Protokoll 1 (Wallner)
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Modul Immunologie Januar 2013<br />
B(n) und resuspendieren. Well 9: Überführen von 50 µl aus Well 8, resuspendieren<br />
und 50 µl verwerfen.<br />
Abb.5: Verdünnungsreihe Bet v1<br />
10. Verdünnungsreihe Extrakt:<br />
In C2 werden 100 µl der erstellten 0,5 µg/ml Verdünnung von Extrakt Standard<br />
pipettiert.<br />
Nach folgendem Schema bis Well 8:<br />
Überführen von 50 µl von C(n-1) nach C(n) und resuspendieren.<br />
Well 9: Überführen von 50 µl aus Well 8, resuspendieren und 50 µl verwerfen.<br />
Abb.6: Verdünnungsreihe Extrakt<br />
11. Waschen mit 200µl TBST pro Well (2x)<br />
12. Pro Well 50 µl Antikörperlösung (polyklonaler Rabbit Anti bet v 1-Antikörper),<br />
Inkubation 30 Minuten bei RT<br />
13. Waschen mit 200µl TBST pro Well (2x)<br />
14. Pro Well 50 µl Antikörperlösung (Goat Anti-Rabbit gekoppelt mit alkaline<br />
Phosphatase), Inkubation 30 Minuten bei RT<br />
15. Waschen mit 200µl TBST pro Well (3x)<br />
16. Pro Well 100 µl Substrat-Lösung (4-NAG)<br />
17. Messung der Ergebnisse am Photometer nach 10, 20 und 30 Minuten bei 405nm<br />
Universität Salzburg 7 / 13
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