Полный текст - БГУ. Сайт биологического факультета

3.3. КУЛЪТУРАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ С. fulvuтИсследование биоэколоmческих особенностей патогена с целью использованияего для оценки растений на болезнеустойчивость невозможнОбез работы с чистыми лабораторными культурами. Вместе с тем, посколькуС. jUlvum обладает высокой степенью паразитизма, культивированиегриба in vitro представляет определенные трудности. Культивированневозбудителя кладоспориоза на четырех наиболее известных для г~фомицетовагаризованных питательных средах (картофельно-глюкознои, овсяной,пивном сусле, Чапека) показало степень пригодности и особенностироста С.jUlvum на каждой из НИХ. Сравнение проводилось по трем характеристикам,отражающим жизнеспособность гриба: л~тентному периоду,интенсивности вегетативного роста и репродуктивнои функции. Культуральныеособениости колоний описывали по поверхностному профипю,цвет определяли по шкале [348].На среде Чапека развивается шерстисто-войлочная серовато-зеленаяколония неправильной формы, с неровными краями. С возрастом колонияприобретает светло-сиреневый цвет. Среда окрашивается в темно-фиолетовыйцвет. На картофельно-глюкозном агаре колония шерстистая, желто-бурая,неправилъной формы, бугристая. Окраска среды темно-коричневая.На овсяном агаре колония, как правило, плоская, округлая, с неровнымикраями, рыжевато-желтого или буровато-зеленого цвета. Окраска реверзуматемно-коричневая. Часто выделяется эксудат. На сусло-агаре развиваетсяшерстисто-войлочная, сильно бугристая колония бурого цвета.Реверзум окрашен в черный цвет.При длительном культивированииv vна любой питательнои среде колониипокрываются белым вторичным мицелием, сформировавшимся изпроросших спор, который образует небольшое количество мелких светлыхспор с тонкой бесцветной оболочкой.vНа всех средах, за исключением пивного сусло-агара, латентныи периододинаков: мицелиальный рост начинается одновременно через4 дня (табл. 9).Рост и спороноmение С.fulvum на развых питательнЫХ средахТаблица 9Инкубационный Относительная ве- КоличествоСреда перНОД,ДНИ личииаколоний,% конидий/см-, пrr.Чапека 4 100 190хl0 4Картофельная 4 78 206хl0 4Овсяная 4 73 336х10 4ПИВное сусло 5 66 32х10 4НСРО.5 - 32,3 21хl0 438Развитие колоний происходит очень медленно, размеры их едва достиrают1O~ 13 мм. На среде из пивного сусла отмечен наиболее слабыйnpирост (66 %) и низкая репродуктивная способность (в ~ 10,5 раза меньше,чем на других средах). Разница в росте на остальных средах несущественна;максимальная интенсивность спорообразования отмечена на овсянойсреде (336 х 104конидий/см-), Поскольку C.fulvum не способен к синтезудостаточного количества витаминов группы В, однако нуждается вних [128], то добавление тиамина (Вд либо рибофлавина (В 2 ) в количестве0,2 г на 100 мл среды существенно ускоряет рост колоний (на 33-41,1 %),при этом значительно (в 1,9~2,1 раза) увеличивается продуктивность спорообразования(табл. 10).Таблица 10СредаВлияние тиамина и рибофлавина на рост С.fulvumИнкубационныйпериод, ДНИОтносительнаявеличинаколоний, %Количество конидий Iсм 2 , пrr.Чапека + тиамин (B 1 ) 5 141,1 448хl0 4Чапека + рибофлавин (В2) 5 133,3 406х10 4Чапека(контроль) 5 100,0 210х10 4НСРо,5 - 17,3 51х10 4Таким образом, картофельно-глюкозная, овсяная и среда Чапека с добавлениемтиамина либо рибофлавина вполне пригодны для культивированияС.fulvum.3.4. ВЛИЯНИЕ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ(ВЛАЖНОСТЬ, ТЕМПЕРАТУРА, рН СРЕДЫ, СВЕТ)НА РОСТ И РАЗВИТИЕ С. fulvumРеализация онтогенетической программы живых организмов тесносвязана с экологическими условиями, главными из которых являютсявлажность, температура, кислотность субстрата, свет. Они же влияют и наинфицирование растений. В значительной степени процесс заражения определяетсявлажностью, т. к. споры большинства фитопатогенных грибовпрорастают при наличии капельно-жидкой влаги [206].Влажность. Относительная влажность воздуха имеет особое значениепри прорастании конидий на поверхности листа, до проникновения гифы вмезофил. Разными исследователями приводятся варьирующие данные обОПТИМальныхи критических значениях влажности для прорастания конидийи роста мицелия (цит. по [170]), нет сведений о влиянии влажности на формированиеи интенсивность спорообразования. В модельном опыте на сухом39