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M A R K T Ü B E R S I C H T<br />

Marktübersicht: PCR-Kits<br />

Molekularbiologische Forschung ohne PCR ist heute kaum mehr denkbar. Die Vielfalt entsprechender Kits, diverser Polymerasen und<br />

Assays für den Pathogennachweis sowie Kits zur Beschleunigung der Hybridisierung und zur PCR-Optimierung nimmt daher mit wachsendem<br />

Kenntnisstand über Schlüsselmoleküle stetig zu. Informationen über die aktuellen Produktlinien gibt die folgende Marktübersicht.<br />

1. Firmendaten, Ansprechpartner Applied Biosystems<br />

Applera Deutschland GmbH<br />

Frankfurter Straße 129 B<br />

64293 Darmstadt<br />

Tel.: +49-(0)6151-9670-0<br />

Fax: +49-(0)6151-9670-5599<br />

abdirect@eur.appliedbiosystems.com<br />

Beckman Coulter GmbH<br />

47807 Krefeld<br />

Europark Fichtenhain B13<br />

Tel.: +49-(0)2151-333-625<br />

Ansprechpartner: Dr. Rene Gödde<br />

2. Produktbezeichnung AmpliTaq ® Gold DNA Polymerase<br />

mit GeneAmp ® 10X PCR Gold Buffer<br />

TaqMan ® PreAmp Master<br />

Mix Kit<br />

High Capacity cDNA Reverse<br />

Transcription Kit<br />

GeXP Agencourt AMPure SNPstart-Kit<br />

3. Anwendungsgebiete Hot-start PCR („research only “) quantitative Amplifikation<br />

von cDNA-Beständen für das<br />

Messen proportional richtiger<br />

Gen-Expression<br />

quantitative Erststrang-cDNA<br />

Synthese von mRNA-Populationen<br />

Kit zur kapillarelektrophoretischen<br />

Charakterisierung von bis zu 30<br />

Genexpressionsprofilen in einer<br />

Multiplex-PCR („research only “)<br />

Kit zur hocheffizienten PCR-<br />

Aufreinigung auf Basis der<br />

SPRI-Technologie mit magnetischen<br />

Beads („research<br />

only “)<br />

Kit zur kapillarelektrophoretischen<br />

Typisierung für bis zu 10<br />

SNPs in einer Multiplex-PCR<br />

(„research only “)<br />

4. optimiert für… Applied Biosystems Thermal<br />

Cyclers<br />

Applied Biosystems Real-Time<br />

PCR Systeme<br />

Applied Biosystems Thermal<br />

Cyclers + Real-Time PCR<br />

Systeme<br />

Beckman Coulter CEQ 8000 & 8800<br />

+ beliebiger Thermocycler<br />

Laborautomation, Mikrotiterplatten<br />

Beckman Coulter CEQ 8000<br />

& 8800 + beliebiger Thermocycler<br />

5. Kitkomponenten/Anzahl Ansätze Enzyme, komplette Puffer; in unterschiedlichen<br />

Größen erhältlich von<br />

200 bis 20,000 Reaktionen<br />

Enzyme, Puffer, dNTPs,<br />

Kontroll- cDNA, Protokoll und<br />

Dokumentation<br />

RT Enzyme, Puffer, dNTP<br />

Mischung und Random-Primer.<br />

Ein RNAse-Inhibitor für<br />

komplizierte Anwendungen ist<br />

in erweitertem Kit erhältlich<br />

100 Reactions 96 - oder 384 Platte pro Ansatz Single Tube; 100 Reactions<br />

6. Polymerase-Eigenschaften Original hot-start-Enzyme, gute<br />

Prozessivität, Aktivierung zum<br />

optimalen Zeitpunkt nach dem hotstart<br />

für eine bessere Spezifität,<br />

lange Halbwertzeit unter Cycling-<br />

Bedingungen<br />

Hot-start Fähigkeit, arbeitet<br />

schon mit 10ng Ausgangsmaterial<br />

37 °C Reaktion mit Random-<br />

Primern, oder 48 °C-Benutzung<br />

möglich, um unter<br />

Verwendung eines gezielten<br />

Primers eine höhere Spezifität<br />

zu erreichen<br />

Thermo-Start ® DNA Polymerase<br />

with separate 25 mM MgCl 2<br />

(ABgene<br />

0908)<br />

7. Nachweisspezifität (%) Falscher Einbau, „Misincorporation Rate“ 1 Base auf 2.000 (0,05%) 95% mindest. 85% recovery für<br />

Produkte größer als 100bp<br />

95%<br />

8. Sensitivität (Kopien/Targetsequenz) AmpliTaq Gold wird erfolgreich in<br />

der low-copy-PCR eingesetzt<br />

unverfälschte Anreicherung<br />

bis zur 30,000fachen Menge<br />

der Ausgangs-RNA<br />

Erhöht durch die Fähigkeit des<br />

Einsatzes bei 48 °C<br />

5 ng total RNA einsetzbar im Bereich von 100<br />

bp bis 40kb<br />

1-100 fmol<br />

9. Quantifizierung AmpliTaq Gold wird als Basis<br />

für quantitative Real-Time-PCR<br />

eingesetzt<br />

wurden in der wissenschaftlichen<br />

Literatur veröffentlicht<br />

vierfach größere Effektivität<br />

der Amplifikation der GAPDH-<br />

Transkription als der beste<br />

Wettbewerber<br />

ja (vergleichbar mit Real-Time-<br />

PCR)<br />

nein<br />

10. Multiplexing/Farbstoffe Multiplexing AmpliTaq Gold wird<br />

erfolgreich für high-level-Multiplex-Anwendungen<br />

wie die MLPA-<br />

Technik eingesetzt.<br />

Mit den TaqMan ® Gene<br />

Expression Assays können<br />

über 100 spezifische Gene auf<br />

Grundlage des prä-amplifizierten<br />

Materials identifiziert<br />

werden<br />

Die ‚Produkt-Bulletins‘ zeigen<br />

überlegene mRNA-Quantifikations-Ergebnisse<br />

bis zu 30x Multiplex möglich mit<br />

1 Farbstoff<br />

10x Multiplex möglich mit 3<br />

versch. Farbstoffen<br />

11. Zahl Pipettierschritte Einsatz einer einzigen vorgemischten<br />

Reaktionslösung<br />

Minimale Anzahl von Pipettierschritten<br />

Minimale Anzahl von Pipettierschritten<br />

max. 10<br />

12. zertifiziert/lizenziert für AmpliTaq Gold wurde vor allem für<br />

forensische und klinische Untersuchungen<br />

eingesetzt, gemäß der<br />

internen Validierung der in diesen<br />

Feldern tätigen Gruppen<br />

Nur für Forschungszwecke zugelassen<br />

13. Besonderheiten Hot-start DNA-Polymerase auf die<br />

in der wissenschaftlichen Literatur<br />

weltweit am häufigsten verwiesen<br />

wird<br />

Sensibelster Pre-Amp-Kit auf<br />

dem Markt<br />

Quantitative cDNA-Produktion<br />

für eine große Bandbreite von<br />

mRNA Ausgangskonzentrationen<br />

selbst Produkte von 100bp<br />

können mit sehr guter Ausbeute<br />

aufgereingt werden<br />

14. Preis (Euro) abhängig von Anwendung<br />

34 | 7. Jahrgang | Nr. 6/2006 LABORWELT

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