Morphologische und DNA-analytische Untersuchungen am - OPUS ...

Einleitung____________________________________________________________22
4. Die detektierten Banden weisen oft eine unterschiedliche Intensität auf, da die
Kernsequenz pro Restriktionsenzymfragment in unterschiedlicher Anzahl
vorliegt (je mehr Sonden an ein DNA-Fragment hybridisiert werden, desto
intensiver erscheint das Markierungssignal). Der Verlust von schwachen Banden
im Spurenmaterial ist so oft unvermeidbar.
5. Ergebnisse des „DNA-Fingerprinting“ sind statistisch nicht analysierbar. Es
liegen keine Kenntnisse vor, welche Banden zu einem Locus zuzuordnen sind
[113].
RFLP-Analyse der Minisatelliten-DNA mittels Single-Locus-Sonden (SLS)
Durch die Einführung von Single-Locus-Sonden (SLS) konnten nach
Restriktionsenzymverdau repetitive Sequenzen der Minisatelliten-DNA von bestimmten
Genorten erfasst werden. Sogenannte VNTRs (engl.: variable number of tandem
repeats) treten als Tandemwiederholungen auf den verschiedenen Chromosomen in
unterschiedlicher Anzahl, Größe und Sequenzen auf. Mit der RFLP-Analyse mittels
Single-Locus-Sonde (z.B. MS1, MS8, MS31, g3, TBQ7) können pro Individuum
maximal zwei Fragmente nachgewiesen werden.
Neben der Möglichkeit der Bestimmung von geschlechtsspezifischen X- und Y-Sonden
[98] besteht der Fortschritt gegenüber der DNA-Typisierung mittels MLS-Sonden darin,
dass durch Hybridisierung mit verschiedenen SLS-Sonden die Übereinstimmung
mehrerer DNA-Muster verschiedener Personen voneinander einfacher zu differenzieren
ist. Des weiteren besteht die Möglichkeit, mehrere Personen voneinander einfach zu
unterscheiden, was als Diskriminationsstärke bezeichnet wird. Jedoch schränken auch
einige Nachteile die Anwendung der RFLP-Analyse mittels SLS in der forensischen
Praxis ein:
1. Auch bei diesem Nachweis ist hochmolekulare DNA erforderlich, da aufgrund
der geringen Empfindlichkeit etwa 20 ng DNA benötigt werden. Zahlreiche in
der SLS-Analyse verwendeten Systeme kommen zwischen 2 – 20 kb zur
Darstellung, sodass bei degradierter DNA ein negatives oder fehlerhaftes
Ergebnis produziert wird.
2. Die Ergebnisse eines einzelnen Merkmalsystems erreichen nicht die
Aussagekraft einer MLS-Analyse.