Protokoll 1 (Wallner)
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Modul Immunologie Januar 2013<br />
Ergebnisse<br />
Wir wissen, dass Bet v 1 eine molekulare Größe von 17 kDa hat. Wir vergleichen nun unsere<br />
Banden vom Bet v 1-Standard und dem Pollenextrakt mit den Banden unseres Markers.<br />
15 kDa<br />
Bet v 1 Pollenextrakt<br />
Bet v 1 Standard<br />
Markerbande<br />
Bandenspektrum Extrakt<br />
Abb. 1: Immunoblot Abb. 2: Coomassie-gefärbtes Gel Abb. 3: Marker-Banden (Quelle:<br />
http://www.piercenet.com)<br />
Diskussion<br />
Im Gel zeigten sich beim Pollenextrakt verschiedene Banden, während sich beim Standard<br />
nur eine Bande zeigte. Im Vergleich dazu bildete sich im Immunoblot ein Niederschlag<br />
spezifisch an der Stelle an der die Antikörper Bet v 1 gebunden hatten. Die markierten<br />
Banden im Immunoblot und die stark bläulichen Banden im Gel befanden sich knapp über<br />
der 15 kDa-Bande des Markers, was den Erwartungen entsprach. Die Bande für Bet v 1 ist<br />
deutlich ausgeprägt, was bedeutet, dass ein großer Anteil des Gesamtproteins aus Bet v 1<br />
besteht.<br />
Die Bandenverzerrung („Smiley-Effekt“) zum Rand des Gels hin entstand durch ungleiche<br />
Ladungsverteilung bei der Elektrophorese.<br />
Universität Salzburg 4 / 13