DETEKSI HIBRIDISASI DALAM BIOSENSOR DNA ELEKTROKIMIA

dari lupus erythematosus sistemik dan bronchial asthma. SPE di-treatment secara
elektrokimia dan kemudian dilapisi dengan larutan stok DNA dan peroksidase atau
kolinsterase yang mengandung 0,01% gelatin, diikuti dengan penambahan 5 µL
glutaraldehid, dan tahap pengeringan selama 15 menit pada temperatur ruang. Signal
analitik merupakan arus yang diukur pada 680 mV atau -150 mV setelah penambahan
S-asetiltiokolin atau hidroquinon, berturut-turut. Pada saat menguji sampel
sebenarnya, 20 µL serum darah disebarkan pada daerah kerja, setelah inkubasi,
pengukuran amperometri dilakukan, dan diperoleh penurunan signal menunjukkan
pembentukkan tambahan antibodi DNA yang menurunkan aksesibilitas enzim dalam
reaksi enzimatis dengan substrat.
Suatu protokol inovatif berdasarkan perubahan konformasi oligonukleotida
probe telah diajukan akhir-akhir ini (Fan et al. 2003). Probe terdiri dari struktur DNA
stem-loop dengan penanda elektroaktif ferrosin (28-mer), diamobilisasi secara self-
assembling melalui residu tiol pada permukaan emas polikristalin. Satuan stem loop
didisain memiliki lima basa komplementer pada ujung 5’ dan 3’ (empat dari mereka
adalah pasangan G-C) sehingga stem-loop dengan kedua ujungnya sangat dekat pada
permukaan emas dan menjaga ferrosin pada ujung 5’ dekat dengan permukaan emas.
Perubahan besar konformasi dihasilkan setelah hibridisasi karena meningkatnya jarak
antara ferrosin dan elektrode, menurunkan signal voltametri dari residu ferrosin (pada
0,492 V. Limit deteksinya adalah 10pM setelah inkubasi 30 menit.
Cara lain deteksi listrik hibridisasi DNA adalah berdasarkan penggunaan
runutan batang mikro indium yang diperoleh secara elektrodeposisi logam ke dalam
38 1