaskromatografi. Nackdelar med metoden är att den kopplade nitrifikation/denitrifikationenockså hämmas vilket kan ge lägre värden på denitrifikationsaktiviteten än vad somegentligen sker.3.3.4 Beräkningar och statistikDenitrifikationen beräknades genom att subtrahera bakgrundshalter (0) av lustgas frånhalterna i prov inkuberade med acetylen ((4+)-0) samt dividera med inkubationstid ochrörets diameter. På samma sätt subtraherades bakgrundshalter av lustgaskoncentrationenmed provet som inkuberats utan acetylen (4-0) för att få fram den spontant bildadelustgasen..För att se variationen inom lokalerna (Kvidinge respektive Kågeröd) testades transekt Amot transekt B på respektive plats. Då där inte fanns någon signifikant skillnad mellandem, slogs värdena samman. Därefter kontrollerades om värdena var normalfördelademed hjälp av ett histogram. Det konstaterades att så inte var fallet varför värdenalogaritmerades och därmed åstadkoms en bättre normalfördelning.Skillnaderna testades statistiskt med ensvansat respektive tvåsvansat t-test. Genom atttesta 0:or (direkt infrysning) mot 4+ (infrysta efter 4 timmars acetyleninhibering medacetylen) kontrollerades det huruvida någon denitrifikation sker m h a ett ensvansat t-test.Detta test valdes eftersom det förväntades en högre lustgashalt i 4+ än i 0. Däreftertestades det om det fanns någon bildad lustgas, N 2 O, genom att testa 4 (inkuberade i 4timmar utan acetylen) mot 0:or. Här använde vi oss av ett tvåsvansat t-test då vi inteförväntade oss någon skillnad i lustgashalt mellan 4´orna och 0´orna, d v s ingen spontanlustgasbildning.Då det endast sker signifikant denitrifikation i Kågeröd fanns det inget motiv till attstatistiskt jämföra Kågeröd mot Kvidinge.27