Rapporto annuale 2004 - Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario ...
Rapporto annuale 2004 - Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario ...
Rapporto annuale 2004 - Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario ...
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
PREFAZIONE<br />
RAPPORTI ATTIVITA’<br />
IRFMN<br />
ISTITUTO MARIO NEGRI, MILANO www.marionegri.it<br />
DIPARTIMENTI<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Oncologia ………………….………………………….……………………… 7<br />
Dipartimento Ambiente e Salute ……….………….………………………….……………… 33<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Neuroscienze ………………….………………………….………………… 47<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Ricerca Car<strong>di</strong>ovascolare ………………….…………………….………… 89<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Immunologia e Biologia Cellulare ……….…………….………………… 111<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Biochimica e Farmacologia Molecolare ……….…………….………… 129<br />
LABORATORI e CENTRI<br />
Laboratorio Politiche Regolatorie del Farmaco ……….…………….………….……… 147<br />
Laboratorio per la Salute Materno Infantile ……….…………….……………………… 153<br />
Laboratorio Epidemiologia Generale ……….…………….………………………….……… 165<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Informatica Me<strong>di</strong>ca ……….……………………………………..….………… 183<br />
Centro Cochrane Italiano ……….……………………………………………………………… 189<br />
Centro Catullo e Daniela Borgomainerio………………………………………………. 195<br />
Biblioteca ……….…………………………………………………………….………….………… 197<br />
LABORATORI NEGRI BERGAMO<br />
DIPARTIMENTI<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Molecolare ……….…………………………………….………… 203<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Bioingegneria ……….…………………………….………………………… 219<br />
CENTRO ALDO e CELE DACCO’<br />
DIPARTIMENTI<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Renale ……….…………………………………………………… 231<br />
LABORATORI e CENTRI<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Epidemiologia Clinica ……….……………………………………………… 261<br />
Coor<strong>di</strong>namento, Informazione e Diagnosi della Malattie Rare ……….…….………… 267<br />
Centro <strong>di</strong> Economia Sanitaria A. e A. Valenti, CESAV ……….………………………… 277<br />
Centro <strong>Ricerche</strong> Trapianti C. Cucchi De Alessandri e G. Crespi ……………….….. 285<br />
L’ ATTIVITA’ DIDATTICA 287<br />
ORGANIGRAMMA 289<br />
L’elenco completo del personale è consultabile sul sito Internet dell’<strong>Istituto</strong> www.marionegri.it<br />
1<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
a cura <strong>di</strong> Isabella Bordogna<br />
in collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Informatica Me<strong>di</strong>ca<br />
finito <strong>di</strong> stampare nel marzo 2005<br />
IRFMN<br />
2<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
PREFAZIONE<br />
IRFMN<br />
Questo volume rappresenta un tentativo <strong>di</strong> riassumere le attività <strong>di</strong> ricerca e <strong>di</strong> formazione<br />
svolte dall’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri <strong>di</strong> Milano e Bergamo. L’attività viene presentata su base<br />
<strong>di</strong>partimentale e in qualche caso anche da singoli laboratori.<br />
Mentre si rimanda al testo per i dettagli dei risultati scientifici ottenuti è pertinente fare alcune<br />
osservazioni <strong>di</strong> carattere generale.<br />
Rispetto agli anni passati si accentuano programmi <strong>di</strong> ricerca che implicano una collaborazione<br />
tra vari laboratori all’interno dei singoli <strong>di</strong>partimenti e in qualche caso fra <strong>di</strong>partimenti. I temi <strong>di</strong><br />
ricerca si sono ridotti <strong>di</strong> numero e si osserva una tendenza a focalizzare la sperimentazione per<br />
ottenere “masse critiche” <strong>di</strong> uomini e risorse su uno stesso tema.<br />
Predomina, in armonia con le tendenze o<strong>di</strong>erne, un orientamento dettato dalle metodologie<br />
della biologia molecolare soprattutto per quanto riguarda lo stu<strong>di</strong>o del meccanismo<br />
d’azione dei farmaci.<br />
L’impiego degli stu<strong>di</strong> con colture in vitro è fondamentale per approfon<strong>di</strong>re l’indagine, tuttavia è<br />
ancora presente un numero significativo <strong>di</strong> ricerche in vivo, l’unico modo - ancora oggi - per<br />
poter validare le ricerche in vitro e per poter realizzare modelli sempre più vicini alle malattie<br />
umane. In questo senso è aumentato considerevolmente l’impiego <strong>di</strong> animali transgenici.<br />
I temi fondamentali <strong>di</strong> ricerca sono quelli tra<strong>di</strong>zionali dell’<strong>Istituto</strong>: oncologia, neuroscienze,<br />
car<strong>di</strong>ovascolare, malattie renali, trapianti d’organo con forti componenti <strong>di</strong> immunologia, biologia<br />
cellulare, biochimica molecolare. Di significato anche gli stu<strong>di</strong> che riguardano ambiente e salute.<br />
Si è accentuato lo stu<strong>di</strong>o delle malattie rare e dei farmaci orfani sia a livello sperimentale che<br />
clinico ed epidemiologico.<br />
In tutta la ricerca del “<strong>Mario</strong> Negri” l’ipotesi è quella <strong>di</strong> sviluppare intorno a ognuno dei gran<strong>di</strong><br />
temi citati una complessità <strong>di</strong> approcci che vada dalla ricerca <strong>di</strong> base, agli stu<strong>di</strong> clinici controllati,<br />
all’analisi epidemiologica e, quando possibile, alla epidemiologia dei servizi.<br />
Il numero delle pubblicazioni scientifiche su riviste internazionali è arrivato a 10.000.<br />
L’attività <strong>di</strong> ricerca necessita, come componente fondamentale, della formazione <strong>di</strong> giovani<br />
ricercatori che trovano nel lavoro <strong>di</strong> laboratorio, non solo la possibilità <strong>di</strong> esprimere le loro idee,<br />
ma anche l’opportunità <strong>di</strong> ottenere un <strong>di</strong>ploma attraverso la scuola <strong>di</strong> qualificazione<br />
professionale riconosciuta dalla Regione Lombar<strong>di</strong>a o il titolo <strong>di</strong> Ph.D. in collaborazione con la<br />
Open University <strong>di</strong> Londra. Di particolare interesse sono altri tipi <strong>di</strong> formazione in<strong>di</strong>rizzati alla<br />
statistica biome<strong>di</strong>ca, ai me<strong>di</strong>ci <strong>di</strong> me<strong>di</strong>cina generale, ai pe<strong>di</strong>atri <strong>di</strong> famiglia e agli infermieri per la<br />
ricerca clinica.<br />
Infine fa parte integrante delle attività del “<strong>Mario</strong> Negri” un interesse per l’informazione a tutti i<br />
livelli, formalizzato nel Centro <strong>di</strong> Informazione per le Malattie Rare e nel Centro <strong>di</strong> Informazione<br />
sui Farmaci.<br />
In tempi così <strong>di</strong>fficili per la ricerca italiana la gratitu<strong>di</strong>ne dell’<strong>Istituto</strong> va a tutti gli enti pubblici e<br />
privati, nonché a Fondazioni e a privati citta<strong>di</strong>ni che hanno reso possibile, con i loro contributi,<br />
piccoli e gran<strong>di</strong>, la realizzazione delle attività riportate in questo volume. Grazie a tutti.<br />
Silvio Garattini<br />
3<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
4<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> <strong>Farmacologiche</strong><br />
“<strong>Mario</strong> Negri” Milano<br />
RAPPORTI<br />
ATTIVITA’ <strong>2004</strong><br />
<strong>di</strong>partimenti e laboratori<br />
5<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
6<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
DIPARTIMENTO DI ONCOLOGIA<br />
PERSONALE<br />
Capo Dipartimento Maurizio D’INCALCI, Dr.Med.Chir.<br />
Ufficio Stu<strong>di</strong> Oncologici e Documentazione<br />
Documentalista Scientifico Stefania FILIPPESCHI, Per.Chim.<br />
Consulente Maria Grazia DONELLI, Dr.Sci.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Antitumorale<br />
Capo Laboratorio Maurizio D’INCALCI, Dr.Med.Chir.<br />
Unità <strong>di</strong> Biofisica<br />
Capo Unità Paolo UBEZIO, Dr.Fis.<br />
Unità <strong>di</strong> Citometria<br />
Capo Unità Eugenio ERBA, Per.Chim.<br />
Unità <strong>di</strong> Farmacologia Clinica Antitumorale<br />
Capo Unità Massimo ZUCCHETTI, Dr.CTF<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Molecolare<br />
Capo Laboratorio Massimo BROGGINI, Ph.D.<br />
Unità <strong>di</strong> Riparazione del DNA<br />
Capo Unità Giovanna DAMIA, Dr. Med. Chir.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia e Terapia delle Metastasi Tumorali<br />
Capo Laboratorio Raffaella GIAVAZZI, Dr.Sci.Biol.<br />
Unità <strong>di</strong> Angiogenesi Tumorale<br />
Capo Unità Giulia TARABOLETTI, Dr.Sci.Biol.<br />
Unità <strong>di</strong> Terapia Antitumorale Molecolare<br />
Capo Unità Maria Rosa BANI, Dr.Sci.Biol.<br />
IRFMN<br />
7<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca Clinica Oncologica<br />
Capo Laboratorio Valter TORRI, Dr.Med.Chir.<br />
Unità <strong>di</strong> Biometria e Data Management<br />
Capo Unità Irene FLORIANI, Dr.Sci.Biol.<br />
Unità <strong>di</strong> Clinical Trials<br />
Capo Unità Roldano FOSSATI, Dr.Med.Chir.<br />
Laboratorio per la Ricerca Traslazionale e <strong>di</strong> Outcome in Oncologia<br />
Capo Laboratorio Giovanni APOLONE, Dr.Med.Chir.<br />
Unità <strong>di</strong> Informatica per la Ricerca Clinica<br />
Capo Unità Luca CLIVIO, Dr.Ing.<br />
Unità <strong>di</strong> Outcome Research<br />
Capo Unità Paola MOSCONI, Dr.Sci.Biol.<br />
IRFMN<br />
8<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
Il Dipartimento <strong>di</strong> Oncologia è formato da tre laboratori sperimentali preclinici (Laboratorio <strong>di</strong><br />
Farmacologia Antitumorale, Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Molecolare e Laboratorio <strong>di</strong> Biologia<br />
e Terapia delle Metastasi) e da due laboratori in<strong>di</strong>rizzati a stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> tipo clinico (Laboratorio <strong>di</strong><br />
Ricerca Clinica Oncologica, Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca Translazionale e <strong>di</strong> Outcome in Oncologia).<br />
In alcuni casi i progetti <strong>di</strong> ricerca sono stati attuati unicamente da singoli laboratori o unità <strong>di</strong><br />
ricerca, in altri casi sono attuati attraverso la collaborazione tra <strong>di</strong>versi laboratori dello stesso<br />
<strong>di</strong>partimento, <strong>di</strong> altri <strong>di</strong>partimenti o <strong>di</strong> gruppi esterni all’<strong>Istituto</strong> (ve<strong>di</strong> collaborazioni nazionali e<br />
internazionali).<br />
Le aree <strong>di</strong> ricerca dei laboratori preclinici riguardano la scoperta, lo stu<strong>di</strong>o e lo sviluppo <strong>di</strong><br />
nuovi farmaci antitumorali e antimetastatici e nuove combinazioni, lo stu<strong>di</strong>o della biologia dei<br />
tumori in<strong>di</strong>rizzati non soltanto ad acquisire nuove conoscenze scientifiche, ma soprattutto come<br />
base per approcci terapeutici più selettivi e per identificare e validare modelli sperimentali adatti<br />
per scoprire e stu<strong>di</strong>are farmaci o modalità terapeutiche innovative.<br />
Lo sviluppo clinico dei nuovi farmaci, conta sia sulla forte collaborazione alle attività del<br />
SENDO (South Europe New Drugs Organization) sia sugli stu<strong>di</strong> condotti dal Laboratorio <strong>di</strong><br />
Farmacologia Antitumorale e dal Laboratorio per la Ricerca Translazionale e <strong>di</strong> Outcome in<br />
Oncologia, ed è finalizzato alla valutazione degli effetti delle nuove terapie attraverso stu<strong>di</strong> <strong>di</strong><br />
fase I/II e <strong>di</strong> fase III comparativa e in stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> efficacia che sono condotti prevalentemente dal<br />
Laboratorio per la Ricerca Clinica Oncologica. A livello della Ricerca degli Outcome (Outcome<br />
Research), poiché questa implica l’attivazione <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> per conoscere i risultati finali <strong>di</strong><br />
particolari pratiche sanitarie e <strong>di</strong> interventi nella pratica clinica, parecchi stu<strong>di</strong> osservazionali e<br />
<strong>di</strong> esito sono stati condotti in collaborazione con Istituzioni sanitarie regionali e nazionali<br />
nonché con Società Scientifiche.<br />
A livello preclinico e clinico sono stati condotti stu<strong>di</strong> su <strong>di</strong>fferenti neoplasie umane, tuttavia la<br />
maggior parte delle attività è stata riservata agli stu<strong>di</strong> sui tumori ovarici.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Il depsipeptide <strong>di</strong> origine marina Apli<strong>di</strong>na è un potente antileucemico, attivo anche in cellule<br />
leucemiche resistenti ad altri farmaci antitumorali. Questo farmaco blocca la secrezione <strong>di</strong><br />
VEGF interferendo con il loop autocrino VEGF-recettore per VEGF.<br />
Apli<strong>di</strong>na possiede attività antiangiogenica.<br />
ET-743 a concentrazioni farmacologicamente ragionevoli (nanomolari) altera i meccanismi <strong>di</strong><br />
regolazione della trascrizione <strong>di</strong> geni inducibili. Inoltre cellule deficienti nel “Nucleotide<br />
Excision Repair” sono meno suscettibili a ET-743 mentre sono ipersuscettibili ai raggi UV e ad<br />
altri farmaci antitumorali che danneggiano il DNA.<br />
La citotossicità <strong>di</strong> ET-743 viene potenziata dal trattamento con inibitori della DNA-PK o della<br />
ATM.<br />
La Variolina e alcuni suoi derivati hanno mostrato una rapida induzione <strong>di</strong> apoptosi in <strong>di</strong>verse<br />
linee cellulari tumorali poco suscettibili ad altri farmaci antitumorali.<br />
Me<strong>di</strong>ante analisi <strong>di</strong> espressione genica, è possibile identificare le pazienti con tumore ovarico in<br />
sta<strong>di</strong>o precoce che presentano rischio maggiore <strong>di</strong> reci<strong>di</strong>va della malattia.<br />
9<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
La presenza <strong>di</strong> una forma troncata <strong>di</strong> p73, DN, trovata in tumori umani, non mo<strong>di</strong>fica la risposta<br />
delle cellule tumorali al trattamento chemioterapico.<br />
La proteina CHK1, ma non CHK2, è fondamentale nel controllo del ciclo cellulare nella fase G2<br />
in seguito a danno indotto al DNA.<br />
Cellule <strong>di</strong> carcinoma della prostata, possono essere sensibilizzate all’azione del farmaco<br />
antitumorale brostallicina, me<strong>di</strong>ante l’utilizzo <strong>di</strong> combinazioni con agenti ipometilanti.<br />
Sono stati ottenuti topi KO per il gene DRAGO che sono vitali e fertili e non presentano<br />
macroscopiche alterazioni. Saranno un utilissimo mezzo per lo stu<strong>di</strong>o della funzione <strong>di</strong> questo<br />
nuovo gene.<br />
E’ stata identificata la regione della trombospon<strong>di</strong>na-1 (un inibitore fisiologico dell'angiogenesi)<br />
che contiene il sito <strong>di</strong> legame per il fattore angiogenico FGF-2.<br />
MMP9 induce il rilascio <strong>di</strong> VEGF dalle cellule <strong>di</strong> tumore ovarico stimolando la formazione <strong>di</strong><br />
ascite.<br />
Sono stati identificati i geni <strong>di</strong>fferentemente espressi sulle cellule endoteliali isolate dai tumori<br />
rispetto alle cellule endoteliali <strong>di</strong> tessuti sani.<br />
Sono stati identificati i geni nel tumore associati alla sensibilità al paclitaxel<br />
17-(<strong>di</strong>methyl amino ethyl amino)-17-methoxygeldanamycin (NSC707545, 17-DMAG), un<br />
composto in grado <strong>di</strong> modulare l’attività <strong>di</strong> Hsp90, possiede attività antiangiogenica.<br />
Terapie <strong>di</strong> combinazione tra agenti antivascolari e farmaci chemioterapici: potenziale<br />
interferenza tra ZD6126 e paclitaxel, due agenti che legano la tubulina.<br />
L'angiogenesi tumorale, regolata dall'espressione <strong>di</strong> VEGF e FGF-2, influenza la risposta dei<br />
tumori alla chemioterapia.<br />
Inibitori dei recettori tirosin cinasici VEGFR, PDGFR, e FGFR, in combinazione con paclitaxel<br />
hanno attività sinergica sull’endotelio vascolare.<br />
Stu<strong>di</strong>o ICON4: lo stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong>mostra un miglioramento della sopravvivenza nel carcinoma<br />
dell'ovaio in sta<strong>di</strong>o avanzato con l'utilizzo <strong>di</strong> terapia <strong>di</strong> seconda linea a base <strong>di</strong> platino derivati e<br />
taxolo.<br />
La risposta al trattamento chemioterapico è un buon in<strong>di</strong>catore surrogato della sopravvivenza in<br />
pazienti con carcinoma della cervice localmente avanzato.<br />
La chemioterapia a<strong>di</strong>uvante con lo schema <strong>di</strong> Vindesina, Mitomicina C e Cisplatino (MVP) nel<br />
carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) non ha prodotto un miglioramento della<br />
sopravvivenza rispetto alla sola chirurgia.<br />
10<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
CNR IGBE, Pavia<br />
CNR, <strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Chimica del Riconoscimento Molecolare, Milano<br />
EUROPA DONNA, Milano<br />
Fondazione Nerina e <strong>Mario</strong> Mattioli Onlus, Milano<br />
Fondazione Salvatore Maugeri, Pavia<br />
Fondo Edo Tempia, Laboratorio <strong>di</strong> Farmacogenomica, Biella<br />
I.A.S.I., Roma<br />
Istituti Ortope<strong>di</strong>ci Rizzoli, Bologna<br />
<strong>Istituto</strong> dei Tumori <strong>di</strong> Milano<br />
<strong>Istituto</strong> Europeo <strong>di</strong> Oncologia (IEO), Milano<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Fisica, Politecnico <strong>di</strong> Milano<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Genetica Molecolare CNR, Sezione <strong>di</strong> Istochimica e Citometria, Pavia<br />
<strong>Istituto</strong> Nazionale per la Ricerca sul Cancro (IST), Genova<br />
<strong>Istituto</strong> Regina Elena, Roma<br />
Laboratorio Cell factory, Policlinico <strong>di</strong> Milano<br />
Ospedale San Gerardo, Monza, Milano<br />
Ospedale San Matteo, Pavia<br />
Unità <strong>di</strong> Tossicologia e Scienze Biome<strong>di</strong>che, ENEA Centro <strong>Ricerche</strong>, Roma<br />
Università Cattolica del Sacro Cuore, Roma<br />
Università <strong>di</strong> Bari<br />
Università <strong>di</strong> Brescia<br />
Università <strong>di</strong> L’Aquila<br />
Università <strong>di</strong> Milano<br />
Università <strong>di</strong> Modena e Reggio Emilia<br />
Università <strong>di</strong> Monza<br />
Università <strong>di</strong> Catania<br />
Università <strong>di</strong> Siena<br />
Università “La Sapienza”, Roma<br />
IRFMN<br />
11<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
Cancer Research UK, Londra, Gran Bretagna<br />
Cancerdegradome Consortium, IP 6th FP, EC<br />
EORTC, Bruxelles, Belgio<br />
EUROPA DONNA, European Coalition, Milano, Italia<br />
European Agency for the Evaluation of Me<strong>di</strong>cinal Products (EMEA), Londra, UK<br />
European Regulatory Issues on Quality of life Assessment (ERIQA), Parigi, Francia<br />
Genome Institute of Singapore (GIS), Singapore<br />
<strong>Istituto</strong> Oncologico della Svizzera Italiana, Bellinzona, Svizzera<br />
Johns Hopkins University, USA<br />
Massachusetts General Hospital and Harvard Me<strong>di</strong>cal School<br />
MD Anderson Cancer Center, Houston, Texas<br />
Metastasis Research Lab, University of Liegi, Belgio<br />
MRC, Leicester, Gran Bretagna<br />
MRC, Londra, Gran Bretagna<br />
National Cancer Institute (NCI), Bethesda and Frederick, MD, USA<br />
Ospedale San Giovanni, Bellinzona, Svizzera<br />
Southern Europe New Drug Organization (SENDO), Milano, Italia<br />
Stroma Consortium, IP 6th FP, EC<br />
Swiss Federal Institute of Technology, Zurigo, Svizzera<br />
Tumor Biology and Metastasis Institute of Cancer Research, Sutton, Gran Bretagna<br />
University of Cincinnati, USA<br />
University of Newcastle, Gran Bretagna<br />
University of Pau, Francia<br />
University of Wisconsin, Ma<strong>di</strong>son, WI, USA<br />
Kyoto University, Giappone<br />
Weizmann Institute of Science, Israele<br />
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Annals of Oncology (Maurizio D’Incalci)<br />
Anti-cancer Drug Design (Maurizio D’Incalci)<br />
Attualità in Senologia (Paola Mosconi)<br />
British Journal of Cancer (Maurizio D’Incalci)<br />
Cancer Chemotherapy and Pharmacology (Maurizio D’Incalci)<br />
Chemotherapy (Maurizio D’Incalci)<br />
Clinical Experimental Metastasis (Raffaella Giavazzi)<br />
Current Opinion in Oncologic, Endocrine and Metabolic Drugs (Maurizio D’Incalci)<br />
European Journal of Cancer (Maurizio D’Incalci, Raffaella Giavazzi)<br />
Health and Quality of Life Outcomes (Giovanni Apolone, Paola Mosconi)<br />
International Journal of Biological Markers (Raffaella Giavazzi)<br />
International Journal for Quality in Health Care (Giovanni Apolone)<br />
Journal of Ambulatory Care and Management (Giovanni Apolone)<br />
Journal of B.U.ON. (Maurizio D’Incalci)<br />
Journal of Experimental Therapeutics and Oncology (Raffaella Giavazzi)<br />
Journal of Me<strong>di</strong>cine and the Person (Giovanni Apolone)<br />
Journal of Preventive Me<strong>di</strong>cine anf Hygiene (Giovanni Apolone)<br />
IRFMN<br />
12<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Molecular Cancer Therapeutics (Maurizio D’Incalci)<br />
Oncology Research (Maurizio D’Incalci)<br />
Tumori (Maurizio D’Incalci)<br />
www.senology.it (Paola Mosconi)<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
IRFMN<br />
American Journal of Pathology, Annals of Oncology, Anticancer Drug Design, Anti-cancer<br />
Drugs, Biochemical Pharmacology, British Journal of Cancer, British Journal of Pharmacology,<br />
British Me<strong>di</strong>cal Journal, Cancer Chemotherapy and Pharmacology, Cancer Detection and<br />
Prevention, Cancer Letters, Cancer Research, Carcinogenesis, Chemico-Biological Interactions,<br />
Clinical & Experimental Metastasis, Clinical Cancer Research, Cytometry, European Journal of<br />
Cancer, European Journal of Immunology, Gynecologic Oncology, Health and Quality of Life<br />
Outcomes, Intensive Care Me<strong>di</strong>cine, International Journal of Biological Markers, International<br />
Journal of Cancer, International Journal for Quality in Health Care, Journal of Ambulatory Care<br />
and Management, Journal of Biological Chemistry, Journal of Biological Markers, Journal of<br />
Cell Biochemistry, Journal of Clinical Oncology, Journal of Experimental Therapeutics and<br />
Oncology, Journal of Me<strong>di</strong>cine and the Person, Journal of Preventive Me<strong>di</strong>cine and Hygiene,<br />
Journal of the National Cancer Institute, Leukemia, Molecular Cancer Therapeutics, Nature<br />
Reviews, PharmacoEconomics, Quality of Life Research, Science, Tumori<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
Comitato Etico Centro <strong>di</strong> Riferimento Oncologico, Aviano (PN)<br />
Comitato Etico Ente Ospedaliero San Paolo, Milano<br />
Comitato Etico <strong>Istituto</strong> Europeo <strong>di</strong> Oncologia, Milano<br />
Comitato Etico <strong>Istituto</strong> Neurologico Carlo Besta, Milano<br />
Comitato Etico <strong>Istituto</strong> Scientifico Eugenio Medea, Bosisio Parini, Lecco<br />
Comitato Etico Ospedale San Gerardo, Monza, Milano<br />
Comitato Etico Ospedale Sant’Anna, Como<br />
Comitato Scientifico, Associazione Italiana Ematologia e Oncologia Pe<strong>di</strong>atrica, Monza, Milano<br />
Comitato <strong>di</strong> selezione del AACR-Pezcoller International Award for Cancer Research<br />
Consiglio Direttivo, Associazione Italiana <strong>di</strong> Colture Cellulari (AICC)<br />
Consiglio Direttivo, Associazione Italiana per le Scienze degli Animali da Laboratorio (AISAL)<br />
Consiglio Direttivo, Metastasis Research Society (MRS)<br />
Consiglio Direttivo, Società Italiana <strong>di</strong> Cancerologia (SIC)<br />
Consiglio Direttivo, Società Italiana <strong>di</strong> Citometria (GIC)<br />
Developmental Therapeutics Program, National Cancer Institute (NCI)<br />
Decision Network and Executive Committee, South Europe New Drug Organization (SENDO)<br />
Direttivo Metastasis Research Society (MRS)<br />
Direttivo Società Italiana <strong>di</strong> Cancerologia (SIC)<br />
Executive Board, EUROPA DONNA<br />
EORTC Board<br />
National Cancer Institute (NCI) (scoperta e sviluppo nuovi farmaci)<br />
NHS R&D National Coor<strong>di</strong>nating Centre for Health Technology Assessment, Gran Bretagna<br />
Quinquennial Review Committee, Cancer Research UK, Gran Bretagna<br />
Scientific Committee, Swiss Cancer League, Svizzera<br />
University Me<strong>di</strong>cal School of Siena<br />
13<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
IRFMN<br />
Conferenza: XXI Conferenza Nazionale <strong>di</strong> Citometria, 29 Settembre-2 Ottobre <strong>2004</strong>, Urbino.<br />
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
DIPARTIMENTO<br />
Meeting: 1st ISC International Conference on Cancer Therapeutics Molecular Targets,<br />
Pharmacology and Clinical Applications. “Marine compounds: ET-743 and beyond”, 19-21<br />
Febbraio, <strong>2004</strong>, Firenze.<br />
Workshop: 2nd p73/p63 International Workshop. “Clones derived from human cancer cells<br />
expressing inducible DNp73: in vitro and in vivo growth and response to anticancer drug<br />
treatment”, 25-27 Marzo, <strong>2004</strong>, Roma.<br />
Meeting: 95th Annual Meeting AACR. ”Combination of angiogenic inhibitors and<br />
chemotherapeutic agents on human endothelium”, 27-31 Marzo, <strong>2004</strong>, Orlando, Florida, USA.<br />
Meeting: 95th Annual Meeting AACR. ”Pharmacological evaluation of Gemcitabine<br />
administered as fixed-dose-rate in combination with cisplatin to patients with non-small-cell<br />
lung cancer”, 27-31 Marzo, <strong>2004</strong>, Orlando, Florida, USA.<br />
Meeting: 95th Annual Meeting AACR. ”Effect of cytotoxic antineoplastic drugs on endothelial<br />
cell response in vitro to the vascular-targeting agent ZD6126”, 27-31 Marzo, <strong>2004</strong>, Orlando,<br />
Florida, USA.<br />
Conferenza: European School of Haematology Fourth Inter<strong>di</strong>sciplinary Euroconference on<br />
Angiogenesis “Expression profiling <strong>di</strong>versity in normal and tumor endothelium revealed by<br />
microarray analysis”, 21-24 Maggio, <strong>2004</strong>, Helsinki, Finlan<strong>di</strong>a.<br />
Symposium: 1st Italian RNA interference Symposium. “Inhibition of cell cycle checkpoint<br />
proteins CHK1 and CHK2 by siRNAs: effects on cellular response to DNA damaging agents”, 8<br />
giugno, <strong>2004</strong>, Milano.<br />
Conference: Cell Cycle, Senescence, Apoptosis and Cancer Conference. “Chk1 but not Chk2, is<br />
involved in the cellular response to DNA damaging agents: effects in isogenic systems with<br />
<strong>di</strong>fferent p53 expression”, 20-23 giugno, <strong>2004</strong>, Glasgow, Scozia.<br />
Meeting: 18th Meeting of the European Association for Cancer Research. “Angiogenic activity<br />
in tumor shed membrane vesicles”, 3-6 Luglio, <strong>2004</strong>, Innsbruck, Austria.<br />
Congresso: 10th International Congress of the Metastasis Research Society. “Role of MMP9 in<br />
promoting VEGF release by ovarian carcinoma cells: implication for ascites formation”, 17-20<br />
Settembre, <strong>2004</strong>, Genova.<br />
Congresso: 10th International Congress of the Metastasis Research Society. “Anti-vascular<br />
tumor therapy: endothelial cell response to cytotoxic anti-neoplastic drugs and the vasculartargeting<br />
agent ZD6126”, 17-20 Settembre,, <strong>2004</strong>, Genova.<br />
14<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Symposium: 16th EORTC-NCI-AACR Symposium, “Effect of chemotherapy on human tumor<br />
xenografts <strong>di</strong>fferently expressing vascular endothelial growth factor (VEGF) and fibroblast<br />
growth factor-2 (FGF-2)”, 28 Settembre-1 Ottobre, <strong>2004</strong>, Ginevra, Svizzera.<br />
Symposium: 16th EORTC-NCI-AACR Symposium, “Bioavailability and pharmacokinetic<br />
study of the novel oral C-Seco taxane derivative IDN 5390 in mice”, 28 Settembre-1 Ottobre,<br />
<strong>2004</strong>, Ginevra, Svizzera.<br />
Symposium: 16th EORTC-NCI-AACR Symposium, “Antitumour activity of the novel 7substituted<br />
camptothecin ST1481 (Gimatecan) in human neuroblastoma”, 28 Settembre-1<br />
Ottobre, <strong>2004</strong>, Ginevra, Svizzera.<br />
Symposium: 16th EORTC-NCI-AACR Symposium, “In vitro evidences on the role of the<br />
halogenoacrylic moiety in modulating brostallicin mechanism of action”, 28 Settembre-1<br />
Ottobre, <strong>2004</strong>, Ginevra, Svizzera.<br />
Symposium: 16th EORTC-NCI-AACR Symposium, “Antitumor activity of brostallicin on<br />
human prostatic cancer cells: fundamental role of combination with hypomethylating agents”,<br />
28 Settembre-1 Ottobre, <strong>2004</strong>, Ginevra, Svizzera.<br />
Symposium: 16th EORTC-NCI-AACR Symposium, “The combination of ET-743 and<br />
Irinotecan is active in preclinical models in rhabdomyosarcoma”, 28 Settembre-1 Ottobre, <strong>2004</strong>,<br />
Ginevra, Svizzera.<br />
Conferenza: XXI Conferenza Nazionale <strong>di</strong> Citometria. “Citochimica del DNA. Fluorocromi e<br />
meto<strong>di</strong> <strong>di</strong> colorazione”. 29 Settembre-2 Ottobre <strong>2004</strong>, Urbino.<br />
Conferenza: XXI Conferenza Nazionale <strong>di</strong> Citometria. “Preparazione delle sospensioni<br />
cellulari”. 29 Settembre-2 Ottobre <strong>2004</strong>, Urbino.<br />
Conferenza: XXI Conferenza Nazionale <strong>di</strong> Citometria. “Analisi dei campioni <strong>di</strong> cellule al<br />
citometro e valutazione dei risultati ottenuti”. 29 Settembre-2 Ottobre <strong>2004</strong>, Urbino.<br />
Conferenza: XXI Conferenza Nazionale <strong>di</strong> Citometria. “Marcatori specifici <strong>di</strong> proliferazione<br />
cellulare”. 29 Settembre-2 Ottobre <strong>2004</strong>, Urbino.<br />
Conferenza: XXI Conferenza Nazionale <strong>di</strong> Citometria. “Analisi del ciclo celllulare: modelli<br />
matematici”. 29 Settembre-2 Ottobre <strong>2004</strong>, Urbino.<br />
Congresso: Congresso Nazionale MIUR-CNR “Progetti Strategici in Oncologia”. “Checkpoints<br />
e sensori del danno del DNA come determinante dell’effetto dei farmaci antitumorali”, 12-13<br />
Ottobre, <strong>2004</strong>, Roma.<br />
Congresso: XLVI Congresso della Società Italiana <strong>di</strong> Cancerologia. “Induction of tubulin<br />
acetylation is associated with inhibition of cell motility by the taxane IDN5390”, 24-27 Ottobre,<br />
<strong>2004</strong>, Pisa.<br />
Congresso: XLVI Congresso della Società Italiana <strong>di</strong> Cancerologia. “Bio<strong>di</strong>stribution of<br />
paclitaxel in human ovarian carcinoma xenografts with <strong>di</strong>fferent sensitivity to paclitaxel.”, 24-<br />
27 Ottobre, <strong>2004</strong>, Pisa.<br />
15<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Congresso: XLVI Congresso della Società Italiana <strong>di</strong> Cancerologia. “Effect of taxanes on the<br />
vascular-targeting activity of ZD6126”, 24-27 Ottobre, <strong>2004</strong>, Pisa.<br />
Workshop: 12th International p53 Workshop. “Inducible overexpression of ?Np73alpha in<br />
cancer cell expressing a wild-type p53. Effects on growth and response to treatment”. 6-10<br />
Novembre, <strong>2004</strong>, Dune<strong>di</strong>n, Nuova Zelanda.<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
Amgen SpA<br />
AIRC Associazione Italiana per la Ricerca sul Cancro<br />
ASL Padova<br />
ASL Provincia <strong>di</strong> Lo<strong>di</strong><br />
Astra Zeneca SpA<br />
Astra Zeneca UK<br />
Bracco Imaging SpA<br />
Centro Cochrane Italiano<br />
Chiesi Farmaceutici SpA<br />
CNR Consiglio Nazionale delle <strong>Ricerche</strong><br />
CNR-MIUR Ministero Istruzione Università e Ricerca<br />
Compagnia San Paolo<br />
CTI Cell Therapeutics, Inc.<br />
Cyclacel Ltd.<br />
Eli Lilly Italia SpA<br />
Elsevier Science Ltd.<br />
EORTC-European Organization for Research and Treatment of Cancer<br />
European Commission - 6th Framework Programme<br />
FIRB-MIUR Fondo per gli Investimenti della Ricerca <strong>di</strong> Base-Ministero Istruzione Università e<br />
Ricerca<br />
FIRC Fondazione Italiana per la Ricerca sul Cancro<br />
Fondazione Cassa <strong>di</strong> Risparmio delle Province Lombarde<br />
Fondazione Nerina e <strong>Mario</strong> Mattioli Onlus<br />
Fondo Edo Tempia<br />
Grunenthal-Formenti<br />
GlaxoSmithKline<br />
Indena SpA<br />
InnoPept Inc.<br />
Institut de Recherche Pierre Fabre<br />
<strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità<br />
Komen Italia Onlus<br />
Medac<br />
Merck Sharp & Dome<br />
Ministero della Sanità<br />
NCI –SAIC Frederick<br />
Nerviano Me<strong>di</strong>cal Science S.r.l.<br />
Novartis Farma SpA<br />
Optigenex Inc.<br />
Pfizer Global Research and Development<br />
Pharma Mar, SA<br />
16<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Pharma Mar USA, Inc.<br />
Policlinico <strong>di</strong> Padova / C.O.R.<br />
PTC Pharma AG<br />
Regione Veneto<br />
Sara Bet srl<br />
SENDO-Tech Srl<br />
Sigma-tau SpA<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Padova<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
N. Celli, B. Mariani, F. Di Carlo, M. Zucchetti, L. Lopez-Lazaro, M. D’Incalci, D. Rotilio. Determination of Apli<strong>di</strong>n,<br />
a marine-derived anticancer drug, in human plasma, whole blood and urine by liquid chromatography with<br />
electrospray ionisation tandem mass spectrometric detection. Journal of Pharmaceutical and Biome<strong>di</strong>cal Analysis, 34:<br />
619-630 (<strong>2004</strong>).<br />
Tognon G., Frapolli G., Zaffaroni M., Erba E., Zucchetti M., Faircloth G.T., M. D’Incalci, Fetal bovine serum, but<br />
not human serum inhibits the in vitro cytotoxicity of ET-743 (Yondelis TM; trabecte<strong>di</strong>n). An example of potential<br />
problems for extrapolation of active drug concentrations from in vitro stu<strong>di</strong>es. Cancer Chemother Pharmacol., 53(1):<br />
89-90 (<strong>2004</strong>).<br />
Janossy J., Ubezio P., Apati A., Magocsi M., Tompa P., Friedrich P. Calpain as a multi-site regulator of cell cycle.<br />
Biochem. Pharmacol., 67:1513-1521 (<strong>2004</strong>).<br />
Erba E., Cavallaro E., Damia G., Mantovani R., Di Silvio A, Di Francesco A.M., Riccar<strong>di</strong> R., Cuevas C., Faircloth<br />
G.T., D’Incalci M. The unique biological features of the marine product Yondelis TM (ET-743, Trabecte<strong>di</strong>n) are<br />
shared by its analog ET-637, which lacks the C ring. Oncology Research, 14: 579-587 (<strong>2004</strong>).<br />
Lupi M., Matera G., Branduar<strong>di</strong> D., D’Incalci M., Ubezio P., Cytostatic and cytotoxic effects of topotecan decoded<br />
by a novel mathematical simulation approach. Cancer Research, 64: 2825-2832 (<strong>2004</strong>).<br />
Matera G., Lupi M., Ubezio P., Heterogeneous cell response to Topotecan in a CFSE-based proliferation test.<br />
Cytometry, Part A, 62A:118-128 (<strong>2004</strong>).<br />
Donald S., Verschoyle, R.D., Greaves P., Colombo T., Zucchetti M., Falcioni C., Zaffaroni M., D’Incalci M.,<br />
Manson M.M., Jimeno J., Steward W.P., Gescher A.J. Dietary Agent Indole-3-Carbinol Protects Female Rats Against<br />
the Hepatotoxicity of the Antitumor Drug ET-743 (Trabecti<strong>di</strong>n) Without Compromising Efficacy in a Rat Mammary<br />
Carcinoma. Int. J. Cancer, 111, 961-967 (<strong>2004</strong>).<br />
C. Sottani, M Zucchetti, M. Zaffaroni, M. Bettinelli, C. Minoia. Validated procedure for simultaneous trace level<br />
determination of the anti-cancer agent gemcitabine and its metabolite in human urine by high performance liquid<br />
chromatography with tandem mass spectrometry. Rapid Commun Mass Spectrom, 18(10): 1017-1023 (<strong>2004</strong>).<br />
P. Ubezio. Unraveling the complexity of cell cycle effects of anticancer drugs in cell populations. Discrete and<br />
Continuous Dynamical Systems- Series B, 4(1):323-335 (<strong>2004</strong>).<br />
M. D’Incalci, R. Dulbecco. Introduction to the special issue “Gene transcription and cancer, from the Genome Project<br />
to practical achievements in <strong>di</strong>agnosis and therapy”. Eur. J. Cancer, 40(17): 2535-2632 (<strong>2004</strong>).<br />
D’Incalci M., Simone M., Tavecchio M., Damia G., Garbi A., Erba E. New Drugs from the Sea. J. Chemother.,<br />
16(4): 86-89 (<strong>2004</strong>).<br />
Marchini S., D’Incalci M., Broggini M. New molecules and strategies in the field of anticancer agents. Curr. Med.<br />
Chem. -Anti-Cancer Agents, 4:247-262 (<strong>2004</strong>).<br />
Piccolo E., Vignati S., Maffucci T., Innominato P. F., Riley A. M., Potter B. V. L., Pandolfi P.P., Broggini M.,<br />
17<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Iacobelli S., Innocenti P., Falasca M., Inositol Pentakisphosphate Promotes Apoptosis through the PI 3-K/Akt<br />
Pathway. Oncogene, 23: 1754-1765 (<strong>2004</strong>).<br />
Broggini M., Marchini S., Fontana E., Moneta D., Fowst C., Geroni, Brostallicin: a new concept in minor grrove<br />
DNA binders development, Anti-Cancer Drugs, 15:1-6 (<strong>2004</strong>).<br />
IRFMN<br />
Damia G., Broggini M., Cell cycle checkpoint proteins and cellular response to treatment by anticancer agent. Cell<br />
cycle 3:1, 46-50 (<strong>2004</strong>).<br />
L. Carrassa, M. Broggini, E. Erba, G. Damia, Chk1 but not Chk2, is involved in the cellular response to DNA<br />
damaging agents. Differential activity in cells expressing or not p53. Cell cycle, 3(9): 1177-1181 (<strong>2004</strong>).<br />
Damia G., Broggini M. Improving the selectivity of cancer treatments by interfering with cell response pathways.<br />
Eur.J.Cancer, 40:2550-2559 (<strong>2004</strong>).<br />
Beria I., Baral<strong>di</strong> P.G., Cozzi P., Caldarelli M., Geroni C., Marchini S., Mongelli N., Romagnoli R. Cytotoxic alphahalogenoacrylic<br />
derivatives of <strong>di</strong>stamycin A and congeners. J.Med.Chem., 47:2611-2623 (<strong>2004</strong>).<br />
Sani M., Belotti D., Giavazzi R., Panzeri W., Volonterio A, Zanda M. Synthesis and evaluation of stereo-pure alphatrifluoromethyl-malic<br />
hydroxamates as inhibitors of matrix metalloproteinases. Tetrahedron Letters, 45:1611-1615<br />
(<strong>2004</strong>).<br />
Sier C.F., Nicoletti I., Santovito M.L., Frandsen T., Aletti G., Ferrari A., Lissoni A., Giavazzi R., Blasi F., Sidenius<br />
N.: Metabolism of tumour-derived urokinase receptor and receptor fragments in cancer patients and xenografted<br />
mice. Thrombosis and Haemostasis, 91(2): 403-411 (<strong>2004</strong>).<br />
Bani M.R., Nicoletti M.I., Alkharouf N.W., Ghilar<strong>di</strong> C., Petersen D., Erba E., Sausville E.A., Liu E.T., Giavazzi R.:<br />
Gene expression correlating with response to paclitaxel in ovarian carcinoma xenografts. Molecular Cancer<br />
Therapeutics, 3(2): 111-121 (<strong>2004</strong>).<br />
Taraboletti G., Poli M., Dossi R., Manenti L., Borsotti P., Faircloth G.T., Broggini M., D’Incalci M., Ribatti D.,<br />
Giavazzi R.: Antiangiogenic activity of apli<strong>di</strong>ne, a new agent of marine origin. British Journal of Cancer, 90:2418-<br />
2424 (<strong>2004</strong>).<br />
Kaur G., Belotti D., Burger A.M., Fisher-Nielson K., Borsotti P., Riccar<strong>di</strong> E., Thillainathan J., Hollingshead M.,<br />
Sausville E.A., Giavazzi R.: Antiangiogenic properties of 17 – (Dimethylaminoethylamino) – 17 –<br />
Demethoxygeldanamycin: an orally bioavailable heat shock protein 90 modulator. Clinical Cancer Res., 10:4813-<br />
4821 (<strong>2004</strong>).<br />
Vidal C.I., Mintz P.J., Lu K., Ellis L.M., Manenti L., Giavazzi R., Gershenson D.M., Broaddus R., Liu J., Arap W.,<br />
Pasqualini R.: An HSP90-mimic peptide revealed by fingerprinting the pool of antibo<strong>di</strong>es from ovarian cancer<br />
patients. Oncogene, 23:8859-8867 (<strong>2004</strong>).<br />
Taraboletti G., Giavazzi R.: Modelling approaches for angiogenesis. Eur. J. Cancer, 40: 881-889 (<strong>2004</strong>).<br />
Donnini S, Morbidelli L, Taraboletti G, Ziche M. ERK1-2 and p38 MAPK regulate MMP/TIMP balance and function<br />
in response to thrombospon<strong>di</strong>n-1 fragments in the microvascular endothelium. Life Sci, 74: 2975-85 (<strong>2004</strong>).<br />
Bani M.R. & Giavazzi R. Invasion and metastasis. In: Principles of molecular oncology 2nd Ed. E<strong>di</strong>ted by: Bronchud<br />
M.H., Foote MA., Giaccone G., Olopade O & Workman P. Humana Press Inc. Totowa, New Jersey, USA. pp 443-<br />
461 (<strong>2004</strong>).<br />
Fossati R, Confalonieri C, Mosconi P, Pistotti V, Apolone G. Quality of life in randomized trials of cytotoxic or<br />
hormonal treatment of advanced breast cancer. Is there added value? Breast Cancer Res Treat, 87: 233-243 (<strong>2004</strong>).<br />
Buda A, Floriani I, Rossi R, Colombo N, Torri V, Conte P F, Fossati R, Ravaioli A, Mangioni C<br />
Randomised controlled trial comparing single agent paclitaxel vs epidoxorubicin plus paclitaxel in patients with<br />
advanced ovarian cancer in early progression after platinum-based chemotherapy: an Italian Collaborative Study from<br />
the '<strong>Mario</strong> Negri' Institute. Br J Cancer 90: 2112-2117 (<strong>2004</strong>).<br />
Labianca R, Fossati R, Zaniboni A, Torri V, Marsoni S, Nitti D, Boffi L, Scatizzi M, Tar<strong>di</strong>o B, Mastrodonato N,<br />
Banducci S, Consani G, Pancera G, ACOI/GIVIO/GISCAD Investigators<br />
Randomized trial of intraportal and/or systemic adjuvant chemotherapy in patients with colon carcinoma. J Natl<br />
18<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Cancer Inst, 96: 750-758 (<strong>2004</strong>).<br />
IRFMN<br />
Selvaggi G, Novello S, Torri V, Leonardo E, De Giuli P, Borasio P, Mossetti C, Ar<strong>di</strong>ssone F, Lausi P, Scagliotti G V.<br />
Epidermal growth factor receptor everexpression correlates with a poor prognosis in completely resected non-smallcell<br />
lung cancer. Ann Oncol, 15: 28-32 (<strong>2004</strong>).<br />
Johnson F E, Virgo K S, Fossati R. Follow-up for patients with colorectal cancer after curative-intent primary<br />
treatment. J Clin Oncol, 22: 1363-1365 (<strong>2004</strong>).<br />
Paccagnella A, Favaretto A, Oniga F, Barbieri F, Ceresoli G, Torri V, Villa E, Verusio C, Cetto G L, Santo A, De<br />
Pangher V, Artioli F, Cacciani G C, Paro<strong>di</strong> G, Soresi F, Ghi M G, Morabito A, Biason R, Giusto M, Mosconi P,<br />
Chiarion Sileni V, Gruppo <strong>di</strong> Stu<strong>di</strong>o Tumori Polmonari del Veneto. Cisplatin versus carboplatin in combination with<br />
mitomycin and vinblastine in advanced non small cell lung cancer. A multicenter, randomized phase III trial. Lung<br />
Cancer, 43: 83-91 (<strong>2004</strong>).<br />
Scagliotti GV, Torri V. Should we be using adjuvant chemotherapy for non-small cell lung cancer? Not yet In: <strong>2004</strong><br />
ASCO Annual meeting. American Society Clinical Oncology, New Orleans, 501-510 (<strong>2004</strong>).<br />
Perrone F, Marangolo M, Di Costanzo F, Colucci G, Repetto L, Merlano M, De Placido S, Torri V, Comella G,<br />
Labianca R, Parisi V, Gallo C. Insurance for independent cancer trials. Ann Oncol, 15: 1722-1723 (<strong>2004</strong>).<br />
Gregorc V, Ceresoli G, Floriani I, Spreafico A, Bencar<strong>di</strong>no K B, Ludovini V, Pistola L, Mihaylova Z, Tofanetti F R,<br />
Ferraldeschi M, Torri V, Cappuzzo F, Aarden L A, Tonato M, Villa E. Effects of Gefitinib on serum epidermal<br />
growth factor receptor and HER2 in patients with advanced non-small cell lung cancer. Clin Cancer Res, 10: 6006-<br />
6012 (<strong>2004</strong>).<br />
Alonso J., Ferrer M., Gandek B., Ware J.E., Aaronson N.K., Mosconi P., Rasmussen N.K., Bullinger M., Fukuhara<br />
S., Kaasa S., Leplege A., and the IQOLA Project Group. Functional health and well-being of the chronically ill in<br />
eight countries: results from the International Qualità of Life Assessment (IQOLA) project. Quality of Life Research,<br />
13: 283-298 (<strong>2004</strong>).<br />
Marchesini G., Melchionda N., Apolone G., Cuzzolaro M., Mannucci E., Grossi E. and the QUOVADIS Study<br />
Group. Prevalence of the metabolic syndrome in treatment-seeking obese persons. Metabolism, 53 (4): 435-440<br />
(<strong>2004</strong>)..<br />
Gallus S., Pacifici R., Colombo P., Scarpino V., Zuccaro P., Bosetti C., Apolone G., La Vecchia C., Smoking in Italy<br />
2003, with a focus on the young. Tumori 90: 171-174 (<strong>2004</strong>).<br />
Apolone G, Garattini S., Drugs policy and market in europe: a useful example for the USA? J.Amb.Care<br />
Management 27:88 (<strong>2004</strong>).<br />
Pironi L., Paganelli F., Mosconi P., Morselli-Labate A.M., Spinucci G., Merli C., Guidetti M., Miglioli M., The SF-<br />
36 instrument for the follow-up of healt-related quality-of-life assessment of patients undergoing home parenteral<br />
nutrition for benign <strong>di</strong>sease, Transplantation Procee<strong>di</strong>ngs 36: 254-258 (<strong>2004</strong>).<br />
Zwahlen M., D’Avanzo B., Egger M., Berrino F., Perneger T., Mosconi P., Domenighetti G. Women’s perception of<br />
the benefits of mammography screening: population-based survey in four countries: authors reply. Int.J.Epidemiol.,<br />
33: 1-2 (<strong>2004</strong>).<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI DIVULGATIVE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Giavazzi R., Aglietta M., Astolfi A., Falanga A., Fusco A., Labianca R., Lollini P.L., Lombardo C., Natali P.G.,<br />
Pierotti M.A., Presta M., Santoro M., Taraboletti G., Zupi G., Vecchio G. Meeting report. 45th Annual Meeting of the<br />
Italian Cancer Society. Tumori, 90:356-362 (<strong>2004</strong>).<br />
19<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Antitumorale<br />
IRFMN<br />
Meccanismo d'azione delle Ecteinasci<strong>di</strong>ne<br />
Un progetto che sta andando avanti da <strong>di</strong>versi anni riguarda la caratterizzazione dei prodotti<br />
naturali <strong>di</strong> origine marina che posseggono attività antitumorale. In particolare sono continuati<br />
stu<strong>di</strong> sugli effetti dell’ET-743 e <strong>di</strong> alcuni suoi derivati sul ciclo cellulare in cellule <strong>di</strong>fettive in<br />
alcuni meccanismi <strong>di</strong> riparo del DNA.<br />
Si sono valutati inibitori <strong>di</strong> ATM o <strong>di</strong> DNA-PK in combinazione con ET-743 in <strong>di</strong>verse linee<br />
cellulari ottenendo l' evidenza che l’attività citotossica <strong>di</strong> ET-743 possa essere incrementata in<br />
modo significativo.<br />
Nel <strong>2004</strong> si sono continuati gli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> alcuni composti analoghi dell’ET-743 ottenendo<br />
informazioni sulla natura delle relazioni struttura-attività <strong>di</strong> queste molecole.<br />
Meccanismo d'azione delle Didemnine<br />
Un’altra classe <strong>di</strong> composti naturali <strong>di</strong> origine marina stu<strong>di</strong>ati <strong>di</strong> recente sono le <strong>di</strong>demnine, in<br />
particolare la Diidro<strong>di</strong>demnina B (Apli<strong>di</strong>na). Questo composto ha mostrato <strong>di</strong> avere una forte<br />
attività inibitoria della crescita e una rapida attivazione <strong>di</strong> apoptosi in cellule <strong>di</strong> leucemie<br />
linfatiche umane. In collaborazione con il laboratorio <strong>di</strong> farmacologia molecolare e con il<br />
laboratorio <strong>di</strong> biologia e terapia delle mestastasi si è scoperto come questo depsipeptide possa<br />
bloccare il “loop” autocrino VEGF/FLT1 presente in cellule leucemiche. L’induzione<br />
dell’apoptosi, almeno in alcune linee cellulari derivate da leucemie umane, sembrerebbe causato<br />
dalla mancanza della attivazione del pathway <strong>di</strong> VEGF la cui secrezione verrebbe bloccata dal<br />
farmaco. Mentre si stanno chiarendo i meccanismi <strong>di</strong> azione <strong>di</strong> Apli<strong>di</strong>na a livello cellulare e<br />
molecolare si è condotto uno stu<strong>di</strong>o su cellule <strong>di</strong> leucemia linfoblastica acuta pe<strong>di</strong>atrica,<br />
coltivate su un supporto stromale. In queste con<strong>di</strong>zioni Apli<strong>di</strong>na ha mostrato <strong>di</strong> essere un<br />
composto attivo a concentrazioni tra 0.5 e 5 nM, anche in casi resistenti alle terapie<br />
convenzionali. Questi stu<strong>di</strong> hanno fornito il razionale per stu<strong>di</strong> clinici <strong>di</strong> Apli<strong>di</strong>na nelle leucemie<br />
linfatiche, che si stanno pianificando.<br />
Meccanismo d'azione delle Varioline<br />
Questi composti inducono rapidamente apoptosi in <strong>di</strong>versi tipi cellulari con un meccanismo<br />
ancora da chiarire. inoltre causano perturbazioni del ciclo cellulare con un blocco delle cellule<br />
nelle fasi G1 e G2 probabilmente dovuti all’inibizione <strong>di</strong> cdk. E’ <strong>di</strong> interesse la scoperta che<br />
questi farmaci sono attivi anche su cellule resistenti ad altri prodotti naturali, ad esempio per la<br />
iperespressione della proteina Pgp responsabile della “multidrug resistance”. Stu<strong>di</strong> che<br />
utilizzano tecniche <strong>di</strong> analisi d’immagine me<strong>di</strong>ante microscopia confocale hanno <strong>di</strong>mostrato che<br />
la Variolina si localizza soprattutto nel nucleo della cellula. Sono state ottenute due linee<br />
cellulari resistenti alla Variolina e sono in corso stu<strong>di</strong> per la caratterizzazione <strong>di</strong> queste linee<br />
resistenti.<br />
Combinazione tra farmaci naturali <strong>di</strong> origine marina e altri farmaci<br />
antitumorali<br />
Si sono ottenute evidenze <strong>di</strong> effetto sinergico o ad<strong>di</strong>tivo <strong>di</strong> ET-743 somministrato in<br />
combinazione con <strong>di</strong>versi altri farmaci antitumorali quali cisplatino, doxorubicina,<br />
camptotechine, e inibitori della Telomerasi.<br />
20<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Il contenuto <strong>di</strong> DNA nei tumori umani dell’ovaio: correlazioni con la clinica<br />
Sono stati pubblicati risultati controversi sul significato prognostico della aneuploi<strong>di</strong>a del DNA<br />
nel carcinoma ovarico avanzato (sta<strong>di</strong>o III o IV). L’unità <strong>di</strong> Citometria ha riportato uno degli<br />
stu<strong>di</strong> più numerosi della letteratura scientifica in<strong>di</strong>cando che l’aneuploi<strong>di</strong>a nel carcinoma<br />
ovarico avanzato non è un fattore prognostico in<strong>di</strong>pendente.<br />
In un’ampia casistica <strong>di</strong> tumori dell’ovaio al I e II sta<strong>di</strong>o è stato misurato, me<strong>di</strong>ante citometria a<br />
flusso, il contenuto <strong>di</strong> DNA e la percentuale <strong>di</strong> cellule nella fase S del ciclo cellulare. Una prima<br />
analisi dei dati sembrerebbe suggerire che anche nei primi sta<strong>di</strong> della malattia il contenuto <strong>di</strong><br />
DNA non sia un fattore prognostico importante per il carcinoma dell’ovaio.<br />
Elaborazione <strong>di</strong> dati del ciclo cellulare e <strong>di</strong> combinazione <strong>di</strong> farmaci<br />
L’unità <strong>di</strong> Biofisica è impegnata in stu<strong>di</strong> teorici e metodologici mirati alla valutazione critica<br />
delle attuali tecniche <strong>di</strong> analisi degli effetti farmacologici su popolazioni cellulari eterogenee.<br />
Sono stati costruiti <strong>di</strong>versi algoritmi <strong>di</strong> calcolo atti a simulare la proliferazione cellulare a<br />
<strong>di</strong>fferenti livelli <strong>di</strong> indagine (dalle interazioni molecolari alla crescita dei tumori soli<strong>di</strong> in vivo)<br />
insieme ai processi <strong>di</strong> misura.<br />
Sono in corso collaborazioni con altri gruppi <strong>di</strong> ricerca, in cui l’unità si occupa del <strong>di</strong>segno<br />
sperimentale e dell’analisi dei dati in stu<strong>di</strong> in vitro <strong>di</strong> combinazione <strong>di</strong> farmaci. In questo settore<br />
sono stati sviluppati <strong>di</strong>versi programmi <strong>di</strong> calcolo che consentono un’analisi comparativa dei<br />
risultati con i più comuni modelli <strong>di</strong> interazione farmacologica.<br />
Analisi della complessità della risposta <strong>di</strong> popolazioni cellulari al<br />
trattamento con farmaci antitumorali<br />
Il progetto si propone <strong>di</strong> stabilire una connessione tra i meccanismi intracellulari <strong>di</strong> risposta al<br />
trattamento farmacologico e le risultanti alterazioni del ciclo cellulare. A partire dagli effetti dei<br />
farmaci sulle singole cellule, si perviene a ricostruire la risposta <strong>di</strong> una popolazione <strong>di</strong> cellule,<br />
così come misurata dalla citometria a flusso o dai test <strong>di</strong> inibizione della proliferazione e <strong>di</strong><br />
sopravvivenza. Il modello adottato per l’analisi e interpretazione dei risultati sperimentali è<br />
ottenuto dalla combinazione <strong>di</strong> due modelli matematici. Il primo descrive il ciclo cellulare,<br />
utilizzando la teoria matematica della <strong>di</strong>namica delle popolazioni strutturate per età. Il secondo<br />
modello descrive la risposta al trattamento usando parametri <strong>di</strong>stinti (“descrittori <strong>di</strong> effetto”),<br />
<strong>di</strong>rettamente associati all’arresto, riparo del danno e mortalità in ogni fase del ciclo (G1, S and<br />
G2M). Tale approccio consente <strong>di</strong> ottenere un’interpretazione quantitativa dei risultati<br />
sperimentali, superando i limiti degli attuali approcci al problema, inadatti a risolvere la<br />
sovrapposizione tra effetti citostatici e citotossici e a stabilire una connessione con i sottostanti<br />
eventi collegati alle <strong>di</strong>verse fasi del ciclo.<br />
Applicando la procedura abbiamo <strong>di</strong>mostrato l’esistenza <strong>di</strong> una complessa ma biologicamente<br />
coerente <strong>di</strong>pendenza dal tempo e dalla dose <strong>di</strong> farmaco per ogni descrittore <strong>di</strong> effetto, in una<br />
linea <strong>di</strong> carcinoma ovarico dopo trattamento con melphalan e doxorubicina. Questi risultati si<br />
aggiungono a quelli precedentemente pubblicati su topotecan, cisplatino e taxolo. Alla<br />
conclusione del progetto sarà quin<strong>di</strong> prodotto un database contenente informazioni sulla risposta<br />
al trattamento con un numero ristretto <strong>di</strong> farmaci, ma ricco <strong>di</strong> informazioni sulle <strong>di</strong>pendenze dal<br />
tempo e dalla dose degli effetti, che consentirà un’intercomparazione <strong>di</strong>retta tra i più comuni<br />
farmaci utilizzati nel trattamento del carcinoma ovarico.<br />
Misura delle variazioni del contenuto cellulare <strong>di</strong> specifiche proteine,<br />
durante la progressione nella fase G1, in cellule in crescita esponenziale<br />
E’ stato sviluppato un metodo per misurare il contenuto <strong>di</strong> particolari proteine in singole cellule<br />
durante l’attraversamento della fase G1. Nello stu<strong>di</strong>o sono stati misurati i livelli <strong>di</strong> Ciclina E, ma<br />
la procedura è applicabile a qualsiasi proteina rilevabile in modo specifico con procedure <strong>di</strong><br />
immunoistochimica. La sequenza degli eventi in G1 è misurata in cellule in crescita<br />
21<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
esponenziale, evitando le problematiche e gli artefatti indotti dalle procedure <strong>di</strong><br />
sincronizzazione.<br />
Il metodo si basa su: i) esposizione delle cellule per pochi minuti a bassissime concentrazioni <strong>di</strong><br />
bromodeoxyuri<strong>di</strong>na (BrdUrd), seguita da raccolta e fissazione delle cellule a <strong>di</strong>versi tempi; ii)<br />
misura contemporanea del contenuto <strong>di</strong> DNA, BrdUrd e Ciclina E me<strong>di</strong>ante citometria a flusso<br />
multiparametrica; iii) analisi dei dati basata sulla teoria della proliferazione <strong>di</strong> popolazioni<br />
asincrone, con durata della fasi variabile.<br />
Stu<strong>di</strong> degli effetti antiproliferativi dei farmaci antitumorali me<strong>di</strong>ante<br />
Carboxyfluorescein <strong>di</strong>acetate succinimidyl ester (CFSE)<br />
La CFSE è attualmente in uso come tracciante per lo stu<strong>di</strong>o della migrazione e proliferazione<br />
delle cellule ematopoietiche. Diversi problemi tecnici ne avevano precluso finora l'utilizzo per<br />
lo stu<strong>di</strong>o dell'attività antiproliferativa dei chemioterapici. Abbiamo analizzato i <strong>di</strong>versi step<br />
critici della procedura, elaborando il modo <strong>di</strong> superare i potenziali errori. Il progetto è stato<br />
portato a termine con successo, consentendo <strong>di</strong> superare i precedenti limiti della procedura. Il<br />
risultato è stato la definizione <strong>di</strong> una procedura standar<strong>di</strong>zzata <strong>di</strong> citometria e analisi dei dati per<br />
la valutazione della <strong>di</strong>namica dei blocchi del ciclo cellulare successiva al trattamento. Il nuovo<br />
metodo è stato applicato allo stu<strong>di</strong>o del farmaco topotecan, misurando la variabilità <strong>di</strong> risposta<br />
in termini <strong>di</strong> percentuali <strong>di</strong> cellule imme<strong>di</strong>atamente bloccate, bloccate dopo una o più <strong>di</strong>visioni o<br />
non colpite dal trattamento.<br />
Farmacocinetica e legame alle proteine plasmatiche del Glivec<br />
L’unità ha messo a punto <strong>di</strong>verse metodologie analitiche sensibili e specifiche me<strong>di</strong>ante HPLC e<br />
HPLC accoppiata a spettrometria <strong>di</strong> massa per lo stu<strong>di</strong>o metabolico e farmacocinetico <strong>di</strong> nuovi<br />
farmaci antitumorali. Questi meto<strong>di</strong> sono stati applicati per valutare in cellule tumorali l’uptake,<br />
la ritenzione e l’efflusso <strong>di</strong> farmaci, sia per valutare la <strong>di</strong>stribuzione tissutale e i parametri<br />
farmacocinetici in animali portatori <strong>di</strong> tumore e sia in liqui<strong>di</strong> biologici ottenuti da pazienti che<br />
partecipano alle iniziali sperimentazioni cliniche <strong>di</strong> questi farmaci.<br />
Fra i farmaci stu<strong>di</strong>ati vi è Glivec, l’inibitore tirosino chinasico con specificità per Abl e c-kit.<br />
Questo farmaco ha indubbiamente rappresentato un grande progresso terapeutico per la terapia<br />
della leucemia mieloide acuta e per il sarcoma gastrointestinale. Vi sono però evidenze<br />
sperimentali, più <strong>di</strong> recente anche cliniche, secondo le quali i livelli plasmatici della proteina <strong>di</strong><br />
fase acuta alfa1 glicoproteina acida (AGP) rilevanti nell’influenzare l’uptake tissutale e la<br />
farmacocinetica del farmaco. In stu<strong>di</strong> preclinici è stato possibile identificare dei potenziali<br />
meto<strong>di</strong> per aumentare la quota libera, non legata ad AGP, <strong>di</strong> Glivec (attraverso l’impiego <strong>di</strong><br />
antibiotici che legano AGP con alta affinità), quin<strong>di</strong> potenzialmente aumentarne l’attività<br />
antitumorale.<br />
Questi meto<strong>di</strong> potrebbero portare a delle applicazioni cliniche.<br />
Farmacocinetica <strong>di</strong> ET-743 e Apli<strong>di</strong>na<br />
In stretta collaborazione con altri gruppi del laboratorio si sono condotti stu<strong>di</strong> metabolici e<br />
farmacocinetici <strong>di</strong> due prodotti marini quali ET-743 e Apli<strong>di</strong>na. Per questi due composti si sono<br />
stu<strong>di</strong>ati l’uptake cellulare in linee sensibili resistenti e la <strong>di</strong>stribuzione tissutale in xenografts.<br />
Inoltre in collaborazione con <strong>di</strong>versi gruppi clinici che in Europa e in Canada stanno<br />
sperimentando questi due farmaci si sta valutando la farmacocinetica clinica <strong>di</strong> questi due<br />
prodotti. Sia a livello preclinico che a livello clinico si stanno valutando le interazioni<br />
farmacocinetiche fra questi farmaci e farmaci correntemente utilizzati nella terapia dei tumori,<br />
quali antracicline e composti <strong>di</strong> coor<strong>di</strong>nazione del platino.<br />
22<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Farmacocinetica <strong>di</strong> nuovi derivati taxanici<br />
Si sono condotti <strong>di</strong>versi stu<strong>di</strong> a livello preclinico che riguardano dei nuovi derivati taxanici che<br />
si <strong>di</strong>fferenziano da quelli convenzionali sia dal punto <strong>di</strong> vista chimico che per la loro attività<br />
biologica. Per due <strong>di</strong> questi composti si sono valutate le proprietà <strong>di</strong> bio<strong>di</strong>sponibilità dopo<br />
somministrazione orale ed è stato interamente caratterizzato il profilo cinetico e metabolico con<br />
meto<strong>di</strong> analitici originali sviluppati dall’unità <strong>di</strong> Farmacologia Clinica Antitumorale. Essi hanno<br />
mostrato attività biologica anche in tumori poco suscettibili ad altri taxani che suggeriscono un<br />
potenziale interesse clinico. La possibilità che questi farmaci agiscano attraverso un<br />
meccanismo d’azione antiangiogenetico, messo in luce dal Laboratorio <strong>di</strong> Biologia e Terapia<br />
delle Metastasi, richiede necessariamente la valutazione farmacocinetica e farmaco<strong>di</strong>namica <strong>di</strong><br />
schemi <strong>di</strong> trattamento cronici dopo prolungata somministrazione.<br />
Farmacocinetica clinica <strong>di</strong> gimatecan<br />
Uno stu<strong>di</strong>o condotto in collaborazione con il SENDO ci ha portato a definire le proprietà <strong>di</strong><br />
farmacocinetica clinica <strong>di</strong> un nuovo derivato della camptotechina (Gimatecan) in pazienti che<br />
partecipano a fasi I-II <strong>di</strong> sperimentazione clinica. Gli stu<strong>di</strong> ancora in corso mostrano che questo<br />
composto è rapidamente assorbito dopo somministrazione orale con una lunga emivita che può<br />
garantire un’esposizione molto lunga al farmaco. Dati <strong>di</strong> farmacocinetica saranno correlati con i<br />
dati <strong>di</strong> tipo clinico (tossicità e attività antitumorale) per comprendere le proprietà <strong>di</strong> questo<br />
nuovo farmaco. Sono in corso stu<strong>di</strong> relativi al metabolismo <strong>di</strong> Gimatecan con l’obiettivo <strong>di</strong><br />
identificare e quantificare metaboliti del farmaco e caratterizzare la loro attività farmacologica.<br />
Attività antitumorale <strong>di</strong> nuovi farmaci e <strong>di</strong> combinazioni <strong>di</strong> farmaci<br />
Valutazione dell’attività antitumorale e della tossicità <strong>di</strong> nuovi farmaci antitumorali “target<br />
specifici” ( es. inibitori della CDK) farmaci antitumorali convenzionali e combinazioni <strong>di</strong><br />
farmaci in tumori del topo e del ratto e in tumori umani trapiantati in topi immuno-deficenti.<br />
Attività antitumorale <strong>di</strong> composti con nota attività <strong>di</strong> chemioprevenzione<br />
Valutazione del meccanismo d’azione e dell’attività antitumorale <strong>di</strong> Indolo-3 carbinolo, suoi<br />
composti analoghi e <strong>di</strong>versi isotiocianati <strong>di</strong> origine naturale.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Molecolare<br />
