Diplôme Balloy - EPHE
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MINISTERE DE l’EDUCATION NATIONALE<br />
ECOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES<br />
Sciences de la Vie et de la Terre<br />
MEMOIRE<br />
Présenté<br />
Par<br />
Viviane BALLOY<br />
Pour l’obtention du diplôme de l’Ecole Pratique des Hautes Etudes<br />
TITRE :<br />
Aspergillose pulmonaire invasive et défense innée : comparaison de<br />
modèles expérimentaux murins.<br />
Soutenu le 21 Novembre 2002 devant le jury suivant<br />
Pr. Jean-Claude GLUCKMAN – Président<br />
Dr. Sylvie DEMIGNOT – Rapporteur<br />
Dr. Michel CHIGNARD – Examinateur<br />
Dr. Jean-Michel ALONSO – Examinateur<br />
Laboratoire de Pharmacologie Cellulaire et Moléculaire – Unité INSERM 505 – 15 rue des<br />
Cordeliers - 75006 PARIS. (Sylvie.Demignot-U505@bhdc.jussieu.fr)<br />
Laboratoire de Défense Innée et Inflammation – Institut Psateur – 25 rue du docteur Roux –<br />
75015 PARIS. (chignard@pasteur.fr)<br />
PRATIQUE DES HAUTES ETUDES<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 1
SCIENCES DE LA VIE ET DE LA TERRE<br />
Aspergillose pulmonaire invasive et défense innée : comparaison de<br />
modèles expérimentaux murins.<br />
Viviane BALLOY<br />
Soutenu le 21 Novembre 2002<br />
RESUME<br />
L’immunité innée joue un rôle primordial dans la défense de l’hôte contre les micro-organismes. L’efficacité<br />
de ce système de défense est constitué pour l’essentiel par l’activité phagocytaire et antimicrobienne des différentes<br />
cellules qui le constituent, principalement les macrophages, les polynucléaires neutrophiles et les monocytes, et par<br />
leur capacité à produire des médiateurs pro-inflammatoires. L’altération de ce système de défense a pour conséquence<br />
le développement de l’infection.<br />
L’aspergillose pulmonaire invasive (API) est une maladie grave, mortelle dans 80 à 90% des cas, qui ne<br />
survient que chez des personnes dont les défenses immunitaires sont diminuées. Le responsable de cette pathologie est<br />
un champignon opportuniste et saprophyte, Aspergillus fumigatus.<br />
La mise au point d’un modèle murin d’API a permis d’étudier l’évolution de la pathologie en fonction de<br />
deux types d’immunosuppression : la corticothérapie et la neutropénie induite par chimiothérapie. La réponse de l’hôte<br />
à l’infection a été mesurée au niveau pulmonaire (lavages broncho-alvéolaires, histologie) chez les animaux<br />
immunodéprimés et comparée à celle d’animaux immunocompétents en termes de recrutement cellulaire, de<br />
production de médiateurs pro-inflammatoires (TNF-a, IFN-g, IL-12) et anti-inflammatoires (IL-10), de destruction du<br />
tissu pulmonaire, de développement du champignon et de la mortalité. Des déplétions cellulaires sélectives ont été<br />
entreprises afin d’identifier les cellules essentielles à la lutte contre ce pathogène.<br />
Cette étude a permis de mettre en évidence des altérations du système de défense innée, et qui diffèrent selon<br />
le type d’immunosuppression. Les mesures effectuées chez les animaux infectés et traités avec un glucocorticoïde<br />
montrent une inhibition de la production de médiateurs pro-inflammatoires et la présence d’IL-10, un recrutement<br />
massif de polynucléaires neutrophiles, une destruction importante du parenchyme pulmonaire et un développement<br />
modéré du champignon. L’infection d’animaux rendus neutropéniques a pour conséquence une production importante<br />
de TNF-a et d’IL-10, une destruction tissulaire moindre et un envahissement fongique important du parenchyme<br />
pulmonaire. Dans les deux cas d’immunosuppression, la mortalité des animaux est de 100% avec cependant une<br />
cinétique différente. La mort des animaux soumis au glucocorticoïde survient entre 3 et 5 jours, alors que la totalité des<br />
animaux neutropéniques meurent au troisième jour de l’infection. La comparaison de ces différents paramètres suggère<br />
que les lésions tissulaires observées dans les poumons des animaux traités avec le glucocorticoïde ne seraient pas dues<br />
à l’envahissement fongique mais à l’afflux massif de polynucléaires neutrophiles et pourraient être la cause de la mort<br />
des animaux. Des études complémentaires seront nécessaires pour comprendre les causes de la mort des animaux<br />
neutropéniques. Il est possible que, dans ce cas, le champignon dissémine dans l’organisme entier et induise des<br />
lésions dans d’autres organes, fatales pour les animaux. Les déplétions cellulaires ont permis de montrer que les<br />
polynucléaires neutrophiles sont essentiels dans la lutte contre l’API alors que les macrophages alvéolaires ont un rôle<br />
plus secondaire, rôle qui pourrait être associé en partie à l’expression d’un récepteur impliqué dans l’immunité innée,<br />
le “ Toll-like récepteur 4 ”.<br />
Mots clés : Aspergillus fumigatus, poumon, infection, inflammation.<br />
TABLE DES MATIERES<br />
Abréviations 5<br />
A – INTRODUCTION ________________________________________________ 6<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 2
I - Présentation d’Aspergillus fumigatus 6<br />
I .1 – Généralités 6<br />
I .2 – Facteurs de virulence 8<br />
II - L'Aspergillose pulmonaire invasive (API) 10<br />
II . 1 – Facteurs favorisants 10<br />
II . 2 – Symptômes et diagnostics 10<br />
II . 3 – Pathogénie 11<br />
II . 4 – Traitement 11<br />
III - Défense pulmonaire de l'hôte immunocompétent 12<br />
III . 1 – Généralités 12<br />
III . 1 – a) L’épithélium 12<br />
III . 1 – b) Les macrophages alvéolaires (MA) 13<br />
III . 1 – c) Les neutrophiles (PN) et les monocytes 14<br />
III . 1 – d) Activité microbicide des phagocytes 16<br />
III . 1 – d1) La phagocytose 16<br />
III . 1 – d2) Production de radicaux oxygénés et de réactifs<br />
dérivés de l’azote 16<br />
III . 1 – d3) Dégranulation 17<br />
III . 1 – e) Les cytokines 17<br />
III . 2 – Défenses vis-à-vis d’Aspergillus fumigatus 18<br />
III . 2 – a) L’épithélium 19<br />
III . 2 – b) Les macrophages alvéolaires 19<br />
III . 2 – c) Les polynucléaires neutrophiles 20<br />
III . 2 – d) Les monocytes 21<br />
III . 2 – e) Les cytokines 21<br />
III . 2 – e1) Le TNF-a 22<br />
III . 2 – e2) L’IFN-g 22<br />
III . 2 – e3) L’IL-12 23<br />
III . 2 – e4) L’IL-10 24<br />
IV - Défense de l'hôte immunodéprimé par corticothérapie 25<br />
ABREVIATIONS<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 3
API<br />
CAM<br />
ESL-1<br />
GSC<br />
IL-1b,-4, –5, –8, –10<br />
i.p.<br />
i.t.<br />
IFN-a, -b, -g<br />
LBA<br />
MA<br />
MCP-1<br />
MIP-1a, -b, -2<br />
MPO<br />
NADPH<br />
NK<br />
NO<br />
PBS<br />
PN<br />
PSGL-1<br />
RANTES<br />
RG<br />
TGF-b<br />
TNF-a<br />
Aspergillose pulmonaire invasive<br />
Cellular adhesion molecule<br />
E-Selectin ligand -1<br />
Granulomatose septique chronique<br />
Interleukine-1b -4 –5 –8 –10<br />
Intrapéritonéale<br />
Intratrachéale<br />
Interféron-a, -b, -g<br />
Lavage broncho-alvéolaire<br />
Macrophages alvéolaires<br />
Monocyte chemotactic protein-1<br />
Macrophage inflammatory protein<br />
Myéloperoxydase<br />
Nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate<br />
Natural killer<br />
Oxyde nitrique<br />
Phosphate-buffer solution<br />
Polynucléaires neutrophiles<br />
P-selectin glyco protein ligand-1<br />
Regulated on activation, normal T cell expressed and secreted<br />
Récepteur aux glucocorticoïdes<br />
Tumor growth factor-b<br />
Tumor necrosis factor-a<br />
A - INTRODUCTION<br />
I – PRESENTATION D’ASPERGILLUS FUMIGATUS<br />
I . 1 – Généralités<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 4
Les champignons véhiculés par l’air peuvent être responsables de mycoses invasives qui constituent<br />
aujourd’hui des pathologies infectieuses parmi les plus graves en santé humaine. Parmi les germes en cause,<br />
Aspergillus fumigatus est de loin le plus dangereux. A. fumigatus est un champignon filamenteux,<br />
appartenant à la classe des ascomycètes, rencontré de façon ubiquiste dans l’atmosphère. Il se développe<br />
dans les lieux humides, sur la matière organique en décomposition, dans le sol ainsi que dans les<br />
climatiseurs et humidificateurs. Il est caractérisé par un mycélium formé de filaments (hyphes) de taille<br />
régulière de 4 µm de diamètre, septés avec des ramifications souvent dichotomiques à angle aigu et de<br />
filaments, dits conidiophores, se terminant par une vésicule sphérique de taille variable. Autour de celle-ci,<br />
sont disposées une ou plusieurs rangées de phialides à l’intérieur desquelles naissent des spores (ou<br />
conidies). L’ensemble forme la tête aspergillaire qui a l’aspect d’un aspersoir d’où son nom. Chaque tête<br />
aspergillaire peut relarguer jusqu’à une centaine de spores. Lors de sa croissance saprophytique, A.<br />
fumigatus produit ainsi des millions de spores asexuées qui sont véhiculées par l'air. Grâce à leur petite<br />
taille (1-3 µm), les spores sont facilement inhalées et transportées à travers l’appareil respiratoire jusqu’aux<br />
alvéoles.<br />
Ce champignon, totalement inoffensif pour la majorité de la population et dont la présence est<br />
commune dans les expectorations, est normalement éliminé par les défenses naturelles de l'homme.<br />
Cependant, capable de se développer sous forme d’hyphes (la forme invasive du champignon) à 37°C, il<br />
peut, dans certains cas, provoquer des mycoses. Ces mycoses, appelées aspergilloses, sont très variables et<br />
vont d'une maladie de type allergique, l’aspergillose bronchopulmonaire allergique, à une infection<br />
généralisée gravissime le plus souvent mortelle, l’aspergillose pulmonaire invasive (API) (Latgé 1999).<br />
I . 2 – Facteurs de virulence<br />
Comme tout pathogène opportuniste, A. fumigatus n'a pas développé de stratégie sophistiquée de<br />
survie. Les principaux facteurs pathogènes connus attribués à A. fumigatus sont son omniprésence, la petite<br />
taille de ses spores, sa thermophilie lui permettant de croître et de survivre dans une grande gamme de<br />
