TRANSFEKTION - H941 Department für Angewandte Genetik und ...
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Das Ergebnis könnte aber auch wie folgt aussehen:<br />
Luminometrie:<br />
Blindwert<br />
Luziferase-<br />
LTK LTK LTK<br />
+ Plasmid "C"<br />
puffer Kontrolle Cd 2+<br />
Kontrolle<br />
(cps) (cps) (cps) (cps)<br />
59<br />
57<br />
62<br />
9954<br />
Protein-Assay:<br />
LTK LTK LTK<br />
+ Plasmid "C"<br />
Kontrolle<br />
(mg/ml)<br />
0.52<br />
Cd 2+<br />
(mg/ml)<br />
0.44<br />
Kontrolle<br />
(mg/ml)<br />
0.47<br />
LTK<br />
+ Plasmid "C"<br />
Cd 2+<br />
(mg/ml)<br />
0.44<br />
Die spezifische Luziferase-Aktivität <strong>für</strong> die Plasmide "H" <strong>und</strong> "C" wäre:<br />
LTK<br />
+ Plasmid "H"<br />
Kontrolle<br />
(cps/mg)<br />
36474<br />
LTK<br />
+ Plasmid "H"<br />
Cd 2+<br />
(cps/mg)<br />
256313<br />
LTK<br />
+ Plasmid "C"<br />
Kontrolle<br />
(cps/mg)<br />
210532<br />
LTK<br />
+ Plasmid "C"<br />
Cd 2+<br />
(cps/mg)<br />
179864<br />
Daher wäre der Induktionsindex <strong>für</strong> die Plasmide "H" <strong>und</strong> "C":<br />
LTK<br />
+ Plasmid "H"<br />
Kontrolle<br />
-<br />
LTK<br />
+ Plasmid "H"<br />
Cd 2+<br />
7.0<br />
LTK<br />
+ Plasmid "C"<br />
Kontrolle<br />
-<br />
LTK<br />
+ Plasmid "C"<br />
Cd 2+<br />
0.9<br />
LTK<br />
+ Plasmid "C"<br />
Cd 2+<br />
(cps)<br />
7973<br />
Wie bereits erwähnt wird die Aktivität des Hsp70-Promotors in Gegenwart von Kadmium-Ionen<br />
deutlich stimuliert, während der starke konstitutive CMV-Promotor durch den<br />
Schwermetallzusatz nicht nennenswert beeinflusst wird. Daher handelt es sich bei Plasmid "H"<br />
um pHsp70-Luc, während Plasmid "C" pCMV-Luc darstellt.<br />
Seite 16 von 24, Erstelldatum 12.09.2011
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