TRANSFEKTION - H941 Department für Angewandte Genetik und ...

ANHANG 4: BERECHNUNGEN
Die Angaben für eine Berechnung im Rahmen des Kolloquiums könnten lauten:
Beispiel 1: DNA-Bestimmung
Verdünnung der DNA-Lösung: 1:200
OD260: 0.38
OD280: 0.21
OD260 = 1.0 entspricht einem DNA-Gehalt von 50 µg/ml. Berechne den DNA-Gehalt Deiner
Lösung sowie den Reinheitsquotienten.
(Auflösung: DNA-Gehalt 3.8 µg/µl; Reinheitsquotient 1.81)
Beispiel 2: Zellzahlbestimmung
Volumen an Zellsuspension: 20 ml
Zellen pro Grossquadrat: 92
Das zwischen Zählkammer und Deckglas eingeschlossene Volumen pro Grossquadrat entspricht
0.2 µl Zellsuspension. Berechne die Zahl der in Deiner Suspension enthaltenen Zellen und
ermittle das Volumen an HBS-Puffer, in dem Du das Zellpellet zur Erstellung einer Suspension
mit 8 � 10 6 Zellen/ml aufzunehmen hast.
(Auflösung: 9.2 � 10 6 Zellen; 1.15 ml HBS-Puffer)
Beispiel 3: spezifische Luziferase-Aktivität und Induktionsindex
Ansatz mit CdCl2: 9630 cps (Luminometrie)
0.62 mg/ml (Proteingehalt)
Kontrollansatz: 5207 cps (Luminometrie)
0.38 mg/ml (Proteingehalt)
Das Probenvolumen für die Luminometrie beträgt 100 µl. Bitte berechne die spezifische
Luziferase-Aktivität jeder Probe, ermittle den Induktionsindex und entscheide, ob es sich um
einen konstitutiven (0.5 � Induktionsindex � 2) oder induzierbaren (Induktionsindex � 2)
Promotor handelt.
(Auflösung: spezifische Aktivität (CdCl2) 155323 cps/mg Protein; spezifische Aktivität
(Kontrolle) 137026 cps/mg Protein; Induktionsindex 1.13 � konstitutiver Promotor)
Seite 24 von 24, Erstelldatum 12.09.2011