températures (12-50°C) et sa capacité à se transformer en hyphes pouvant envahir des tissus sous certaines<br />
conditions. Cependant, A. fumigatus peut avoir des propriétés qui le protègent des défenses pulmonaires et<br />
qui pourraient assurer sa survie dans le poumon dans un délai suffisant pour initier et développer une<br />
infection dans un hôte approprié. Des enzymes et des toxines sécrétées par A. fumigatus ont ainsi été<br />
analysées pour leur pouvoir pathogène potentiel (Bouchara et al., 1995 ; Jaton-Ogay et al., 1994 ; Tang et<br />
al., 1993 ; Monod et al., 1993 ; Paris et al., 1993) mais aucun de ces facteurs n’a pu être impliqué<br />
expérimentalement dans des infections. L’analyse de mutants a été tout aussi infructueuse (Smith et al.,<br />
1994 ; Aufauve-Brown et al., 1997 ; Calera et al., 1997). Toutefois, un type d’avirulence a été obtenu pour le<br />
mutant Pyr-G, incapable de germer in vivo en absence d’uracile et d’uridine (d’Enfert et al., 1996). Plus<br />
récemment, sur 5000 mutants testés, le seul avirulent identifié est un champignon dépendant de l’acide Paminobenzoïque<br />
qui est incapable de germer in vivo quand ce métabolite n’est pas présent (Brown et al.,<br />
2000). Cependant, le terme de facteur de virulence ne peut être appliqué à de tels facteurs qui, une fois<br />
mutés, affectent en fait la morphogénèse du champignon. Il est cependant possible que ces différents facteurs<br />
aient individuellement un effet mineur mais que ce soit leur combinaison qui permette la progression de<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 5
l’infection.<br />
II - L’ASPERGILLOSE PULMONAIRE INVASIVE (API)<br />
II . 1 – Facteurs favorisants<br />
Depuis une dizaine d’années, A. fumigatus est devenu le plus prévalent des champignons aéroportés,<br />
responsable d’infections invasives sévères et souvent mortelles chez les sujets immunodéprimés. On a<br />
assisté à la multiplication par 4 des API en 12 ans. L’augmentation de la fréquence de cette pathologie<br />
résulte du nombre croissant de patients immunodéprimés et de la plus grande agressivité des traitements<br />
immunosuppresseurs (Stevens, 2000).<br />
Les sujets à risque sont toutes les personnes dont les défenses immunitaires sont diminuées, en<br />
particulier celles présentant des altérations quantitatives ou qualitatives de la fonction phagocytaire:<br />
neutropénie chimio-induite avant allogreffe de moelle osseuse, traitement par cyclosporine des patients<br />
transplantés (greffes pulmonaires surtout), chimiothérapie anticancéreuse intense, corticothérapie massive. Il<br />
existe aussi une maladie génétique rare, la granulomatose septique chronique (GSC), caractérisée par un<br />
dysfonctionnement de la production des métabolites oxygénés par les polynucléaires neutrophiles (PN) et<br />
les macrophages, qui rend ces individus plus susceptibles à l'infection aspergillaire. Ainsi, on estime que<br />
l’incidence de l’API se situe entre 5 et 25% chez les patients ayant une leucémie aiguë, entre 5 et 10% chez<br />
les patients ayant subi une allogreffe de moelle et entre 0,5 et 5% après traitement cytotoxique<br />
d’hémopathies ou après autogreffe de moelle ainsi qu’après transplantation d’organe. Chez le greffé du rein,<br />
la dose totale de glucocorticoïdes reçue rapportée à la durée du traitement est en étroite corrélation avec le<br />
développement de l’API. Il ressort que la granulopénie profonde et prolongée souvent induite par<br />
chimiothérapie semble être le facteur le plus important (Stevens, 2000).<br />
II . 2 – Symptômes et diagnostics<br />
L’API est une pneumopathie opportuniste particulièrement redoutable, qui évolue rapidement vers la<br />
mort en 1 à 2 semaines chez plus de la moitié des patients. Les chances de survie augmentent si le<br />
diagnostic est effectué précocement. Malheureusement, ce diagnostic, difficile à établir, est souvent trop<br />
tardif et les traitements antifongiques sont actuellement mis en place sur la base d'une simple suspicion de<br />
l'infection.<br />
Les malades atteints de cette infection présentent, la plupart du temps, de la fièvre et des symptômes<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 6
pulmonaires (toux, douleurs thoraciques, malaises et difficultés à respirer) qui ne disparaissent pas sous<br />
traitement antibiotique. Des tests de diagnostic précoce sont utilisés pour la détection d’anticorps<br />
anti-Aspergillus ou d’antigènes circulants (Weiner et al., 1983) comme le galactomannane, un constituant<br />
de la paroi du champignon. Ils ne sont cependant pas suffisamment sensibles.<br />
D’autres tests plus fiables, mais de pronostics plus tardifs, sont utilisés tels que les examens aux<br />
rayons X et au "scanner" qui permettent de localiser le(s) foyer(s) infectieux. La bronchoscopie est souvent<br />
très utile pour confirmer le diagnostic (Sharma et Chwogule, 1998).<br />
II . 3 – Pathogénie<br />
Suite à la colonisation de l’arbre trachéobronchique et des alvéoles, les spores germent et les<br />
filaments d’A. fumigatus gagnent de proche en proche le parenchyme pulmonaire, les lésions étant<br />
maximales autour des bronches. A. fumigatus franchit au cours de sa croissance différentes barrières<br />
anatomiques et parvient à envahir les vaisseaux pulmonaires de petits et moyens calibres. Ce tropisme<br />
vasculaire des filaments va entraîner une thrombose responsable d’un infarctus localisé. En<br />
histopathologie, la lésion caractéristique est la lésion en cible : nécrose ischémique entourée d’un<br />
liseré hémorragique. Les filaments sont observés aussi bien dans la nécrose que dans la zone<br />
hémorragique. A partir des vaisseaux, tous les organes peuvent être atteints par dissémination<br />
aspergillaire : cœur, rein, foie, cerveau, os, tube digestif, peau, etc…(Huerre et al., 2000)<br />
II . 4 – Traitements<br />
Le traitement repose sur l'emploi de molécules antifongiques telles que l'amphotéricine B et/ou<br />
l'itraconazole. L'amphotéricine B est administrée à concentrations élevées par injection intraveineuse. Cet<br />
antifongique peut cependant occasionner, chez certains patients, des dommages au niveau du rein et d'autres<br />
organes. Pour remédier à ces inconvénients, de nouvelles formules d'amphotéricine B moins toxiques ont<br />
été développées. L'itraconazole est généralement administré oralement, lui aussi à doses très élevées. Le<br />
plus tôt sera démarré le traitement antifongique, plus grandes seront les chances de survie. Seul un tiers des<br />
patients traités survit à l'infection et aucun malade infecté ne survit en absence de traitement (Stevens,<br />
2000).<br />
Les efforts de recherche portent actuellement sur l'amélioration de la précocité du diagnostic et<br />
l'efficacité du traitement. Cependant, pour enrayer le développement croissant de cette pathologie, il est<br />
essentiel d’atteindre une meilleure compréhension de la physiopathologie de la maladie. Des progrès doivent<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 7
être faits, en particulier, au niveau de la réponse de l’hôte.<br />
III - DEFENSE PULMONAIRE DE L’HÔTE IMMUNOCOMPETENT<br />
III . 1 - Généralités<br />
La première ligne de défense contre les pathogènes est constituée par le système de l’immunité<br />
innée. Dans le tractus respiratoire, les cellules responsables de cette défense innée sont les cellules<br />
épithéliales, les macrophages alvéolaires (MA) et les phagocytes sanguins.<br />
Les pathogènes inhalés rencontrent un grand nombre d’obstacles avant de parvenir dans les alvéoles.<br />
Une grande partie de la défense pulmonaire est accomplie par les différentes barrières physiques des voies<br />
aériennes supérieures, le réflexe de la toux, l’élimination mucociliaire et les propriétés antimicrobiennes des<br />
muqueuses.<br />
Les micro-organismes, qui parviennent à franchir ces barrières, atteignent les alvéoles. Ils se<br />
trouvent alors confrontés à deux types cellulaires importants dans la défense innée : les MA dans un<br />
premier temps, et dans un deuxième temps, si cette première ligne de défense est insuffisante, les<br />
phagocytes recrutés du sang, incluant les PN et les monocytes. Les PN et les monocytes sont des cellules<br />
circulantes qui migrent dans les tissus, ici le poumon, lors d’une infection. Les premiers à s’accumuler sur<br />
le site infectieux sont les PN suivis des monocytes transportés par un flux sanguin accru dans la zone<br />
inflammatoire (Nelson et al., 1995).<br />
III . 1 – a) L’épithélium<br />
Les voies aériennes partant du nasopharynx jusqu’à la trachée et aux bronchioles terminales sont<br />
principalement tapissées de cellules épithéliales ciliées et de cellules sécrétrices. Cette muqueuse épithéliale<br />
est composée aussi d’autres cellules comme les cellules dendritiques. La partie alvéolaire du poumon est<br />
formée de deux types de cellules épithéliales : les pneumocytes de type I importants dans les échanges<br />
gazeux, et les pneumocytes de type II, précurseurs des types I et dotés des principales fonctions<br />
immunorégulatrices.<br />
Ces différents types cellulaires produisent de nombreux facteurs pouvant contribuer à la défense<br />
pulmonaire de l’hôte. Ainsi, les cellules sécrétrices produisent le mucus qui, avec les mouvements dûs aux<br />
cellules ciliées, forme une barrière mucociliaire permettant l’élimination des pathogènes. Les constituants<br />
majeurs du mucus sont des complexes glycoprotéiques appelés mucines qui contiennent des sites<br />
d’adhérence pour de nombreuses bactéries. Les microorganismes piégés dans le mucus sont incapables de<br />
se lier aux cellules épithéliales et sont éliminés par les mouvements ciliaires qui propulsent le mucus du<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 8
tractus respiratoire vers l’oropharynx où ils sont déglutis ou expectorés. Les cellules sécrétrices et les<br />
pneumocytes de type II sécrètent du surfactant qui diminue la tension de surface à l’interface air/liquide et<br />
