02.12.2012 Views

DETEKSI HIBRIDISASI DALAM BIOSENSOR DNA ELEKTROKIMIA

DETEKSI HIBRIDISASI DALAM BIOSENSOR DNA ELEKTROKIMIA

DETEKSI HIBRIDISASI DALAM BIOSENSOR DNA ELEKTROKIMIA

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

RNA dalam ekstrak E. coli. Gold microelectrode array terdiri dari empat pasang<br />

elektrode interdigitasi plus dua elektrode pembantu. Tahap-tahap preparasi biosensor<br />

tersebut: a) Amobilisasi probe terbiotinilasi; b) Hibridisasi dengan target; c)<br />

Hibridisasi bertingkat dengan oligonukleotida berlabel digoksigenin; d) Inkubasi<br />

dengan suatu konjugat antidigoksigenin-alkaline fosfatase; e) Penambahan p-<br />

aminofenol fosfat; f) Deteksi amperometri untuk menurunkan p-aminofenol setelah<br />

pentransferan pada chip.<br />

Pengukuran dilakukan dengan set potensial dari satu jari pada 250 mV<br />

sementara yang lainnya -50 mV. Dalam hal ini suatu resiklus terjadi antara p-<br />

aminofenol dan quinoneimine (produk reduksinya) mengamplifikasi respons<br />

amperometri. Perbedaan antara respons anodik dan katodik adalah penggunaannya<br />

sebagai signal. Dengan pengujian ini adalah memungkinkan untuk mendeteksi 10 11 –<br />

10 10 molekul target<br />

Suatu biosensing listrik ultrasensitif <strong>DNA</strong> diajukan dengan menggunakan<br />

CNT untuk pengenalan dan untuk terjadinya transduksi (Wang et al. 2004). Alkaline<br />

fosfatase diamobilisasi pada CNT menggunakan linker karbodiimida. Hampir 10 4 kali<br />

peningkatan sensitivitas diperoleh dalam keberadaan CNT yang dimodifikasi dengan<br />

alkaline fosfatase. Bagaimanapun, jika menggunakan GC dimodifikasi dengan<br />

nanotube karbon sebagai transduser, amplifikasi kedua diperoleh (30 kali lipat),<br />

dalam kaitannya dengan penambahan akumulasi produk enzimatis α-naftol dengan<br />

keberadaan CNT. Limit deteksi yang rendah diperoleh selama akumulasi 20 menit,<br />

sekitar 1 fg/mL, atau 54 aM, atau 820 copy, atau 1.3 zmol dalam 25 µL sampel.<br />

36 1

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!