G2 checkpoint del ciclo cellulare<br />
E’ stata valutata la importanza relativa <strong>di</strong> CHK1 e CHK2 nell’indurre una risposta <strong>di</strong> blocco del<br />
ciclo cellulare dopo danno. A tale scopo sono stati utilizzati small interference RNA (siRNA),<br />
piccole molecole <strong>di</strong> RNA in grado <strong>di</strong> inibire selettivamente la espressione del gene considerato.<br />
Sulla base delle sequenze geniche, sono stati <strong>di</strong>segnati siRNA specifici per CHK1 e CHK2 e<br />
queste molecole testate per la loro capacità <strong>di</strong> ridurre l’espressione delle proteine. Siamo riusciti<br />
a ridurre <strong>di</strong> più del 90% l’espressione <strong>di</strong> CHK1 o CHK2 e abbiamo quin<strong>di</strong> continuato gli stu<strong>di</strong><br />
combinando questi siRNA ocn farmaci come cisplatino o con ra<strong>di</strong>azioni ionizzanti. Bloccando<br />
CHK1 riusciamo ad aumentare l’attività <strong>di</strong> cisplatino e IR, mentre il blocco <strong>di</strong> CHK2 non<br />
provoca alcun aumento <strong>di</strong> attività. L’uso combinato <strong>di</strong> siRNA contro CHK1 e CHK2 dà gli<br />
stessi risultati ottenuti con siRNA contro CHK1. I dati ottenuti sostengono fortemente CHK1<br />
come possibile target per molecole in grado <strong>di</strong> sensibilizzare cellule tumorali all’azione <strong>di</strong><br />
farmaci antitumorali.<br />
23<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Mo<strong>di</strong>ficazioni post-traduzionali <strong>di</strong> CHK1<br />
CHK1 è una proteina che in seguito a induzione <strong>di</strong> danno viene mo<strong>di</strong>ficata attraverso<br />
fosforilazioni. Questa attività si prefigge <strong>di</strong> identificare nuovi sistemi <strong>di</strong> attivazione <strong>di</strong> CHK1,<br />
valutando altre mo<strong>di</strong>ficazioni posttraduzionali come l’acetilazione. Sono state preparate proteine<br />
ricombinanti sia derivate dall’intero gene che da porzioni <strong>di</strong> esso, comprendente la parte Nterminale<br />
o C-terminale, che sono state utilizzate per valutare la capacità <strong>di</strong> proteine acetilanti <strong>di</strong><br />
mo<strong>di</strong>ficare le lisine presenti sulla proteina CHK1. L’incubazione <strong>di</strong> CHK1 ricombinante con<br />
acetilcoenzima A e p300, ha permesso <strong>di</strong> rilevare in vitro la formazione <strong>di</strong> lisine acetilate,<br />
identificate me<strong>di</strong>ante anticorpi che riconoscono questo residuo mo<strong>di</strong>ficato. Questo meccanismo<br />
potrebbe rappresentare, se confermato in cellule, un nuovo meccanismo <strong>di</strong> attivazione <strong>di</strong> CHK1.<br />
Caratterizzazione <strong>di</strong> nuovi potenziali geni oncosoppressori<br />
Il gene DRAGO identificato e clonato nel nostro laboratorio rimane uno dei progetti più<br />
interessanti del gruppo. Sono stati ottenuti i topi knock out per il gene che si sviluppano<br />
apparentemente in modo normale. La caratterizzazione iniziale del fenotipo <strong>di</strong> questi animali ha<br />
<strong>di</strong>mostrato come la crescita in termini <strong>di</strong> peso corporeo è nella norma, che i topi sia eterozigoti<br />
che omozigoti per la delezione sono fertili e che fino a quattro mesi dalla nascita non presentano<br />
alterazioni macroscopicamente rilevabili. Sono stati isolati fibroblasti embrionali da topi<br />
normali, da topi con un allele deleto e da topi con entrambi gli alleli deleti e si sta cercando <strong>di</strong><br />
caratterizzare il comportamento <strong>di</strong> queste cellule in coltura, in particolare rispetto alla loro<br />
capacità <strong>di</strong> <strong>di</strong>vidersi e <strong>di</strong> propagarsi e <strong>di</strong> rispondere ad una serie <strong>di</strong> danni indotti con ra<strong>di</strong>azioni<br />
ultraviolette o ra<strong>di</strong>azioni ionizzanti.<br />
Analisi <strong>di</strong> espressione genica<br />
Lo stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> espressione genica in cellule trattate con il farmaco ET-743 è stato in<strong>di</strong>rizzato alla<br />
valutazione dell’espressione genica in cellule selezionate per la resistenza al farmaco stesso. Da<br />
due <strong>di</strong>verse linee cellulari, le Igrov-1 <strong>di</strong> derivazione ovarica e le Cs-1 derivate da<br />
condrosarcoma, sono state ottenute due linee resistenti a ET-743, entrambe con un fattore <strong>di</strong><br />
resistenza <strong>di</strong> 4-5. In queste cellule è stato valutato se era mo<strong>di</strong>ficato il pattern <strong>di</strong> espressione<br />
genica tra cellule resistenti e cellule parentali sensibili. L’analisi <strong>di</strong> espressione genica si è<br />
focalizzata sull’identificazione <strong>di</strong> quei geni o <strong>di</strong> quei pattern molecolari che presentavano una<br />
simile alterazione <strong>di</strong> espressione nelle due linee resistenti rispetto alle loro linee parentali. Da<br />
questa analisi è emerso che vi sono 70 geni con espressione alterata in entrambe le linee <strong>di</strong> cui<br />
circa 20 presentano una espressione maggiore nelle linee resistenti rispetto alle parentali e 50<br />
una espressione inferiore. Stiamo attualmente caratterizzando questi geni per capire se e quali<br />
possono essere rilevanti per il meccanismo <strong>di</strong> azione <strong>di</strong> questo promettente farmaco<br />
antitumorale.<br />
Caratterizzazione molecolare del carcinoma dell’ovaio<br />
E’ stato approfon<strong>di</strong>to lo stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> caratterizzazione molecolare dei tumori ovarici allo sta<strong>di</strong>o I.<br />
E’ stato incrementato il numero <strong>di</strong> pazienti analizzati e sono state eseguite nuove analisi con<br />
approcci <strong>di</strong>versi <strong>di</strong> valutazione dei clusters <strong>di</strong> pazienti con espressione genica simile. I tumori<br />
analizzati sono ora 75 e i dati emergenti confermano la relativa omogeneità <strong>di</strong> espressione<br />
genica <strong>di</strong> queste pazienti. Sono stati identificati alcuni clusters <strong>di</strong> geni che identificano<br />
sottopopolazioni <strong>di</strong> pazienti con caratteristiche biologiche del tumore simile. Un cluster in<br />
particolare riesce ad identificare pazienti con una prognosi particolarmente sfavorevole e quin<strong>di</strong><br />
potrebbe rappresentare un nuovo metodo per identificare, all’interno della popolazione, quei<br />
pazienti che necessitano un trattamento chemioterapico. Lo stu<strong>di</strong>o, visti gli incoraggianti<br />
risultati, proseguirà con l’analisi <strong>di</strong> espressione genica in pazienti con tumore ovarico in sta<strong>di</strong>o<br />
più avanzato.<br />
24<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Stu<strong>di</strong>o dell’espressione <strong>di</strong> PRL-3 in tumori ovarici<br />
PRL-3 è una fosfatasi appartenente alla famiglia delle PRL che è stata recentemente descritta<br />
come proteina sovraespressa, in pazienti con tumore del colon, nelle metastasi rispetto al tumore<br />
primario <strong>di</strong> origine. Abbiamo stu<strong>di</strong>ato l’espressione <strong>di</strong> questo gene a livello <strong>di</strong> RNA in pazienti<br />
con tumore ovarico <strong>di</strong> sta<strong>di</strong>o III e in metastasi derivate da esso, per valutare se anche nel tumore<br />
dell’ovaio si osservava lo stesso fenomeno. L’analisi ha mostrato che non ci sono significative<br />
<strong>di</strong>fferenze <strong>di</strong> espressione tra tumore primario e metastasi ma, a <strong>di</strong>fferenza <strong>di</strong> quanto visto nel<br />
tumore del colon, il tumore primario dell’ovaio esprime livelli relativamente alti <strong>di</strong> questa<br />
fosfatasi. Abbiamo quin<strong>di</strong> esteso lo stu<strong>di</strong>o a tumori a sta<strong>di</strong>o più precoce (sta<strong>di</strong>o I) trovando che i<br />
tumori allo sta<strong>di</strong>o III esprimono livelli <strong>di</strong> PRL-3 maggiori rispetto al tumore allo sta<strong>di</strong>o I<br />
suggerendo che questa fosfatasi, nel tumore dell’ovaio, potrebbe essere associata con la<br />
progressione tumorale più che con la metastatizzazione.<br />
Inibizione del segnale me<strong>di</strong>ato da PI3K/Akt<br />
In cellule <strong>di</strong> carcinoma ovarico il gene PI3K è spesso overespresso o mutato e come risultato<br />
questa chinasi risulta costitutivamente attivata. La conseguenza è la presenza <strong>di</strong> proteine che<br />
determinano sopravvivenza cellulare, come Akt, costitutivamente fosforilate e quin<strong>di</strong> attive. In<br />
questo progetto è stata valutata la capacità <strong>di</strong> inositoli tetra e pentafosfati <strong>di</strong> inibire il<br />
reclutamento <strong>di</strong> Akt in membrana e la sua successiva fosforilazione. IP5 si è <strong>di</strong>mostrato in grado<br />
<strong>di</strong> indurre riduzione della fosforilazione <strong>di</strong> akt e, come conseguenza, <strong>di</strong> indurre riduzione della<br />
crescita cellulare. Inoltre la combinazione <strong>di</strong> IP5 con un farmaco antitumorale come cisplatino o<br />
taxolo si è mostrata più attiva delle singole molecole nell’indurre apoptosi. Gli inositoli penta<br />
fosfati potrebbero quin<strong>di</strong> rappresentare un ottimo modello per la sintesi <strong>di</strong> molecole in grado <strong>di</strong><br />
revertire il fenotipo antiapoptotico indotto dalla fosforilazione costitutiva <strong>di</strong> Akt.<br />
Oncosoppressori p53 a p73<br />
L’analogo <strong>di</strong> p53, p73, è noto essere presente in <strong>di</strong>verse isoforme, derivanti da splicing<br />
alternativi a carico della parte c-terminale. Oltre a queste isoforme, ne esiste una, chiamata<br />
DNp73, che manca invece del dominio <strong>di</strong> transattivazione situato nella parte N-terminale della<br />
proteina. Questa forma DN <strong>di</strong> p73 ha funzioni antagonizzanti quelle <strong>di</strong> p53 e p73.<br />
Sono stati ulteriormente caratterizzati cloni cellulari derivati dalla linea <strong>di</strong> carcinoma del colon<br />
umano HCT116 esprimenti dopo induzione la forma DN <strong>di</strong> p73. Questi cloni, nonostante<br />
esprimano alti livelli <strong>di</strong> DNp73 che antagonizzano le funzioni delle proteine p53 e p73 wildtype,<br />
rispondono al trattamento chemioterapico in maniera analoga alle cellule non esprimenti<br />
DNp73. Inoltre le stesse cellule trapiantate in topi nu<strong>di</strong> sono in grado <strong>di</strong> sviluppare tumori che<br />
crescono in maniera analoga ai cloni non indotti o non esprimenti DNp73. Abbiamo <strong>di</strong>mostrato<br />
che anche in vivo i tumori esprimono e mantengono alti livelli <strong>di</strong> questa forma aberrante <strong>di</strong> p73,<br />
sia me<strong>di</strong>ante tecniche <strong>di</strong> biologia molecolare che attraverso l’uso <strong>di</strong> tecniche <strong>di</strong><br />
immunoistochimica. I tumori che crescono nell’animale da esperimento rispondono inoltre al<br />
trattamento con farmaci antitumorali esattamente come la linea parentale da cui sono stati<br />
derivati. Sono in corso esperimenti atti a valutare gli effetti della sovraespressione <strong>di</strong> questa<br />
forma aberrante <strong>di</strong> p73 in cellule HCT116 in cui il gene co<strong>di</strong>ficante per p53 è stato inattivato,<br />
per verificare se l’impatto dell’espressione <strong>di</strong> DNp73 in cellule senza p53 (situazione che si<br />
riscontra nella maggior parte dei tumori umani) è <strong>di</strong>verso.<br />
Meccanismo <strong>di</strong> azione <strong>di</strong> nuovi farmaci antitumorali<br />
E’ stato <strong>di</strong>mostrato negli anni precedenti dal nostro laboratorio che il farmaco antitumorale<br />
brostallicina, un derivato della <strong>di</strong>stamicina che lega il DNA nel suo solco minore, presenta un<br />
meccanismo <strong>di</strong> azione peculiare, in quanto esercita una maggiore attività quando sono presenti<br />
alti livelli del sistema glutatione (GSH) glutatione-S-transferase (GST). In <strong>di</strong>versi tumori umani<br />
i livelli <strong>di</strong> questi enzimi detossificanti sono più elevati rispetto al tessuto normale da cui<br />
25<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
originano e questo potrebbe rappresentare un vantaggio per la selettività <strong>di</strong> azione della<br />
molecola. Vi sono però alcuni tumori umani in cui il gene che co<strong>di</strong>fica per GST è inattivato per<br />
metilazione, che impe<strong>di</strong>sce la trascrizione <strong>di</strong> RNA e la formazione <strong>di</strong> una proteina funzionale.<br />
Un caso emblematico è il tumore della prostata, dove in più del 90% dei casi la proteina GST<br />
non è espressa. E’ stato quin<strong>di</strong> iniziato uno stu<strong>di</strong>o per valutare se molecole in grado <strong>di</strong> revertire<br />
lo stato <strong>di</strong> metilazione del DNA potessero mo<strong>di</strong>ficare l’azione della brostallicina. Una linea <strong>di</strong><br />
carcinoma della prostata umana, LNCaP è stata presa come campione in quanto non esprime<br />
GST e non risponde al trattamento con brostallicina. Il co-trattmaento <strong>di</strong> brostallicina con 5-<br />
Aza-deossiciti<strong>di</strong>na (inibitore della metilazione) sensibilizza le cellule al trattamento.<br />
Analogamente, transfettando in cellula LNCaP il gene umano <strong>di</strong> GST aumenta notevolmente la<br />
risposta delle cellule al trattamento con brostallicina. Questi risultati in<strong>di</strong>cano che è possibile<br />
modulare selettivamente in cellule tumorali con alterata espressione <strong>di</strong> GST l’azione del<br />
farmaco antitumorale brostallicina.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia e Terapia delle Metastasi Tumorali<br />
Regolazione fisiologica dell'angiogenesi<br />
L’angiogenesi, la formazione <strong>di</strong> vasi sanguigni da vasi preesistenti, gioca un ruolo rilevante<br />
nella progressione tumorale. Questo processo è regolato da un delicato bilancio tra fattori pro-<br />
ed anti-angiogenici. Ci occupiamo da tempo dello stu<strong>di</strong>o dei fattori endogeni che regolano<br />
l'angiogenesi. Nel <strong>2004</strong> abbiamo proseguito nello stu<strong>di</strong>o della trombospon<strong>di</strong>na-1 (TSP-1), un<br />
inibitore endogeno dell'angiogenesi, il cui legame <strong>di</strong>retto ai fattori angiogenici, in particolare<br />
FGF-2, ne altera la bio<strong>di</strong>sponibilità e inibisce l'attività. Ci occupiamo dello stu<strong>di</strong>o del rapporto<br />
struttura-funzione dei <strong>di</strong>versi siti attivi della TSP-1, con lo scopo principale <strong>di</strong> identificare il sito<br />
<strong>di</strong> legame per FGF-2.<br />
Abbiamo inoltre continuato lo stu<strong>di</strong>o sul ruolo delle metalloproteinasi della matrice (MMPs),<br />
nell'angiogenesi e nella progressione tumorale, <strong>di</strong>mostrando che MMP9 induce il rilascio <strong>di</strong><br />
Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF), un fattore che stimola l’angiogenesi e la<br />
permeabilità dei vasi, e che questo fenomeno è legato alla formazione <strong>di</strong> ascite associata alla<br />
progressione del carcinoma ovarico. Nel <strong>2004</strong> si sono svolti stu<strong>di</strong> per identificare da un lato il<br />
meccanismo del rilascio <strong>di</strong> VEGF me<strong>di</strong>ato da MMPs da parte <strong>di</strong> cellule tumorali e dall’altro la<br />
capacità <strong>di</strong> VEGF <strong>di</strong> stimolare l’espressione <strong>di</strong> geni coinvolti nei processi invasivi e metastatici.<br />
Infine, stu<strong>di</strong>amo la capacità <strong>di</strong> cellule tumorali <strong>di</strong> rilasciare MMPs e VEGF come componenti <strong>di</strong><br />
vescicole <strong>di</strong> membrana, in grado <strong>di</strong> attivare l'angiogenesi tumorale.<br />
Espressione genica nell’endotelio associato ai tumori: ruolo svolto dal<br />
microambiente<br />
Capire le <strong>di</strong>fferenze qualitative e funzionali tra le cellule endoteliali (EC) dei vasi tumorali e dei<br />
vasi normali potrebbe consentire l’identificazione <strong>di</strong> marcatori selettivi dell’endotelio vascolare<br />
associato a stati patologici e/o <strong>di</strong> nuove molecole bersaglio per lo sviluppo <strong>di</strong> interventi<br />
farmacologici. Abbiamo analizzato il profilo <strong>di</strong> espressione genica <strong>di</strong> cellule endoteliali isolate<br />
da carcinomi ovarici e da ghiandole surrenali, esposte o no ad un ambiente<br />
"angiogenico/tumorale" ricostituito in vitro. Tutto ciò utilizzando la tecnologia dei microarray<br />
(Affymetrix HG U95A) che ci ha pemesso <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>are l'espressione <strong>di</strong> circa 12000 geni. L’<br />
analisi dei risultati e la loro validazione tramite RealTime PCR ha permesso <strong>di</strong> confermare che<br />
i) l’ambiente è in grado <strong>di</strong> modulare l’espressione genica dell’endotelio ii) che questo effetto è<br />
in<strong>di</strong>pendente dall’origine delle EC; iii) che le EC isolate da tumore presentano <strong>di</strong>fferenze <strong>di</strong><br />
espressione genica rispetto alle EC isolate da tessuto normale. Risultati preliminari<br />
suggeriscono che due geni, co<strong>di</strong>ficanti proteine transmebrana, potrebbero essere interessanti<br />
come marcatori <strong>di</strong> endotelio/stroma tumorale in quanto il loro trascritto è piu abbondante in EC<br />
isolate da tumore che da tessuto normale mentre non è presente in cellule tumorali.<br />
26<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Modelli preclinici: ruolo <strong>di</strong> FGF-2 e VEGF nella crescita e<br />
vascolarizzazione del tumore<br />
L’angiogenesi tumorale è controllata da molteplici fattori prodotti dal tumore stesso e<br />
dall’ospite. Sono state generate (in collaborazione con ricercatori dell’Università <strong>di</strong> Brescia)<br />
cellule <strong>di</strong> carcinoma dell’endometrio umano (HEC-1-B) che <strong>di</strong>fferiscono per espressione FGF2<br />
e/oVEGF. Abbiamo mostrato che la crescita <strong>di</strong> questi tumori e la loro vascolarizzazione sono<br />
influenzate dall’espressione o meno <strong>di</strong> questi fattori. Ora stiamo stu<strong>di</strong>ando come la modulazione<br />
dell’espressione dei fattori angiogenici influenza la risposta alla chemioterapia. Abbiamo<br />
trovato che anche in tumori in cui i fattori angiogenici sono inibiti, e quin<strong>di</strong> la vascolarizzazione<br />
è alterata, i chemioterapici (es. paclitaxel, doxorubicina) raggiungono il tumore e sono in grado<br />
<strong>di</strong> esercitare la loro attività antineoplastica.<br />
Terapia antiangiogenica e antivascolare<br />
Terapie antineoplastiche <strong>di</strong>rette contro il sistema vascolare dei tumori possono essere <strong>di</strong>segnate<br />
seguendo due <strong>di</strong>verse strategie. La terapia antiangiogenica è volta a prevenire la formazione dei<br />
nuovi vasi, mentre la terapia antivascolare ha lo scopo <strong>di</strong> <strong>di</strong>struggere selettivamente i vasi già<br />
formati nei tumori. Nel <strong>2004</strong> abbiamo proseguito nello stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> composti anti-angiogenici, con<br />
particolare interesse per l'analisi del meccanismo <strong>di</strong> azione del taxano IDN 5390, un composto<br />
analogo al paclitaxel. Nel <strong>2004</strong> abbiamo inoltre stu<strong>di</strong>ato le proprietà antiangiogeniche <strong>di</strong> 17-<br />
(<strong>di</strong>methyl amino ethyl amino)-17-methoxygeldanamycin (NSC707545, 17-DMAG), un<br />
composto in grado <strong>di</strong> modulare l’attività <strong>di</strong> Hsp90, somministrato per via orale.<br />
Tra i composti anti-vascolari abbiamo stu<strong>di</strong>ato le proprietà <strong>di</strong> ZD6126, un colchinolo che,<br />
causando la depolimerizzazione dei microtubuli, danneggia selettivamente i vasi sanguigni del<br />
tumore, portando alla necrosi della massa tumorale in modelli <strong>di</strong> neoplasie sperimentali. In<br />
particolare ci occupiamo della possibilità <strong>di</strong> combinare ZD6126 con chemioterapici tra<strong>di</strong>zionali,<br />
quali il paclitaxel, per ottimizzarne l’attività limitando possibili interferenze tra i <strong>di</strong>versi agenti.<br />
Per questo composto abbiamo valutato le possibili interazioni <strong>di</strong> farmacocinetica con il<br />
paclitaxel.<br />
Terapia antiangiogenica in combinazione alla chemioterapia<br />
Si ritiene che trattamenti basati su inibitori dell’angiogenesi possano dare il miglior risultato in<br />
combinazione con terapie convenzionali. Quest’aspetto è stato esplorato con SU6668, un<br />
inibitore dei recettori tirosin cinasici VEGFR2, FGFR1 e PDGFR in combinazione con<br />
paclitaxel, su modelli <strong>di</strong> carcinoma ovarico umano. Il trattamento con SU6668 inibiva la<br />
formazione d’ascite e la <strong>di</strong>sseminazione del tumore nella cavità peritoneale del topo nudo. La<br />
risposta era accompagnata da una <strong>di</strong>minuzione dei fattori <strong>di</strong> crescita solubili. L’aggiunta <strong>di</strong><br />
questo trattamento al paclitaxel ne migliorava in modo significativo l’in<strong>di</strong>ce terapeutico, anche<br />
con dosaggi bassi-non tossici del chemioterapico. Nel proseguo dello stu<strong>di</strong>o abbiamo <strong>di</strong>mostrato<br />
che SU6668 e paclitaxel inibiscono in modo sinergico la proliferazione delle cellule endoteliali<br />
e muscolari lisce, entrambi elementi importanti nella neo- vascolarizzazione. In vivo la<br />
combinazione inibisce in modo sinergistico la formazione <strong>di</strong> vasi in modelli preclinici e causa<br />
apoptosi delle cellule endoteliali.<br />
Alterazioni molecolari in risposta alla terapia<br />
Comprendere le basi molecolari della risposta terapeutica riveste un’importanza fondamentale<br />
per lo sviluppo <strong>di</strong> nuovi interventi farmacologici. Sono stati utilizzati modelli sperimentali <strong>di</strong><br />
carcinoma ovarico sensibili/resistenti al paclitaxel per stu<strong>di</strong>are alterazioni dell’espressione<br />
genica causate dal chemioterapico. Utilizzando la tecnologia <strong>di</strong> cDNA microarray (meto<strong>di</strong>ca che<br />
offre il vantaggio <strong>di</strong> valutare l’espressione <strong>di</strong> migliaia <strong>di</strong> geni contemporaneamente) abbiamo<br />
osservato che, nei tessuti tumorali che rispondevano alla terapia, la somministrazione del<br />
farmaco mo<strong>di</strong>fica il livello <strong>di</strong> espressione <strong>di</strong> geni coinvolti in varie funzioni biologiche, quali<br />
27<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
regolazione del ciclo cellulare, proliferazione, apoptosi, trascrizione genica, trasduzione del<br />
segnale e metabolismo cellulare. La modulazione <strong>di</strong> geni rappresentativi, associata al grado <strong>di</strong><br />
sensibilità al paclitaxel, è stata confermata , tramite analisi <strong>di</strong> Northern blot, in una serie <strong>di</strong><br />
tumori sperimentali con <strong>di</strong>fferente grado <strong>di</strong> sensibilità al paclitaxel.<br />
Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> bio<strong>di</strong>stribuzione del paclitaxel hanno mostrato che, fino a 4 ore dalla sua<br />
somministrazione, il farmaco è presente in uguale misura sia nei tumori che rispondono alla<br />
terapia sia in quelli resistenti. Per poi <strong>di</strong>minuire piu rapidamente in quest’ultimi. Questo<br />
conferma l’ipotesi che la risposta terapeutica correla con la farmacocinetica. Questi risultati nel<br />
loro insieme permettono <strong>di</strong> speculare che la modulazione genica in seguito alla<br />
somministrazione <strong>di</strong> un farmaco potrebbe essere utilizzata come misura farmaco<strong>di</strong>namica<br />
pre<strong>di</strong>ttiva <strong>di</strong> risposta.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca Clinica Oncologica<br />
Carcinoma del colon-retto<br />
GILDA è uno stu<strong>di</strong>o randomizzato, in aperto, internazionale, <strong>di</strong> confronto tra follow-up<br />
intensivo e follow-up minimalista nel carcinoma colorettale (sta<strong>di</strong>o B2-C <strong>di</strong> Dukes mod. sec.<br />
aster e coller) dopo trattamento con intenti curativi. La sperimentazione ha come misure <strong>di</strong> esito<br />
la sopravvivenza libera da malattia (in questo caso intesa come anticipazione <strong>di</strong>agnostica), la<br />
sopravvivenza globale, la qualità della vita e la valutazione dei costi <strong>di</strong>retti e in<strong>di</strong>retti. E’<br />
attualmente il più grande stu<strong>di</strong>o randomizzato mai eseguito che valuti l’efficacia della<br />
sorveglianza postoperatoria nel carcinoma colorettale. Al momento sono entrati in stu<strong>di</strong>o oltre<br />
1100 pazienti e si prevede la chiusura al raggiungimento <strong>di</strong> 1200 pazienti.<br />
Carcinoma gastrico<br />
”Intergruppo Nazionale A<strong>di</strong>uvante Gastrico”: è un stu<strong>di</strong>o randomizzato, in aperto,<br />
multicentrico, sul ruolo della chemioterapia a<strong>di</strong>uvante nel trattamento del carcinoma gastrico;<br />
viene condotto in più <strong>di</strong> 150 Unità Operative <strong>di</strong> tutta Italia. La sperimentazione ha come<br />
obiettivo quello <strong>di</strong> confrontare l’efficacia, valutata in termini <strong>di</strong> sopravvivenza libera da malattia<br />
e <strong>di</strong> sopravvivenza globale e la sicurezza, valutata in termini <strong>di</strong> tossicità ed eventi avversi, <strong>di</strong> un<br />
regime fluorouracile/leucovorin (5-FU/LV) versus un trattamento sequenziale <strong>di</strong> campto (CPT-<br />
11) con 5-FU/LV seguito da taxotere e cisplatino (TXT+CDDP) come terapia a<strong>di</strong>uvante per<br />
l’adenocarcinoma dello stomaco o della giunzione gastroesofagea operato ra<strong>di</strong>calmente. Per<br />
entrambi i bracci il periodo <strong>di</strong> trattamento è <strong>di</strong> 18 settimane a meno <strong>di</strong> tossicità non tollerabile,<br />
<strong>di</strong> progressione <strong>di</strong> malattia o <strong>di</strong> consenso ritirato da parte del paziente. Finito tale periodo, i<br />
pazienti saranno seguiti in follow-up senza ricevere un ulteriore trattamento. Alla ripresa <strong>di</strong><br />
malattia, il clinico sceglierà se e quale chemioterapia adottare.<br />
Carcinoma polmonare<br />
Il fattore <strong>di</strong> crescita epidermico (EGFR) è sovraespresso in molti tumori soli<strong>di</strong> tra cui il tumore<br />
del polmone a cellule non piccole (NSCLC) ed è associato alla progressione della malattia e ad<br />
una cattiva prognosi. Poichè l’EGFR è un promettente target per la terapia tumorale, farmaci<br />
che ne impe<strong>di</strong>scano l’attivazione potrebbero essere efficaci in questa neoplasia. Quanto<br />
premesso costituisce il razionale per uno stu<strong>di</strong>o randomizzato, multicentrico, in doppio cieco,<br />
sponsorizzato in Europa dall’EORTC e in Italia dall’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri. L’obiettivo è <strong>di</strong><br />
<strong>di</strong>mostrare un beneficio in termini <strong>di</strong> sopravvivenza globale e libera da progressione<br />
nell’utilizzo del Gefinitib versus placebo, in pazienti con tumore polmonare avanzato ed a<br />
cellule non piccole, che non hanno manifestato una progressione della malattia dopo una prima<br />
linea chemioterapica palliativa: lo stu<strong>di</strong>o è stato approvato dai Comitati Etici competenti.<br />
28<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Carcinoma ovarico<br />
ICON5: è un trial randomizzato che confronta il trattamento standard carboplatino+paclitaxel<br />
con quattro <strong>di</strong>versi schemi <strong>di</strong> trattamento: triplette <strong>di</strong> farmaci (gemcitabina o doxorubicina<br />
liposomale con carboplatino e paclitaxel) o combinazioni sequenziali <strong>di</strong> doppiette <strong>di</strong> farmaci<br />
(gemcitabina o topotecan con carboplatino seguite da carboplatino e paclitaxel) in pazienti con<br />
carcinoma epiteliale dell’ovaio. Il <strong>di</strong>segno adottato è il più efficiente per condurre una<br />
valutazione sistematica e simultanea <strong>di</strong> una serie <strong>di</strong> regimi chemioterapici promettenti, elimando<br />
la necessità <strong>di</strong> confronti in<strong>di</strong>retti tra stu<strong>di</strong>. lo stu<strong>di</strong>o è in corso negli Stati Uniti, in Australia,<br />
Nuova Zelanda ed in Europa, dove è coor<strong>di</strong>nato dal Me<strong>di</strong>cal Research Council in UK e<br />
dall’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri in Italia. In questo stu<strong>di</strong>o, attualmente concluso, sono state<br />
randomizzate circa 5000 pazienti.<br />
Carcinoma della cervice uterina<br />
Lo stu<strong>di</strong>o SNAP02 ha l’obiettivo <strong>di</strong> verificare l’attività e il profilo <strong>di</strong> tossicità della doppietta<br />
paclitaxel-cisplatino (tp) nei confronti del braccio <strong>di</strong> riferimento paclitaxel-ifosfamide-cisplatino<br />
(tip). obiettivo primario <strong>di</strong> questo stu<strong>di</strong>o è la valutazione dell'attività dei trattamenti proposti (tip<br />
vs tp), nelle pazienti affette da cervicocarcinoma epidermoide localmente avanzato, in termini <strong>di</strong><br />
risposte patologiche complete o parziali ottimali. Lo stu<strong>di</strong>o si è recentemente concluso ed è in<br />
fase <strong>di</strong> analisi statistica.<br />
Carcinoma del corpo dell’utero<br />
Lo stu<strong>di</strong>o Iliade è uno stu<strong>di</strong>o multicentrico a più protocolli sulla modulazione dell’isterectomia,<br />
sul ruolo della linfadenectomia e la terapia a<strong>di</strong>uvante nel trattamento del carcinoma<br />
dell’endometrio.<br />
Una coorte <strong>di</strong> pazienti affette da carcinoma endometriale operabile è seguita prospetticamente e<br />
a tali pazienti è offerto <strong>di</strong> partecipare a uno o più stu<strong>di</strong> controllati. Sono previsti quattro stu<strong>di</strong><br />
<strong>di</strong>versi: 1) chirurgia: confronto tra due <strong>di</strong>verse modalità <strong>di</strong> isterectomia (piver1 vs. piver2) con<br />
lo scopo <strong>di</strong> compararne il profilo rischio/ beneficio; 2) chirurgia: confronto tra utilizzo o meno<br />
della linfadenectomia per verificare il ruolo terapeutico della rimozione estensiva e sistematica<br />
dei lonfono<strong>di</strong> retroperitoneali 3) chemioterapia: pazienti con presenza <strong>di</strong> fattori <strong>di</strong> rischio<br />
elevato per la reci<strong>di</strong>va possono essere randomizzate a ra<strong>di</strong>oterapia+chemioterapia vs. sola<br />
ra<strong>di</strong>oterapia; 4) ra<strong>di</strong>oterapia: pazienti con presenza <strong>di</strong> fattori <strong>di</strong> rischio interme<strong>di</strong>o per la reci<strong>di</strong>va<br />
possono essere randomizzate a ra<strong>di</strong>oterapia vs. follow-up. Lo stu<strong>di</strong>o è ancora in corso.<br />
Carcinoma mammario<br />
Il laboratorio è responsabile del coor<strong>di</strong>namento e dell’analisi statistica <strong>di</strong> due stu<strong>di</strong>: il primo è<br />
uno stu<strong>di</strong>o osservazionale <strong>di</strong> pazienti con tumore della mammella operato. L’obiettivo è ottenere<br />
informazioni generali su prognosi e pattern <strong>di</strong> reci<strong>di</strong>va <strong>di</strong> queste pazienti osservate in ospedali<br />
italiani. inoltre si otterranno dati sulle modalità <strong>di</strong> sta<strong>di</strong>azione, trattamento e follow-up delle<br />
pazienti seguite in Italia.<br />
il secondo è un trial controllato sulla prima linea <strong>di</strong> trattamento <strong>di</strong> pazienti con tumore<br />
mammario metastatico. si confronterà il letrozolo da solo vs. letrozolo successivo ad una linea<br />
chemoterapica vs. il letrozolo concomitante ad una chemoterapia. Lo stu<strong>di</strong>o, internazionale, è<br />
attualmente in corso in Australia e in vari Paesi europei.<br />
MALT linfomi<br />
Il gruppo dei linfomi non Hodgkin MALT comprende un numero <strong>di</strong> linfomi extranodali B a<br />
basso grado con caratteristiche simili. Nonostante l’abbondante letteratura in materia, non sono<br />
ancora stati pubblicati stu<strong>di</strong> controllati per la <strong>di</strong>mostrazione <strong>di</strong> quale sia la terapia ottimale:<br />
tuttavia, la chemioterapia con agenti alchilanti può essere considerata al momento lo standard <strong>di</strong><br />
riferimento. Il Rituximab, un anticorpo monoclonale <strong>di</strong>retto contro l’antigene CD20 dei B<br />
29<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
linfociti, espresso nell’80% dei linfomi non Hodgkin, si è <strong>di</strong>mostrato efficace nel linfoma<br />
follicolare CD20 positivo e potrebe esserlo anche in altri linfomi. In questo stu<strong>di</strong>o, il piano <strong>di</strong><br />
trattamento consiste somministrazione orale <strong>di</strong> Chlorambucil. In uno dei due bracci <strong>di</strong><br />
randomizzione al Chlorambucil verrà associato Rituximab. Questo è il primo stu<strong>di</strong>o<br />
randomizzato che valuta se l’aggiunta del Rituzimab al Chlorambucil possa migliorare la<br />
prognosi dei linfomi MALT. Lo stu<strong>di</strong>o, internazionale, è coor<strong>di</strong>nato dall’ Oncology Institute of<br />
Southern Switzerland, Bellinzona. La randomizzazione dei 200 pazienti previsti e l’analisi<br />
statistica sono coor<strong>di</strong>nate dall’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri.<br />
Astensione dal fumo<br />
Il Bupropione, un farmaco antidepressivo, si è <strong>di</strong>mostrato efficace nella <strong>di</strong>sassuefazione dal<br />
fumo quando utilizzato all’interno <strong>di</strong> un programma intensivo <strong>di</strong> supporto motivazionale<br />
proposto da centri specializzati. Scopo <strong>di</strong> questo stu<strong>di</strong>o è <strong>di</strong> confermarne l’efficacia in un setting<br />
<strong>di</strong> me<strong>di</strong>cina <strong>di</strong> base, utilizzando una strategia semplificata <strong>di</strong> colloqui <strong>di</strong> supporto, senza<br />
l’intervento <strong>di</strong>retto <strong>di</strong> specialisti psicologi, con un <strong>di</strong>segno randomizzato in doppio cieco. La<br />
popolazione dello stu<strong>di</strong>o è composta da fumatori cronici <strong>di</strong> almeno 10 sigarette al giorno. La<br />
fase <strong>di</strong> trattamento dura 7 settimane con tre visite compresa quella iniziale <strong>di</strong> arruolamento in<br />
stu<strong>di</strong>o. La fase <strong>di</strong> follow-up dura un anno, con due visite. Le misure <strong>di</strong> esito utilizzate sono<br />
l’astinenza continuativa dal fumo e l’astinenza puntuale (almeno sette giorni <strong>di</strong> astinenza al<br />
momento dell’incontro); saranno inoltre valutate variazioni <strong>di</strong> peso, pressione arteriosa,<br />
frequenza car<strong>di</strong>aca, l’incidenza degli effetti collaterali. In totale sono previsti 585 pazienti. Lo<br />
stu<strong>di</strong>o ha coinvolto 508 pazienti e si prevede la chiusura del reclutamento entro aprile 2005.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca Translazionale e <strong>di</strong> Outcome in Oncologia<br />
Anemia nei pazienti anziani<br />
E’ stato attivato uno stu<strong>di</strong>o per valutare la prevalenza e l’impatto dell’anemia nei soggetti<br />
anziani con o senza tumore. Scopo principale dello stu<strong>di</strong>o è definire l’impatto dell’anemia su<br />
<strong>di</strong>versi in<strong>di</strong>catori <strong>di</strong> Outcome riportati dal paziente, ad esempio gli aspetti cognitivi e funzionali,<br />
valutare la qualità della vita e il tipo <strong>di</strong> trattamento farmacologico prescritto e il suo effetto sullo<br />
stato <strong>di</strong> salute. Sono stati contattati 7000 dei 9000 soggetti eleggibili residenti a Biella. Circa il<br />
40% dei soggetti ha partecipato alla prima fase che richiedeva un esame del sangue, mentre<br />
circa 400 soggetti hanno accettato <strong>di</strong> sottoporsi ad un’intervista vis-à-vis in una seconda fase, al<br />
fine <strong>di</strong> valutare il <strong>di</strong>fferente impatto dell’anemia. Lo stu<strong>di</strong>o, che è in fase <strong>di</strong> completamento, è<br />
condotto in collaborazione con il laboratorio <strong>di</strong> Neuropsichiatria Geriatrica (dr. Ugo Lucca).<br />
Il dolore nei malati <strong>di</strong> cancro<br />
Una percentuale variabile tra il 60% e l’80% dei pazienti con tumore in sta<strong>di</strong>o avanzato<br />
necessita <strong>di</strong> terapie del dolore. Contrariamente alla <strong>di</strong>sponibilità <strong>di</strong> efficaci trattamenti<br />
antidolorifici così come co<strong>di</strong>ficati dal WHO, parecchi stu<strong>di</strong> documentano uno scarso trattamento<br />
del dolore, soprattutto in Italia dove <strong>di</strong>versi ostacoli limitano l’uso <strong>di</strong> oppiacei. Al fine <strong>di</strong><br />
incrementare la qualità e l’efficacia delle terapie del dolore nei malati <strong>di</strong> cancro, è stato<br />
delineato un progetto <strong>di</strong> ricerca a <strong>di</strong>verse fasi. Lo stu<strong>di</strong>o implica tre attività: a) programmi<br />
informativi ed educativi per pazienti e me<strong>di</strong>ci sulla conoscenza e consapevolezza del tema<br />
dolore e sui relativi trattamenti, b) conduzione <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> valutazione farmacologica per meglio<br />
caratterizzare il profilo farmacocinetico degli oppioi<strong>di</strong>, c) valutazione attraverso uno stu<strong>di</strong>o<br />
clinico randomizzato delle <strong>di</strong>fferenti strategie farmacologiche su <strong>di</strong>fferenti misure <strong>di</strong> Outcome,<br />
nel contesto <strong>di</strong> un <strong>di</strong>segno “comprehensive cohort” che accresca la generalizzazione dello stu<strong>di</strong>o<br />
clinico. Le fasi a) e b) sono in fase <strong>di</strong> completamento, mentre l’avvio della fase c) è prevista per<br />
il prossimo anno.<br />
30<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Costruire un’alleanza strategica tra associazioni <strong>di</strong> pazienti e citta<strong>di</strong>ni e<br />
comunità me<strong>di</strong>co scientifica<br />
E’ stato varato un progetto riguardante un programma <strong>di</strong> ricerca che coinvolge i consumatori e<br />
le loro associazioni. Il progetto, che raggruppa in uno sforzo collaborativo l’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong><br />
Negri, il Centro Cochrane Italiano (www.cochrane.it ) e l’agenzia <strong>di</strong> giornalismo scientifico<br />
Za<strong>di</strong>g (www.za<strong>di</strong>g.it ) ha come obiettivo l’aumento della qualità e la quantità dell’informazione<br />
basata sull’evidenza per pazienti e citta<strong>di</strong>ni, al fine <strong>di</strong> incrementare il ruolo dei citta<strong>di</strong>ni nella<br />
ricerca e nelle decisioni cliniche. Al momento, un Comitato Scientifico multi<strong>di</strong>sciplinare è stato<br />
organizzato per <strong>di</strong>scutere esaurientemente i <strong>di</strong>fferenti sta<strong>di</strong> del progetto. Molti incontri sono stati<br />
organizzati e sono iniziate due fasi, in<strong>di</strong>pendenti ma complementari. La prima fase riguarda<br />
un’indagine che vuole valutare se e quanto le associazioni <strong>di</strong> pazienti e le loro federazioni siano<br />
coinvolte in programmi <strong>di</strong> ricerca e nelle attività educative con le società scientifiche e il<br />
sistema sanitario, la seconda fase prevede la messa a punto <strong>di</strong> un portale rivolto ai citta<strong>di</strong>ni e alle<br />
loro associazioni.<br />
Progetto EUROPA DONNA<br />
EUROPA DONNA raccoglie gli interessi delle donne europee e sviluppa iniziative con le<br />
autorità locali e nazionali, puntando l’attenzione sul bisogno <strong>di</strong> aumentare i programmi e i<br />
servizi sanitari essenziali nella lotta contro il tumore al seno. EUROPA DONNA raccoglie le<br />
esperienze e le conoscenze <strong>di</strong> 32 paesi europei impegnati nella lotta al tumore al seno,<br />
ri<strong>di</strong>stribuendo le informazioni acquisite. Le attività sono state finalizzate alla presentazione del<br />
“rapporto finale sul tumore al seno nell’unione europea”, all’organizzazione del 6° congresso<br />
pan-europeo dal titolo “uguali standard <strong>di</strong> qualità per tutti” e del terzo corso <strong>di</strong> aggiornamento<br />
rivolto a rappresentanti <strong>di</strong> associazioni. Inoltre è stata coor<strong>di</strong>nata dall’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri<br />
un’indagine sui membri delle associazioni facenti capo a EUROPA DONNA e a Reach to<br />
Recovery (questa associazione aiuta le donne colpite da tumore da più <strong>di</strong> 30 anni).<br />
Gruppo italiano <strong>di</strong> lavoro per la <strong>di</strong>agnosi anticipata (Gilda) nel tumore<br />
colorettale<br />
All’interno dello stu<strong>di</strong>o randomizzato multicentrico Gilda coor<strong>di</strong>nato dal laboratorio <strong>di</strong> ricerca<br />
clinica oncologica e in parte gestito dal laboratorio per la ricerca translazionale e <strong>di</strong> outcome in<br />
oncologia, è proseguita l’attività <strong>di</strong> monitoraggio della valutazione della qualità <strong>di</strong> vita dei<br />
pazienti. i dati raccolti saranno oggetto <strong>di</strong> analisi economico-sanitarie in accordo con il<br />
protocollo dello stu<strong>di</strong>o. sono stati randomizzati 980 pazienti e la chiusura dello stu<strong>di</strong>o è<br />
avvenuta alla fine del <strong>2004</strong>.<br />
Progetto M.A.I.A. (Multiple Access Input Assistant)<br />
Si tratta <strong>di</strong> un progetto <strong>di</strong> ricerca inserito nell'ambito dello stu<strong>di</strong>o del rapporto tra informatica e<br />
<strong>di</strong>sabilità, sviluppato presso l'<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri <strong>di</strong> Milano in collaborazione con il Politecnico<br />
<strong>di</strong> Milano e incentrato sullo stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> tutte le metodologie me<strong>di</strong>ante le quali un computer può<br />
venire in aiuto alla persona per il miglioramento della sua qualità della vita, intesa come<br />
comunicazione e come autonomia.<br />
In questo contesto per Disabilità si intende il senso più allargato del termine. Disabile è colui<br />
che è in <strong>di</strong>fficoltà a livello cognitivo, ma anche colui che pur essendo normodotato da questo<br />
punto <strong>di</strong> vista si trova in <strong>di</strong>fficoltà nel movimento e quin<strong>di</strong> nella comunicazione (<strong>di</strong>fficoltà a<br />
parlare o a scrivere). Trova posto nel progetto lo stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> sistemi in ausilio alla comunicazione<br />
per l'anziano quando associabile funzionalmente al <strong>di</strong>sabile motorio, piuttosto che per il <strong>di</strong>sabile<br />
motorio temporaneo a causa <strong>di</strong> un trauma.<br />
Presupposto per il progetto è l'assunzione <strong>di</strong> poter utilizzare un comune elaboratore come mezzo<br />
per facilitare la comunicazione grazie alla sua versatilità e alla sua <strong>di</strong>ffusione sempre più<br />
capillare.<br />
31<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Tutto il progetto prevede come obiettivi la realizzazione <strong>di</strong> software libero e <strong>di</strong>stribuibile<br />
gratuitamente oltre che la pubblicazioni <strong>di</strong> schemi per la realizzazione <strong>di</strong> ausili a basso costo.<br />
Non ultimo è il tentativo <strong>di</strong> proporre una metodologia organica per affrontare il tema della<br />
comunicazione nel <strong>di</strong>sabile motorio lontana da politiche <strong>di</strong> mercato.<br />
Altre attività<br />
Nel corso del <strong>2004</strong> sono progre<strong>di</strong>te altre attività riguardo la ricerca translazionale in oncologia.<br />
L’attenzione si è sviluppata sul processo <strong>di</strong> trasferimento delle informazioni dalla ricerca<br />
preclinica alla pratica clinica. La maggior parte delle attività ha implicato la raccolta <strong>di</strong><br />
materiale biologico e <strong>di</strong> dati da esso derivati e la loro archiviazione in database complessi;<br />
inoltre sono state sviluppate altre applicazioni informatiche per rendere possibile il controllo <strong>di</strong><br />
numerosi dati sia biologici sia clinici rispettando norme e regole sulla sicurezza e riservatezza.<br />
tali attività sono state condotte in collaborazione con il laboratorio <strong>di</strong> epidemiologia dell’<strong>Istituto</strong><br />
<strong>Mario</strong> Negri, il Laboratorio <strong>di</strong> Farmacogenomica tumorale presso il Fondo Edo Tempia <strong>di</strong><br />
Biella e il Sendo <strong>di</strong> Milano.<br />
32<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
DIPARTIMENTO AMBIENTE E SALUTE<br />
PERSONALE<br />
Capo Dipartimento Roberto FANELLI, Dr.Sci.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biochimica Analitica<br />
Capo Laboratorio Chiara CHIABRANDO, Dr.Sci.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Chimica e Tossicologia dell’Ambiente<br />
Capo Laboratorio Emilio BENFENATI, Dr.Chim.<br />
Unità <strong>di</strong> Igiene Industriale e Ambientale<br />
Capo Unità Marco LODI Per.Chim.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Spettrometria <strong>di</strong> Massa<br />
Capo Laboratorio Enrico DAVOLI, Dr.Sci.Prod.Anim.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Tossicologia Molecolare<br />
Capo Laboratorio Luisa AIROLDI, Dr.Farm.<br />
Unità <strong>di</strong> Bioin<strong>di</strong>catori Proteici e Genetici<br />
Capo Unità Roberta PASTORELLI Dr.Sci.Biol.<br />
Unità del Dipartimento<br />
Unità <strong>di</strong> Tossicologia degli Alimenti<br />
Capo Unità Ettore ZUCCATO, Dr.Med.Chir.<br />
33<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
L’attività del Dipartimento Ambiente e Salute è de<strong>di</strong>cata allo stu<strong>di</strong>o dei fattori ambientali<br />
rilevanti per la salute umana. Le principali linee <strong>di</strong> ricerca riguardano la rilevazione <strong>di</strong> fattori<br />
tossici nell’ambiente, la valutazione dell’esposizione umana e dei rischi per la salute, ed infine<br />
lo stu<strong>di</strong>o dei meccanismi <strong>di</strong> tossicità degli inquinanti.<br />
La valutazione della presenza <strong>di</strong> inquinanti nell’ambiente riguarda sia sostanze ben conosciute,<br />
come <strong>di</strong>ossine e PCB, che nuove classi <strong>di</strong> contaminanti “non convenzionali” (interferenti<br />
endocrini, composti “naturali” potenzialmente tossici, e farmaci <strong>di</strong>ffusi nell'ambiente a seguito<br />
dell’utilizzo umano o veterinario). Per la rilevazione <strong>di</strong> queste sostanze vengono sviluppate ed<br />
utilizzate tecniche analitiche sofisticate basate sulla spettrometria <strong>di</strong> massa.<br />
Il Dipartimento è attivo nella valutazione dell’esposizione umana ai composti tossici presenti<br />
nell'ambiente e negli alimenti. La <strong>di</strong>eta, infatti, è la principale fonte <strong>di</strong> inquinanti <strong>di</strong> interesse<br />
prioritario (PCB, <strong>di</strong>ossine ed altri interferenti endocrini).<br />
La valutazione del rischio associato a reali situazioni <strong>di</strong> contaminazione ambientale, ha assunto<br />
<strong>di</strong> recente grande importanza. Per rispondere alla crescente richiesta d’informazione, il<br />
Dipartimento svolge un'attività <strong>di</strong> Analisi <strong>di</strong> Rischio tossicologico ed ecotossicologico, basata<br />
su stu<strong>di</strong> in campo e modelli previsionali <strong>di</strong> tossicità.<br />
Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> epidemiologia molecolare vengono utilizzati per identificare fattori genetici e/o<br />
ambientali capaci <strong>di</strong> influenzare il rischio per la salute. Si cercano inoltre nuovi “in<strong>di</strong>catori<br />
biologici” utili all’identificazione <strong>di</strong> soggetti a rischio, per poi in<strong>di</strong>viduare appropriate strategie<br />
<strong>di</strong> prevenzione.<br />
Nel Dipartimento è stata sviluppata una piattaforma tecnologica avanzata <strong>di</strong> proteomica, per<br />
identificare le proteine presenti in un comparto biologico in <strong>di</strong>verse con<strong>di</strong>zioni. Questo<br />
approccio in ambito tossicologico è relativamente nuovo, e può contribuire ad identificare i<br />
bersagli molecolari degli agenti tossici, e nuovi in<strong>di</strong>catori <strong>di</strong> tossicità o <strong>di</strong> patologia, anche legati<br />
agli effetti collaterali dei farmaci.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Il polimorfismo <strong>di</strong> enzimi coinvolti nella riparazione del DNA mo<strong>di</strong>fica la presenza <strong>di</strong> addotti<br />
del benzo(a)pirene nel DNA linfocitario umano.<br />
La formazione <strong>di</strong> addotti del 4-aminobifenile nel DNA <strong>di</strong> tumori della vescica aumenta con il<br />
grado <strong>di</strong> invasività del tumore ed è più elevata nei fumatori.<br />
Valori <strong>di</strong> riferimento delle frequenze alleliche e genotipiche <strong>di</strong> <strong>di</strong>versi geni metabolici in una<br />
popolazione <strong>di</strong> 15000 soggetti controllo.<br />
Il polimorfismo del CYP1A1 mo<strong>di</strong>fica il rischio <strong>di</strong> tumore del polmone.<br />
Gli addotti al DNA linfocitario sono mo<strong>di</strong>ficati in piccola misura dai polimorfismi dei geni<br />
coinvolti nel metabolismo della 2-amino-1-metil-6-fenilimidazo[4,5-b]-piri<strong>di</strong>na.<br />
Identificazione del polimorfismo del gene CYP2C9 come causa <strong>di</strong> grave risposta avversa alla<br />
fenitoina.<br />
Caratterizzazione del profilo <strong>di</strong> proteine epatiche in ratti esposti a TCDD.<br />
Caratterizzazione del profilo <strong>di</strong> proteine dell'osso in un modello murino <strong>di</strong> osteoporosi.<br />
Sviluppo <strong>di</strong> nuovi meto<strong>di</strong> in spettrometria <strong>di</strong> massa per la misura selettiva <strong>di</strong> desametasone<br />
plasmatico, ed inquinanti ad attività endocrina, compresi i loro coniugati.<br />
Una procedura automatizzata, standar<strong>di</strong>zzata e riproducibile per ottenere dei modelli QSAR.<br />
Cancerogenicità, mutagenicità e tossicità acuta nel mammifero, e tossicità negli organismi<br />
acquatici possono essere predetti da modelli con utilizzo <strong>di</strong> reti neurali, algoritmi genetici, data<br />
mining, fuzzy logic.<br />
34<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Una nuova metodologia per la caratterizzazione degli odori ambientali, che permette <strong>di</strong><br />
identificare, in situazioni complesse, la fonte delle emissioni odorigene o il processo<br />
responsabile.<br />
Il consumo alimentare <strong>di</strong> quantitativi me<strong>di</strong>o-elevati <strong>di</strong> pesce può causare il superamento dei<br />
limiti <strong>di</strong> sicurezza per l’assunzione giornaliera <strong>di</strong> PCB e sostanze <strong>di</strong>ossino-simili.<br />
Uno stesso alimento può contenere concentrazioni <strong>di</strong> PCB e sostanze <strong>di</strong>ossino-simili <strong>di</strong>verse in<br />
<strong>di</strong>fferenti paesi dell’UE.<br />
Dimostrazione dei rischi associati all’inquinamento ambientale da farmaci.<br />
Identificazione <strong>di</strong> specifiche leggi che regolano l’inquinamento ambientale da farmaci (carico<br />
ambientale, bilancio <strong>di</strong> massa).<br />
ARPA Veneto<br />
ASL <strong>di</strong> Brescia<br />
CNR – IRSA<br />
CSPO-Firenze<br />
CSRA-Asti<br />
Fondazione 'S. Maugeri'<br />
Fondazione ISI, Torino<br />
<strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità<br />
Ministero dell'Ambiente<br />
Politecnico <strong>di</strong> Milano<br />
Politecnico <strong>di</strong> Torino<br />
Provincia <strong>di</strong> Vercelli<br />
Provincia Pordenone<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Cagliari<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Genova<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Napoli "Federico II"<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Palermo<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Roma "La Sapienza"<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Torino<br />
Università dell’Insubria, Varese<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
BASF Agricultural Centre, Limburgerhorf, Germany<br />
Central Science Laboratory, York, UK<br />
Danish Institute of Agricultural Sciences, Research Centre Foulum, Tjele, Denmark<br />
Department of Analytical and Pharmaceutical Chemistry, The Royal Danish School of<br />
Pharmacy, Denmark<br />
Department of Anatomy and Cell Biology, University of Oulu, Oulu, Finland<br />
Department of Analytical and Pharmaceutical Chemistry, The Royal Danish School of<br />
Pharmacy, Denmark.<br />
Department of Computer Science and Enginnering, University of Galati, Romania<br />
Department of Electrical and Computer Engineering, University of Patras, Greece<br />
Department of Environmental Health, National Public Health Institute, Kuopio, Finland<br />
35<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Department of Inland Fisheries, Institute of Freshwater Ecology and Inland Fisheries, Berlin,<br />
Germany<br />
Department of Molecular Biology, University of Bergen, Bergen, Norway<br />
Department of Organic Chemistry, Universidad de Ca<strong>di</strong>z, Spain<br />
Division of Endocrinology, Department of Internal Me<strong>di</strong>cine, Sahlgrenska University Hospital,<br />
Goteborg, Sweden<br />
Environmental Chemistry, IIQAB-CSIC, Barcelona, Spain<br />
Environmental Hygiene and Chemistry Department, Institute of Environmental Me<strong>di</strong>cine and<br />
Hospital Epidemiology, University of Freiburg, Germany<br />
Environmental Hygiene and Chemistry Department, Institute of Environmental Me<strong>di</strong>cine and<br />
Hospital Epidemiology, University of Freiburg, Germany<br />
Faculté de Mé<strong>di</strong>cine et de Pharmacie, Université de Mons-Hainaut, Mons, Belgium<br />
Faculty of Veterinary Me<strong>di</strong>cine, Utrecht University, Utrecht, The Netherlands<br />
Forschungzentrum Jülich Gmbh, Jülich, Germany<br />
Gruppo Collaborativo sulla Suscettibilità Genetica ai Cancerogeni Ambientali (GSEC), Milano,<br />
Italia<br />
Institute of Environmental Me<strong>di</strong>cine. Karolinska Institute, Stockholm, Sweden<br />
Institute of Phytome<strong>di</strong>cine, Biological Control, Horticulture and Nematology, Wien, Austria<br />
Institute of Soil Science and Plant Cultivation, Pulawy, Poland<br />
Interuniversitaeres Forchunginstitut fuer Agrarbiotechnologie, Tulln, Austria<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Chimica <strong>di</strong> São Carlos, Università <strong>di</strong> São Paulo, Brasile<br />
KnowledgeMiner Software, Berlin, Germany<br />
Laboratory of Chemometrics & Bioinformatics, University of Orléans, Orléans, France<br />
Lithuanian Institute of Agricultrure, Vilnius, Lithuania<br />
Liverpool John Moores University, Liverpool, United Kingdom<br />
National Institute of Chemistry, Kemijski Institut Ljubljana, Ljubljana, Slovenia<br />
Natural Resources Research Institute, University of Minnesota, Duluth, MN<br />
Pesticide Safety Directorate, York, UK<br />
Plant Protection Institute, Hungarian Academy of Sciences, Budapest, Hungary<br />
School of Biome<strong>di</strong>cal Sciences, University of Ulster, Coleraine, Northern Ireland<br />
Syngenta Crop Protection AG, Basel, Switzerland<br />
UFZ Leipzig, Germany<br />
University of Tartu, Tartu, Estonia<br />
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Journal of Environmental Science and Health, Part B (Emilio Benfenati), Journal of<br />
Environmental Science and Health, Part C (Emilio Benfenati), International Journal of<br />
Computational Intelligence (Emilio Benfenati), International Journal of Information Technology<br />
(Emilio Benfenati), International Journal of Signal Processing (Emilio Benfenati).<br />
36<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
IRFMN<br />
Analytica Chimica Acta, Analytical Bioanalytical Chemistry, Chemosphere, Current Organic<br />
Chemistry, Current Analytical Chemistry, Environmental Science & Technology, European<br />
Journal of Cancer, International Journal of Biological Markers, Internet Electronic Journal<br />
Molecular Design, Quantitative Structure Activity Relationship, Trends in Biotechnology,<br />
Water Research<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
CCPF – Commissione Consultiva Prodotti Fitosanitari (Ministero della Salute, Ministero<br />
dell'Ambiente)<br />
CCTN – Commissione Consultiva Tossicologica Nazionale (Ministero della Salute)<br />
ECCO – European Commission Coor<strong>di</strong>nation<br />
EFSA – European Food Safety Agency<br />
EMEA – European Agency for the Evaluation of Me<strong>di</strong>cinal products.<br />
IGQ - Commissione Ambiente e Sicurezza<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
Emilio Benfenati ha organizzato il workshop: Data, Algorithms, and Results in QSAR<br />
(DARQ’<strong>2004</strong>), Milano, 2-5 novembre <strong>2004</strong>.<br />
Emilio Benfenati ha organizzato il simposio: Knowledge Exploration in Life Science<br />
Informatics<br />
<strong>2004</strong> (KELSI’<strong>2004</strong>), Milano, 25-26 novembre <strong>2004</strong>.<br />
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
DIPARTIMENTO<br />
Italian Proteome Society, 1st Congress, 27-29 May <strong>2004</strong>, Verona, Italy<br />
10th International Congress of Toxicology, 11-15 July, <strong>2004</strong>, Tampere, Finland<br />
2nd Italian Human Proteome Organization National Meeting, 16-18 September <strong>2004</strong>, Chieti,<br />
Italy<br />
Proteomix, VI Incontro, 25-26 November <strong>2004</strong>, Camogli (GE), Italy<br />
Second European Allelopathy Symposium, 3-5 giugno <strong>2004</strong>, Pulawy, Poland<br />
22nd Conference of European Comparative Endocrinologists, 24-28 agosto <strong>2004</strong>, Uppsala,<br />
Sweden<br />
11th International Workshop on Quantitative Structure-Activity Relationships in Environmental<br />
Sciences (QSAR <strong>2004</strong>), 9-13 maggio <strong>2004</strong>, Liverpool, UK<br />
14 SETAC Annual meeting, 18-22 aprile <strong>2004</strong>, Prague, Czech Republic<br />
52nd American Society for Mass Spectrometry Conference, Nashville, TE, USA<br />
Dioxin <strong>2004</strong>, Berlin 6-10, <strong>2004</strong>, Germany<br />
SETAC (Society of Environmental Toxicology) Europe 14TH Annual Meeting, Prague, April<br />
37<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
17-22, <strong>2004</strong>, Czech Republic<br />
CIESM workshop: Novel contaminants and pathogens in coastal waters. Neuchatel, 12-15 May<br />
<strong>2004</strong>, Switzerland<br />
Workshop: Toward a monitoring network. A technical workshop for phamaceuticals and<br />
personal care products in the environment. Niagara-on-the-Lake, March 28-30, <strong>2004</strong>, Ontario,<br />
Canada<br />
Workshop: Priority hazardous substances and emerging contaminants of the aquatic<br />
environment. Rome, Dicember 15, <strong>2004</strong>, Italy<br />
Convegno: Biotecnologie vegetali, la parola alla ricerca. Cremona, Gennaio 30, <strong>2004</strong>, Italy<br />
Giornata <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o: OGM <strong>2004</strong>, prospettive <strong>di</strong> legislazione e ricerca. Milano Marzo 25, <strong>2004</strong>,<br />
Italy<br />
Workshop: Farmaci nell’ambiente acquatico. ISS, Roma. Aprile 26, <strong>2004</strong>, Italy<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
ACEGAS S.p.A, Trieste<br />
Associazione Italiana Ricerca sul Cancro<br />
Centro <strong>di</strong> Informazione sul PVC, Milano<br />
Comune <strong>di</strong> Ternate<br />
Consorzio Quadrifoglio S.p.A.<br />
CSRA<br />
ECODECO, Pavia<br />
European Commission (GEN-AIR; COMET; IMAGETOX; MEBFOOD; FATEALLCHEM;<br />
DEMETRA; EUFRAM; OpenMolGRID; COST 282; EASYRING; HERBICBIOREM;<br />
BONETOX, CASCADE, HAIR)<br />
Ferrero, Alba (Cuneo)<br />
FIAT Auto S.p.A., Torino<br />
Fondazione Italo Monzino, Milano<br />
Ministero dell'Istruzione, dell'Università e della Ricerca, Italia<br />
Ministero della Salute – Ricerca Finalizzata 2002<br />
Ministero della Salute, Italia<br />
Ministero dell'Ambiente, Italia<br />
Provincia <strong>di</strong> Pordenone<br />
Provincia <strong>di</strong> Vercelli<br />
SO.GE.NU.S. S.p.A.<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Airol<strong>di</strong> L, Magagnotti C, Pastorelli R, Fanelli R<br />
Enzyme polymorphisms influencing the metabolism of heterocyclic aromatic amines<br />
J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci <strong>2004</strong>; 802: 175-181<br />
Gormally E, Hainaut P, Carboux E, Airol<strong>di</strong> L, Autrup H, Malaveille C, Dunning A, Garte S, Matullo G, Overvad K,<br />
Tjonneland A, Clavel-Chapelon F, Boffetta P, Boeing H, Trichopoulou A, Palli D, Krogh V, Tumino R, Panico S,<br />
Bueno-De-Mesquita H B, Peeters P H, Lund E, Gonzalez C A, Martinez C, Dorronsoro M, Barricarte A, Tormo M J,<br />
Quiros J R, Berglund G, Hallmans G, Day N E, Key T J, Veglia F, Peluso M, Norat T, Saracci R, Kaaks R, Riboli E,<br />
Vineis P<br />
38<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Amount of DNA in plasma and cancer risk: a prospective study<br />
Int J Cancer <strong>2004</strong>; 111: 746-749<br />
Vineis P, Veglia F, Anttila S, Benhamou S, Clapper M L, Dolzan V, Ryberg D, Hirvonen A, Kremers P, Le<br />
Marchand L, Pastorelli R, Rannug A, Romkes M, Schoket B, Strange R C, Garte S, Taioli E<br />
CYP1A1, GSTM1 and GSTT1 polymorphisms and lung cancer: a pooled analysis of gene-gene interactions<br />
Biomarkers <strong>2004</strong>; 9: 298-305<br />
Benfenati E, Mariani G, Lo<strong>di</strong> M, Reitano G, Fanelli R<br />
Is bioexsiccation releasing <strong>di</strong>oxins?<br />
Organohalogen Compounds <strong>2004</strong>; 66: 955-961<br />
Benfenati E, Barcelò D, Johnson I, Galassi S, Levsen K<br />
Emerging organic contaminats in leachates from industrial waste landfills and industrial effluent,<br />
Trends in Analytical Chemistry <strong>2004</strong>; 22: 757-765<br />
Mazzatorta P, Benfenati E, Lorenzini P, Vighi M<br />
A QSAR approach to evaluate pesticide toxicity: an overview of modern local classification techniques<br />
Journal of Chemical Information and Computer Science <strong>2004</strong>; 44: 105-112<br />
IRFMN<br />
Toropov AA, Benfenati E<br />
QSAR modelling of aldehyde toxicity by means of optimisation of correlation weights of nearest neighbouring codes<br />
J. Molecular Struct. (THEOCHEM) <strong>2004</strong>; 676: 165-169<br />
Toropov AA, Benfenati E<br />