empêche le collapsus des alvéoles à l’expiration. Plusieurs protéines du surfactant ont été caractérisées, dont<br />
les protéines A et D qui joueraient un rôle important dans la défense innée contre les microbes en agissant<br />
comme des opsonines. Les cellules ciliées et les pneumocytes de type II contribuent aussi à cette défense en<br />
produisant, entre autres, des b-défensines ayant une activité antimicrobienne. L’épithélium pulmonaire peut<br />
également participer à la régulation de la réponse inflammatoire en produisant des cytokines (TNF-a, IL-6,<br />
IL-1b…), des chimiokines (IL-8, RANTES..) et d’autres médiateurs tels que des métabolites de l’acide<br />
arachidonique, activant ou permettant le recrutement de cellules immunocompétentes. Ainsi la production de<br />
TNF-a stimule l’expression de molécules d’adhérence à la surface de l’endothélium et de l’épithélium<br />
pulmonaires et celle de l’IL-8, par son pouvoir chimiotactique, attire les PN dans les espaces aériens<br />
(Cunningham et Mahon 2001).<br />
III . 1 – b) Les macrophages alvéolaires (MA)<br />
Les MA sont des cellules résidantes dérivées de monocytes recrutés hors de toute inflammation. Ils<br />
représentent la première ligne de défense contre les micro-organismes ayant atteint les alvéoles. Ils<br />
éliminent ces derniers intracellulairement après les avoir phagocytés.<br />
Outre leur fonction phagocytaire, les MA jouent un rôle prédominant dans l’orchestration de la<br />
réponse inflammatoire. En effet, face à une charge microbienne trop importante ou trop virulente pour être<br />
contenue par les MA, ces derniers sont capables d’induire le recrutement de PN et de monocytes sanguins.<br />
Pour cela, les MA sécrètent plusieurs cytokines et chimiokines intervenant dans la réponse inflammatoire<br />
telles que le TNF-a et l’IL-8 (Nelson et Summer, 1998).<br />
III . 1 – c) Les polynucléaires neutrophiles (PN) et les monocytes<br />
En absence d’inflammation, les leucocytes sont des cellules sanguines circulantes. L’apparition sur<br />
l’endothélium adjacent au site inflammatoire, de molécules d’adhérence induites par les médiateurs<br />
inflammatoires libérés par les tissus endommagés, est le premier événement responsable de l’extravasation<br />
locale de leucocytes. L’interaction leucocytes/endothélium implique directement différentes molécules<br />
appartenant à des familles variées (sélectines, intégrines, ligands de type mucine..) et plusieurs chimiokines<br />
et leurs récepteurs (Witko-Sarsat, 2000). La migration des leucocytes, à travers l’endothélium, peut se<br />
décomposer en quatre phases:<br />
1) Le ralentissement et roulement des leucocytes sur l’endothélium:<br />
Le ralentissement initial est dû essentiellement aux sélectines P et E exprimées à la surface des<br />
cellules endothéliales après stimulation par différents médiateurs inflammatoires tels que la thrombine, le<br />
TNF-a, l’IL-1. Les sélectines P et E interagissent alors avec des ligands de type mucine (PSGL-1 et ESL-1)<br />
situés à la surface des leucocytes. La sélectine L, exprimée de façon constitutive à la surface des PN, se lie<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 9
au PSGL-1 des PN déjà adhérents, permettant le roulement de nouveaux PN.<br />
2) Le déclenchement de l’activation des leucocytes:<br />
Lors d’une inflammation, des gradients de concentrations de molécules chimiotactiques tels que le<br />
C5a, l’IL-8, le PAF, le LTB4 ou des composés bactériens sont formés à partir du site inflammatoire.<br />
L’interaction de ces molécules chimiotactiques avec les nombreux récepteurs présents à la surface des PN<br />
entraîne l’activation de ces derniers au travers d’une cascade de signalisation conduisant à leur adhésion à<br />
l’endothélium.<br />
3) L’adhésion des leucocytes:<br />
Elle implique des interactions entre les intégrines leucocytaires et les CAM des cellules<br />
endothéliales, dont l’expression à la surface est induite par les cytokines inflammatoires (TNF-a, IFN-g, IL-<br />
1b).<br />
4) La diapédèse :<br />
Les intégrines et les CAM sont reliées au cytosquelette de chacune des cellules, ce qui permet aux<br />
leucocytes de se tracter eux-mêmes à travers l’endothélium, lors d’un processus appelé la diapédèse. Les<br />
cellules adhérentes émettent des pseudopodes à travers les jonctions intercellulaires des cellules<br />
endothéliales avant de les traverser. Les enzymes libérées par les leucocytes en migration altèrent la<br />
membrane basale. La migration des PN à travers la matrice extracellulaire passe par des intégrines, des<br />
molécules d’adhérence, incluant les récepteurs à la laminine, à la fibronectine ou à la vitronectine et des<br />
chimiokines qui dirigent les leucocytes vers les tissus.<br />
III . 1 – d) Activité microbicide des phagocytes<br />
Les macrophages, les PN et les monocytes sont trois types cellulaires complémentaires dans<br />
l’élimination des pathogènes par leurs pouvoirs phagocytaires et microbicides et leur capacité à interagir<br />
entre eux en générant de nombreux médiateurs tels que des cytokines, des chimiokines et des radicaux<br />
oxygénés. Sur le site infectieux, ils vont remplir leur rôle qui est d’ingérer et de détruire les microorganismes.<br />
Pour cela, ils utilisent différents mécanismes (Witko-Sarast, 2000):<br />
III . 1 – d.1) La phagocytose :<br />
C’est le processus par lequel ces cellules internalisent les particules et les micro-organismes. Dans<br />
une première phase, les phagocytes adhèrent à la membrane des particules soit par des récepteurs non<br />
spécifiques tels que des récepteurs qui reconnaissent des motifs conservés sur les pathogènes comme les<br />
mannanes dans les parois de levures ou les lipopolysaccharides à la surface des bactéries à Gram négatif,<br />
soit par des récepteurs pour les opsonines spécifiques que sont les IgG ou la fraction C3b du complément.<br />
La cellule développe ensuite des pseudopodes autour des particules afin de les internaliser, formant ainsi des<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 10
vésicules intracellulaires liées à la membrane, les phagosomes.<br />
III . 1 – d.2) Production de radicaux oxygénés et de réactifs dérivés de l’azote :<br />
Durant la phagocytose, les cellules entrent dans une phase d’hyperactivité au cours de laquelle elles<br />
augmentent leur consommation d’O2 . Une enzyme, la NADPH oxydase, est assemblée dans la membrane du<br />
phagosome où elle réduit l’O 2 en ions superoxydes (O 2 .- ) qui peuvent alors donner naissance aux radicaux<br />
hydroxyles (OH . ), à l’oxygène singulet (O . ) et au peroxyde d’hydrogène (H 2 O 2 ), des métabolites aux effets<br />
toxiques sur l’acide désoxyribonucléique, les protéines et les lipides membranaires.<br />
Certaines cellules activées expriment une NO-synthase qui catalyse la production d’oxyde nitrique<br />
(NO) à partir de la L-arginine. L’activité toxique du NO est modeste mais est augmentée en présence<br />
d’anions superoxydes et d’O 2 , conduisant respectivement à la formation de peroxynitrite (ONOO - ) et à celle<br />
d’un puissant oxydant, le dioxyde d’azote (NO 2 ). Toutefois, le NO s’avère être directement toxique pour<br />
certains parasites, bactéries et champignons. Chez l’homme, les macrophages ne semblent pas pouvoir<br />
produire des quantités significatives de NO, mais d’autres cellules tels que les PN en sont capables.<br />
III . 1 – d.3) Dégranulation :<br />
Les lysosomes, qui sont des organites présents dans toutes les cellules, fusionnent avec les<br />
phagosomes pour former des phagolysosomes. Les enzymes lysosomales libérées dans le phagolysosome,<br />
dégradent et digèrent les particules phagocytées. Il peut arriver que la phagocytose échoue en raison d’une<br />
taille trop grande de la particule à phagocyter, le contenu des granules étant alors déversé dans le milieu<br />
extracellulaire. Parmi les molécules microbicides, on peut trouver :<br />
le lysozyme (muraminidase) qui est une enzyme hydrolysant des peptidoglycannes de la paroi de<br />
certaines bactéries à Gram positif. Il est produit de façon constitutive par les PN et certains macrophages. Il<br />
est présent dans la plupart des sécrétions ;<br />
les défensines qui sont des petits peptides à activité antimicrobienne, que l’on trouve dans les<br />
granules des PN. Elles sont plus actives à pH alcalin. Les défensines ont un spectre très large d’activités<br />
antibactériennes et antifongiques. Certaines défensines forment des canaux ioniques dans les membranes<br />
cibles, d’autres interfèrent avec le métabolisme des pathogènes ;<br />
les protéases acides, actives à pH acide, qui comprennent les glycosidases, les lipases et la<br />
phosphatase acide ;<br />
les protéases neutres, actives autour de pH 7, qui incluent la collagénase, l’élastase, la cathepsine G<br />
et la protéinase 3, et dont certaines ont été montrées actives sur les bactéries à Gram positif ou négatif, les<br />
levures et les champignons ;<br />
la lactoferrine des granules du PN, dont le domaine aminoterminal microbicide est libéré par la<br />
pepsine. Elle se lie très fortement au fer, privant ainsi les bactéries de cet élément essentiel à leur survie ;<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 11
la myéloperoxydase, présente dans les monocytes et surtout dans les PN, convertit, en présence<br />
d’H 2 O 2 , les halogénures en composés toxiques tel que l’acide hypochloreux (HOCl). A son tour, HOCl peut<br />
réagir avec les amines primaires ou secondaires pour former un groupe particulier d’oxydants, les<br />
chloramines. En raison de leur longue durée de vie, ces composés sont beaucoup plus toxiques que les<br />
dérivés oxygénés.<br />
III . 1 – e) Les cytokines<br />
Les cellules participant à la défense ont besoin de communiquer entre elles afin de mettre en<br />
place une réponse de l’hôte efficace. Les interactions cellulaires dans le système immunitaire se font à<br />
la fois par contact direct et par l’intermédiaire de médiateurs solubles appelés cytokines. Celles-ci<br />
