DETEKSI HIBRIDISASI DALAM BIOSENSOR DNA ELEKTROKIMIA

Gambar 5. Deteksi terjadinya hibridisasi berdasarkan stripping penanda logam.
Protokol tediri dari:
a) Amobilisasi probe terbiotinilasi pada streptavidin-modified magnetic
beads,
b) Hibridisasi dengan target terbiotinilasi
c) Interaksi dengan nanopartikel emas koloidal dilapisi streptavidin,
d) Pengendapan perak,
e) Pelarutan partikel perak,
f) Deposisi perak terlarut pada SPE, dan
g) Analisis stripping kronopotensiometri dari logam terdeposisi.
Wang et al. (2003b) melaporkan suatu protokol baru untuk deteksi hibridisasi
DNA menggunakan DNA sebagai templat metalisasi. Protokol baru ini terdiri dari
modifikasi emas dengan cystamine diikuti dengan amobilisasi probe DNA dengan
pengikatan kovalen dengan karbodiimida. Setelah penghilangan DNA nonspesifik
yang teradsorpsi, hibridisasi dilakukan dalam larutan bufer foafat 0,05M, pH 7,6,
selama 30 menit pada temperatur ruang. Pada saat DNA nonhibridisasi dihilangkan,
perak dikumpulkan secara elektrostatik pada hibrid dan setelah presipitasi dalam
30 1