Download (10Mb) - tuprints

Einleitung
innerhalb eines Sphäroides entsteht durch eine frühe Adhäsion der kleinen
Aggregate (67).
E17
ONL
OPL
INL
div17
ONL
OPL
INL
IPL
GCL
a
div8
b
IPL
div8
GCL
*
c c´*
*
c´
Abbildung 5. Immunhistochemisch gefärbte Kryoschnitte einer E17 in vivo-Retina (a), eines
div17 Explantats (b) und eines div8 Sphäroids (c, c‘). Die Kryoschnitte wurden alle gegen
Glutaminsynthetase und Stäbchen-Photorezeptoren gefärbt. Die Struktur des Explantats gleicht
der in vitro-Retina. Der Sphäroid weist die Merkmale der IPL (Stern) und ONL (Dreieck; Rosetten)
auf. In der vergrößerten Ansicht c‘ von Bild c ist zu erkennen, dass die Photorezeptoren in gleicher
Weise in der Rosette angeordnet sind wie in vivo und im Explantat. Maßstab: 50 µm.
Eine höhere retinale Organisation in vitro zeigt nur ein Explantatsystem. Hierbei
werden ganze Retinastücke in Kultur überführt. Im Gegensatz zum Sphäroid-
System wird auf eine Untersuchung der Reaggregation-Fähigkeit in
An/Abwesenheit von Zusätzen verzichtet. Bei dem Explantatsystem steht die
Entwicklung der einzelnen Zelltypen und der Schichtenbildung (OPL und IPL) im
Vordergrund. Dabei ist es von besonderem Vorteil, wenn die Explantate ohne
spezielle Zusätze und ohne Matrix, wie etwa einer Zellulosemembran,
auskommen. Das ideale System besitzt dieselben Kulturbedingungen wie die
Sphäroid-Kultivierung. Darüber hinaus sollten die Explantate stabil genug sein, um
eine Kultivierung von mehr als 10 Tagen in vitro überstehen zu können. Teil dieser
Arbeit war die Entwicklung dieses Explantatsystems (71).
13