interviennent à tous les stades et dans tous les types de réactions immunitaires, permettant<br />
l’amplification, l’orientation puis la régulation des réponses cellulaires et humorales. Elles ont le rôle<br />
de véritables médiateurs paracrines, mais parfois autocrines, de la réaction immunitaire. Ces<br />
molécules, aux effets pléiotropiques, s’articulent entre elles au sein d’un réseau complexe où elles<br />
interagissent par des relations de production en cascade, de synergie, d’amplification et d’inhibition.<br />
Elles sont produites par une grande variété de cellules et jouent un rôle important dans de<br />
nombreuses réponses physiologiques. Elles peuvent intervenir dans l’inflammation ou encore avoir<br />
une fonction de cytotoxines. Elles sont impliquées dans la physiopathologie de nombreuses maladies et<br />
peuvent avoir un pouvoir thérapeutique. Le terme cytokine est un terme général qui recouvre les<br />
interleukines (IL-1 à IL-23), le TNF-a, les IFN-a, b, g, le TGF-b et les chimiokines (IL-8, MIP-1 a et b,<br />
éotaxine, etc…). Les cytokines sont classées en deux catégories, selon les profils distincts de cytokines<br />
produites par des lymphocytes T auxiliaires (“ helper ” ou Th). Ainsi, les lymphocytes Th1 intervenant dans<br />
l’immunité de type antimicrobienne produisent des cytokines dites Th1 comme l’IL-12, l’IFN-g, le TNF-a<br />
ou -b. Les lymphocytes Th2, impliqués dans la réponse allergique, sont à l’origine des cytokines Th2 telles<br />
que l’IL-4, -5, -6, -10 et -13. Cette classification est étendue à toutes les cytokines quelques soient les<br />
cellules qui les ont produites ; on parle alors de cytokines de phénotype Th1 ou Th2 (Cavaillon, 1996).<br />
Les cellules épithéliales, les MA, les PN et les monocytes sont capables de synthétiser un grand<br />
nombre de cytokines pouvant à induire des effets différents parfois même opposés selon la cible cellulaire<br />
considérée. (Cavaillon, 1996 ; Mégarbane et al., 1998)<br />
III . 2 - Défenses vis-à-vis d’Aspergillus fumigatus<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 12
Dans le cas de l’API, c’est la réponse de l’hôte qui détermine l’établissement de l’aspergillose. En<br />
effet, le contact conidies-hôte est quotidien pour toute la population (1 à 20 spores/m 3 d’air). Ceci est<br />
d’autant plus vrai pour les personnes travaillant dans certains environnements exposés, par exemple les<br />
déchetteries, qui inhalent tous les jours des millions de spores dont celles d’A. fumigatus et qui ne<br />
développent pourtant pas d’API. Ceci s’explique par une réponse efficace de l’hôte qui élimine les conidies<br />
présentes dans l’appareil respiratoire, par les mécanismes mettant en jeu la défense innée du poumon. Une<br />
grande partie des conidies est, en effet, éliminée des voies respiratoires par les mouvements ciliaires de<br />
l’épithélium muqueux.<br />
Les mécanismes employés par les MA, les PN et les monocytes pour tuer les conidies et les<br />
filaments sont encore mal compris. En effet, si différentes études ont été réalisées sur ce sujet, les<br />
interprétations diffèrent selon les protocoles mis en place (in vivo et in vitro) et la source des cellules<br />
étudiées, humaines ou murines, sanguines ou alvéolaires.<br />
III . 2 – a) L’épithélium<br />
La majorité des conidies d’A. fumigatus sont éliminées du poumon par l’action mucociliaire de<br />
l’épithélium bronchique. Cependant, A. fumigatus peut produire des toxines ayant un rôle inhibiteur sur<br />
l’activité ciliaire et des protéases capables d’endommager le tissu épithélial (Robinson et al., 1990 ;<br />
Amitami et al., 1995). De plus, il a été montré que les cellules épithéliales, tout comme les cellules<br />
endothéliales, étaient capables d’internaliser des spores d’A. fumigatus (Wasylnka et Moore, 2002).<br />
Toutefois, les conséquences de cette internalisation, soit comme voie d’élimination du champignon, soit<br />
comme site primaire d’infection, n’ont pas encore été mises en évidence.<br />
Le surfactant pulmonaire joue un rôle protecteur contre l’invasion fongique. En effet, il a été montré<br />
que les protéines A et D du surfactant étaient impliquées dans l’augmentation de la phagocytose et<br />
l’élimination des conidies d’A. fumigatus par les MA et les PN (Madan et al., 1997).<br />
III . 2 – b) Les macrophages alvéolaires<br />
Les MA ingèrent les conidies inhalées et les détruisent de manière intracellulaire, prévenant ainsi<br />
leur germination sous forme d’hyphes (Schaffner et al., 1982 ; Waldorf et al., 1984 ; Levitz et al., 1986).<br />
Il a été montré que les MA murins se lient aux conidies par des interactions de type lectine (Kan et<br />
Bennett, 1988). La phagocytose est efficace même en absence d’opsonine ou d'immunoglobuline. Après<br />
phagocytose, la germination des conidies est inhibée à l'intérieur du compartiment phagolysosomal et les<br />
macrophages, humains ou de différentes espèces animales, dérivés du sang ou alvéolaires, tuent et digèrent<br />
les spores (Schaffner et Schaffner, 1987). Après 24 heures, 90% des conidies phagocytées sont tuées et 6 à<br />
12 heures plus tard complètement digérées (Schaffner, 1994). Cependant, il est important de noter qu’il est<br />
nécessaire que les spores aient gonflé et soient ainsi devenues métaboliquement actives à l’intérieur du<br />
phagosome, c’est-à-dire 4 à 6 heures après la phagocytose, pour que les phagocytes soient capables de les<br />
tuer (Schaffner, 1994). Le processus de gonflement induit des altérations morphologiques et des<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 13
changements dans la composition de la paroi fongique précédant la transformation en hyphe. Cette<br />
activation survient quand les conidies rencontrent un environnement propice comme dans les voies<br />
aériennes terminales du poumon ou à l’intérieur des phagosomes du MA.<br />
Les dérivés actifs oxygénés produits en faible quantité par les MA ne semblent pas impliqués dans<br />
le processus fongicide. En effet, les macrophages humains dérivés du sang, qui après 10 jours de culture ne<br />
produisent plus de quantité significative de réactifs oxygénés, sont encore capables de tuer les conidies<br />
(Schaffner et al., 1983). Il en est de même pour les macrophages d'enfants souffrant de GSC qui ne<br />
produisent pas de radicaux oxygénés (Morgenstern et al., 1997).<br />
La production de NO, puis la formation de peroxynitrite sont reconnues comme étant de puissants<br />
métabolites antifongiques (Moncada et Higgs, 1993). Toutefois, l’existence et l’efficacité des réactifs<br />
intermédiaires dérivés de l’azote ne sont pas encore éclaircies dans le cas d’une infection par A. fumigatus.<br />
Bien qu’il soit connu que le NO est synthétisé abondamment par les phagocytes murins et de rats et que<br />
cette synthèse est inhibée par les corticostéroides (DiRosa et al., 1989), sa sécrétion par les phagocytes<br />
mononucléés humains reste controversée (Albina, 1995). De plus, le NO ne semble pas impliqué dans<br />
l’élimination d’A. fumigatus par les MA murins (Michaliszyn et al., 1995).<br />
Les systèmes non oxydatifs tels que les défensines pourraient être des composants importants du<br />
mécanisme de défense antifongique (Levitz, 1986). Cependant, les défensines, bien qu'abondantes dans les<br />
MA de lapins, ne sont pas retrouvées dans les macrophages humains qu'ils soient alvéolaires, péritonéaux<br />
ou dérivés du sang (Schaffner, 1992).<br />
III . 2 – c) Les polynucléaires neutrophiles<br />
Le fait que la neutropénie soit un risque important d'API et que la reconstitution d’une population<br />
normale de PN soit essentielle pour stopper la croissance du champignon établit le rôle majeur de cette<br />
population cellulaire dans la lutte contre l’API.<br />
Durant sa germination et après sa transformation en hyphe, A. fumigatus est tué par les PN recrutés<br />
consécutivement à l’inflammation déclenchée par l’infection. Il a été montré que les hyphes étant trop<br />
larges pour être phagocytés par les PN, ces derniers adhèrent aux tubes germinatifs ayant échappé à la<br />
phagocytose macrophagique et tuent les filaments mycéliens de manière extracellulaire par exocytose de<br />
leur contenu granulaire et production de radicaux oxygénés (Diamond et al., 1978). Cette dernière est<br />
dépendante des dérivés oxygénés générés par les voies de la NADPH oxydase puis de la myéloperoxydase<br />
(MPO). L’importance de l’activité antifongique des métabolites de l’oxygène est confirmée par le fait que,<br />
chez les malades atteints de GSC, caractérisée par un déficit de l’un des composants de la NADPH-oxydase<br />
entraînant un défaut de production des radicaux oxygénés, les PN soient incapables d'endommager les<br />
hyphes (Rex et al., 1990). Cependant, les PN comme les macrophages sont impuissants contre les conidies<br />
non gonflées, métaboliquement inactives. Ceci semble dû à la capacité de ces conidies dormantes de résister<br />
aux dérivés oxygénés (Levitz et Diamond, 1985).<br />
Le rôle des dérivés de l'oxygène est important dans l'élimination des hyphes par les PN, mais il est<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 14
complété par l'action de systèmes non oxydatifs comme les défensines (Levitz et al., 1986) et les sérine-<br />
protéases. Ainsi, il a été montré que les souris dont les PN sont déficients en cathepsine G et en élastase<br />
sont plus sensibles à l’API (Tkalcevic et al., 2000). Toutefois, il faut noter que les conidies peuvent<br />
produire des protéases capables d'hydrolyser les peptides antimicrobiens endogènes (Delucca et al., 1997).<br />
III . 2 - d) Les monocytes<br />
Les monocytes humains s’attachent aux spores par un récepteur dont l'interaction est bloquée par des<br />
b-1,4-oligoglucosides (Kan et Bennett, 1991). Comme pour les MA, les mécanismes antifongiques des<br />
monocytes sanguins ne sont pas encore éclaircis. Ils possèdent un système oxydatif plus efficace que les<br />
MA, puisqu’il est complété par la production de MPO. En effet, durant leur différenciation en MA, les<br />
