DETEKSI HIBRIDISASI DALAM BIOSENSOR DNA ELEKTROKIMIA

dimodifikasi dengan oligonukleotida sintesis dan fragmen DNA yang diekstraksi dari
darah manusia dan diamplifikasi PCR digunakan untuk pengujian daunomycin
sebagai indikator redoks untuk deteksi polimorfisme apolipoprotein E (Marraza et al.
2000), menunjukkan respons linier hingga 2 mg/L DNA target. Tidak terdapat
pengganggu yang teramati dengan urutan nonkomplementer yang mengandung satu
mismatch di tengah-tengah urutan. Limit deteksinya adalah 10µM. Biosensor ini
dapat digunakan tidak hanya untuk deteksi oligonukleotida sintesis tetapi juga
fragmen 244 pb yang mengandung dua kodon polimorfisme, 12 dan 158. Waktu
hibridisasi yang lebih lama diperlukan untuk sampel sebenarnya (hingga 8 menit)
untuk mengimbangi penurunan kececepatan hibridisasi sebagai konsekuensi dari
penembahan panjang rantai. Penentuan yang sangat sensitif dan selektif diperoleh.
Marrazza et al. (1999) mengajukan sensor elektrokimia diposable
menggunakan 13-mer DNA sintesis yang diamobilisasi pada SPE dengan dua
prosedur: adsorpsi langsung oligonukleotida pada permukaan yang di-pretreatment,,
dan amobilisasi oligonukleotida terbiotinilasi pada SPE modifikasi avidin. Hibridisasi
dilakukan pada temperatur ruang dan transduksi dilakukan dengan PSA pada arus
konstan dari signal oksidasi kronopotensiometri daunomycin. Limit deteksinya
berturut-turut adalah 2 atau 3 µg/mL untuk biosensor yang dipreparasi secara
adsorpsi sederhana probe atau interaksi oligonukleotida terbiotinilasi-avidin.
Penggunaan daunomycin sebagai indikator redoks juga diajukan oleh
kelompok Fang (Sun et al. 1998). Probe DNA 24-mer DNA diamobilisasi secara
kovalen pada permukaan emas diderivatisasi dengan monolayer aminoetanatiol
13 1