Skriptum Pharmazeuten 2011

Durch den Indikator (Phenolrot) ist der unbeimpfte Kligler rot.
Die Beimpfung erfolgt im Stich und auf der Schrägfläche.
a.) Dextrose-Abbau: durch Dextrose-(Glucose)-Abbau entsteht Säure; der Indikator schlägt
um nach gelb. Da der Kliger nur sehr wenig Dextrose enthält, ist dieser Zucker nach
wenigen Stunden verbraucht. Danach kommt es durch den Sauerstoff der Luft auf der
Schrägfläche zu einer Realkalisierung mit Farbrückschlag nach rot.
Kligler nach 24 Stunden: rot/gelb
b.) Lactose-Abbau: durch Lactose-Spaltung entsteht Säure; der Indikator schlägt um nach
gelb. Da im Kligler zehnmal so viel Laktose wie Dextrose enthalten ist, wird Lactose in
24 Stunden nicht ganz aufgebraucht. Es tritt also keine Realkalisierung der Schrägfläche
auf.
Kligler nach 24 Stunden: gelb/gelb
c.) H2S-(Schwefelwasserstoff)-Bildung aus schwefelhaltigen Aminosäuren oder
anorganischen Sulfaten und Sulfiten erfolgt zB durch Salmonellen und Citrobacter. Die
im positiven Fall entstehende Schwarzfärbung ergibt sich aus der Verbindung von H2S
mit Eisensalzen (FeSO4).
d.) Gasbildung: entsteht beim Zucker-Abbau durch die meisten Enterobakteriaceaen
(Ausnahmen s.o.)
Zuckerspaltung
Die meisten Bakterien sind in der Lage, durch Fermente (Carbohydrasen) verschiedene Zucker
abzubauen. Zur Differenzierung der Enterobakterien eigenen sich besonders:
1.) Glucose (=Dextrose, Traubenzucker), ein Monosaccharid
2.) Lactose (=Milchzucker), ein Disaccharid aus einem Glucose- und einem
Galaktosemolekül
3.) Saccharose (=Rohrzucker), ein Disaccharid aus Glucose und Fructose
Bei der Zuckerspaltung entstehen saure Abbauprodukte, die den pH-Wert des Mediums
herabsetzen, sodass der zugesetzte Indikator (Bromthymolblau) von blaugrün nach gelb
umschlägt.
Glucose positiv: alle Enterobakterien
Lactose positiv: die meisten „apathogenen“ Enterobakterien
Darüber hinaus entsteht beim Zucker-Abbau durch Enterobakterien Gas (Ausnahmen: Shigellen,
Salmonella typhi, Proteus morganii & rettgeri).
Die Prüfung der Gasbildung erfolgt am einfachsten mit DURHAM-Röhrchen, das sind kleine
Eprouvetten von etwa 30 mm Länge und 8 mm Durchmesser, die im Dextrose-Röhrchen mit der
Öffnung nach unten versenkt werden. Bei der Bebrütung gasbildender Keime bildet sich im
Gärröhrchen eine mehr oder weniger große Gasblase.
Hinweis: Bei anaerober Bebrütung können Indikatorfarben reduziert werden. Deshalb empfiehlt
sich der Zusatz des Indikators erst nach abgeschlossener Bebrütung! Außerdem ist zu bedenken,
dass fast alle Farbstoffe auf empfindliche Keime hemmend wirken können.
Harnstoffspaltung
Proteusstämme (außer Prot. inconstans = Providentia) produzieren das Ferment Urease. Urease
hydrolisiert Harnstoff zu Ammoniumcarbonat: CO (NH2)2 + Urease und H2O (NH4)2CO3.
Ammoniumcarbonat verschiebt den pH-Wert des Mediums in den alkalischen Bereich, was
durch Zusatz eines geeigneten Indikators (Phenolphtalein) sichtbar gemacht werden kann:
Rotfärbung.
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