QSAR modelling of aldehyde toxicity against a protozoan, Tetrahymena pyriformis by optimization of correlation<br />
weights of nearest neighboring codes<br />
J. Molecular Struct. (THEOCHEM) <strong>2004</strong>; 679: 225-228<br />
Roncaglioni A, Benfenati E, Boriani E, Clook M<br />
A protocol to select high quality datasets of ecotoxicity values for pesticides<br />
J Environ. Sci. Heal.-Part B <strong>2004</strong>; B39: 641-652<br />
Roncaglioni A, Novic M, Vracko M, Benfenati E<br />
Classification of potential endocrine <strong>di</strong>srupters on the basis of molecular structure using nonlinear modelling method,<br />
J. Chem. Inf. Comput. Sci. <strong>2004</strong>; 44: 300-309<br />
Gallani B, Boix A, Di Domenico A, Fanelli R<br />
Occurrence of ndl-PCB in food and feed in Europe<br />
Organohalogen Compounds <strong>2004</strong>; 66: 3610-3618<br />
Fattore E, Chu I, Sand S, Fanelli R, Falk-Filippson A, Hakansson H<br />
Dose-response assessment using the benchmark dose approach of changes in hepatic ROD activity for in<strong>di</strong>vidual<br />
polychlorinated biphenyl congeners<br />
Organohalogen Compounds <strong>2004</strong>; 66: 3402-3407<br />
Lalumera G M, Calamari D, Galli P, Castiglioni S, Crosa G, Fanelli R<br />
Preliminary investigation on the environmental occurrence and effects of antibiotics used in acquaculture in Italy<br />
Chemosphere <strong>2004</strong>; 54: 661-668<br />
Turci R, Mariani G, Marinaccio A, Balducci Clau<strong>di</strong>o, Bettinelli M, Fanelli R, Nichetti S, Minoia C<br />
Critical evaluation of a high-throughput analytical method for polychlorinated biphenyls in human serum: Which<br />
detector for the establishment of the reference values?<br />
Rapid Commun Mass Spectrom <strong>2004</strong>; 18: 421-434<br />
Smiesko M, Benfenati E<br />
Pre<strong>di</strong>ctive Models for Aquatic Toxicity of Aldehydes Designed on Various Model Chemistries Running title:<br />
Pre<strong>di</strong>ctive Models for Toxicity of Aldehydes,<br />
J. Chem. Inf. Comp. Sci. <strong>2004</strong>; 44: 976-984<br />
Lemke F, Mulle JAM, Benfenati E<br />
Modelling and pre<strong>di</strong>ction of toxicity of environmental pollutants<br />
Lecture Notes in Artificial Intelligence. <strong>2004</strong>; 3303, 221-234<br />
39<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Benfenati E<br />
Procedures to standar<strong>di</strong>ze data and compare models<br />
Lecture Notes in Artificial Intelligence <strong>2004</strong>; 3303, 235-248<br />
Gini G, Craciun MV, Konig C, Benfenati E<br />
Combining unsupervised and supervised artificail neural networks to pre<strong>di</strong>ct aquatic toxicity<br />
Journal of Chemical Information and Modeling <strong>2004</strong>; 44: 1897-1902<br />
IRFMN<br />
Castiglioni S, Fanelli R, Calamari D, Bagnati R, Zuccato E<br />
Methodological approaches for studying pharmaceuticals in the environment by comparing pre<strong>di</strong>cted and measured<br />
concentrations in River Po, Italy<br />
Regulatory Toxicology and Pharmacology <strong>2004</strong>; 39: 25-32.<br />
Zuccato E, Fanelli R, Fattore E, Val<strong>di</strong>celli L<br />
Levels of PCBs in salmon samples from Europe<br />
Organohalogen Compounds <strong>2004</strong>; 66: 1998-2003.<br />
Andreozzi R, Caprio V, Ciniglia C, de Champdoré M, Lo Giu<strong>di</strong>ce R, Marotta R, Zuccato E<br />
Antibiotics in the environment. Occurrence in Italian STPs, fate and preliminary assessment on algal toxicity of<br />
amoxicillin<br />
Environmental Science Technology <strong>2004</strong>, 38 : 6832-6838.<br />
Riservato M, Rolla A, Davoli E<br />
An isotopic <strong>di</strong>lution approach for 1,3 buta<strong>di</strong>ene tailpipe emissions and ambient air monitoring<br />
Rapid Commun Mass Spectrom <strong>2004</strong>; 18: 399-404<br />
EFSA Scientific Panel<br />
Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission to assess the<br />
health risks to consumers associated with exposure to organotins in foodstuffs<br />
The EFSA Journal <strong>2004</strong>; 102: 1-119<br />
EFSA Scientific Panel<br />
Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in Food Chain on a request from the Commission related to<br />
ochratoxin A (OTA) as undesirable substance in animal feed<br />
The EFSA Journal <strong>2004</strong>; 101: 1-36<br />
EFSA Scientific Panel<br />
Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission related to<br />
Fluorine as undesirable substance in animal feed<br />
The EFSA Journal <strong>2004</strong>; 100: 1-22<br />
EFSA Scientific Panel<br />
Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission related to the<br />
toxicity of fishery products belonging to the family of Gempylidae<br />
The EFSA Journal <strong>2004</strong>; 92: 1-5<br />
EFSA Scientific Panel<br />
Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission related to<br />
Zearalenone as undesirable substance in animal feed<br />
The EFSA Journal <strong>2004</strong>; 89: 1-35<br />
EFSA Scientific Panel<br />
Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission related to<br />
Deoxynivalenol (DON) as undesirable substance in animal feed<br />
The EFSA Journal <strong>2004</strong>; 73: 1-41<br />
EFSA Scientific Panel<br />
Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission related to<br />
cadmium as undesirable substance in animal feed<br />
The EFSA Journal <strong>2004</strong>; 72: 1-24<br />
EFSA Scientific Panel<br />
40<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission related to lead<br />
as undesirable substance in animal feed<br />
The EFSA Journal <strong>2004</strong>; 71: 1-20<br />
EFSA Scientific Panel<br />
Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission related to<br />
Aflatoxin B1 as undesirable substance in animal feed<br />
The EFSA Journal <strong>2004</strong>; 39: 1-27<br />
EFSA Scientific Panel<br />
Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission related to<br />
mercury and methylmercury in food<br />
The EFSA Journal <strong>2004</strong>; 34: 1-14<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI DIVULGATIVE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Zuccato E, Fanelli R.<br />
Processo ai cibi OGM.<br />
Le Scienze <strong>2004</strong>, 425 (gennaio): 56-63.<br />
Davoli E<br />
Spettrometria <strong>di</strong> massa nella determinazione in-situ <strong>di</strong> inquinanti<br />
Laboratorio 2000 <strong>2004</strong>; 18: 8-9<br />
ALTRE PRODUZIONI EDITORIALI PUBBLICATE NEL CORSO DEL<br />
<strong>2004</strong><br />
J. A. Lopez, E. Benfenati, W. Dubitzky<br />
Knowledge Exploration in Life Science Informatics. Lecture Notes in Artificial Intelligence, 3303. pp1-248.<br />
Springer, Berliln, <strong>2004</strong><br />
Alexanian Arthur, Sacchi G, Davoli E<br />
Gas collection efficiency in a municipal solid waste landfill. A case study. (Cd-rom version)<br />
ISWA World Environment Congress, Rome, October 17-21, <strong>2004</strong>. <strong>2004</strong><br />
Zuccato E.<br />
Pre<strong>di</strong>ction of the environmental load of pharmaceuticals contaminating the marine environment. A case for the<br />
Adriatic Sea. CIESM Workshop Monographs n° 26. CIESM , Monaco, <strong>2004</strong>: 51-54.<br />
Zuccato E, Castiglioni S, Fanelli R, Bagnati R and Calamari D.<br />
Pharmaceuticals in the environment: changes in presence and concentrations of pharmaceuticals for human use in<br />
Italy. In: Pharmaceuticals in the environment. Second e<strong>di</strong>tion. K Kummered Ed. Springer-Verlag, Berlin, <strong>2004</strong>.<br />
Zuccato E, Castiglioni S, Fanelli R, Bagnati R Reitano G and Calamari D.<br />
Risk related to the <strong>di</strong>scharge of pharmaceuticals in the environment: further research is needed. In: Pharmaceuticals<br />
in the environment. Second e<strong>di</strong>tion. K Kummered Ed. Springer-Verlag, Berlin, <strong>2004</strong>.<br />
41<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Tossicologia Molecolare<br />
IRFMN<br />
Proteomica in tossicologia<br />
Le proteine svolgono tutte le funzioni essenziali della cellula e l’analisi globale della loro<br />
espressione in cellule, tessuti e flui<strong>di</strong> biologici in seguito a determinati stimoli, rappresenta un<br />
potente mezzo per identificare nuovi in<strong>di</strong>catori <strong>di</strong> risposta. In particolare, gli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> proteomica<br />
del laboratorio hanno lo scopo <strong>di</strong> caratterizzare le mo<strong>di</strong>ficazioni del profilo proteico indotte da<br />
composti tossici ambientali in vari compartimenti biologici e in <strong>di</strong>verse con<strong>di</strong>zioni sperimentali.<br />
I composti oggetto <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o includono interferenti endocrini, estrogeni, o teratogeni ambientali.<br />
La modulazione dei profili proteici è messa in relazione con eventuali cambiamenti funzionali<br />
che determinano l'effetto tossico. Mo<strong>di</strong>ficazioni qualitative e quantitative del proteoma in<br />
risposta ad esposizione a composti tossici ambientali, o in particolari con<strong>di</strong>zioni patologiche,<br />
sono analizzate anche nell’uomo e focalizzate su plasma e urine, allo scopo <strong>di</strong> identificare<br />
eventuali in<strong>di</strong>catori che possano contribuire a chiarire il meccanismo d’azione <strong>di</strong> composti<br />
tossici o che abbiano significato <strong>di</strong>agnostico o prognostico. La tecnica maggiormente impiegata<br />
in laboratorio per l’analisi del proteoma è l’elettroforesi bi<strong>di</strong>mensionale. Dopo visualizzazione<br />
delle proteine me<strong>di</strong>ante opportuni protocolli <strong>di</strong> colorazione, l’analisi d’immagine dei gels<br />
ottenuti in <strong>di</strong>verse con<strong>di</strong>zioni, permette la caratterizzazione <strong>di</strong>fferenziale dei profili proteici.<br />
L'identificazione delle proteine isolate e sottoposte a <strong>di</strong>gestione con proteasi specifiche, è<br />
ottenuta me<strong>di</strong>ante spettrometria <strong>di</strong> massa (MALDI-TOF-MS, HPLC-ESI-MS/MS) accoppiata<br />
all’uso <strong>di</strong> banche dati. In alternativa all’uso dell’elettroforesi bi<strong>di</strong>mensionale, le miscele<br />
proteiche sono <strong>di</strong>gerite con proteasi specifiche, i pepti<strong>di</strong> ottenuti vengono separati me<strong>di</strong>ante<br />
cromatografia liquida bi<strong>di</strong>mensionale e le proteine identificate me<strong>di</strong>ante spettrometria <strong>di</strong> massa.<br />
Epidemiologia Molecolare<br />
L'attività del laboratorio è focalizzata sulla misura degli in<strong>di</strong>catori biologici usati per<br />
determinare l’esposizione umana a composti tossici ambientali. In particolare viene stu<strong>di</strong>ata la<br />
formazione <strong>di</strong> addotti al DNA o alle proteine del sangue <strong>di</strong> alcuni cancerogeni ambientali<br />
appartenenti alla classe degli idrocarburi policiclici aromatici, delle ammine aromatiche, o delle<br />
ammine aromatiche eterocicliche in soggetti esposti a tali composti presenti nell’ambiente o<br />
nella <strong>di</strong>eta. L'analisi quantitativa degli addotti è eseguita utilizzando la gas cromatografia o la<br />
cromatografia liquida accoppiate alla spettrometria <strong>di</strong> massa. I livelli <strong>di</strong> addotti sono messi in<br />
relazione alla presenza <strong>di</strong> polimorfismi <strong>di</strong> geni che co<strong>di</strong>ficano per enzimi coinvolti nel<br />
metabolismo dei composti in esame. I polimorfismi genetici stu<strong>di</strong>ati sono variazioni a livello <strong>di</strong><br />
un singolo nucleotide (single nucleotide polymorphisms, SNPs). La misura degli SNPs è basata<br />
sull'analisi dei polimorfismi dei frammenti <strong>di</strong> restrizione (RFLP) dopo amplificazione <strong>di</strong><br />
specifiche sequenze nucleoti<strong>di</strong>che dei geni in esame me<strong>di</strong>ante la reazione a catena della<br />
polimerasi (PCR).<br />
L'importanza dei fattori genetici nel determinare la suscettibilità umana agli agenti cancerogeni<br />
ambientali, ha promosso una cooperazione a livello internazionale avente lo scopo <strong>di</strong> reperire<br />
dati <strong>di</strong> riferimento sulla frequenza dei polimorfismi genetici più comuni per gli enzimi<br />
metabolici in popolazioni <strong>di</strong> controllo.<br />
Farmacogenetica<br />
I singoli in<strong>di</strong>vidui rispondono alle terapie farmacologiche in modo eterogeneo. Lo stu<strong>di</strong>o del<br />
genoma umano ha permesso <strong>di</strong> stabilire che buona parte <strong>di</strong> questa variabilità è determinata<br />
geneticamente. La conoscenza delle basi genetiche del metabolismo, trasporto, eliminazione e<br />
42<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
meccanismo d'azione <strong>di</strong> un farmaco dovrebbe renderne possibile la scelta e la determinazione<br />
del dosaggio in relazione alle capacità in<strong>di</strong>viduali <strong>di</strong> metabolizzare, rispondere ed eliminare il<br />
composto. Le variazioni in<strong>di</strong>viduali nella risposta ai farmaci sono determinate me<strong>di</strong>ante l'analisi<br />
degli SNPs. Lo stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> questi in<strong>di</strong>catori è <strong>di</strong> grande utilità, non solo per determinare la corretta<br />
dose <strong>di</strong> farmaco, ma anche e soprattutto per prevenire reazioni avverse gravi.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biochimica Analitica<br />
Identificazione e caratterizzazione <strong>di</strong> proteine me<strong>di</strong>ante spettrometria <strong>di</strong><br />
massa<br />
Il laboratorio è impegnato nella messa a punto <strong>di</strong> <strong>di</strong>verse tecniche analitiche e strumentali per<br />
l’identificazione e la caratterizzazione strutturale <strong>di</strong> proteine e pepti<strong>di</strong> in campioni biologici.<br />
Questa attività è mirata principalmente a 1) caratterizzare le <strong>di</strong>verse isoforme <strong>di</strong> proteine che<br />
risultano significativamente mo<strong>di</strong>ficate in stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> proteomica <strong>di</strong>fferenziale dopo elettroforesi<br />
bi<strong>di</strong>mensionale, 2) ottenere profili proteici in flui<strong>di</strong> biologici per l’in<strong>di</strong>viduazione <strong>di</strong> nuovi<br />
biomarkers <strong>di</strong> interesse fisiopatologico o tossicologico, 3) identificare e caratterizzare prodotti<br />
endogeni <strong>di</strong> degradazione proteica, 4) identificare proteine prodotte da cellule in vitro in risposta<br />
a determinati stimoli, 5) isolare in modo altamente selettivo (me<strong>di</strong>ante microtecniche <strong>di</strong><br />
immunoaffinità) proteine <strong>di</strong> particolare interesse biome<strong>di</strong>co e identificare le loro eventuali<br />
mo<strong>di</strong>ficazioni post-translazionali me<strong>di</strong>ante spettrometria <strong>di</strong> massa (LC-MS/MS).<br />
Proteomica<br />
Il principale scopo della proteomica è quello identificare proteine o insiemi <strong>di</strong> proteine espresse<br />
in modo <strong>di</strong>fferenziale in varie con<strong>di</strong>zioni fisiopatologiche, oppure a seguito <strong>di</strong> esposizione a<br />
composti tossici, ad agenti biologici, o a farmaci. La tecnica più <strong>di</strong>ffusa per lo stu<strong>di</strong>o del<br />
proteoma è l'identificazione me<strong>di</strong>ante spettrometria <strong>di</strong> massa <strong>di</strong> proteine separate me<strong>di</strong>ante gel<br />
elettroforesi bi<strong>di</strong>mensionale (2-DE). L'uso <strong>di</strong> banche dati è un supporto essenziale a questa<br />
attività. Il Laboratorio è attivo nella ottimizzazione delle tecniche correlate, sia quelle che<br />
riguardano la spettrometria <strong>di</strong> massa (varie tecniche complementari quali MALDI-TOF-MS,<br />
nanoESI-MS/MS and LC-MS/MS), che quelle che riguardano la preparazione del campione (es.<br />
purificazione e l'arricchimento <strong>di</strong> proteine poco abbondanti), e la caratterizzazione <strong>di</strong><br />
mo<strong>di</strong>ficazioni post-translazionali.<br />
Sviluppo <strong>di</strong> metodologie analitiche in spettrometria <strong>di</strong> massa<br />
Sono stati sviluppati nuovi meto<strong>di</strong> <strong>di</strong> analisi per la misura <strong>di</strong> farmaci e <strong>di</strong> loro metaboliti in<br />
campioni biologici, utilizzando la tecnica della spettrometria <strong>di</strong> massa accoppiata alla<br />
cromatografia liquida (HPLC-MS). Questa tecnica permette la determinazione <strong>di</strong> molecole<br />
polari e ad alto peso molecolare con alta sensibilità e, attraverso la frammentazione degli ioni<br />
pseudo-molecolari, lo stu<strong>di</strong>o della struttura <strong>di</strong> eventuali metaboliti e prodotti <strong>di</strong> degradazione.<br />
I farmaci maggiormente stu<strong>di</strong>ati sono stati: taxani ed altri farmaci antitumorali; desametasone e<br />
altri corticosteroi<strong>di</strong>; testosterone, <strong>di</strong>idrotestosterone e altri steroi<strong>di</strong> collegati da vie metaboliche.<br />
Questi stu<strong>di</strong> si sono avvalsi dell'uso <strong>di</strong> spettrometri <strong>di</strong> massa a triplo quadrupolo e a trappola<br />
ionica, equipaggiati con sorgenti <strong>di</strong> ionizzazione electrospray (ESI) e a ionizzazione chimica a<br />
pressione atmosferica (APCI).<br />
43<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Laboratorio <strong>di</strong> Chimica e Tossicologia dell'Ambiente<br />
IRFMN<br />
Unità <strong>di</strong> igiene industriale e ambientale - Stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> emissioni <strong>di</strong> inquinanti<br />
in atmosfera<br />
Le ricerche sono rivolte allo stu<strong>di</strong>o delle emissioni <strong>di</strong> inquinanti in atmosfera. Lo stu<strong>di</strong>o<br />
riguarda sia il campionamento in aree circostanti la fonte <strong>di</strong> emissione, sia le analisi chimiche,<br />
sia la modellazione del trasporto in considerazione delle con<strong>di</strong>zioni meteorologiche e<br />
dell'orografia, sia l'analisi del rischio sulla popolazione e l'ambiente. Le analisi <strong>di</strong> inquinanti<br />
organici vengono svolte in spettrometria <strong>di</strong> massa, utilizzando la tecnica GC-MS, con tecniche<br />
in alta risoluzione (ad esempio per <strong>di</strong>ossine) che in ionizzazione negativa (ad esempio per PCB).<br />
Si effettuano sia ricerche identificative, che analisi quantitative.<br />
Sviluppo e utilizzo <strong>di</strong> metodologie analitiche per indagini <strong>di</strong><br />
contaminazioni <strong>di</strong> acque, suolo, biota, campioni umani <strong>di</strong> popolazione<br />
esposta<br />
Le ricerche sono rivolte allo sviluppo e applicazione <strong>di</strong> meto<strong>di</strong> analitici per lo stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong><br />
inquinanti ambientali in situazioni quali: ecositemi acquatici, suoli, <strong>di</strong>scariche, siti contaminati.<br />
Le analisi <strong>di</strong> inquinanti organici vengono svolte in spettrometria <strong>di</strong> massa, utilizzando la tecnica<br />
GC-MS, LC-MS, LC-MS/MS. Si effettuano sia ricerche identificative, che analisi quantitative.<br />
Gli analiti includono: <strong>di</strong>ossine, PCB, PAH, analoghi polibromobifenileteri, pestici<strong>di</strong>, composti<br />
ad attività endocrina, inquinanti industriali, etc.<br />
Stu<strong>di</strong>o delle proprietà ambientali, tossiche ed ecotossiche degli inquinanti<br />
Le ricerche sono rivolte allo stu<strong>di</strong>o delle proprietà degli inquinanti, reperendo le informazioni da<br />
letteratura, confrontando e valutando le <strong>di</strong>verse fonti, e, soprattutto, sviluppando modelli<br />
pre<strong>di</strong>ttivi per sopperire alla mancanza <strong>di</strong> dati sperimentali. Infatti, nella maggior parte degli<br />
inquinanti ambientali, si assiste a una mancanza <strong>di</strong> dati. I modelli che vengono sviluppati,<br />
quin<strong>di</strong>, partono dalla sola formula chimica. La ricerca calcola e valuta i <strong>di</strong>versi tipi <strong>di</strong> descrittori<br />
e frammenti chimici relativi ai composti, ottenuti con <strong>di</strong>versi software specifici. Quin<strong>di</strong>, si<br />
sviluppano modelli utilizzando algoritmi quali reti neurali, fuzzy logic, algoritmi genetici,<br />
classificatori, analisi multivariata, etc. I vari meto<strong>di</strong> sono comparati e integrati in una struttura<br />
organica.<br />
Analisi del rischio associato a inquinanti<br />
Le ricerche sono rivolte allo stu<strong>di</strong>o dell'analisi del rischio associato all'esposizione a<br />
contaminanti per la popolazione e l'ambiente. A tal fine si eseguono stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> modellazione del<br />
trasporto e <strong>di</strong>ffusione degli inquinanti, per giungere a una concentrazione prevista nel contesto<br />
spazio-temporale. Tale attività si combina con quelle sopra esposte relative alle analisi chimiche<br />
<strong>di</strong> inquinanti e caratterizzazione della tossicità ed ecotossicità, giungendo a un costrutto<br />
organico e articolato.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Spettrometria <strong>di</strong> Massa<br />
Inquinamento da particolato<br />
Le evidenze epidemiologiche mostrano come un numero sempre crescente <strong>di</strong> patologie, sia<br />
acute che croniche, siano associate all'inquinamento da particolato urbano. Questo riguarda non<br />
solo malattie legate al sistema respiratorio, ma anche al sistema car<strong>di</strong>ovascolare. Vengono<br />
sviluppate metodologie per il campionamento e l'analisi <strong>di</strong> particolato, al fine <strong>di</strong> caratterizzare<br />
sia le sostanze adsorbite e veicolate, sia l'esposizione cui si é soggetti in <strong>di</strong>fferenti situazioni<br />
ambientali.<br />
44<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Sviluppo <strong>di</strong> metodologie e strumentazione in campo ambientale<br />
Vengono sviluppate metodologie analitiche e strumentazioni de<strong>di</strong>cate a specifiche<br />
problematiche ambientali. Generalmente la strumentazione sviluppata, sempre basata sulla<br />
spettrometria <strong>di</strong> massa, mira ad avere sensibilità elevate per la misura <strong>di</strong> inquinanti in tracce ed<br />
ultratracce, o ad essere trasportabile per effettuare analisi in campo, o ad essere automatizzata<br />
per effettuare monitoraggi.<br />
Caratterizzazione dell'inquinamento olfattivo<br />
Le problematiche legate all'inquinamento olfattivo, problema sempre più sentito dalla<br />
popolazione generale, sono legate alla complessità sia della percezione degli odori, che alla<br />
formazione degli odori ambientali. Questi sono spesso il risultato della interazione <strong>di</strong> <strong>di</strong>verse<br />
sostanze odorigene che, tutte insieme, e a bassissime concentrazioni, partecipano alla<br />
formazione dell'odore. La base per lo stu<strong>di</strong>o dell'inquinamento olfattivo é la conoscenza delle<br />
<strong>di</strong>verse sostanze presenti in ambienti "inquinati". Sono quin<strong>di</strong> necessarie sia metodologie<br />
analitiche che permettano <strong>di</strong> identificare e misurare gli "odoranti" presenti, che metodologie<br />
chemiometriche necessarie per ricostruire informazioni utili per l'identificazione della causa<br />
principale della molestia olfattiva.<br />
Unità <strong>di</strong> Tossicologia degli Alimenti<br />
PCB e <strong>di</strong>ossine negli alimenti<br />
Sono in corso stu<strong>di</strong> per valutare l’esposizione alimentare del consumatore a PCB e <strong>di</strong>ossine. In<br />
particolare, è stato misurato il contenuto <strong>di</strong> PCB in alcune classi <strong>di</strong> alimenti rappresentativi in<br />
quattro <strong>di</strong>fferenti nazioni, per stimare le <strong>di</strong>fferenze nell’esposizione nel consumatore europeo.<br />
Importante conclusione è che l’esposizione tramite lo stesso tipo <strong>di</strong> alimento può essere<br />
<strong>di</strong>fferente, talora in misura sostanziale, nei <strong>di</strong>versi paesi, e che il consumo <strong>di</strong> pesce in<br />
quantitativi me<strong>di</strong>o-elevati approssima e supera i limiti <strong>di</strong> sicurezza stabiliti dalla Commissione<br />
Europea.<br />
Farmaci nell’ambiente<br />
I farmaci rappresentano uno dei più recenti inquinanti ambientali identificati. Sono attualmente<br />
in corso campagne <strong>di</strong> misurazione <strong>di</strong> farmaci nelle acque <strong>di</strong> alcuni fiumi italiani, allo scopo <strong>di</strong><br />
meglio definire il problema e stu<strong>di</strong>are i rischi correlati. Lo stu<strong>di</strong>o ha permesso <strong>di</strong> 1) identificare i<br />
principali farmaci “inquinanti” da stu<strong>di</strong>are approfon<strong>di</strong>tamente; 2) stabilire che l’inquinamento<br />
da farmaci non è un evento casuale o puntiforme, ma un fenomeno continuo governato da leggi<br />
fisiche (carichi ambientali, bilanci <strong>di</strong> massa); 3) stabilire che le concentrazioni ambientali <strong>di</strong><br />
numerosi farmaci superano stabilmente i valori considerati <strong>di</strong> sicurezza; 4) stu<strong>di</strong>are processi<br />
avanzati <strong>di</strong> trattamento delle acque, in collaborazione con alcune Università Italiane.<br />
Meto<strong>di</strong> agronomici e inquinanti emergenti<br />
La nostra attività è iniziata con un approccio “esplorativo” sui rischi degli OGM e<br />
dell’agricoltura biologica. Le conclusioni <strong>di</strong> una vasta revisione della letteratura sui possibili<br />
rischi per la salute umana, sono che attualmente non sono identificabili rischi connessi al<br />
consumo alimentare <strong>di</strong> OGM, ma che esistono dei dubbi sull’affidabilità delle attuali meto<strong>di</strong>che,<br />
sperimentali ed epidemiologiche, a rilevare potenziali effetti a bassa incidenza e a lungo<br />
termine. Per contribuire a risolvere questo problema, sono state poste le basi <strong>di</strong> un progetto sullo<br />
sviluppo <strong>di</strong> nuove tecnologie per la valutazione della sicurezza d’uso delle piante da OGM in<br />
alimentazione. Il progetto prevede l’impiego <strong>di</strong> tecniche alternative per rilevare potenziali<br />
mo<strong>di</strong>ficazioni indotte in sistemi viventi dagli alimenti OGM.<br />
45<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Attività regolatorie<br />
E' in corso la valutazione <strong>di</strong> monografie <strong>di</strong> prodotti fitosanitari per incarico del Ministero della<br />
Sanità a fini della registrazione Europea (inclusione nell’Annex I). La valutazione ha riguardato<br />
l’analisi dei residui negli alimenti e del “risk assessment” per l'uomo delle sostanze Captan e<br />
Folpet.<br />
46<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
DIPARTIMENTO DI NEUROSCIENZE<br />
PERSONALE<br />
Capo Dipartimento Gianluigi FORLONI, Dr.Sci.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia delle Malattie Neurodegenerative<br />
Capo Laboratorio Gianluigi FORLONI, Dr.Sci.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Infiammazione e Malattie del Sistema Nervoso<br />
Capo Laboratorio Maria Grazia DE SIMONI, Dr.Sci.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Malattie Neurologiche<br />
Capo Laboratorio Ettore BEGHI, Dr.Med.Chir.<br />
Laboratorio del Metabolismo dei Farmaci<br />
Capo Laboratorio Silvio CACCIA, Dr.Farm.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Neurobiologia Molecolare<br />
Capo Laboratorio Caterina BENDOTTI, Dr.Farm.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Neurologia Sperimentale<br />
Capo Laboratorio Annamaria VEZZANI, Dr.Sci.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Neuropsichiatria Geriatrica<br />
Capo Laboratorio Ugo LUCCA, MSc<br />
Unità <strong>di</strong> Epidemiologia e Psichiatria Sociale<br />
Capo Unità Barbara D’AVANZO, Dr.Filo.<br />
Unità <strong>di</strong> Epidemiologia Geriatrica<br />
Capo Unità Mauro TETTAMANTI, Dr.Sci.Biol.<br />
Unità <strong>di</strong> Farmacologia Geriatrica<br />
Capo Unità Emma RIVA, Dr.Med.Chir.<br />
Unità <strong>di</strong> Valutazione della Qualità dei Servizi per l’Anziano<br />
Capo Unità Alessandro NOBILI, Dr.Med.Chir.<br />
IRFMN<br />
47<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Unità del Dipartimento<br />
Unità <strong>di</strong> Farmacologia Comportamentale<br />
Capo Unità Luigi CERVO, Per.Chim.<br />
Unità <strong>di</strong> Farmacologia del Comportamento Cognitivo<br />
Capo Unità Mirjana CARLI, Per.Chim.<br />
IRFMN<br />
Unità <strong>di</strong> Micro<strong>di</strong>alisi Intracerebrale<br />
Capo Unità Roberto William INVERNIZZI, Dr.Sci.Biol.<br />
48<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
Il Dipartimento <strong>di</strong> Neuroscienze è strutturato in sette Laboratori e tre Unità <strong>di</strong> Dipartimento, le<br />
attività <strong>di</strong> ricerca riguardano lo stu<strong>di</strong>o delle malattie neurologiche e psichiatriche affrontato dal<br />
punto <strong>di</strong> vista delle basi biologiche, <strong>di</strong> alcuni aspetti clinici e della valutazione dei servizi<br />
sanitari. Accanto a queste attività, nel Dipartimento sono presenti competenze più generali, non<br />
riconducibili esclusivamente all'ambito neurologico, che riguardano la farmacocinetica,<br />
l'informazione sull'uso dei farmaci e l'elaborazione <strong>di</strong> trial clinici e <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> epidemiologici.<br />
Tra<strong>di</strong>zionalmente una parte del Dipartimento si è de<strong>di</strong>cata alla creazione <strong>di</strong> modelli sperimentali<br />
per lo stu<strong>di</strong>o dei meccanismi patogenetici e dei possibili interventi terapeutici che riguar<strong>di</strong>no le<br />
malattie neurodegenerative, come Alzheimer e malattie da prioni, neurologiche come l'epilessia<br />
o psichiatriche come la depressione. Più recentemente si sono sviluppati e consolidati progetti <strong>di</strong><br />
ricerca per lo stu<strong>di</strong>o della sclerosi laterale amiotrofica (SLA), l'ictus cerebrale e le sostanze<br />
d'abuso. Per quanto riguarda gli aspetti clinici <strong>di</strong>verse <strong>di</strong> queste patologie sono oggetto <strong>di</strong> stu<strong>di</strong><br />
epidemiologici come epilessia, SLA e Alzheimer e <strong>di</strong> clinical trial per la valutazione<br />
dell'efficacia <strong>di</strong> trattamenti farmacologici. Le attività del Dipartimento mirano a un'integrazione<br />
delle <strong>di</strong>verse competenze per lo sviluppo <strong>di</strong> progetti multi<strong>di</strong>sciplinari. L'obiettivo è <strong>di</strong> dare<br />
risposte integrate sul piano della conoscenza, della terapia e della pratica clinica alle complesse<br />
tematiche, in gran parte irrisolte, proposte dalle malattie del sistema nervoso.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Due mutazioni del gene che co<strong>di</strong>fica per PEN 2, una proteina coinvolta nella produzione <strong>di</strong> beta<br />
amiloide, sono state identificate in pazienti con Alzheimer familiare<br />
Una mutazione del gene che co<strong>di</strong>fica per presenilina 1 (E318G) è stata identificata come fattore<br />
<strong>di</strong> rischio nella malattia <strong>di</strong> Alzheimer<br />
In uno stu<strong>di</strong>o piuttosto ampio è stato <strong>di</strong>mostrato che i livelli plasmatici <strong>di</strong> beta amiloide 1-42<br />
sono significativamente più bassi nei soggetti Alzheimer rispetto ai controlli <strong>di</strong> pari età<br />
In colture cellulari umane alfa-sinucleina a basse concentrazioni ha attività neuroprotettiva.<br />
Questo effetto <strong>di</strong>pende dalla porzione C-terminale della proteina e non è mo<strong>di</strong>ficato dalle<br />
mutazioni associate al morbo <strong>di</strong> Parkinson<br />
Nei soggetti con Mild Cognitive Impairment-amnesici è possibile osservare, anche nel breve<br />
periodo (9 mesi), una <strong>di</strong>minuzione più consistente della memoria relativa a eventi pubblici<br />
rispetto a quella autobiografica.<br />
Relativamente basse concentrazioni <strong>di</strong> folati nel siero sono associate a un elevato rischio <strong>di</strong><br />
demenza e <strong>di</strong> declino cognitivo e funzionale nei gran<strong>di</strong> anziani (80+).<br />
La presenza <strong>di</strong> demenza nel grande anziano (80+) è associata a un grande aumento (5 volte) del<br />
numero <strong>di</strong> ore <strong>di</strong> assistenza da parte del caregiver.<br />
La prevalenza dell’anemia nella popolazione anziana è del 7,6%, cresce significativamente con<br />
l’età ed è maggiore negli uomini rispetto alle donne. L’anemia <strong>di</strong> grado lieve presenta una<br />
associazione modesta ma significativa con alcune variabili cognitive, funzionali e <strong>di</strong> qualità<br />
della vita.<br />
49<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
E' stata stabilita una migliore efficienza organizzativa e gestionale delle strutture con Nucleo<br />
Alzheimer rispetto alle strutture che ne sono prive.<br />
In seguito a un intervento <strong>di</strong> counseling si ha un miglioramento dello stress e del carico<br />
assistenziale del caregiver del malato <strong>di</strong> demenza.<br />
Elevata prevalenza d’uso dei farmaci nei pazienti anziani istituzionalizzati, aumento del rischio<br />
<strong>di</strong> interazioni nei pazienti in politerapia e forte correlazione tra numero <strong>di</strong> farmaci assunti e<br />
rischio <strong>di</strong> interazioni.<br />
La sintomatologia dolorosa, presente all’ingresso in Hospice, è stata curata nell’83% dei malati<br />
oncologici terminali. Nel 91% dei malati la qualità della vita dell’ultimo periodo era migliorata<br />
e il decesso è avvenuto sotto sedazione e in assenza <strong>di</strong> sintomi stressanti (dolore, <strong>di</strong>spnea,<br />
vomito, ect) o <strong>di</strong> procedure invasive.<br />
E’ stata stabilita una soglia che permette <strong>di</strong> <strong>di</strong>stinguere in base ai punteggi totali della HoNOS i<br />
soggetti sani da quelli non sani e quelli gravi da quelli molto gravi dal punto <strong>di</strong> vista della<br />
patologia psichiatrica. Tale definizione rappresenta uno strumento nuovo per la valutazione dei<br />
singoli pazienti e <strong>di</strong> gruppi <strong>di</strong> pazienti nei servizi psichiatrici.<br />
La mortalità <strong>di</strong> pazienti con una prima crisi epilettica non provocata è superiore a quella della<br />
popolazione generale, ma il rischio è significativamente superiore solo per le fasce <strong>di</strong> età più<br />
giovani.<br />
Le donne con epilessia presentano un elevato rischio <strong>di</strong> depressione. La depressione appare<br />
correlata alla tipologia e alla gravità della malattia.<br />
Nei pazienti con prima crisi epilettica non provocata è stato <strong>di</strong>mostrato che la prognosi a lungo<br />
termine delle crisi è sovrapponibile nei casi trattati imme<strong>di</strong>atamente e nei casi trattati in<br />
occasione della ricorrenza, confermando che il trattamento dell’epilessia dovrebbe iniziare solo<br />
in occasione della ricorrenza <strong>di</strong> crisi.<br />
Bambini con epilessia che hanno mostrato resistenza a due farmaci antiepilettici, esposti ad un<br />
terzo farmaco hanno presentato una probabilità <strong>di</strong> remissione simile a quella <strong>di</strong> bambini che<br />
hanno continuato il trattamento con i farmaci già assegnati. Ciò suggerisce che una con<strong>di</strong>zione<br />
<strong>di</strong> farmacoresistenza nell’epilessia può essere già definita dopo il fallimento <strong>di</strong> due farmaci.<br />
Una familiarità per malattie vascolari è risultata più frequente tra i soggetti con emicrania<br />
rispetto al gruppo <strong>di</strong> controllo, suggerendo una pre<strong>di</strong>sposizione genetica per malattie vascolari<br />
tra i soggetti emicranici.<br />
Il ricovero ospedaliero è risultato significativamente superiore alla gestione ambulatoriale della<br />
cefalea, come <strong>di</strong>mostrato dalla riduzione del numero, dell’intensità e della durata degli attacchi,<br />
dal minor consumo <strong>di</strong> analgesici, e dal maggior gra<strong>di</strong>mento dei me<strong>di</strong>ci e dei familiari<br />
Specifici recettori del neuropeptide Y e della somatostatina me<strong>di</strong>ano l'attivita' anticonvulsivante<br />
<strong>di</strong> questi pepti<strong>di</strong> endogeni. Questa evidenza e' importante perche' suggerisce nuovi targets per lo<br />
sviluppo <strong>di</strong> farmaci anticonvulsivanti completamente <strong>di</strong>versi da quelli attualmente <strong>di</strong>sponibili<br />
E' stato <strong>di</strong>mostrato il ruolo <strong>di</strong> alcune citochine proinfiammatorie nella modulazione dell'attivita'<br />
epilettica nei modelli sperimentali evidenziando e descrivendo quin<strong>di</strong> un meccanismo coinvolto<br />
50<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
nell'eziopatogenesi delle convulsioni fino ad ora sconosciuto.<br />
IRFMN<br />
Alcune proteine <strong>di</strong> trasporto dei farmaci sono funzionalmente attivitate dalle convulsioni oppure<br />
sovraespresse in alcune patologie <strong>di</strong>splastiche legate ad epilessia farmacoresistente ed hanno un<br />
ruolo significativo nel <strong>di</strong>minuire le concentrazioni cerebrali dei farmaci antiepilettici nei modelli<br />
sperimentali.<br />
L'inibitore del complemento C1-INH ha un potente effetto neuroprotettivo nel danno cerebrale<br />
da ischemia/riperfusione<br />
La somministrazione per via sistemica <strong>di</strong> enossieparina, un'eparina a basso peso molecolare,<br />
riduce le placche e l'accumulo <strong>di</strong> beta-amiloide in un modello murino <strong>di</strong> malattia <strong>di</strong> Alzheimer<br />
La proteina citoplasmatica Rai(Shc C) protegge dal danno ischemico<br />
L'infusione <strong>di</strong> cellule staminali neurali riduce il danno striatale da ischemia/riperfusione<br />
La mancata degradazione delle proteine anomale il cui accumulo porta alla formazione <strong>di</strong><br />
aggregati nocivi per i motoneuroni dei topi malati <strong>di</strong> SLA, <strong>di</strong>penderebbe dalla <strong>di</strong>minuzione dei<br />
livelli <strong>di</strong> proteasoma costitutivo ed il concomitante aumento dell’immunoproteasoma.<br />
Un’aumentata nitrazione delle proteine potrebbe contribuire alla patogenesi della SLA.<br />
Farmaci con attività agonista parziale o antagonista sui recettori dopaminergici D3 sono in<br />
grado <strong>di</strong> modulare, negli animali da esperimento, il comportamento <strong>di</strong> ricerca della sostanza<br />
d'abuso alla comparsa <strong>di</strong> stimoli ambientali associati all'assunzione <strong>di</strong> cocaina<br />
(+)-HA-966, un agonista parziale alla glicina riduce l’autosomministrazione della cocaina negli<br />
animali da laboratorio.<br />
La somministrazione <strong>di</strong> una singola dose <strong>di</strong> cocaina mo<strong>di</strong>fica l’impatto <strong>di</strong> una seconda dose sul<br />
comportamento ed induce cambiamenti neurochimici duraturi nel sistema nervoso centrale del<br />
soggetto sperimentale.<br />
L'iperforina trimetossibenzoato si è <strong>di</strong>mostrata attiva in un modello animale pre<strong>di</strong>ttivo<br />
dell'attività antidepressiva.<br />
Il ceppo DBA/2J è resistente agli effetti dei bloccanti dell’uptake della serotonina in un modello<br />
animale pre<strong>di</strong>ttivo dell'attività antidepressiva.<br />
La mutazione della triptofano idrossilasi-2 annulla l’effetto degli SSRI nel forced swimming<br />
test nel topo e comporta una ridotta capacità degli SSRI <strong>di</strong> interagire coi meccanismi<br />
serotoninergici<br />
I recettori 5-HT2c controllano il rilascio <strong>di</strong> GABA nella substantia nigra reticulata<br />
Un aumentato rilascio <strong>di</strong> glutammato corticale indotto dall’ipofunzione dei recettori NMDA è<br />
deleterio per le funzioni cognitive <strong>di</strong>pendenti dalla corteccia prefrontale<br />
Gli antagonisti dei recettori 5-HT2A prevengono l’aumento del rilascio <strong>di</strong> glutammato corticale<br />
indotto dall’ipofunzione dei recettori NMDA<br />
51<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
I recettori 5-HT2c controllano alcuni aspetti delle funzioni cognitive e motorie dei gangli della<br />
base.<br />
L’ipofunzione del recettore NMDA nella corteccia prefrontale è deleterio per le funzioni<br />
cognitive come l’attenzione e controllo esecutivo della performance.<br />
Gli antagonisti dei recettori 5-HT2A prevengono i deficit cognitivi indotti dall’ipofunzione dei<br />
recettori NMDA del glutammato.<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
Associazione Trenta Ore per la Vita<br />
Associazione per la Ricerca Neurogenetica, Lamezia Terme (CS) e ASL 6, Regione Calabria<br />
Agenzia <strong>di</strong> Sanità Pubblica della Regione Lazio, Roma<br />
ASL <strong>di</strong> Trento<br />
Clinica IRCSS S. Maria Nascente, Milano<br />
Clinica Neurologica III Università <strong>di</strong> Milano, Azienda Ospedaliera S. Paolo, Milano<br />
Clinica S. Maria, Castellanza (VA)<br />
Consorzio <strong>Ricerche</strong> Luigi Amaducci, CRIC, Arcugnano (Vc)<br />
DIBIT, San Raffaele Scientific Insitute, Milano.<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Chimica Biologica, Università <strong>di</strong> Padova<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Chimica, Università egli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Firenze<br />
Dipartimento En<strong>di</strong>cronologia, Università <strong>di</strong> Milano<br />
Dipartimento Farmaco Chimico Tecnologico, Università <strong>di</strong> Siena<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Salute Mentale dell'Azienda Ospedaliera <strong>di</strong> Milano Niguarda<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Salute Mentale dell'Azienda Ospedaliera Salvini <strong>di</strong> Garbagnate<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina e Salute Pubblica, Sezione <strong>di</strong> Psichiatria e Psicologia Clinica,<br />
Università <strong>di</strong> Verona<br />
Dip. <strong>di</strong> Morfofisiologia, Scuola <strong>di</strong> me<strong>di</strong>cina Veterinaria, Università <strong>di</strong> Torino, Grugliasco (TO).<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Neurologia Università <strong>di</strong> Milano, Ospedale Luigi Sacco.<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Neuroscienze e Riabilitazione, Azienda Ospedaliera “Santa Maria della<br />
Misericor<strong>di</strong>a”, U<strong>di</strong>ne<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Neuroscienze, Università <strong>di</strong> Parma, Parma<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Salute Mentale <strong>di</strong> Trieste<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Salute Mentale dell’Azienda Ospedaliera Salvini <strong>di</strong> Garbagnate<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Salute Mentale dell’Azienda Ospedaliera San Gerardo <strong>di</strong> Monza<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Salute Mentale dell’Azienda Ospedaliera <strong>di</strong> Milano Niguarda<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Salute Mentale dell’Azienda Ospedaliera <strong>di</strong> Milano San Carlo<br />
Dip. <strong>di</strong> Scienze Biomolecolari e Biotecnologie, Università <strong>di</strong> Milano<br />
Dipartimento Scienze Neurologiche, Università <strong>di</strong> Genova, Genova<br />
Dipartimento Scienze Neurologiche, Ospedale Maggiore Policlinico <strong>di</strong> Milano<br />
Direzione Generale Famiglia e Solidarietà Sociale, Regione Lombar<strong>di</strong>a, Milano<br />
Direzione Generale Sanità, Regione Lombar<strong>di</strong>a, Milano<br />
Divisione Neurologica, Università <strong>di</strong> Bologna<br />
Federazione Alzheimer Italia, Milano<br />
Franco Calori Cell Factory, Centro Trasfusionale e <strong>di</strong> Immunologia dei Trapianti, IRCCS<br />
Ospedale Maggiore, Milano<br />
Fondazione Clelio Angelino<br />
Fondazione Floriani, Milano<br />
52<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Fondo Edo Tempia<br />
Hospice “Domus Salutis”, Brescia<br />
Hospice “via <strong>di</strong> natale”, Aviano (PN)<br />
IRCSS "Casa Sollievo della Sofferenza", San Giovanni Rotondo<br />
IRCCS <strong>Istituto</strong> Auxologico Italiano, Milano<br />
IRCSS Neuromed, Pozzilli, Isernia<br />
IRCSS "San Raffaele", Milano<br />
<strong>Istituto</strong> Europeo <strong>di</strong> Oncologia, IRCCS, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Farmacologia e Farmacognosia, Università <strong>di</strong> Urbino<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Farmacologia, Universita' <strong>di</strong> Milano<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Economia Sanitaria, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> Nazionale Neurologico “Carlo Besta”, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> Neurologico "Casimiro Mon<strong>di</strong>no", Pavia<br />
<strong>Istituto</strong> "Stella Maris", IRCCS, Calambrone (PI)<br />
<strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità, Roma<br />
<strong>Istituto</strong> Zooprofilattico Piemonte Liguria Val D'Aosta,Torino<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Neuroscienze, Centro Dino Ferrari, Università <strong>di</strong> Milano<br />
Lega Italiana per la Lotta contro i Tumori<br />
Ospedale Regionale Ca Fondello, Treviso<br />
Ospedale "Molinette", Torino<br />
Pio Albergo Trivulzio, Milano<br />
Polo Oncologico, ASL 12, Biella<br />
Provincia Lombardo-Veneta Or<strong>di</strong>ne Ospedaliero San Giovanni <strong>di</strong> Dio, Fatebenefratelli <strong>di</strong><br />
Cernusco sul Naviglio<br />
Unione Nazionale delle Associazioni per la Salute Mentale (UNASAM), Milano<br />
Unità <strong>di</strong> geriatria, Ospedale Maggiore IRCCS, Università <strong>di</strong> Milano<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Foggia<br />
Università Cattolica del Sacro Cuore <strong>di</strong> Roma<br />
Università del Piemonte Orientale, Novara<br />
Università <strong>di</strong> Milano, IRCCS Ospedale Maggiore, Milano<br />
Università Milano-Bicocca, Monza<br />
U.O. Neurologia, Clinica S. Maria, Castellanza (VA).<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
IRFMN<br />
Albert Eistein College of Me<strong>di</strong>cine, Bronx, NY, USA<br />
Atomic Energy Commission, Service de Neurovirologie, Fontenay-aux-Roses, France<br />
Beaumont Hospital, Dublin, Ireland<br />
Centre for Neuroscience Research and Division of Biomolecular Sciences, GKT School, King’s<br />
College, London, UK<br />
Centro per lo Stu<strong>di</strong>o delle Malattie Dismetaboliche e delle Iperlipidemie, Ospedale della Beata<br />
Vergine, Mendrisio, Switzerland<br />
Chorley & South Ribble General Hospital, Chorley, UK<br />
Cochrane Collaboration Depression, Anxiety and Neurosis Group (CCDAN), Gran Bretagna<br />
Columbia University, Haverstraw, NY, USA<br />
Department of Anatomy and Physiology, Laval University, Quebec<br />
Department of Cell Biology, Washington University, St Louis, USA<br />
Department of Chemistry,The Australian National University, Canberra City, Australia<br />
Department of Experimental Psychology, University of Cambridge, UK<br />
53<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Department of Mental Health and Substance Dependence WHO Geneve, Switzerland<br />
Department of Pathology and Infectious Diseases Royal Veterinary College, Herts, UK<br />
Department of Pharmacology, Division of Neuroscience, University of Birmingham, UK<br />
Department of Psychiatry, Me<strong>di</strong>cal Center University of Mississippi, Jackson, USA<br />
Department of Psychiatry, University of Hull, UK<br />
Department of Veterinary Pathology, Glasgow University Veterinary School, Glaskow, UK<br />
Division of Me<strong>di</strong>cal Genetics, CHUV Lausanne, Switzerland<br />
European Union of Family Associations of People with Mental Illness (EUFAMI)<br />
HSPH Harvard University, Boston, USA<br />
IBCM, University of Lausanne, Lausanne, Switzerland<br />
Imperial College School of Me<strong>di</strong>cine, Rheumatology Section, London, UK<br />
Inserm Unite 549, Paris, France<br />
Institut de Génétique Humaine du CNRS, Montpellier, France<br />
Jefferson Med Coll, Philadelphia, USA<br />
Karolinska Institutet, Stockholm, Sweden<br />
King’s College Hospital, London, UK<br />
National Research and Development Centre for Welfare and Health (STAKES),<br />
Finland<br />
Neuroprion, Network of Excellence, WP VI, EC<br />
Ninewells Hospital and Me<strong>di</strong>cal School, Dundee, Scotland UKNorthern Illinois University,<br />
DeKalb, IL, USA<br />
Novartis Pharma, Basel, Switzerland<br />
Organizzazione Mon<strong>di</strong>ale della Sanità, Dipartimento <strong>di</strong> Salute Mentale e Dipendenza da<br />
Sostanze, Ginevra, Svizzera<br />
Public Health and Consumers’ Protection (Directorate General), Brussells, European Union<br />
Robarts Research Institute, London, Ontario, Canada<br />
Royal Manchester Children's Hospital, Manchester, UK<br />
Royal Preston Hospital, Preston, UK<br />
Sergievsky Center, Columbia University, New York, NY, USA<br />
Servizio <strong>di</strong> Geriatria, Ospedale della Beata Vergine, Mendrisio, Switzerland<br />
The Scripps Research Institute, La Jolla, California, USA<br />
Univ of California at Irvine, Irvine, CA, USA<br />
University of Car<strong>di</strong>ff, United Kingdom<br />
Univ of Colorado, Denver, USA<br />
University Hospital, London, ON, Canada<br />
Univ of Innsbruck, Innsbruck, Austria<br />
Univ of Maryland, Baltimore, USA<br />
University of Maastricht, the Netherland<br />
University of Melbourne, Austin and Repatriation Me<strong>di</strong>cal Centre Heidelberg, Melbourne,<br />
Australia<br />
University of Rijeka Me<strong>di</strong>cal School, Rijeka, Croatia<br />
Université Victor Segalen, Bordeaux, France<br />
Walton Hospital, Liverpool, UK<br />
WAPR (World Association for Psychosocial Rehabilitation)<br />
Virtanen Institute for Molecular Sciences, University of Kuopio, Finland<br />
Vrije Universiteit Me<strong>di</strong>cal Center, Amsterdam, The Netherland<br />
IRFMN<br />
54<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Biochemical Journal (G. Forloni)<br />
Brain aging (G. Forloni)<br />
Clinical Drug Investigation (E.Beghi)<br />
Cochrane Collaboration, Epilessia (E.Beghi)<br />
Drugs in the R&D (E.Beghi)<br />
Epidemiologia e Prevenzione (U.Lucca)<br />
Epilepsy Currents (A.Vezzani)<br />
Epilepsia (A.Vezzani)<br />
Inpharma (E.Beghi)<br />
International Journal of Mental Health (A.Barbato)<br />
Journal of Neurochemistry (C.Bendotti)<br />
Neurological Sciences (E.Beghi)<br />
Neuroepidemiology (E.Beghi)<br />
Psichiatria <strong>di</strong> Comunità (A.Barbato)<br />
Ricerca & Pratica (A.Nobili)<br />
Acta Neurologica Scan<strong>di</strong>navica<br />
Acta Pharmacologica Sinica<br />
Acta Psychiatrica Scan<strong>di</strong>navica<br />
American Journal of Human Genetics<br />
American Journal of Pathology<br />
Annals of Neurology<br />
Annals of Pharmacotherapy<br />
Behavioural Brain Research<br />
Behavioural Pharmacology<br />
Biochemical Journal<br />
Biochemistry<br />
Brain Research<br />
Brain Research Review<br />
Brain Res Bulletin<br />
British Journal of Pharmacology<br />
Clinical Drug Investigation<br />
Clinical Pharmacokinetics<br />
Clin Pharm Ther<br />
CNS Drugs<br />
Dialogo sui farmaciDrugs<br />
Epidemiologia e Psichiatria Sociale<br />
Epilepsia<br />
Epilepsy & Behavior<br />
European Journal of Immunology<br />
European Journal of Neuroscience<br />
European Journal of Pharmacology<br />
European Journal of Public Health<br />
Experimental Neurology<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
IRFMN<br />
55<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Expert Opinion on Pharmacotherapy<br />
FASEB Journal<br />
Fundamental Clinical Psychopharmacology<br />
Giornale <strong>di</strong> Neuropsichiatria dell’Età Evolutiva<br />
Glia<br />
Journal of the American Board of Family Practice<br />
Journal of Cell. Biology<br />
Journal of Chemical Neuroanatomy<br />
Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biome<strong>di</strong>cal and Life Science<br />
Journal of Headache and Pain<br />
Journal of Histochemistry and Cytochemistry<br />
Journal of Immunology<br />
Journal of Neurochemistry<br />
Journal of Neuroimmunology<br />
Journal of Neurology, Neurosurgery and Psychiatry<br />
Journal of Neuroscience<br />
Journal of Neuroscience Methods<br />
Journal of Pharmacy and Pharmacology<br />
Journal of Psychosomatic Research<br />
Journal of Structural Biology<br />
Life Sciences<br />
Lancet Neurology<br />
Me<strong>di</strong>ca Science Monitor<br />
Molecular Brain Research<br />
Molecular and Cellular Neuroscience<br />
Neuroepidemiology<br />
Neurology<br />
Neurological Sciences<br />
Nerobiology of Aging<br />
Neurobiology of Diseases<br />
Neuropharmacology<br />
Neuropsychopharmacology<br />
Neuroscience<br />
Neuroscience and Biobehavioural Review<br />
Neuroscience Letters<br />
Pharmacological Research<br />
Pharmacology Biochemistry & Behavior<br />
Proc Natl Acad Sci, USA<br />
Psychopharmacology<br />
Synapse<br />
The Annals of Pharmacotherapy<br />
Trends Molecular Me<strong>di</strong>cine<br />
IRFMN<br />
56<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
Agenzia Europea <strong>di</strong> Valutazione dei Me<strong>di</strong>cinali (EMEA; European Me<strong>di</strong>cines Agency)<br />
Associazione Italiana <strong>di</strong> Neuroepidemiologia (Presidenza)<br />
Associazione Italiana per la Ricerca sull’Invecchiamento Cerebrale (AIRIC, Presidenza)<br />
Board of "Master in Advanced Technologies for the Study of Neurodegenerative Diseases",<br />
Milan University, Commissione sulla Health Care Policy della Lega Internazionale contro<br />
l’Epilessia (ILAE)<br />
Commisssione ministeriale per lo stu<strong>di</strong>o delle problematiche concernenti la <strong>di</strong>agnosi, la cura e<br />
l’assistenza dei pazienti affetti da sclerosi laterale amiotrofica.<br />
Comitato Or<strong>di</strong>natore del Master in "Tecnologie Avanzate Applicate alle Patologie<br />
Neurodegenerative", Università <strong>di</strong> Milano<br />
Committee for Proprietary Me<strong>di</strong>cinal Products (CPMP) presso L’EMEA<br />
Consiglio Direttivo AIRIC<br />
Direttivo della Lega Italiana contro l’Epilessia (LICE)<br />
Esperto Commissione Unica del Farmaco – Ministero della Salute<br />
Esperto Nazionale, accre<strong>di</strong>tato dal Ministero della Salute, per l’EMEA (The European<br />
Me<strong>di</strong>cines Agency)<br />
Esperto per il Me<strong>di</strong>cal Research Council (MRC), UK<br />
Gruppo <strong>di</strong> Stu<strong>di</strong>o sull’Epilessia della Società Italiana <strong>di</strong> Neurologia (SIN)<br />
Gruppo <strong>di</strong> Stu<strong>di</strong>o sulla Qualità della Vita della Società Italiana <strong>di</strong> Neurologia (SIN)<br />
Gruppo <strong>di</strong> Stu<strong>di</strong>o sulla Sclerosi Laterale Amiotrofica della Società Italiana <strong>di</strong> Neurologia (SIN)<br />
Mental Health Working Party of DG-SANCO, Directorate General - Public Health and<br />
Consumer Protection - of the European Union, Bruxelles, BelgiumGruppo <strong>di</strong> coor<strong>di</strong>namento<br />
Neuroprion NoE, EC<br />
International Committee su “Epilepsy and the Law”<br />
Me<strong>di</strong>cal Research Council Strategic Grant Application<br />
Neurobiology Commission of the International League Against Epilepsy<br />
Neuroepidemiology, Sezione della American Academy of Neurology (Chair)<br />
Task Force "Evidence-based psychosocial interventions in mental <strong>di</strong>sorders" - World Health<br />
Organisation, Geneva, Switzerland<br />
World Association For Psychosocial Rehabilitation (Presidenza)<br />
57<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Giornata <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o sulla malattia <strong>di</strong> Alzheimer<br />
27 marzo <strong>2004</strong>, Ateneo Veneto, Venezia<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
Formazione rilevatori fase II del progetto ProgresAcuti<br />
9-10 gennaio <strong>2004</strong>, <strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> <strong>Farmacologiche</strong> "<strong>Mario</strong> Negri", Milano<br />
Riunione nazionale progetto ProgresAcuti<br />
28 maggio <strong>2004</strong>, <strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> <strong>Farmacologiche</strong> "<strong>Mario</strong> Negri", Milano<br />
Convegno WAPR Italia "I problemi insoluti della psichiatria <strong>di</strong> comunità"<br />
30 maggio <strong>2004</strong>, Saronno<br />
- NEP Associazione Italiana <strong>di</strong> Neuroepidemiologia - I Corso <strong>di</strong> Introduzione alla Evidence<br />
Based Neurology. Novara 1-3 marzo, <strong>2004</strong>.<br />
- NEP Associazione Italiana <strong>di</strong> Neuroepidemiologia - II Corso <strong>di</strong> Introduzione alla Evidence<br />
Based Neurology. Novara 7-9 Giugno, <strong>2004</strong>.<br />
Corso <strong>di</strong> Aggiornamento: “Decidere in Me<strong>di</strong>cina: come valutare un trial terapeutico.”<br />
Manfredonia, 18 Dicembre <strong>2004</strong>.<br />
7th International NPY meeting, Coimbra, Portogallo, 4-8 Febbraio <strong>2004</strong><br />
30° Riunione Annuale Associazione Italiana per la ricerca sull'Invecchiamento Cerebrale,<br />
Padova 25-27 maggio <strong>2004</strong><br />
6th European Congress on Epileptogenesis, 30 Maggio-3 Giugno <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
58<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
International Conference on Schizophrenia. Outcome of schizophrenia in the age of community<br />
care 29 gennaio-2 febbraio <strong>2004</strong>, Chennay, In<strong>di</strong>a<br />
Convegno AIRIC “L'anziano nel mondo del lavoro”.<br />
Aspetti neuropsicologici<br />
6 marzo <strong>2004</strong>, Milano<br />
CNR Consiglio Nazionale delle <strong>Ricerche</strong> - First Advanced Course: "Antiepileptic drugs beyond<br />
epilepsy: focus on migraine, neuroprotection and pain". Roma March, 8 - 9th <strong>2004</strong>.<br />
An International Congress: "Life-sustaining treatments and vegetative state: scientific advances<br />
and ethical <strong>di</strong>lemmas." Roma, 17-20 Marzo <strong>2004</strong>.<br />
Corso <strong>di</strong> formazione all'autoaiuto in psichiatria per gli operatori socio-sanitari della Provincia <strong>di</strong><br />
Milano 25 marzo <strong>2004</strong>, Milano<br />
Universitat de Girona, Catalogna. Transformacio de l'hospital psiquiatric de Milà en recurses<br />
comunitaris. 26 e 27 marzo <strong>2004</strong>, Girona, Spagna<br />
SIN Società Italiana <strong>di</strong> Neurologia Gruppo <strong>di</strong> Stu<strong>di</strong>o sull'Epilessia - Corso <strong>di</strong> Aggiornamento:<br />
"ATTUALITA' IN EPILETTOLOGIA". Roma, 3 aprile <strong>2004</strong>, Policlinico A. Gemelli.<br />
Le sindromi demenziali: dalla clinica all'assistenza. La <strong>di</strong>mensione epidemiologica e l'impatto<br />
economico delle demenze. 16-17 aprile <strong>2004</strong>, Alba (Cn)<br />
Convegno WAPR Italia. Il ruolo degli utenti nella gestione dei servizi <strong>di</strong> salute mentale<br />
30 aprile <strong>2004</strong>, Saronno<br />
Corso Residenziale <strong>di</strong> Perfezionamento in <strong>di</strong>agnostica multi<strong>di</strong>sciplinare e terapia delle malattie<br />
neuromuscolari. Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Messina, 3 - 5 maggio <strong>2004</strong>, Taormina.<br />
Congresso Congiunto - IV Congresso della Associazione Italiana <strong>di</strong> Miologia e IX Riunione del<br />
gruppo <strong>di</strong> Stu<strong>di</strong>o del Sistema Nervoso Periferico - Taormina, 6-8 maggio <strong>2004</strong>.<br />
Workshop: 2nd European ALS Research Workshop Nice (France) 14 - 16 Maggio <strong>2004</strong><br />
Primary role of mitochondrial abnormalities in animal models of motor neuron degeneration<br />
Corso CEFPAS "Percorsi <strong>di</strong>agnostico-terapeutici nelle epilessie: la valutazione delle prove <strong>di</strong><br />
efficacia". 22 - 23 marzo <strong>2004</strong> e 12 - 14 maggio <strong>2004</strong>, Caltanissetta.<br />
Neuroprion <strong>2004</strong> Parigi, Francia, 20-28 maggio <strong>2004</strong><br />
Le demenze. Un approccio multi<strong>di</strong>sciplinare Valutazione neuropsicologica negli stu<strong>di</strong><br />
multicentrici. 20 maggio <strong>2004</strong>, Ancona<br />
Le demenze. L'epidemiologia delle demenze. 21 maggio <strong>2004</strong>, San Giovanni Rotondo (FG)<br />
Riunione <strong>annuale</strong> Associazione Italiana per la Ricerca sull’Invecchioamento Cerebrale – Società<br />
59<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Italiana <strong>di</strong> Neuropatologia, Padova 24-26 maggio <strong>2004</strong><br />
Workshop of the Italian Proteomic Society, Verona 27-29 Maggio, <strong>2004</strong><br />
2D gel versus 2D Western blot analysis by Progenesis software<br />
VIII ITINAD Annual Meeting. Eparin and Alzheimer <strong>di</strong>sease:, 3-5 Giugno <strong>2004</strong><br />
Convegno WAPR Italia. Approcci innovativi nella residenzialità psichiatrica<br />
4 giugno <strong>2004</strong>, Roma<br />
IRFMN<br />
Scuola <strong>di</strong> Specializzazione <strong>di</strong> Neurochirurgia - 3¯ Giornata <strong>di</strong> neurochirurgia Funzionale "I<br />
Farmaci Antiepilettici nel Paziente Neurochirurgico: Prevenzione, Trattamento?" Università<br />
Cattolica del Sacro Cuore - Roma, Policlinico "A. Gemelli" 14 giugno <strong>2004</strong>.<br />
Convegno Neuroscienze Molecolari Milano, 17-18 giugno <strong>2004</strong><br />
56th Annual Meeting of the American Academy of Neurology. April 24 - May 1, <strong>2004</strong> San<br />
Francisco, California.<br />
6th European Congress on Epileptology in Vienna, Austria. 30th May - 3rd June, <strong>2004</strong><br />
Workshop La Sclerosi Laterale Amiotrofica, IV workshop nazionale, Napoli 11-12 Giugno,<br />
<strong>2004</strong><br />
Morte cellulare: apoptosi,necrosi o...?<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Foggia Azienda Ospedaliero-Universitaria "Ospedali Riuniti" <strong>di</strong><br />
Foggia - Corso avanzato <strong>di</strong> aggiornamento in "EPILESSIA" - Manfredonia, 16-20 giugno <strong>2004</strong>.<br />
XXIVth CINP Congress "The serotonin 5-HT2A receptors in the prefrontal cortex by<br />
modulating cortical glutamate transmission may serve to optimise the executive control of<br />
attention." Invited Speaker June 20-24, 2005 Paris, France<br />
The 9th International Conference on Alzheimer's <strong>di</strong>sease and Related Disorders.<br />
Low levels of B vitamins and the risk of cognitive and functional decline in the very old:<br />
Results from the Monzino 80-plus Study.<br />
Extra caregiver time due to dementia: Results from the Monzino 80-plus Study.<br />
Bis-naphthol reduces prion infectivity and increase survival in experimental scrapie<br />
Nicastrin mutation (N417Y) is a risk factor in Alzheimer's <strong>di</strong>sease 17-22 luglio <strong>2004</strong>,<br />
Philadelphia, USA<br />
Convegno: Federation European Neuroscience (FENS) Lisbona, Portogallo July <strong>2004</strong><br />