monocytes sanguins perdent leur capacité à produire cette enzyme. Malgré tout, leur activité dépendante de<br />
l’oxygène semble être moins puissante que celle des PN (Diamond et al., 1983). Les monocytes peuvent<br />
éliminer les conidies par d’autres mécanismes tels que la synthèse de protéases (Schaffner, 1985). Ils sont<br />
aussi capables d’endommager les hyphes par des systèmes oxydatifs et non oxydatifs (protéines cationiques)<br />
qui peuvent agir en synergie (Diamond et al., 1983). Il est ainsi possible que, dans quelques cas, les<br />
monocytes se substituent aux PN défectueux pour exercer certaines de leurs fonctions.<br />
III . 2 - e) Les cytokines<br />
Le TNF-a, l’IL-10, l’IL-12 et l’IFN-g ont été largement impliqués dans l’immunité innée<br />
pulmonaire. Les cytokines de type Th2, dont l’IL-10 et l’IL-4, et les cytokines de type Th1 telles que le<br />
TNF-a, l’IL-12 et l’IFN-g ont été particulièrement étudiées dans les infections pulmonaires fongiques,<br />
notamment dans le cadre de l’API. Plusieurs études suggèrent que ces deux classes de cytokines auraient<br />
des effets opposés sur l’évolution de la pathologie (Cenci et al., 1998 a). En effet, les cytokines de type Th1<br />
auraient un rôle protecteur vis-à-vis de l’infection alors que les cytokines de type Th2 seraient associées<br />
à la progression de la pathologie.<br />
Comme pour les études d’interaction du champignon avec les cellules phagocytaires, les<br />
résultats obtenus pour chacune de ces cytokines diffèrent selon les protocoles utilisés (in vivo, in vitro,<br />
espèces ou lignées animales, concentrations et voies d’administration des conidies, modèle<br />
d’immunosuppression, etc..).<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 15
III . 2 - e.1) Le TNF-a<br />
Le TNF-a est la cytokine la mieux étudiée dans la réponse inflammatoire pulmonaire, et a été<br />
impliqué dans de nombreux modèles animaux de pneumonie. Cette cytokine, sécrétée sous forme d’une<br />
protéine de 17 kDa principalement par les cellules de la lignée myéloïde et dans une moindre quantité par<br />
les cellules épithéliales pulmonaires, est l’un des activateurs essentiels des PN et des macrophages.<br />
La production de TNF-a liée à la présence d’A. fumigatus a été étudiée dans des modèles de<br />
stimulation in vitro. Les MA issus d’animaux immunocompétents et stimulés par des conidies ou des<br />
hyphes synthétisent du TNF-a, alors que ceux provenant de souris prétraitées par l’acétate de cortisone sont<br />
incapables de produire cette cytokine (Taramelli et al., 1996).<br />
Dans des modèles animaux d’API, le TNF-a est exprimé dans le poumon durant l’infection et est<br />
mesuré dans les liquides de lavages broncho-alvéolaires. La neutralisation du TNF-a induit une diminution<br />
de l’élimination du pathogène et parfois une augmentation de la mortalité selon l’importance de la charge de<br />
conidies administrées ou l’état immunitaire de la souris (Duong et al., 1998 ; Mehrad et al., 1999).<br />
Les mécanismes par lesquels le TNF-a produit des effets bénéfiques dans la réponse pulmonaire<br />
innée ne sont pas bien définis. Ils pourraient être liés à sa participation à l’afflux de PN au site<br />
inflammatoire et/ou à son pouvoir activateur de la fonction antifongique des PN, ainsi qu’à son implication<br />
dans la production de chimiokines et d’autres cytokines. Ainsi, le TNF-a accroît la microbicidie des<br />
leucocytes en augmentant la phagocytose, la réponse oxydative et la libération des protéases (Beutler, 1995),<br />
notamment vis-à-vis d’A. fumigatus (Roilides et al., 1998). Le TNF-a contribue aussi à l’accumulation des<br />
PN dans les sites inflammatoires en stimulant l’expression de molécules d’adhérence à la surface des<br />
cellules endothéliales et des cellules phagocytaires et en induisant la production de chimiokines (Le et<br />
Vilcek, 1987). Cependant, malgré son rôle bénéfique, les effets toxiques importants du TNF-a le rendent<br />
difficilement utilisable en clinique.<br />
III . 2 - e.2) L’IFN-g<br />
L'IFN-g est une cytokine pléiotropique de 45 kDa sécrétée essentiellement par les lymphocytes T<br />
activés et les cellules NK (natural killer) et, dans une moindre quantité, par les MA (Robinson et al., 1985).<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 16
La sécrétion de l'IFN-g est induite par le TNF-a et l'IL-12 et provoque la différenciation et l'activation de<br />
différents sous-types de lymphocytes. De plus, l'IFN-g active les PN et les phagocytes mononucléés en<br />
augmentant leur pouvoir phagocytaire et leur capacité à présenter les antigènes et en stimulant l’explosion<br />
respiratoire et la production de NO par induction de la NO-synthase. En clinique, l'administration<br />
systémique d'IFN-g à des patients souffrant de GSC produit une réduction importante des infections (Gallin<br />
et al., 1995). Les effets de l'IFN-g sur les mécanismes de défense cellulaire de l'hôte sont étroitement liés à<br />
ceux du TNF-a. Ainsi, l'activation de macrophages murins par l'IFN-g conduit à la production d'IL-12<br />
(Boehm et al., 1997) et de TNF-a qui sert ensuite d'intermédiaire pour l'élimination intracellulaire de micro-<br />
organismes (Langermans et al., 1992).<br />
Vis-à-vis d'A. fumigatus, des études in vitro ont montré que le traitement de PN avec de l'IFN-g<br />
recombinant augmente leur capacité à endommager et à tuer les hyphes (Gaviria et al., 1999). De plus,<br />
l'IFN-g a la capacité d'augmenter l'activité fongicide des macrophages (Roilides et al., 1994). Ces effets<br />
bénéfiques sur l’activité antifongique des phagocytes sont potentialisés par la présence de Granulocyte<br />
Colony-Stimulating Factor (G-CSF) (Roilides et al., 1993a). Cette combinaison d’IFN-g et de G-CSF<br />
permet aussi d’augmenter l’activité antifongique de PN traités avec des corticostéroides (Roilides et al.,<br />
1993b). L'IFN-g recombinant a été utilisé avec succès, seul ou en association avec le G-CSF recombinant,<br />
dans des protocoles thérapeutiques chez des malades atteints d'infections fongiques à Candida ou<br />
Aspergillus (Poynton et al., 1998).<br />
Dans des modèles d'API murine, la résistance des souris aux infections aspergillaires est corrélée<br />
avec la concentration d’IFN-g dans les lavages broncho-alvéolaires et dans le poumon total (Brieland et al.,<br />
2001). Ceci est confirmé par l'administration combinée d’IFN-g et de TNF-a recombinants qui permet la<br />
diminution de l'invasion fongique dans les organes et de la mortalité (Nagai et al., 1995).<br />
III . 2 - e. 3) L’IL-12<br />
L'IL-12 est une cytokine hétérodimérique de 70 kDa (p70), composée de deux glycoprotéines p40 et<br />
p35. Elle est produite par de nombreux types cellulaires, incluant les lymphocytes B, les cellules NK, les<br />
PN, les monocytes, les macrophages et les cellules épithéliales pulmonaires. L'IL-12 stimule la prolifération<br />
et la cytotoxicité des cellules T ainsi que la sécrétion par ces cellules d'autres cytokines de type Th1, en<br />
particulier l'IFN-g (Trinchieri et Gerosa, 1996). Comme l'IFN-g, l'IL-12 a été impliquée dans l'immunité de<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 17
type antimicrobien dans de nombreux modèle animaux d'infection chronique (Heinzel et al., 1993). En<br />
plus de son rôle dans l'immunité acquise, l'IL-12 a un rôle important dans l'immunité innée contre les<br />
pathogènes communs des voies respiratoires (Greenberger et al., 1996). Dans des modèles murins<br />
d'infection par Candida albicans, il a été montré qu'elle protégeait les souris neutropéniques de<br />
l'infection (Romani et al., 1997). Son rôle dans l’API a été moins étudié. In vitro, l’IL-12 augmente la<br />
production d'anions superoxydes par des monocytes incubés en présence d'hyphes (Roilides et al.,<br />
1999). Dans des modèles in vivo, la présence de cette cytokine dans les poumons est associée à la<br />
résistance des animaux à l'infection (Cenci et al., 1998b ; Brieland et al., 2001).<br />
III . 2 - e.4) L’IL-10<br />
L'IL-10 est une cytokine pléiotropique de 18 kDa qui peut affecter la balance Th1/Th2 dans<br />
les infections fongiques. Elle est produite par les lymphocytes Th2, les macrophages, les mastocytes et<br />
les lymphocytes B. L'IL-10 est connue pour être une importante cytokine immunorégulatrice<br />
influençant le développement des cellules Th ainsi que la production de nombreuses cytokines pro-<br />
inflammatoires (Moore et al., 1993). De plus, l'IL-10 empêche la production de NO induite par<br />
l'IFN-g, aboutissant à une diminution de la résistance aux pathogènes (Romani et al., 1994).<br />
Cependant, in vivo, l’influence de l’IL-10 sur l'évolution des infections diffère selon les micro-<br />
organismes considérés. Selon les cas, une production endogène ou l'administration d'IL-10 peut, par<br />
ses propriétés anti-inflammatoires, se montrer bénéfique dans le cas de réponses inflammatoires<br />
aiguës liées à l’infection (Sawa et al., 1997 ; Chmiel et al., 1999). Au contraire, dans d'autres modèles,<br />
la suppression de l'IL-10 augmente la résistance des animaux à l'infection (Greenberger et al., 1995).<br />
En ce qui concerne l’API, il a été montré une meilleure résistance des souris génétiquement<br />
déficientes en IL-10 aux infections chroniques ou systémiques à A. fumigatus (Del Sero et al., 1999 ;<br />
Clemons et al., 2000).<br />
In vitro, les effets de l'IL-10 sont également contradictoires. Les monocytes humains élutriés,<br />
prétraités par l'IL-10 et incubés en présence d'A. fumigatus réagissent différemment selon qu’ils sont<br />
en présence de conidies ou d’hyphes. D'un côté, leur capacité à phagocyter et à inhiber la germination<br />
des conidies est augmentée et leur activité anticonidicidale reste intacte, alors que, d'un autre côté,<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 18
leur pouvoir fongicide sur les hyphes est diminué (Roilides et al., 1997). Le prétraitement de PN<br />
humains avec l'IL-10 aboutit à la suppression de leur activité phagocytique vis-à-vis de<br />
