notice technique - Biocentric

Perfil de Amplificación :
5 min 2) 95°C – 1 ciclo
30 seg 95°C –
2 min 58°C –
10 ciclos
25 seg 95°C –
40 seg 53°C – 20 ciclos
40 seg 70°C –
8 min 70°C – 1 ciclo
2)
Cuando se usen ciertas DNA polimerasas hot start, este paso ha de ser alargado
(consulte el manual de la enzima).
Dependiendo del termociclador usado, el perfil de amplificación puede tener que
ser modificado (contacte con su distribuidor local).
Los productos para amplificación pueden almacenarse entre +4 y –20ºC.
Para comprobar la reacción de amplificación, aplique directamente 5 µl de cada
muestra a un gel de agarosa, sin la adición de buffer de carga. Los amplicones generados
en la reacción PNM EHEC 1 tienen una longitud de 63 bp (Control Universal),
42 bp (E. coli/Shigella ssp.), 65 bp (ipaH), y 50 bp (eae), respectivamente. Los amplicones
generados en la reacción PNM EHEC 2 tienen una longitud de 93 bp (stx1) y
115 bp (stx2), respectivamente.
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