Tole of the ubiquitin-proteasome pathway in familial amyotrophic lateral sclerosis.<br />
Beneficial effect of riluzole and acety-l-carnitine (ALC) in a transgenic mouse model of familial<br />
ALS.<br />
Stu<strong>di</strong>es on hSOD-1 accumulation and on the ubiquitin/proteasome pathway in a murine model<br />
of amyotrophic lateral sclerosis<br />
Regional Meeting World Psychiatric Association. Evidence-based mental health care: a critical<br />
view<br />
16-18 settembre <strong>2004</strong>, Lahore, Pakistan<br />
27¯ Congresso Nazionale Lice, Milano 19 - 22 Settembre Università degli Stu<strong>di</strong>. Simposio<br />
60<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
GlaxoSmithKline "Epilessia e donna" 19 Settembre <strong>2004</strong>.<br />
Stroke and inflammation: 7th International Congress of Neuroimmunology,<br />
Venezia, 28 September-2 October <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
SIN-XXXV Congresso Società Italiana <strong>di</strong> Neurologia<br />
"Encefalopatie e demenze: il contributo <strong>di</strong> un registro nazionale all'assistenza ed alla ricerca".<br />
Proteomic analysis of nitrated proteins in a mouse model of familial amyotrophic lateral<br />
sclerosis<br />
Proteomic characterization of aggregates in a transgenic mouse model of familial amyotrophic<br />
lateral sclerosis<br />
Geografia molecolare e cellulare della degenerazione del motoneurone. Genova 25-29<br />
Settembre <strong>2004</strong>.<br />
Patologie degenerative del motoneuroni: 1¯ Convegno Toscano: Fattoria Pieve a Salti (SI) 7-10<br />
ottobre <strong>2004</strong><br />
Dalle alterazioni mitocondriali agli aggregati proteici: un percorso unico nei topi con SOD1<br />
mutata?<br />
La gestione del dolore cronico nello stu<strong>di</strong>o del Me<strong>di</strong>co <strong>di</strong> Famiglia Il paziente anziano con<br />
dolore 16 ottobre, 6 e 13 novembre <strong>2004</strong>, Milano<br />
Azienda Ospedaliera Universitaria <strong>di</strong> Verona, SIN-SNO Triveneto, LICE Veneto: "Le epilessie<br />
sintomatiche dell'adulto. Attualità clinico-terapeutiche". Verona, 23 Ottobre <strong>2004</strong> - Centro<br />
Me<strong>di</strong>co Culturale "G. Marani"<br />
Congresso Mon<strong>di</strong>ale della World Social Psychiatry Outcome of schizophrenia in the age of<br />
community care<br />
26-28 ottobre <strong>2004</strong>, Kobe, Giappone<br />
The role of protein aggregation in neurodegeneration 6° Special Interest Subgroups - Protein<br />
Toxicity Congresso FISV 30 settembre – 3 ottobre <strong>2004</strong>, Riva del Garda (TN)<br />
34th Annual meeting of Society For Neuroscience, "Activation of mGlu2/3 receptors prevents<br />
phencycli<strong>di</strong>ne induced attentional deficits in mice"<br />
Ubiquitinated aggregates in a transgenic mouse model of familial amyotrophic lateral sclerosis:<br />
mechanisms of formation and proteomic characterization.<br />
"Role of 5-HT2C receptors in controlling GABAergic transmission in the substantia nigra<br />
reticulata"<br />
"Activation of mGlu2/3 receptors prevents phencycli<strong>di</strong>neinduced attentional deficits in mice"<br />
SB-277011-A, a selective dopamine D3 receptor antagonist, reduces cocaine, but not sucrose<br />
pellet-seeking behavior in response to associated stimuli in rats. 23-27 October <strong>2004</strong> San Diego,<br />
USA<br />
Specific intracellular signalling pathways associated to p38MAP Kinase in a transgenic mouse<br />
model of ALS during the progression of the <strong>di</strong>sease.<br />
120th ENMC International Workshop: European Minocycline in ALS (EUMINALS)<br />
24th - 26th October 2003, Naarden, The Netherlands<br />
Inflammatory mechanisms in ALS: Animal models<br />
I Congresso Nazionale ANIRCEF (Associazione Neurologica Italiana per la Ricerca sulle<br />
61<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Cefalee): "Le cefalee e la neurologia". Monza, 28 - 31 Ottobre <strong>2004</strong>.<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Messina: "Introduzione alla ricerca scientifica in neuroscienze<br />
cliniche". Corso Residenziale Messina, 5 - 6 Novembre <strong>2004</strong>, Villa Pace.<br />
Convegno ASL 2 <strong>di</strong> Torino. Riflessioni e connessioni. Tendenze attuali della riabilitazione<br />
psicosociale<br />
5 novembre <strong>2004</strong>, Torino<br />
Congresso Mon<strong>di</strong>ale World Psychiatric Association. Innovations in outcome assessment of<br />
psychosocial interventions in severe mental <strong>di</strong>sorders<br />
12 e 13 novembre <strong>2004</strong>, Firenze<br />
Epilepsy and Epidemiology. Swe<strong>di</strong>sh Epilepsy Society - Umea, 11-12 Novembre, <strong>2004</strong>.<br />
IRFMN<br />
Advanced Course on Neurodegenerative Disorders. University of Coimbra, Coimbra, Portugal,<br />
22-26 Novembre, <strong>2004</strong><br />
Corso <strong>di</strong> formazione per gli operatori psichiatrici della Regione Liguria. Revisione della<br />
letteratura sugli interventi precoci nelle psicosi<br />
23 novembre <strong>2004</strong>, Genova<br />
Convegno nazionale ProgresAcuti. Il servizio <strong>di</strong> ricovero nell'organizzazione <strong>di</strong>partimentale<br />
25 e 26 novembre <strong>2004</strong>, Bologna<br />
Convegno OMS e Regione Lombar<strong>di</strong>a. Valutazione del sistema dei servizi <strong>di</strong> salute mentale in<br />
Lombar<strong>di</strong>a<br />
30 novembre e 1 <strong>di</strong>cembre <strong>2004</strong>, Milano<br />
La valutazione neuropsicologica del paziente demente. 2 <strong>di</strong>cembre <strong>2004</strong>, Lugano, Svizzera<br />
15th International symposium on ALS /MND, Philadelphia, USA 2-4 December, <strong>2004</strong><br />
Cellular selective activation of p38MAPK upstream pathway in the spinal cord of transgenic<br />
sod1 mutant mice during progession of <strong>di</strong>sease.<br />
Congresso WAPR Paesi Baschi. Outcome evaluation of mental hospital closure<br />
3 <strong>di</strong>cembre <strong>2004</strong>, Bilbao, Spagna<br />
Corso: "Modelli per la Prevenzione, la Sorveglianza, la Diagnosi e la Terapia delle Malattie<br />
Rare." Organizzato dall'<strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità, 9 - 10 Dicembre <strong>2004</strong>.<br />
Giornata <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o sugli interventi precoci nelle psicosi. Rilievi critici sulla letteratura sugli<br />
interventi precoci<br />
15 <strong>di</strong>cembre <strong>2004</strong>, Milano<br />
62<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
IRFMN<br />
Amgen, Milano<br />
Associazione Trenta Ore per la Vita<br />
Azienda "Santa Maria della Misericor<strong>di</strong>a", U<strong>di</strong>ne<br />
Azienda Ospedaliera "Salvini" <strong>di</strong> Garbagnate<br />
Azienda Ospedaliera S. Paolo, Milano<br />
Boehringer Ingelheim<br />
Dyax<br />
Federazione Alzheimer, Milano<br />
Fondazione Cariplo<br />
Fondazione Mariani, Milano<br />
Fondazione Monzino, Milano<br />
Glaxo-SmithKline<br />
Hospice "via <strong>di</strong> Natale", Aviano (PN)<br />
IMPHA II, DG-SANCO, Public Health and Consumers' Protection (Directorate General<br />
<strong>Istituto</strong> Comprensivo Statale "G.D. Romagnosi", Carate Brianza (MI)<br />
I.R.I.S<br />
<strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità<br />
Janssen-Cilag<br />
Ministero della Ricerca Scientifica<br />
Ministero della Salute<br />
Nikem Research<br />
Ospedale “Casa Sollievo” <strong>di</strong> San Giovanni Rotondo<br />
Pfizer Italia<br />
Pharming<br />
Regione Lombar<strong>di</strong>a, Assessorato alla Famiglia e Solidarietà Sociale e Assessorato alla SanitÖ,<br />
Milano<br />
Rimol<strong>di</strong> e Bergamini<br />
SELECTA MEDICA, Pavia<br />
Sigma-Tau<br />
SPA -Omega-3<br />
63<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Adriani W, Rea M, Baviera M, Invernizzi R, Carli M, Ghirar<strong>di</strong> O, Caprioli A, Laviola G<br />
Acetyl-L-carnitine reduces impulsive behaviour in adolescent rats<br />
Psychopharmacology (Berl) 176: 296-304 (<strong>2004</strong>)<br />
IRFMN<br />
Albani D., Peverelli, E., Zametta, R., Veschini, L. Negro, A. Forloni, G. Protective effect of TAT-delivered alpha<br />
synuclein: relevance of the C-terminal domain and involvement of HSP70.<br />
FASEB J. 18:1713-5 (<strong>2004</strong>)<br />
Banfi C, Sironi L, De Simoni M G, Gelosa P, Barcella S, Perego C, Gianazza E, Guerrini U, Tremoli E and Mussoni<br />
L. Pentoxifylline prevents spontaneous brain ischemia in stroke-prone rats, J Pharmacol Exp Ther 310: 890-895<br />
(<strong>2004</strong>)<br />
Barbato A, D'Avanzo B. Epidemiology of voluntary placement of mentally ill people across the European Union.<br />
Lettera. British J.Psychiatry 184:163-168 (<strong>2004</strong>)<br />
Barbato A, D'Avanzo B, Rocca G, Amatulli A, Lampugnani D. A Study of long-stay patients resettled in the<br />
community after closure of a psychiatric hospital in Italy. Psychiatric Services 55:67-70 (<strong>2004</strong>)<br />
Barbato A, Monzani E, Schiavi T. Life satisfaction in a sample of outpatients with severe mental <strong>di</strong>seases. A survey<br />
in Northern Italy. Quality of Life Research 13:969-973 (<strong>2004</strong>)<br />
Beghi, E., M. Roncolato, G. Visonà. Depression and altered quality of life in women with epilepsy of childbearing<br />
age. Epilepsia 45: 64-70 (<strong>2004</strong>)<br />
Beghi, E., L. Garattini, E. Ricci, D. Cornago, F. Parazzini and EPICOS Group. Direct cost of me<strong>di</strong>cal management of<br />
epilepsy among adults in Italy: a prospective cost-of-illness study (EPICOS). Epilepsia 45: 171-178 (<strong>2004</strong>)<br />
Beghi, E., C. Gandolfo, C. Ferrarese, et al. Bovine spongiform encephalopathy and creutzfeldt-jakob <strong>di</strong>sease: facts<br />
and uncertainties underlying the causal link between animal and human <strong>di</strong>sease. Neurol Sci 25: 122-129 (<strong>2004</strong>)<br />
Beghi, E., M. Beghi, C. Cornaggia. Primary prevention of epilepsy in patients with <strong>di</strong>fferent epileptogenic con<strong>di</strong>tions.<br />
Expert Rev. Neurotherapeutics; 4: 945-952. (<strong>2004</strong>)<br />
Beghi.E. Efficacy and tolerability of the new antiepileptic drugs: comparison of two recent guidelines. Lancet Neurol<br />
3: 618-621 (<strong>2004</strong>)<br />
Bendotti C. and Carri, MT. Lessons from models of SOD1-limkec familial ALS.<br />
Trends Mol Med. 10 :393-400 (<strong>2004</strong>)<br />
Bendotti,C., C. Atzori, R. Piva, M. Tortarolo, M.J. Strong, S. DeBiasi and A. Migheli Activated p38MAPK is a novel<br />
component of the intracellular inclusions found in human amyotrophic lateral sclerosis and mutant SOD1 transgenic<br />
mice. J. Neuropath. Exp.l Neurol. 63, 113–119 (<strong>2004</strong>)<br />
Bergamaschini L, Rossi E, Storini C, Pizzimenti S, Distaso M, Perego C, De Luigi A, Vergani C and De Simoni MG.<br />
Peripheral treatment with enoxaparin, a low-molecular weight heparin, reduces plaques and beta-amyloid<br />
accumulation in a mouse model of Alzheimer's <strong>di</strong>sease. J. Neurosci. 24: 4181-4186 (<strong>2004</strong>)<br />
Biasini, E., Fioriti, L., Ceglia, I., Bertoli, A. Invernizzi, R., Chiesa, R. , Forloni, G.Proteasome inhibition and<br />
aggregation in Parkinson's <strong>di</strong>sease: fart and artifacts in cellular models. J. Neurochem. 88:545-53. (<strong>2004</strong>)<br />
Borsello T, Bonny C. Use of cell-permeable peptides to prevent neuronal degeneration. Trends Mol Med. 10:239-44<br />
(<strong>2004</strong>)<br />
Caccia S. Metabolism of the newest antidepressants: Comparisons with related predecessors. IDrugs 7: 143-150<br />
(<strong>2004</strong>)<br />
Campiani G, Butini S, Fattorusso C, Catalanotti B, Gemma S, Nacci V, Morelli E, Cagnotto A, Mereghetti I, Mennini<br />
T, Carli M, Minetti P, Di Cesare M A, Mastroianni D, Scafetta N, Galletti B, Stasi M A, Castorina M, Pacifici L,<br />
64<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Vertechy M, Di Serio S, Ghirar<strong>di</strong> O, Tinti O, Carminati P<br />
Pyrrolo[1,3]benzothiazepine-based serotonin and dopamine receptor antagonists. Molecular modeling, further<br />
structure-activity relationship stu<strong>di</strong>es, and identification of novel atypical antipsychotic agents<br />
J Med Chem 47: 143-157 (<strong>2004</strong>)<br />
IRFMN<br />
Carli M, Baviera M, Invernizzi R, Balducci C<br />
The serotonin 5-HT2A receptors antagonist MI00907 prevents impairment in attentional performance by NMDA<br />
receptor blockade in the rat prefrontal cortex<br />
Neuropsychopharmacology 29: 1637-1647 (<strong>2004</strong>)<br />
Ceglia I, Carli M, Baviera M, Renol<strong>di</strong> G, Calcagno E, Invernizzi R<br />
The 5-HT2A receptor antagonist M100,907 prevents extracellular glutamate rising in response to NMDA receptor<br />
blockade in the mPFC<br />
J Neurochem 91: 189-199 (<strong>2004</strong>)<br />
Ceglia I, Acconcia S, Fracasso C, Colovic M, Caccia S, Invernizzi R<br />
Effects of chronic treatment with escitalopram or citalopram on extracellular 5-HT in the prefrontal cortex of rats:<br />
Role of 5-HT1A receptors<br />
Br J Pharmacol 142: 469-478, <strong>2004</strong><br />
Colovic M, Zennaro E, Caccia S. Liquid chromatographic assay for riluzole in mouse plasma and central nervous<br />
system tissues. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 803: 305-309, (<strong>2004</strong>)<br />
Cervo L, Mennini T, Rozio M, Canetta A, Burbassi S, Guiso G, Pirona L, Riva A, Morazzoni P, Caccia S, Gobbi M.<br />
Potential antidepressant properties of IDN 5491 (hyperforin-trimethoxybenzoate), a semisynthetic ester of hyperforin<br />
Eur Neuropsychopharmacol , In Press (available on line 26 October <strong>2004</strong>)<br />
D'Avanzo B, Battino R N, Gallus S, Barbato A. Factors pre<strong>di</strong>cting <strong>di</strong>scharge of patients from community residential<br />
facilities: A longitu<strong>di</strong>nal study from Italy. Australian and New Zealand J Psych 38:619-628 (<strong>2004</strong>)<br />
De Simoni M G, Rossi E, Storini C, Pizzimenti S, Echart C, Bergamaschini L. The powerful neuroprotective action<br />
of C1-inhibitor on brain ischemia-reperfusion injury does not require C1q. Am J Pathol., 164: 1857-1863 (<strong>2004</strong>)<br />
Fenoglio C. , Galimberti, D., Lovati, C. Gui<strong>di</strong>, I. , Gatti, A., Fogliarino, S., Tiriticco, M., Mariani, C. Forloni, G.<br />
Pettinati, C., Baron, P., Conti, G. Bresolin, N. and Scarpini, E. MCP-1 in Alzheimer’s <strong>di</strong>sease patients: A-2518G<br />
polymorphism and serum levels Neurobiol Aging 25: 1169-73. (<strong>2004</strong>)<br />
Ferri ALM, Cavallaro M, Braida D, Di Cristofano A, canta A, Vezzani A, Ottolenghi S, pandolfi PP, Sala M, DeBiasi<br />
S, Nicolis SK "Sox2 deficiency causes neurodegeneration and impaired neurogenesis in the adult mouse brain"<br />
Development, 131: 3805-3819 (<strong>2004</strong>)<br />
Forloni G., Immune system contributing to prion <strong>di</strong>seaseas,<br />
Drug Discovery Today: Disease mechanisms 1: 351-356 (<strong>2004</strong>)<br />
Galimberti, D., Fenoglio, C., Lovati, C., Gatti, A., Gui<strong>di</strong>, I. Ventanelli, E., Gary, R., Mariani, C., Forloni, G.<br />
Pettenati, C., Baron, P. Comi, G. Bresolin, N. and Scarpini, E.CCR2-641 plymorphism and CCR5D32 deletion in<br />
patients with Alzheimer’s <strong>di</strong>sease J. Neurol Sci 225: 79-83 (<strong>2004</strong>)<br />
Grignaschi G, Burbassi S, Zennaro E, Bendotti C, Cervo L<br />
A single high dose of cocaine induces behavioural sensitization and mo<strong>di</strong>fies mRNA enco<strong>di</strong>ng GluR1 and GAP-43 in<br />
rats Eur J Neurosci 20:2833-2837 (<strong>2004</strong>)<br />
Invernizzi R, Garattini S<br />
Role of presynaptic alpha2-adrenoceptors in antidepressant action: Recent fin<strong>di</strong>ngs from micro<strong>di</strong>alysis stu<strong>di</strong>es Prog<br />
Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry 28: 819-827 (<strong>2004</strong>)<br />
Lanzi, G., C.A. Zambrino, C. Termine, M. Palestra. O. Ferrari Ginevra, S. Orcesi, P. Manfre<strong>di</strong>, E. Beghi. Prevalence<br />
of tic <strong>di</strong>sorders among primary school students in the city of Pavia, Italy. Arch Dis Child 89: 45-47 (<strong>2004</strong>).<br />
Marchi N, Hallene KL, Kight KM, Cucullo L, Moddel G, Bingaman W, Dini G, Vezzani A, Janigro D. Significance<br />
of MDR1 and multiple drug resistance in refractory human epileptic brain BMC Med, 2: 37. (<strong>2004</strong>)<br />
Mennini, T., P. Bigini, A. Cagnotto, L. Carvelli, P. Di Nunno, E. Fumagalli, M. Tortarolo, W. A. Buurman, P. Ghezzi<br />
65<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
and C. Bendotti .<br />
Glial activation and TNFR-I upregulation precedes motor dysfunction in the spinal cord of mnd mice. Cytokine, 25<br />
pp 127-135 (<strong>2004</strong>)<br />
Millan M J, Gobert A, Roux S, Porsolt R, Meneses A, Carli M, Di Cara B, Jaffard R, Rivet J M, Lestage P, Mocaer<br />
E, Peglion J L, Dekeyne A<br />
The serotonin1A receptor partial agonist S15535 [4-(benzo<strong>di</strong>oxan-5-yl)1-(indan-2-yl)piperazine enhances cholinergic<br />
transmission and cognitive function in rodents: A combined neurochemical and behavioral analysis J Pharmacol Exp<br />
Ther 311: 190-203 (<strong>2004</strong>)<br />
Nobili A, Riva E, Tettamanti M, Lucca U, Liscio M, Petrucci B, Salvini Porro G. The effect of a structured<br />
intervention on caregivers of patients with dementia and problem behaviors. A randomized controlled study.<br />
Alzheimer Dis Ass Disorders 18: 75-82 (<strong>2004</strong>)<br />
Quadri P, Fragiacomo C, Pezzati R, Zanda E, Forloni G, Tettamanti M, Lucca U. Homocysteine, folate, and vitamin<br />
B-12 in mild cognitive impairment, Alzheimer <strong>di</strong>sease, and vascular dementia. American J. Clin Nutr. 80: 114-122<br />
(<strong>2004</strong>)<br />
Richichi C, E-J. D. Lin, D. Stefanin, D. Colella, T. Ravizza,G. Grignaschi, G. Sperk, M. J. During and A. Vezzani "<br />
Anticonvulsant and antiepileptogenic effects me<strong>di</strong>ated by adeno-associated virus vector neuropeptide Y expression in<br />
the rat hippocampus" J Neurosci, 24: 3051-3059 (<strong>2004</strong>)<br />
Specchio, LM. and Beghi, E. Should antiepileptic drugs be withdrawn in seizure-free patients? CNS Drugs <strong>2004</strong>; 18:<br />
201-212.<br />
Troglio F, Echart C, Gobbi A, Pawson T, Pelicci PG, De Simoni MG & Pelicci G. The neuron-specific Rai (Shc C)<br />
adaptor regulates the PI3K-Akt pathway in vivo and protects against cerebral ischemia. Proc Natl Acad Sci U S A<br />
101(43): 15476-15481 (<strong>2004</strong>)<br />
Tomson, T. E. Beghi, A. Sundqvist, S.I. Johannessen. Me<strong>di</strong>cal risks in epilepsy: a review with focus on physical<br />
injuries, mortality, traffic accidents and their prevention. Epilepsy Res 60: 1-16 (<strong>2004</strong>)<br />
Tonini, C., E. Beghi, A.T. Berg, G. Bogliun, L. Giordano, R.W. Newton, A. Tetto, E. Vitelli, D. Vitezic, S. Wiebe.<br />
Pre<strong>di</strong>ctors of epilepsy surgery outcome: a meta-anaysis. Epilepsy Res 62: 75-87 (<strong>2004</strong>).<br />
Tortarolo, M., A. J. Crossthwaite, L. Conforti, R. J. Williams, C. Bendotti and M. Rattray. Expression of SOD1<br />
G93A or wild-type SOD1 in primary cultures of astrocytes downregulates the glutamate transporter GLT-1: lack of<br />
involvement of oxidative stress. J. Neurochem 88:481-93 (<strong>2004</strong>)<br />
Vanoni, c., S. Massari, M. Losa, P. Carrera, C. Perego, L. Conforti, and G. Pietrini Increased internalisation and<br />
degradation of the GLT-1 glial glutamate transporter in a cell model to study the molecular mechanisms underlying<br />
familial amyotrophic lateral sclerosis (ALS). J. Cell. Sci. 117(Pt 22):5417-26 (<strong>2004</strong>)<br />
66<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
SELEZIONE PUBBLICAZIONI DIVULGATIVE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Barbato A, Ciniselli G. Lo stato dell'arte in riabilitazione psichiatrica. Prospettive Sociali e Sanitarie <strong>2004</strong>; 7:1-3.<br />
IRFMN<br />
Beghi. E. L’epidemiologia dell’epilessia. Epilepsy News, Trimestrale <strong>di</strong> Aggiornamento sull’Epilessia. Giugno <strong>2004</strong>;<br />
n° 3: pp. 1-4.<br />
Beghi E.. Antiepilettici. Ricerca & Pratica <strong>2004</strong>; 20:261-266.<br />
Bendotti. C. Geografia molecolare e cellulare della degenerazione del motoneurone. Neurological Sci. 25, S613- 618,<br />
<strong>2004</strong><br />
Caccia S. Isoenzimi del citocromo P450 e variabilita' della risposta farmacologica (versione cd-rom) In: Interazioni<br />
tra farmaci, il cd-rom. Selecta Me<strong>di</strong>ca, Pavia; <strong>2004</strong><br />
Caccia S, Nobili A. Citocromo P450 e interazioni metaboliche (parte I: basi farmacologiche e potenziali conseguenze<br />
cliniche). Ricerca & Pratica <strong>2004</strong>; 20: 146-156.<br />
Felcher A, Barbato A. Sospesi fra pió mon<strong>di</strong>. Un'esperienza <strong>di</strong> approccio <strong>di</strong> gruppo al <strong>di</strong>sagio psichico del migrante.<br />
Psichiatria <strong>di</strong> ComunitÖ <strong>2004</strong>; 3:127-132.<br />
Nobili A, Garattini S. Interazioni tra farmaci: il paziente <strong>di</strong>abetico. Aggiornamento Me<strong>di</strong>co <strong>2004</strong>; 28: 33-36.<br />
Nobili A, Garattini S. Interazioni tra farmaci: benzo<strong>di</strong>azepine. Aggiornamento Me<strong>di</strong>co <strong>2004</strong>; 28: 133-136.<br />
Nobili A, Garattini S. Interazioni tra farmaci: profilassi per chi viaggia. Aggiornamento Me<strong>di</strong>co <strong>2004</strong>; 28: 210-215.<br />
Nobili A, Garattini S. Interazioni tra farmaci: le statine. Aggiornamento Me<strong>di</strong>co <strong>2004</strong>; 28: 293-297.<br />
Nobili A, Garattini S. Interazioni tra farmaci: gli antibiotici beta-lattamici. Aggiornamento Me<strong>di</strong>co <strong>2004</strong>; 28: 372-<br />
378.<br />
Nobili A, Pasina L. Le interazioni dei contraccettivi orali: una valutazione della loro rilevanza clinica. Ricerca &<br />
Pratica <strong>2004</strong>; 20: 73-82.<br />
Nobili A, Piana I. Il progetto "Cara nonna": come parlare ai bambini della malattia <strong>di</strong> Alzheimer. Ricerca & Pratica<br />
<strong>2004</strong>; 20: 215-220.<br />
Vezzani A Terapia genica nell'epilessia<br />
Ricerca & Pratica <strong>2004</strong>; n. 116: 59-62<br />
ALTRE PRODUZIONI EDITORIALI PUBBLICATE NEL CORSO DEL<br />
<strong>2004</strong><br />
Garattini S, Nobili A. Interazioni tra farmaci: una valutazione della loro rilevanza clinica. Il CD-ROM. Pavia:<br />
SELECTA MEDICA Ed., aprile <strong>2004</strong>.<br />
Mennini T, Caccia S. Interazioni tra farmaci e prodotti erboristici: l'esempio degli estratti <strong>di</strong> Hypericum Perforatum<br />
(versione cd-rom) In: Interazioni tra farmaci, il cd-rom. Selecta Me<strong>di</strong>ca, Pavia; <strong>2004</strong><br />
67<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia delle Malattie Neurodegenerative<br />
IRFMN<br />
Malattia <strong>di</strong> Alzheimer: stu<strong>di</strong> genetici<br />
In collaborazione con <strong>di</strong>versi centri neurologici e il laboratorio <strong>di</strong> Neuropsichiatria Geriatrica è<br />
stata creata una banca <strong>di</strong> campioni <strong>di</strong> sangue, da cui si estrae il DNA, <strong>di</strong> pazienti Alzheimer<br />
(AD) in forma spora<strong>di</strong>ca (SAD) o familiare (FAD) o con demenza <strong>di</strong> tipo vascolare,<br />
<strong>di</strong>agnosticati secondo criteri riconosciuti a livello internazionale. Alla fine del <strong>2004</strong> il numero <strong>di</strong><br />
campioni AD spora<strong>di</strong>ci ha superato le 700 unità mentre quelli FAD sono circa 200. Gli stu<strong>di</strong><br />
genetici sono finalizzati all'identificazione <strong>di</strong> fattori causali nelle forma familiari o fattori <strong>di</strong><br />
rischio nelle forma spora<strong>di</strong>che. In entrambe le popolazioni sono stati effettuati stu<strong>di</strong> sui geni che<br />
co<strong>di</strong>ficano per nicastrina e PEN-2, due proteine <strong>di</strong> recente identificazione coinvolte nella<br />
fisiopatologia <strong>di</strong> AD. Grazie all’analisi in DHPLC, una mutazione sul gene che co<strong>di</strong>fica per<br />
nicastrina (N417Y) è stata identificata come fattore <strong>di</strong> rischio in AD. Due sono invece i<br />
polimorfismi in<strong>di</strong>viduati sul gene che co<strong>di</strong>fica per PEN-2 entrambi in pazienti FAD. Il ruolo<br />
patogenetico <strong>di</strong> una <strong>di</strong> queste mutazioni è attualmente allo stu<strong>di</strong>o utilizzando fibroblasti<br />
prelevati dalla cute del paziente. Nei fibroblasti coltivati in vitro sarà analizzato il metabolismo<br />
della proteina precursore dell’amiloide (APP), le cui alterazioni potrebbero essere associate allo<br />
sviluppo della patologia. E’ inoltre proseguito lo screening dei campioni FAD per i geni che<br />
co<strong>di</strong>ficano per presenilina 1 e 2 (PS-1 e PS-2) e APP, i tre geni identificati fino ad ora con<br />
mutazioni missenso associate ad AD. In particolare è stato approfon<strong>di</strong>to il ruolo patogenetico<br />
della mutazione E318G sul gene che co<strong>di</strong>fica per PS1 in una famiglia con FAD <strong>di</strong> cui abbiamo<br />
numerosi prelievi.<br />
Alzheimer's <strong>di</strong>sease: stu<strong>di</strong> preclinici<br />
L'accumulo <strong>di</strong> beta proteina (bA) nel parenchima cerebrale e sulle pareti vascolari è il fenomeno<br />
patologico più precoce in AD, ad esso numerosi stu<strong>di</strong> hanno attribuito un ruolo causale nello<br />
sviluppo della malattia. L'eliminazione <strong>di</strong> aA è <strong>di</strong>ventato quin<strong>di</strong> un obiettivo terapeutico<br />
fortemente perseguito attraverso molteplici approcci: gli interventi a livello degli enzimi <strong>di</strong><br />
sintesi e <strong>di</strong> degradazione del peptide, quelli in grado <strong>di</strong> regolare l'espressione del precursore o il<br />
suo metabolismo ecc. Nel laboratorio da <strong>di</strong>versi anni si persegue l'idea <strong>di</strong> poter aggre<strong>di</strong>re i<br />
depositi <strong>di</strong> bA attraverso un intervento <strong>di</strong>retto <strong>di</strong> tipo anti-amiloidogenico sugli aggregati,<br />
capace <strong>di</strong> impe<strong>di</strong>rne la formazione o <strong>di</strong> eliminarli una volta formati. I dati più interessanti sono<br />
stati ottenuti con le tetracicline, una classe <strong>di</strong> antibiotici <strong>di</strong> cui alcuni elementi hanno anche la<br />
capacità <strong>di</strong> passare la barriera emato-encefalica. Gli stu<strong>di</strong> sperimentali hanno messo in luce<br />
l’effetto anti-amiloidogenico delle tetracicline ed il loro potenziale ruolo curativo che sarà<br />
testato in ambito clinico. In collaborazione con il Dipartimento <strong>di</strong> Biochimica e Farmacologia<br />
Molecolare, nel <strong>2004</strong> sono state testate altre molecole capaci <strong>di</strong> legare gli aggregati <strong>di</strong> amiloide<br />
con la doppia finalità <strong>di</strong> in<strong>di</strong>viduare molecole anti-demenza e possibili markers <strong>di</strong>agnostici. La<br />
capacità <strong>di</strong> legare gli aggregati <strong>di</strong> amiloide può essere utilizzata anche per identificare la<br />
presenza <strong>di</strong> placche in vivo con tecniche <strong>di</strong> imaging<br />
Malattie da prioni: stu<strong>di</strong> in vitro<br />
Le encefalopatie spongiformi (ES) sono malattie neurodegenerative <strong>di</strong> origine spora<strong>di</strong>ca o<br />
genetica ma anche trasmissibili, hanno manifestazioni cliniche e neuropatologiche <strong>di</strong>fferenti ma<br />
invariabilmente caratterizzate dall’accumulo cerebrale <strong>di</strong> un forma alterata della proteina prion<br />
(PrPsc). Le ES sono malattie rare ma la possibile trasmissione <strong>di</strong> una forma bovina della<br />
malattia (BSE) all'uomo ha creato grande allarme sanitario prima in Inghilterra e poi in tutta<br />
Europa. Come è noto PrPsc oltre ad essere coinvolta nella patogenesi della malattia è anche<br />
68<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
componente essenziale dell’agente infettivo. Nel laboratorio si sono sviluppati <strong>di</strong>versi progetti<br />
per comprendere il meccanismo molecolare che associa la presenza della PrPsc allo sviluppo del<br />
processo neurodegenerativo. Uno <strong>di</strong> questi, in collaborazione con il laboratorio <strong>di</strong> Biochimica e<br />
Chimica delle Proteine, prevede la sintesi <strong>di</strong> pepti<strong>di</strong> omologhi a larghe porzioni della proteina<br />
prion e lo stu<strong>di</strong>o dei loro effetti biologici e delle loro caratteristiche chimico-fisiche. Tra i<br />
pepti<strong>di</strong> sintetizzati si è conclusa la caratterizzazione del peptide, 82-146 omologo a un<br />
frammento <strong>di</strong> PrP ritrovato nei depositi cerebrali in pazienti con ES. PrP 82-146 si struttura in<br />
foglietti beta e ha attività neurotossica, rappresenta quin<strong>di</strong> un ottimo modello per lo stu<strong>di</strong>o in<br />
vitro della proteina prion. Nel corso del <strong>2004</strong> è stato affrontato il potenziale ruolo tossico della<br />
PrP definita “citoplasmatica”. In questo caso il fenomeno degenerativo dovrebbe essere indotto<br />
da un meccanismo intracellulare che dà luogo all’accumulo della proteina con conseguenze<br />
deleterie per la cellula nervosa. I nostri dati non hanno confermato questa ipotesi che pure aveva<br />
avuto largo seguito nella letteratura scientifica del settore. E’ proseguito lo stu<strong>di</strong>o del ruolo<br />
funzionale e patologico della PrP nel modello cellulare “inducibile”, capace cioè sotto il<br />
controllo <strong>di</strong> doxiciclina <strong>di</strong> esprimere forme mutate e native <strong>di</strong> PrP in linee cellulari PC12. Le<br />
forme mutate sia <strong>di</strong> tipo inserzionale, con 9 extra octapepti<strong>di</strong>, che puntiformi con mutazione<br />
acido aspartico/asparagina al codone 178, entrambe associate a forma familiari <strong>di</strong> ES.<br />
Malattie da prioni: scrapie sperimentale<br />
Da qualche anno il laboratorio è dotato delle strutture necessarie per lo scrapie sperimentale, gli<br />
animali da esperimento, topi e criceti, sono inoculati con omogenato <strong>di</strong> tessuto cerebrale infetto.<br />
I criceti, dopo l’inoculo cerebrale, sviluppano la malattia entro 60-70 giorni e muoiono entro 90-<br />
100 giorni. L’analisi istopatologica dell’encefalo <strong>di</strong> questi animali mette in evidenza i depositi<br />
<strong>di</strong> PrPsc, il danno neuronale, la gliosi e la caratteristica spongiosi a livello corticale e talamico.<br />
L’attività anti-amiloidogenica <strong>di</strong> <strong>di</strong>verse molecole sono attualmente allo stu<strong>di</strong>o per verificare la<br />
capacità curativa.<br />
Malattie da prioni: topi PG14<br />
Oltre allo scrapie sperimentale nel laboratorio è presente, sviluppato dal dr. Chiesa negli Stati<br />
Uniti, un altro modello in vivo per lo stu<strong>di</strong>o delle ES, si tratta <strong>di</strong> topi transgenici che esprimono<br />
la forma mutata della proteina prion (PG14). Questi animali, nella forma omozigote, sviluppano<br />
dai tre mesi <strong>di</strong> vita delle alterazioni motorie sempre più gravi e arrivano a morte intorno ai sei<br />
mesi. Da un punto <strong>di</strong> vista neuropatologico, i topi PG14 presentano un danno cerebellare molto<br />
evidente a carico delle cellule granulari, mentre nelle altre aree cerebrali non ci sono evidenti<br />
alterazioni. Nel tessuto cerebrale è presente una forma <strong>di</strong> proteina scrapie parzialmente<br />
resistente alla <strong>di</strong>gestione con proteasi K e insolubile, con caratteristiche simili a PrPsc.<br />
Apparentemente questa proteina PG14 ha caratteristiche interme<strong>di</strong>e tra la forma cellulare e<br />
quella patologica della proteina prion, tuttavia l’inoculo <strong>di</strong> estratto cerebrale PG14 non è infetto.<br />
Utilizzando tessuti cerebrali <strong>di</strong> questi animali a <strong>di</strong>verse età, è attualmente in corso uno stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong><br />
proteomica per identifcare nuovi fattori coinvolti nella patogenesi delle ES. Inoltre, in<br />
collaborazione con David Harris alla Washington University <strong>di</strong> St.Louis, i topi PG14 sono stati<br />
incrociati con topi resi incapaci <strong>di</strong> esprimere la proteina proapoptotica Bax. La progenie <strong>di</strong><br />
questi topi (PG14/Bax-/-) mostra una significativa riduzione della morte neuronale cerebellare,<br />
tuttavia i topi hanno un per<strong>di</strong>ta sinaptica comparabile a quella dei PG14 e anche dal punto <strong>di</strong><br />
vista clinico non mostrano <strong>di</strong>fferenze. La morte neuronale non sembra quin<strong>di</strong> determinante nel<br />
produrre le alterazioni neurologiche nei PG14, dati simili sono stati ottenuti in altri contesti<br />
sperimentali. I dati in<strong>di</strong>cano quin<strong>di</strong> che l’aspetto essenziale del processo neurodegenerativo è la<br />
<strong>di</strong>sfunzione sinaptica più che la morte neuronale. Queste evidenze possono orientare in maniera<br />
significativa l’approccio terapeutico a queste patologie.<br />
69<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Morbo <strong>di</strong> Parkinson: stu<strong>di</strong> genetici<br />
Il Morbo <strong>di</strong> Parkinson è la seconda più <strong>di</strong>ffusa malattie neurodegenerativa, anche in questo la<br />
patogenesi è ancora ignota, tuttavia le terapie a <strong>di</strong>sposizione, pur rimanendo in un contesto<br />
sintomatologico, sono <strong>di</strong>versamente articolate e con un buon livello <strong>di</strong> efficacia. La valutazione<br />
dell'influenza genetica è sempre stata tenuta ai margini degli stu<strong>di</strong> sull'eziologia <strong>di</strong> PD che<br />
hanno tra<strong>di</strong>zionalmente privilegiato la componente ambientale per la presenza <strong>di</strong> tossine la cui<br />
esposizione era in grado <strong>di</strong> indurre un quadro clinico simile a PD. Gli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> genetica<br />
molecolare, svolti negli ultimi anni, hanno invece aperto una nuova prospettiva identificando<br />
mutazioni <strong>di</strong> due geni che co<strong>di</strong>ficano per alfa-sinucleina e parkina associate in entrambi i casi a<br />
forme giovanili <strong>di</strong> PD. Sempre in collaborazione con <strong>di</strong>versi centri neurologici, è stata attivata la<br />
raccolta <strong>di</strong> campioni <strong>di</strong> sangue provenienti da soggetti PD <strong>di</strong> origine spora<strong>di</strong>ca o familiare.<br />
Mentre le mutazioni associate a PD del gene che co<strong>di</strong>fica per alfa-sinucleina sono un evento<br />
raro, solo tre (A30P e A53T E46K) fino ad ora identificate, le mutazioni <strong>di</strong> parkina sono molto<br />
numerose sia in forma puntiforme che <strong>di</strong> delezione. Anche nella nostra popolazione abbiamo<br />
identificato mutazioni <strong>di</strong> parkina associata a PD in omozigosi. Tuttavia in alcuni soggetti PD<br />
giunti alla nostra attenzione è stata riscontrata la presenza <strong>di</strong> mutazioni <strong>di</strong> parkina in forma<br />
eterozigote. E' quin<strong>di</strong> allo stu<strong>di</strong>o l'ipotesi che in forma eterozigote, le mutazioni <strong>di</strong> parkina,<br />
siano un fattore <strong>di</strong> rischio per PD, mentre acquisiscono un ruolo causale in omozigosi.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Malattie Neurologiche<br />
Stu<strong>di</strong> epidemiologici sulla sclerosi laterale amiotrofica (SLA)<br />
Vi sono inclusi stu<strong>di</strong> su incidenza, fattori <strong>di</strong> rischio e mortalità della SLA. Le informazioni sono<br />
derivate da un registro regionale <strong>di</strong> malattia istituito nel 1998 e comprendente tutti i pazienti con<br />
nuova <strong>di</strong>agnosi <strong>di</strong> SLA identificati in 8 province lombarde. Utilizzando simili protocolli <strong>di</strong><br />
indagine, informazioni analoghe sono raccolte in due altri registri regionali (piemontese e<br />
pugliese) ai quali il registro lombardo è in associato. I dati provenienti dal registro lombardo e<br />
da pazienti esaminati nel contesto <strong>di</strong> collaborazioni con il Gruppo Italiano della SLA sono stati<br />
anche utilizzati per una verifica della vali<strong>di</strong>tà e della riproducibilità dei criteri <strong>di</strong>agnostici della<br />
SLA e <strong>di</strong> alcune scale funzionali. Sulla base dei dati acquisiti, l'incidenza annua della SLA è<br />
risultata sovrapponibile a quanto documentato in altri paesi occidentali in cui sono stati attivati<br />
registri <strong>di</strong> malattia, attestandosi intorno ai valori più elevati della letteratura (1,9 casi per<br />
100.000). Anche la mortalità è risultata comparabile ai risultati degli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> popolazioni<br />
analoghe condotti con meto<strong>di</strong> più rigorosi. La validazione dei criteri <strong>di</strong>agnostici per la SLA<br />
attualmente in uso (classificazione <strong>di</strong> El Escorial) ha permesso <strong>di</strong> affermare che tali criteri sono<br />
vali<strong>di</strong> e riproducibili solo dopo opportuno addestramento degli esaminatori.<br />
Il Laboratorio <strong>di</strong> Malattie Neurologiche ha recentemente istituito un gruppo collaborativo<br />
europeo sui registri della SLA (EURALS) al quale partecipano i titolari <strong>di</strong> registri regionali e<br />
nazionali della malattia per la creazione <strong>di</strong> un database comune. Con la collaborazione <strong>di</strong> gruppi<br />
Inglesi ed Irlandesi (titolari <strong>di</strong> registri <strong>di</strong> popolazione), è stato elaborato un protocollo comune<br />
per l'esecuzione <strong>di</strong> uno stu<strong>di</strong>o caso-controllo per la valutazione del ruolo dell'attività fisica, dei<br />
traumi e degli sport professionistici nella genesi della SLA.<br />
Stu<strong>di</strong> sui marcatori biologici della SLA<br />
Campioni ematici <strong>di</strong> pazienti con SLA arruolati nel registro regionale lombardo o provenienti da<br />
altre casistiche appartenenti a membri del Gruppo Italiano della SLA sono utilizzati allo scopo<br />
<strong>di</strong> dosare il Tumor Necrosis Factor (TNF), il Vasoendotelial Growth Factor (VEGF), e l'Insulin<br />
Growth Factor (IGF). Tali stu<strong>di</strong> sono condotti in collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong><br />
Farmacologia Recettoriale ed il Laboratorio <strong>di</strong> Neurobiologia Molecolare. Il materiale ematico è<br />
anche utilizzato per lo stu<strong>di</strong>o del metabolismo e del trasporto del glutammato nel contesto <strong>di</strong><br />
una collaborazione con la Clinica Neurologica dell'Università <strong>di</strong> Milano-Bicocca.<br />
70<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Stu<strong>di</strong> sui costi e sulla qualità della vita nella SLA<br />
E' stato recentemente completato uno stu<strong>di</strong>o osservazionale volto a verificare la qualità della<br />
cura ai pazienti con SLA comparando due <strong>di</strong>versi modelli assistenziali, il primo realizzato da<br />
centri de<strong>di</strong>cati ed il secondo da strutture neurologiche generali. I parametri esaminati<br />
comprendono la rilevazione della <strong>di</strong>sabilità, dei costi assistenziali, della qualità <strong>di</strong> vita e<br />
dell'in<strong>di</strong>ce <strong>di</strong> gra<strong>di</strong>mento espresso dal paziente. L'indagine è coor<strong>di</strong>nata dall'<strong>Istituto</strong> Neurologico<br />
<strong>di</strong> Milano. L'elaborazione dei dati raccolti è tuttora in corso.<br />
Stu<strong>di</strong> sulle complicanze dell'epilessia<br />
Alcune complicanze dell'epilessia sono state esplorate utilizzando <strong>di</strong>segni <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong>versi. Il<br />
primo è costituito da uno stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> coorte condotto su pazienti con epilessia e su controlli<br />
appaiati reclutati in 8 paesi europei allo scopo <strong>di</strong> esaminare la morbilità ed il rischio <strong>di</strong> incidenti<br />
attribuibili all'epilessia. Pubblicati i risultati generali dello stu<strong>di</strong>o, sono stati esaminati alcuni<br />
dettagli riguardanti la tipologia delle malattie e degli incidenti e le relative complicanze. Per<br />
ogni malattia o incidente sono state esaminate le conseguenze, gli interventi me<strong>di</strong>ci (inclusi i<br />
ricoveri) e le assenze dal lavoro o da scuola. E' in esame la mortalità <strong>di</strong> una coorte <strong>di</strong> soggetti<br />
reclutati alla prima crisi epilettica tonico-clonica generalizzata in <strong>di</strong>versi centri italiani per<br />
essere ammessi ad un trial terapeutico e sottoposti a follow-up a decorrere dal 1988. Uno stu<strong>di</strong>o<br />
caso-controllo è stato completato per la valutazione della depressione in un campione <strong>di</strong> donne<br />
con epilessia ed in un gruppo <strong>di</strong> controllo designato all'interno <strong>di</strong> una casistica arruolata da<br />
neurologi attivi sul territorio nazionale. Sulla base degli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> cui sopra, è stato <strong>di</strong>mostrato che<br />
i pazienti con epilessia presentano un rischio solo lievemente superiore a quello della<br />
popolazione generale <strong>di</strong> ammalare o avere incidenti e che la tipologia e la gravità <strong>di</strong> malattie ed<br />
incidenti sono lievemente <strong>di</strong>verse nei pazienti rispetto alla popolazione generale. La mortalità <strong>di</strong><br />
pazienti con una prima crisi epilettica non provocata è superiore a quella della popolazione<br />
generale, ma il rischio è significativamente superiore solo per le fasce <strong>di</strong> età più giovani. Le<br />
donne con epilessia presentano un elevato rischio <strong>di</strong> depressione. La depressione appare<br />
correlata alla tipologia e alla gravità della malattia.<br />
Costi dell'epilessia<br />
Una coorte <strong>di</strong> pazienti con epilessia, reclutati sul territorio nazionale da 14 istituzioni <strong>di</strong> secondo<br />
e <strong>di</strong> terzo livello, e osservati prospetticamente per un anno è stata esaminata per la valutazione<br />
dei costi <strong>di</strong>retti (costi sanitari relativi alla malattia). I soggetti ammessi sono stati sud<strong>di</strong>visi in<br />
sottogruppi (prime <strong>di</strong>agnosi o epilessie croniche, le ultime stratificate in base alla gravità <strong>di</strong><br />
malattia) per verificare l'impatto della tipologia del caso sui costi dell'epilessia. Dal confronto<br />
dei <strong>di</strong>versi sottogruppi è emerso che i costi dell'epilessia variano sulla base della durata <strong>di</strong><br />
malattia e dalla risposta al trattamento antiepilettico (variando da un minimo <strong>di</strong> 412 Euro per le<br />
epilessie in remissione ad un massimo <strong>di</strong> 2198 Euro per le epilessie croniche farmacoresistenti).<br />
Su questa base, è stato istituito un nuovo stu<strong>di</strong>o prospettico negli stessi centri volto a valutare i<br />
costi <strong>di</strong>retti dell'epilessia in un più ampio campione <strong>di</strong> pazienti.<br />
Strategie terapeutiche innovative in pazienti con epilessia<br />
Nel contesto <strong>di</strong> uno stu<strong>di</strong>o multicentrico nazionale, una coorte <strong>di</strong> pazienti con una prima crisi<br />
epilettica non provocata, randomizzati a decorrere dal 1988 a trattamento imme<strong>di</strong>ato o ad attesa<br />
della ricorrenza <strong>di</strong> crisi per l'inizio del trattamento, è stata riesaminata dopo prolungamento del<br />
follow-up per verificare l'impatto delle due strategie terapeutiche sulla prognosi a lungo termine<br />
dell'epilessia (definita dalla probabilità <strong>di</strong> remissione delle crisi per almeno 5 anni). Allo scopo<br />
<strong>di</strong> verificare se il primo trattamento antiepilettico possa essere effettuato con basse dosi <strong>di</strong><br />
farmaco, pazienti con epilessia <strong>di</strong> nuova <strong>di</strong>agnosi non trattati sono stati randomizzati a<br />
trattamento con dosi standard dei farmaci in uso o con la metà delle stesse dosi in <strong>di</strong>versi centri<br />
italiani. Entrambi i gruppi terapeutici sono stati quin<strong>di</strong> sottoposti a follow-up fino a<br />
71<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
completamento <strong>di</strong> due anni <strong>di</strong> remissione o fino ad un massimo <strong>di</strong> 5 anni. La raccolta dei dati è<br />
stata recentemente conclusa ed è in corso l'analisi dei risultati. Per stabilire se la mancata<br />
risposta a due farmaci antiepilettici sia sufficiente per in<strong>di</strong>care una con<strong>di</strong>zione <strong>di</strong><br />
farmacoresistenza nel bambino, soggetti in età pe<strong>di</strong>atrica giu<strong>di</strong>cati refrattari a due farmaci<br />
antiepilettici sono stati randomizzati a introdurre un terzo farmaco oppure ad ottimizzare il<br />
trattamento assegnato e seguiti per un massimo <strong>di</strong> 3 anni. Il beneficio terapeutico è definito dal<br />
raggiungimento <strong>di</strong> almeno sei mesi consecutivi <strong>di</strong> completo controllo delle crisi. Lo stu<strong>di</strong>o è<br />
stato condotto in collaborazione con l'IRCCS "Stella Maris" <strong>di</strong> Calabrone (PI). Nei pazienti con<br />
prima crisi non provocata hanno <strong>di</strong>mostrato che la prognosi a lungo termine delle crisi è<br />
sovrapponibile nei casi trattati imme<strong>di</strong>atamente e nei casi trattati in occasione della ricorrenza,<br />
confermando che il trattamento dell'epilessia dovrebbe iniziare solo in occasione della<br />
ricorrenza <strong>di</strong> crisi. Anche i bambini trattati con un terzo farmaco non hanno presentato una<br />
<strong>di</strong>versa probabilità <strong>di</strong> remissione rispetto ai bambini che hanno continuato il trattamento con i<br />
farmaci già assegnati. Ciò suggerisce che una con<strong>di</strong>zione <strong>di</strong> farmacoresistenza nell'epilessia può<br />
essere già definita dopo il fallimento <strong>di</strong> due farmaci.<br />
In<strong>di</strong>catori <strong>di</strong> insuccesso della chirurgia dell'epilessia<br />
Nel contesto della Cochrane Collaboration, è stata condotta una revisione sistematica della<br />
letteratura sulla prognosi <strong>di</strong> pazienti sottoposti a chirurgia dell'epilessia allo scopo <strong>di</strong> identificare<br />
i principali pre<strong>di</strong>ttori <strong>di</strong> successo e <strong>di</strong> insuccesso terapeutico. L'indagine, realizzata con la<br />
collaborazione <strong>di</strong> ricercatori italiani e <strong>di</strong> 4 paesi stranieri (Stati Uniti, Regno Unito, Canada,<br />
Croazia), ha riguardato l'esame <strong>di</strong> 55 pubblicazioni sod<strong>di</strong>sfacenti precisi criteri <strong>di</strong> selezione.<br />
Dallo stu<strong>di</strong>o è emerso che il successo della chirurgia è stato influenzato positivamente dalla<br />
presenza <strong>di</strong> convulsioni febbrili, neoplasia cerebrale, concordanza tra EEG e RMN encefalica,<br />
ed estensione della resezione chirurgica. Fattori prognostici negativi sono risultati invece la<br />
presenza <strong>di</strong> reperti patologici alla RMN e <strong>di</strong> anomalie epilettiformi postoperatorie ed il ricorso<br />
al monitoraggio intracranico. Una nuova revisione sistematica <strong>di</strong> trial clinici randomizzati nella<br />
chirurgia dell'epilessia è in corso.<br />
Stu<strong>di</strong> epidemiologici sulla prevalenza e sui fattori <strong>di</strong> rischio <strong>di</strong> cefalee<br />
croniche primarie<br />
In collaborazione con la Neuropsichiatria Infantile dell'Università <strong>di</strong> Pavia, uno stu<strong>di</strong>o casocontrollo<br />
è stato condotto allo scopo <strong>di</strong> verificare se tra i soggetti con emicrania (con e senza<br />
aura) vi fosse una maggiore prevalenza <strong>di</strong> familiari (<strong>di</strong> primo e secondo grado) con malattie<br />
vascolari (ictus cerebri, ipertensione, infarto miocar<strong>di</strong>co, <strong>di</strong>abete) rispetto alla popolazione<br />
generale. I bambini con emicrania sono stati confrontati con una popolazione <strong>di</strong> controllo<br />
rappresentata da bambini con altre malattie neurologiche non correlate a cefalea e a malattie<br />
vascolari. In collaborazione con la Clinica Neurologica dell'Università <strong>di</strong> Parma è stato<br />
recentemente concluso uno stu<strong>di</strong>o sulla prevalenza della cefalea a grappolo. L'indagine è stata<br />
effettuata sottoponendo a screening (me<strong>di</strong>ante compilazione <strong>di</strong> un questionario ad-hoc) gli<br />
assistiti <strong>di</strong> 5 me<strong>di</strong>ci <strong>di</strong> me<strong>di</strong>cina generale (per un totale <strong>di</strong> 10.071 in<strong>di</strong>vidui). In parallelo, le<br />
domande inserite nel questionario sono state valutate sottoponendo ad intervista pazienti con<br />
cefalea a grappolo, con emicrania e con cefalea <strong>di</strong> tipo tensivo allo scopo <strong>di</strong> testarne vali<strong>di</strong>tà e<br />
riproducibilità per la <strong>di</strong>agnosi <strong>di</strong> cefalea a grappolo, con riferimento ai criteri della International<br />
Headache Society.<br />
Una familiarità per malattie vascolari è risultata più frequente tra i soggetti con emicrania<br />
rispetto al gruppo <strong>di</strong> controllo, suggerendo una pre<strong>di</strong>sposizione genetica per malattie vascolari<br />
tra i soggetti emicranici. Risultati preliminari dello stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> validazione dei criteri <strong>di</strong>agnostici<br />
della cefalea a grappolo hanno <strong>di</strong>mostrato che i sintomi che meglio separano la malattia dalle<br />
altre forme <strong>di</strong> cefalea cronica primaria comprendono la presenza <strong>di</strong> prolungati intervalli liberi da<br />
crisi, <strong>di</strong> movimenti compulsivi e <strong>di</strong> attacchi <strong>di</strong> breve durata. La prevalenza "lifetime" della<br />
72<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
cefalea a grappolo è risultata <strong>di</strong> 2,8 casi per 1.000.<br />
IRFMN<br />
Strategie terapeutiche in bambini con cefalea cronica primaria<br />
In collaborazione con la Neuropsichiatria Infantile dell'Università <strong>di</strong> Pavia è stato completato<br />
uno stu<strong>di</strong>o randomizzato pragmatico sulla utilità <strong>di</strong> un breve ricovero ospedaliero rispetto alla<br />
gestione ambulatoriale <strong>di</strong> bambini con cefalea cronica primaria. Il successo delle due modalità<br />
<strong>di</strong> gestione è stato misurato verificandone l'impatto sulle crisi cefalalgiche nel follow-up e su<br />
altri misuratori in<strong>di</strong>retti <strong>di</strong> beneficio assistenziale (consumo <strong>di</strong> farmaci, sod<strong>di</strong>sfazione della<br />
famiglia e del curante). Un altro stu<strong>di</strong>o randomizzato, promosso dalla Neuropsichiatria Infantile<br />
dell'Università <strong>di</strong> Pavia e condotto in collaborazione con altri gruppi nazionali, è stato iniziato<br />
allo scopo <strong>di</strong> verificare l'impatto della presa in carico psicologica rispetto ad un trattamento<br />
convenzionale <strong>di</strong> bambini con cefalea cronica primaria. Lo stu<strong>di</strong>o è tuttora in corso.<br />
Il ricovero ospedaliero è risultato significativamente superiore alla gestione ambulatoriale della<br />
cefalea, come <strong>di</strong>mostrato dalla riduzione del numero, dell'intensità e della durata degli attacchi,<br />
dal minor consumo <strong>di</strong> analgesici, e dal maggior gra<strong>di</strong>mento dei me<strong>di</strong>ci e dei familiari. L'utilità<br />
del ricovero può essere giustificata da una più approfon<strong>di</strong>ta gestione dei problemi alla base della<br />
patologia in esame.<br />
Prevalenza e fattori <strong>di</strong> rischio vascolare e genetici della malattia <strong>di</strong><br />
Alzheimer<br />
Uno screening della malattia <strong>di</strong> Alzheimer è stato quasi concluso in due aree geografiche della<br />
provincia <strong>di</strong> Foggia (nel comprensorio della città <strong>di</strong> Foggia e a San Giovanni Rotondo) per<br />
definirne la prevalenza ed i fattori <strong>di</strong> rischio vascolare e per stabilire il genotipo ApoE in un<br />
campione casuale <strong>di</strong> soggetti residenti. L'indagine include soggetti <strong>di</strong> età superiore ai 65 anni<br />
identificati nelle liste anagrafiche delle due aree in esame. Lo screening comprende due fasi, la<br />
prima condotta al domicilio del soggetto e consistente in un'intervista strutturata volta a definire<br />
la presenza <strong>di</strong> demenza, a ricercare i fattori <strong>di</strong> rischio vascolare, ed il profilo neuropsicologico<br />
del soggetto, e la seconda per la definizione dell'eziologia e per l'inquadramento nosografico<br />
della demenza. Il reclutamento è stato completato il 31 <strong>di</strong>cembre <strong>2004</strong>.<br />
Fattori <strong>di</strong> rischio neoplastico e comorbi<strong>di</strong>tà nella miastenia grave<br />
Uno stu<strong>di</strong>o caso-controllo è stato eseguito in collaborazione con la clinica neurologica<br />
dell'Università <strong>di</strong> Pavia per la ricerca <strong>di</strong> fattori <strong>di</strong> rischio neoplastico in pazienti con miastenia<br />
grave. La popolazione in esame è rappresentata da 2479 soggetti assistiti da centri <strong>di</strong> terzo<br />
livello <strong>di</strong>sseminati sul territorio nazionale e seguiti per un periodo me<strong>di</strong>o <strong>di</strong> 9 anni. Una o più<br />
neoplasie erano presenti in 221 casi (9%). Se confrontati con i pazienti senza neoplasie<br />
(controlli), i casi <strong>di</strong> neoplasia presentavano più frequentemente un timoma o un trattamento<br />
pregresso o attuale con immunoglobuline, e meno frequentemente un'esposizione alla<br />
ciclofosfamide.<br />
Il materiale raccolto per l'esecuzione dello stu<strong>di</strong>o è stato utilizzato per la elaborazione <strong>di</strong><br />
progetti volti al confronto con altre banche-dati per verificare se la mortalità nei pazienti con<br />
miastenia grave associata a neoplasie sia superiore a quella della popolazione generale e se<br />
l'incidenza delle neoplasie nella coorte in esame sia superiore a quella della popolazione<br />
generale, con ricerca dei pre<strong>di</strong>ttori principali <strong>di</strong> mortalità all'interno della coorte.<br />
Diagnosi e prevalenza della <strong>di</strong>stonia<br />
Nel contesto <strong>di</strong> una collaborazione con l'istituto "San Raffaele" <strong>di</strong> Milano è stato completato<br />
uno stu<strong>di</strong>o sulla prevalenza della <strong>di</strong>stonia focale nell'adulto nella provincia <strong>di</strong> Foggia. I casi<br />
sono reperiti da fonti molteplici (ricoveri ospedalieri, visite presso gli ambulatori <strong>di</strong> neurologia,<br />
ORL, oculistica, ortope<strong>di</strong>a) presso i due principali ospedali della provincia. Per la verifica della<br />
qualità della <strong>di</strong>agnosi <strong>di</strong> <strong>di</strong>stonia, è stato effettuato nel 2002 uno stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> validazione che ha<br />
73<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
coinvolto 4 neurologi e 14 specializzan<strong>di</strong> in neurologia i quali hanno esaminato 29<br />
videoregistrazioni <strong>di</strong> casi con <strong>di</strong>stonia o con malattie considerate nella <strong>di</strong>agnosi <strong>di</strong>fferenziale.<br />
L'accordo tra esaminatori è stato giu<strong>di</strong>cato insod<strong>di</strong>sfacente nel 26% delle coppie, era migliore<br />
tra i neurologi che tra gli specializzan<strong>di</strong>, e predominava per il blefarospasmo, la <strong>di</strong>stonia<br />
cervicale e dell'arto superiore, e la <strong>di</strong>sfonia spasmo<strong>di</strong>ca. Dai risultati dello stu<strong>di</strong>o è emerso che<br />
la qualità degli stu<strong>di</strong> epidemiologici sulla <strong>di</strong>stonia <strong>di</strong>pende dal background e dall'esperienza<br />
degli esaminatori e può variare a seconda delle <strong>di</strong>verse forme cliniche. L'analisi dei dati dello<br />
stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> prevalenza è tuttora in corso.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Metabolismo dei Farmaci<br />
Resistenza ai farmaci antidepressivi: stu<strong>di</strong> in modelli animali e nei pazienti<br />
Il problema della resistenza ai farmaci antidepressivi coinvolge il 10-30% dei pazienti depressi<br />
malgrado la moltitu<strong>di</strong>ne <strong>di</strong> farmaci oggi <strong>di</strong>sponibili. L'obiettivo primario <strong>di</strong> questi stu<strong>di</strong> è<br />
pertanto la caratterizzazione comportamentale e biochimica <strong>di</strong> un modello <strong>di</strong> resistenza. Si<br />
ritiene che tali stu<strong>di</strong> contribuiranno a chiarire alcuni aspetti della patogenesi della malattia e dare<br />
in<strong>di</strong>cazioni utili per lo stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> markers biologici della risposta farmacologica, capaci <strong>di</strong><br />
stabilire in modo preventivo l'efficacia <strong>di</strong> attuali e nuove terapie antidepressive. Il progetto è<br />
svolto in collaborazione con l'Unità <strong>di</strong> Micro<strong>di</strong>alisi Intracerebrale (R.W. Invernizzi), l'Unita <strong>di</strong><br />
Farmacologia Comportamentale (L. Cervo), il Laboratorio <strong>di</strong> Biologia delle Malattie<br />
Neurodegenerative (G. Forloni) e l'Unità <strong>di</strong> Epidemiologia Psichiatrica (A. Barbato).<br />
Meccanismi <strong>di</strong> resistenza ai farmaci antiepilettici<br />
Precedenti stu<strong>di</strong> hanno <strong>di</strong>mostrato che la p-glicoproteina, una proteina <strong>di</strong> transmembrana<br />
co<strong>di</strong>ficata nell'uomo dal gene MDR1, viene funzionalmente attivata dalle convulsioni ed ha un<br />
ruolo significativo nel <strong>di</strong>minuire le concentrazioni cerebrali <strong>di</strong> alcuni farmaci antiepilettici nei<br />
modelli sperimentali. L'obiettivo è ora <strong>di</strong> stabilire se un intervento farmacologico sull'attività <strong>di</strong><br />
questa e/o altre proteine che fungono da pompa <strong>di</strong> efflusso per gli xenobiotici possono rivertire,<br />
almeno in parte, la resistenza ai farmaci antiepilettici. Lo stu<strong>di</strong>o è svolto in collaborazione con il<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Neurologia Sperimentale (A. Vezzani), al quale si rimanda per una breve<br />
descrizione e dei risultati ottenuti nei modelli sperimentali.<br />
Nuovi derivati <strong>di</strong> origine vegetale per il trattamento della depressione<br />
L'iperforina, è uno dei possibili responsabili degli effetti <strong>di</strong> tipo antidepressivo degli estratti <strong>di</strong><br />
Hypericum perforatum. E' probabilmente implicato anche nei ben documentati fenomeni <strong>di</strong><br />
interazione tra gli estratti e i farmaci metabolizzati dall'isoforma CYP3A4 del citocromo P-450.<br />
Questo è stato recentemente documentato in modelli animali, evidenziando che questo<br />
componente induce l'attività e l'espressione della proteina CYP3A, comportandosi<br />
qualitativamente e quantitativamente come un estratto <strong>di</strong> Hypericum perforatum contenente<br />
un'equivalente quantità <strong>di</strong> iperforina. Gli stu<strong>di</strong> si sono ora rivolti ad alcuni derivati<br />
(tetraidroiperforina, octaidroiperforina) ed esteri dell'acilfloroglucinolo (iperforina<br />
trimetossibenzoatato e acetato). L'obiettivo è quello <strong>di</strong> identificare quei composti che<br />
mantengono l'attività antidepressivo-simile dell'iperforina perdendo la capacità <strong>di</strong> indurre gli<br />
isoenzimi del citocromo P-450. Il progetto è svolto in collaborazione con Indena S.p.A e il<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Patologia Molecolare (L. Cantoni).<br />
1-(2-metossifenil)-piperazina come metabolita attivo <strong>di</strong> nuovi potenziali<br />
farmaci psicotropi<br />
L'interesse per questa problematica nasce dal fatto che i farmaci a struttura aril-piperazinica<br />
possono formare derivati 1-aril-piperazinici durante la loro biotrasformazione. Questi metaboliti<br />
sono farmacologicamente attivi e tendono a concentrarsi nel sistema nervoso centrale,<br />
74<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
raggiungendo concentrazioni simili o più elevate del farmaco precursore. Possono pertanto<br />
contribuire o anche essere responsabili <strong>di</strong> particolari effetti farmacologici del farmaco<br />
somministrato.<br />
Recentemente sono stati sintetizzati alcuni composti contenenti la 1-(2-metossifenil)-piperazina<br />
(oOCH3PP) nella loro struttura. Anche il derivato oOCH3PP possiede numerose attività<br />
farmacologiche, tra le quali un'attività antagonista nei confronti dei recettori dopaminergici D2,<br />
comune ad alcuni dei suoi potenziali precursori suggeriti come nuovi potenziali antipsicotici. Ha<br />
anche un'azione agonista nei confronti dei recettori 5-HT1A, anche questa azione comune ad<br />
alcuni dei suoi potenziali precursori (mentre altri si comportano da antagonisti). Inoltre possiede<br />
attività ipotensiva e adrenolitica. Ci prefiggiamo pertanto <strong>di</strong> a) verificare se questi derivati<br />
formano oOCH3PP nei modelli animali utilizzati negli stu<strong>di</strong> farmacologici, b) determinare le<br />
concentrazioni cerebrali del metabolita in relazione a quelle del composto precursore e c)<br />
stabilire il significato farmacologico del metabolita nell'attività dei vari derivati ometossifenilpiperazinici,<br />
cercando <strong>di</strong> evidenziare eventuali <strong>di</strong>fferenze tra le specie. Questo<br />
assume particolare rilevanza in considerazione del fatto che l'oOCH3PP viene oggi considerato<br />
un composto "psicoattivo", e come tale verrà presto inserito nell'apposita tabella delle sostanze<br />
stupefacenti. In questa tabella, che farà rientrare il composto nell'ambito della "illegalità",<br />
compaiono anche l'isomero para-sostituito della OCH3PP, la mCF3PP e la N-benzil-piperazina.<br />
Stu<strong>di</strong> farmacocinetici con particolare riferimento al problema del<br />
passaggio della barriera ematoencefalica <strong>di</strong> nuovi potenziali farmaci<br />
L'obiettivo principale è quello <strong>di</strong> caratterizzare aspetti generalmente non valutabili nell'uomo,<br />
quali il grado <strong>di</strong> uptake e la <strong>di</strong>stribuzione nel SNC dei composti precursori e loro metaboliti<br />
attivi. L'impreve<strong>di</strong>bilità <strong>di</strong> questi aspetti e le possibili <strong>di</strong>fferenze tra le specie sottolineano poi<br />
l'importanza <strong>di</strong> queste conoscenze per una corretta interpretazione del profilo farmacologico <strong>di</strong><br />
un farmaco e per l'estrapolazione dei dati sperimentali alla situazione clinica. In questo contesto<br />
