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Zielsetzung
2 Zielsetzung
Ziel dieser Arbeit war es, die Rolle von Müllerschen Radialgliazellen (MCs) bei der
Wirkung der neurotrophen Faktoren GDNF, BDNF und PEDF auf die embryonale
Entwicklung der Wirbeltierretina näher zu ergründen. Als Modellsysteme dienten
Sphäroide und Explantate aus der embryonalen Hühnerretina. Dabei wurden die
Explantate vor allem genutzt, weil sie während ihrer Kultivierung deutlicher alle
retinalen Schichten ausbilden.
Der erste Teil dieser Arbeit sollte sich mit der Suche nach geeigneten Methoden
und Systemen beschäftigen, mit denen die Rolle der Müllerzellen in retinalem
Gewebe und in Reinkultur studiert werden kann. Hierzu sollten reine Müllerzell-
Populationen aus retinalem Gewebe erstellt werden, die für die
Expressionsstudien (RT-PCR) genutzt werden konnten. Die Reinigung der
Müllerzellen sollte möglichst nach kurzer Kultivierungsdauer erreicht werden.
Anhand dieser Populationen sollte die Expression relevanter Zytokine und ihren
Rezeptoren nachgewiesen werden.
Im zweiten Teil sollte die Wirkung von α-Aminoadipat (AAA) auf Explantate
untersucht werden. Dies sollte sowohl auf immunhistochemischer, als auch auf
Genexpressionsebene untersucht werden. Es wurde bisher angenommen, dass
AAA oxidativen Stress in Müllerzellen erzeugt, was zum Anschwellen (Gliose) und
zum Absterben der Müllerzellen führen kann. Dies sollte in dieser Arbeit überprüft
und weiter analysiert werden. Hierzu war es erforderlich, eine Methode zu
etablieren, die Auskunft über den oxidativen Stress gibt.
Im dritten Teil sollte die Wirkung von relevanten Zytokinen auf reine Müllerzell-
Populationen und die Wirkung von α-Aminoadipat (AAA) auf das
Expressionsmuster in Müllerzellen untersucht werden. Im letzten Fall sollte
insbesondere auf die Expression relevanter Zytokine unter dem Einfluss von AAA
geachtet werden. Desweiteren sollte die Wirkung von Zytokinen auf die AAAbehandelten
Explantate untersucht werden. Insbesondere sollte eine mögliche
Reduzierung der toxischen Wirkung von AAA auf Müllerzellen bestimmt werden.
Zur Dokumentation wurden immunhistochemische und molekulare Methoden
verwendet.
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