Staphylococcus aureus et des conidies de Candida albicans, ainsi qu’à une perte de leur activité<br />
fongicide sur les hyphes (Roilides et al., 2000).<br />
IV – DEFENSE DE L’HOTE IMMUNODEPRIME PAR CORTICOTHERAPIE<br />
Les glucocorticoïdes ont de multiples effets immunosuppresseurs et anti-inflammatoires, en<br />
particulier sur les macrophages. L'effet suppresseur des glucocorticoïdes sur les cellules est induit par<br />
l'interaction avec un récepteur intracellulaire spécifique qui est exprimé en nombre variable chez les<br />
monocytes, les macrophages, les granulocytes et toutes les sous-populations de lymphocytes.<br />
En absence de glucocorticoïdes, le récepteur aux glucocorticoïdes (RG) est présent dans le<br />
cytoplasme sous forme d’hétéro-oligomère constitué du RG lui-même, de deux molécules heat shock protein<br />
(hsp) 90, d’une molécule hsp 70 et d’une molécule hsp 56. Les glucocorticoïdes atteignent le cytoplasme<br />
des cellules par diffusion passive à travers la membrane. Une fois dans le cytoplasme, ils se lient au<br />
complexe RG/hsp qui change de conformation, par dissociation de hsp 90 et de hsp 56. Après cette<br />
activation, le complexe glucocorticoïde/RG passe la membrane nucléaire, entre dans le noyau et la molécule<br />
hsp 70 est dissociée. Dans le noyau, le RG forme un homodimère qui peut réguler la transcription de gènes<br />
de diverses manières : 1) par liaison du complexe glucocorticoïde/RG à des séquences d’ADN spécifiques,<br />
activant ou réprimant ainsi directement des gènes , 2) par interaction avec d’autres facteurs de transcriptions<br />
et 3) en modulant la stabilité de molécules d’ARNm spécifiques (Van der Velden, 1998).<br />
Les glucocorticoïdes affectent de différentes façons les activités antifongiques des monocytes, des<br />
MA et des PN tel que cela a été montré dans des modèles murins et dans des études in vitro utilisant des<br />
phagocytes humains.<br />
L'importance des systèmes non oxydatifs des MA est mis en évidence dans l'étude de l'action des<br />
corticostéroïdes sur leur activité antimicrobienne. En effet, les MA exposés à des concentrations<br />
pharmacologiques de corticostéroïdes phagocytent in vitro et in vivo de façon normale et ont une réponse<br />
oxydative adéquate, mais sont incapables d'inhiber la germination et de tuer les conidies intracellulaires qui<br />
finissent par germer et par transpercer le macrophage dépourvu de défense (Epstein et al., 1967). Ces<br />
observations constituent une preuve supplémentaire du rôle mineur de la réponse oxydative des MA dans les<br />
mécanismes de défense antifongique et permettent d’affirmer que les glucocorticoïdes inhibent des systèmes<br />
de défense non oxydatifs. Ces systèmes, opérationnels dans les phagolysosomes de MA compétents, n’ont<br />
pas été identifiés à ce jour. Une étude a suggéré que les glucocorticoïdes affectent l’activité anticonidicidale<br />
par leur propriété de stabiliser certaines membranes cellulaires telles que les membranes lysosomales,<br />
prévenant ainsi la fusion phagolysosomale (Merkow et al., 1971). Cette étude basée sur les aspects<br />
ultrastructuraux des phagolysosomes a été récemment infirmée par une autre étude utilisant des marquages<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 19
lysosomaux (Schaffner et Schaffnerr, 1987).<br />
A l’inverse, l’action des glucocorticoïdes sur les PN induit une inhibition de la réponse oxydative et<br />
une diminution de la destruction hyphale (Roilides et al., 1993b). Bien que le rôle majeur des PN ait été<br />
établi dans la lutte contre l’API, l’étude de l’inhibition par les glucocorticoïdes de l’activité antifongique<br />
des PN n’a pas été plus approfondie à ce jour.<br />
H. BIBLIOGRAPHIE<br />
Albina, J.E. (1995) - On the expression of nitric oxide in killing of Aspergillus fumigatus conidia by<br />
pulmonary alveolar macrophages. Why no NO. J. Leukoc. Biol., 58 : 643-649.<br />
Amitami, R., Taylor, G., Elezis, N., Llewellyn-Jones, C., Mitchell, J., Kuez, F., Cole, P.J., Wilson, R.<br />
(1995) – Purification and characterization of factors producced by Aspergillus fumigatus wich affect human<br />
ciliated respiratory epithelium. Infect. Immun., 63 : 3266-3271.<br />
Aufauve-Brown, A., Mellado, E., Gow, N.A.R., Holden, D.W. (1997) – A. fumigatus chsE : A gene related<br />
to CHS3 of Saccharomyces cerevisiae and important for hyphal growth and conidiophore development but<br />
not pathogenicity. Fungal Genet. Biol., 21 : 141-152.<br />
Baldwin, A.S. (1996) – The NF-kB and IkB proteins: new discoveries and insights. Annu. Rev. Immunol.,<br />
14 : 649-681.<br />
Belvin, M.P., Anderson, K.V. (1996) – A conserved signaling pathway : the Drosophilia toll-dorsal<br />
pathway. Ann. Rev. Cell. Dev. Biol., 12 : 393-416.<br />
Beutler, B. (1995) - TNF, immunity and inflammatory disease : lessons of the past decade. J. Invest. Med.,<br />
43 : 227-235.<br />
Boehm, U., Klamp, T., Groot, M., Howard, J.C. (1997) - Cellular response to interferon-g. Annu. Rev.<br />
Immunol., 15 : 749-795.<br />
Bouchara, J.P., Tronchin, G., Larcher, G., Chabasse, D. (1995) - The search for virulence determinants in<br />
Aspergillus fumigatus. Trends Microbiol., 3 : 327-330.<br />
Brieland, J.K., Jackson, C., Menzel, F., Loebenberg, D., Cacciapuoti, A., Halpern, J., Hurst, S., Muchamuel,<br />
T., Debets, R., Kastelein, R., Churakova, T., Abrams, J., Hare, R., O’Garra, A. (2001) - Cytokine<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 20
networking in lungs of immonucompetent mice in response to inhaled Aspergillus fumigatus. Infect.<br />
Immun., 69 : 1554-1560.<br />
Brown, J.S., Aufauvre-Brown, A., Brown, J., Jennings, J.M., Arst, H. Jr., Holden, D.W. (2000) -<br />
Signature-tagged and directed mutagenesis identify PABA synthetase as essential for Aspergillus fumigatus<br />
pathogenicity. Mol. Microbiol., 36 : 1371-1380.<br />
Calera, J.A., Paris, S., Monod, M., Hamilton, A.J., Debeaupuis, J.P., Diaquin, M., Lopez-Medrano, R., Leal,<br />
F., Latgé, J.P. (1997) - Cloning and disruption of the antigenic catalase of A. fumigatus. Infect. Immun., 65 :<br />
4718-4724.<br />
Cassatella, M.A., Meda, L., Bonora, S., Ceska, M., Constantin, G. (1993) - IL-10 inhibits the release of<br />
proinflammatory cytokines from human polymorphonuclear leukocytes. Evidence for an autocrine role of<br />
TNF and IL-1b in mediating the production of IL-8 triggered by LPS. J. Exp. Med., 178 : 2207-2211.<br />
Cavaillon, J.M. (éd.)(1996) – Les cytokines. Masson. Paris.<br />
Cenci, E., Perito, S., Enssle, K.H., Mosci, P., Latgé, J.P., Romani, L., Bistoni, F. (1997) – Th1 and Th2<br />
cytokines in mice with invasive aspergillosis. Inf. Immun., 65 : 564-570.<br />
Cenci, E., Mencacci, A., Fe d’Ostiani, C., Montagnoli, C., Bacci, A., Del Sero, G., Perito, S., Bistoni, F.,<br />
Romani, L. (1998a) – Cytokine- and T-helper-dependant immunity in murine aspergillosis. Res. Immunol.,<br />
149 : 445-454.<br />
Cenci, E., Mencacci, A., Fe d'Ostiani, C., Del Sero, G., Mosci, P., Montagnoli, C., Bacci, A., Romani, L.<br />
(1998b) - Cytokine- and T helper-dependent lung mucosal immunity in mice with invasive pulmonary<br />
aspergillosis. J. Infect. Dis., 178 : 1750-1760.<br />
Chmiel, J.F., Konstan, M.W., Knesebeck, J.E., Hilliard, J.B., Bonfield, T.L., Dawson, D.V., Berger, M.<br />
(1999) - IL-10 attenuates excessive inflammation in chronic Pseudomonas infection in mice. Am. J. respir.<br />
Crit. Care Med., 160 : 2040-2047.<br />
Clemons, K.V., Grunig, G., Sobel, R.A., Mirels, L.F., Rennick, D.M., Stevens, D.A. (2000) – Role of IL-10<br />
in invasive aspergillosis : increased resistance of IL-10 gene knockout mice to lethal systemic aspergillosis.<br />
Clin. Exp. Immunol., 122 : 186-191.<br />
Cox, G. (1996) - IL-10 enhances resolution of pulmonary inflammation in vivo by promoting apoptosis of<br />
neutrophils. Am. J. Physiol., 271 : 566-571.<br />
Cunningham, R., Mahon, B.P. (2001) – The immunological role of respiratory tract epithelium. Mod. Asp.<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 21
Immunobiol., 5 : 204-209.<br />
Del Sero, G., Mencacci, A., Cenci, E., Ostiani, C., Montagnoli, C., Bacci, A., Mosci, P., Kopf, P., Romani,<br />
L. (1999) - Antifungal type 1 responses are upregulated in IL-10-deficient mice. Microbes Inf., 1 : 1169-<br />
1180.<br />
Delucca, A.J., Bland, J.M., Jacks, T.J., Grimm, C., Cleveland, T.E., Walsh, T.J. (1997) - Fungicidal activity<br />
of cecropin A. Antimicrob. Agents Chemother., 41 : 481-483.<br />
D'Enfert, C., Diaquin, M., Delit, A., Wuscher, N., Debeaupuis, J.P., Huerre, M., Latgé, J.P. (1996) -<br />
Attenuated virulence of uridine - uracil auxotrophs of Aspergillus fumigatus. Infect. Immun., 64 : 4401-<br />
4405.<br />
Diamond, R.D., Krzesicki, R., Epstein, B., Jao, W. (1978) - Damage to hyphal forms of fungi by human<br />
leucocytes in vitro : A possible defense mechanism in aspergillosis and mucormycosis. Am. J. Pathol., 91 :<br />
313-328.<br />
Diamond, R.D., Haudenschild, C.C., Erickson, N.F. (1983) - Mechanisms of destruction of Aspergillus<br />
fumigatus hyphae mediated by human monocytes. J. Infect. Dis., 147 : 474-483.<br />
DiRosa, M., Radomski, M., Carnuccio, R., Moncada, S. (1989) - Glucocorticoids inhibit the induction of<br />
nitric oxide synthase in macrophages. Biochem. Biophys. Res. Comm., 172 : 1246-1252.<br />
Doherty, D.E., Downey, G.P., Worthen, G.S., Haslett, C., Henson, P.M. (1998) – Monocyte retention and<br />
migration in pulmonary inflammation : requirement for neutrophils. Lab. Invest., 59 : 200-213.<br />
Duong, M., Ouellet, N., Simard, M., Bergeron, Y., Olivier, M., Bergeron, M.G. (1998) - Kinetic study of<br />
host defense and inflammatory response to Aspergillus fumigatus in steroid-induced immunosuppressed<br />
mice. J. Immunol., 178 : 1472-1482.<br />
Epstein, S.M., Verney, E., Miale, T.D., Sidransky, H. (1967) - Studies on the pathogenesis of experimental<br />
pulmonary aspergillosis. Am. J. Pathol., 51 : 769-788.<br />