si è inserito un progetto, svolto in collaborazione con l'Unità <strong>di</strong> Farmacologia Comportamentale,<br />
atto a documentare il passaggio della barriera ematoencefalica e la farmacocinetica in sede<br />
cerebrale <strong>di</strong> nuovi agonisti dopaminergici potenzialmente in grado <strong>di</strong> prevenire la ricaduta nel<br />
consumo <strong>di</strong> sostanze d'abuso in seguito all'insorgenza <strong>di</strong> "craving". Tra questi S il BP 897,<br />
descritto come un selettivo parziale agonista dei recettori D3 (probabilmente implicati nel<br />
fenomeno della <strong>di</strong>pendenza da cocaina) e che proprio per queste sue caratteristiche S in fase <strong>di</strong><br />
stu<strong>di</strong>o clinico come possibile farmaco "anticraving". Altri composti meno specifici ma<br />
potenzialmente attivi nell'inibire il craving da cocaina sono stati sintetizzati dal Dipartimento<br />
Farmaco Chimico Tecnologico dell'Università <strong>di</strong> Siena (Prof. Campiani).<br />
Sono in corso anche stu<strong>di</strong> riguardanti nuove molecole con attività anti-amiloidogenica,<br />
potenzialmente in grado <strong>di</strong> legarsi "in vitro "ad aggregati amiloidei già formati impedendo la<br />
formazione <strong>di</strong> nuovi accumuli (Sigma-Tau, Pomezia).<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Neurologia Sperimentale<br />
Meccanismi biochimico-molecolari coinvolti nelle genesi e propagazione<br />
delle convulsioni e del danno neuronale ad esse associato: Ruolo dei<br />
neuropepti<strong>di</strong><br />
In particolare, stiamo indagando il ruolo della somatostatina e del neuropeptide Y e dei loro<br />
sottotipi recettoriali nel controllo dell'attivita' epilettica. I nostri precedenti risultati in<br />
collaborazione con il Dr Gobbi hanno infatti <strong>di</strong>mostrato che questi due neuropepti<strong>di</strong> endogeni<br />
controllano in maniera inibitoria l'attivita' epilettica. Stiamo utilizzando farmaci che agiscono<br />
specificamente sui <strong>di</strong>versi sottotipi recettoriali con attivita' agonista od antagonista per valutare<br />
la loro capacità <strong>di</strong> inibire o modulare le convulsioni in modelli sperimentali in vivo. Utilizziamo<br />
anche topi geneticamente mo<strong>di</strong>ficati che mancano dei <strong>di</strong>versi sottotipi recettoriali per valutare la<br />
75<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
loro suscettibilità alle convulsioni e all'epilettogenesi. Una volta identificato inequivocabilmente<br />
il ruolo dei sottotipi recettoriali nell'inibire l'attività epilettica, indagheremo la possibilità <strong>di</strong><br />
utilizzare dei farmaci non pepti<strong>di</strong>ci che possano essere somministrati per via sistemica al fine <strong>di</strong><br />
controllare le convulsioni.<br />
Ruolo delle molecole dell'infiammazione<br />
Stiamo stu<strong>di</strong>ando in collaborazione con il laboratorio della Dr De Simoni il ruolo <strong>di</strong> alcune<br />
citochine proinfiammatorie quali IL-1beta e TNF-alfa nella genesi e propagazione delle<br />
convulsioni e nei fenomeni neurodegenerativi ad esse associati. I nostri risultati sperimentali<br />
hanno fino ad ora <strong>di</strong>mostrato che l'attività epilettica induce la sintesi <strong>di</strong> varie molecole coinvolte<br />
nei processi infiammatori. IL-1beta ha proprietà proconvulsivanti mentre l'antagonista<br />
recettoriale <strong>di</strong> IL-1 e il TNF-alfa hanno proprietà anticonvulsivanti. Stiamo stu<strong>di</strong>ando quali <strong>di</strong><br />
queste molecole oltre a modulare l'attività epilettica contribuiscono all'insorgenza del danno<br />
neuronale in dotto dall'attività convulsiva.<br />
Convulsioni e sviluppo postnatale<br />
E' noto che la suscettibilità alle convulsioni è maggiore nel bambino rispetto all'adulto e lo<br />
stesso fenomeno si manifesta nel ro<strong>di</strong>tore durante lo sviluppo postnatale. Ci prefiggiamo quin<strong>di</strong><br />
<strong>di</strong> stu<strong>di</strong>are quali siano i meccanismi coinvolti in maniera significativa nei cambiamenti <strong>di</strong><br />
suscettibilità alle convulsioni ed in particolare alla insorgenza del danno neuronale che si<br />
manifesta nel ratto solo dopo i primi 15 giorni <strong>di</strong> vita postnatale. I nostri stu<strong>di</strong> si stanno<br />
focalizzando principalmente sui neuropepti<strong>di</strong> e le citochine sopracitati.<br />
Meccanismi <strong>di</strong> resistenza ai farmaci antiepilettici<br />
Lo stu<strong>di</strong>o è svolto in collaborazione con il laboratorio <strong>di</strong> Metabolismo dei Farmaci (Dr Caccia)<br />
e si prefigge <strong>di</strong> indagare se il fenomeno della resistenza a vari farmaci antiepilettici <strong>di</strong>pende<br />
dall'attività <strong>di</strong> una famiglia <strong>di</strong> glicoproteine <strong>di</strong> membrana chiamate P-gp che estrudono i farmaci<br />
dal cervello verso il sangue. Queste proteine (ad es la proteina prodotta dal gene MDR oppure<br />
MRP) sembrano avere un ruolo significativo nel determinare la resistenza ad alcuni farmaci<br />
antitumorali ed hanno la capacità <strong>di</strong> estrudere dalle cellule un'ampia gamma <strong>di</strong> farmaci<br />
amfifilici/idrofobici. Abbiamo <strong>di</strong>mostrato che la proteina prodotta dal gene MDR viene<br />
sintetizzata in maggiori quantità in specifiche aree cerebrali durante l'attività epilettica ed<br />
influenza significativamnte la concentrazione cerebrale <strong>di</strong> alcuni farmaci anticonvulsiventi. Una<br />
aumentata espressione della p-gp è stata <strong>di</strong>mostrata anche nel tessuto cerebrale <strong>di</strong> pazienti affetti<br />
da epilessia farmacoresistente e potrebbe quin<strong>di</strong> contribuire alla refrattarietà alla terapia<br />
farmacologica impedendo il raggiungimento <strong>di</strong> concentrazioni <strong>di</strong> farmaco clinicamente rilevanti<br />
nel tessuto epilettico. Stu<strong>di</strong> in corso si prefiggono <strong>di</strong> inibire l'attività della (e) P-gp in modelli<br />
sperimentali <strong>di</strong> epilessia utilizzando bloccanti della funzione della pompa e quin<strong>di</strong> valutare se<br />
l'efficacia dei trattamenti anticonvulsivanti migliora significativamente. Stiamo inoltre<br />
valutando l'espressione <strong>di</strong> P-gp in modelli animali <strong>di</strong> malformazioni dello sviluppo corticale,<br />
poichè questa patologia è associata nell'uomo ad epilessia farmacoresistente.<br />
Ruolo della barriera ematoencefalica nell'epilettogenesi<br />
Stiamo stu<strong>di</strong>ando come mo<strong>di</strong>ficazioni della permeabilità della barriera emato-encefalica per se o<br />
associate a fenomeni infiammatori possano determinare un substrato <strong>di</strong> ipereccitabiltà neuronale<br />
che sfoci in una <strong>di</strong>minuita soglia convulsiva. Questo stu<strong>di</strong>o si rivolge particolarmente ai casi <strong>di</strong><br />
epilessie sintomatiche che sono spesso associati ad un danno <strong>di</strong> barriera che precede l'evento<br />
convulsivo.<br />
76<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Nuovi approcci terapeutici <strong>di</strong> gene transfer in vivo<br />
Questo stu<strong>di</strong>o riguarda l'utilizzo <strong>di</strong> vettori virali adeno-associati che introducano nuovi geni e<br />
un' aumentata produzione <strong>di</strong> alcune proteine in aree cerebrali specifiche al fine <strong>di</strong> antagonizzare<br />
l'attività epilettica. Stiamo al momento utilizzando vettori adenovirali che veicolano il gene del<br />
neuropeptide Y nell'ippocampo del ratto. Abbiamo <strong>di</strong>mostrato che la sovraespressione del<br />
transgene determina una ridotta attività epilettica nel ratto. Lo sviluppo <strong>di</strong> questa linea <strong>di</strong> ricerca<br />
riguarda la possibilità <strong>di</strong> utilizzare vettori virali che possano inibire la comparsa e la ricorrenza<br />
delle convulsioni spontanee che insorgono dopo l'induzione <strong>di</strong> un danno acuto cerebrale<br />
(Traumatico, eccitotossico, ischemico).<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Neuropsichiatria Geriatrica<br />
Impatto clinico del donepezil su pazienti Alzheimeriani nella popolazione<br />
generale<br />
Sta giungendo al termine lo stu<strong>di</strong>o osservazionale sull'impatto clinico del donepezil (5 o 10<br />
mg/<strong>di</strong>e per os), un farmaco anticolinesterasico approvato per il trattamento della malattia <strong>di</strong><br />
Alzheimer <strong>di</strong> grado lieve e moderato. Nello stu<strong>di</strong>o, 800 pazienti vengono seguiti per una durata<br />
<strong>di</strong> tre anni (anche in caso <strong>di</strong> sospensione, per qualsiasi motivo, dell'assunzione del farmaco) e<br />
vengono valutati in maniera prospettica i parametri concernenti i <strong>di</strong>versi aspetti della malattia,<br />
compresi gli eventuali <strong>di</strong>sturbi del caregiver e i costi legati alla malattia, oltre agli aspetti legati<br />
alla sicurezza del farmaco.<br />
Stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> popolazione sulla prevalenza delle demenze nei gran<strong>di</strong> anziani<br />
In parallelo al progressivo aumento degli in<strong>di</strong>vidui <strong>di</strong> 80 e più anni all'interno della popolazione<br />
anziana (65+), il numero dei malati <strong>di</strong> demenza nella fascia <strong>di</strong> età 80+ rappresenta una frazione<br />
in continua crescita sul totale degli affetti. L'esclusione dagli stu<strong>di</strong>, come quasi sempre avviene,<br />
dei soggetti nelle classi <strong>di</strong> età più avanzate tende inevitabilmente a sottostimare il numero<br />
complessivo <strong>di</strong> affetti da demenza presenti nella popolazione. Per ovviare a questa lacuna è<br />
stato dunque avviato uno stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> popolazione (door-to-door) sulla prevalenza, l'incidenza, i<br />
fattori <strong>di</strong> rischio e la storia naturale delle demenze e dei deficit cognitivi associati<br />
all'invecchiamento in una popolazione <strong>di</strong> anziani con età maggiore <strong>di</strong> 80 anni residente in otto<br />
comuni in provincia <strong>di</strong> Varese. Lo stu<strong>di</strong>o beneficia <strong>di</strong> un grant della Fondazione Monzino.<br />
Prevalenza dell'anemia in una popolazione anziana<br />
In collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca Translazionale e <strong>di</strong> Outcome in Oncologia è<br />
stato concluso uno stu<strong>di</strong>o epidemiologico sulla prevalenza dell'anemia in una popolazione <strong>di</strong><br />
anziani <strong>di</strong> età tra i 65 e gli 84 anni <strong>di</strong> età che risiedono nella città <strong>di</strong> Biella (circa 10000<br />
soggetti). Scopo dello stu<strong>di</strong>o inoltre era <strong>di</strong> stabilire se un'anemia <strong>di</strong> grado lieve (definita da bassi<br />
livelli <strong>di</strong> emoglobina) presenti un'associazione significativa con variabili cliniche, cognitive e<br />
funzionali e <strong>di</strong> qualità della vita.<br />
Epidemiologia della malattia <strong>di</strong> Alzheimer: prevalenza e fattori <strong>di</strong> rischio<br />
Nell'ambito del "Progetto strategico <strong>di</strong> ricerca finalizzata sulla malattia <strong>di</strong> Alzheimer" del<br />
Ministero della Sanità, in collaborazione con il Dipartimento <strong>di</strong> Neurologia dell'Ospedale "Casa<br />
Sollievo della Sofferenza" <strong>di</strong> S. Giovanni Rotondo (FG) e con il Laboratorio <strong>di</strong> Neurologia<br />
dell'<strong>Istituto</strong> "<strong>Mario</strong> Negri" è proseguito lo stu<strong>di</strong>o triennale sulla prevalenza e i fattori <strong>di</strong> rischio<br />
vascolari e genetici della malattia <strong>di</strong> Alzheimer in provincia <strong>di</strong> Foggia.<br />
Sempre nell'ambito del "Progetto strategico <strong>di</strong> ricerca finalizzata sulla malattia <strong>di</strong> Alzheimer"<br />
del Ministero della Sanità, è proseguita la collaborazione con il Dipartimento <strong>di</strong> Neuroscienze<br />
dell'Azienda "Santa Maria della Misericor<strong>di</strong>a" <strong>di</strong> U<strong>di</strong>ne allo svolgimento del progetto "Stu<strong>di</strong>o<br />
77<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
[triennale] <strong>di</strong> prevalenza e incidenza e valutazione <strong>di</strong> markers bioumorali della malattia <strong>di</strong><br />
Alzheimer" gestito dalla Regione Friuli Venezia Giulia.<br />
IRFMN<br />
Vali<strong>di</strong>tà e atten<strong>di</strong>bilità della batteria neuropsicologica del CERAD<br />
In collaborazione con la Clinica della Memoria del Servizio <strong>di</strong> Geriatria dell'Ospedale della<br />
Beata Vergine <strong>di</strong> Mendrisio (Svizzera), è proseguito lo stu<strong>di</strong>o trasversale e longitu<strong>di</strong>nale sulla<br />
vali<strong>di</strong>tà e atten<strong>di</strong>bilità della batteria neuropsicologica del CERAD (Consortium to Establish a<br />
Registry of Alzheimer's Disease, uno degli strumenti più <strong>di</strong>ffusi internazionalmente per lo<br />
stu<strong>di</strong>o delle demenze e dei deficit cognitivi dell'anziano) nella <strong>di</strong>agnosi delle forme iniziali <strong>di</strong><br />
demenza e nell'in<strong>di</strong>viduazione degli anziani con mild cognitive impairment.<br />
Stu<strong>di</strong>o longitu<strong>di</strong>nale in pazienti affetti da MCI<br />
Partecipazione, in collaborazione con la Clinica Neurologica III (Azienda Ospedaliera S. Paolo)<br />
dell'Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano, allo stu<strong>di</strong>o longitu<strong>di</strong>nale sulla capacità <strong>di</strong> variabili<br />
psicometriche (oltre che demografiche, cliniche e biologiche) <strong>di</strong> pre<strong>di</strong>re la "conversione" in<br />
demenza <strong>di</strong> soggetti con mild cognitive impairment. Questo stu<strong>di</strong>o fa parte del progetto della<br />
Regione Lombar<strong>di</strong>a finanziato dal Ministero della Sanità nell'ambito del "Progetto strategico <strong>di</strong><br />
ricerca finalizzata sulla malattia <strong>di</strong> Alzheimer".<br />
Valutazione della qualità dei servizi per il malato <strong>di</strong> demenza<br />
Nel campo della valutazione della qualità dei servizi per le demenze e degli interventi a<br />
sostegno della famiglia e del caregiver è stata avviata una collaborazione con la Direzione<br />
Generale dell'Assessorato alla Famiglia e Solidarietà Sociale della Regione Lombar<strong>di</strong>a per la<br />
realizzazione <strong>di</strong> due progetti specifici finanziati da fon<strong>di</strong> del Ministero della Salute.<br />
Il primo progetto ha l'obiettivo <strong>di</strong> valutare comparativamente in un campione <strong>di</strong> 70 RSA e IDR<br />
con e senza Nucleo Alzheimer (a) la qualità <strong>di</strong> queste strutture sulla base <strong>di</strong> in<strong>di</strong>catori <strong>di</strong><br />
struttura e <strong>di</strong> processo, (b) l'appropriatezza dei ricoveri e (c) l'impatto delle caratteristiche<br />
strutturali, organizzative ed assistenziali sullo stato cognitivo, funzionale e comportamentale del<br />
paziente con demenza.<br />
Il secondo progetto (Progetto CARER), in collaborazione con la Federazione Alzheimer Italia<br />
(AI), ha l'obiettivo <strong>di</strong> valutare l'effetto <strong>di</strong> un intervento <strong>di</strong> sostegno e <strong>di</strong> counselling alla famiglia<br />
che ha in carico e assiste a domicilio un malato <strong>di</strong> demenza. Misure d'outcome sono: il grado <strong>di</strong><br />
stress, il carico assistenziale del caregiver, l'uso <strong>di</strong> servizi e l'istituzionalizzazione/permanenza<br />
in famiglia del paziente.<br />
Progetto interazioni<br />
Il progetto della durata <strong>di</strong> 3 anni ha come obiettivo principale lo sviluppo e l'implementazione <strong>di</strong><br />
un database sulle interazioni all'interno del SISS della Regione Lombar<strong>di</strong>a come strumento <strong>di</strong><br />
supporto per il me<strong>di</strong>co <strong>di</strong> me<strong>di</strong>cina generale (MMG) al momento della prescrizione<br />
farmacologia. All'interno del progetto è previsto uno stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> valutazione della prevalenza delle<br />
interazioni su un campione <strong>di</strong> me<strong>di</strong>ci e uno stu<strong>di</strong>o longitu<strong>di</strong>nale per monitorare i comportamenti<br />
del MMG <strong>di</strong> fronte al sospetto/segnalazione da parte del database <strong>di</strong> una potenziale interazione<br />
clinicamente rilevante.<br />
Progetto epidemiologia del farmaco nell'anziano<br />
All'interno <strong>di</strong> una convenzione con la Direzione Generale Sanità della Regione Lombar<strong>di</strong>a il<br />
progetto, della durata <strong>di</strong> 3 anni, prevede una valutazione dei pattern prescrittivi nei pazienti<br />
anziani (età > 65 anni) della Regione Lombar<strong>di</strong>a, con particolare riferimento ad alcune classi<br />
terapeutiche (farmaci del sistema car<strong>di</strong>ovascolare, classe C del sistema ATC; del sistema<br />
respiratorio, classe R dell'ATC; e del sistema nervoso centrale, classe N dell'ATC). In<br />
particolare saranno valutate l'appropriatezza prescrittiva e verranno elaborate delle mappe <strong>di</strong><br />
78<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
prescrizione e spesa per le <strong>di</strong>verse zone monitorate.<br />
IRFMN<br />
Progetto Trenta Ore per la Vita: Valutazione dell'appropriatezza d'uso dei<br />
farmaci nell'anziano<br />
Il progetto ha come obiettivo la valutazione del corretto uso dei farmaci in <strong>di</strong>fferenti popolazioni<br />
<strong>di</strong> anziani (ultraottantenni, anziani istituzionalizzati, anziani in assistenza domiciliare integrata,<br />
anziani ambulatoriali) e la presenza <strong>di</strong> eventuali pre<strong>di</strong>ttori correlabili ad un uso inappropriato.<br />
Servizio <strong>di</strong> informazione sui farmaci nell'anziano<br />
Ogni giorno è <strong>di</strong>sponibile gratuitamente, per gli anziani e per i me<strong>di</strong>ci, un servizio telefonico o<br />
via e-mail <strong>di</strong> informazione sui farmaci. Questo servizio risponde ogni anno a oltre 600 quesiti.<br />
Qualità dell'assistenza ai soggetti oncologici terminali<br />
Nel 1999 è stato avviato, in collaborazione con l'hospice "via <strong>di</strong> Natale" <strong>di</strong> Aviano (PN), un<br />
progetto <strong>di</strong> ricerca che ha come obiettivo quello <strong>di</strong> valutare la qualità dell'assistenza durante<br />
l'ultimo periodo <strong>di</strong> vita dei malati accolti in hospice. Sono stati avviati uno stu<strong>di</strong>o retrospettivo e<br />
uno prospettico. Il progetto prevede attualmente la valutazione dell'attività a cinque anni<br />
dall'apertura della struttura.<br />
Revisione dell'efficacia <strong>di</strong> trattamenti psicosociali e psicofarmacologici<br />
alla luce della letteratura più recente<br />
Conclusione della meta analisi sulla terapia <strong>di</strong> coppia nel trattamento della depressione, in cui<br />
sono stati analizzati, utilizzando il software della Cochrane Collaboration, do<strong>di</strong>ci stu<strong>di</strong><br />
randomizzati, per metà dei quali sono state richieste informazioni complementari.<br />
Progetto nazionale PROGRES Acuti<br />
Conduzione della seconda fase (valutazione dei pazienti presenti in un giorno in<strong>di</strong>ce in un<br />
campione randomizzato <strong>di</strong> Servizi <strong>di</strong> Diagnosi e Cura della Lombar<strong>di</strong>a): formazione dei<br />
monitor, rilevazione, controllo <strong>di</strong> qualità dei dati e input; correzione dei dati della prima fase;<br />
avvio dell'analisi specifica della Lombar<strong>di</strong>a per la prima fase.<br />
Depressione resistente<br />
Stu<strong>di</strong>o clinico sul valore pre<strong>di</strong>ttivo dei marker genetici per l'identificazione dei soggetti con<br />
<strong>di</strong>agnosi <strong>di</strong> depressione resistenti al trattamento con SSRI e sulla relazione tra livelli serici <strong>di</strong><br />
BDNF in un campione <strong>di</strong> pazienti che non rispondono al trattamento con SSRI in Lombar<strong>di</strong>a.<br />
Presentazione dei protocolli ai comitati etici delle <strong>di</strong>verse Aziende Ospedaliere, avvio dello<br />
stu<strong>di</strong>o nell'Unità Operativa <strong>di</strong> Psichiatria <strong>di</strong> Bollate.<br />
Indagine epidemiologica sul benessere psicologico della popolazione <strong>di</strong><br />
origine cinese a Milano<br />
Stesura del protocollo, presentazione e <strong>di</strong>scussione con il Comune <strong>di</strong> Milano, in<strong>di</strong>viduazione<br />
dello strumento (General Health Questionnaire) e assistenza alla trascrizione in caratteri<br />
semplificati cinesi e alla traduzione in italiano, pre<strong>di</strong>sposizione dello strumento sull'utilizzo dei<br />
servizi da parte della comunità cinese.<br />
Il revolving door nelle strutture residenziali: monitoraggio e<br />
prefigurazione <strong>di</strong> strategie per il controllo<br />
Definizione del protocollo <strong>di</strong> ricerca, definizione degli strumenti <strong>di</strong> valutazione e reclutamento<br />
dei centri.<br />
79<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Partecipazione ai lavori della Evidence Base taskforce del Mental Health<br />
Working Party del Direttorato Generale - Salute Pubblica e Protezione del<br />
Consumatore - dell'Unione Europea<br />
Discussione e stesura <strong>di</strong> un documento <strong>di</strong> riferimento per la produzione <strong>di</strong> evidenze all'interno<br />
dei lavori del Mental Health Working Party, "Recommendations on the evidence base for the<br />
Mental Health Working Part". Adesione al progetto IMPHA II, A European Platform for Mental<br />
Health Promotion and Mental Disorder Prevention: In<strong>di</strong>cators, Interventions and Policies,<br />
finanziato dal Direttorato Generale - Salute Pubblica e Protezione del Consumatore -<br />
dell'Unione Europea, sulla documentazione, integrazione, implementazione, <strong>di</strong>ffusione e<br />
valutazione dei progetti <strong>di</strong> prevenzione del <strong>di</strong>sagio mentale nei paesi europei.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Infiammazione e Malattie del Sistema Nervoso<br />
Inibizione <strong>di</strong> aspetti specifici della risposta infiammatoria e marcata<br />
riduzione del danno cerebrale da ischemia/riperfusione<br />
Nostri stu<strong>di</strong> precedenti hanno mostrato che il complemento ed i sistemi infiammatori ad esso<br />
relati, quali il sistema <strong>di</strong> contatto/chinine e quello fibrinolitico possono costituire nuovi target<br />
terapeutici nel trattamento del danno ischemico.<br />
Abbiamo <strong>di</strong>mostrato che il C1-INH, un inibitore serin-proteasico che agisce da inibitore<br />
primario del sistema del complemento e <strong>di</strong> quello delle chinine, migliora significativamente i<br />
deficit neurologici e il volume d'infarto in topi con ischemia cerebrale focale indotta da<br />
occlusione transitoria dell'arteria cerebrale me<strong>di</strong>a. Abbiamo approfon<strong>di</strong>to ulteriormente questo<br />
dato verificando la sua efficacia in <strong>di</strong>versi ceppi <strong>di</strong> topi (che hanno un <strong>di</strong>verso livello <strong>di</strong><br />
espressione del complemento) e definendo la dose-risposta e la finestra temporale della sua<br />
efficacia. Dato che C1-INH può agire su <strong>di</strong>versi substrati, abbiamo valutato il coinvolgimento<br />
delle <strong>di</strong>verse vie <strong>di</strong> attivazione del complemento e quello <strong>di</strong> altri sistemi quali il sistema delle<br />
chinine e quello della coagulazione. Per esplorare i meccansimi <strong>di</strong> neuroprotezione attivati dal<br />
C1-INH abbiamo inoltre stu<strong>di</strong>ato l'espressione (mRNA e proteine) <strong>di</strong> molecole infiammatorie<br />
tra cui citochine, molecole <strong>di</strong> adesione, isoforme <strong>di</strong> NO sintasi e markers <strong>di</strong> apoptosi.<br />
I risultati ottenuti mostrano che: i) il C1-INH esercita un effetto neuroprotettivo molto marcato,<br />
inducendo una <strong>di</strong>minuzione del 90% della lesione ischemica; ii) il C1-INH induce un'inibizione<br />
del reclutamento cellulare, dell'infiammazione e dell'apoptosi; iii) la neuroprotezione indotta dal<br />
C1-INH è almeno in parte in<strong>di</strong>pendente dall'inibizione della via classica del complemento e<br />
altre vie <strong>di</strong> attivazione del complemento, altri sistemi infiammatori come quello del<br />
contatto/chinine, o il controllo <strong>di</strong> eventi trombotici associati al danno da ischemia/riperfusione<br />
possono essere coinvolti nella sua potente azione protettiva.<br />
Il C1-INH, che è attualmente utilizzato in clinica come terapia sostitutiva in pazienti<br />
geneticamente carenti <strong>di</strong> C1-INH, possiede marcati effetti neuroprotettivi modulando <strong>di</strong>versi<br />
aspetti della risposta infiammatoria da ischemia/riperfusione.<br />
Cellule staminali neurali nell'approccio terapeutico dell'ischemia cerebrale<br />
Scopo <strong>di</strong> questo progetto è <strong>di</strong> valutare le con<strong>di</strong>zioni necessarie affinchè l'infusione <strong>di</strong> cellule<br />
staminali neurali (NSCs) riduca il danno ischemico e <strong>di</strong> indagare i meccanismi alla base <strong>di</strong><br />
questa protezione. NSCs, ottenute da topi neonati che esprimono il gene per la betagalattosidasi,<br />
vengono infuse in topi singenici in cui l'ischemia cerebrale focale viene ottenuta<br />
me<strong>di</strong>ante occlusione dell'arteria cerebrale me<strong>di</strong>a. In questi animali abbiamo stu<strong>di</strong>ato la<br />
migrazione e la <strong>di</strong>stribuzione delle cellule a <strong>di</strong>versi tempi dall'infusione. I risultati ottenuti<br />
mostrano che a tempi brevi le cellule iniettate per via intracerebroventricolare sono localizzate a<br />
livello epen<strong>di</strong>male attorno al sito <strong>di</strong> iniezione. In tempi successivi le cellule migrano nel<br />
parenchima cerebrale e quin<strong>di</strong>, a tempi più lunghi, e fino a 14 giorni, si ritrovano localizzate<br />
prevalentemente a livello dei vasi cerebrali, sia nel lato ipsi- che in quello contr-laterale. In topi<br />
80<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
sham-operati non si osservano cellule positive nè a livello del parenchima, nè a livello vascolare<br />
a nessun tempo considerato, in<strong>di</strong>cando che in assenza della lesione le cellule non permangono<br />
nel tessuto cerebrale.<br />
Due settimane dopo la lesione ischemica (e l'infusione <strong>di</strong> NSCs), si effettua la conta neuronale<br />
nella area lesa, me<strong>di</strong>ante tecnica <strong>di</strong> analisi dell'immagine (AnalySIS). I topi che hanno ricevuto<br />
l'infusione <strong>di</strong> salina mostrano un numero <strong>di</strong> neuroni nettamente inferiore rispetto ai topi trattati<br />
con NSCs. Questi dati in<strong>di</strong>cano che l'infusione con NSCs riduce in modo significativo la pre<strong>di</strong>ta<br />
neuronale indotta da ischemia.<br />
Si sta attualmente analizzando l'attivazione <strong>di</strong> geni e la presenza <strong>di</strong> proteine <strong>di</strong> molecole<br />
infiammatorie e <strong>di</strong> fattori trofici nei <strong>di</strong>versi gruppi sperimentali al fine <strong>di</strong> chiarire i meccanismi<br />
<strong>di</strong> neuroprotezione indotti dalle NSCs.<br />
Eparina e malattia <strong>di</strong> Alzheimer<br />
Abbiamo <strong>di</strong>mostrato precedentemente che l'eparina in vitro possiede effetti antiinfiammatori e<br />
neuroprotettivi. Abbiamo ora stu<strong>di</strong>ato l'effetto <strong>di</strong> un trattamento periferico a lungo termine con<br />
enossieparina, un'eparina a basso peso molecolare, in topi transgenici che overesprimono<br />
APP751 humana. La somministrazione per via intraperitoneale con enossieparina per sei mesi<br />
ha indotto una <strong>di</strong>minuzione significativa del numero dei depositi, dell'area occupata dagli stessi<br />
e della concentrazione totale <strong>di</strong> beta-amiloide. L'analisi immuocitochimica <strong>di</strong> cellule GFAPpositive<br />
ha mostrato che enossieparina aveva ridotto significativamente la presenza <strong>di</strong> astrociti<br />
attivati attorno ai depositi <strong>di</strong> amiloide. In vitro enossieparina e' in grado <strong>di</strong> ridurre l'attivazione<br />
dei sistemi del complemento e <strong>di</strong> quello <strong>di</strong> contatto/chinine provocata da beta-amiloide, sistemi<br />
infiammatori che sono attivati nella malattia <strong>di</strong> Alzheimer. La riduzione del carico <strong>di</strong> amiloide,<br />
della citotossicità e dell'azione proinfiammatoria della beta-amiloide in<strong>di</strong>cano che<br />
enossieparina, un farmaco anticoagulante <strong>di</strong> comune uso clinico, può essere proposta nel<br />
trattamento della progressione della malattia <strong>di</strong> Alzheimer.<br />
Stu<strong>di</strong> sul ruolo <strong>di</strong> Rai (Shc C) nel danno cerebrale da<br />
ischemia/riperfusione<br />
Questa linea <strong>di</strong> ricerca è focalizzata su Rai, un membro della famiglia delle proteine <strong>di</strong> tipo Shc,<br />
trasduttori citoplasmatici che con<strong>di</strong>vidono una struttura modulare simile. Rai è espressa<br />
selettivamente nel tessuto nervoso. E' in grado <strong>di</strong> attivare il pathway PI3K/Akt, <strong>di</strong> agire come<br />
fattore anti-apoptotico e <strong>di</strong> aumentare la sopravvivenza <strong>di</strong> neuroni esposti a deprivazione <strong>di</strong><br />
siero. In collaborazione con G. Pelicci (IEO, Milano) abbiamo iniziato a stu<strong>di</strong>are il ruolo <strong>di</strong> Rai<br />
in vivo. Abbiamo stu<strong>di</strong>ato l'espressione <strong>di</strong> Rai e nel suo sistema <strong>di</strong> segnalazione in topi<br />
ischemici Rai -/-. In questi topi l'ischemia induce deficits funzionali più marcati, un aumento<br />
dell'apoptosi e dell'area ischemica. Rai sembra funzionare come un gene sensibile allo stress che<br />
aumenta l'attivitazione <strong>di</strong> PI3K e la fosforilazione <strong>di</strong> Akt in seguito ad un insulto ipossico o<br />
ossidativo. I dati ottenuti in<strong>di</strong>cano che Rai possiede un ruolo protettivo nel danno cerebrale e la<br />
ulteriore definizione del suo sistema <strong>di</strong> segnalazione potrà fornire in<strong>di</strong>cazioni per nuove<br />
strategie terapeutiche per il trattamento dell'ictus.<br />
Stu<strong>di</strong> sul ruolo <strong>di</strong> Rai (Shc C) nel danno cerebrale da<br />
ischemia/riperfusione<br />
Questa linea <strong>di</strong> ricerca è focalizzata su Rai, un membro della famiglia delle proteine <strong>di</strong> tipo Shc,<br />
trasduttori citoplasmatici che con<strong>di</strong>vidono una struttura modulare simile. Rai è espressa<br />
selettivamente nel tessuto nervoso. E' in grado <strong>di</strong> attivare il pathway PI3K/Akt, <strong>di</strong> agire come<br />
fattore anti-apoptotico e <strong>di</strong> aumentare la sopravvivenza <strong>di</strong> neuroni esposti a deprivazione <strong>di</strong><br />
siero. In collaborazione con G. Pelicci (IEO, Milano) abbiamo iniziato a stu<strong>di</strong>are il ruolo <strong>di</strong> Rai<br />
in vivo. Abbiamo stu<strong>di</strong>ato l'espressione <strong>di</strong> Rai e nel suo sistema <strong>di</strong> segnalazione in topi<br />
ischemici Rai -/-. In questi topi l'ischemia induce deficits funzionali piu' marcati, un aumento<br />
81<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
dell'apoptosi e dell'area ischemica. Rai sembra funzionare come un gene sensibile allo stress che<br />
aumenta l'attivitazione <strong>di</strong> PI3K e la fosforilazione <strong>di</strong> Akt in seguito ad un insulto ipossico o<br />
ossidativo. I dati ottenuti in<strong>di</strong>cano che Rai possiede un ruolo protettivo nel danno cerebrale e la<br />
ulteriore definizione del suo sistema <strong>di</strong> segnalazione potrà fornire in<strong>di</strong>cazioni per nuove<br />
strategie terapeutiche per il trattamento dell'ictus.<br />
Stu<strong>di</strong> sul ruolo <strong>di</strong> Rai (Shc C) nel danno cerebrale da<br />
ischemia/riperfusione<br />
Questa linea <strong>di</strong> ricerca è focalizzata su Rai, un membro della famiglia delle proteine <strong>di</strong> tipo Shc,<br />
trasduttori citoplasmatici che con<strong>di</strong>vidono una struttura modulare simile. Rai è espressa<br />
selettivamente nel tessuto nervoso. E' in grado <strong>di</strong> attivare il pathway PI3K/Akt, <strong>di</strong> agire come<br />
fattore anti-apoptotico e <strong>di</strong> aumentare la sopravvivenza <strong>di</strong> neuroni esposti a deprivazione <strong>di</strong><br />
siero. In collaborazione con G. Pelicci (IEO, Milano) abbiamo iniziato a stu<strong>di</strong>are il ruolo <strong>di</strong> Rai<br />
in vivo. Abbiamo stu<strong>di</strong>ato l'espressione <strong>di</strong> Rai e nel suo sistema <strong>di</strong> segnalazione in topi<br />
ischemici Rai -/-. In questi topi l'ischemia induce deficit funzionali più marcati, un aumento<br />
dell'apoptosi e dell'area ischemica. Rai sembra funzionare come un gene sensibile allo stress che<br />
aumenta l'attivitazione <strong>di</strong> PI3K e la fosforilazione <strong>di</strong> Akt in seguito ad un insulto ipossico o<br />
ossidativo. I dati ottenuti in<strong>di</strong>cano che Rai possiede un ruolo protettivo nel danno cerebrale e la<br />
ulteriore definizione del suo sistema <strong>di</strong> segnalazione potrà fornire in<strong>di</strong>cazioni per nuove<br />
strategie terapeutiche per il trattamento dell'ictus.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Neurobiologia Molecolare<br />
Stu<strong>di</strong>o dei meccanismi patogenetici della Sclerosi Laterale Amiotrofica:<br />
ruolo dei meccanismi intracellulari<br />
Ruolo dei meccanismi intracellulari nella progressiva degenerazione dei motoneuroni spinali nei<br />
topi con SOD1 mutata (SOD1G93A), un modello <strong>di</strong> SLA familiare.<br />
Continuando lo stu<strong>di</strong>o dei segnali intracellulari associati all'attivazione della proteina<br />
p38MAPK, abbiamo osservato che nei motoneuroni spinali <strong>di</strong> topi con SOD1 mutata che<br />
progressivamente degenerano, ma non negli astrociti e nella microglia, tale fenomeno avviene<br />
attraverso l'attivazione a cascata <strong>di</strong> una serie <strong>di</strong> chinasi (MKK3, 6, 4 e Ask1) a monte delle quali<br />
vi è un aumento <strong>di</strong> espressione dei recettori <strong>di</strong> tipo 1 e 2 del tumor necrosis factor alpha<br />
(TNFalfa) ma non <strong>di</strong> quelli per interleuchina beta (IL1b) e Fas. Questi risultati raccolti in un<br />
manoscritto che sta per essere sottoposto alla rivista Neurobiology of Disease, forniscono<br />
ulteriori evidenze del ruolo <strong>di</strong> p38MAPK nella patogenesi della malattia in<strong>di</strong>cando nuovi<br />
potenziali e selettivi per lo sviluppo <strong>di</strong> nuove strategie terapeutiche. Inoltre abbiamo confermato<br />
che la progressiva degenerazione dei motoneuroni nei topi SOD1G93A non è associata ad una<br />
<strong>di</strong>sfunzione del sistema PI3K-Akt deputato al mantenimento della sopravvivenza cellulare. Al<br />
contrario, un'attivazione (fosforilazione) <strong>di</strong> Akt si riscontra negli astrociti ipertrofici allo sta<strong>di</strong>o<br />
avanzato della patologia in<strong>di</strong>cando un possibile ruolo <strong>di</strong> questa proteina nella sopravvivenza e<br />
nella proliferazione <strong>di</strong> queste cellule. Questo stu<strong>di</strong>o in<strong>di</strong>ca che interventi mirati ad aumentare i<br />
livelli <strong>di</strong> Akt fosforilato nei motoneuroni potrebbe favorire la protezione <strong>di</strong> queste cellule<br />
fornendo un altro potenziale bersaglio per lo sviluppo <strong>di</strong> nuove terapie.<br />
82<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Ruolo della via <strong>di</strong> degradazione proteica ubiquitina/proteasoma nella<br />
progressiva degenerazione dei motoneuroni spinali in un modello murino<br />
<strong>di</strong> SLA familiare<br />
E' stata completata l'analisi dell'attività del sistema ubiquitina/proteasoma in omogenato <strong>di</strong><br />
midollo spinale <strong>di</strong> topi SOD1G93A presi a <strong>di</strong>fferenti sta<strong>di</strong> della malattia e confrontati con topi<br />
controllo. I dati in<strong>di</strong>cano che nonostante ci sia un accumulo <strong>di</strong> proteine insolubili al detergente,<br />
tra cui la SOD1, con la progressione della patologia, l'attività del proteasoma rimane invariata.<br />
La mancata alterazione potrebbe <strong>di</strong>pendere da un bilancio tra i livelli delle subunità costitutive<br />
del proteasoma che <strong>di</strong>minuiscono con il progre<strong>di</strong>re della patologia e il concomitante aumento<br />
dei livelli <strong>di</strong> immunoproteasoma. Questo scambio da proteasoma a immunoproteasoma<br />
causerebbe la formazione <strong>di</strong> pepti<strong>di</strong> proni ad aggregare o a formare siti antigenici che<br />
potrebbero indurre una risposta immunitaria specifica e in questo modo determinare la<br />
vulnerabilità selettiva dei motoneuroni. Questi dati in via <strong>di</strong> pubblicazione nella rivista<br />
Neurobiology of Disease forniscono nuove ipotesi nello scenario dei meccanismi molecolari<br />
coinvolti nella degenerazione selettiva dei motoneuroni nella SLA. Inoltre in collaborazione con<br />
il <strong>di</strong>partimento <strong>di</strong> Molecular Biochemistry and Pharmacology è tutt'ora in corso l'analisi<br />
proteomica della composizione degli aggregati proteici nel midollo spinale dei topi con SOD1<br />
mutata. Sinora l'analisi ha <strong>di</strong>mostrato che le proteine nitrate che aumentano nel midollo spinale<br />
dei topi SOD1G93A durante la progressione della malattia non sono presenti negli aggregati<br />
insolubili ma si accumulano nella frazione solubile. La nitrazione potrebbe determinare<br />
l'alterazione della funzione delle proteine e della loro degradazione. Questa parte dello stu<strong>di</strong>o è<br />
raccolta in un manoscritto in stampa sulla rivista J.Biological Chemistry.<br />
Interventi terapeutici nel modello murino <strong>di</strong> SLA<br />
L'analisi del numero dei motoneuroni a seguito del trattamento con acetilcarnitina più riluzolo<br />
dei topi SOD1G93A, descritto nel precedente rapporto, ha <strong>di</strong>mostrato un parziale effetto<br />
neuroprotettivo dei singoli farmaci che non è amplificato dall'associazione dei due. E' probabile<br />
quin<strong>di</strong> che il rallentamento della progressione della malattia osservato con l'associazione dei due<br />
farmaci sia ascrivibile in parte ad un effetto protettivo a livello delle giunzioni neuromuscolari<br />
dell'aceltilcarnitina.<br />
Poichè‚ l'eritropoietina umana ricombinante (rhuEPO) mostrava effetti neuroprotettivi sui<br />
motoneuroni in coltura esposti a stimoli eccitotossici, abbiamo valutato l'effetto del trattamento<br />
cronico con questo composto sull'andamento della patologia nei topi SOD1G93A. Abbiamo<br />
osservato un progressivo aumento dell'ematocrito in questi animali ma con risultati negativi sia<br />
per quanto riguarda la progressione della malattia che per l'effetto neuroprotettivo.<br />
Un altro approccio è stato quello relativo all'uso <strong>di</strong> cellule staminali ematopoietiche ottenute dal<br />
cordone ombelicale umano. In uno stu<strong>di</strong>o preliminare abbiamo <strong>di</strong>mostrato che queste cellule<br />
opportunamente marcate in vitro con un marcatore nucleare fluorescente(Hoechst) iniettate nei<br />
ventricoli cerebrali dei topi SOD1G93A trattati con ciclosporina sono in grado, in minima parte,<br />
<strong>di</strong> migrare lungo le meningi che circondano il midollo spinale e in qualche caso anche <strong>di</strong><br />
penetrare il parenchima spinale e sono visibili per un tempo relativamente lungo (4 settimane).<br />
Stiamo ora verificando se un trattamento simile sia in grado <strong>di</strong> migliorare la sintomatologia e<br />
aumentare la sopravvivenza dei topi.<br />
83<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Sviluppo <strong>di</strong> un modello con<strong>di</strong>zionale <strong>di</strong> topi transgenici per SOD1 mutata<br />
con il metodo tTA<br />
Lo scopo <strong>di</strong> questo progetto è quello <strong>di</strong> sviluppare un modello murino con<strong>di</strong>zionale dove<br />
l'espressione della SOD1 umana (hSOD1) mutata possa essere controllata temporalmente con il<br />
sistema tTA. Abbiamo prodotto 8 linee <strong>di</strong> topi portatori del cDNA umano<br />
SOD1G93A(hSOD1G93A), tre delle quali anche esprimono una proteina fluorescente verde<br />
(EGFP) come marcatore. Tutte queste linee sono state incrociate con topi nei quali l'espressione<br />
della tTA è sotto il controllo del promotore della proteina prionica. In tutti i topi doppi<br />
transgenici per le <strong>di</strong>verse linee l’espressione e la <strong>di</strong>stribuzione <strong>di</strong> EGFP e/o SOD1 G93A è<br />
ristretta all’epitelio olfattorio (EO), i recettori vomeronasali e le loro proiezioni, ma non si<br />
osservano livelli misurabili <strong>di</strong> proteina o <strong>di</strong> mRNA nel resto del sistema nervoso. In linea con<br />
altri stu<strong>di</strong>, noi ipotizziamo che il background genetico eterologo dei topi doppi transgenici possa<br />
essere responsabile della mancanza <strong>di</strong> espressione ubiquitaria <strong>di</strong> SOD1/EGFP e dell’espressione<br />
eterogenea <strong>di</strong> tTA mRNA nel SNC. Una possibilità è che il background genetico possa<br />
influenzare la mutilazione del promotore controllando l’espressione dei transgeni. Attualmente<br />
stiamo trasferendo alcune linee responsive sullo stesso background genetico FVB/N dei topi<br />
attivatori per vedere se questo possa aiutare a raggiungere un’espressione consistente ed<br />
ubiquitaria della proteina SOD1G93A nel sistema nervoso.<br />
Altre attività <strong>di</strong> ricerca<br />
UNITA’ DI FARMACOLOGIA COMPORTAMENTALE<br />
Basi neuronali del consumo, del "drug craving" e del "relapse"<br />
nell'assunzione <strong>di</strong> sostanze d'abuso<br />
Scopo <strong>di</strong> questo progetto è quello <strong>di</strong> produrre in<strong>di</strong>cazioni utili allo sviluppo <strong>di</strong> approcci<br />
terapeutici efficaci per prevenire il consumo e la ricaduta nell'assunzione <strong>di</strong> sostanze d'abuso in<br />
seguito all'insorgenza <strong>di</strong> "craving".<br />
Il progetto prevede l'utilizzo <strong>di</strong> modelli sperimentali <strong>di</strong> assunzione e <strong>di</strong> "relapse" (ricaduta)<br />
indotto dalla presentazione <strong>di</strong> stimoli ambientali associati all'autosomministrazione della<br />
cocaina dopo un periodo <strong>di</strong> astinenza. Si è <strong>di</strong>mostrato che agonisti parziali e antagonisti al<br />
recettore dopaminergico del tipo D3 sono in grado <strong>di</strong> modulare, in ratti <strong>di</strong>sintossicati, i<br />
comportamenti <strong>di</strong> ricerca della sostanza d'abuso scatenati dalla presentazione degli stimoli<br />
ambientali precedentemente associati all'assunzione della cocaina. Inoltre, si stanno svolgendo<br />
<strong>di</strong>versi stu<strong>di</strong> nel tentativo <strong>di</strong> trasferire queste evidenze sperimentali ad altre sostanze d'abuso<br />
(nicotina) e in altre procedure sperimentali ("con<strong>di</strong>tioned place preference").<br />
Caratterizzazione dell'attività <strong>di</strong> un parziale agonista al sito modulatorio<br />
della glicina sul consumo <strong>di</strong> cocaina<br />
Con l'obiettivo <strong>di</strong> ottenere farmaci in grado <strong>di</strong> modulare il consumo <strong>di</strong> cocaina l'attività dell' (+)-<br />
HA-966, un agonista parziale alla glicina, è stato stu<strong>di</strong>ato per la sua capacità <strong>di</strong> ridurre<br />
l'autosomministrazione della sostanza d'abuso. L'(+)-HA-966 significativamente riduce la<br />
autosomministrazione della sostanza d'abuso. Nel tentativo <strong>di</strong> identificare la natura dell'effetto<br />
osservato, la sostanza è stata stu<strong>di</strong>ata su <strong>di</strong>versi protocolli <strong>di</strong> autosomministrazione della<br />
sostanza d'abuso e i risultati ottenuti sono stati confrontati con la capacità dell'(+)-HA-966 <strong>di</strong><br />
modulare l'autosomministrazione <strong>di</strong> cibo. I risultati hanno <strong>di</strong>mostrato che l'agonista parziale alla<br />
glicina mo<strong>di</strong>fica entrambi i comportamenti. Non è chiaro quin<strong>di</strong> se l'(+)-HA-966 induca un<br />
deficit generale nella motivazione o un deficit nella performance dei soggetti sperimentali.<br />
84<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Una singola somministrazione <strong>di</strong> cocaina induce sensibilizzazione<br />
comportamentale e mo<strong>di</strong>fica l'mRNA che co<strong>di</strong>fica il GluR1 e la GAP-43<br />
nell'animale da laboratorio<br />
L'assunzione delle sostanze d'abuso induce plasticità comportamentale accompagnata da<br />
mo<strong>di</strong>ficazioni della connettività sinaptica e della neurotrasmissione me<strong>di</strong>ata dagli aminoaci<strong>di</strong><br />
eccitatori. In questo stu<strong>di</strong>o abbiamo <strong>di</strong>mostrato che la somministrazione <strong>di</strong> una singola dose <strong>di</strong><br />
cocaina rende l'animale da laboratorio più sensibile da un punto <strong>di</strong> vista comportamentale ad<br />
una seconda dose, anche quando questa è somministrata una settimana dopo la prima.<br />
L'aumentata sensibilità è accompagnata da un aumento dell'mRNA della GAP-43, una proteina<br />
presente nel sistema nervoso associata alla crescita neuronale, e mRNA per il GluR1, una<br />
subunità del recettore AMPA per il glutammato.<br />
Nuovi prodotti <strong>di</strong> origine vegetale per il trattamento della depressione<br />
Il progetto, svolto in collaborazione con Indena S.p.A., il Laboratorio Metabolismo dei Farmaci<br />
(Silvio Caccia) e il Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Recettoriale (Tiziana Mennini), si propone<br />
l'identificazione dei costituenti attivi responsabili della attività antidepressiva degli estratti <strong>di</strong><br />
Hypericum perforatum L. e loro possibile meccanismo d'azione, nell'intento <strong>di</strong> sviluppare un<br />
farmaco con caratteristiche farmaco<strong>di</strong>namiche e farmacocinetiche superiori all'estratto totale<br />
attualmente utilizzato.<br />
Dopo aver <strong>di</strong>mostrato che l'iperforina è un elemento che contribuisce all'attività dell'estratto<br />
idrometanolico <strong>di</strong> Hypericum perforatum L. in un modello pre<strong>di</strong>ttivo dell'attività antidepressiva,<br />
si è passati alla valutazione farmacologica e allo stu<strong>di</strong>o del meccanismo d'azione <strong>di</strong> alcuni suoi<br />
derivati. Tra questi, l'iperforina trimetossibenzoato ha mostrato un effetto <strong>di</strong> tipo antidepressivo.<br />
Resistenza ai farmaci antidepressivi: stu<strong>di</strong> sperimentali e clinici<br />
Il progetto svolto in collaborazione con l'Unità <strong>di</strong> Micro<strong>di</strong>alisi Intracerebrale (R.W. Invernizzi),<br />
il Laboratorio <strong>di</strong> Metabolismo dei Farmaci (Silvio Caccia) e il Laboratorio <strong>di</strong> Biologia delle<br />
Malattie Neurodegenerative (Gianluigi Forloni) ha come obiettivo lo stu<strong>di</strong>o dei meccanismi<br />
biologici alla base della risposta ai farmaci antidepressivi allo scopo <strong>di</strong> produrre nuove strategie<br />
terapeutiche per i soggetti che non rispondono alla terapia.<br />
Utilizzando il "forced swimming test" e valutando la risposta ai farmaci antidepressivi in vari<br />
ceppi <strong>di</strong> topo, abbiamo <strong>di</strong>mostrato che i topi DBA/2J non rispondono ai bloccanti della<br />
ricaptazione <strong>di</strong> serotonina. La mancata risposta è probabilmente dovuta ad una mutazione<br />
dell'enzima <strong>di</strong> sintesi della serotonina, la triptofano idrossilasi-2, che comporta una ridotta<br />
capacità <strong>di</strong> sintetizzare il neurotrasmettitore.<br />
UNITA’ DI FARMACOLOGIA DEL COMPORTAMENTO COGNITIVO<br />
Recettori della serotonina e fisiopatologia dei gangli della base<br />
I gangli della base sono parte essenziale del circuito neuronale deputato al controllo motorio e<br />
cognitivo. Disfunzioni nella trasmissione GABAergica o glutammatergica nel nucleo<br />
subtalamico è associato a deficit cognitivi in varie malattie neurologiche tra cui il Morbo <strong>di</strong><br />
Parkinson e la Sindrome <strong>di</strong> Gilles de la Tourette.<br />
Gli stu<strong>di</strong>, condotti nell'Unita <strong>di</strong> Farmacologia del Comportamento Cognitivo, hanno avuto<br />
l'obiettivo <strong>di</strong> chiarire il ruolo dei recettori serotoninergici <strong>di</strong> tipo 5-HT2C nel controllare i deficit<br />
motori e cognitivi indotti dalla stimolazione dei recettori GABAA del nucleo subtalamico<br />
(NST). I risultati mostrano chiaramente che la stimolazione dei recettori 5-HT2C è in grado <strong>di</strong><br />
prevenire i deficit cognitivi ed in parte anche quelli motori. Questo stu<strong>di</strong>o finanziato dalla<br />
"Tourette Syndrome Association" (USA) è stato fatto in collaborazione con i gruppi <strong>di</strong> R.W.<br />
Invernizzi (Dip. Neuroscienze, Milano) ed E. Esposito (Consorzio M. Negri Sud, Chieti).<br />
85<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Meccanismi glutamatergici e serotoninergici corticali e processi<br />
attenzionali<br />
Nell'ambito <strong>di</strong> un progetto collaborativo con R.W. Invernizzi, Capo Unità <strong>di</strong> Micro<strong>di</strong>alisi<br />
Intracerebrale del nostro istituto e finanziato dal MIUR, sono in corso gli stu<strong>di</strong> che mirano a<br />
definire il ruolo dei meccanismi glutamatergici e serotoninergici nei processi attenzionali nel<br />
ratto. Usando tecniche comportamentali, farmacologiche, biochimiche e stereotassiche nel ratto<br />
abbiamo <strong>di</strong>mostrato che il deficit d'attenzione e l'impulsività indotta dal blocco dei recettori<br />
NMDA sono associati ad un aumento del rilascio <strong>di</strong> glutammato e <strong>di</strong> serotonina dalle<br />
terminazioni corticali. Il trattamento con farmaci antagonisti del recettore della serotonina 5-<br />
HT2A previene il deficit d'attenzione e l'impulsività, e l'aumento del rilascio <strong>di</strong> glutammato.<br />
Tali risultati suggeriscono che il blocco dei recettori 5-HT2A potrebbe costituire un<br />
meccanismo molecolare per lo sviluppo <strong>di</strong> farmaci atti a contrastare i deficit cognitivi della<br />
schizofrenia.<br />
UNITA’ DI MICRODIALISI INTRACEREBRALE<br />
Farmaci antidepressivi<br />
Nonostante l'ampia gamma <strong>di</strong> farmaci <strong>di</strong>sponibili per la terapia della depressione, restano<br />
ancora insoluti il problema del ritardo con cui si instaura l'effetto antidepressivo e la scarsa o<br />
nulla risposta che si riscontra in un numero non trascurabile <strong>di</strong> pazienti.<br />
I nostri stu<strong>di</strong> hanno mostrato che l'attivazione degli autorecettori serotoninergici <strong>di</strong> tipo 5-HT1A<br />
riduce l'efficacia con cui gli inibitori selettivi della ricaptazione della serotonina (SSRI)<br />
aumentano la <strong>di</strong>sponibilità <strong>di</strong> serotonina nelle sinapsi cerebrali <strong>di</strong> ratto. Recentemente abbiamo<br />
trovato che anche l'efficacia dei farmaci antidepressivi che inibiscono selettivamente il reuptake<br />
<strong>di</strong> noradrenalina (NRI) è limitata dall'attivazione dell'autorecettore alfa2-adrenergico. Tali<br />
risultati suggeriscono che l'effetto antidepressivo degli SSRI e degli NRI può essere accelerato e<br />
potenziato dalla combinazione con antagonisti dell'autorecettore.<br />
E' stato avviato un progetto che cercherà <strong>di</strong> chiarire i meccanismi biologici della risposta ai<br />
farmaci antidepressivi allo scopo <strong>di</strong> proporre nuove strategie terapeutiche per i soggetti che non<br />
rispondono alla terapia. Utilizzando un modello murino per valutare l'effetto antidepressivo, il<br />
"forced swimming test", risultati preliminari mostrano che i topi del ceppo DBA/2J non<br />
rispondono agli SSRI probabilmente a causa <strong>di</strong> una mutazione dell'enzima <strong>di</strong> sintesi della<br />
serotonina, la triptofano idrossilasi-2, che comporta una ridotta capacità <strong>di</strong> sintetizzare il<br />
neurotrasmettitore. Indagini biochimiche hanno messo in luce che gli SSRI hanno un effetto<br />
modesto o ad<strong>di</strong>rittura nullo sulla sintesi <strong>di</strong> serotonina nei topi portatori della mutazione.<br />
Recettori 5-HT2C e fisiopatologia dei gangli della base<br />
I gangli della base sono parte essenziale del circuito neuronale deputato al controllo motorio e<br />
cognitivo. Alterazioni a vari livelli <strong>di</strong> tale circuito sono responsabili dei movimenti ipo- o ipercinetici<br />
associati a varie malattie neurologiche tra cui il Morbo <strong>di</strong> Parkinson, la Corea <strong>di</strong><br />
Huntington e la Sindrome <strong>di</strong> Gilles de la Tourette. Gli stu<strong>di</strong> condotti dal nostro gruppo hanno<br />
avuto l'obiettivo <strong>di</strong> chiarire il ruolo dei recettori serotoninergici <strong>di</strong> tipo 5-HT2C nel controllare<br />
la trasmissione GABAergica nella substantia nigra reticulata (SNR), principale nucleo <strong>di</strong><br />
"output" dei gangli della base. Abbiamo stabilito che la stimolazione dei recettori 5-HT2C<br />
aumenta il rilascio <strong>di</strong> GABA nella SNR. Inoltre, i gruppi <strong>di</strong> M. Carli (Dip. Neuroscienze,<br />
Milano) e E. Esposito (Consorzio M. Negri Sud, Chieti), partecipanti al progetto finanziato dalla<br />
"Tourette Syndrome Association" (USA) hanno stabilito che la stimolazione dei recettori 5-<br />
HT2C aumenta l'attività elettrica dei neuroni GABAergici della SNR e migliora i deficit<br />
cognitivi causati dalla stimolazione dei recettori GABAergici nel nucleo subtalamico<br />
86<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Meccanismi glutamatergici e serotoninergici corticali e processi<br />
attenzionali<br />
Nell'ambito <strong>di</strong> un progetto collaborativo con M. Carli, che <strong>di</strong>rige l'Unità <strong>di</strong> Farmacologia del<br />
Comportamento Cognitivo del nostro istituto e finanziato dal MIUR, sono in corso gli stu<strong>di</strong> che<br />
mirano a definire il ruolo dei meccanismi glutamatergici e serotoninergici nei processi<br />
attenzionali nel ratto. Utilizzando la tecnica <strong>di</strong> micro<strong>di</strong>alisi intracerebrale per la misurazione del<br />
rilascio dei neurotrasmettitori in vivo, abbiamo <strong>di</strong>mostrato che il deficit attenzionale indotto dal<br />
blocco dei recettori NMDA è associato ad un aumento del rilascio <strong>di</strong> glutammato e <strong>di</strong> serotonina<br />
dalle terminazioni corticali. Il trattamento con farmaci antagonisti del recettore della serotonina<br />
5-HT2A reverte il deficit comportamentale e l'aumento del rilascio <strong>di</strong> glutammato. Tali risultati<br />
suggeriscono che il blocco dei recettori 5-HT2A potrebbe costituire un meccanismo molecolare<br />
per lo sviluppo <strong>di</strong> farmaci atti a contrastare i deficit cognitivi della schizofrenia.<br />
87<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
88<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
DIPARTIMENTO DI RICERCA<br />
CARDIOVASCOLARE<br />
PERSONALE<br />
IRFMN<br />
Capo Dipartimento Maria Grazia FRANZOSI, Dr.Sci.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Clinica Car<strong>di</strong>ovascolare<br />
Capo Laboratorio Roberto LATINI, Dr.Med.Chir.<br />
Unità <strong>di</strong> Endocrinologia Car<strong>di</strong>ovascolare<br />
Capo Unità Serge MASSON, Dr.Bioch.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Valutazione Clinica dei Farmaci<br />
Capo Laboratorio Maria Grazia FRANZOSI, Dr.Sci.Biol.<br />
Unità <strong>di</strong> Bioinformatica<br />
Capo Unità Enrico NICOLIS, Stud.Sci.Informaz.<br />
Unità <strong>di</strong> Statistica Me<strong>di</strong>ca<br />
Capo Unità Simona BARLERA, Dr.Sci.Pol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca in Me<strong>di</strong>cina Generale<br />
Capo Laboratorio M.Carla RONCAGLIONI, Dr.Sci.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Clinica<br />
Capo Laboratorio Gianni TOGNONI, Dr.Med.Chir.<br />
Unità <strong>di</strong> Ricerca Infermieristica<br />
Capo Unità Paola DI GIULIO, Dipl.Inf.Prof.<br />
89<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
Il Dipartimento <strong>di</strong> Ricerca Car<strong>di</strong>ovascolare sviluppa attività <strong>di</strong> ricerca che coprono sia l'area<br />
sperimentale e <strong>di</strong> ricerca <strong>di</strong> base, sia quella della valutazione clinica ed epidemiologica <strong>di</strong><br />
farmaci, strategie <strong>di</strong>agnostico-terapeutiche, fattori <strong>di</strong> rischio, pre<strong>di</strong>ttori <strong>di</strong> esito. Caratteristica<br />
comune alla logica <strong>di</strong> sviluppo dei progetti del Dipartimento (nato sostanzialmente della lunga<br />
esperienza degli stu<strong>di</strong> GISSI) è quella <strong>di</strong> privilegiare un'organizzazione <strong>di</strong> ricerca a forte<br />
impronta collaborativa e multicentrica (anche per quanto riguarda la componente della parte<br />
sperimentale che si interfaccia con la clinica). In questo senso lo staff del Dipartimento è<br />
concepibile come un "nucleo <strong>di</strong> riferimento" per un gruppo <strong>di</strong> ricerca reale che abbraccia, a<br />
livello nazionale e internazionale, in modo permanente, centinaia <strong>di</strong> ricercatori clinici e<br />
moltissime strutture assistenziali.<br />
Alle più tra<strong>di</strong>zionali collaborazioni centrate sulla componente me<strong>di</strong>ca e ospedaliera della<br />
ricerca, si sono aggiunte negli ultimi anni linee <strong>di</strong> ricerca specificamente originali nel panorama<br />
italiano, che riguardano la me<strong>di</strong>cina generale e la funzione-attività infermieristica.<br />
Il Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Clinica Car<strong>di</strong>ovascolare svolge attività <strong>di</strong> ricerca clinica e<br />
sperimentale riassumibili in tre aree principali: a) fisiopatologia, modulazione farmacologica e<br />
ruolo prognostico dell’attivazione del sistema renina-angiotesina-aldosterone e dei sistemi<br />
neuro-ormonali in genere, nell’infarto miocar<strong>di</strong>co e nell’insufficienza car<strong>di</strong>aca; b)<br />
fisiopatologia, inibizione farmacologica e ruolo prognostico dell’attivazione dei processi<br />
infiammatori nell’infarto miocar<strong>di</strong>co e nell’insufficienza car<strong>di</strong>aca; c) terapia cellulare<br />
dell’infarto miocar<strong>di</strong>co.<br />
Il Laboratorio <strong>di</strong> Valutazione Clinica dei Farmaci svolge attività <strong>di</strong> ricerca clinica ed<br />
epidemiologica nell’ambito <strong>di</strong> tre aree principali: a) valutazione clinica <strong>di</strong> farmaci e strategie<br />
terapeutiche in ambito ospedaliero con la conduzione <strong>di</strong> clinical trial <strong>di</strong> gran<strong>di</strong> <strong>di</strong>mensioni nello<br />
scompenso car<strong>di</strong>aco, nelle sindromi coronariche acute e nella fibrillazione atriale; b)<br />
epidemiologia genetica dell’infarto miocar<strong>di</strong>co e dello scompenso car<strong>di</strong>aco; c) epidemiologia<br />
clinica e valutazione dei fattori <strong>di</strong> rischio dell’Infarto mioca<strong>di</strong>co.<br />
Il Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca in Me<strong>di</strong>cina Generale svolge attività <strong>di</strong> ricerca clinica ed<br />
epidemiologica nell'ambito della prevenzione car<strong>di</strong>ovascolare con una vasta rete <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>ci <strong>di</strong><br />
Me<strong>di</strong>cina Generale. In particolare l'attività è orientata: a) alla verifica <strong>di</strong> nuove ipotesi attraverso<br />
trial clinici <strong>di</strong> gran<strong>di</strong> <strong>di</strong>mensioni; b) alla valutazione della reale trasferibilità degli interventi<br />
preventivi <strong>di</strong> provata efficacia nella pratica clinica quoti<strong>di</strong>ana attraverso stu<strong>di</strong> epidemiologici e<br />
<strong>di</strong> outcome research; c) a effettuare stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> farmacoepidemiologia a partire dalle analisi delle<br />
prescrizioni <strong>di</strong> gran<strong>di</strong> data-base amministrativi.<br />
Il Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Clinica ha sviluppato reti <strong>di</strong> ricerca infermieristica orientate alla<br />
valutazione della qualità <strong>di</strong> salute e <strong>di</strong> vita dei pazienti e all'epidemiologia degli interventi<br />
infermieristici e alle loro implicazioni per il benessere e l'outcome dei pazienti.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Grazie alle cure oggi <strong>di</strong>sponibili, chi ha un infarto e si fa ricoverare subito in ospedale ha<br />
moltissime probabilità <strong>di</strong> sopravvivere. Rimane però una piccola quota <strong>di</strong> pazienti che,<br />
nonostante le migliori terapie, non riesce a superare la fase acuta. La possibilità <strong>di</strong> identificare<br />
questi casi <strong>di</strong> infarto 'killer' fin dalle prime ore successive all'insorgenza dei sintomi<br />
permetterebbe <strong>di</strong> pianificare la strategia <strong>di</strong> trattamento più efficace. Ed e' proprio questa la<br />
promessa della PTX3, una proteina <strong>di</strong> fase acuta della famiglia delle pentraxine, identificata<br />
circa 10 anni fa nel Dipartimento <strong>di</strong> Immunologia dell’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri <strong>di</strong> Milano. Una<br />
90<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
ricerca condotta dal Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Clinica Car<strong>di</strong>ovascolare ha <strong>di</strong>mostrato su una<br />
casistica <strong>di</strong> 742 infartuati inclusi nello stu<strong>di</strong>o 'LATIN' coor<strong>di</strong>nato dall'ANMCO (Associazione<br />
Nazionale Me<strong>di</strong>ci Car<strong>di</strong>ologi Ospedalieri), che PTX3 e' un pre<strong>di</strong>ttore in<strong>di</strong>pendente <strong>di</strong> mortalità e<br />
del rischio <strong>di</strong> sviluppare scompenso car<strong>di</strong>aco dopo infarto miocar<strong>di</strong>co acuto. Inoltre i suoi livelli<br />
