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Willinger.ppt [Schreibgeschützt]
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Testung von Hefen im Vergleich<br />
Methodenvergleich<br />
M27-A2<br />
EUCAST<br />
DIN 58940-84<br />
Zielgruppe<br />
Hefen<br />
fermentierende Hefen<br />
Hefen<br />
Platte<br />
Microtiter 96 U;<br />
Microtiter 96 F<br />
Microtiter 96 U<br />
Gesamtvolumen<br />
200 µl<br />
200µl<br />
200 µl<br />
Medium<br />
RPMI 1640 +<br />
RPMI 1640 +<br />
HR-Medium*<br />
Amphotericin B:<br />
Amphotericin B:<br />
(+ 0,5 mg /L<br />
Antibiotic medium 3?<br />
Antibiotic medium 3<br />
Methylenblau)<br />
Glucose- Konz.<br />
0,20%<br />
RPMI 2% / AM3 2%<br />
2%<br />
Puffer<br />
MOPS<br />
MOPS<br />
Phosphatpuffer<br />
pH<br />
6,9 – 7,1 (25°C)<br />
7,0 ± 0,2<br />
6,8 – 7,2<br />
Inoculum (Zellen/ml)<br />
0,5 – 2,5x10 3<br />
0,5 – 2,5x10 5 in A.d.<br />
0,5 – 2,5x10 3<br />
Temperatur (°C)<br />
35°C<br />
35°C – 37°C<br />
36°C ± 1 °C<br />
Auswertung nach<br />
46-50 h<br />
24h<br />
18 (24, 48) ± 2 h<br />
C.neoformans<br />
70 – 74 h<br />
entfällt<br />
48 + 72 h<br />
visuell / photometrisch<br />
visuell<br />
photometrisch<br />
visuell<br />
Ablese-Hilfen<br />
80 % Inhibition<br />
Endpunkt : 50% Inhibition<br />
(MIC50%) 5FC + Azole<br />
80 % Inhibition<br />
MIC 80% : AmB<br />
Nach W. Fegeler, 2006<br />
+ mit Glutamin, ohne Bicarbonat<br />
MOPS: 3-N-(morpholino)propanesulfonic acid<br />
HR*. Modifiziert nach<br />
Schmalreck
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