Полный текст - БГУ. Сайт биологического факультета

"\TG590 \cLET-4-G~ТМ43/SSR4J/" 3.4/ Cf-б/SSR12/'// 2.2, 12 3 4 5 м\\\,\\\TG365Т1556СТ146Т1399TG178СТ206SSR350Рис. 20. Локализация гена С/бна генетической карте томатаTomato-EXPEN 2000 [371]Для дальнейшего анализа локусов Cj2 и С/5, а также картированногонами гена С/б были использованы цраймеры 2-5С и CF5, разработанныеDixon et al. [285] на основании нуклеотидной последовательностигена С/5 и дающие при амплификации продукты определенного молекулярноговеса.В результате амплификации праймера 2-5С с ДНК тест-линий быливыявлены молекулярные маркеры ожидаемого размера в случае амплификациис ДНК индивидуальных растений, содержащих локусы Cj2 и С/5.для растений с геном Сjб получен минорный спектр продуктов амплификациитого же веса, который не позволяет достоверно идентифицироватьданный локус. Амплификация праймера с ДИК линий томата, содержащихдругие локусы устойчивости (СjЗ, С/4, Cj9), а также с ДИК восприимчивыхформ отсутствовала. Таким образом, данный праймер выявляет кластергенов Cj2/Cj5, однако непригоден для выявления локуса С/б (рис. 21).Амплификация ДНК томатов с праймером CF5 давала маркер ожидаемогомолекулярного веса только у растений, содержащих локус С/5, в другихслучаях амплификация отсутствовала.На основании данных о нуклеотидной последовательности генаCj2 был сконструирован праймер 2-2CR, предположительно повышающийспецифичность амплификации кластера Cj2/C/5. Действительно, приамплификации ДНК линий томата CGN15330, CGN15342, CGN15332 иCGN15839 с праймерами 2-5CF и 2-2CR полученный спектр фрагментовпозволяет выявить как локусы Cj2 и С/5, так и С/б, в то время как с ДНКдругих тест-линий амплификация отсутствует (рис. 22).~:J,Рис. 21. Амплификация дик томата с npаймерами 2-5С.дик растений содержит локусы: 1- Cfl; 2, 3 - Cf5; 4, 5 - С/бМ - маркер молекулярной массы (1 kb DNA 1adder (ERL)).Стрелкой обозначены уникальные маркерыРис. 22. Амплификация дик томата с npаймерами 2-5С и 2-2CR..дик содержит локусы: 1- Cfl; 2, 3 - Cf5; 4, 5, б - С/б.М - маркер молекулярной массы (1 kb DNA 1adder (BRL)).Стрелкой обозначены уникальные маркерыПолученные нами данные о локализации высокоэффективного генаС/б устойчивости к кладоспориозу на б-й хромосоме томата и разработанныемолекулярно-генетические маркеры, выявляющие локусы Cj2, Cj5 иС/б, позволяют значительно повысить эффективность селекционной работыи расширяют возможность использования новых перспективных источниковгенов устойчивости в селекционных программах.108