Подсекция «Антропология

деградации и ремоделирования межклеточного матрикса. Известно, что урокиназа
регулирует клеточную миграцию не только за счет протеолитического действия, но и путем
активации внутриклеточной сигнализации. Рецептор урокиназы (uPAR) играет центральную
роль в передаче сигнала от урокиназы внутрь клетки. Однако GPI-рецептор урокиназы
лишен трансмембранного и внутриклеточного доменов и поэтому не может самостоятельно
запускать внутриклеточные сигнальные каскады. Считается, что активация сигнальных
путей происходит опосредованно через некоторые трансмембранные рецепторы, с которыми
взаимодействует uPAR. Особую роль среди таких посредников играют интегрины,
рецепторы, ассоциированные с G-белками и тирозинкиназные рецепторы фактора роста
EGFR. Однако механизмы внутриклеточной сигнализации урокиназы все еще до конца не
ясны и нуждаются в изучении.
Мы предположили, что урокиназный тип активатора плазминогена стимулирует
клеточную миграцию опосредованно через матриксный белок фибулин-5. Для проверки
данной гипотезы были исследованы две линии клеток: эмбриональные мышиные
фибробласты дикого типа (MEFwt) и нокаутированные по гену фибулина-5 (MEFko).
Оказалось, что адгезивные свойства и подвижность клеток MEFwt и MEFko различны.
Клетки MEFko быстрее прикрепляются к субстрату, но медленнее движутся по сравнению с
клетками дикого типа. Влияние урокиназы на клеточную подвижность было изучено в
камере Бойдена и на модели царапины. Оказалось, что урокиназа стимулирует
направленную миграцию клеток обоих типов по градиенту урокиназы, однако статистически
достоверная разница в движении клеток под действием урокиназы по сравнению с
контролем наблюдалась лишь у клеток дикого типа. Таким образом, полученные данные
могут свидетельствовать об участии фибулина-5 в регуляции миграции клеток, вызванной
урокиназой.
Светособирающий комплекс LH2 из серной фотосинтезирующей бактерии Eсt. haloalkaliphyla
Ашихмин Александр Александрович (Орел, alex-asch@rambler.ru)
Изучен светособирающий комплекс LH2, выделенный из мембран серной бактерии
Eсt. haloalkaliphyla методом ПАГЭ. Его спектр поглощения в ближней ИК области
характеризуется двумя полосами при 800 и 850 нм. Полоса поглощения при 800 нм у
данного комплекса была гомогенной, как у комплексов LH2 из несерных бактерий. В LH2
комплексе Alc. minutissimum полоса при 800 нм была гетерогенной (два компонента) и с этой
характеристикой связывают способность комплексов собираться без каротиноидов.
Основные каротиноиды в комплексе LH2 из Eсt. haloalkaliphyla – ангидрородовибрин (34%)
и спириллоксантин (37%). Изучена возможность подавления синтеза каротиноидов
Eсt. haloalkaliphyla с помощью ДФА. Были выращены клетки с различным содержанием
каротиноидов (60-70%, 35-45% и 25-30% от контроля). Определен состав каротиноидов во
всех видах образцов. При концентрации ДФА 12 мг/л в среде выращивания были получены
практически бескаротиноидные клетки (3-5% от контроля), которые содержали следы
ζ-каротина и ОН-нейроспорина. Популяции комплексов LH2 из клеток с различным
содержанием каротиноидов исследованы на гетерогенность состава. В любой из данных
популяций присутствовала часть комплексов LH2 с более высоким содержанием
каротиноидов, чем в исходной мембране. Они были более термоустойчивы и выделялись,
как «выжившие» комплексы после нагревания мембран при 80°С. Полученные результаты
согласованы с ранее имеющимися данными по гетерогенности LH2 комплексов
у Alc. minutissimum.
Проведено встраивание экстрактов каротиноидов из бактерии Alc. minutissimum (основной
каротиноид – родопин 68%) в бескаротиноидные хроматофоры Eсt. haloalkaliphyla. Удалось
добиться максимального встраивания (≈95%) по сравнению с контролем. Изучены спектры
поглощения, КД, флуоресценции и возбуждения флуоресценции, а также фотоустойчивость,
термостабильность полученных комплексов со встроенными каротиноидами. Данные
характеристики соответствуют характеристикам комплекса LH2 из контрольных клеток.
42