TRANSFEKTION - H941 Department für Angewandte Genetik und ...
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ANHANG 1: VERWENDETE PLASMIDE<br />
Die beiden verwendeten Plasmide, pHsp70-Luc (siehe oben) <strong>und</strong> pCMV-Luc, unterscheiden sich<br />
nur in der Promotor-Sequenz. Sie enthalten folgende Elemente:<br />
"hsp70" bzw. "CMV": bei "hsp70" handelt es sich um die Promotorregion des Hsp70-Gens des<br />
Menschen. Hsp70 ist ein sogenanntes Hitzeschockprotein mit einer Molekülmasse von 70 kDa.<br />
Säugerzellen produzieren Hitzeschockproteine wie Hsp70 unter Stressbedingungen. Die Präsenz<br />
von Schwermetallen im Kulturmedium bewirkt Stress, wodurch die Transkription des Hsp70-<br />
Gens induziert wird. Beim Promotor des hsp70-Gens handelt es sich daher um einen<br />
induzierbaren Promotor. Bei "CMV" handelt es sich um den Immediate/Early<br />
Promotor/Enhancer des humanen Zytomegalovirus, einem starken konstitutiven Promotor.<br />
►► Frage 12: was ist ein Promotor? was bedeutet konstitutiv?<br />
►► Frage 13: könntest Du Dir einen molekularen Mechanismus vorstellen, wie Kadmium-<br />
Ionen eine Induktion des hsp70-Promotors bewirken?<br />
►► Frage 14: wodurch unterscheiden sich Enhancer-Elemente von Promotoren?<br />
"Luciferase": dies ist das Gen <strong>für</strong> das Enzym Luziferase des Leuchtkäfers Photinus pyralis. Es<br />
kodiert <strong>für</strong> ein Protein mit einer Molekülmasse von 62 kDa.<br />
►► Frage 15: kommt Luziferase auch in Säugerzellen vor?<br />
Seite 18 von 24, Erstelldatum 12.09.2011
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