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Méthodologie Bioaccessibilité de la vitamine A Effets des modalités de préparation Méthodes d’analyses biochimiques α-amylase Echantillon homogénéisé Pepsine Pancréatine+sels biliaires Phase orale (pH7, 10 min, 37°C) Dosage sur HPLC de la teneur en vitamine A bioaccessible Digestion gastrique (pH4, 1h, 37°C) Extraction de la vitamine A avec éthanol/hexane (4/3) Filtration sur membrane 0,45 µm Digestion intestinale (pH7, 1h30, 37°C) Centrifugation (4 000g, 45min, 4°C) Bioaccessibilité = Teneur en vitamine A bioaccessible Teneur en vitamine A totale * 100 26
Méthodologie Effets des modalités de préparation Méthodes d’analyses biochimiques Mesure de la digestibilité in vitro (DIV) du fer et du zinc Principe de la méthode: • Simuler la digestion gastro-intestinale dans les conditions physiologiques avec une dialyse en fin de digestion intestinale - Digestion gastrique (1h, 37°C, pH 2 + pepsine) - Digestion intestinale (2h, 37°C, pH 7,0 + pancréatine & sels biliaires) • Récupérer les quantités de fer et de zinc digestibles dans le dialysat • Doser par spectrométrie d’absorption atomique les quantités de fer et de zinc sur: - Echantillons tels que consommés teneurs totales - Dialysats teneurs digestibles - Surnageants teneurs solubles non dialysables DIV = Teneur en fer ou zinc digestible Teneur en fer ou zinc totale * 100 27
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