sono pre<strong>di</strong>ttivi in<strong>di</strong>pendentemente da quelli <strong>di</strong> marcatori classici come il peptide natriuretico <strong>di</strong><br />
tipo B, la proteina C reattiva e la troponina T. PTX3, scoperta da Mantovani e colleghi, è<br />
prodotta dall'organismo in risposta a situazioni infiammatorie e l'infiammazione ha un ruolo<br />
fondamentale nello scatenarsi <strong>di</strong> un infarto.<br />
I mesoangioblasti sono cellule staminali associate ai vasi e sono stati usati con successo per<br />
riparare il danno muscolare scheletrico in un modello murino <strong>di</strong> <strong>di</strong>strofia muscolare, una<br />
malattia ad oggi senza cura. In uno stu<strong>di</strong>o condotto dal Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Clinica<br />
Car<strong>di</strong>ovascolare in collaborazione con G. Cossu (SCRI) e E. Dejana (IFOM), sono stati<br />
confrontati i mesoangioblasti con altre cellule, quelle derivate dal midollo osseo, i fibroblasti<br />
embrionali e una linea <strong>di</strong> cellule endoteliali <strong>di</strong> origine embrionale. Solo i mesoangioblasti e le<br />
staminali midollari hanno ridotto il danno derivante da infarto, presumibilmente attraverso la<br />
produzione <strong>di</strong> fattori anti-apoptotici e angiogenici. A <strong>di</strong>fferenza delle staminali midollari, i<br />
mesoangioblasti sono facili da espandere in vitro, anche da pazienti.L’assenza <strong>di</strong> beneficio con<br />
fibroblasti e staminali endoteliali suggerisce che non tutti i tipi cellulari si equivalgono. Questo<br />
è il primo confronto <strong>di</strong>retto <strong>di</strong> 4 tipi cellulari nello stesso modello sperimentale <strong>di</strong> infarto<br />
miocar<strong>di</strong>co acuto. Questi dati complessivamente definiscono un probabile meccanismo con il<br />
quale <strong>di</strong>versi tipi <strong>di</strong> cellule staminali/progenitrici esercitano effetti protettivi sul miocar<strong>di</strong>o<br />
ischemico. In particolare, i mesoangioblasti producono vari fattori <strong>di</strong> crescita, come bFGF, IGF-<br />
1 e HGF che prevengono l’apoptosi dei car<strong>di</strong>omiociti indotta da ipossia e stimolano la<br />
proliferazione <strong>di</strong> periciti/cellule muscolari lisce <strong>di</strong> vasi neoformati. I risultati <strong>di</strong> questo stu<strong>di</strong>o<br />
riconciliano i benefici funzionali osservati dopo trapianto cellulare, riportati nella maggioranza<br />
degli stu<strong>di</strong> precedenti, con una frequenza estremamente bassa <strong>di</strong> formazione <strong>di</strong> nuovi<br />
car<strong>di</strong>omiociti a partire dalle cellule staminali somministrate. Offrono allo stesso tempo una serie<br />
<strong>di</strong> dati utili come base per futuri stu<strong>di</strong> sull’animale da esperimento e possibilmente sull’uomo.<br />
Lo stu<strong>di</strong>o INTERHEART, coor<strong>di</strong>nato dall'Università McMaster e condotto in 52 paesti, tra cui<br />
l'Italia, per la quale il Laboratorio <strong>di</strong> Valutazione Clinica dei Farmaci ha svolto il ruolo <strong>di</strong><br />
coor<strong>di</strong>natore nazionale, ha <strong>di</strong>mostrato che il 90% del rischio <strong>di</strong> infarto miocar<strong>di</strong>co acuto è<br />
attribuibile a 9 fattori <strong>di</strong> rischio, tutti facilmente misurabili, e per la maggior parte, mo<strong>di</strong>ficabili.<br />
Il fumo e l’alterazione del quadro lipi<strong>di</strong>co sono i più importanti, in quanto responsabili dei 2/3<br />
del rischio se associati. I fattori psicosociali, l’obesità addominale, il <strong>di</strong>abete e l’ipertensione<br />
sono gli altri fattori che aumentano il rischio, mentre il consumo <strong>di</strong> frutta e verdura, una<br />
modesta quantità <strong>di</strong> alcool e l’esercizio fisico lo riducono. I risultati dello stu<strong>di</strong>o INTERHEART<br />
sono vali<strong>di</strong> per tutti i gruppi etnici e le regioni geografiche del mondo.<br />
Stu<strong>di</strong> su famiglie per mappare geni <strong>di</strong> suscettibilità attraverso linkage <strong>di</strong>sequilibrium hanno<br />
prodotto buoni risultati nelle malattie ad esor<strong>di</strong>o precoce dove proband e relativi genitori sono<br />
facilmente reperibili, mentre non si ritenevano attuabili nelle malattie ad esor<strong>di</strong>o tar<strong>di</strong>vo come<br />
l’aterosclerosi coronarica. La trasmissione <strong>di</strong> un allele putativo funzionale, il lymphotoxin- N26<br />
(804A), in<strong>di</strong>cato come associato alla malattia coronarica in uno stu<strong>di</strong>o nella popolazione<br />
Giapponese, è stata testata in uno stu<strong>di</strong>o su più <strong>di</strong> 400 famiglie “trio” incluse nel progetto<br />
PROCARDIS , uno stu<strong>di</strong>o multicentrico europeo progettato per identificare i geni <strong>di</strong><br />
suscettibilità all’infarto e a cui il Laboratorio <strong>di</strong> Valutazione Clinica dei Farmaci collabora. I<br />
risultati hanno in<strong>di</strong>cato che questo allele è associato alla malattia coronarica anche negli<br />
Europei.<br />
Lo stu<strong>di</strong>o PPP, condotto dal Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca in Me<strong>di</strong>cina Generale, ha in<strong>di</strong>cato che nei<br />
91<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
pazienti <strong>di</strong>abetici l'aspirina a basse dosi è molto meno efficace nel prevenire gli eventi<br />
car<strong>di</strong>ovascolari rispetto ad altri gruppi <strong>di</strong> soggetti ad alto rischio.<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
ANMCO (Associazione Nazionale Me<strong>di</strong>ci Car<strong>di</strong>ologi Ospedalieri)<br />
CINECA (Centro <strong>di</strong> Calcolo Interuniversitario dell'Italia Nord-Orientale)<br />
CSeRMEG (Centro Stu<strong>di</strong> e <strong>Ricerche</strong> in Me<strong>di</strong>cina Generale)<br />
Gruppi organizzati <strong>di</strong> MMG (FIMMG; CoS, Ass.Cu.M.I., AMISI)<br />
IFOM-FIRC, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Ricerca in Cure palliative Lino Maestroni<br />
Regione Lombar<strong>di</strong>a<br />
SIBIOC (Società Italiana <strong>di</strong> Biochimica Clinica)<br />
SIFO (Società Italiana <strong>di</strong> Farmacia Ospedaliera)<br />
Stem Cell Research Institute, Ospedale San Raffaele, Milano<br />
Università degli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Torino<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
IRFMN<br />
PHRI (Population Health Research Institute) & CCC (Cana<strong>di</strong>an Car<strong>di</strong>ovascular Collaboration),<br />
Università McMaster, Hamilton, Ontario,Canada<br />
Cecomet (Centro de Epidemiologia comunitaria y Me<strong>di</strong>cina tropical, Esmeraldas, Ecuador)<br />
Cochrane Collaboration, Oxford, UK<br />
Clinical Trial Research Unit, Università <strong>di</strong> Auckland, New Zealand<br />
CTSU (Clinical Trial Service Unit) / ISIS (International Stu<strong>di</strong>es on Infarct Survival), Oxford,<br />
UK<br />
Division of Genetics and Development, Guy's, King's and St Thomas' School of Me<strong>di</strong>cine,<br />
King's College, London<br />
ECLA (Estu<strong>di</strong>os Car<strong>di</strong>ologicos de Latino-America)<br />
Karolinska Institutet, Stockholm, Svezia<br />
Società Internazionale <strong>di</strong> Oncoematologia Pe<strong>di</strong>atrica<br />
Veterans Affairs, Minneapolis, Minnesota, USA<br />
Westfälische Wilhelms - Universität, Münster, Germania<br />
Wellcome Trust Centre for Human Genetics, University of Oxford, UK<br />
WONCA (World Organization of Family Doctors), Europe<br />
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Circulation, International Journal of Health Services, Journal of Clinical Epidemiology (Gianni<br />
Tognoni)<br />
Italian Heart Journal, Journal of Car<strong>di</strong>ac Failure (Roberto Latini)<br />
Assistenza Infermieristica e Ricerca, European Journal of Cancer Care, European Journal of<br />
Oncology Nursing, International Nursing Perspectives (Paola Di Giulio)<br />
92<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
IRFMN<br />
American Heart Journal, American Journal of Managed Care, Car<strong>di</strong>ovascular Research,<br />
Circulation, Clinical Pharmacology and Therapeutics, European Heart Journal, Italian Journal of<br />
Car<strong>di</strong>ology, Journal of Car<strong>di</strong>ac Failure, PharmacoEconomics<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
European Science Foundation<br />
Comitato Etico della Regione Lombar<strong>di</strong>a<br />
Comitato Etico per la Sperimentazione Clinica dei Farmaci Azienda U.L.S.S. 21 <strong>di</strong> Legnago -<br />
Regione Veneto<br />
Comitato Etico Azienda U.L.S.S. 20 <strong>di</strong> Verona - Regione Veneto<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
Corso <strong>di</strong> avvio dello stu<strong>di</strong>o Rischio & Prevenzione per i me<strong>di</strong>ci dell’Azienda ULSS 20 Verona<br />
10/01/04, Ospedale Civile Maggiore, Verona<br />
Investigators’ Meeting - Stu<strong>di</strong>o Prono/Supino II<br />
18/2/04, Hotel Royal Garden, Assago<br />
Corso <strong>di</strong> avvio dello stu<strong>di</strong>o Rischio & Prevenzione per i me<strong>di</strong>ci dell’ASL Provincia <strong>di</strong> Como<br />
4/03/04, Villa Teresa, Como<br />
Corso <strong>di</strong> avvio dello stu<strong>di</strong>o Rischio & Prevenzione per i me<strong>di</strong>ci dell’Azienda ULSS 20 Verona,<br />
dell’Azienda ULSS 22 Bussolengo, dell’Azienda ULSS 13 Mirano e dell’APSS <strong>di</strong> Trento<br />
13/03/04, Ospedale Civile Maggiore, Verona<br />
Corso <strong>di</strong> avvio dello stu<strong>di</strong>o Rischio & Prevenzione per i me<strong>di</strong>ci dell’Azienda ULSS 15<br />
Camposampiero, dell’Azienda ULSS 16 Padova e dell’Azienda ULSS 2 Feltre<br />
17/03/04, Scuola Infermieri, Ospedale <strong>di</strong> Camposampiero, Camposampiero (PD)<br />
Corso <strong>di</strong> avvio dello stu<strong>di</strong>o Rischio & Prevenzione per i me<strong>di</strong>ci dell’ASL della Provincia <strong>di</strong><br />
Milano 1, dell’ASL della Provincia <strong>di</strong> Milano 3 e dell’ASL della Provincia <strong>di</strong> Cremona<br />
8/05/04, <strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri, Milano<br />
Prima riunione Infermiere/i - Stu<strong>di</strong>o Prono/Supino II<br />
14/05/04, Fiera Campionaria, Milano<br />
35° Congresso Nazionale <strong>di</strong> Car<strong>di</strong>ologia ANMCO, Riunione degli Sperimentatori dello stu<strong>di</strong>o<br />
GISSI-HF 23/05/04, Congresso Nazionale ANMCO, Fortezza da Basso, Firenze<br />
Mini Investigators’ Meeting – Stu<strong>di</strong>o GISSI-HF<br />
7/06/04, Starhotels, Bologna<br />
93<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Investigators’ Meeting - Stu<strong>di</strong> MICHELANGELO: OASIS-5 & OASIS-6<br />
22/06/04, Congresso Nazionale ANMCO, Fortezza da Basso, Firenze<br />
IRFMN<br />
Corso <strong>di</strong> avvio dello stu<strong>di</strong>o Rischio & Prevenzione per i me<strong>di</strong>ci dell’ASL Provincia <strong>di</strong> Varese e<br />
dell’ASL Provincia <strong>di</strong> Mantova<br />
2/10/04, <strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri, Milano<br />
Investigators' Meeting – Stu<strong>di</strong>o GISSI-HF, Un modello <strong>di</strong> ricerca collaborativa<br />
6/10/04, Royal Hotel Carlton, Bologna<br />
Riunione dei me<strong>di</strong>ci e delle/i infermiere/i dei centri partecipanti - Stu<strong>di</strong>o Prono/Supino II<br />
18/10/04, Ospedale Policlinico, Milano<br />
Corso <strong>di</strong> avvio dello stu<strong>di</strong>o Rischio & Prevenzione per i me<strong>di</strong>ci dell’ASL Città <strong>di</strong> Milano e<br />
dell’ASL Provincia <strong>di</strong> Varese<br />
20/11/04, <strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri, Milano<br />
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
DIPARTIMENTO<br />
American College of Car<strong>di</strong>ology. Annual Scientific Session, 7-10/3/04, New Orleans:<br />
- Comparative yield of clinical, laboratory, echocar<strong>di</strong>ographic and neurohormonal pre<strong>di</strong>ctos of<br />
outcome in heart failure patients (Val-HeFT data).<br />
- Eplerenone normalizes <strong>di</strong>astolic relaxation and extracellular matrix accumulation in aged rats<br />
with myocar<strong>di</strong>al infarction.<br />
- Prognostic role of plasma C-reactive protein in heart failure: results from Val-HeFT.<br />
- Prognostic role of neutrophil and lymphocyte counts in heart failure. Results from Val-HeFT.<br />
Associazione Nazionale Me<strong>di</strong>ci Car<strong>di</strong>ologi Ospedalieri. 35° Congresso Nazionale <strong>di</strong><br />
Car<strong>di</strong>ologia, 22-26/5/04, Firenze:<br />
- Da cosa <strong>di</strong>pende il valore degli ormoni natriuretici nella sindrome coronarica acuta?<br />
Osservazioni da un campione <strong>di</strong> pazienti <strong>di</strong> comunità.<br />
- Il valore prognostico degli ormoni natriuretici nella sindrome coronarica acute vale anche per i<br />
pazienti <strong>di</strong> comunità?<br />
- BNP e segni e sintomi come marcatori <strong>di</strong> gravità in pazienti con insufficienza car<strong>di</strong>aca<br />
coronarica: dati dello stu<strong>di</strong>o Val-HeFT.<br />
- Livelli circolanti <strong>di</strong> precursori endoteliali in pazineti con insufficienza car<strong>di</strong>aca sintomatica.<br />
Dati preliminari dal GISI-HF.<br />
- La proteina C-reattiva in pazienti con insufficienza car<strong>di</strong>aca dello stu<strong>di</strong>o Val-HeFT.<br />
- Pre<strong>di</strong>zione dell’esito clinico dai cambiamenti a breve termine <strong>di</strong> BNP in pazienti con<br />
insufficienza car<strong>di</strong>aca: lo stu<strong>di</strong>o Val-HeFT.<br />
WONCA Europe Regional Conference, Quality in practice, 1-4/06/04, Amsterdam:<br />
- Treatment and control of type II <strong>di</strong>abetes accor<strong>di</strong>ng to the overall car<strong>di</strong>ovascular risk level.<br />
- Treatment and control of car<strong>di</strong>ovascular risk factors by a sample of Italian General<br />
Practitioners.<br />
ESC, European Society of Car<strong>di</strong>ology, 28/8/04-01/09/04, Monaco:<br />
94<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
- Car<strong>di</strong>oprotection by anti-oxidant therapy in experimental <strong>di</strong>abetes.<br />
- Prognostic value of total cholesterol and triglycerides in heart failure results from Val-HeFT.<br />
- Statins in symptomatic chronic systolic heart failure. A post-hoc analysis of 5010 patients<br />
enrolled in Val-HeFT.<br />
- Renal and hepatic function in patients with chronic symptomatic systolic heart failure on<br />
statins. A post-hoc analysis of 5010 patients enroled to Val-heFT.<br />
- Brain natriuretic peptide and symptoms as markers of severity in patients with chronic heart<br />
failure: Val-HeFT data.<br />
CINECA – Consorzio <strong>Mario</strong> Negri Sud, Progetto ARNO – Donne e Farmaci, 7-8/10/04, Roma:<br />
- La cronicità car<strong>di</strong>ovascolare.<br />
Centro <strong>di</strong> Riferimento Regionale per l’Epidemiologia Clinica dell’Insufficienza Car<strong>di</strong>aca –<br />
Giornata sullo scompenso, Aula Magna Ospedale Cervello, 9/10/04, Palermo:<br />
- Epideliologia clinica dello scompenso.<br />
European Clinical Research Infracstructures Network (ECRIN) – Worskshop Nazionale, CIRM,<br />
28/10/04, Milano:<br />
- Gli stu<strong>di</strong> GISSI. Un modello <strong>di</strong> ricerca non-profit.<br />
American College of Car<strong>di</strong>ology. Annual Scientific Session, 7-10/11/04, New Orleans:<br />
- Valsartan and C-Reactive protein in chronic heart failure: Data from the Val-HeFT Trial.<br />
- Inactivation of JAM-A gene increases neutrophil entrapment in the heart microcirculation,<br />
aggravating no-reflow phenomenon and reperfusion injury in mice.<br />
- Total cholesterol, statin therapy, and survival in ischemic and nonischemic heart failure:<br />
Results from the Val-HeFT.<br />
- Are statins of clinical benefit in patients with established systolic chronic heart failure? A<br />
retrospective analysis of 5010 patients enrolled in Val-HeFT.<br />
- Progrostic value of endothelin peptides in heart failure: results from Val-HeFT.<br />
Ricercatori e Comitati Eitici, Museo Diocesano, 26-27/11/04, Milano:<br />
- Rischio e prevenzione: un modello <strong>di</strong> trial in me<strong>di</strong>cina generale.<br />
- Casi positivi e controversi – GISSI-HF: le con<strong>di</strong>zioni e i costi del non-profit.<br />
- Interventi non farmacologici (es: cellule staminali, ecc..).<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
AstraZeneca, Chiesi Farmaceutici, Fondazione Cariplo, Guidant Europe, Heart Care<br />
Foundation, ISS Programma Cellule Staminali, Kinetic Concepts Inc., Medtronics Italia S.p.A.,<br />
Novartis Pharma, Population Health Research Institute-Mc Master University, Pharmacia<br />
Upjohn, Roche Diagnostics, Sigma Tau, SPA Società Prodotti Antibiotici S.p.A., Takeda Italia<br />
S.p.A., Warren Institute<br />
95<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
Brines M, Grasso G, Fiordaliso F, Sfacteria A, Ghezzi P, Fratelli M, Latini R, Xie Q-w, Smart J, Su-Rick C-j, Pobre<br />
E, Diax D, Gomez D, Hand C, Coleman T, Ceriami A<br />
Erythropoietin me<strong>di</strong>ates tissues protection through an erythropoietin and common ß-subunit heteroreceptor<br />
Proc Natl Acad S <strong>2004</strong>; 101: 14907-14912<br />
Chimenti S, Carlo E, Masson S, Bai A, Latini R<br />
Myocar<strong>di</strong>al infarction. Animal models<br />
Methods Mol Med <strong>2004</strong>; 98: 217-225<br />
Cohn J N, Anand I S, Latini R, Masson S, Chiang Y T, Glazer R<br />
Aldosterone levels after angiotensin receptor blocker treatment. Reply to<br />
Circulation <strong>2004</strong>; 109: 182<br />
Di Stasi D, Bernasconi R, Marchioli R, Marfisi R M, Rossi G, Tognoni G, Tacconi M T<br />
Early mo<strong>di</strong>fications of fatty acid composition in plasma phospholipids, platelets and mononucleates of healthy<br />
volunteers after low doses of n-3 polynsatured fatty acids<br />
Eur J Clin Pharmacol <strong>2004</strong>; 60: 183-190<br />
Ferrario G, Aarden LA, Alkhimovitch O, Avanzini F, Cirrincione C, Galloni G, Marchesi S, Pellegrini A,<br />
Roccatagliata D, Roncaglioni MC, Russo TE.<br />
People’s perception of their overall coronary risk: an Italian experience.<br />
Ital Heart J <strong>2004</strong>; 5: 16-21<br />
Fiordaliso F, Bianchi R, Staszewsky L, Cuccovillo I, Doni M, Laragione T, Salio M, Savino C, Melucci S,<br />
Santangelo F, Scanziani E, Masson S, Ghezzi P, Latini R<br />
Antioxidant treatment attenuates hyperglycemia-induced car<strong>di</strong>omyocyte death in rats<br />
J Mol Cell Car<strong>di</strong>ol <strong>2004</strong>; 37: 959-968<br />
Franzosi M G, Tognoni G, Gar<strong>di</strong>nale E, INTERHEART Investigators<br />
Association of psychosocial risk factors with risk of acute myocar<strong>di</strong>al infarction in 11119 cases and 13648 controls<br />
from 52 countries (the INTERHEART study): case-control study<br />
Lancet <strong>2004</strong>; 364: 953-962<br />
Franzosi M G, Tognoni G, Gar<strong>di</strong>nale E, INTERHEART Investigators<br />
Effect of potentially mo<strong>di</strong>fiable risk factors associated with myocar<strong>di</strong>al infarction in 52 countries (the INTERHEART<br />
study): case-control study<br />
Lancet <strong>2004</strong>; 364: 937-952<br />
Latini R, Maggioni A P, Peri G, Gonzini L, Lucci D, Mocarelli P, Vago L, Pasqualini F, Signorini S, Soldateschi D,<br />
Tarli L, Schweiger C, Fresco C, Cecere R, Tognoni G, Mantovani A, LATIN Investigators<br />
Prognostic significance of the long pentraxin PTX3 in acute myocar<strong>di</strong>al infarction<br />
Circulation <strong>2004</strong>; 110: 2349-2354<br />
Latini R, Masson S, Anand I, Salio M, Hester A, Judd D, Barlera S, Maggioni A P, Tognoni G, Cohn J N, Val-HeFT<br />
Investigators<br />
The comparative prognostic value of plasma neurohormones at baseline in patients with heart failure enrolled in Val-<br />
HeFT<br />
Eur Heart J <strong>2004</strong>; 25: 292-299<br />
Latini R, Masson S, Staszewsky L, Maggioni A P<br />
Valsartan for the treatment of heart failure<br />
Expert Opin Pharmacother <strong>2004</strong>; 5: 181-193<br />
Longhini E, Fanari P, Giacomotti E, Palmulli P, Gabrione M, Gori D, Barlera S, Tognoni G, Salvadori A<br />
Lung function and methacholine responsiveness among adolescents in an air-polluted area<br />
Respiration <strong>2004</strong>; 71: 51-59<br />
Masson S, Staszewsky L, Annoni G, Carlo E, Arosio B, Bai A, Calabresi C, Martinoli E, Salio M, Fiordaliso F,<br />
Scanziani E, Rudolph A E, Latini R<br />
96<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Eplerenone, a selective aldosterone blocker, improves <strong>di</strong>astolic function in aged rats with small-to-moderate<br />
myocar<strong>di</strong>al infarction<br />
J Card Fail <strong>2004</strong>; 10: 433-441<br />
Messina E, De Angelis L, Frati G, Morrone S, Chimenti S, Fiordaliso F, Salio M, Battaglia M, Latronico MVG,<br />
Coletta M, Vivarelli E, Frati L, Cossu G, Giacomello A<br />
Isolation and expansion of adult car<strong>di</strong>ac stem cells from human and murine heart<br />
Circ Res <strong>2004</strong>; 95: 911-921<br />
Roncaglioni MC, Avanzini F, Roccatagliata D, Monesi L, Tamayo-Benitez D, Tombesi M, Caimi V, Longoni P,<br />
Lauri D, Barlera S, Tognoni G, on behalf of the Collaborative Group Risk and Prevention Study.<br />
How general practitioners perceive and grade the car<strong>di</strong>ovascular risk of their patients.<br />
Eur J Car<strong>di</strong>ovasc Prev Rehabil <strong>2004</strong>; 11: 233-238<br />
Sacco M, Pellegrini F, Roncaglioni MC, Avanzini F, Tognoni G, Nicolucci A, on behalf of the PPP-Primary<br />
Prevention Project.<br />
Aspirin resistance in <strong>di</strong>abetic patients. Reply to<br />
Diabetes Care <strong>2004</strong>; 27: 1246<br />
Tavazzi L, Maggioni A P, Tognoni G, GISSI<br />
Participation versus education: The GISSI story and beyond<br />
Am Heart J <strong>2004</strong>; 148: 222-229<br />
IRFMN<br />
Tavazzi L, Tognoni G, Franzosi M G, Latini R, Maggioni A P, Marchioli R, Nicolosi G L, Porcu M, GISSI-HF<br />
Investigators<br />
Rationale and design of the GISSI heart failure trial: A large trial to assess the effects of n-3 polyunsaturated fatty<br />
acids and rosuvastatin in symptomatic congestive heart failure<br />
Eur J Heart Fail <strong>2004</strong>; 6: 635-641<br />
Temporelli P L, Giannuzzi P, Nicolosi G L, Latini R, Franzosi M G, Gentile F, Tavazzi L, Maggioni A P, GISSI-3<br />
Echo Substudy Investigators<br />
Doppler-derived mitral deceleration time as a strong prognostic marker of left ventricular remodeling and survival<br />
after acute myocar<strong>di</strong>al infarction. Results of the GISSI-3 Echo Substudy<br />
J Am Coll Car<strong>di</strong>ol <strong>2004</strong>; 43: 1646-1653<br />
Tognoni G, Franzosi M G, Nicolis E, Barlera S, Specchia C, Chio<strong>di</strong>ni B, Crociati L, Ferrario L, PROCARDIS<br />
A trio family study showing association of the lymphotoxin-alfa N26 (804A) allele with coronary artery <strong>di</strong>sease<br />
Eur J Hum Genet <strong>2004</strong>; 12: 770-774<br />
Wong M, Staszewsky L, Latini R, Barlera S, Glazer R, Aknay N, Hester A, Anand I, Cohn J N<br />
Severity of left ventricular remodeling defines outcomes and response to therapy in heart failure: Valsartan Heart<br />
Failure Trial (Val-HeFT) echocar<strong>di</strong>ographic data<br />
J Am Coll Car<strong>di</strong>ol <strong>2004</strong>; 43: 2022-2027<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI DIVULGATIVE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Anselmi M, Caicedo F, Caicedo O, Chumo A, Mina S, Peralta P, Pran<strong>di</strong> R, Valdez J, Avanzini F.<br />
Una comunità del sud del mondo partecipa al controllo dell’ipertensione arteriosa: i protagonisti raccontano.<br />
Assistenza Infermieristica e Ricerca <strong>2004</strong>; 23: 5-13<br />
Avanzini F, Anselmi M.<br />
L’epidemia delle malattie car<strong>di</strong>ovascolari nei paesi in via <strong>di</strong> sviluppo.<br />
Assistenza Infermieristica e Ricerca <strong>2004</strong>; 23: 48-52<br />
Borrelli G, Ferri B, Flamminio A V, Marfisi R M, Marchioli R, Pera C, Polidoro A, Scarano M, Tognoni G<br />
Da cavie a soggetti? Il punto <strong>di</strong> vista <strong>di</strong> chi ha partecipato al GISSI-Prevenzione<br />
Giornale Italiano Farmacia Clinica <strong>2004</strong>; 18: 61-69<br />
97<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Caimi V, Roncaglioni MC, a nome del Gruppo Collaborativi Rischio e Prevenzione<br />
Parte lo stu<strong>di</strong>o Rischio & Prevenzione (R&P). Ecco un estratto del protocollo e le in<strong>di</strong>cazioni utili per aderire alla<br />
ricerca.<br />
Occhio Clinico <strong>2004</strong>; 10: 39-42<br />
Montalvo G, Marquez M, Moreira JM, Armani D, Avanzini F, Tognoni G.<br />
Funzionalità e accuratezza degli sfigmomanometri in uso negli ospedali e negli ambulatori. Indagine nella regione <strong>di</strong><br />
Esmeraldas (Ecuador).<br />
Ricerca & Pratica <strong>2004</strong>; 116: 49-58<br />
Tognoni G<br />
Direttiva Europea sulla sperimentazione e sulla informazione sui farmaci<br />
Informazioni sui Farmaci <strong>2004</strong>; 28: 1-2<br />
Tognoni G<br />
ReP come guida alla lettura della normativa sulla sperimentazione in me<strong>di</strong>cina generale<br />
Ricerca & Pratica <strong>2004</strong>; n. 117: 94-101<br />
98<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Clinica Car<strong>di</strong>ovascolare<br />
IRFMN<br />
Mesoangioblasti, cellule staminali <strong>di</strong> origine midollare, fibroblasti e cellule<br />
staminali <strong>di</strong> origine endoteliale nel topo dopo occlusione dell'arteria<br />
coronarica. Efficacia comparativa a lungo termine della funzione<br />
ventricolare sinistra, perfusione collaterale del miocar<strong>di</strong>o ischemico,<br />
rigenerazione del miocar<strong>di</strong>o<br />
Numerosi stu<strong>di</strong> hanno <strong>di</strong>mostrato che cellule autologhe e omologhe <strong>di</strong> <strong>di</strong>fferente origine<br />
possono riparare il miocar<strong>di</strong>o danneggiato in seguito a un insulto ischemico acuto. La resa in<br />
termini <strong>di</strong> colonizzazione dell'area danneggiata e <strong>di</strong> sostituzione delle cellule irreversibilmente<br />
danneggiate varia molto da stu<strong>di</strong>o a stu<strong>di</strong>o, oscillando dal 63% a meno dell'1%.<br />
Il lavoro pubblicato su mesoangioblasti <strong>di</strong> topo trapiantati in topi dopo legatura della coronaria<br />
sinistra ha <strong>di</strong>mostrato che i mesoangioblasti sono in grado <strong>di</strong> ridurre significativamente il danno<br />
da infarto sperimentale, in modo simile ai precursori emopoietici midollari (più noti). A<br />
<strong>di</strong>fferenza dei precursori midollari i mesoangioblasti sono potenzialmente interessanti perché (a)<br />
più facilmente espan<strong>di</strong>bili e (b) ottenibili da biopsia del muscolo scheletrico nell’uomo.<br />
Nuovi stu<strong>di</strong> su potenziale riparativo <strong>di</strong> <strong>di</strong>fferenti tipi cellulari <strong>di</strong> origine<br />
murina e umana nell’infarto sperimentale nel topo<br />
A seguito degli stu<strong>di</strong> completati sui mesoangioblasti, sono <strong>di</strong> recente iniziati altri stu<strong>di</strong><br />
sperimentali:<br />
1. confronto su <strong>di</strong>fferenziazione e riduzione <strong>di</strong> danno da infarto sperimentale <strong>di</strong> 2 linee cellulari<br />
murine che <strong>di</strong>fferiscono per il recettore <strong>di</strong> tipo 1 del fattore <strong>di</strong> crescita dei fibroblasti (FGFR), un<br />
recettore essenziale nello sviluppo embrionale, nella crescita e nel rimodellamento dei tessuti <strong>di</strong><br />
origine mesodermica. In vitro, le cellule dotate <strong>di</strong> recettore (+/-) danno origine nel 90% dei casi<br />
a car<strong>di</strong>omiociti pulsanti, mentre quelle prive (-/-) solo nel 10%. Scopo dello stu<strong>di</strong>o è confrontare<br />
due tipi cellulari identici, a parte il destino a car<strong>di</strong>omiociti, nel riparare il danno; in altre parole,<br />
è necessario/utile che una cellula trapiantata abbia un destino car<strong>di</strong>omiocitario per ottimizzare il<br />
beneficio?<br />
2. Lo scenario più attraente <strong>di</strong> terapia cellulare car<strong>di</strong>aca è quello teoricamente basato su<br />
meto<strong>di</strong>che <strong>di</strong> autotrapianto <strong>di</strong> cellule miocar<strong>di</strong>che con potenziale rigenerativo (“staminali<br />
car<strong>di</strong>ache”). Si intende in<strong>di</strong>care con questo termine una procedura che implica il prelievo dal<br />
cuore del paziente <strong>di</strong> un frammento miocar<strong>di</strong>co seguito dall’ isolamento e la successiva<br />
espansione in vitro <strong>di</strong> cellule staminali e progenitori car<strong>di</strong>aci derivati da questo. Ottenuta una<br />
adeguata quantità <strong>di</strong> cellule, esse verrebbero reimpiantate nel cuore del paziente, eventualmente<br />
previo <strong>di</strong>fferenziamento in vitro. I vantaggi <strong>di</strong> questa procedura sarebbero: la mancanza <strong>di</strong><br />
rigetto, l’utilizzo <strong>di</strong> cellule già in<strong>di</strong>rizzate in senso miocar<strong>di</strong>co e l’ipotizzabile assenza <strong>di</strong> liste <strong>di</strong><br />
attesa per il trapianto. Gli svantaggi potrebbero essere: il tempo necessario per l’espansione in<br />
vitro <strong>di</strong> cellule car<strong>di</strong>ache, i costi elevati <strong>di</strong> tale procedura, l’ impiego <strong>di</strong> cellule derivate da un<br />
organo scompensato (quin<strong>di</strong>, possibilmente, a potenziale proliferativo/<strong>di</strong>fferenziativo limitato)<br />
e, non ultima, la necessità <strong>di</strong> prelevare frammenti <strong>di</strong> tessuto a pazienti con performance car<strong>di</strong>aca<br />
già compromessa. La possibilità <strong>di</strong> superare questi impe<strong>di</strong>menti potrebbe essere data<br />
dall’impiego <strong>di</strong> cellule autologhe provenienti da fonti alternative più accessibili. Ciò implica che<br />
miocar<strong>di</strong>ociti funzionali possano essere generati da cellule primitive <strong>di</strong> origine non car<strong>di</strong>aca. In<br />
questo progetto ci si propone <strong>di</strong> paragonare fra loro cellule multipotenti derivate da <strong>di</strong>fferenti<br />
organi e tessuti (cuore, midollo osseo e fegato) per la loro capacità <strong>di</strong> rigenerare miocar<strong>di</strong>o<br />
funzionale in un modello murino <strong>di</strong> infarto acuto del miocar<strong>di</strong>o. Dovremo trapiantare cellule <strong>di</strong><br />
99<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
origine umana in topi immunodeficienti per poi valutare gli effetti con ecocar<strong>di</strong>ografia e istomorfometria.<br />
Qualora cellule derivate da <strong>di</strong>fferenti sorgenti si <strong>di</strong>mostrassero equipotenti nella<br />
capacità rigenerativa d’organo, si potrebbe attuare una terapia cellulare privilegiando come<br />
fonte quella più facilmente accessibile.<br />
Sulla stessa linea del punto 2, si stanno sperimentando cellule derivate da biopsie miocar<strong>di</strong>che<br />
(atrio o ventricolo) umane, espanse in vitro e poi trapiantate nella zona circostante l’infarto in<br />
topi immunodeficienti (SCID/bg) in collaborazione con l’<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Anatomia Patologica<br />
dell’Università <strong>di</strong> U<strong>di</strong>ne (CA Beltrami).<br />
Caratterizzazione del fenotipo knock-out per Junction Adhesion Molecule<br />
1 (JAM-1) in un modello murino sperimentale <strong>di</strong> ischemia car<strong>di</strong>aca e<br />
riperfusione<br />
JAM-1 è stata la prima proteina identificata <strong>di</strong> questa famiglia nelle giunzioni aderenti tra<br />
cellule endoteliali. JAM sembra avere un ruolo nel modulare il passaggio <strong>di</strong> cellule dal sangue<br />
ai tessuti. Lo stu<strong>di</strong>o è stato <strong>di</strong>segnato per verificare se l’assenza <strong>di</strong> JAM-1 (a) mo<strong>di</strong>fichi il<br />
numero <strong>di</strong> leucociti infiltranti il miocar<strong>di</strong>o nelle prime ore dopo ischemia seguita da riperfusione<br />
e (b) influenzi l’entità del danno conseguente. Sembra che non ci siano marcate <strong>di</strong>fferenze nelle<br />
<strong>di</strong>mensioni del danno (area dell’infarto), mentre si osservano meno leucociti polimorfonucleati<br />
nel miocar<strong>di</strong>o dei topi geneticamente privi <strong>di</strong> JAM-1. Questo progetto si inserisce in un vasto<br />
programma collaborativo europeo (VI programma quadro, coor<strong>di</strong>natrice E. Dejana, European<br />
Vascular Genomics Network, WP 14 and 15) che si prefigge <strong>di</strong> valutare i meccanismi e gli<br />
effetti della angiogenesi nel riparare il danno ischemico del muscolo car<strong>di</strong>aco e <strong>di</strong> quello<br />
scheletrico.<br />
Effetti car<strong>di</strong>oprotettivi <strong>di</strong> un analogo sintetico dell’eritropoietina in un<br />
modello murino sperimentale <strong>di</strong> ischemia car<strong>di</strong>aca e riperfusione<br />
L'eritropoietina umana ricombinante (EPO) è un fattore <strong>di</strong> crescita essenziale che promuove la<br />
sopravvivenza, proliferazione e <strong>di</strong>fferenziazione <strong>di</strong> cellule progenitrici eritroi<strong>di</strong>. In un modello<br />
<strong>di</strong> ischemia e riperfusione car<strong>di</strong>aca nel ratto abbiamo <strong>di</strong>mostrato che EPO ha migliorato<br />
significativamente la funzione ventricolare sinistra dopo 1 e 12 settimane <strong>di</strong> riperfusione. Il<br />
beneficio osservato potrebbe essere spiegato parzialmente da una minore per<strong>di</strong>ta <strong>di</strong> miociti<br />
car<strong>di</strong>aci e da una attenuazione ipertrofica. La protezione in vitro da apoptosi indotta da ipossia<br />
potrebbe spiegare i benefici osservati i quali suggeriscono un possibile ruolo terapeutico<br />
dell'EPO nell'infarto miocar<strong>di</strong>co acuto. Scopo dello stu<strong>di</strong>o in corso è <strong>di</strong> verificare se la<br />
protezione con EPO è da attribuire almeno in parte a un aumento <strong>di</strong> eritrociti, oppure no.<br />
Abbiamo quin<strong>di</strong> riprodotto il <strong>di</strong>segno sperimentale con un nuovo composto, un derivato<br />
carbamilato <strong>di</strong> EPO (CEPO), che sembra dare gli stessi risultati benefici <strong>di</strong> EPO, aprendo nuove<br />
vie alla car<strong>di</strong>oprotezione selettiva, senza aumento della eritropoiesi, non sempre desiderata.<br />
Stu<strong>di</strong>o del ruolo della PTX3 me<strong>di</strong>ante topi ko in due modelli animali <strong>di</strong><br />
infarto miocar<strong>di</strong>co acuto e <strong>di</strong> ipertrofia ventricolare sinistra<br />
Mentre PTX3 è stata <strong>di</strong>mostrata avere un ruolo non ridondante nella riproduzione e nella<br />
resistenza a infezioni fungine (Aspergillus fumigatus), il suo ruolo in ambito car<strong>di</strong>ovascolare<br />
non è stato ancora ben definito, anche se risulta essere un marcatore prognostico in<strong>di</strong>pendente<br />
dopo infarto miocar<strong>di</strong>co acuto nell’uomo. Si cercherà <strong>di</strong> valutare eventuali funzioni <strong>di</strong> PTX3<br />
me<strong>di</strong>ante l’uso <strong>di</strong> topi deficienti della proteina (knock-out), sottoposti a legatura della coronaria<br />
sinistra e successiva riperfusione oppure a stenosi chirurgica della aorta ascendente. Il confronto<br />
con topi che possiedono PTX3 (wild type) dovrebbe rivelare eventuali <strong>di</strong>fferenze fenotipiche<br />
attraverso cui inferire possibili funzioni <strong>di</strong> PTX3.<br />
100<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Modulazione farmacologica dell’apoptosi dei car<strong>di</strong>omiociti in ratti<br />
<strong>di</strong>abetici ipertesi<br />
L’ipertensione e il <strong>di</strong>abete sono i fattori <strong>di</strong> rischio per l’insorgenza e il peggioramento <strong>di</strong><br />
malattie car<strong>di</strong>ovascolari. In pazienti <strong>di</strong>abetici e ipertesi, il rischio <strong>di</strong> morte car<strong>di</strong>ovascolare e <strong>di</strong><br />
danno d’organo è maggiore rispetto ai pazienti con solo <strong>di</strong>abete o ipertensione. Inoltre, la<br />
funzione car<strong>di</strong>aca risulta maggiormente compromessa in ratti <strong>di</strong>abetici ipertesi rispetto a animali<br />
<strong>di</strong>abetici o ipertesi. L’obiettivo principale <strong>di</strong> questo progetto è <strong>di</strong> confrontare l’apoptosi dei<br />
car<strong>di</strong>omiociti nel ventricolo sinistro <strong>di</strong> ratti normotesi con quella <strong>di</strong> ratti geneticamente ipertesi<br />
in un modello <strong>di</strong> <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 1 indotto da streptozotocina. Un secondo obiettivo è <strong>di</strong> valutare<br />
me<strong>di</strong>ante l’uso <strong>di</strong> inibitori farmacologici specifici, il ruolo <strong>di</strong> <strong>di</strong>versi sistemi neuro-ormonali<br />
(sistema renina-angiotensina, sistema beta-adrenergico) o delle specie reattive dell’ossigeno nel<br />
determinare l’apoptosi. Risultati preliminari in<strong>di</strong>cano che l’apoptosi dei car<strong>di</strong>omiociti è<br />
maggiore nei ratti <strong>di</strong>abetici ipertesi rispetto ai ratti normotesi, e che l’inibizione dei sistemi<br />
renina-angiotensina e beta-adrenergico riduce significativamente la morte dei car<strong>di</strong>omiociti.<br />
GISSI-HF. Sottoprogetto Bioumorale (G105-S2) e microalbuminuria<br />
Lo stu<strong>di</strong>o clinico GISSI-HF (arruolamento dei pazienti in atto) si propone <strong>di</strong> valutare se due<br />
trattamenti (un inibitore dell’idrossimetil-glutaril-CoA reduttasi o statina e gli n-3 PUFA) sono<br />
in grado <strong>di</strong> migliorare la prognosi dei pazienti con insufficienza car<strong>di</strong>aca <strong>di</strong> ogni eziologia, con<br />
o senza riduzione della frazione <strong>di</strong> eiezione del ventricolo sinistro. Il sottoprogetto bioumorale è<br />
sud<strong>di</strong>viso in 4 aree <strong>di</strong> ricerca specifiche, con lo scopo ultimo <strong>di</strong> ottenere risultati utili per meglio<br />
comprendere la fisiopatologia dello scompenso car<strong>di</strong>aco e gli effetti dei farmaci in stu<strong>di</strong>o.<br />
Campioni ematici vengono raccolti all’ingresso dello stu<strong>di</strong>o e dopo tre mesi per misurare gli<br />
aci<strong>di</strong> grassi plasmatici, il profilo neuroormonale dei pazienti (in particolare la concentrazione<br />
plasmatica del peptide natriuretico cerebrale, BNP) e in<strong>di</strong>catori circolanti dell’infiammazione<br />
(proteina C reattiva e PTX3) e del catabolismo del collagene (PIIINP), in circa 1000 pazienti. In<br />
un gruppo più ristretto <strong>di</strong> pazienti (circa 60) il numero <strong>di</strong> progenitori endoteliali circolanti verrà<br />
posto in relazione con l'eziologia dello scompenso e con i trattamenti dello stu<strong>di</strong>o. Dati<br />
preliminari sul profilo lipi<strong>di</strong>co e sui livelli <strong>di</strong> BNP <strong>di</strong> questi pazienti, ottenuti in collaborazione<br />
con il Laboratorio <strong>di</strong> Biochimica e Chimica delle Proteine (R. Bernasconi e M.T. Tacconi), sono<br />
<strong>di</strong>sponibili. Sono pure stati misurati i progenitori endoteliali circolanti nei primi 50 pazienti,<br />
stu<strong>di</strong>ati in collaborazione con il laboratorio <strong>di</strong> E. Dejana.<br />
NT-proBNP, troponina T nello stu<strong>di</strong>o Val-HeFT<br />
Lo stu<strong>di</strong>o Val-HeFT (Valsartan Heart Failure Study) era uno stu<strong>di</strong>o clinico internazionale,<br />
randomizzato, il cui scopo era <strong>di</strong> valutare l'efficacia del valsartan, un antagonista recettoriale <strong>di</strong><br />
tipo I dell'angiotensina II in 5010 pazienti con insufficienza car<strong>di</strong>aca sintomatica. Lo stu<strong>di</strong>o ha<br />
<strong>di</strong>mostrato una significativa riduzione del 13% dell'end-point combinato <strong>di</strong> mortalità e morbilità<br />
(Cohn and Tognoni, New England J Med 2001; 345: 1667-75). Alla randomizzazione e al<br />
follow-up (me<strong>di</strong>ana <strong>di</strong> 23 mesi) sono stati raccolti e analizzati i campioni plasmatici nella<br />
maggior parte dei pazienti. L'obiettivo <strong>di</strong> questo stu<strong>di</strong>o era <strong>di</strong> determinare i livelli plasmatici<br />
pro-Brain Natriuretic Peptide (NT-proBNP, un marcatore della <strong>di</strong>latazione del ventricolo<br />
sinistro) e <strong>di</strong> troponina T (Tn-T, un marcatore <strong>di</strong> danno miocar<strong>di</strong>co), nei pazienti Val-HeFT.<br />
NT-proBNP, Tn-T e hsTn-T (misurata con un metodo nuovo ad alta sensibilità) sono stati<br />
misurati in circa 8000 campioni <strong>di</strong> 2550 pazienti me<strong>di</strong>ante meto<strong>di</strong> ELISA su piattaforma<br />
Elecsys (Roche Diagnostics) nel Laboratorio <strong>di</strong> Endocrinologia dell'Ospedale Luigi Sacco <strong>di</strong><br />
Milano (T. Vago).<br />
101<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Gli effetti anti-rimodellamento del blocco dei recettori dell'aldosterone con<br />
canrenone nell'insufficienza car<strong>di</strong>aca lieve-moderata: lo stu<strong>di</strong>o AREA IN-<br />
CHF<br />
Lo stu<strong>di</strong>o RALES ha <strong>di</strong>mostrato che lo spironolattone, un antagonista recettoriale<br />
dell'Aldosterone, riduce il rischio <strong>di</strong> morbilità e mortalità sia nello scompenso car<strong>di</strong>aco<br />
progressivo, sia nella morte improvvisa in pazienti con scompenso car<strong>di</strong>aco moderato o severo.<br />
Gli antagonisti dell'aldosterone potrebbero essere efficaci in quanto contrastano gli effetti<br />
dell'aldosterone sulla ritenzione <strong>di</strong> so<strong>di</strong>o, sulla per<strong>di</strong>ta <strong>di</strong> potassio e magnesio, sull'attivazione<br />
simpatica, la compliance vascolare e la fibrosi car<strong>di</strong>aca. Nell'AREA IN-CHF, uno stu<strong>di</strong>o<br />
multicentrico, randomizzato e controllato con placebo, è stato valutato l'effetto del canrenone,<br />
un metabolita dello spironolattone, in pazienti con scompenso car<strong>di</strong>aco moderato (n=400 per<br />
gruppo) in termini <strong>di</strong> rimodellamento del ventricolo sinistro e <strong>di</strong> end-point combinato <strong>di</strong><br />
mortalità e morbilità. Il <strong>di</strong>segno dello stu<strong>di</strong>o prevede un prelievo <strong>di</strong> sangue a tutti i pazienti alla<br />
randomizzazione e dopo 6 mesi per determinare la concentrazione plasmatica <strong>di</strong> aldosterone<br />
(solo all'ingresso), del peptide natriuretico cerebrale e <strong>di</strong> un marker circolante del turnover del<br />
collagene (peptide N-terminale del collagene III). Questi fattori bioumorali saranno dosati<br />
centralmente dal Dipartimento <strong>di</strong> Ricerca Car<strong>di</strong>ovascolare e produrranno informazioni<br />
sull'effetto del canrenone su questi in<strong>di</strong>catori e sulle loro relazioni con l'outcome dello stu<strong>di</strong>o.<br />
L'arruolamento è in atto.<br />
PTX3, una nuova pentraxina lunga, e la proteina C-reattiva nei pazienti<br />
con insufficienza car<strong>di</strong>aca cronica e in pazienti con fibrillazione atriale<br />
PTX3 è una nuova proteina espressa con particolare intensità dall'endotelio stimolato del letto<br />
coronarico. I suoi livelli circolanti aumentano dopo infarto miocar<strong>di</strong>co, ma non è mai stata<br />
stu<strong>di</strong>ata nella insufficienza car<strong>di</strong>aca. PTX3 potrebbe essere coinvolta in una complessa risposta<br />
immunitaria che secondo recenti stu<strong>di</strong> potrebbe contribuire alla progressione della insufficienza<br />
car<strong>di</strong>aca.al trapianto car<strong>di</strong>aco e potenzialmente essere un in<strong>di</strong>catore <strong>di</strong> rigetto acuto, risposta<br />
car<strong>di</strong>ovascolare al rigetto e all'ischemia durante il trapianto car<strong>di</strong>aco. PTX3 e un’altra<br />
pentraxina, la proteina C-reattiva (PCR) verranno dosati in circa 1200 pazienti con insufficienza<br />
car<strong>di</strong>aca e in circa 400 pazienti con fibrillazione striale, arruolati in stu<strong>di</strong> multicentrici,<br />
rispettivamente CandHeart e GISSI-AF.<br />
Sottoprogetto ecocar<strong>di</strong>ografico e bioumorale dello stu<strong>di</strong>o GISSI-AF<br />
Nell’ambito dello stu<strong>di</strong>o GISSI-AF (ve<strong>di</strong>), è stato pianificato un sottoprogetto che si propone <strong>di</strong><br />
stu<strong>di</strong>are eventuali meccanismi neurormonali e <strong>di</strong> rimodellamento strutturale del cuore<br />
responsabili della ricorrenza e gravità della fibrillazione atriale (FA).In circa un terzo dei<br />
pazienti arruolati nello stu<strong>di</strong>o (400 pazienti in circa 40 centri) verranno eseguiti 3 esami<br />
ecocar<strong>di</strong>ografici seriati (randomizzazione, 6 mesi e 1 anno) e altrettanti prelievi ematici.<br />
Me<strong>di</strong>ante ecocar<strong>di</strong>ografia verranno misurate le <strong>di</strong>mensioni dell’atrio sinistro e del ventricolo,<br />
mentre nel plasma verrano misurati BNP, endotelina-1 e marcatori dell’infiammazione, PCR,<br />
PTX3 (ve<strong>di</strong>) e IL-6. Oltre a fare luce sulla fisiopatologia della FA, l’aritmia più <strong>di</strong>ffusa nel<br />
paziente anziano, questo sottoprogetto si propone <strong>di</strong> spiegare eventuali effetti benefici del<br />
farmaco in stu<strong>di</strong>o, il valsartan, un bloccante dei recettori <strong>di</strong> tipo 1 della angiotensina II.<br />
Stu<strong>di</strong>o CandHeart, effetti del candesartan su BNP e funzione ventricolare<br />
sinistra in pazienti con insufficienza car<strong>di</strong>aca sintomatica<br />
Il candesartan, un bloccante dei recettori <strong>di</strong> tipo 1 della angiotensina II, riduce<br />
significativamente la morbi-mortalità nella insufficienza car<strong>di</strong>aca, come <strong>di</strong>mostrato dagli stu<strong>di</strong><br />
CHARM. Nel CandHeart ci si propone <strong>di</strong> meglio definire gli effetti del candesartan su un<br />
marcatore specifico e sensibile <strong>di</strong> gravità e prognosi della insufficienza car<strong>di</strong>aca, il BNP e sul<br />
rimodellamento del ventricolo sinistro. Circa 1300 pazienti con insufficienza car<strong>di</strong>aca<br />
102<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
sintomatica e qualsiasi valore <strong>di</strong> frazione <strong>di</strong> eiezione del ventricolo sinistro verranno<br />
randomizati in 115 centri circa a candesartan o no-candesartan, con un <strong>di</strong>segno a 2 bracci<br />
paralleli, in aperto. I pazienti verrano seguiti con visite seriate per 1 anno. Le misure bioumorali<br />
e ecocar<strong>di</strong>ografiche verranno eseguite alla randomizzazione, dopo 3 e 12 mesi (fine stu<strong>di</strong>o).<br />
Stu<strong>di</strong>o prono/supino 2, effetti della pronazione prolungata sulla<br />
sopravvivenza nella insufficienza respiratoria acuta grave (ARDS)<br />
Questo stu<strong>di</strong>o è la continuazione del precedente stu<strong>di</strong>o Prono/Supino che aveva <strong>di</strong>mostrato in<br />
400 pazienti con ARDS che la pronazione per 6 ore nei primi 10 giorni migliorava i valori<br />
emogasanalitici, ma non riduceva la mortalità, che per questa patologia si aggira sul 50% nei<br />
primi 6 mesi. Era questo uno dei pochi stu<strong>di</strong> multicentrici in Terapia Intensiva condotti<br />
interamente in Italia. Lo stesso gruppo facente capo all’<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Anestesia e Rianimazione del<br />
Policlinico <strong>di</strong> Milano (L. Gattinoni) ha avviato un nuovo stu<strong>di</strong>o che si prefigge <strong>di</strong> valutare<br />
l’effetto <strong>di</strong> un protocollo <strong>di</strong> pronazione prolungata da 6 a 20 ore giornaliere in pazienti con<br />
ARDS più grave (sottogruppo in cui era stata <strong>di</strong>mostrata una tendenza della pronazione a<br />
migliorare la sopravvivenza nello stu<strong>di</strong>o precedente). Sono stati arruolati 60 pazienti in circa 10<br />
centri e si prevede <strong>di</strong> arruolare almeno 300 pazienti nel prossimo anno.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Valutazione Clinica dei Farmaci<br />
PROCARDIS: Stu<strong>di</strong>o del genoma per identificare geni <strong>di</strong> suscettibilità alla<br />
malattia coronarica<br />
Il PROCARDIS si propone <strong>di</strong> in<strong>di</strong>viduare nuovi geni coinvolti nella malattia coronarica, con un<br />
<strong>di</strong>segno <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o oggi riconosciuto come il più efficiente nell'ambito dell' epidemiologia<br />
genetica per una genotipizzazione complessiva: l'analisi genotipica dei "fratelli affetti da eventi"<br />
(affected sibling-pairs, ASPs), che consente <strong>di</strong> valutare se qualcuno dell'ampio numero <strong>di</strong><br />
marker misurati su tutti i cromosomi venga trasmesso tra congiunti affetti all'interno delle<br />
famiglie con una frequenza maggiore <strong>di</strong> quella attesa in base al calcolo delle probabilità. Questi<br />
marker potrebbero essere "linked" ai geni <strong>di</strong> suscettibilità alla malattia in determinate regioni<br />
cromosomiali, che possono quin<strong>di</strong> essere isolate. Oggi i progressi tecnologici consentono <strong>di</strong><br />
effettuare stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> screening su tutto il genoma in un numero <strong>di</strong> famiglie sufficientemente<br />
grande da poter garantire una buona probabilità <strong>di</strong> identificazione dei geni correlati a una<br />
malattia coronarica precoce.<br />
Una stima "conservativa" della probabilità <strong>di</strong> produrre risultati innovativi e affidabili per quanto<br />
riguarda geni capaci <strong>di</strong> contribuire in<strong>di</strong>vidualmente per una frazione del 10-15% al profilo<br />
complessivo del rischio <strong>di</strong> malattia coronarica, porta ad una <strong>di</strong>mensione del campione intorno<br />
alle 2000 coppie <strong>di</strong> ASPs portatrici <strong>di</strong> un evento car<strong>di</strong>ovascolare coronarico prima dei 65 anni.<br />
La possibilità <strong>di</strong> includere nella popolazione anche i genitori (è evidente che il limite principale<br />
è la probabilità della loro sopravvivenza) permette <strong>di</strong> combinare l'approccio degli ASPs con<br />
altre modalità <strong>di</strong> analisi della trasmissione familiare <strong>di</strong> rischio genetico, specificamente con la<br />
tecnica TDT (transmission <strong>di</strong>sequilibrium test) o altre strategie <strong>di</strong> verifica <strong>di</strong> associazione già<br />
<strong>di</strong>sponibili o che <strong>di</strong>verranno tecnicamente praticabili.<br />
Il PROCARDIS è condotto da un Consorzio <strong>di</strong> ricerca, il cui programma è stato supportato dal<br />
5th Framework Programme della Comunità Europea e da un grant <strong>di</strong> AstraZeneca. Il Consorzio<br />
<strong>di</strong> ricerca è così costituito: Gruppo Italiano per lo Stu<strong>di</strong>o della Sopravvivenza nell'Infarto<br />
(gruppo GISSI, sostenuto dalla collaborazione tra l'<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri e l'ANMCO); Clinical<br />
Trial Service Unit, Università <strong>di</strong> Oxford (gruppo ISIS); Institute of Clinical Chemistry and<br />
Laboratory Me<strong>di</strong>cine and Institute for Arteriosclerosis Research, Università <strong>di</strong> Münster;<br />
Institute for Atherosclerosis Research, Karolinska Hospital, Stoccolma; Wellcome Trust of<br />
Human Genetics, Car<strong>di</strong>ovascolar Me<strong>di</strong>cine Department, Università <strong>di</strong> Oxford.<br />
Il progetto ha concluso la fase <strong>di</strong> arruolamento delle famiglie da parte dei 4 centri <strong>di</strong> ricerca<br />
103<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
europei afferenti al Consorzio. Sono state reclutate nello stu<strong>di</strong>o più <strong>di</strong> 2000 coppie <strong>di</strong> ASPs e<br />
più <strong>di</strong> 1200 famiglie analizzabili per il TDT. In Italia il reclutamento è stato effettuato<br />
inizialmente utilizzando il database degli stu<strong>di</strong> GISSI-3 e GISSI-Prevenzione e successivamente<br />
in modo prospettico in 44 centri <strong>di</strong> car<strong>di</strong>ologia, con un totale <strong>di</strong> 765 famiglie reclutate. Per tutte<br />
la famiglie è stata completata la genotipizzazione. L’analisi <strong>di</strong> linkage è in corso.<br />
GISSI-HF. Stu<strong>di</strong>o clinico <strong>di</strong> gran<strong>di</strong> <strong>di</strong>mensioni che valuta gli effetti <strong>di</strong> n-3<br />
PUFA e <strong>di</strong> Rosuvastatina sulla mortalità e morbi<strong>di</strong>tà dei pazienti con<br />
scompenso car<strong>di</strong>aco sintomatico<br />
Il GISSI (Gruppo Italiano per lo Stu<strong>di</strong>o della Sopravvivenza nell'Insufficienza car<strong>di</strong>aca) è una<br />
collaborazione tra l'<strong>Istituto</strong> "<strong>Mario</strong> Negri" e l'ANMCO (Associazione Nazionale Me<strong>di</strong>ci<br />
Car<strong>di</strong>ologi Ospedalieri) che opera da oltre 15 anni nel campo della ricerca car<strong>di</strong>ovascolare. Lo<br />
stu<strong>di</strong>o GISSI-HF è una sperimentazione clinica (la quinta condotta dal GISSI) che si propone <strong>di</strong><br />
verificare gli effetti <strong>di</strong> due trattamenti, il primo con n-3 PUFA (aci<strong>di</strong> grassi polinsaturi) e il<br />
secondo con rosuvastatina in pazienti affetti da scompenso car<strong>di</strong>aco che già ricevono i<br />
trattamenti raccomandati per questa malattia.<br />
Il GISSI-HF è uno stu<strong>di</strong>o prospettico, multicentrico, in doppio cieco, controllato con placebo, in<br />
cui pazienti con evidenza clinica <strong>di</strong> scompenso car<strong>di</strong>aco <strong>di</strong> qualsiasi eziologia e senza limiti <strong>di</strong><br />
età vengono randomizzati a<br />
- R1 n-3 PUFA o placebo (Randomizzazione 1);<br />
- R2 rosuvastatina o placebo (Randomizzazione 2).<br />
L'obiettivo principale dello stu<strong>di</strong>o è <strong>di</strong> <strong>di</strong>mostrare che una terapia a lungo termine con (a) n-3<br />
PUFA, (b) rosuvastatina riduce la mortalità totale, e la mortalità totale o il ricovero in ospedale<br />
per problemi car<strong>di</strong>ovascolari, rispetto ai corrispondenti gruppi placebo.<br />
Verranno reclutati 7000 pazienti per verificare l'efficacia <strong>di</strong> n-3 PUFA. Di questi, 5250<br />
entreranno anche nella parte R2 dello stu<strong>di</strong>o che valuta l'efficacia <strong>di</strong> rosuvastatina.<br />
Secondo la caratteristica degli stu<strong>di</strong> GISSI, anche il GISSI-HF è uno stu<strong>di</strong>o pragmatico, su<br />
pazienti quanto più possibile rappresentativi della realtà clinica quoti<strong>di</strong>ana.<br />
La randomizzazione nello stu<strong>di</strong>o è iniziata nel settembre 2002. Al 31 <strong>di</strong>cembre <strong>2004</strong> risultano<br />
arruolati 6700 pazienti da 364 Centri <strong>di</strong> Car<strong>di</strong>ologia. E’ previsto un follow-up <strong>di</strong> almeno <strong>di</strong> 3<br />
anni.<br />
Contestualmente al trial, vengono condotti vari sottoprogetti per cercare <strong>di</strong> comprendere il<br />
meccanismo d’azione dei trattamenti sperimentali:<br />
- rimodellamento ventricolare (ecocar<strong>di</strong>ografia);<br />
- bioumorale (neurormoni, marker dell’infiammazione, progenitori endoteliali circolanti, aci<strong>di</strong><br />
grassi liberi circolanti);<br />
- aritmie e attività simpatica (monitoraggio Holter);<br />
- funzione cognitiva;<br />
- tolleranza allo sforzo;<br />
- carico assistenziale;<br />
- marker genetici.<br />
Il progetto è condotto in collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Clinica<br />
Car<strong>di</strong>ovascolare.<br />
Stu<strong>di</strong>o GISSI-HF: Sottoprogetto genetico<br />
Si conosce ancora poco circa il ruolo dei fattori genetici nell'eziologia, evoluzione, prognosi e<br />
risposta al trattamento dello scompenso car<strong>di</strong>aco, con l'eccezione <strong>di</strong> alcune forme originate da<br />
specifiche car<strong>di</strong>omiopatie. Lo scompenso car<strong>di</strong>aco presenta <strong>di</strong>fferenti eziologie, tra le quali<br />
l'ischemica rappresenta più del 50%. Tra i geni can<strong>di</strong>dati nella car<strong>di</strong>opatia ischemica, i più<br />
coinvolti sembrano quelli implicati nel metabolismo dei lipi<strong>di</strong>. Recente interesse suscitano<br />
anche i geni coinvolti nei processi infiammatori.<br />
104<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Il sottoprogetto genetico dello stu<strong>di</strong>o GISSI-HF (ve<strong>di</strong> sezione ad esso relativa) offre<br />
l'opportunità <strong>di</strong> migliorare le nostre conoscenze circa il ruolo <strong>di</strong> varianti genetiche nello<br />
scompenso car<strong>di</strong>aco, grazie alla raccolta <strong>di</strong> campioni ematici <strong>di</strong> un ampio numero <strong>di</strong> soggetti<br />
affetti da scompenso <strong>di</strong> <strong>di</strong>fferente eziologia (es. non-ischemica e ischemica).<br />
Gli obiettivi del sottoprogetto genetico sono 1) valutare le relazioni tra i polimorfismi <strong>di</strong> geni<br />
can<strong>di</strong>dati implicati nel metabolismo dei lipi<strong>di</strong> e nella risposta infiammatoria e la prognosi <strong>di</strong><br />
pazienti arruolati nello stu<strong>di</strong>o GISSI-HF, 2) valutare se e come tali relazioni vengono mo<strong>di</strong>ficate<br />
dai trattamenti farmacologici in stu<strong>di</strong>o.<br />
Data la rapi<strong>di</strong>tà con la quale continuamente nascono e si accumulano nuove informazioni e<br />
ipotesi in campo genetico, potranno venire valutati anche altri polimorfismi correlati allo<br />
scompenso che risultassero interessanti nel corso dello stu<strong>di</strong>o. Circa 100 centri dello stu<strong>di</strong>o<br />
GISSI-HF partecipano a questo sottoprogetto. A fine <strong>di</strong>cembre <strong>2004</strong> è stato incluso circa il 90%<br />
dei 2000 pazienti previsti dallo stu<strong>di</strong>o. Come per lo stu<strong>di</strong>o principale, il follow-up sarà <strong>di</strong><br />
almeno tre anni.<br />
Stu<strong>di</strong>o GISSI-Prevenzione-Genetica<br />
La car<strong>di</strong>opatia ischemica (CHD) è determinata dall’interazione tra fattori ambientali noti e<br />
fattori genetici molto meno conosciuti. Lo stu<strong>di</strong>o GISSI-Prevenzione ha <strong>di</strong>mostrato in una<br />
popolazione <strong>di</strong> 11324 pazienti sopravvissuti ad infarto del miocar<strong>di</strong>o, l'efficacia <strong>di</strong> una terapia<br />
con n-3 PUFA e con pravastatina, nel ridurre la mortalità nel corso <strong>di</strong> 3,5 anni <strong>di</strong> follow-up.<br />
Durante questo periodo sono stati raccolti circa 8000 campioni <strong>di</strong> sangue <strong>di</strong> pazienti arruolati<br />
nello stu<strong>di</strong>o, che sono oggetto <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> collaborativi con la SIBioC (Società Italiana <strong>di</strong><br />
Biochimica Clinica e Biologia Molecolare Clinica). Lo stu<strong>di</strong>o GISSI-Prevenzione-genetica si<br />
prefigge l'obiettivo <strong>di</strong> valutare il ruolo <strong>di</strong> alcuni polimorfismi genetici implicati nel metabolismo<br />
lipi<strong>di</strong>co e nella risposta infiammatoria nella prognosi <strong>di</strong> pazienti con car<strong>di</strong>opatia ischemica e<br />
nella loro risposta alla terapia farmacologica con n-3 PUFA e/o statine su circa 2500 pazienti<br />
inclusi nello stu<strong>di</strong>o GISSI-Prevenzione.<br />
Le implicazioni pratiche comprendono 1) la possibilità <strong>di</strong> stimare il rischio <strong>di</strong> ciascun paziente<br />
considerando oltre ai fattori <strong>di</strong> rischio classici car<strong>di</strong>ovascolari anche caratteri genetici, e 2) la<br />
possibilità <strong>di</strong> in<strong>di</strong>viduare i pazienti che realmente rispondono alla terapia con n-3 PUFA e/o con<br />
statine.<br />
Stu<strong>di</strong>o ACTIVE (Atrial Fibrillation Clopidogrel Trial with Irbesartan for<br />
prevention of Vascular Events)<br />
Lo stu<strong>di</strong>o ACTIVE (Atrial Fibrillation Clopidogrel Trial with Irbesartan for prevention of<br />
Vascular Events) è un trial multinazionale, multicentrico condotto in più <strong>di</strong> 600 centri <strong>di</strong> 33<br />
paesi afferenti alla rete coor<strong>di</strong>nata dal Cana<strong>di</strong>an Car<strong>di</strong>ovascular Collaboration Project Office del<br />
Population Health Research Institute (PHRI) che fa capo alla Università McMaster <strong>di</strong> Hamilton,<br />
Ontario. Per l’Italia il coor<strong>di</strong>namento scientifico <strong>di</strong> questi stu<strong>di</strong> è svolto dal Laboratorio <strong>di</strong><br />
Valutazione Clinica dei Farmaci del Dipartimento <strong>di</strong> Ricerca Car<strong>di</strong>ovascolare.<br />
Lo stu<strong>di</strong>o ACTIVE è un trial randomizzato a gruppi paralleli i cui obiettivi primari sono a)<br />
valutare se clopidogrel più aspirina (ASA) è superiore ad ASA e non inferiore alla terapia<br />
anticoagulante orale standard nel prevenire gli eventi vascolari nei pazienti con fibrillazione<br />
atriale b) valutare se la riduzione della pressione sanguigna con irbesartan è superiore al placebo<br />
nel prevenire gli eventi vascolari nei pazienti con fibrillazione atriale. L’outcome principale <strong>di</strong><br />
efficacia è costituito dall’incidenza <strong>di</strong> ictus, infarto miocar<strong>di</strong>o e morte vascolare nel corso del<br />
follow-up, che durerà tra due e quattro anni. Lo stu<strong>di</strong>o, iniziato nel giugno 2003, randomizzerà<br />
14000 pazienti, 6500 nel braccio W (confronto tra warfarina e aspirina + clopidogrel) e 7500 nel<br />
braccio A (confronto tra aspirina e aspirina + clopidogrel). Al <strong>di</strong>cembre <strong>2004</strong> è stato completato<br />
il reclutamento dei pazienti nel braccio W, mentre il braccio A prosegue.<br />
105<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Stu<strong>di</strong> MICHELANGELO: OASIS-5 & OASIS-6<br />
Gli stu<strong>di</strong> internazionali Michelangelo OASIS-5 e OASIS-6 hanno lo scopo <strong>di</strong> valutare<br />
l’efficacia <strong>di</strong> fodaparinux, un pentasaccaride <strong>di</strong> sintesi che agisce come anticoagulante<br />
attraverso l’inibizione selettiva del fattore Xa, nelle Sindromi Coronariche Acute. Vengono<br />
condotti in più <strong>di</strong> 600 centri <strong>di</strong> 41 paesi afferenti alla rete OASIS (Organization to Assess<br />