Fonteneau, P. (éd.) (1999) – Immunologie, aide mémoire illustré. De Boek § Larcier s.a. Paris-Bruxelles.<br />
Gallin, J.I., Farber, J.M., Holland, S.M., Nutman, T.B. (1995) - Interferon-g in the management of<br />
infectious diseases. Ann. Intern. Med., 123 : 216-224.<br />
Gaviria, J.M., van Burik, J.A., Dale, D.C., Root, R.K., Liles, W.C. (1999) - Comparison of interferon-g,<br />
Granulocyte Colony-Stimulating Factor and Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor for<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 22
priming leucocyte-mediated hyphal damage of opportunistic fungal pathogens. J. Infect. Dis., 179 : 1038-<br />
1041.<br />
Gerson, S.L., Talbot, G.H. (1984) – Prolonged neutropenia : the major risk factor for pulmonary invasive<br />
aspergillosis in patients with acute leukaemia. Ann. Intern. Med., 100 : 345-351.<br />
Greenberger, M.J, Strieter, R.M., Kunkel, S.L., Danforth, J.M., Goodman, R.E., Standiford, T.J. (1995) -<br />
Neutralization of IL-10 increases survival in a murine model of Klebsiella pneumonia. J. Immunol., 155 :<br />
722-729.<br />
Greenberger, M.J., Kunkel, S.L., Strieter, R.M., Lukacs, N.W., Bramson, J., Gauldie, J. (1996) - IL-12 gene<br />
therapy protects mice in lethal Klebsiella pneumoniae. J. Immunol., 157 : 3006-3012.<br />
Hamelmann, E., Schwarze, J., Tadeka, K, Oshiba, A., Larsen, L., Irvin, G., Gelfand, E.W. (1997) –<br />
Noninvasive measurement of airway responsiveness in allergic mice using barometric plethysmography. Am.<br />
J. Resp. Crit. Care. Med., 156 : 766-775.<br />
Heinzel, F.P., Schoenhaut, D.S., Rerko, R.M., Rosser, L.E., Gately, M.K. (1993) - Recombinant IL-12 cures<br />
mice infected with Leishmania major. J. Exp. Med., 177 : 1505-1509.<br />
Huerre, M., Michiels, J.F., Pierre, C. (éd.) (2001) – Diagnostic histopathologique des parasitoses et mycoses.<br />
Le pathologiste, Elsevier. Amsterdam.<br />
Jaton-Ogay, K., Paris, S., Huerre, M., Quadroni, M., Falchetto, R., Togni, G., Latgé, J.P., Monod, M.<br />
(1994) – Cloning and disruption of the gene encoding an extracellular metalloprotease of Aspergillus<br />
fumigatus. Mol. Microbiol., 14 : 917-928<br />
Kan, V.L., Bennett, J.E. (1988) - Lectin-like attachment sites on murine pulmonary alveolar macrophages<br />
bind A. fumigatus conidia. J. Infect. Dis., 158 : 407-414.<br />
Kan, V.L., Bennett, J.E. (1991) - b1,4-oligoglucosides inhibit the binding of Aspergillus fumigatus to<br />
monocytes. J. Infect. Dis., 163 : 1154-1156.<br />
Langermans, J.A.M., Van der Hulst, M.E.B., Nibbering, P.H., Hiemstra, P.S., Fransen, L., Van Furth, R.<br />
(1992) - IFN-g induced L-arginine-dependent toxoplasmatic activity in murine peritoneal macrophages is<br />
mediated by endogenous tumor necrosis factor-a. J. Immunol., 148 : 568-574.<br />
Latgé, J.P. (1999) – Aspergillus fumigatus and Aspergillosis. Clin. Microbiol. Rev., 12 : 310-350.<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 23
Latgé, J.P. (2001) – The pathobiology of Aspergillus fumigatus. Trends in Microbiol., 9 : 382-388.<br />
Le, J., Vilcek, J. (1987) – TNF and IL-1: cytokines with multiple overlapping biological activities. Lab.<br />
Invest., 56 : 234-248.<br />
Lefort, J., Singer, M., Leduc, D., Renesto, P., Nahori, M.A., Huerre, M., Creminon, C., Chignard, M.,<br />
Vargaftig, B.B. (1998) - Systemic administration of endotoxin induces bronchopulmonary hyperreactivity<br />
dissociated from TNF-a formation and neutrophil sequestration into the murine lungs. J. Immunol., 161 :<br />
474-480.<br />
Lehmann, P.F., White, L.O. (1975) - Chitin assay used to demonstrate renal localization and cortisoneenhanced<br />
growth of Aspergillus fumigatus mycelium in mice. Infect. Immun. 12 : 987-993.<br />
Lemaitre, B., Nicolas, E., Michaut, L., Reichhart, J.M., Hoffmann, J.A. (1996) – The dorsoventral<br />
regulatory gene cassette spatzle/Toll/cactus controls the potent antifungal response in Drosophilia adults.<br />
Cell, 86 : 973-983.<br />
Levine, S.J., Larivee, P., Logun, C., Angus, C.W., Shelhamer, J.H. (1993) – Corticosteroids differentially<br />
regulate secretion of IL-6, IL-8, and GM-CSF by a human bronchial epithelial cell line. Am. J. Physiol.,<br />
265 :L630-L638.<br />
Levitz, S.M., Diamond, R.D. (1985) - Mechanisms of resistance of Aspergillus fumigatus conidia to killing<br />
by neutrophils in vitro. J. Infect. Dis., 152 : 33-42.<br />
Levitz, S.M., Selsted M.E., Ganz, T., Lehrer, R.I., Diamond, R.D. (1986) – In vitro killing of spores and<br />
hyphae of Aspergillus fumigatus and Rhizopus oryzae by rabbit neutrophil cationic peptides and<br />
bronchoalveolar macrophages. J. Infect. Dis., 154 : 483-489.<br />
Levitz, S.M., Farrell, T.P. (1990) - Human neutrophil degranulation stimulated by Aspergillus fumigatus. J.<br />
Leukoc. Biol., 47 : 170-175.<br />
Lorenz, E., Mira, J.P., Frees, K.L., Schwartz, D.A. (2002) – Relevance of mutations in the TLR4 receptor<br />
with gram-negative septic shock. Arch. Intern. Med., 162 : 1028-1032.<br />
Madan, T., Eggleton, P., Kishore, U., Strog, P., Aggrawal, S.S., Sarma, P.U., Reid, K.B. (1997) - Binding<br />
of pulmonary surfactant proteins A and D to Aspergillus fumigatus conidia enhances phagocytosis and<br />
killing by human neutrophils and alveolar macrophages. Infect. Immun., 65 : 3171-3179.<br />
Meagher, L.C., Cousin, J.M., Seckl, J.R., Haslett, C. (1996) - Opposing effects of glucocorticoids on the<br />
rate of apoptosis in neutrophilic and eosinophjilic granulocytes. J. Immunol., 156 : 4422-4428.<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 24
Mégarbane, B., Galanaud, P., Emilie, D. (1998) – Cytokines du système de défense: interleukines et<br />
chimiokines.<br />
Mehrad, B., Strieter, R.M., Standiford, T.J. (1999) - Role of TNF in pulmonary host defense in murine<br />
invasive aspergillosis. J. Immunol., 162 : 1633-1640.<br />
Merkow, L.P., Epstein, S.M., Sidransky, H., Verney, E., Pardo, M. (1971) - The pathogenesis of<br />
experimental pulmonary aspergillosis. An ultrastructural study of alveolar macrophages after phagocytosis<br />
of a flavus spores in vivo. Am. J. Pathol., 62 : 57-74.<br />
Michaliszyn, E., Senechal, S., Martel, P., de Repentigny, L. (1995) - Lack of involvement of nitric oxide in<br />
killing of Aspergillus fumigatus conidia by pulmonary alveolar macrophages. Infect. Immun., 63 : 2075-<br />
2078.<br />
Moncada, S., Higgs, A. (1993) - The L-arginine-nitric oxide pathway. N. Engl. J. Med. 329 : 2002-2012.<br />
Monod, M., Paris, S., Sarfati, J., Jaton-Ogay, K., Ave, P., Latgé, J.P. (1993) – Virulence of alkaline<br />
protease-deficient mutants of Aspergillus fumigatus. FEMS Microbiol. Lett., 106 : 39-46.<br />
Moore, K.W., O’Garra, A., de Waal Malefyt, R., Viera, P., Mosmann, T.R. (1993) - Interleukine-10.<br />
Ann. Rev. Immunol., 11 : 165-190<br />
Morgenstern, D.E., Gifford, M.A., Li, L.L., Doerschuck, C.M., Dinauer, M.C. (1997) - Absence of<br />
respiratory burst in X-linked chronic granulomatous disease mice leads to abnormalities in both host defense<br />
and inflammatory response to Aspergillus fumigatus. J. Exp. Med. 185 : 207-218.<br />
Murayama, T., Amitani, R., Ikegami, Y., Kawanami, R., Lee, W.J., Nawada, R. (1993) - Effects of<br />
Aspergillus fumigatus culture filtrate on antifungal activity of human phagocytes in vitro. Thorax, 53 : 975-<br />
978.<br />
Mutschler, E., Derendorf, H. (éd.) (1995) – Drugs actions: basics principles and therapeutics aspects.<br />
Medpharm Scientific Publishers, Stuttgart, Germany.<br />
Nagai, H., Guo, J., Choi, H., Kurup, V. (1995) - Interferon-g and tumor necrosis factor-a protect mice from<br />
invasive aspergillosis. J. Infect. Dis., 172 : 1554-1560.<br />
Nelson, S., Mason, C.M., Kolls, J., Summer, W.R. (1995) – Pathophysiology of pneumonia. Clin. Chest<br />
Med., 16 : 1-11.<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 25
Nelson, S., Summer, W.R. (1998) – Innate immunity, cytokines and pulmonary host defenses. Inf. Dis. Clin.<br />
North America, 12 : 555-567.<br />
Ozinsky, A., Underhill, D.M., Fontenot, J.D., Hajjar, A.M., Smith, K.D., Wilson, C.B., Schroeder, L.,<br />
Aderem, A. (2000) - The repertoire for pattern recognition of pathogens by the innate immune system is<br />
defined by cooperation between toll-like receptors. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 97 : 13766-13771.<br />
Pahl, H.L., Baeurle, P.A. (1996) - The immunosuppressive fungal metabolite gliotoxine specifically inhibits<br />
transcription factor NF-kappaB. J. Exp. Med., 183 : 1829-1840.<br />
Paris, S., Monod, M., Diaquin, M., Lamy, B., Arruda, L.K., Punt, P.J., Latgé, J.P. (1993) – A transformant<br />
of Aspergillus fumigatus deficient in the antigenic cytotoxin ASPF1. FEMS Microbiol. Lett., 111 : 31-36.<br />
Pradelles, P., Grasi, J., Creminon, C., Boutten, B., Mamas, S. (1994) – Immunometric assay of low<br />
molecular weights haptens containing primary amino groups. Anal. Chem., 66 : 16-22.<br />
Pradelles, P., Grassi, J, Maclouf, J. (1985) – Enzyme immunoassays of eicosanoids using acetylcholine<br />
esterase as label: an alternative to radioimmunoassay. Anal. Chem., 57 : 1170-1173.<br />
Poltorak, A., He, X., Smirnova, I., Liu, M.Y., Van Huffel, C., Du, X., Birdwell, D., Alejos, E., Silva, M.,<br />
Galanos, C., Freundenberg, M., Ricciardi-Castagnoli, P., Layton, B., Beutler, B. (1998) – Defective LPS<br />
signaling in C3H/HeJ and C57BL/10ScCR mice: mutations in Tlr4 gene. Science, 282 : 2085-2088.<br />
Poynton, C.H., Barnes, R.A., Rees, J. (1998) - Interferon-g and granulocyte-stimulating factor for the<br />
treatment of hepatosplenic candidosis in patients with acute leukemia. Clin. Infect. Dis., 26 : 239-240.<br />
Rex, J.H., Bennett, J.E., Gallin, J.I., Malech, H.L., Melnick, D.A. (1990) - Normal and deficient neutrophils<br />
can cooperate to damage Aspergillus fumigatus hyphae. J. Infect. Dis., 91 : 313-328.<br />
Richard, J.L., Debey, M.C. (1995) - Production of gliotoxin during the pathogenic states in turkey poults by<br />
Aspergillus fumigatus. Mycopathologia, 1298 : 111-115.<br />
