DETEKSI HIBRIDISASI DALAM BIOSENSOR DNA ELEKTROKIMIA

dengan limit deteksi 2,6 x 10 11 molekul target dalam larutan sampel 10 µL.
Hibridisasi dilakukan pada temperatur ruang selama 10 menit menggunakan larutan
hibridisasi 10 mL. Limit deteksi diperoleh 3,0 µg/mL target. Biosensor yang diajukan
dapat membedakan dengan jelas antara DNA spesifik unruk apoE dan sampel kontrol
negatif, dengan suatu reprodusibilitas 14% untuk oligonukleotida target sintesis dan
15-25% untuk sampel sebenarnya. Suatu pengganggu 50% dapat teramati untuk
urutan yang mengandung satu basa mismatch.
Kelompok Thorp melaporkan beberapa penelitian yang berkaitan dengan efek
elektrokatalitik Ru(bpy)3 2+ terhadap oksidasi guanin menggunakan elektrode ITO
(Napier dan Thorp 1997a; Aper et al. 1997b; Ontko et al. 1999; Armistead dan Thorp
2000, 2001; Johnston dan Thorp 1996). Napier et al. (1997b) mengajukan suatu
biosensor elektrokimia untuk deteksi terjadinya hibridisasi berdasarkan transfer
elektron guanin terhadap kompleks logam Ru(bpy)3 2+ .
Suatu urutan probe yang mengandung inosin sebagai pengganti guanin telah
digunakan sebagai probe (Napier dan Thorp 1997a). Dalam penelitian ini, efisiensi
biosensor untuk penentuan produk PCR telah ditunjukkan untuk pertama kalinya
menggunakan DNA genomik dari virus Herpes simplex tipe II (561 pb), Clostridium
perfringens (247 bp), dan RNA genomik HIV (3.2 kb), dengan perbedaan yang
sangat baik terhadap urutan nonkomplementernya. Napier dan Thorp (1997a) juga
menggunakan ITO yang dimodifikasi dengan 1,12-dodecanedicarboxylic acid
(DDCA) dan poli(C) untuk mendeteksi hibridisasinya dengan poli(G). Monolayer
DDCA mencegah oksidasi langsung guanin sementara elektroaktivitas tinggi untuk
4 1