Подсекция «Антропология

Полученные данные позволяют говорить о значительных перестройках в работе
МДГ-системы в клетках мезофилла и обкладки сорго под действием засоления. Показана
активация НАД + -зависимых ферментов в клетках мезофилла, очевидно связанная с
эффектом “солевого дыхания”. Кроме того, увеличение активности этих ферментов при
стрессе необходимо для синтеза малата, способного поддерживать осмотический баланс
клетки. Установлено увеличение содержания малата в мезофилле сорго в первые 6 часов
солевого воздействия с последующим снижением его содержания, что вероятно является
результатом усиления декарбоксилирования малата. В обкладке указанные эффекты были
менее выражены по сравнению с мезофиллом. Обнаружено усиление работы
НАДФ + -зависимого малик-энзима в мезофилле сорго и НАДФ + -зависимой МДГ в его
обкладке, что указывает на негативное влияние стрессора на скорость работы цикла Хэтча-
Слейка. Мы предполагаем, что именно НАДФ + -МДГ обеспечивает в накопление малата в
клетках обкладки опытных растений. Таким образом, индуцированные засолением
изменения в работе МДГ системы главным образом направлены на интенсификацию цикла
Кребса, необходимую для энергизации клеток, и на дополнительный синтез малата,
способного выполнять осмолитические функции. Исследуемая ферментная система в
клетках мезофилла сорго более лабильна в стрессовых условиях по сравнению с обкладкой.
Специфичность мест встраивания каротиноидов в светособирающий комплекс
В800-850 из Alc. minutissimum
Большаков Максим Александрович (Пущино, lfbv22@rambler.ru)
Цель работы – исследовать избирательность встраивания каротиноидов в комплекс LH2
из серной фотосинтезирующей бактерии Alc. minutissimum. Упрощенная схема
спририллоксантинового пути биосинтеза каротиноидов представлена следующей цепочкой:
– ликопин – родопин – дидегидрородопин – ангидрородовибрин – родовибрин –
спириллоксантин. В комплексе LH2 Alc. minutissimum основным каротиноидом является
родопин. В него встраивали каротиноиды из более поздних этапов биосинтеза
(спириллоксантин, ангидрородовибрин из Rps. rubrum).
Бескаротиноидные мембраны выделяли из клеток Alc. minutissimum, выращенных с ДФА
(12 мг/л). Каротиноиды из Rps. rubrum выделяли методом экстракции ацетон/метанольной
смесью с последующим переводом в петролейный эфир и высушивали током аргона. Состав
экстракта: спириллоксантин 88%, родопин 8,7% и ангидрородовибрин 3,3%. Встраивание
проводили путем дробного добавления экстракта каротиноидов в ацетон/метаноле
(А490=0.7) к бескаротиноидным хроматофорам Alc. minutissimum, с последующим диализом
для удаления растворителей. Анализ каротиноидного состава проводили методом ВЭЖХ на
колонке Spherisorb ODS2, используя детектор с диодной матрицей SPD-M20A. Спектры
поглощения образцов регистрировали на спектрофотометре Cary 50.
Максимальное увеличение полосы поглощения каротиноидов (~30% от контроля)
получено при 3-х кратном добавлении экстракта. В этом случае в LH2 комплекс встраивался
преимущественно родопин. Дальнейшее добавление экстракта вызывало быстрое
разрушение LH2 комплекса и в его спектре поглощения присутствовало значительное
количество мономерного БХЛ (полоса при 780 нм). Реэлектрофорез этой фракции, позволил
выделить небольшое количество LH2 комплекса, в котором основным каротиноидом был
спириллоксантин (36,5%). Чтобы доказать специфичность встраивания каротиноидов в LH2
комплекс, использовали смесь экстрактов из Rps. rubrum и Alc. minutissimum (основной
каротиноид – родопин) в разном соотношении (1:1 и 1:4). В комплекс LH2 встраивался
преимущественно родопин. В LH1 комплекс всегда встраивался спириллоксантин, даже при
условии, что его было недостаточно для максимального встраивания. Обсуждаются
процессы встраивания каротиноидов в комплексы LH2 in vivo.
46