Robertson, M.D., Seaton, A., Raeburn, J.A., Milne, L.J. (1987) - Inhibition of phagocyte migration and<br />
spreading by spores diffusates of Aspergillus fumigatus. J. Med. Vet. Mycol., 25 : 389-396.<br />
Robinson, B.T., Venaille, T.J., Mendis, A.H., McAleer, R. (1990) – Allergens as proteases : an Aspergillus<br />
fumigatus proteinase directly induces human epithelial cell detachment. J. Allergy Clin., 86 : 726-731<br />
Robinson, B.W.S., McLemore, T.L., Crystal, R.G. (1985) – Gamma interferon is spontaneously released by<br />
alveoalr macrophages and lung T-lymphocytes in patients with pulmonary sarcoidosis. J. Clin. Invest., 75 :<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 26
1488-1495.<br />
Roilides, E., Uhlig, K., Venzon, D., Pizzo, P.A., Walsh, T.J. (1993a) - Enhancement of oxidative response<br />
and damage caused by neutrophils to Aspergillus fumigatus hyphae by granulocyte colony-stimulating factor<br />
and g-interferon. Infect. Immun., 61 : 1185-1193.<br />
Roilides, E., Uhlig, K., Venzon, D., Pizzo, P., Walsh, T. (1993b) - Prevention of corticosteroid-induced<br />
suppression of human polymorphonuclear leucocyte-induced damage of Aspergillus fumigatus hyphae by<br />
granulocyte colony-stimulating factor and g-interferon. Infect. Immun., 61 : 4870-4877.<br />
Roilides, E., Holmes, A., Blake, C., Venzon, D., Pizzo, P.A., Walsh, T.J. (1994) - Antifungal activity of<br />
elutriated human monocytes against Aspergillus fumigatus hyphae : enhancement by granulocyte colony-<br />
stimulating factor and g-interferon. J. Infect. Dis., 170 : 894-899.<br />
Roilides, E., Dimitriadou, A., Kadiltsoglou, I., Sein, T., Karpouzas, J., Pizzo, P.A., Walsh, T.J. (1997) - IL-<br />
10 exerts suppressive and enhancing effects on antifungal activity of mononuclear phagocytes against<br />
Aspergillus fumigatus. J. Immunol., 158 : 322-329.<br />
Roilides, E., Dimitriadou-Georgiadou, A., Sein, T., Kadiltsoglou, I., Walsh, T.J. (1998) - Tumor necrosis<br />
factor a enhances antifungal activities of polymorphonuclear and mononuclear phagocytes against<br />
Aspergillus fumigatus. Infect.Immun., 66 : 5999-6003.<br />
Roilides, E., Tsaparidou, S., Kadiltsoglou, I., Sein, T., Walsh, T.J. (1999) - IL-12 enhances antifungal<br />
activity of human mononuclear phagocytes against Aspergillus fumigatus: implications for a g-interferonindependent<br />
pathway. Infect. Immun., 67 : 3047:3050.<br />
Roilides, E., Katsifa, H., Tsaparidou, S., Stergiopoulou, T., Panteliadis, C., Waslh, T.J. (2000) – IL-10<br />
suppresses phagocytic and antihyphal activities of human neutrophils. Cytokine, 12 : 379-387.<br />
Romani, L., Pucetti, P., Mencacci, A., Cenci, E., Spaccapelo, R., Tonnetti, L., Grohmann, U., Bistoni, F.<br />
(1994) - Neutralization of IL-10 up-regulates nitric oxide production and protects susceptible mice from<br />
challenge with Candida albicans. J. Immunol., 152 : 3514-3521.<br />
Romani, L., Mencacci, A., Cenci, E., Spaccapelo, R., Del Sero, G., Nicoletti, I., Trinchieri, G., Bistoni, F.,<br />
Pucetti, P. (1997) - Neutrophil production of IL-12 and IL-10 in candidiasis and efficacy of IL-12 therapy in<br />
neutropenic mice. J. Immunol., 158 : 5349-5356.<br />
Sadilot, R.T., Jansen, E.D., Blackwell, T.R., Zoia, O., Yull, F., Christman, J.W., Blackwell, T.S. (2001 ) -<br />
High-dose dexamethasone accentuates nuclear factor-kB activation in endotoxin-treated mice. Am. J.<br />
Respir. Crit Care Med., 164 : 873-878.<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 27
Salez, L., Singer, M., <strong>Balloy</strong>, V., Créminon, C., Chignard, M. (2000) – Lack of IL-10 synthesis by murine<br />
alveolar macrophages upon lipopolysaccharide exposure. Comparison with peritoneal macrophages. J.<br />
Leukoc. Biol., 67 : 545-552.<br />
Sawa, T., Corry, D.B., Gropper, M.A., Ohara, M., Kurahashi, K., Wiener-Kronish, J.P. (1997) - IL-10<br />
improves lung injury and survival in Pseudomonas aeruginosa pneumonia. J. Immunol., 159 : 2858-2866.<br />
Schaffner, A., Douglas, H., Braude, A. (1982) - Selective protection against conidia by mononuclear and<br />
against mycelia by polymorphonuclear phagocytes in resistance to Aspergillus : observations on these two<br />
lines of defense in vivo and in vitro with human and mouse phagocytes. J. Clin. Invest., 69 : 617-631.<br />
Schaffner, A., Douglas, H., Braude, A.I., Davis, C.E. (1983) - Killing of Aspergillus spores depends on the<br />
anatomical source of macrophage. Infect. Immun., 42 : 1109-1115.<br />
Schaffner, A. (1985) - Therapeutic concentrations of glucocorticoids suppress the antimicrobial activity of<br />
human macrophages without impairing their responsiveness to g-interferon. J. Clin. Invest., 76 : 1755-1764.<br />
Schaffner, A., Schaffner, T. (1987) - Glucocorticoid-induced impairment of macrophages<br />
antimicrobial activity – Mechanisms and dependence on the state of activation. Rev. Infect. Dis., 9<br />
(suppl5) : 5620-5629.<br />
Schaffner, A. (1992) - Host defence in aspergillosis. In: Bennett JE, Hay RJ, Peterson PK, eds. New<br />
strategies in fungal disease. Edinburgh: Churchill Livingstone,p98.<br />
Schaffner, A. (1994) - Macrophage-Aspergillus interactions. Immunol. Ser. 60 : 545-552.<br />
Schelenz, S., Smith, D.A., Bancroft, G.J. (1999) - Cytokine and chemokine responses following pulmonary<br />
challenge with Aspergillus fumigatus : obligatory role of TNF-a and GM-CSF in neutrophil recruitement.<br />
Medical Mycology, 37 : 183-194.<br />
Sharma, O.P., Chwogule, R. (1998) – Many faces of pulmonary aspergillosis. Eur. Resp. J., 12 : 705-715.<br />
Sinha, B.K., Monga, D.P., Prasad, S. (1988 ) - A combination of Gomori-Grocott methenamine silver nitrate<br />
and hematoxylene and eosin staining technique for the demonstration of Candida albicans in tissue. Quad<br />
Sclavo Diagn., 24 :129-32.<br />
Slight, J., Mitchell, C.G. (1996) - Inhibition of the alveolar macrophage oxidative burst by diffusible<br />
component from the surface of the spores of the fungus Aspergillus fumigatus. Thorax, 51 : 389-396.<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 28
Smith, J.M., Tang, C.M., Van Noorden, S., Holden, D.W. (1994) - Virulence of A. fumigatus double<br />
mutants lacking restrictocin and an alkaline protease in a low-dose model of invasive pulmonary<br />
aspergillosis. Infect. Immun., 62 : 5247-5254.<br />
Snedecor, G. (1980) - Chi square test. Statistical Method, 7 th ed.<br />
Stevens, D.A., Kan, V.L., Judson, M.A., Morrison, V.A., Dummer, S., Denning, D.W., Bennett, J.E.,<br />
Walsh, T.J., Patterson, T.F., Pankey, G.A. (2000) – Practise guidelines for disease caused by Aspergillus.<br />
Clin. Infect. Dis., 30 : 696-709.<br />
Tang, C.M., Cohen, J., Krausz, T., van Noorden, S., Holden, D.W. (1993) – The alkaline protease of<br />
Aspergillus fumigatus is not a virulence determinant in two murine models of the invasive pulmonary<br />
aspergillosis. Infect. Immun., 61 : 1650-1656.<br />
Taramelli, D., Malabarba, M.G., Sala, G., Basilico, N., Cocuzza, G. (1996) - Production of cytokines by<br />
alveolar and peritoneal macrophages stimulated by Aspergillus fumigatus conidia or hyphae. J. Med. Vet.<br />
Myc., 34 : 49-56.<br />
Tkalcevic, J., Novelli, M., Phylactides, M., Iredale, J.P., Segal, A.W., Roes, J. (2000) - Impaired immunity<br />
and enhanced resistance to endotoxin in the absence of neutrophil elastase and cathepsin G. Immunity, 12 :<br />
201-210.<br />
Tomee, J.F., Wierenga, A.T., Hiemstra, P.S., Kauffman, H.K. (1997) - Proteases from Aspergillus<br />
fumigatus induce release of proinflammatory cytokines and cell detachment in airway epithelial cell lines. J.<br />
Infect. Dis., 176 : 300-303.<br />
Trinchieri, G., Gerosa, F. (1996) - Immunoregulation by IL-12. J. Leukoc. Biol., 59 : 505-511.<br />
Underhill, D.M., Ozinsky, A., Hajjar, A.M., Stevens, A., Wilson, C.B., Bassetti, M., Aderem, A. (1999) –<br />
The Toll-like receptor 2 is recruited to macrophages phagosomes and discriminates between pathogens.<br />
Nature, 21 : 811-815.<br />
Van der Velden, V.H.J. (1998) – Glucocorticoïds: mechanisms of action and anti-inflammatory potential in<br />
asthma. Med. Inflamm., 7 : 229-237.<br />
Van Rooijen, N. (1993) - Extracellular and intracellular action of clodronate in osteolytic bone diseases? A<br />
hypothesis. Calcif. Tissue Int., 52 : 407-411.<br />
Van Rooijen, N., Sanders, A., van den Berg, T.K. (1996) - Apoptosis of macrophages induced by liposome-<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 29
mediated intracellular delivery of clodronate and propamidine. J. Immunol. Meth., 193 : 93-99.<br />
de Vries, J.E. (1995) - Immunosuppressive and anti-inflammatory properties of interleukin-10. Ann. Med.,<br />
27 : 537-541.<br />
Waldorf, A.R., Levitz, S., Diamond, R.D. (1984) - In vivo bronchoalveolar macrophage defense against<br />
Rhizopus oryzae and Aspergillus fumigatus. J. Infect. Dis., 150 : 752-760.<br />
Waldorf, A.R., Diamond, R.D. (1985) - Neutrophil chemotactic responses induced by fresh and<br />
swollen Rhizopus oryzae spores and Aspergillus fumigatus conidies. Infect. Immun., 48 : 458-463.<br />
Wang, J.E., Warris, A., Ellingsen, E.A., Jorgensen, P.F., Flo, T.H., Espevik, T., Solberg, R., Verweij, P.E.,<br />
Aasen, A.O. (2001) – Involvement of CD14 and Toll-Like Receptors in activation of human monocytes by<br />
Aspergillus fumigatus hyphae. Infect. Immun., 69 : 2402-2406.<br />
Wasylnka, J.A., Moore, M.M (2002) – Uptake of Aspergillus fumigatus conidia by phagocytic and<br />
nonphagocytic cells in vitro: Quantitation using strains expressing green fluorescent protein. Infect. Immun.,<br />
70 : 3156-3163.<br />
Weiner, M., Talbot, G., Gerson, S. (1983) - Antigen detection in the diagnosis of invasive pulmonary,<br />
aspergillosis : Utility in controlled, blinded trials. Ann. Intern. Med., 99 : 777-782.<br />
Witko-Sarsat, V., Rieu, P., Descamps-Latscha, B., Lesavre, P., Halbwachs-Mecarelli, L. (2000) –<br />
Neutrophils : molecules, functions and pathophysiological aspects. Lab. Invest., 80 : 617-653.<br />
<strong>EPHE</strong> Banque de Monographies SVT 30