Strategies in Ischaemic Syndromes), coor<strong>di</strong>nata dal Cana<strong>di</strong>an Car<strong>di</strong>ovascular Collaboration<br />
Project Office del Population Health Research Institute che fa capo alla Università McMaster <strong>di</strong><br />
Hamilton, Ontario. Per l’Italia il coor<strong>di</strong>namento scientifico <strong>di</strong> questi stu<strong>di</strong> è svolto dal<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Valutazione Clinica dei Farmaci del Dipartimento <strong>di</strong> Ricerca Car<strong>di</strong>ovascolare.<br />
Lo stu<strong>di</strong>o OASIS-5 ha l’obiettivo principale <strong>di</strong> valutare l’efficacia <strong>di</strong> fondaparinux, rispetto ad<br />
enoxaparina nel prevenire la morte, l'infarto miocar<strong>di</strong>co acuto o l'ischemia refrattaria in pazienti<br />
con angina instabile e infarto miocar<strong>di</strong>co senza sopraslivellamento del tratto ST (UA/NSTE), in<br />
terapia <strong>di</strong> routine. Lo stu<strong>di</strong>o è randomizzato, in doppio cieco, controllato, a gruppi paralleli e<br />
prevede l'inclusione <strong>di</strong> un totale <strong>di</strong> 22000 pazienti. La fase <strong>di</strong> reclutamento è stata avviata nel<br />
giugno 2003 e prevede il suo completamento nel 2005.<br />
Lo stu<strong>di</strong>o OASIS-6 ha l’obiettivo principale <strong>di</strong> valutare se fondaparinux è superiore al controllo<br />
(eparina non frazionata o placebo) nel prevenire la morte e il reinfarto a 9 giorni in pazienti con<br />
sindrome coronarica acuta con sopraslivellamento del tratto ST (STE-ACS), can<strong>di</strong>dati al<br />
trattamento con trombolisi o PCI primaria e in terapia standard. Lo stu<strong>di</strong>o prevede l'inclusione<br />
<strong>di</strong> un totale <strong>di</strong> 10000 pazienti.<br />
La fase <strong>di</strong> reclutamento è stata avviata all’inizio del <strong>2004</strong>.<br />
Stu<strong>di</strong>o INTER-HEART<br />
La mortalità per patologie car<strong>di</strong>ovascolari appare in <strong>di</strong>minuzione nella maggior parte dei Paesi<br />
sviluppati ma è in aumento nei Paesi emergenti e in via <strong>di</strong> sviluppo. Le attuali conoscenze<br />
derivano soprattutto da stu<strong>di</strong> condotti nei Paesi sviluppati e poco si conosce del ruolo dei fattori<br />
<strong>di</strong> rischio tra<strong>di</strong>zionali e nuovi nei Paesi emergenti.<br />
Lo stu<strong>di</strong>o INTER-HEART è uno stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> tipo caso-controllo che ha raccolto dati<br />
epidemiologici sui fattori <strong>di</strong> rischio ambientali, clinici e genetici per l'infarto miocar<strong>di</strong>co in 52<br />
<strong>di</strong>versi Paesi in Asia, Europa, Me<strong>di</strong>o Oriente, Africa, Australia, Nord e Sud America,<br />
utilizzando un protocollo standar<strong>di</strong>zzato e con la logica <strong>di</strong> valutare se i <strong>di</strong>versi fattori <strong>di</strong> rischio<br />
avevano un impatto <strong>di</strong>fferente nelle <strong>di</strong>verse regioni del mondo.<br />
I casi sono pazienti con infarto miocar<strong>di</strong>co acuto ricoverati entro 24 ore dall’inizio dei sintomi<br />
nelle Unità <strong>di</strong> Cura Coronarica dei centri partecipanti; i controlli erano soggetti senza precedenti<br />
<strong>di</strong> malattie car<strong>di</strong>ovascolari e “matched” per sesso ed età ai casi. Per ciascun caso veniva<br />
reclutato almeno un controllo.<br />
Il questionario dello stu<strong>di</strong>o ha raccolto dati su fattori demografici (paese <strong>di</strong> origine, lingua<br />
madre), aspetti socio-economici (istruzione, occupazione, red<strong>di</strong>to), abitu<strong>di</strong>ni <strong>di</strong> vita (fumo,<br />
attività fisica, <strong>di</strong>eta) e sulla storia personale e familiare <strong>di</strong> malattie e fattori <strong>di</strong> rischio<br />
car<strong>di</strong>ovascolari.<br />
Lo stu<strong>di</strong>o INTER-HEART è sponsorizzato dall’Organizzazione Mon<strong>di</strong>ale della Sanità, dalla<br />
World Heart Federation, e ha ricevuto finanziamenti da più <strong>di</strong> 40 enti pubblici e privati.<br />
La fase pilota dell’INTER-HEART, durata da febbraio 1999 a fine 2000, aveva reclutato 4000<br />
soggetti in 41 paesi. Lo stu<strong>di</strong>o a regime ha raccolto quasi 30000 tra casi e controlli dall’aprile<br />
2000 al <strong>di</strong>cembre 2002. La rete internazionale è coor<strong>di</strong>nata dal Cana<strong>di</strong>an Car<strong>di</strong>ovascular<br />
Collaboration Project Office dell'Università McMaster <strong>di</strong> Hamilton, Canada. Il Laboratorio <strong>di</strong><br />
Valutazione Clinica dei Farmaci ha svolto il ruolo <strong>di</strong> coor<strong>di</strong>natore nazionale per l'Italia. I<br />
risultati finali sono stati presentati al Congresso della European Society of Car<strong>di</strong>ology nel<br />
Settembre <strong>2004</strong> e pubblicati contemporaneamente su Lancet <strong>2004</strong>, 364: 937-52.<br />
106<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
GISSI-AF. Stu<strong>di</strong>o clinico che valuta l’efficacia <strong>di</strong> un antagonista dei<br />
recettori dell’angiotensina II nella fibrillazione atriale<br />
Il GISSI-AF è uno stu<strong>di</strong>o multicentrico, randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo,<br />
sull’efficacia del Valsartan, un antagonista dei recettori dell’angiotensina II, nella prevenzione<br />
delle reci<strong>di</strong>ve <strong>di</strong> fibrillazione atriale (FA).<br />
La FA è l’aritmia più frequentemente riscontrata nella pratica clinica; la sua eziopatogenesi è<br />
piuttosto complessa. Le alterazioni metaboliche, meccaniche ed elettrofisiologiche riscontrabili<br />
negli atri in presenza dell’aritmia producono progressivamente alterazioni strutturali che<br />
possono rendere la FA irreversibile. Nella genesi <strong>di</strong> questo fenomeno che viene detto<br />
“remodeling atriale” svolge un ruolo importante il sistema renina-angiotensina-aldosterone<br />
(RAAS) ed esistono dati clinici ed evidenze sperimentali che confermano questo ruolo.<br />
Il gruppo GISSI ha considerato importante condurre uno stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong>segnato per verificare se<br />
l’aggiunta <strong>di</strong> un antagonista del RAAS (valsartan) possa prevenire la ricorrenza <strong>di</strong> FA in<br />
pazienti con car<strong>di</strong>opatie o comorbi<strong>di</strong>tà <strong>di</strong> <strong>di</strong>verso tipo, trattati al meglio delle terapie<br />
raccomandate. Verranno recluatati 1400 pazienti che verranno sottoposti a un anno <strong>di</strong><br />
trattamento. In un sottogruppo <strong>di</strong> 400 pazienti verrà condotto un sottoprogetto ecocar<strong>di</strong>ografico<br />
e bioumorale, con l’obiettivo <strong>di</strong> approfon<strong>di</strong>re il meccanismo d’azione del trattamento<br />
sperimentale.<br />
Secondo la caratteristica degli stu<strong>di</strong> GISSI, anche il GISSI-AF (il sesto trial condotto dal gruppo<br />
GISSI) sarà uno stu<strong>di</strong>o pragmatico, su pazienti poco selezionati in modo da riprodurre la pratica<br />
clinica.<br />
Il progetto è condotto in collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Clinica<br />
Car<strong>di</strong>ovascolare.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca in Me<strong>di</strong>cina Generale<br />
Stu<strong>di</strong>o Rischio e Prevenzione (R&P)<br />
Lo stu<strong>di</strong>o R&P è uno stu<strong>di</strong>o sull’ottimizzazione della prevenzione car<strong>di</strong>ovascolare nei pazienti<br />
ad alto rischio, condotto a livello nazionale dai me<strong>di</strong>ci <strong>di</strong> me<strong>di</strong>cina generale.<br />
Obiettivo e <strong>di</strong>segno dello stu<strong>di</strong>o<br />
- Valutazione clinica controllata, in doppio cieco, randomizzata, dell’efficacia <strong>di</strong> un trattamento<br />
con n-3 PUFA nel ridurre l’incidenza <strong>di</strong> eventi car<strong>di</strong>ovascolari, fatali e non, in una popolazione<br />
definita dai MMG partecipanti ad alto rischio.<br />
- La storia epidemiologica ed assistenziale <strong>di</strong> questa popolazione (stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> outcomes).<br />
Popolazione in stu<strong>di</strong>o<br />
Criteri <strong>di</strong> inclusione<br />
Tra i soggetti che vengono considerati dal MMG ad elevato rischio car<strong>di</strong>ovascolare vengono<br />
selezionati/e i/le pazienti con:<br />
- fattori <strong>di</strong> rischio multipli (e.g. ipertensione, ipercolesterolemia, <strong>di</strong>abete, fumo, storia familiare<br />
<strong>di</strong> infarto miocar<strong>di</strong>co, obesità, sesso e età)<br />
- pregressi eventi car<strong>di</strong>o-cerebrovascolari o manifestazioni cliniche <strong>di</strong> patologia aterosclerotica<br />
(ictus cerebrale, TIA, arteriopatie periferiche, precedenti interventi <strong>di</strong> rivascolarizzazione<br />
arteriosa, angina pectoris).<br />
Criteri <strong>di</strong> esclusione<br />
- con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> co-morbi<strong>di</strong>tà tali da far considerare infausta la prognosi in un tempo breve (es.<br />
neoplasie maligne);<br />
- attesa non-compliance in un follow-up <strong>di</strong> lungo periodo;<br />
- controin<strong>di</strong>cazioni (allergie note agli n-3 PUFA) o in<strong>di</strong>cazioni (IMA pregresso) al trattamento<br />
con n-3 PUFA.<br />
Misure <strong>di</strong> efficacia<br />
L’obiettivo primario è quello <strong>di</strong> valutare se una somministrazione a lungo termine con n-3<br />
107<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
PUFA è più efficace del corrispondente placebo nel ridurre l’insieme della mortalità totale e dei<br />
maggiori eventi car<strong>di</strong>ovascolari (infarti e ictus non fatali); gli eventi car<strong>di</strong>ovascolari maggiori<br />
(mortalità car<strong>di</strong>ovascolare, ictus e infarti non fatali) la mortalità per cause coronariche; la morte<br />
improvvisa.<br />
La randomizzazione è centrale, stratificata per me<strong>di</strong>co.<br />
Il trattamento sperimentale è rappresentato da una capsula contenente 1 g <strong>di</strong> n-3 PUFA, o il<br />
placebo corrispondente, da assumere giornalmente.<br />
La durata del follow-up è <strong>di</strong> 5 anni. Per documentare con sufficiente affidabilità statistica che il<br />
trattamento con n-3 PUFA è in grado <strong>di</strong> ridurre l’incidenza <strong>di</strong> eventi sarà necessario reclutare<br />
almeno 12.000 pazienti.<br />
Stato <strong>di</strong> avanzamento<br />
Le randomizzazioni sono iniziate nel Febbraio del <strong>2004</strong> e nel corso dell’anno sono stati<br />
randomizzati 4310 pazienti da 319 MMG. Le ASL attive alla fine del <strong>2004</strong> sono 23 e in ogni<br />
ASL si sono tenuti i corsi <strong>di</strong> formazione per gli sperimentatori.<br />
I dati relativi alla popolazione recluta sono i seguenti: età me<strong>di</strong>a 65 anni, maschi 62%,<br />
ipertensione 79%, ipercolesterolemia 62%, <strong>di</strong>abete 56%, fumo 16%, obesità 35%, storia<br />
familiare <strong>di</strong> infarto miocar<strong>di</strong>co precoce 20%. Il 25% dei pazienti presenta una patologia<br />
aterosclerotica, il 50% presenta <strong>di</strong>abete associato ad un altro fattore <strong>di</strong> rischio e il 23% dei non<br />
<strong>di</strong>abetici presenta fattori <strong>di</strong> rischio multipli.<br />
Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> farmacoepidemiologia a partire da banche dati <strong>di</strong> prescrizioni<br />
amministrative-istituzionali: la popolazione delle donne<br />
La farmacoepidemiologia a partire dai dati <strong>di</strong> prescrizione in me<strong>di</strong>cina generale ha portato nel<br />
corso degli anni a concentrare l’interesse sui problemi e le popolazioni che hanno nei dati<br />
prescrittivi uno degli in<strong>di</strong>catori più informativi.<br />
Continuando una lunga tra<strong>di</strong>zione <strong>di</strong> collaborazione con il CINECA (Consorzio<br />
Interuniversitario per il Calcolo Automatico dell'Italia Nord Orientale) sono stati elaborati nel<br />
corso del <strong>2004</strong> i dati <strong>di</strong> prescrizione dell’Osservatorio ARNO, che consiste in un database <strong>di</strong><br />
dati omogenei <strong>di</strong> prescrizione farmaceutica su un campione <strong>di</strong> <strong>di</strong>verse realtà prescrittive sparse<br />
sul territorio nazionale, nella popolazione femminile.<br />
L’analisi condotta sulla banca dati ARNO su un campione <strong>di</strong> 8.052.350 assistibili che avevano<br />
ricevuto almeno una prescrizione <strong>di</strong> farmaco lungo l’anno 2003, si è ampiamente soffermata sul<br />
trattamento farmacologico delle malattie car<strong>di</strong>ovascolari e dei fattori <strong>di</strong> rischio car<strong>di</strong>ovascolari.<br />
Complessivamente i farmaci del sistema car<strong>di</strong>ovascolare sono prescritti al 30% dell’intero<br />
campione <strong>di</strong> donne (1% nell’adolescenza, 5% nell’età adulta, 34% nella perimenopausa, 70%<br />
nell’età anziana). L’uso <strong>di</strong> farmaci car<strong>di</strong>ovascolari è su base occasionale nelle fasce <strong>di</strong> età più<br />
giovani, mentre il tasso <strong>di</strong> cronicità (calcolato come la prescrizione <strong>di</strong> più <strong>di</strong> 4 confezioni <strong>di</strong><br />
farmaco nel corso dell’anno) aumenta progressivamente con l’età : donne in premenopausa (45-<br />
54 anni) 17,4%, tra 55-64 anni 39.2%, tra 65 e 74 anni 60.5%, fino a raggiungere un massimo<br />
(70.3%) nella fascia d’età tra 75-84 anni (e poi decrescere nelle gran<strong>di</strong> anziane (67%). La spesa<br />
complessiva ascrivibile al gruppo dei farmaci car<strong>di</strong>ovascolari è considerevolmente più alta nelle<br />
donne rispetto agli uomini e la <strong>di</strong>fferenza risulta più marcata soprattutto nelle fasce più anziane<br />
della popolazione. Come atteso, i farmaci per il trattamento dell’ipertensione sono i più<br />
prescritti, seguiti dai farmaci antitrombotici, sia nella popolazione femminile che in quella<br />
maschile.<br />
108<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
L’ipertensione arteriosa nella foresta ecuadoregna: un progetto sulla<br />
prevalenza dell’ipertensione, sulle sue complicanze e sull’efficacia<br />
preventiva del trattamento antiipertensivo in una zona rurale dell’Ecuador.<br />
Fa parte delle attività del Laboratorio un progetto <strong>di</strong> collaborazione con il Cecomet (Centro de<br />
Epidemiologia comunitaria y Me<strong>di</strong>cina tropical) <strong>di</strong> Esmeralda, Ecuador sulla prevalenza e il<br />
trattamento dell’ipertensione arteriosa.<br />
In una zona rurale dell’Ecuador, il <strong>di</strong>stretto sanitario <strong>di</strong> Borbon, localizzato al nord della<br />
provincia <strong>di</strong> Esmeraldas è attualmente in corso uno stu<strong>di</strong>o sul trattamento dell’ipertensione.<br />
In questa area infatti il 36% della popolazione adulta risulta ipertesa: il 44% con ipertensione <strong>di</strong><br />
grado I (140-159/90-99 mmHg), il 29% <strong>di</strong> grado II (160-179/100-109) ed il 27% <strong>di</strong> grado III<br />
(>180mmHg). L’ipertensione è più prevalente nella razza nera con una prevalenza nelle classi<br />
<strong>di</strong> età più giovani (40 anni) del 40% negli uomini e del 50% nelle donne. Solo il 13% degli<br />
ipertesi riceveva farmaci antiipertensivi, nessuno li assumeva regolarmente e solo 4 ipertesi<br />
risultavano controllati dalla terapia (
IRFMN<br />
Epidemiologia dei problemi infermieristici e farmacosorveglianza nelle<br />
RSA e nei <strong>di</strong>stretti<br />
L'obiettivo dello stu<strong>di</strong>o è <strong>di</strong> descrivere i problemi che gli infermieri incontrano nell'assistenza ai<br />
pazienti anziani assistiti nei <strong>di</strong>stretti o ricoverati nelle RSA, e che richiedono decisioni<br />
assistenziali, con particolare riferimento ai problemi legati ai farmaci. Una ADR è infatti da<br />
prendere sempre in considerazione quando si verifica un problema inatteso in queste<br />
popolazioni. Il progetto è in fase <strong>di</strong> sviluppo e sarà attivato nei primi mesi del 2005 e<br />
coinvolgerà gli infermieri <strong>di</strong> RSA e <strong>di</strong>stretti <strong>di</strong> 5 regioni italiane: Lombar<strong>di</strong>a, Piemonte,<br />
Trentino Alto A<strong>di</strong>ge, Toscana e Friuli Venezia Giulia<br />
End of Life Observatory: Dying with Dementia Stu<strong>di</strong>o retrospettivo sulle<br />
modalità <strong>di</strong> morte dei pazienti con demenza<br />
Stu<strong>di</strong>o in collaborazione con l’<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Ricerca in Cure Palliative Lino Maestroni. L’obiettivo<br />
<strong>di</strong> questa prima fase è la descrizione delle modalità <strong>di</strong> morte (riferite all’ultimo mese) dei<br />
pazienti con Demenza grave (Fast 7c) ricoverati in un campione <strong>di</strong> RSA >100 posti letto della<br />
provincia <strong>di</strong> Cremona e <strong>di</strong> Torino. La fase successiva sarà prospettica, per analizzare le<br />
decisioni <strong>di</strong> fine vita che vengono prese per questi pazienti.<br />
110<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
DIPARTIMENTO DI IMMUNOLOGIA<br />
E BIOLOGIA CELLULARE<br />
PERSONALE<br />
IRFMN<br />
Capo Dipartimento Alberto MANTOVANI,Dr.Med.Chir.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia Vascolare<br />
Capo Laboratorio Elisabetta DEJANA, Dr.Sci.Biol. Ph.D.<br />
Unità <strong>di</strong> Angiogenesi Molecolare*<br />
Capo Unità Ferruccio BREVIARIO, Per.Chim.<br />
Unità <strong>di</strong> Coltura <strong>di</strong> Tessuti<br />
Capo Unità Giovanna BALCONI, Dipl.Univ.<br />
Unità <strong>di</strong> Fisiologia Endoteliale*<br />
Capo Unità Maria Grazia LAMPUGNANI, Dr.Sci.Biol.<br />
*Unità <strong>di</strong>staccate presso l’<strong>Istituto</strong> FIRC <strong>di</strong> Oncologia Molecolare (IFOM, Milano)<br />
Laboratorio per lo Stu<strong>di</strong>o dei Sistemi Biologici<br />
Capo Laboratorio Gianfranco BAZZONI, Dr.Med.Chir.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Immunofarmacologia<br />
Capo Laboratorio Annunciata VECCHI, Dr.Sci.Biol.<br />
Unità <strong>di</strong> Immunopatologia Sperimentale<br />
Capo Unità Cecilia GARLANDA, Dr.Med.Vet.<br />
111<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia Cellulare<br />
Capo Laboratorio Paola ALLAVENA, Dr.Med.Chir.<br />
Unità <strong>di</strong> Tecniche Immunologiche<br />
Capo Unità Giuseppe PERI, Dipl.Lab.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Infiammazione e Trasduzione del Segnale<br />
Capo Laboratorio Silvano SOZZANI, Dr.Farm.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia Molecolare<br />
Capo Laboratorio Antonio SICA, Dr.Sci.Biol. Ph.D.<br />
IRFMN<br />
112<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
Il Dipartimento <strong>di</strong> Immunologia e Biologia Cellulare (DIBC) è focalizzato sulla<br />
immunobiologia dei me<strong>di</strong>atori dell'immunità innata, in particolare citochine e chemochine, e<br />
sull'endotelio vascolare. Inoltre, il Dipartimento è interessato allo sviluppo <strong>di</strong> nuove terapie<br />
me<strong>di</strong>ate da cellule o anticorpi per le patologie <strong>di</strong> tipo onco-ematologico. Le aree <strong>di</strong> interesse del<br />
DIBC sono centrali alla comprensione della patofisiologia <strong>di</strong> <strong>di</strong>verse patologie umane che<br />
vanno dalle malattie vascolari, all'infiammazione, all'autoimmunità e alle malattie neoplastiche.<br />
Le citochine e le cellule endoteliali costituiscono un importante bersaglio per lo sviluppo <strong>di</strong><br />
nuovi approcci terapeutici nei confronti <strong>di</strong> queste malattie come pure per l'identificazione <strong>di</strong><br />
strumenti <strong>di</strong>agnostici innovativi. Inoltre, il DIBC ha un interesse particolare nello sviluppo e<br />
nella definizione del meccanismo <strong>di</strong> azione <strong>di</strong> nuove terapie basate su cellule o anticorpi nel<br />
settore dell'ematologia.<br />
Gli approcci utilizzati al DIBC enfatizzano il livello molecolare, con uno sforzo in particolare<br />
nell'identificazione e caratterizzazione <strong>di</strong> nuove molecole e lo sviluppo <strong>di</strong> nuovi strumenti<br />
originali (es. animali geneticamente mo<strong>di</strong>ficati, anticorpi monoclonali, saggi <strong>di</strong> misura). Gli<br />
stu<strong>di</strong> a livello molecolare sono facilitati dalla attività <strong>di</strong> una parte del gruppo <strong>di</strong> Biologia<br />
Vascolare all'<strong>Istituto</strong> FIRC <strong>di</strong> Biologia Molecolare. Questa istituzione offre accesso a<br />
metodologie sperimentali avanzate nell'ambito delle nanotecnologie, della bioinformatica e<br />
della biologia strutturale. In parallelo, vengono condotti stu<strong>di</strong> in vivo in modelli preclinici e uno<br />
sforzo continuo viene fatto per valutare gli strumenti molecolari e i para<strong>di</strong>gmi sviluppati nel<br />
contesto della patologia umana o <strong>di</strong>rettamente nell'uomo. Da questo punto <strong>di</strong> vista,<br />
complessivamente l'attività del DIBC riflette la convergenza <strong>di</strong> ricerca fondamentale e clinica.<br />
Attività antitumorale <strong>di</strong> chemochine<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Caratterizzazione del ruolo dell'enzima PI3Kg nella migrazione leucocitaria<br />
Caratterizzazione del ruolo <strong>di</strong> PTX3 in <strong>di</strong>verse patologie umane: car<strong>di</strong>ovascolari, infettive,<br />
tumorali<br />
Caratterizzazione del ruolo delle strutture giunzionali endoteliali nella regolazione della<br />
permeabilità vascolare e nell'angiogenesi.<br />
Caratterizzazione <strong>di</strong> alcuni <strong>di</strong>fetti molecolari nella trasmissione del segnale <strong>di</strong> leucociti tumoreassociati<br />
Caratterizzazione <strong>di</strong> un nuovo ruolo funzionale del recettore del mannosio su cellule dendritiche<br />
Colture a lungo termine <strong>di</strong> cellule endoteliali linfatiche<br />
Definizione del switch dei recettori per chemiochine in cellule dendritiche<br />
Definizione del ruolo <strong>di</strong> PTX3 in infezioni e fertilità<br />
Generazione <strong>di</strong> nuove linee <strong>di</strong> topi KO<br />
113<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Generazione e stabilizzazione <strong>di</strong> una linea <strong>di</strong> cellule endoteliali linfatiche <strong>di</strong> topo<br />
Identificazione del primo recettore decoy per IL-1<br />
Identificazione della prima pentraxina lunga umana, PTX3<br />
Identificazione <strong>di</strong> nuovi inibitori <strong>di</strong> citochine e chemiochine<br />
IRFMN<br />
Identificazione <strong>di</strong> proteine che compongono le strutture giunzionali dell'endotelio (VE-caderina<br />
e JAM-A).<br />
Identificazione <strong>di</strong> recettori decoy funzionali nel sistema delle chemiochine<br />
Identificazione <strong>di</strong> TIR8, un nuovo componente della superfamiglia dei recettori TLR e IL-1<br />
Identificazione <strong>di</strong> nuovi recettori chemiotattici in sottopopolazioni <strong>di</strong> cellule dendritiche<br />
Regolazione della produzione <strong>di</strong> chemiochine in cellule dendritiche<br />
Regolazione dell'espressione <strong>di</strong> TLR4 e trasmissione del segnale attraverso MyD88<br />
Regolazione dell'espressione e della funzionalità <strong>di</strong> recettori per chemiochine<br />
Regolazione <strong>di</strong> chemiochine in microambienti<br />
Regolazione <strong>di</strong> JAM-A da parte <strong>di</strong> citochine infiammatorie<br />
Ruolo inibitorio <strong>di</strong> TIR8 nell’infiammazione<br />
Ruolo <strong>di</strong> JAM-A nella motilità cellulare<br />
Stu<strong>di</strong>o della capacità dei precursori mesodermici circolanti <strong>di</strong> colonizzare vasi e altri tessuti in<br />
rigenerazione.<br />
Sviluppo <strong>di</strong> linee <strong>di</strong> precursori mesodermici circolanti.<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
DIBIT, <strong>Istituto</strong> Scientifico San Raffaele, Milano<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Ematologia, Ospedali Riuniti <strong>di</strong> Bergamo<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Genetica, Biologia e Biochimica, Università <strong>di</strong> Torino<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Sperimentale e Biochimica,Università <strong>di</strong> Perugia<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Sperimentale e Patologia, Università <strong>di</strong> Roma<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Sperimentale e Patologia, Università <strong>di</strong> Brescia<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Pe<strong>di</strong>atria, Ospedale S.Gerardo, Monza<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Salute Pubblica e Biologia Cellulare, Università Tor Vergata, Roma<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Scienze Biome<strong>di</strong>che e Biotecnologie, Università <strong>di</strong> Brescia<br />
Facoltà <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina e Chirurgia Ospedale <strong>di</strong> Desio, Milano<br />
I Clinica Me<strong>di</strong>ca, Università <strong>di</strong> Roma "La Sapienza", Policlinico Umberto I.<br />
114<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Clinica Me<strong>di</strong>ca Generale Ematologia e Immunologia Clinica, Torrette <strong>di</strong> Ancona<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Anatomia Patologica, Università <strong>di</strong> Milano, Ospedale Luigi Sacco, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Patologia Generale, Università <strong>di</strong> Milano<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Terapia Sperimentale per la Fibrosi Cistica, Ospedale S. Raffaele, Milano<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia Molecolare, <strong>Istituto</strong> Gaslini, Genova<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Chirurgia Sperimentale, Ospedale San Raffaele, Milano<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Immunopatologia Cattedra <strong>di</strong> Nefrologia, Dip. <strong>di</strong> Discipline Cliniche e<br />
Chirurgiche, Università <strong>di</strong> Torino<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Microbiologia, Università <strong>di</strong> Perugia<br />
Ospedale Molinette, Università <strong>di</strong> Torino<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
Centro <strong>di</strong> Virologia Applicata ai Tumori, Deutsches Krebsforschungszentrum, Heidelberg,<br />
Germania<br />
Centro <strong>di</strong> Tecnologia Transgenica e Terapia Genica, Lovanio, Belgio<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Chimica Biologica, Università <strong>di</strong> Buenos Aires, Argentina<br />
Dip. Farmacologia, Facoltà <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina <strong>di</strong> Hannover, Germania<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Ematologia, Academisch Ziekenhuis Leiden, Olanda<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Interna, Università <strong>di</strong> Basilea, Svizzera<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Nefrologia, Università <strong>di</strong> Leiden, Olanda<br />
Duke University, Durham, North Carolina, USA<br />
Erasmus University, Rotterdam, Olanda<br />
ICRF Translational Oncology Laboratory, Londra, UK<br />
INSERM U470, Centro <strong>di</strong> Biochimica, Università <strong>di</strong> Nizza, Francia<br />
<strong>Istituto</strong> Pasteur, Parigi, Francia<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Ricerca sul Cuore, Camperdown, Australia<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Immunoregolazione Molecolare, NCI-FCRDC, Frederick, MD, USA<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Oncologia Trasduzionale, ICRF, Londra, UK<br />
<strong>Istituto</strong> Max Planck, Friburgo, Germania<br />
MRC, Hammersmith Hospital, London, UK<br />
NCI, NIH, Bethesda, Maryland, USA<br />
Rega Institute, Lovanio, Belgio<br />
Scripps Research Institute, La Jolla, CA, USA<br />
Università <strong>di</strong> Friburgo, Svizzera<br />
Università <strong>di</strong> Lovanio, Belgio<br />
University College <strong>di</strong> Londra, UK<br />
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
American Journal of Physiology (E. Dejana)<br />
Annals of Oncology (A. Mantovani)<br />
Atherosclerosis, Thrombosis. A Journal of Vascular Biology (E. Dejana)<br />
Cell Adhesion and Communication (E. Dejana)<br />
Cell and Tissue Research (E. Dejana)<br />
Current Immunology Reviews (S. Sozzani)<br />
Cytokine (A. Mantovani)<br />
IRFMN<br />
115<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Endothelium (A. Mantovani, E. Dejana)<br />
European Cytokine Network (A. Mantovani)<br />
European Journal of Immunology (A. Mantovani, Executive Commitee E<strong>di</strong>tion)<br />
Haematologica (A. Mantovani, E. Dejana)<br />
International Immunopharmacology (A. Mantovani)<br />
Journal of Cell Biology (E. Dejana)<br />
Journal of Clinical Investigation (A. Mantovani)<br />
Journal of Immunology (A. Mantovani, S. Sozzani, Associate E<strong>di</strong>tors)<br />
Journal of Leukocyte Biology (A. Mantovani)<br />
Journal of Vascular Investigation (E. Dejana)<br />
Microvascular Research (E. Dejana)<br />
Trends in Immunology (A. Mantovani)<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
IRFMN<br />
Arteriosclerosis and Thrombosis, Blood, British Journal of Cancer, British Journal of<br />
Pharmacology, Cancer, Cancer Research, Cytokine, European Journal of Cancer, European<br />
Journal of Immunology, FEBS Letters, Haematologica, Human Gene Therapy, Immunity,<br />
International Journal of Cancer, Journal of Cellular Physiology, Journal of Clinical<br />
Investigation, Journal of Experimental Me<strong>di</strong>cine, Journal of Immunology, Journal of Leukocyte<br />
Biology, Journal of the National Cancer Institute, Leukemia, Nature, Nature Immunology,<br />
Nature Reviews in Immunology, Nature Me<strong>di</strong>cine, PNAS, Trends in Immunology<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
Associazione Italiana per la Ricerca sul Cancro<br />
Consiglio Nazionale delle <strong>Ricerche</strong>, Progetto Finalizzato Biotecnologie<br />
Commissione “Ricerca Finalizzata” del Ministero della Salute, Italia<br />
Commissione “Cellule Staminali” dell’<strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità, Italia<br />
CPMP (EMEA) Agenzia per la valutazione del dossier <strong>di</strong> registrazione <strong>di</strong> nuovi farmaci<br />
EMBO (European Molecular Biology Organization), Heidelberg, Germania;<br />
EC 5° Programma Quadro<br />
Fondazione Scientifica Mauriziana<br />
<strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità, Programma Nazionale per l'AIDS<br />
UNESCO, Commission for Natural Sciences<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
3 a Conferenza Nazionale SIICA, Ischia, 24-27 Aprile <strong>2004</strong><br />
Cellule dendritiche regolatorie nella risposta Immunitaria, Certosa <strong>di</strong> Pontignano, Siena, 28-30<br />
Settembre, <strong>2004</strong><br />
116<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
6° Congresso Mon<strong>di</strong>ale su Trauma, Shock, Infiammazione e Sepsi, Monaco, 2-6 Marzo <strong>2004</strong>.<br />
Toll <strong>2004</strong>, Taormina, 8-11 Maggio <strong>2004</strong>.<br />
3° Conferenza Nazionale SIICA, Ischia, 24-27 Aprile <strong>2004</strong>.<br />
12° Congresso Internazionale <strong>di</strong> Immunologia, Montreal Canada, 18-23 Luglio <strong>2004</strong>.<br />
Gordon Research Conference "Chemotactic Cytokines", Aussois, Francia, 19-24 Settembre<br />
<strong>2004</strong>.<br />
7° Congresso Internazionale <strong>di</strong> Neuroimmunologia, Venezia, 28 settembre -2 Ottobre <strong>2004</strong>.<br />
European Science Foundation Workshop: "What are the pattern recognition receptors really<br />
doing?" Turku, Finlan<strong>di</strong>a, 2-5 Settembre <strong>2004</strong>.<br />
XXIX Meeting della Società Brasiliana <strong>di</strong> Immunologia, Our Preto, Brasile, 4-7 Ottobre <strong>2004</strong>.<br />
Cytokines in Cancer and Immunity, San Juan, Portorico, 21-25 Ottobre <strong>2004</strong>.<br />
Inflammation: from cellular immunity to human <strong>di</strong>sease, Monash Me<strong>di</strong>cal Centre, Melbourne,<br />
Australia, 28-30 Novembre <strong>2004</strong>.<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
ACRAF Angelini<br />
Alfa Wassermann<br />
Associazione Italiana per la Ricerca sul Cancro<br />
Association for International Cancer Research<br />
Astra Zeneca<br />
Comunità Europea<br />
Consiglio Nazionale delle <strong>Ricerche</strong><br />
Fondazione CARIPLO<br />
Fondazione Italiana per la Ricerca sul Cancro<br />
Fondazione Paolo Belli<br />
Fondazione Tettamanti<br />
Hycult<br />
ImClone Inc.<br />
Indena<br />
<strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità<br />
Ministero Istruzione, Università e Ricerca Scientifica<br />
Ministero Salute<br />
Molmed<br />
Roche Italia<br />
Sigma Tau<br />
117<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Bazzoni G, Dejana E<br />
Endothelial cell-to-cell junctions: Molecular organization and role in vascular homeostasis<br />
Physiol Rev <strong>2004</strong>; 84: 869-901<br />
IRFMN<br />
Bellocchio S, Montagnoli C, Bozza S, Gaziano R, Rossi C, Manbula S S, Vecchi A, Mantovani A, Levitz S M,<br />
Romani L<br />
The contribution of the toll-like/IL-1 receptor superfamily to innate and adaptive immunity to fungal pathogens in<br />
vivo<br />
J Immunol <strong>2004</strong>; 172: 3059-3069<br />
Bertini R, Allegretti M, Bizzarri C, Moriconi A, Locati M, Zampella G, Cervellera M N, Di Cioccio V, Cesta M C,<br />
Galliera E, Martinez F O, Di Bitondo R, Troiani G, Sabbatini V, D'Anniballe G, Anacar<strong>di</strong>o R, Cutrin J C, Cavalieri<br />
B, Mainiero F, Strippoli R, Villa P, Di Girolamo M, Martin F, Gentile M, Santoni A, Corda D, Poli Giuseppe,<br />
Mantovani A, Ghezzi P, Colotta F<br />
Non-competitive allosteric inhibitors of the inflammatory chemokine receptors CXCR1 and CXCR2: Prevention of<br />
reperfusion injury<br />
Proc Natl Acad Sci USA <strong>2004</strong>; 101: 11791-11796<br />
Bonecchi R, Locati M, Galliera E, Vulcano M, Sironi M, Fra A M, Gobbi M, Vecchi A, Sozzani S, Haribabu B, Van<br />
Damme J, Mantovani A<br />
Differential recognition and scavenging of native and truncated macrophage-derived chemokine (MDC/CCL22) by<br />
the D6 decoy receptor<br />
J Immunol <strong>2004</strong>; 172: 4972-4976<br />
Cera M R, Del Prete A, Vecchi A, Corada M, Martin Padura I, Motoike T, Tonetti P, Bazzoni G, Vermi W, Gentili F,<br />
Bernasconi S, Sato T N, Mantovani A, Dejana E<br />
Increased DC trafficking to lymph nodes and contact hypersensitivity in junctional adhesion molecule-A-deficient<br />
mice<br />
J Clin Invest <strong>2004</strong>; 114: 729-738<br />
D'Amico G, Vulcano M, Bugarin C, Bianchi G, Pirovano G, Bonamino M, Marin V, Allavena P, Biagi E, Bion<strong>di</strong> A<br />
CD40 activation of BCP-ALL cells generates IL-10-producing, IL-12-defective APCs that induce allogeneic T-cell<br />
anergy<br />
Blood <strong>2004</strong>; 104: 744-751<br />
Dejana E<br />
Endothelial cell-cell junctions: Happy together<br />
Nat Rev Mol Cell Biol <strong>2004</strong>; 5: 261-270<br />
Del Prete A, Vermi W, Dander E, Otero K, Barberis L, Luini W, Bernasconi S, Sironi M, Santoro A, Garlanda C,<br />
Facchetti F, Wymann M P, Vecchi A, Hirsch E, Mantovani A, Sozzani S<br />
Defective dendritic cell migration and activation of adaptive immunity in PI3Kgamma-deficient mice<br />
EMBO J <strong>2004</strong>; 23: 3505-3515<br />
Diniz S N, Nomizo R, Cisalpino P S, Teixeira M M, Brown G D, Mantovani A, Gordon S, Reis L F L, Dias A A M<br />
PTX3 function as an opsonin for the dectin-1-dependent internalization of zymosan by macrophages<br />
J Leukoc Biol <strong>2004</strong>; 75: 649-656<br />
Galliera E, Jala V R, Trent J O, Bonecchi R, Signorelli P, Lefkowitz R J, Mantovani A, Locati M, Haribabu B<br />
Beta-arrestin-dependent constitutive internalization of the human chemokine decoy receptor D6<br />
J Biol Chem <strong>2004</strong>; 279: 25590-25597<br />
Garlanda C, Riva F, Polentarutti N, Buracchi C, Sironi M, De Bortoli M, Muzio M, Bergottini R, Scanziani E, Vecchi<br />
A, Hirsch E, Mantovani A<br />
Intestinal inflammation in mice deficient in Tir8, an inhibitory member of the IL-1 receptor family<br />
Proc Natl Acad Sci USA <strong>2004</strong>; 101: 3522-3526<br />
Gazzaniga S, Gonzalez L, Mantovani A, Vecchi A, Wainstok R<br />
118<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Isolation and molecular characterization of a mouse renal microvascular endothelial cell line<br />
In Vitro Cell Dev Biol Anim <strong>2004</strong>; 40: 82-88<br />
IRFMN<br />
Gulino V, Moratto D, Sozzani S, Cava<strong>di</strong>ni P, Otero K, Tassone L, Imberti L, Pirovano S, Notarangelo LD, Soresina<br />
R, Mazzolari E, Nelson DL, Notarangelo LD, Badolato R.<br />
Altered leukocyte response to CXCL12 in patients with Warts Hypogammaglobulinemia, Infections, Myelokathexis<br />
(WHIM) syndrome.<br />
Blood, 104:444-452, <strong>2004</strong><br />
Klouche M, Peri G, Knabbe C, Eckstein H H, Schmid F X, Schmitz G, Mantovani A<br />
Mo<strong>di</strong>fied atherogenic lipoproteins induce expression of pentraxin-3 by human vascular smooth muscle cells<br />
Atherosclerosis <strong>2004</strong>; 175: 221-228<br />
Latini R, Maggioni A P, Peri G, Gonzini L, Lucci D, Mocarelli P, Vago L, Pasqualini F, Signorini S, Soldateschi D,<br />
Tarli L, Schweiger C, Fresco C, Cecere R, Tognoni G, Mantovani A, LATIN Investigators<br />
Prognostic significance of the long pentraxin PTX3 in acute myocar<strong>di</strong>al infarction<br />
Circulation <strong>2004</strong>; 110: 2349-2354<br />
Luchetti M, Sambo P, Majlingova P, Svegliati Baroni S, Peri G, Paroncini P, Introna M, Stoppacciaro A, Mantovani<br />
A, Gabrielli A<br />
Scleroderma fibroblasts constitutively express the long pentraxin PTX3<br />
Clin Exp Rheumatol <strong>2004</strong>; 22 Suppl 33: S66-S72<br />
Mantovani A, Sozzani S, Locati M, Schioppa T, Saccani A, Allavena P, Sica A<br />
Infiltration of tumours by macrophages and dendritic cells: Tumour-associated macrophages as a para<strong>di</strong>gm for<br />
polarized M2 mononuclear phagocytes<br />
In: Cancer and inflammation. Wiley, Chichester; <strong>2004</strong> : 137-148<br />
Mantovani A, Allavena P, Sica A<br />
Tumour-associated macrophages as a prototypic type II polarised phagocyte population: Role in tumour progression<br />
Eur J Cancer <strong>2004</strong>; 40: 1660-1667<br />
Mantovani A, Allavena P, Sozzani S, Vecchi A, Locati M, Sica A<br />
Chemokines in the recruitment and shaping of the leukocyte infiltrate of tumors<br />
Semin Cancer Biol <strong>2004</strong>; 14: 155-160<br />
Mantovani A, Locati M, Polentarutti N, Vecchi A, Garlanda C<br />
Extracellular and intracellular decoys in the tuning of inflammatory cytokines and toll-like receptors: The new entry<br />
TIR8/SIGIRR<br />
J Leukoc Biol <strong>2004</strong>; 75: 738-742<br />
Mantovani A, Sica A, Sozzani S, Allavena P, Vecchi A, Locati M<br />
The chemokine system in <strong>di</strong>verse forms of macrophage activation and polarization<br />
Trends Immunol <strong>2004</strong>; 25: 677-686<br />
Marchesi F, Monti P, Leone B E, Zerbi A, Vecchi A, Piemonti L, Mantovani A, Allavena P<br />
Increased survival, proliferation, and migration in metastatic human pancreatic tumor cells expressing functional<br />
CXCR4<br />
Cancer Res <strong>2004</strong>; 64: 8420-8427<br />
Martinez F O, Sironi M, Vecchi A, Colotta F, Mantovani A, Locati M<br />
IL-8 induces a specific transcriptional profile in human neutrophils: Synergism with LPS for IL-1 production<br />
Eur J Immunol <strong>2004</strong>; 34: 2286-2292<br />
Monti P, Leone B E, Zerbi A, Balzano G, Cainarca S, Sor<strong>di</strong> V, Pontillo M, Mercalli A, Di Carlo V, Allavena P,<br />
Piemonti L<br />
Tumor-derived MUC1 mucins interact with <strong>di</strong>fferentiating monocytes and induce IL-10high IL-12low regulatory<br />
dendritic cell<br />
J Immunol <strong>2004</strong>; 172: 7341-7349<br />
Monti P, Marchesi F, Reni M, Mercalli A, Sor<strong>di</strong> V, Zerbi A, Balzano G, Di Carlo V, Allavena P, Piemonti L<br />
A comprehensive in vitro characterization of pancreatic ductal carcinoma cell line biological behavior and its<br />
correlation with the structural and genetic profile<br />
119<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Virchows Archiv <strong>2004</strong>; 445: 236-247<br />
IRFMN<br />
Napoleone E, Di Santo A, Peri G, Mantovani A, de Gaetano G, Donati M B, Lorenzet R<br />
The long pentraxin PTX3 up-regulates tissue factor in activated monocytes: Another link between inflammation and<br />
clotting activation<br />
J Leukoc Biol <strong>2004</strong>; 76: 203-209<br />
Perrier P, Martinez F O, Locati M, Bianchi G, Nebuloni M, Vago G, Bazzoni F, Sozzani S, Allavena P, Mantovani A<br />
Distinct transcriptional programs activated by interleukin-10 with or without lipopolysaccharide in dendritic cells:<br />
Induction of the B cell-activating chemokine, CXC chemokine ligand 13<br />
J Immunol <strong>2004</strong>; 172: 7031-7042<br />
al-Rama<strong>di</strong> B K, Ellis M, Pasqualini F, Mantovani A<br />
Selective induction of pentraxin 3, a soluble innate immune pattern recognition receptor, in infectious episodes in<br />
patients with haematological malignancy<br />
Clin Immunol <strong>2004</strong>; 112: 221-224<br />
Rusnati M, Camozzi M, Moroni E, Bottazzi B, Peri G, Indraccolo S, Amadori A, Mantovani A, Presta M<br />
Selective recognition of fibroblast growth factor-2 by the long pentraxin PTX3 inhibits angiogenesis<br />
Blood <strong>2004</strong>; 104: 92-99<br />
Salustri A, Garlanda C, Hirsch E, De Acetis M, Maccagno A, Bottazzi B, Doni A, Bastone A, Mantovani G, Beck-<br />
Peccoz P, Salvatori G, Mahoney D J, Day A J, Siracusa G, Romani L, Mantovani A<br />
PTX3 plays a key role in the organization of the cumulus oophorus extracellular matrix and in in vivo fertilization<br />
Development <strong>2004</strong>; 131: 1577-1586<br />
Sica A, Biswas S, Paul S, Lecchi C, Schioppa T, Bottazzi B, Mantovani A<br />
Molecular basis of the phenotype of tumor-associated macrophages<br />
Recent Research Development Immunology <strong>2004</strong>; 6: 15-30<br />
Simon A, Bijzet J, Voorbij H A M, Mantovani A, Van der Meer J W M, Drenth J P H<br />
Effect of inflammatory attacks in the classical type hyper-IgD syndrome on immunoglobulin D, cholesterol and<br />
parameters of the acute phase response<br />
J Intern Med <strong>2004</strong>; 256: 247-253<br />
Thomas F C, Sheth B, Eckert J J, Bazzoni G, Dejana E, Fleming T P<br />
Expression of JAM-1 to epithelial <strong>di</strong>fferentiation and tight-junction biogenesis in the mouse preimplantation embryo<br />
J Cell Sci <strong>2004</strong>; 117: 5599-5608<br />
van Rossum A, Fazzini F, Limburg P C, Manfre<strong>di</strong> A A, Rovere Querini P, Mantovani A, Kallenberg C G M<br />
The prototypic tissue pentraxin PTX3, in contrast to the short pentraxin serum amyloid P, inhibits phagocytosis of<br />
late apoptotic neutrophils by macrophages<br />
Arthritis Rheum <strong>2004</strong>; 50: 2667-2674<br />
Vulcano M, Dusi S, Lissandrini D, Badolato R, Mazzi P, Ribol<strong>di</strong> E, Borroni E, Calleri A, Donini M, Plebani A,<br />
Notarangelo L, Musso T and S Sozzani.<br />
Toll receptor-me<strong>di</strong>ated regulation of NADPH oxidase in human dendritic cells.<br />
J Immunol, 173:5749-5756, <strong>2004</strong><br />
120<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia Vascolare<br />
IRFMN<br />
Struttura e funzione delle giunzioni <strong>di</strong> aderenza endoteliali<br />
Le proteine transmembrana presenti alle giunzioni <strong>di</strong> aderenza appartengono alla famiglia delle<br />
caderine e me<strong>di</strong>ano adesione omofilica. Queste proteine si organizzano in complessi multimerici<br />
e seguono a cerniera i contatti tra cellule . L’endotelio esprime una caderina specifica (VEcaderina)<br />
che è presente solo in questo tipo cellulare. La coda citoplasmatica della VE-caderina<br />
lega la beta catenina e <strong>di</strong>verse chinasi e fosfatasi. La beta catenina può traslocare al nucleo dove<br />
si associa a fattori trascrizionali specifici (Tcf /LEF) e modula la trascrizione <strong>di</strong> <strong>di</strong>versi geni<br />
legati al ciclo cellulare e alla apoptosi. Quando la beta catenina è legata alle caderine e’<br />
stabilizzata ma trattenuta a livello <strong>di</strong> membrana e non può segnalare. Quando le caderine sono<br />
assenti o mutate la beta catenina è libera <strong>di</strong> muoversi al nucleo e segnalare in maniera meno<br />
controllata. La inattivazione del gene della VE-caderina o della beta catenina endoteliale induce<br />
la morte precoce degli embrioni in utero a causa <strong>di</strong> forti alterazioni nello sviluppo del sistema<br />
vascolare. Nel futuro stu<strong>di</strong>eremo la attività trascrizionale della beta catenina durante lo sviluppo<br />
del sistema vascolare vedremo se i tempi e le regioni vascolari dove in assenza <strong>di</strong> beta catenina<br />
si manifestano i <strong>di</strong>fetti osservati corrispondono a quelli dove la proteina esprime attivita’<br />
trascrizionale. Inoltre, stu<strong>di</strong>eremo cellule endoteliali beta catenina nulle ricostituite per<br />
trasfezione con beta catenina wild type o i suoi <strong>di</strong>versi mutanti. Infine svilupperemo altri topi<br />
geneticamente mo<strong>di</strong>ficati dove una forma stabilizzata <strong>di</strong> beta catenina viene sovrespressa<br />
nell’endotelio o dove viene inattivata in maniera con<strong>di</strong>zionale dopo la nascita.<br />
Regolazione delle giunzioni strette<br />
Le interazioni tra proteine delle Giunzioni Strette regolano il passaggio dei flui<strong>di</strong> e la<br />
migrazione dei leucociti tra cellule endoteliali ed epiteliali contigue. Recentemente abbiamo<br />
descritto alcune <strong>di</strong> queste interazioni, focalizzandoci su JAM-A (una proteina <strong>di</strong> membrana<br />
delle Giunzioni Strette) e sulle molecole ad essa associate. Abbiamo inoltre definito che i<br />
domini PDZ me<strong>di</strong>ano la maggior parte <strong>di</strong> queste interazioni molecolari. Uno degli obiettivi<br />
principali della nostra ricerca consiste ora nel valutare come queste interazioni sono regolate in<br />
risposta a stimoli normali e patologici. Per questo scopo, stiamo utilizzando approcci<br />
complementari <strong>di</strong> biologia cellulare e <strong>di</strong> biochimica. Un altro obiettivo consisterà<br />
nell’identificare nuove interazioni tra proteine (e i domini che me<strong>di</strong>ano queste associazioni)<br />
utilizzando tecniche <strong>di</strong> proteomica. Da ultimo, definiremo la rilevanza biologica <strong>di</strong> queste<br />
interazioni me<strong>di</strong>ante l’analisi genetica delle proteine giunzionali nell’organismo modello<br />
Caenorhab<strong>di</strong>tis elegans. Il fine ultimo <strong>di</strong> tutte queste linee <strong>di</strong> ricerca è l’identificazione <strong>di</strong><br />
determinanti molecolari per il possibile sviluppo <strong>di</strong> farmaci ad azione anti-infiammatoria.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Immunofarmacologia<br />
Identificazione del ruolo <strong>di</strong> nuovi recettori dell’immunità innata<br />
Nel Dipartimento negli ultimi anni sono state identificate nuove molecole dell’immunità innata,<br />
il recettore solubile pentrassina 3 (PTX3), il recettore TIR8, membro della superfamiglia dei<br />
recettori IL-1R/TLR e il recettore orfano per chemiochine LCCR. Il laboratorio ha<br />
significativamente contribuito alla definizione del ruolo <strong>di</strong> queste molecole grazie alla<br />
generazione <strong>di</strong> animali geneticamente mo<strong>di</strong>ficati e allo stu<strong>di</strong>o del loro fenotipo in con<strong>di</strong>zioni<br />
fisiologiche o patologiche in contesti infiammatori e infettivi. Inoltre questi animali sono stati<br />
utilizzati nel laboratorio per la generazione <strong>di</strong> anticorpi monoclonali specifici, sfruttando la loro<br />
121<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
assenza <strong>di</strong> tolleranza verso la molecola <strong>di</strong> cui sono deficienti.<br />
Gli stu<strong>di</strong> su PTX3 hanno messo in evidenza il ruolo non ridondante <strong>di</strong> questa molecola<br />
nell’immunità innata in infezioni fungine opportuniste e il suo ruolo <strong>di</strong> componente strutturale<br />
della matrice extracellulare del cumulo ooforo e verosimilmente in altre matrici extracellulari<br />
prodotte in con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> infiammazione. I risultati ottenuti hanno permesso <strong>di</strong> avviare uno<br />
stu<strong>di</strong>o sull'applicazione farmacologica <strong>di</strong> questa molecola nelle infezioni fungine <strong>di</strong> pazienti<br />
immunodepressi.<br />
Gli stu<strong>di</strong> condotti su TIR8 hanno permesso <strong>di</strong> identificare il ruolo <strong>di</strong> questo recettore. TIR8 è<br />
una molecola espressa a livello <strong>di</strong> cellule epiteliali e <strong>di</strong> cellule dendritiche che si associa al<br />
recettore <strong>di</strong> IL-1 e ad alcuni membri della famiglia dei TLR ed esercita un ruolo <strong>di</strong> controllo<br />
negativo sulla produzione <strong>di</strong> citochine che consegue all'attivazione <strong>di</strong> questi recettori da parte <strong>di</strong><br />
specifici ligan<strong>di</strong>. TIR8 è quin<strong>di</strong> una molecola con attività modulatoria dei processi <strong>di</strong><br />
infiammazione mucosale, in particolare nel tratto gastrointestinale.<br />
LCCR è un recettore orfano della famiglia dei recettori per chemiochine: i primi stu<strong>di</strong> condotti<br />
sugli animali geneticamente mo<strong>di</strong>ficati suggeriscono un ruolo per questa molecola nella<br />
regolazione della migrazione leucocitaria in contesti infiammatori.<br />
Un’altra linea <strong>di</strong> lavoro ha riguardato lo stu<strong>di</strong>o filogenetico dei membri della famiglia delle<br />
pentrassine, realizzato analizzando le sequenze depositate nelle banche dati delle pentrassine <strong>di</strong><br />
<strong>di</strong>verse specie e lo stu<strong>di</strong>o dell’espressione delle pentrassine lunghe dell’uomo e del topo in<br />
sottopopolazioni leucocitarie.<br />
Caratterizzazione del ruolo <strong>di</strong> D6, un recettore per chemochine silente<br />
All’interno <strong>di</strong> una linea <strong>di</strong> ricerca portata avanti nel Dipartimento da anni sullo stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong><br />
recettori “trappola” (decoy receptors) è stato caratterizzato un recettore per chemiochine,<br />
chiamato D6, espresso prevalentemente dalle cellule endoteliali dei vasi linfatici. D6 è stato<br />
definito un recettore “promiscuo”, in quanto è in grado <strong>di</strong> legare molte chemiochine, indotte o<br />
aumentate nei processi infiammatori, della famiglia delle CC chemiochine. Il lavoro svolto in<br />
collaborazione con l’<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Patologia Generale della Facoltà <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina, Università degli<br />
Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano, ha permesso <strong>di</strong> definire D6 come recettore “spazzino”, che lega e rimuove le<br />
chemiochine infiammatorie, ma non manda alla cellula segnali attivatori noti. Queste<br />
caratteristiche e la sua localizzazione anatomica sui vasi linfatici suggeriscono che faccia parte<br />
<strong>di</strong> una strategia antiinfiammatoria, regolando la bio<strong>di</strong>sponibilità delle chemiochine e<br />
limitandone la loro <strong>di</strong>ffusione attraverso il sistema linfatico. E' attualmente in stu<strong>di</strong>o il ruolo <strong>di</strong><br />
D6 in vivo utilizzando topi KO per questo recettore.<br />
Generazione e caratterizzazione <strong>di</strong> una linea <strong>di</strong> cellule endoteliali linfatiche<br />
<strong>di</strong> topo<br />
Il sistema linfatico costituisce un importante meccanismo <strong>di</strong> sorveglianza immunologica,<br />
filtrando la linfa e gli antigeni in essa contenuti attraverso la catena dei linfono<strong>di</strong>. Abbiamo<br />
isolato, stabilizzato e caratterizzato una linea <strong>di</strong> cellule endoteliali da vasi linfatici iperplastici <strong>di</strong><br />
topi. Le cellule esprimono i marcatori caratteristici delle cellule endoteliali linfatiche (VEGFR3,<br />
podoplanina, Prox-1 e D6). Producono inoltre citochine ed esprimono molecole <strong>di</strong> adesione, che<br />
vengono regolate da stimoli infiammatori. E’ quin<strong>di</strong> <strong>di</strong>sponibile uno strumento per lo stu<strong>di</strong>o<br />
delle interazioni tra endotelio linfatico e le cellule che circolano in questi vasi fisiologicamente,<br />
come i leucociti, o in con<strong>di</strong>zioni patologiche, come le cellule tumorali.<br />
Chemochine e polarizzazione dei fagociti mononucleati<br />
Nella regolazione delle risposte immuni come nella infiammazione le cellule che presentano<br />
l’antigene, come i fagociti mononucleati e le cellule dendritiche, svolgono un ruolo centrale. Il<br />
microambiente in cui i monociti <strong>di</strong>fferenziano a macrofagi influenza la loro maturazione ed<br />
attivazione. I macrofagi detti <strong>di</strong> tipi I (M1) <strong>di</strong>fferenziano in presenza <strong>di</strong> stimoli come IFNg e<br />
122<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
LPS e sono coinvolti in risposte come DTH e controllo dei patogeni intracellulari, mentre i<br />
macrofagi <strong>di</strong> tipo II (M2) sono una popolazione più eterogenea, indotta dall’esposizione a IL-<br />
4/IL-13, o IL-10 o immunocomplessi e stimoli infiammatori, e partecipano al riparo e<br />
rimodellamento dei tessuti, allergie, immunoregolazione e risposta agli elminti. Anche la<br />
produzione <strong>di</strong> chemochine <strong>di</strong>fferisce nei macrofagi ottenuti in microambienti specifici. In<br />
particolare abbiamo osservato che la presenza <strong>di</strong> immunocomplessi e stimoli infiammatori<br />
induce macrofagi con capacità <strong>di</strong> produzione <strong>di</strong> CCL1 regolata in modo unico, essendo inibita<br />
da citochine sia <strong>di</strong> tipo 1 che <strong>di</strong> tipo 2. Il controllo <strong>di</strong> circuiti specifici <strong>di</strong> chemochine e citochine<br />
può portare ad approcci terapeutici per malattie me<strong>di</strong>ate da immunocomplessi.<br />
Farmacologia<br />
La comprensione dei circuiti delle citochine è necessaria per riconsiderare il modo <strong>di</strong> agire <strong>di</strong><br />
agenti immunosoppressivi/antiinfiammatori classici come per es.gli ormoni glucocorticoi<strong>di</strong>.<br />
Vengono stu<strong>di</strong>ati nuovi farmaci, con attività antiinfiammatoria e meccanismi d’azione ancora<br />
non noti, per i loro effetti sulla produzione <strong>di</strong> citochine e chemiochine o per la loro capacità <strong>di</strong><br />
interferire con i recettori specifici. In particolare l’attivazione e la modulazione dei recettori per<br />
le chemiochine hanno mostrato avere un ruolo importante nei processi infiammatori acuti e<br />
cronici. L’antagonismo <strong>di</strong> questi recettori rappresenta quin<strong>di</strong> un importante target per<br />
l’identificazione <strong>di</strong> nuovi agenti terapeutici con attività antiinfiammatoria e/o<br />
immunomodulatoria. In questa ottica è stato condotto uno stu<strong>di</strong>o sulla ricerca <strong>di</strong> nuovi composti<br />
in grado <strong>di</strong> interferire con il recettore CCR2, <strong>di</strong> cui è stato documentato in letteratura il ruolo<br />
importante in patologie infiammatorie croniche, come l’aterosclerosi e l’artrite reumatoide.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia Cellulare<br />
Caratterizzazione <strong>di</strong> nuovi circuiti <strong>di</strong> regolazione dell'infiammazione e<br />
immunità innata<br />
I fattori dell'infiammazione e dell'immunità innata regolano in modo determinante l'avvio della<br />
risposta immunitaria, nonchè la sua amplificazione e polarizzazione. I me<strong>di</strong>atori infiammatori<br />
sono anche fortemente coinvolti nei meccanismi patogenetici <strong>di</strong> numerose malattie a elevato<br />
impatto sociale, quali infezioni, malattie auto-immuni, tumori. Vi è quin<strong>di</strong> un grande interesse<br />
nello sviluppare nuove strategie terapeutiche per modulare appropriatamente<br />
(stimolare/sopprimere) la risposta infiammatoria/immunitaria.<br />
Recettori decoy (trappola) per citochine e chemiochine infiammatorie<br />
I recettori decoy sono in grado <strong>di</strong> legare in modo specifico il loro ligando, ma non sono in grado<br />
<strong>di</strong> trasdurre a valle il segnale, essi fungono quin<strong>di</strong> da sequestratori del ligando. Il nostro<br />
laboratorio ha collaborato alla identificazione del primo recettore decoy: il recettore <strong>di</strong> tipo II <strong>di</strong><br />
IL-1 (Colotta et al. Science, 1993). Il nostro gruppo ha recentemente <strong>di</strong>mostrato l'esistenza <strong>di</strong><br />
decoy funzionali (cioè strutturalmente integri, ma lo stesso incapaci <strong>di</strong> segnalare) nel sistema<br />
delle citochine chemiotattiche/chemiochine. I recettori per chemiochine infiammatorie su cellule<br />
dendritiche e monociti vengono funzionalmente <strong>di</strong>saccoppiati dalle componenti che trasmettono<br />
il segnale, quando le cellule sono esposte a una combinazione <strong>di</strong> segnali pro- e antiinfiammatori,<br />
quali IL-10 e LPS e IFN gamma. Vengono così generati dei recettori decoy<br />
"funzionali" che hanno la funzione <strong>di</strong> eliminare le chemiochine infiammatorie dal tessuto e <strong>di</strong><br />
attivare quin<strong>di</strong> un circuito <strong>di</strong> blocco dell'infiammazione. Sono stati definiti i meccanismi<br />
molecolari che sottendono al <strong>di</strong>saccoppiamento <strong>di</strong> questi recettori decoy. Infine è stata<br />
caratterizzata la molecola D6 come decoy promiscuo per chemochine infiammatorie.<br />
123<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Biologia delle cellule che presentano gli antigeni: le cellule dendritiche<br />
Le cellule dendritiche (DC) sono leucociti professionisti nella presentazione degli antigeni e<br />
svolgono un ruolo in<strong>di</strong>spensabile nell'avviare, amplificare e polarizzare la risposta immunitaria.<br />
Da alcuni anni lo stu<strong>di</strong>o della biologia delle DC è stu<strong>di</strong>ata da <strong>di</strong>versi gruppi del nostro<br />
Dipartimento. I principali progetti sono i seguenti:<br />
1) Differenziazione in vitro <strong>di</strong> colture <strong>di</strong> DC umane a partire da precursori (monociti, cellule<br />
CD34+),<br />
2) Isolamento <strong>di</strong> sottopopolazioni <strong>di</strong> DC umane circolanti (DC mieloi<strong>di</strong>, DC plasmacitoi<strong>di</strong>)<br />
3) Modulazione del <strong>di</strong>fferenziamento/attivazione <strong>di</strong> DC con fattori pro/anti-infiammatori, nuovi<br />
modulatori della risposta immunitaria, farmaci.<br />
4) Analisi delle funzioni biologiche delle DC: cattura e presentazione dell'Ag; produzione <strong>di</strong><br />
fattori importanti nella risposta infiammatoria/immunitaria (citochine/chemiochine, PTX3) e<br />
polarizzazione delle risposte Th1/2 e T reg; risposta migratoria a fattori chemiotattici, incluse<br />
nuove chemiochine.<br />
5) Analisi e caratterizzazione <strong>di</strong> recettori <strong>di</strong> membrana il cui ruolo è importante nella biologia <strong>di</strong><br />
DC, in particolare nuovi recettori coinvolti nella risposta immunitaria innata (TLR, PTX3, Ctype<br />
lectin R (recettore del mannosio); nuovi recettori chemiotattici).<br />
6) Profilo <strong>di</strong> espressione genica <strong>di</strong> DC umane stimolate con fattori infiammatori/antiinfiammatori<br />
me<strong>di</strong>ante tecniche Affimetrix.<br />
Ruolo del sistema immunitario all'interfaccia col tumore<br />
Oltre alla componente propriamente tumorale, il tumore è composto da cellule stromali:<br />
endoteliali, fibloblasti, leucociti. Questo laboratorio stu<strong>di</strong>a da molti anni il ruolo dei leucociti<br />
che infiltrano il tessuto neoplastico e ha descritto in passato come queste cellule possano essere<br />
<strong>di</strong> interesse per nuove strategie <strong>di</strong> immunoterapia. In particolare, il principale interesse del<br />
progetto è lo stu<strong>di</strong>o del fenotipo cellulare e molecolare dei Macrofagi Associati a Tumore<br />
(TAM), nella prospettiva <strong>di</strong> esplorare il potentiale uso <strong>di</strong> queste cellule per la terapia contro i<br />
tumori. Il nostro interesse si basa su nostri precedenti stu<strong>di</strong> sulle alterazioni molecolari e<br />
funzionali dei TAM, che suggeriscono alcuni meccanismi molecolari responsabili delle loro<br />
attività protumorali e immunosoppressive. Ad esempio i TAM isolati dall'ascite <strong>di</strong> carcinoma<br />
ovarico umano, mostrano una produzione <strong>di</strong>fettiva <strong>di</strong> Interleuchina-12 (IL-12), una citochina<br />
centrale nell’ attivazione <strong>di</strong> infiammazione e immunità e nella generazione delle risposte <strong>di</strong> tipo<br />
Th1, e producono invece livelli elevati <strong>di</strong> IL-10, una citochina fortemente immunosopressiva.<br />
Tra le molecole che me<strong>di</strong>ano un fenotipo immunosoppressivo, e' in stu<strong>di</strong>o un recettore <strong>di</strong><br />
membrana, il Mannose Receptor, che lega varie proteine glicosilate, tra cui mucine tumorali, e<br />
che puo' indurre la produzione <strong>di</strong> IL-10.<br />
Basi biologiche della <strong>di</strong>sseminazione tumorale: ruolo dei recettori per<br />
chemochine<br />
Il processo <strong>di</strong> metastatizzazione tumorale mostra sorpredenti somiglianze con la migrazione dei<br />
leucociti nei tessuti, che è strettamente regolata dalle chemiochine. Stu<strong>di</strong> recenti hanno rivelato<br />
che anche i tumori esprimono alcuni recettori per chemiochine e che questi possono essere<br />
coinvolti nella <strong>di</strong>sseminazione del tumore. La caratterizzare dell'espressione dei recettori per<br />
chemiochine su linee tumorali <strong>di</strong> origine pancreatica ha in<strong>di</strong>cato che alcuni tumori esprimono il<br />
CXCR4 (recettore per CXCL12). In uno stu<strong>di</strong>o recente abbiamo <strong>di</strong>mostrato che le linee<br />
tumorali pancreatiche che esprimono il recettore CXCR4 hanno maggiore mobilità in risposta<br />
alla chemochina CXCL12. Inoltre, il signalling attraverso il recettore CXCR4 aumenta la<br />
capacità proliferativa delle cellule tumorali e la loro capacità <strong>di</strong> sopravvivenza in con<strong>di</strong>zioni<br />
subottimali.<br />
124<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Laboratorio <strong>di</strong> Infiammazione e Trasduzione del Segnale<br />
