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Afin d’évaluer la déplétion en graines au cours de<br />
l’hiver dans le cadre du second protocole de suivi,<br />
une méthodologie identique de carottage a été<br />
appliquée sur les 60 parcelles concernées, pour un<br />
total de 7 200 carottages.<br />
Chaque carottage permettait le prélèvement de 6,3<br />
cm 3 (2 cm de diamètre et 2 cm de profondeur; Fig.<br />
3A, 3C). Après échantillonnage, les échantillons<br />
ont été conservés à environ 4 ° C afin d’inhiber les<br />
processus de germination. La densité en graines a<br />
été estimée après germination en conditions<br />
contrôlées (Ter Heerds et al, 1996; Ter Heerds et al<br />
1999). Pratiquement, les prélèvements de sol ont<br />
été tamisés (mailles 3 mm) afin d’ôter les<br />
fragments de plantes et les pierres puis<br />
placés dans des plateaux en plastique à une<br />
profondeur d'environ 2 cm sur un mélange de sable<br />
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stérilisé (Price et al. 2010). Par la suite, les<br />
plateaux ont été maintenus sous serre dans des<br />
conditions d’humidité contrôlées, avec un cycle<br />
diurne de lumière de 14h. La température variait<br />
entre 15 et 35 ° C afin de reproduire l’amplitude des<br />
variations nuit/jour. De plus, afin de contrôler pour<br />
d’éventuelles contaminations, des plateaux ne<br />
contenant que du sable stérilisé ont été répartis<br />
entre les plateaux d'échantillons dans la serre. Le<br />
nombre de plantules émergé a été comptabilisé<br />
tous les trois jours pendant dix semaines jusqu'à ce<br />
que le taux de germination approche zéro. Chaque<br />
plantule nouvellement germée était retirée du<br />
plateau après avoir été comptabilisée. Après dix<br />
semaines de mise en germination, une recherche<br />
de graines non germées (à l’aide d’une loupe<br />
binoculaire) à été conduite sur 40 échantillons de<br />
sol choisis aléatoirement.<br />
Fig. 2: Illustration des 5 types de cultures utilisés durant l’étude. (A) chaume de céréales (n=29); (B) luzerne<br />
(n=50); (C) colza (n=36); (D) céréale d’hiver (n=51); (E) prairie (n=58).