62794 Platelia Aspergillus Ag.pdf - BIO-RAD

10- PROCEDIMIENTOMateriales suministradosVéase la sección REACTIVOS.Materiales necesarios pero no suministrados1. Agua destilada o desionizada para la dilución de la solución de lavado concentrada.2. Papel absorbente.3. Guantes desechables.4. Gafas protectoras.5. Hipoclorito sódico (lejía) y bicarbonato sódico.6. Pipetas o multipipetas, ajustables o fijas, para medir y dispensar 50 µL, 100 µL, 300 µL y 1.000 µL.7. Tubos de 1,5 mL de polipropileno para microcentrifugadora con cierre hermético, aptos para resistirtemperaturas de hasta 120°C (bloque calefactor) o 100°C (baño maría).• Tapones roscados y tubos: tubos cónicos de 1,5 mL, Cat. Bio-Rad # 224-0100 o equivalente.O• Tubos de tapa a presión: tubos EZ para micropruebas, 1,5 mL, Cat. Bio-Rad # 223-9480 oequivalente.• Cierres de tapones de microtubos (en EE.UU.: Fischer Scientific Cat. # NC9346739) o equivalente,fuera de EE.UU.: Cat. VWR # 6054001 o equivalente). Estos cierres sellan de manera segura lostubos de tapa a presión evitando que se abran durante los cambios de presión y temperatura ytambién facilitan su descarga del bloque calefactor o del baño maría.8. Centrifugadora de mesa de laboratorio para tubos de polipropileno de 1,5 mL capaz de alcanzar10.000 g (Brinkman Cat. # 22-36-280-1 o Cat. VWR Scientific, # 20901-051 o equivalente).9. Si se utiliza bloque calefactor para el tratamiento de los sueros/líquido LBA:• Bloque calefactor. Se recomiendan los siguientes modelos de bloques calefactores:• Modelo de bloque simple: Cat. Grant # QBD-1 L - fuera de EE.UU.: Cat. Grant # QBD1 distribuidopor VWR en su Cat.: # 460-0074)• Modelo de bloque doble: Cat. Grant # QBD-2 L - fuera de EE.UU.: Cat. Grant # QBD2 distribuidopor VWR en su Cat.: # 460-0076)• Bloque para bloques calefactores: ambos bloques calefactores (QBD-1 L, QBD1 and QBD-2L,QBD2) deben usarse con el Bloque Grant, Cat. # QB-E1 distribuido fuera de EE.UU. bajo el Cat.VWR: # 460-8517Si se utiliza baño maría para el tratamiento de los sueros/líquido LBA:• Gradilla circular flotante de microcentrifugadora para matraces de 1L (en EE.UU.: Cat. CientíficoVWR # 60986- -100 o Cat. Nalgene: # 5974-1015 o equivalente).• Baño maría a 100 ºC.10. Agitador Vórtex.11. Incubador de microplacas a 37 ± 1°C.12. Lavador de microplacas semiautomático o automático.13. Lector de microplacas equipado con filtros de 450 nm y 620/630 nm.Comentarios sobre el procedimientoLos controles negativo, positivo y de corte deben probarse en cada ciclo para validar los resultados dela prueba.Tratamiento de los sueros/líquido LBATodos los controles de sueros: negativo (R3), de corte (R4) y positivo (R5) deben procesarse al mismotiempo como muestras de suero/líquido LBA:1. Pipetee 300 µL de cada prueba de suero/líquido LBA y realice el control en tubos de polipropilenode 1,5 mL individuales.2. Añada a cada tubo 100 µL de muestra de solución de tratamiento (R7).3. Agite los tubos cuidadosamente, con agitación enérgica o vórtex para homogeneizar totalmente.Cierre bien el tubo para evitar que se abra durante el calentamiento.62