LAPORAN AKHIR PROGRAM RISET INSENTIF 2010 - KM Ristek

• •
RINGKASAN
Rekayasa Genetik Azospirillum Unggul untuk Menurunkan Penggunaan Pupuk Nitrogen
Sebesar 30% dan Penggunaan Pupuk Fosfat Sebesar 15% dari Standar Pemupukan untuk
Padi Sawah. Eny Ida RiyaDti, Toto Hadiarto, D. N. Susilowati. Pertanian modem di
Indonesia sangat tergantung dengan penggunaan pupuk kimia N, P dan K. Penggunaan
Azospirillum sp yang multi fungsi sebagai penambat N dan pelarut P dan menghasilkan
hormone tumbuh akan sangat membantu pertanian di Indonesia. Penelitian peningkatan
mutu genetik dengan sifat superior terhadap penambatan N dan pelarutan P sangat
diperlukan agar Azospirillum ini efektif untuk petani. Dari hasil penelitian tahun 2009 telah
diisolasi dan dipilih sebanyak 22 isolat Azospirillum dengan fungsi ganda sebagai penambat
N dan pelarut P serta menghasilkan hormone tumbuh Indole Acetic Acid (IAA). Tiga isolat
telah dipilih, Aj 18.3.1, Aj 5251 , dan Aj Bandung 6.4.2.1 dengan kombinasi kemampuan
pelarutan P, aktivitas nitrogenase dan produksi IAA tertinggi. Telah dimonitor kemampuan
melarutkan P secara kuantitatif, dan diidentifikasi secara molekular dengan 165 rD?\ A.
Isolat Aj Bandung 6.4.1.2 telah dipilih untuk penelitian pada tahun ke 2 (2010) karena
menunjukkan kemampuan pelarutan P paling tinggi dibandingkan dengan yang lain dan
juga dari isolat komersial TGH. Pada tahun 2010 ini dilakukan peningkatan mutu genetik
strain lokal terpilih dengan EMS 1.5%, pengaruh mutasi terhadap aktivitas nitrogenase dan
produksi IAA, serta uji stabilitas mutan. Beberapa konsentrasi EMS (0, 0,5, 1, 1,5 dan 2
%) dengan beberapa waktu inkubasi (0, 15, 30, 45, 60, dan 90 menit) telah dilak'Ukan.
Perlakuan yang sesuai untuk mutasi adalah pada konsentrasi 1.5% dengan waktu inkubasi
selama 45 menit. Telah diperoleh 138 isolat mutan berdasarkan zona beningnya. Sudah
dilakukan penentuan killing curve dari isolat terpilih terhadap konsentrasi EMS dan lama
inkubasi pada larutan EMS. Dari 13 8 isolat (disimpan 53 mutan) dan dipilih 10 isolat
untuk dilakukan pengukuran nitrogenase dan produksi IAAnya untuk mengetahui pengaruh
mutasi terhadap kedua parameter tersebut. Hasil menunjukkan bahwa terjadi variasi
peningkatan kemapuan pelarutan P, produksi nitrogenase dan IAA setelah dimutasi. Isolat
mutan AzM1.7.2.12 dan AzM 3.7.1.14 dipilih untuk uji stabilitas dengan sub kultur selama
10 hari dibandingkan dengan isolat alam Aj Bandung 6.4.1.2. Dari pengukuran indeks P,
kemampuan melarutkan P, aktivitas nitrogenase dan produksi IAAnya, kedua mutan
bersifat stabil sampai hari ke 10 untuk ketida sifat terse but.
,Kata kunci: Azospirillum, nitrogenase, pelarut P, IAA, mutagenesis
v