IRFMN<br />
Le cellule dendritiche: una popolazione migratoria<br />
Le cellule dendritiche hanno un ruolo chiave nell'induzione della risposta immunitaria. Per<br />
compiere questa funzione devono migrare in modo regolato nei tessuti e negli organi linfoi<strong>di</strong><br />
secondari. In collaborazione con il laboratorio <strong>di</strong> Immunologia Cellulare, questo gruppo ha<br />
caratterizzato, alcuni anni fa, l'espressione dei recettori per chemochine in cellule dendritiche.<br />
La regolazione dei recettori da parte <strong>di</strong> stimoli infiammatori ha portato alla formulazione del<br />
para<strong>di</strong>gma dello "switch recettoriale" durante la maturazione <strong>di</strong> queste cellule. In circolo, le<br />
cellule dendritiche comprendono le cellule dendritiche mieloi<strong>di</strong> (M-DC) e le cellule dendritiche<br />
plasmacito<strong>di</strong> (P-DC). Questi due tipi cellulari svolgono un ruolo peculiare nell’attivazione<br />
dell’immunità adattativa e sono caratterizzati da una <strong>di</strong>versa <strong>di</strong>stribuzione tissutale in situazioni<br />
fisiologiche e patologiche. Questo gruppo ha definito le basi molecolari responsabili per la loro<br />
<strong>di</strong>versa <strong>di</strong>stribuzione tissutale, <strong>di</strong>mostrando che queste due popolazioni esprimono un <strong>di</strong>verso<br />
repertorio <strong>di</strong> recettori chemiotattici. Inoltre, questo gruppo ha recentemente in<strong>di</strong>viduato un<br />
nuovo recettore chemiotattico espresso dalle P-DC che è responsabile del loro reclutamento a<br />
livello degli organi linfoi<strong>di</strong> secondari e ai siti periferici nel corso <strong>di</strong> patologie infiammatorie e<br />
autoimmuni. Per meglio approfon<strong>di</strong>re i meccanismi responsabili della migrazione <strong>di</strong> cellule<br />
dendritiche nei tessuti sono in fase <strong>di</strong> caratterizzazione due nuovi recettori per chemochine. Il<br />
primo FPRL2 è stato recentemente identificato come il recettore per un peptide (F2L) che<br />
origina da una proteina citosolica che viene rilasciata in situazioni <strong>di</strong> danno tissutale. Il secondo,<br />
HCR, è tuttora un recettore "orfano", in quanto il suo ligando è ancora sconosciuto, che viene<br />
indotto durante la maturazione delle cellule dendritiche.<br />
Trasduzione del segnale <strong>di</strong> recettori per chemochine<br />
L'ingaggio dei recettori per chemochine attiva <strong>di</strong>verse vie <strong>di</strong> trasduzione del segnale. In<br />
collaborazione con il Prof. Hirsch (Università <strong>di</strong> Torino) abbiamo <strong>di</strong>mostrato che l'ingaggio dei<br />
recettori per chemochine attiva l'isoforma gamma della phosphoinositide3 kinasi (PI3Kg).<br />
L'attivazione <strong>di</strong> questo enzima ha un ruolo cruciale nella chemiotassi <strong>di</strong> cellule fagocitiche e<br />
cellule dendritiche. Topi geneticamente mo<strong>di</strong>ficati per questo enzima (PI3Kg-/-) hanno un<br />
<strong>di</strong>fetto grave della migrazione delle cellule dendritiche in vitro e in vivo. Il <strong>di</strong>fetto <strong>di</strong> migrazione<br />
delle cellule dendritiche è associato ad una ridotta capacità dei topi PI3Kg-/- <strong>di</strong> sviluppare<br />
risposte immunitarie antigene specifiche. Questi risultati identificano la PI3Kg-/- come un<br />
possibile bersaglio farmacologico per tutte quelle malattie che sono caratterizzate da un<br />
eccessiva attivazione delle risposte immunitarie, quali le malattie allergiche e autoimmuni.<br />
Le cellule dendritiche come cellule effettrici dell’immunità innata<br />
Le cellule dendritiche svolgono il ruolo <strong>di</strong> “interruttori” delle risposte dell’immunità specifica.<br />
Tuttavia stu<strong>di</strong> recenti stanno delineando per queste cellule un importante ruolo regolatorio anche<br />
nell’ambito dell’immunità specifica. Infatti, le cellule dendritiche non solo rispondono ai fattori<br />
chemiotattici ma sono anche in grado <strong>di</strong> produrre elevati livelli <strong>di</strong> molte chemochine. La<br />
chemochina MDC/CCL2 è prodotta in gran<strong>di</strong> quantità da DC in vitro e in vivo, sopratutto in<br />
con<strong>di</strong>zioni patologiche che sono caratterizzate da una polarizzazione dei lifociti Th2 (dermatiti<br />
allergiche). La produzione <strong>di</strong> PARC/CCL18 è invece selettivamente inibita durante la<br />
maturazione delle DC e rappresenta verosimilmente un meccanismo <strong>di</strong> inibizione della risposta<br />
infiammatoria in con<strong>di</strong>zioni omeostatiche. Infine, le cellule dendritiche sono in grado <strong>di</strong><br />
degradare batteri me<strong>di</strong>ante la produzione <strong>di</strong> ra<strong>di</strong>cali dell’ossigeno prodotti in seguito<br />
all’attivazione della NADPH ossidasi. Questo meccanismo contribuisce ad evitare la<br />
<strong>di</strong>sseminazione dei patogeni dai siti periferici agli organi linfoi<strong>di</strong> secondari.<br />
125<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia Molecolare<br />
IRFMN<br />
Identificazione dei meccanismi molecolari che promuovono il fenotipo<br />
protumorale dei macrofagi associati a tumore (TAM)<br />
Il <strong>di</strong>partimento <strong>di</strong> Immunologia e Biologia Cellulare esprime da lungo tempo un forte interesse<br />
sulla relazione funzionale fra i tumori e il sistema immunitario. Nel recente passato, ha<br />
contribuito in modo significativo a descrivere la biologia dei macrofagi nel contesto del<br />
microambiente tumorale. I Macrofagi-Associati a Tumore (TAM) rappresentano la componente<br />
infiammatoria predominante dell’infiltrato dei tumori. Queste cellule influenzano vari aspetti<br />
del tessuto neoplastico favorendo la progressione tumorale. Su tali basi, il laboratorio è<br />
principalmente focalizzato sulla caratterizzazione del fenotipo molecolare <strong>di</strong> queste cellule, nel<br />
tentativo <strong>di</strong> identificare bersagli molecolari utili in nuove terapie antitumorali.<br />
I tumori soli<strong>di</strong> sono costituiti da cellule maligne e da stroma. Questi due compartimenti sono<br />
strettamente inter<strong>di</strong>pendenti, influenzandosi reciprocamente. In particolare, i fagociti<br />
mononucleati sono una importante componente dello stroma dei tumori e possono rappresentare<br />
sino al 50% della massa tumorale. Queste cellule stabiliscono una relazione simbiotica con i<br />
tumori e vari stu<strong>di</strong> hanno <strong>di</strong>mostrato una correlazione negativa fra il numero dei TAM e la<br />
prognosi <strong>di</strong> pazienti con tumore. Varie molecole, incluso chemochine, citochine e fattori<br />
microambientali come l’ipossia, sono convolti nel reclutamento e nell’attivazione delle attivita’<br />
funzionali dei TAM. I TAM sono considerati parte importante della risposta infiammatoria che<br />
in molte circostanze promuove la crescita e la progressione tumorale. Il nostro laboratorio ha<br />
recentemente descritto il profilo <strong>di</strong> espressione genica dei TAM, fornendo nuove informazioni<br />
sui meccanismi molecolari che promuovono il loro fenotipo funzionale. Questi stu<strong>di</strong> tendono a<br />
fornire informazioni sulla biologia dei TAM e nuovi elementi per terapie antitumorali<br />
innovative. La formulazione <strong>di</strong> strategie per il controllo del numero dei TAM e la riattivazione<br />
del loro potenziale antitumorale rappresenta l’obiettivo centrale del progetto.<br />
Segnali <strong>di</strong> traduzione per l’attivazione dei TAM<br />
I macrofagi sono cellule dell’immunità innata con un elevata plasticità funzionale, in grado <strong>di</strong><br />
rispondere a stimoli ambientali me<strong>di</strong>ante programmi funzionali <strong>di</strong>versi. I macrofagi classici o<br />
M1 vengono attivati in risposta a prodotti microbici e Interferone-g, ed esprimono funzioni<br />
infiammatorie e citotossiche. Le informazioni <strong>di</strong>sponibili sui TAM definiscono queste cellule<br />
come macrofagi polarizzati alternativamente o M2, principalmente orientati<br />
all’immunosoppressione, angiogenesi e riparazione dei tessuti. Ciò suggerisce che i tumori<br />
possono selezionare macrofagi che esprimono attività protumorali. Abbiamo quin<strong>di</strong><br />
recentemente svolto analisi biochimiche per definire i segnali <strong>di</strong> trasduzione promossi da stimoli<br />
<strong>di</strong> attivazione classica M1, come LPS e Interferone-g, nei TAM. I risultati ottenuti sono in linea<br />
con il profilo <strong>di</strong> espressione genica dei TAM e forniscono un profilo molecolare in accordo con<br />
il fenotipo <strong>di</strong> queste cellule. I TAM risultano <strong>di</strong>fettivi per l’espressione <strong>di</strong> citochine<br />
proinfiammatorie (IL-12, TNF-a, IL-6) e per l’attivazione <strong>di</strong> NF-kB, mentre esprimono alti<br />
livelli della citochina immunosoppressiva IL-10. Lo stu<strong>di</strong>o dei mecccanismi molecolari che<br />
guidano questo stato <strong>di</strong> tolleranza è parte importante della ricerca in corso e alcuni dati<br />
preliminari in<strong>di</strong>cano l’alta espressione dell’omo<strong>di</strong>mero inibitorio p50 NF-kB nei TAM come un<br />
possibile me<strong>di</strong>atore. Evidenze in vitro e in vivo sembrano confermare tale ipotesi. Un’ulteriore<br />
analisi del sistema NF-kB, con particolare rilievo all’avvia MyD88-<strong>di</strong>pendente e –in<strong>di</strong>pendente<br />
è attualmente in corso.<br />
126<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Effetti dell’ipossia sul reclutamento dei TAM<br />
I tessuti neoplastici sono caratterizzati da una vascolarizzazione <strong>di</strong>sor<strong>di</strong>nata e da conseguente<br />
ipossia. I TAM si accumulano preferenzialmente nelle regioni scarsamente vascolarizzate dei<br />
tumori, caratterizzate da bassa tensione <strong>di</strong> ossigeno. Alcune evidenze suggeriscono che in<br />
ipossia i TAM cooperano con i tumori per promuovere la formazione <strong>di</strong> nuovi vasi,<br />
angiogenesi. Il nostro gruppo ha recentemente descritto come l’ipossia induca l’espressione<br />
selettiva del recettore CXCR4 in varie cellule, compreso i fagociti mononucleati. Questa<br />
osservazione sottolinea l’importanze del circuito ipossia/HIF-1/CXCR4 nel reclutamento e<br />
attivazione dei TAM nel sito tumorale. Gli effetti dell’ipossia sul sistema delle chemochine<br />
saranno ulteriormente stu<strong>di</strong>ati analizzando altri recettori delle chemochine, in <strong>di</strong>versi tipi<br />
cellulari. Il gene tumore-soppressivo PTEN, la cui espressione viene persa in molti tumori, è<br />
coinvolto nel controllo dell’espressione <strong>di</strong> molti geni induribili da ipossia. L’impatto della<br />
per<strong>di</strong>ta della sua espressione sul sistema delle chemochine e sulla formazione delle metastasi<br />
sarà investigato in <strong>di</strong>versi tipi <strong>di</strong> cancro.<br />
Recupero del fenotipo antitumorale dei TAM<br />
Possibili strategie antitumorali che coinvolgono i TAM prevedono la riduzione del loro numero<br />
e il recupero delle loro attività tumoricide. L’identificazione delle alterazioni molecolari che<br />
controllano l’espressione genica e il reclutamento dei TAM può quin<strong>di</strong> condurre<br />
all’identificazione <strong>di</strong> bersagli molecolari utili nella terapia antitumorale. Esperimenti ex vivo ed<br />
in vivo sono in corso allo scopo <strong>di</strong> ridurre il reclutamento dei TAM e ripristinare le loro attività<br />
antitumorali. Inibitori <strong>di</strong> HIF-1 verranno usati in vivo in topi portatori <strong>di</strong> tumore, per testare la<br />
loro capacità <strong>di</strong> limitare il reclutamento intratumorale <strong>di</strong> queste cellule, la progressione tumorale<br />
e la formazione <strong>di</strong> metastasi. Una strategia alternativa prevede la riduzione dei livelli <strong>di</strong><br />
espressione della proteina p50 NF-?B nei TAM e la valutazione dei suoi effetti sulla crescita del<br />
tumore. L’uso <strong>di</strong> animali ingegnerizzati e <strong>di</strong> strategie molecolari in grado <strong>di</strong> modulare in vivo i<br />
livelli <strong>di</strong> espressione <strong>di</strong> p50 NF-?B (RNA Interference), sarà utilizzata per validare questi<br />
meccanismi come possibili bersagli terapeutici.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> per lo Stu<strong>di</strong>o dei Sistemi Biologici<br />
Caratterizzazione funzionale <strong>di</strong> Junctional Adhesion Molecule-A (JAM-A)<br />
JAM-A è una molecola <strong>di</strong> membrana che si localizza alle giunzioni intercellulari. In questi<br />
ultimi anni, abbiamo scoperto che JAM-A lega proteine intracellulari della famiglia PDZ, le<br />
quali contengono domini <strong>di</strong> interazione proteina-proteina. Di recente, abbiamo caratterizzato il<br />
ruolo funzionale <strong>di</strong> queste interazioni. In collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Biologia<br />
Vascolare, abbiamo caratterizzato una linea cellulare endoteliale che non esprime JAM-A e<br />
abbiamo osservato che l’assenza <strong>di</strong> JAM-A porta ad aumentata motilità cellulare, alterata<br />
stabilità dei microtubuli, e ridotta formazione dei focal adhesions (i punti <strong>di</strong> contatto tra cellule e<br />
matrice extracellulare). Tutti questi cambiamenti funzionali sono prevenuti in seguito ad<br />
espressione <strong>di</strong> JAM-A a catena lunga, ma non in seguito ad espressione <strong>di</strong> una forma mutata <strong>di</strong><br />
JAM-A che non è in grado <strong>di</strong> legare le proteine PDZ. Queste osservazioni mettono in luce un<br />
nuovo meccanismo <strong>di</strong> inibizione della motilità, che non <strong>di</strong>pende dal contatto cellula-cellula e<br />
che è me<strong>di</strong>ato da interazioni <strong>di</strong> tipo PDZ. Considerando il ruolo centrale della motilità cellulare<br />
in molti processi biologici, queste osservazioni sono <strong>di</strong> potenziale importanza per <strong>di</strong>verse<br />
con<strong>di</strong>zioni fisiologiche e patologiche, quali metastasi e infiammazione.<br />
127<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Regolazione funzionale <strong>di</strong> Junctional Adhesion Molecule-A (JAM-A) da<br />
parte <strong>di</strong> citochine infiammatorie<br />
JAM-A svolge un ruolo importante nelle risposte infiammatorie, quali la formazione <strong>di</strong> edema e<br />
la trasmigrazione dei leucociti. Sebbene sia noto che la citochina infiammatoria Tumor Necrosis<br />
Factor (TNF) induce il <strong>di</strong>sassemblaggio <strong>di</strong> JAM-A dalle giunzioni intercellulari, il meccanismo<br />
d’azione <strong>di</strong> questo effetto non è ancora stato caratterizzato in dettaglio. Di recente, abbiamo<br />
osservato che TNF aumenta la solubilità <strong>di</strong> JAM-A in detergenti non-ionici ed aumenta la<br />
quantità <strong>di</strong> JAM-A alla superficie cellulare che è solubile in questi detergenti. Inoltre, abbiamo<br />
osservato (me<strong>di</strong>ante citometria a flusso) che i livelli <strong>di</strong> JAM-A alla superficie cellulare sono più<br />
alti in seguito a trattamento con TNF. Poiché questi livelli più alti <strong>di</strong> JAM-A derivano dalle<br />
giunzioni intercellulari (e non da compartimenti intracellulari), noi proponiamo che TNF induca<br />
non solo il <strong>di</strong>sassemblaggio <strong>di</strong> JAM-A dalle giunzioni (e la sua successiva ri<strong>di</strong>stribuzione sulla<br />
superficie cellulare), ma anche la sua <strong>di</strong>spersione alla superficie in modo tale che JAM-A<br />
<strong>di</strong>viene più facilmente accessibile agli anticorpi utilizzati per l’analisi in citometria. Queste<br />
osservazioni sono importanti per evidenziare potenziali meccanismi <strong>di</strong> regolazione della<br />
permeabilità cellulare durante le risposte infiammatorie che potrebbero essere modulate da<br />
interventi farmacologici.<br />
128<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
DIPARTIMENTO DI BIOCHIMICA<br />
E FARMACOLOGIA MOLECOLARE<br />
PERSONALE<br />
IRFMN<br />
Capo Dipartimento <strong>Mario</strong> SALMONA, Dr.Sci.Prep.Alim.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biochimica e Chimica delle Proteine<br />
Capo Laboratorio <strong>Mario</strong> SALMONA, Dr.Sci.Prep.Alim.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia Molecolare<br />
Capo Laboratorio Enrico GARATTINI, Dr.Med.Chir.<br />
Unità <strong>di</strong> Struttura e Regolazione del Gene<br />
Capo Unità Mineko TERAO, Ph.D.Bioch.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Recettoriale<br />
Capo Laboratorio Tiziana MENNINI, Dr.Farm.<br />
Unità <strong>di</strong> Trasmissione Sinaptica<br />
Capo Unità Marco GOBBI, Dr.Farm.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Neuroimmunologia<br />
Capo Laboratorio Pietro GHEZZI, Biol.<br />
Unità <strong>di</strong> Farmacologia dello Shock Settico<br />
Capo Unità Pia VILLA, Dr.Farm.<br />
Unità dei Me<strong>di</strong>atori Biochimici dell’Infiammazione<br />
Capo Unità Maddalena FRATELLI, Dr.Sci.Biol.<br />
Unità delle Neuropatie Metaboliche<br />
Capo Unità Roberto BIANCHI, Dr.Sci.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Patologia Molecolare<br />
Capo Laboratorio Lavinia CANTONI, Dr.Sci.Biol.<br />
129<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
Il Dipartimento <strong>di</strong> Biochimica e Farmacologia Molecolare è composto da cinque laboratori con<br />
interessi scientifici e scopi <strong>di</strong> ricerca apparentemente eterogenei fra loro, ma accomunati dallo<br />
stu<strong>di</strong>o strutturale e funzionale <strong>di</strong> prodotti genici specifici e farmacologicamente rilevanti. A<br />
questo proposito per l'identificazione <strong>di</strong> nuove proteine che potrebbero rappresentare dei<br />
bersagli per la terapia farmacologica vengono utilizzate le classiche tecniche <strong>di</strong> biochimica e<br />
biologia molecolare. Le potenziali interazioni tra farmaci e proteine sono stu<strong>di</strong>ate anche a livello<br />
molecolare, utilizzando un'ampia varietà <strong>di</strong> approcci che vanno dagli stu<strong>di</strong> condotti sugli<br />
animali a simulazioni computazionali.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Identificazione delle tetracicline e della quinacrina come potenziali agenti terapeutici per il<br />
trattamento delle malattie da prioni.<br />
Sintesi e caratterizzazione chimico-fisica e biologica <strong>di</strong> pepti<strong>di</strong> dedotti dalla sequenza della<br />
proteina prionica.<br />
Identificazione <strong>di</strong> una correlazione tra sintesi del colesterolo e produzione <strong>di</strong> proteina prionica.<br />
Sviluppo <strong>di</strong> meto<strong>di</strong> <strong>di</strong> estrazione <strong>di</strong> proteine e <strong>di</strong> protocolli <strong>di</strong> purificazione <strong>di</strong> proteine<br />
attraverso elettroforesi bi<strong>di</strong>mensionale su gel.<br />
Messa a punto <strong>di</strong> meto<strong>di</strong> per l'analisi e l'identificazione <strong>di</strong> mo<strong>di</strong>fiche ossidative delle proteine,<br />
tra cui la glutationilazione.<br />
Identificazione <strong>di</strong> proteine me<strong>di</strong>ante analisi <strong>di</strong> spettrometria <strong>di</strong> massa e ricerca in banca dati.<br />
L'iperforina, presente negli estratti <strong>di</strong> Hypericum Perforatum, (utilizzati nelle forme lievi <strong>di</strong><br />
depressione), induce il sistema microsomiale epatico del metabolismo dei farmaci.<br />
Sviluppo <strong>di</strong> una linea cellulare motoneuronale che esprime in modo regolabile la proteina<br />
transattivatrice tTA per controllare l'espressione <strong>di</strong> geni <strong>di</strong> interesse per patologie<br />
motoneuronali.<br />
Sviluppo <strong>di</strong> un modello cellulare motoneuronale inducibile per lo stu<strong>di</strong>o della tossicità della<br />
forma mutata G93A <strong>di</strong> superossido <strong>di</strong>smutasi 1, presente in pazienti con sclerosi laterale<br />
amiotrofica familiare.<br />
La presenza nel motoneurone della forma mutata tossica G93A <strong>di</strong> superossido <strong>di</strong>smutasi 1 altera<br />
l'equilibrio elettrico e la morfologia dei mitocondri.<br />
L'epatotossicità del <strong>di</strong>clofenac è evidenziata da un aumento dell'enzima eme ossigenasi-1<br />
nell'epatocita.<br />
Identificazione dell’eritropoietina come agente neuroprotettivo ed in<strong>di</strong>viduazione <strong>di</strong> molecole<br />
con attività neuroprotettiva in modelli <strong>di</strong> ischemia cerebrale.<br />
Identificazione dell’effetto farmacologico dell’eritropoeitina nella neuropatia <strong>di</strong>abetica.<br />
Identificazione <strong>di</strong> derivati dell'eritropoietina che ne hanno mantenuta le attivita' neuroprotettive<br />
ma perso non quelle emopoietiche.<br />
Scoperta <strong>di</strong> proteine che sono reversibilmente regolate dallo stato <strong>di</strong> ossidoriduzione me<strong>di</strong>ante<br />
un processo detto glutationilazione.<br />
L’uso <strong>di</strong> molecole antiossidanti in modelli <strong>di</strong> sepsi permette <strong>di</strong> <strong>di</strong>minuire la risposta<br />
infiammatoria potenziando quella <strong>di</strong> <strong>di</strong>fesa immunitaria.<br />
Identificazione delle proteine esofacciali redox regolate.<br />
Il TNF è coinvolto nella degenerazione dei motoneuroni in un modello <strong>di</strong><br />
motoneurodegenerazione murina.<br />
Il Riluzolo riduce la per<strong>di</strong>ta <strong>di</strong> motoneuroni e la progressione clinica in un modello <strong>di</strong><br />
motoneurodegenerazione murina aumentando l'espressione <strong>di</strong> BDNF endogeno.<br />
130<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Sinaptosomi cerebrali in perfusione permettono <strong>di</strong> <strong>di</strong>stinguere derivati amfetamici neurotossici<br />
da quelli non neurotossici.<br />
Stu<strong>di</strong> sul funzionamento dei trasportatori del glutammato (EAATs) hanno permesso <strong>di</strong><br />
documentare che l’attività rilasciante del glutammato me<strong>di</strong>ata dagli EAATs (trasporto inverso) è<br />
funzionalmente <strong>di</strong>ssociata dalla ricaptazione del glutammato stesso.<br />
Stu<strong>di</strong> struttura-affinità condotti utilizzando analoghi del WB-4101 (prototipo degli antagonisti al<br />
recettore adrenergico alpha-1) hanno confermato i modelli farmacoforici del recettore alpha-1 e<br />
suggeriscono alcune mo<strong>di</strong>ficazioni strutturali importanti per aumentare l’affinità e la selettività<br />
<strong>di</strong> nuove molecole.<br />
Stu<strong>di</strong> in vitro suggeriscono che l’effetto antidepressivo degli estratti <strong>di</strong> iperico potrebbe essere<br />
dovuto all’effetto inibitorio dell’iperforina (uno dei potenziali principi attivi) sulla produzione <strong>di</strong><br />
IL6 a livello periferico, in accordo con il possibile ruolo delle citochine nella<br />
patogenesi/mantenimento della depressione.<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
Advanced Biology Center, Genova<br />
Centro Anemie Congenite, Ospedale Maggiore Policlinico, IRCCS, Dip. Me<strong>di</strong>cina Interna,<br />
Università <strong>di</strong> Milano<br />
Dip. Anatomia, Farmacologia, Me<strong>di</strong>cina Legale, Università <strong>di</strong> Torino<br />
Dip. Biotecnologie, Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano<br />
Dip. Chimica Biochimica e Biotecnologie per la Me<strong>di</strong>cina, Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano<br />
Dip. Chimica Farmaceutica e Tossicologica, Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano<br />
Dip. Farmaco-Chimico-Tecnologico, Università <strong>di</strong> Siena<br />
Dip. Farmacologia Me<strong>di</strong>ca, Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano<br />
Dip. Scienze Biochimiche, Università <strong>di</strong> Firenze<br />
Dip. Scienze Farmaceutiche, Università <strong>di</strong> Catania<br />
Dip. Scienze Farmaceutiche, Università <strong>di</strong> Genova<br />
Dip. Scienze <strong>Farmacologiche</strong>, Università <strong>di</strong> Milano<br />
Dip. Scienze Fisiologiche e <strong>Farmacologiche</strong>,Università <strong>di</strong> Pavia<br />
Dip. Scienze Molecolari, Università <strong>di</strong> Milano<br />
Dip. Stu<strong>di</strong> pre-clinici, Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano<br />
Facoltà <strong>di</strong> Biologia, Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano<br />
Facoltà <strong>di</strong> Chimica, Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano<br />
Facoltà <strong>di</strong> Chimica, Università <strong>di</strong> Ferrara<br />
Glaxosmithkline, Verona<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Biologia Molecolare Buzzati Traverso, Napoli<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Biome<strong>di</strong>cina e Immunologia Molecolare CNR, Palermo<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Clinica Neurologica, Ospedale Maggiore Policlinico, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Neuroscienze C.N.R., Pisa<br />
<strong>Istituto</strong> Nazionale dei Tumori, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> Nazionale dei Tumori, Napoli<br />
<strong>Istituto</strong> Nazionale Neurologico "C. Besta", Milano<br />
<strong>Istituto</strong> Oncologico Europeo, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> Regina Elena, Roma<br />
Lofarma Allergeni, Milano<br />
Newron Pharmaceuticals, Milano<br />
Ospedale Pe<strong>di</strong>atrico Bambino Gesù, Roma<br />
Ospedale Pe<strong>di</strong>atrico "Gaslini", Genova<br />
131<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Ospedale S. Gerardo, Monza<br />
Primo Dipartimento <strong>di</strong> Ostetricia e Ginecologia, Clinica Mangiagalli, Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong><br />
Milano<br />
Sigma-Tau, Pomezia<br />
Zambon, Milano<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
Boston College, Boston, MA, USA<br />
Case Western Research University, Cleveland, OH, USA<br />
Dept. de Biologia Cellular, Fac de Ciences Biologiques, Università <strong>di</strong> Valencia, Spagna<br />
Dept. de Bioquimica, Fac. Me<strong>di</strong>cina/Centro de Investigacion, Hospital Universitario La Fe,<br />
Valencia, Spagna<br />
Dept. de Quimica-Fisica de Macromoleculas Biologicas, CSIC, Madrid, Spagna<br />
Faculdad de Ciencias Me<strong>di</strong>cas, Universidad de Santiago de Chile, Cile<br />
Flanders Interuniversity Institute for Biotechnology (VIB) University of Gent, Belgio<br />
Giessen Polyclinic University, Giessen, Germania<br />
Houston University, TX, USA<br />
IBSN CNRS, Marseille, Francia<br />
In<strong>di</strong>ana University, In<strong>di</strong>anapolis, IN, USA<br />
Institut de Genetique et Biologie Moleculaire et Cellulaire, Strasbourg, Francia<br />
Institute Pasteur, Paris, Francia<br />
John Innes Centre, Norwich, Gran Bretagna<br />
Kenneth S. Warren Institute, Ossining, NY, USA<br />
Max-Planck-Institut für experimentelle Me<strong>di</strong>zin, Göttingen, Germania<br />
National Institute of Health, Bethesda, MD, USA<br />
Nippon University, Tokyo, Giappone<br />
North Shore University Hospital, Manhasset, NY, USA<br />
Pepscan System BV, Lelystad, Olanda<br />
Polichem S.A., Lugano, Switwerland<br />
Stanford University School of Me<strong>di</strong>cine, Stanford, CA, USA<br />
Technical University Braunschweig, Germania<br />
Trinity College, Dublin, Irlanda<br />
Universidad de La Laguna, Tenerife, Spagna<br />
Universidaed Nova, Lisbon, Portogallo<br />
Universitat des Saarlandes, Homburg, Germania<br />
Universitat Freiburg, Germania<br />
Universite Paris, Francia<br />
Université Victor Segalen Bordeaux 2, Bordeaux, Francia<br />
University of Car<strong>di</strong>ff, Gran Bretagna<br />
University of Colorado, School of Me<strong>di</strong>cine, Denver, CO, USA<br />
University of Glasgow, Gran Bretagna<br />
University of Gottingen, Germania<br />
University of Muenster, Germania<br />
University of Sussex, Gran Bretagna<br />
University of Vienna, Austria<br />
Waring-Webb Institute, University of Colorado, Denver CO, USA<br />
Weizmann Institut, Rehovot, Israele<br />
Westfaelische Wilhelms-Universitaet Muenster, Germania<br />
132<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Neurobiology of Lipids (L. Diomede)<br />
Neuroimmunomodulation (P. Ghezzi)<br />
Newsletters of the International Cytokine Society (P. Ghezzi)<br />
E<strong>di</strong>torial Board European Journal of Cancer (E. Garattini)<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
IRFMN<br />
American Journal Physiology, Biochemical Journal, Biochemical Pharmacology, Biochimica<br />
Biophysica Acta, Brain Research, Cancer Research, Cell Death and Differentiation, Circulation,<br />
Drug Investigation, European Journal of Cancer, European Journal of Immunology, European<br />
Journal of Neuroscience, International Journal of Cancer, Journal of Hepatology, Journal of<br />
Immunology, Journal of Lipid Me<strong>di</strong>ators, Journal of Neurochemistry, Pharmacological<br />
Research, Procee<strong>di</strong>ngs of the National Academy of Sciences.<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
Referee per MRC Career Development Award, Me<strong>di</strong>cal Research Council, London, UK<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
Workshop: “Proteomica: Una tecnica per molte applicazioni”, 6 Febbraio, Università<br />
dell’Insubria, Varese, Italia.<br />
Congresso: “Sixth World congress on Trauma, Shock, Inflammation and Sepsis”, “Effect of<br />
HMGB1 in the central nervous system”, 2-6 Marzo, Munich, Germania.<br />
Simposio: “PharmaBioTec”, “Role of Macromolecular Substances in the Prion Diseases”, 25-28<br />
Aprile, Trieste, Italia.<br />
Congresso: “Retreat DTI – Dulbecco Telethon Institute”, “Proteomic characterization of<br />
aggregates in a transgenic mouse model of familial amyotrophic lateral sclerosis”, 10-12<br />
Maggio, Piacenza, Italia.<br />
Congress: “IPSo (Italian Proteome Society)”, “Proteomic analysis of nitrated proteins in a<br />
mouse model of familial amyotrophic lateral sclerosis” , 27-29 Maggio, Verona, Italia.<br />
Workshop: “2nd European ALS Research Workshop”, “Riluzole protects against motor neuron<br />
degeneration in the wobbler mouse”, 14-16 Maggio, Nice, Francia.<br />
Meeting: “XL Riunione Annuale AINP - XXX Riunione Annuale AIRIC”, “Riluzole reduces<br />
motor neuron degeneration in the wobbler mouse in the absence of excitotoxicity”, 24-26<br />
Maggio, Padova, Italia.<br />
133<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Conferenza: “First International Conference of the European Network of Excellence<br />
NeuroPrion”, “Kinetics of PrP 82-146 fibril formation determined by surface plasmon<br />
resonance”, “PrP 82-146 oligomerization determined by photo-induced cross-linking”, “Effect<br />
of plasminogen gene <strong>di</strong>sruption in the development of scrapie in mice”, 24-28 Maggio, Parigi,<br />
Francia.<br />
Congresso: “6th European Epileptogenesis Congress”, “Anti-epileptic effects of botulinum<br />
toxin E”, 28 Maggio - 4 Giugno, Vienna, Austria.<br />
Simposio: “46th Nobel foundation Symposium”, 6-9 Giugno, Stoccolma, Svezia.<br />
Congresso: “4th Forum of European Neuroscience”, “Motor neuron degeneration in the wobbler<br />
mouse is reduced by riluzole through a mechanism independent from antiglutamatergic action”,<br />
“Retinal oxidation and apoptosis in the mnd mouse, a model of neuronal ceroid lipofuscinosis”,<br />
“Anti-epileptic effects of botulinum toxin E”, 10-14 Luglio, Lisbona, Portogallo.<br />
Congresso: “European Congress on Pharmacology- EPHAR <strong>2004</strong>”, “Characterization of the<br />
effects of two conformationally constrained aspartate and glutamate analogues on excitatory<br />
amino acid transporters”, 14-17 Luglio, Porto, Portogallo.<br />
Simposio: “Serotonin Satellite Symposium”, “New hypothesis for the role of 5-HT transporter<br />
in the effect of amphetamine derivatives in synaptosomes”, “Development of Potent and<br />
Selective Peripheral 5-HT3 Receptor Agonists and Antagonists, Keystones of a New<br />
Therapeutic Strategy to Car<strong>di</strong>ac Diseases”, 17-19 Luglio, Porto, Portogallo.<br />
Simposio: “XVII International Symposium on Me<strong>di</strong>cinal Chemistry”, “Development of Novel<br />
and Potent Atypical Antipsychotic Agents: Rational Design, an Elegant Palla<strong>di</strong>um-catalysed<br />
Route and Biological Stu<strong>di</strong>es”, 15-19 Agosto, Copenhagen, Danimarca.<br />
Meeting: “6th Siena Meeting from genome to proteome biomarker <strong>di</strong>scovery & imaging<br />
proteomes”, 30 Agosto - 2 Settembre, Siena, Italia.<br />
Congresso: “Convegno Nazionale della Divisione <strong>di</strong> Chimica Farmaceutica della Società<br />
Chimica Italiana”, “Sintesi <strong>di</strong> 1,2,4 triazoli come ligan<strong>di</strong> per i recettori delle endoteline”, “Aci<strong>di</strong><br />
(E)-a[(1H-indol-3-il)metilene]benzeneacetici: una nuova classe <strong>di</strong> ligan<strong>di</strong> per i recettori delle<br />
endoteline”, “3-Arilpiperazinilalchilpirrolo[3,2-d]pirimi<strong>di</strong>n-2,4-<strong>di</strong>one: una nuova classe <strong>di</strong><br />
ligan<strong>di</strong> potenti ed altamente selettivi per i recettori a1 adrenergici”, 6-10 Settembre, Pisa, Italia.<br />
Conferenza: “12th Euroconference on Apoptosis Chania”, “Erythropoietin prevents neuronal<br />
apoptosis and in neuroprotective in models of <strong>di</strong>sease of the nervous system”, 17-20 Settembre,<br />
Creta, Grecia.<br />
Congresso: “32° Congresso Nazionale della Società Italiana <strong>di</strong> Microbiologia (SIM)”, “Prioni e<br />
encefalopatie spongiformi”, 26-29 Settembre, Milano, Italia.<br />
Congresso: “Patologie degenerative del motoneurone: 1° convegno toscano”, "La presenza <strong>di</strong><br />
G93A-superossido <strong>di</strong>smutasi 1 aumenta la vulnerabilità dei motoneuroni con meccanismi che<br />
coinvolgono la funzionalità dei mitocondri", 7-10 Ottobre, Buonconvento, Siena, Italia.<br />
Meeting: “34th Annual Meeting of the Society For Neuroscience”, “In vitro characterization<br />
and in vivo tracking of magnetically labeled neural stem cells”, 23-27 Ottobre, San Diego, CA,<br />
USA.<br />
134<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
Associazione Italiana Ricerca sul Cancro (AIRC), Milano, Italia<br />
Biotecnologie BT - Perugia, Italia<br />
Comunità Europea, Bruxelles, Belgio<br />
Consiglio Nazionale delle <strong>Ricerche</strong> (CNR), Palermo, Italia<br />
Dompè, L' Aquila, Italia<br />
Fondazione Don Gnocchi, Milano, Italia<br />
Fondazione Cariplo, Milano, Italia<br />
Fondazione Mariani, Milano, Italia<br />
Fondazione Monzino, Milano, Italia<br />
Fondazione Weizmann-Pasteur-Negri, Parigi, Francia<br />
Indena, Milano, Italia<br />
<strong>Istituto</strong> Auxologico Italiano, Milano, Italia<br />
<strong>Istituto</strong> Nazionale Neurologico "C. Besta", Milano, Italia<br />
Kenneth S. Warren Institute, NY, USA<br />
Lundbeck A/S, Copenhagen, Danimarca<br />
Ministero della Salute, Roma, Italia<br />
Ministero dell'Istruzione, Università e Ricerca Scientifica (MIUR), Roma, Italia<br />
North Shore University Hospital, NY, USA<br />
Perfetti-Van Melle, Lainate (Mi), Italia<br />
Sigma Tau, Pomezia (Roma), Italia<br />
Telethon, Milano, Italia<br />
Università <strong>di</strong> Firenze, Italia<br />
Università <strong>di</strong> Milano-Bicocca, Italia<br />
Università <strong>di</strong> Siena, Italia<br />
Zambon Group, Bresso (Mi), Italia<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
Agnello D, Mascagni P, Bertini R, Villa P, Senal<strong>di</strong> G, Ghezzi P.<br />
Granulocyte colony-stimulating factor decreases tumor necrosis factor production in whole blood: role of interleukin-<br />
10 and prostaglan<strong>di</strong>n E(2).<br />
Eur Cytokine Netw. 15: 323-6, <strong>2004</strong><br />
Bate C, Salmona M, Williams A.<br />
Ginkgolide B inhibits the neurotoxicity of prions or amyloid-beta1-42.<br />
J Neuroinflammation. 1: 4, <strong>2004</strong><br />
Bate C, Salmona M, Williams A.<br />
The role of platelet activating factor in prion and amyloid-beta neurotoxicity.<br />
Neuroreport 15: 509-13, <strong>2004</strong><br />
Bate C, Salmona M, Diomede L, Williams A.<br />
Squalestatin cures prion-infected neurons and protects against prion neurotoxicity.<br />
J Biol Chem. 279: 14983-90, <strong>2004</strong><br />
Beghi E., Mennini T. and The Italian Network for the Study of Motor Neuron Disease.<br />
Basic and clinical research on amyotrophic lateral sclerosis and other motor neuron <strong>di</strong>sorders in Italy: recent fin<strong>di</strong>ngs<br />
and achievements from a network of laboratories.<br />
135<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Neurol. Sci. 25: S41-60, <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
Bertini R, Allegretti M, Bizzarri C, Moriconi A, Locati M, Zampella G, Cervellera MN, Di Cioccio V, Cesta MC,<br />
Galliera E, Martinez FO, Di Bitondo R, Troiani G, Sabbatini V, D'Anniballe G, Anacar<strong>di</strong>o R, Cutrin JC, Cavalieri B,<br />
Mainiero F, Strippoli R, Villa P, Di Girolamo M, Martin F, Gentile M, Santoni A, Corda D, Poli G, Mantovani A,<br />
Ghezzi P, Colotta F.<br />
Noncompetitive allosteric inhibitors of the inflammatory chemokine receptors CXCR1 and CXCR2: prevention of<br />
reperfusion injury.<br />
Proc Natl Acad Sci U S A. 101: 11791-6, <strong>2004</strong><br />
Bianchi R, Buyukakilli B, Brines M, Savino C, Cavaletti G, Oggioni N, Lauria G, Borgna M, Lombar<strong>di</strong> R, Cimen B,<br />
Comelekoglu U, Kanik A, Tataroglu C, Cerami A, Ghezzi P.<br />
Erythropoietin both protects from and reverses experimental <strong>di</strong>abetic neuropathy.<br />
Proc Natl Acad Sci U S A 101: 823-8, <strong>2004</strong><br />
Bigini P. and Mennini T.<br />
Immunohistochemical localization of TNFalpha and its receptors in the rodent central nervous system.<br />
Methods Mol Med 98: 73, <strong>2004</strong><br />
Bolchi C, Catalano P, Fumagalli L, Gobbi M, Pallavicini M, Pedretti A, Villa L, Vistoli G, Valoti E<br />
Structure-affinity stu<strong>di</strong>es for a novel series of homochiral naphtho and tetrahydronaphtho analogues of alpha1<br />
antagonist WB-4101 .<br />
Bioorganic and Me<strong>di</strong>cinal Chemistry 12: 4937-4951, <strong>2004</strong><br />
Bonecchi R, Locati M, Vulcano M, Sironi M, Fra A M, Gobbi M, Vecchi A, Sozzani S, Van Damme J, Mantovani A<br />
Differential recognition and scavenging of native and truncated macrophage-derived chemokine (Macrophage-<br />
Derived Chemokine/CC Chemokine Ligand 22) by the D6 decoy receptor.<br />
J Immunol.172: 4972-4976, <strong>2004</strong><br />
Boshuizen RS, Langeveld JP, Salmona M, Williams A, Meloen RH, Lange<strong>di</strong>jk JP.<br />
An in vitro screening assay based on synthetic prion protein peptides for identification of fibril-interfering<br />
compounds.<br />
Anal Biochem. 333: 372-80, <strong>2004</strong><br />
Brines M, Grasso G, Fiordaliso F, Sfacteria A, Ghezzi P, Fratelli M, Latini R, Xie QW, Smart J, Su-Rick CJ, Pobre<br />
E, Diaz D, Gomez D, Hand C, Coleman T, Cerami A.<br />
Erythropoietin me<strong>di</strong>ates tissue protection through an erythropoietin and common beta-subunit heteroreceptor.<br />
Proc Natl Acad Sci U S A. 101: 14907-12, <strong>2004</strong><br />
Campiani G, Butini S, Fattorusso C, Catalanotti B, Gemma S, Nacci V, Morelli E, Cagnotto A, Mereghetti I, Mennini<br />
T, Carli M, Minetti P, Di Cesare MA, Mastroianni D, Scafetta N, Galletti B, Stasi M A, Castorina M, Pacifici L,<br />
Vertechy M, Di Serio S, Ghirar<strong>di</strong> O, Tinti O and Carminati P.<br />
Pyrrolo[1,3]benzothiazepine-based serotonin and dopamine receptor antagonists. Molecular modeling, further<br />
structure-activity relationship stu<strong>di</strong>es, and identification of novel atypical antipsychotic agents.<br />
J Med Chem 47: 143, <strong>2004</strong><br />
Cosentino U, Vari MR, Saracino AA, Pitea D, Moro G, Salmona M.<br />
Tetracycline and its analogues as inhibitors of amyloid fibrils: searching for a geometrical pharmacophore by<br />
theoretical investigation of their conformational behavior in aqueous solution.<br />
J Mol Model (Online). <strong>2004</strong> [Epub ahead of print]<br />
Di Stasi D, Bernasconi R, Marchioli R, Marfisi RM, Rossi G, Tognoni G, Tacconi MT.<br />
Early mo<strong>di</strong>fications of fatty acid composition in plasma phospholipids, platelets and mononucleates of healthy<br />
volunteers after low doses of n-3 polyunsaturated fatty acids.<br />
Eur J Clin Pharmacol. 60 :183-90, <strong>2004</strong><br />
Fiordaliso F, Bianchi R, Staszewsky L, Cuccovillo I, Doni M, Laragione T, Salio M, Savino C, Melucci S,<br />
Santangelo F, Scanziani E, Masson S, Ghezzi P, Latini R.<br />
Antioxidant treatment attenuates hyperglycemia-induced car<strong>di</strong>omyocyte death in rats.<br />
J Mol Cell Car<strong>di</strong>ol. 37: 959-68, <strong>2004</strong><br />
Funicello M, Conti P, De Amici M, De Micheli C, Mennini T, Gobbi M.<br />
Dissociation of [3H]glutamate uptake from glutamate-induced [3H]D-aspartate release by 3-Hydroxy-<br />
136<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
4,5,6,6atetrahydro-3aH-pyrrolo[3,4-d]isoxazole-4-carboxylic Acid and 3-Hydroxy-4,5,6,6a-tetrahydro-3aHpyrrolo[3,4-d]isoxazole-6-carboxylic<br />
Acid, two conformationally constrained aspartate and glutamate analogues.<br />
Mol. Pharmacol. 66: 522-529, <strong>2004</strong><br />
Garattini E, Gianni M, Terao M.<br />
Retinoid related molecules an emerging class of apoptotic agents with promising therapeutic potential in oncology:<br />
pharmacological activity and mechanisms of action.<br />
Curr Pharm Des.10: 433-48 Review, <strong>2004</strong><br />
Garattini E, Parrella E, Diomede L, Gianni' M, Kalac Y, Merlini L, Simoni D, Zanier R, Ferrara FF, Chiarucci I,<br />
Carminati P, Terao M, Pisano C.<br />
ST1926, a novel and orally active retinoid-related molecule inducing apoptosis in myeloid leukemia cells: modulation<br />
of intracellular calcium homeostasis.<br />
Blood 103: 194-207, <strong>2004</strong><br />
Garattini E, Terao M.<br />
Atypical retinoids: an expan<strong>di</strong>ng series of anti-leukemia and anti-cancer agents<br />
endowed with selective apoptotic activity.<br />
J Chemother. 16, Suppl 4: 70-3, <strong>2004</strong><br />
Garlanda C, Bottazzi B, Bastone A, Mantovani A.<br />
Pentraxins at the Crossroads Between Innate Immunity, Inflammation, Matrix Deposition and Female Fertility.<br />
Annu Rev Immunol. <strong>2004</strong> [Epub ahead of print]<br />
Ghezzi P, Brines M.<br />
Erythropoietin as an antiapoptotic, tissue-protective cytokine.<br />
Cell Death Differ. 11: S37-44, <strong>2004</strong><br />
Ghezzi P, Cerami A.<br />
Tumor necrosis factor as a pharmacological target.<br />
Methods Mol Med. 98: 1-8. Review, <strong>2004</strong><br />
Ghezzi P, Ungheri D.<br />
Synergistic combination of N-acetylcysteine and ribavirin to protect from lethal influenza viral infection in a mouse<br />
model.<br />
Int J Immunopathol Pharmacol. 17: 99-102, <strong>2004</strong><br />
Gobbi M, Moia M, Funicello M, Riva A, Morazzoni P and Mennini T.<br />
In vitro effects of the <strong>di</strong>cyclohexylammonium salt of hyperforinon interleukin-6 release in <strong>di</strong>fferent experimental<br />
models.<br />
Planta Me<strong>di</strong>ca 70: 680-682, <strong>2004</strong><br />
Guarneri R, Russo D, Cascio C, D'Agostino S, Galizzi G, Bigini P, Mennini T and Guarneri P.<br />
Retinal oxidation, apoptosis and age- and sex-<strong>di</strong>fferences in the mnd mutant mouse, a model of neuronal ceroid<br />
lipofuscinosis.<br />
Brain Research 1014: 209, <strong>2004</strong><br />
Kurosaki M, Terao M, Barzago MM, Bastone A, Bernar<strong>di</strong>nello D, Salmona M, Garattini E.<br />
The aldehyde oxidase gene cluster in mice and rats. Aldehyde oxidase homologue 3, a novel member of the molybdoflavoenzyme<br />
family with selective expression in the olfactory mucosa.<br />
J Biol Chem. 279: 50482-98, <strong>2004</strong><br />
Leist M, Ghezzi P, Grasso G, Bianchi R, Villa P, Fratelli M, Savino C, Bianchi M, Nielsen J, Gerwien J, Kallunki P,<br />
Larsen AK, Helboe L, Christensen S, Pedersen LO, Nielsen M, Torup L, Sager T, Sfacteria A, Erbayraktar S,<br />
Erbayraktar Z, Gokmen N, Yilmaz O, Cerami-Hand C, Xie QW, Coleman T, Cerami A, Brines M.<br />
Derivatives of erythropoietin that are tissue protective but not erythropoietic.<br />
Science, 305: 239-42, <strong>2004</strong><br />
Meloni C, Ghezzi PM, Cipriani S, Petroni S, Del Poeta G, Rossini B, Rossi V, Recino G, Suppo G, Cecilia A,<br />
Casciani CU.<br />
One year of clinical experience in post<strong>di</strong>lution hemofiltration with online reinfusion of regenerated ultrafiltrate.<br />
Blood Purif. 22: 505-9, <strong>2004</strong><br />
137<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Mennini T and Bendotti C.<br />
Excitotoxicity in amyotrophic lateral sclerosis:selective vulnerability of motor neurons.<br />
in: Excitotoxicity in neurological <strong>di</strong>seases. New therapeutic challenge., eds. C. Ferrarese and M. Flint Beal (Kluwer<br />
Academic Publishers, Boston/Dordrecht/London) p. 217, <strong>2004</strong><br />
Mennini T, Bigini P, Cagnotto A, Carvelli L, Di Nunno P, Fumagalli E, Tortarolo M, Buurman WA, Ghezzi P,<br />
Bendotti C.<br />
Glial activation and TNFR-I upregulation precedes motor dysfunction in the spinal cord of mnd mice.<br />
Cytokine 25: 127-35, <strong>2004</strong><br />
Mennini T and Gobbi M.<br />
The Antidepressant Mechanism of Hypericum perforatum.<br />
Life Sci. 75: 1021-1027, <strong>2004</strong><br />
Mo<strong>di</strong>ca M, Romeo G, Materia L, Russo F, Cagnotto A, Mennini T, Gaspar R, Falkay G and Fulop F.<br />
Synthesis and bin<strong>di</strong>ng properties of novel selective 5-HT3 receptor ligands.<br />
Bioorganic and Me<strong>di</strong>cinal Chemistry 12: 3891, <strong>2004</strong><br />
Parrella E, Gianni' M, Cecconi V, Nigro E, Barzago MM, Rambal<strong>di</strong> A, Rochette-Egly C, Terao M, Garattini E.<br />
Phospho<strong>di</strong>esterase IV inhibition by piclamilast potentiates the cyto<strong>di</strong>fferentiating action of retinoids in myeloid<br />
leukemia cells. Cross-talk between the cAMP and the retinoic acid signaling pathways.<br />
J Biol Chem. 279: 42026-40, <strong>2004</strong><br />
Salustri A, Garlanda C, Hirsch E, De Acetis M, Maccagno A, Bottazzi B, Doni A, Bastone A, Mantovani G, Beck<br />
Peccoz P, Salvatori G, Mahoney DJ, Day AJ, Siracusa G, Romani L, Mantovani A.<br />
PTX3 plays a key role in the organization of the cumulus oophorus extracellular matrix and in in vivo fertilization.<br />
Development 131:1577-86, <strong>2004</strong> Erratum in: Development 131: 2235. <strong>2004</strong><br />
Santoro B, Bigini P, Levan<strong>di</strong>s G, Nobile V, Biggiogera M, Botti F, Mennini T and Curti D.<br />
Evidence for chronic mitochondrial impairment in the cervical spinal cord of a murine model of motor neuron <strong>di</strong>sease<br />
Neurobiol Dis 17: 349, <strong>2004</strong><br />
Vila R, Kurosaki M, Barzago MM, Kolek M, Bastone A, Colombo L, Salmona M, Terao M, Garattini E.<br />
Regulation and biochemistry of mouse molybdo-flavoenzymes. The DBA/2 mouse is selectively deficient in the<br />
expression of aldehyde oxidase homologues 1 and 2 and represents a unique source for the purification and<br />
characterization of aldehyde oxidase.<br />
J Biol Chem. 279: 8668-83, <strong>2004</strong><br />
Villa P, Ghezzi P.<br />
Animal models of endotoxic shock.<br />
Methods Mol Med. 98: 199-206, <strong>2004</strong><br />
Zhang D, Zhang G, Hayden MS, Greenblatt MB, Bussey C, Flavell RA, Gosh S, Leist M, Ghezzi P, Grasso G,<br />
Bianchi R, Villa P, Fratelli M, Savino C, Bianchi M, Nielsen J, Gerwien J, Kallunki P, Larsen A, Helboe L,<br />
Christensen S, Pedersen L, Nielsen M, Torup L, Sager TH, Sfacteria A, Erbayaktar S, Erbayaktar Z, Gokmen N,<br />
Yilmaz O, Cerami-Hand C, Xie Q, Coleman TH, Cerami A, Brines M, Torres VE, Wang X, Quian Q, Somlo ST,<br />
Harris P, Gattone V.<br />
A Novel Molecule Designed to Keep Bacteria out of the Urinary Tract: A Toll-Like Receptor that Prevents Infection<br />
by Uropathogenic Bacteria.<br />
Science 303: 1522-1526, <strong>2004</strong><br />
Zuco V, Zanchi C, Cassinelli G, Lanzi C, Supino R, Pisano C, Zanier R, Giordano V, Garattini E, Zunino F.<br />
Induction of apoptosis and stress response in ovarian carcinoma cell lines treated with ST1926, an atypical retinoid.<br />
Cell Death Differ. 11: 280-9, <strong>2004</strong><br />
138<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Farmacologia Recettoriale<br />
IRFMN<br />
Stu<strong>di</strong> sulla patologia del motoneurone I<br />
Stu<strong>di</strong> sulla patologia del motoneurone I<br />
Ci sono forti evidenze che complesse interazioni tra stress ossidativo, <strong>di</strong>sfunzioni mitocondriali,<br />
alterazioni <strong>di</strong> citochine e della trasmissione glutammatergica giochino un importante ruolo nella<br />
patogenesi <strong>di</strong> malattie del motoneurone come la sclerosi laterale amiotrofica. Abbiamo in corso<br />
progetti specifici su queste tematiche, alcuni in collaborazione con il <strong>di</strong>partimento <strong>di</strong><br />
neuroscienze (Dr. Beghi, Dr. Bendotti).<br />
Stu<strong>di</strong> in vitro: colture primarie <strong>di</strong> motoneuroni <strong>di</strong> ratto, esposte per 48 ore a basse<br />
concentrazioni <strong>di</strong> agonisti glutammatergici, vanno incontro a morte <strong>di</strong> tipo apoptotico mentre<br />
concentrazioni più elevate inducono morte <strong>di</strong> tipo non-apoptotico. Stiamo stu<strong>di</strong>ando i principali<br />
eventi intracellulari che si verificano in questi <strong>di</strong>versi meccanismi <strong>di</strong> morte cellulare, e stiamo<br />
testando nuovi potenziali trattamenti che interferiscano selettivamente con uno dei due<br />
meccanismi. Abbiamo, ad esempio, evidenziato che eritropoietina protegge i motoneuroni<br />
esclusivamente da morte apoptotica mentre acetilcarnitina è efficace per entrambi i processi,<br />
aumentando l'espressione <strong>di</strong> TrkB nei motoneuroni. Sono in corso stu<strong>di</strong> con un peptide inibitore<br />
<strong>di</strong> JNK, reso permeabile alla membrana cellulare me<strong>di</strong>ante la sequenza TAT, per chiarire il<br />
ruolo <strong>di</strong> JNK nella morte necrotica o apoptotica.<br />
Stu<strong>di</strong> sulla patologia del motoneurone II. Stu<strong>di</strong> In vivo<br />
I topi wobbler manifestano una selettiva per<strong>di</strong>ta dei motoneuroni del tratto cervicale del midollo<br />
spinale e sono considerati un buon modello <strong>di</strong> Sclerosi Laterale Amiotrofica spora<strong>di</strong>ca. Non<br />
abbiamo trovato <strong>di</strong>fferenze nei livelli plasmatici del glutammato e nell’espressione dei<br />
trasportatori e delle subunità per il recettore AMPA nel midollo cervicale del topo wobbler<br />
rispetto al controllo sano. Abbiamo osservato inoltre che il trattamento con un antagonista<br />
competitivo ai recettori AMPA non ha ridotto la progressione sintomatologica e la per<strong>di</strong>ta <strong>di</strong><br />
motoneuroni, mentre il trattamento con riluzolo é risultato efficace. Queste evidenze supportano<br />
l'ipotesi che l’eccitotossicità non sia causa della morte del motoneurone nel topo wobbler e<br />
suggeriscono che il riluzolo agisca con un meccanismo d’azione <strong>di</strong>verso da quello<br />
antiglutammatergico, che sembra legato all'aumento <strong>di</strong> BDNF endogeno. L'apoptosi non è<br />
coinvolta nel processo <strong>di</strong> morte del motoneurone nel topo wobbler, e, in accordo con queste<br />
evidenze, il trattamento con eritropoietina è risultato inefficace. Per quanto riguarda i processi<br />
neuroinfiammatori nel topo wobbler si osserva gliosi reattiva e aumento <strong>di</strong> TNF e TNFR1, e tale<br />
aumento si accentua con l'evoluzione della patologia. Il trattamento con una proteina legante h-<br />
TNF riduce l'atrofia muscolare e migliora il comportamento motorio. Sono inoltre in corso<br />
ricerche legate all'uso <strong>di</strong> cellule staminali neurali (collaborazione col Dott. Parati, <strong>Istituto</strong><br />
Neurologico Besta) e del sangue del cordone ombelicale umano (collaborazione con la Dott.sa<br />
Lazzari, Policlinico) e alla valutazione del ruolo del deficit mitocondriale (Prof. Curti,<br />
Università <strong>di</strong> Pavia).<br />
Stu<strong>di</strong> sulla patologia del motoneurone III. Stu<strong>di</strong> In vivo<br />
I topi mnd presentano una mutazione spontanea del gene CLN8, responsabile <strong>di</strong> una patologia<br />
rara nell'uomo (epilessia mioclonica progressiva, della famiglia delle lipofuscinosi ceroidee<br />
neuronali) e presentano una retinopatia precoce e una <strong>di</strong>sfunzione motoria tar<strong>di</strong>va senza per<strong>di</strong>ta<br />
<strong>di</strong> motoneuroni. Gli mnd sono un buon modello <strong>di</strong> eccitotossicità, con aumentati livelli <strong>di</strong><br />
glutammato plasmatico gia in fase presintomatica, riduzione del trasportatore per il glutammato<br />
GLT-1 e della subunità GluR3 del recettore AMPA, e aumento della subunità GluR2 nel<br />
139<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
midollo spinale lombare. Il trattamento con un nuovo antagonista non competitivo per i recettori<br />
AMPA (ZK187638) migliora le prestazioni motorie nei topi, come riportato in precedenza per<br />
l’agonista competitivo NBQX. Il TNF e il suo recettore TNFR1 sono aumentati già in età<br />
presintomatica, quando un'intensa proliferazione astrogliale e microgliale è manifesta.<br />
Presentano riduzione delle funzioni mitocondriali e del consumo <strong>di</strong> ossigeno (Prof. D.Curti,<br />
Università <strong>di</strong> Pavia) e aumentati livelli <strong>di</strong> derivati dei perossilipi<strong>di</strong> che reagiscono con Acido<br />
Tiobarbiturico (TBARS) (Prof. P. Guarneri, CNR <strong>di</strong> Palermo). Il trattamento con L-carnitina<br />
ritarda la comparsa dei sintomi motori, aumenta le attività mitocondriali e il QO2 e <strong>di</strong>minuisce i<br />
livelli <strong>di</strong> TBARS. Sono in corso ricerche per chiarire la funzione molecolare della proteina<br />
co<strong>di</strong>ficata dal gene CLN8 e i meccanismi <strong>di</strong> morte delle cellule nervose.<br />
Stu<strong>di</strong> sui trasportatori del glutammato<br />
Un'eccessiva stimolazione dei recettori glutammatergici risulta dannosa per i neuroni e la<br />
concentrazione <strong>di</strong> glutammato viene mantenuta a livello fisiologico me<strong>di</strong>ante un meccanismo<br />
attivo <strong>di</strong> ricaptazione da parte <strong>di</strong> trasportatori (EAATs) localizzati sulle membrane cellulari <strong>di</strong><br />
neuroni e glia. E' stato suggerito che un meccanismo <strong>di</strong> trasporto inverso (rilascio <strong>di</strong> glutammato<br />
nel versante extracellulare) da parte degli EAATs rappresenti un evento precoce nell'ischemia<br />
acuta. Quin<strong>di</strong> composti che interagiscono con tale meccanismo bloccando gli EAATs<br />
potrebbero essere utili nel prevenire l'eccitotossicità indotta da ischemia. Abbiamo in corso un<br />
progetto con l'Università <strong>di</strong> Siena (Prof. Campiani) per la caratterizzazione <strong>di</strong> nuove strutture<br />
sintetizzate attraverso la realizzazione <strong>di</strong> un modello 3D della struttura attiva dei trasportatori<br />
del glutammato, con lo scopo <strong>di</strong> trovare inibitori selettivi <strong>di</strong> rilevanti EAATs. Si stanno<br />
caratterizzando <strong>di</strong>fferenti approcci biochimici per <strong>di</strong>stinguere agenti "bloccanti" o "substrati".<br />
Per questo stu<strong>di</strong>o saranno usate preparazioni sinaptosomiali o gliali purificate da cervello e<br />
midollo spinale <strong>di</strong> ratto e cellule HEK 293 che esprimono stabilmente i tre principali EAATs.<br />
Stu<strong>di</strong> sulla neurotossicità’ <strong>di</strong> derivati dell’amfetamina<br />
Il meccanismo responsabile della neurotossicità serotoninergica indotta da alcuni derivati<br />
dell’amfetamina, tra cui l’ecstasy (metilene<strong>di</strong>ossimetamfetamina), è ancora controverso. Il loro<br />
principale effetto acuto è il rilascio <strong>di</strong> serotonina dalle terminazioni nervose ed è conseguente<br />
alla loro interazione, come substrati, con i trasportatori serotoninergici. Questa interazione<br />
sembra necessaria per indurre gli effetti neurotossici, ma non sufficiente, in quanto sono stati<br />
descritti alcuni derivati dell’amfetamina che inducono un marcato rilascio <strong>di</strong> serotonina in vivo<br />
senza dare neurotossicità. Abbiamo stu<strong>di</strong>ato vari derivati dell’amfetamina (forniti dal Dr.<br />
Reyes-Parada, Universidad de Santiago de Chile), neurotossici o non, in <strong>di</strong>fferenti modelli<br />
sperimentali in vitro e in vivo. Un risultato particolarmente interessante è che nei sinaptosomi<br />
perfusi in vitro, solo le amfetamine neurotossiche aumentano il rilascio <strong>di</strong> serotonina.<br />
Attualmente stiamo approfondendo il significato <strong>di</strong> questa osservazione utilizzando nuove<br />
molecole.<br />
Impiego del Biacore per stu<strong>di</strong>are composti antifibrillogenici<br />
La possibilità <strong>di</strong> analizzare le interazioni biomolecolari si è recentemente ampliata con lo<br />
sviluppo <strong>di</strong> biosensori ottici, come il Biacore, che impiegano la tecnologia della risonanza<br />
plasmonica <strong>di</strong> superficie (SPR). Questa metodologia offre numerosi vantaggi, tra cui la<br />
possibilità <strong>di</strong> misurare l'interazione in tempo reale, utilizzando quantità molto ridotte <strong>di</strong><br />
molecole interagenti, e senza nessun tipo <strong>di</strong> marcatura. Stiamo valutando la possibilità <strong>di</strong><br />
analizzare con il Biacore le reazioni <strong>di</strong> aggregazione della proteina prionica e della betaamiloide,<br />
nell'ambito <strong>di</strong> progetti <strong>di</strong> ricerca coor<strong>di</strong>nati dal Laboratorio <strong>di</strong> Biochimica e Chimica<br />
delle proteine (nostro Dipartimento) e dal Laboratorio <strong>di</strong> Biologia dei <strong>di</strong>sor<strong>di</strong>ni<br />
neurodegenerativi ( Dipartimento <strong>di</strong> Neuroscienze). Risultati preliminari in<strong>di</strong>cano che questa<br />
tecnologia può effettivamente permettere <strong>di</strong> misurare e caratterizzare il legame <strong>di</strong> pepti<strong>di</strong><br />
140<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
solubili agli aggregati fibrillari. Il passaggio successivo sarà quin<strong>di</strong> rappresentato dallo stu<strong>di</strong>o<br />
dei composti che interferiscono con il processo <strong>di</strong> aggregazione, potenzialmente utili nel<br />
trattamento delle patologie da prioni e della malattia <strong>di</strong> Alzheimer.<br />
Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> bin<strong>di</strong>ng recettoriale<br />
Abbiamo stu<strong>di</strong>ato composti <strong>di</strong> nuova sintesi sui recettori cerebrali in vitro, in collaborazione con<br />
<strong>di</strong>versi laboratori <strong>di</strong> Chimica Farmaceutica dell'Università. I risultati ottenuti dagli esperimenti<br />
<strong>di</strong> bin<strong>di</strong>ng (affinità e selettività) sono stati utilizzati per stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> molecular modeling (QSAR) e<br />
per ulteriori valutazioni farmacologiche. Esempi sono la caratterizzazione <strong>di</strong> nuove molecole<br />
con attività <strong>di</strong> antipsicotici atipici; <strong>di</strong> antagonisti selettivi al recettore 5HT3 che non passano la<br />
barriera ematoencefalica e possono essere utilizzati come tool per il sistema car<strong>di</strong>ovascolare; <strong>di</strong><br />
leganti potenti e selettivi per i recettori del glutammato, o per i recettori 5HT1A e alpha-1 della<br />
noradrenalina. E’ anche possibile valutare l’attività agonista/antagonista <strong>di</strong> composti che<br />
agiscono su recettori accoppiati alle G-proteins misurando il loro effetto sul bin<strong>di</strong>ng del GTP-g-<br />
S. Con questo approccio abbiamo caratterizzato agonisti parziali selettivi per il recettore D3, che<br />
sono risultati attivi nel ridurre il craving da cocaina nel ratto (in collaborazione con Dr. Luigi<br />
Cervo, Dipt. Neuroscienze), e stiamo valutando l'attività <strong>di</strong> nuovi potenziali agonisti ai recettori<br />
5-HT6.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Neuroimmunologia<br />
Le citochine sono importanti me<strong>di</strong>atori infiammatori<br />
Il laboratorio stu<strong>di</strong>a il loro ruolo in modelli <strong>di</strong> infezione e infiammazione, con particolare<br />
attenzione al loro doppio ruolo <strong>di</strong> me<strong>di</strong>atori patogenetici da un lato e <strong>di</strong> molecole essenziali per<br />
l’immunità innata dall’altro e alla possibilità <strong>di</strong> modularne farmacologicamente la produzione e<br />
l’azione. In particolare utilizziamo modelli in vitro e in vivo per lo stu<strong>di</strong>o della produzione <strong>di</strong><br />
citochine (IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, IL-18, MCP-1, TNF) e l’attivazione <strong>di</strong> fattori trascrizionali<br />
(NF-kB) e vie <strong>di</strong> trasduzione del segnale (p38, STAT) implicate nella loro azione e produzione.<br />
Inoltre verifichiamo i risultati <strong>di</strong> questi stu<strong>di</strong> in modelli in vivo <strong>di</strong> artrite e infiammazione acuta.<br />
In questi modelli stiamo stu<strong>di</strong>ando molecole antiossidanti tioliche, farmaci antiinfiammatori non<br />
steroidei e statine. Una parte <strong>di</strong> questi progetti è mirata all’area della neuroinfiammazione<br />
utilizzando modelli <strong>di</strong> patologie del sistema nervoso centrale e periferico con componente<br />
infiammatoria (ve<strong>di</strong> attività 3) e cellule nervose in vitro (neuroni, glia, astrociti). Inoltre<br />
utilizziamo la produzione <strong>di</strong> citochine in vitro come in<strong>di</strong>catore per testare composti<br />
potenzialmente pirogeni, irritanti o tossici che si propone come possibile alternativa ai test su<br />
animali.<br />
Regolazione redox<br />
Lo stu<strong>di</strong>o del cosiddetto stress ossidativo ha portato alla identificazione <strong>di</strong> fenomeni biochimici<br />
che vengono mo<strong>di</strong>ficati da molecole antiossidanti anche in assenza <strong>di</strong> stress ossidativo inteso<br />
come produzione eccessiva <strong>di</strong> metaboliti tossici dell’ossigeno (ra<strong>di</strong>cali liberi). Si parla perciò <strong>di</strong><br />
regolazione redox per definire l’insieme delle funzioni cellulari (espressione <strong>di</strong> geni, attività <strong>di</strong><br />
enzimi e fattori trascrizionali etc.) che sono in qualche modo mo<strong>di</strong>ficate dallo stato <strong>di</strong> redox<br />
della cellula, inteso come il rapporto tra specie ossidanti e riducenti (in genere: il rapporto tra<br />
glutatione ossidato e ridotto). Il nostro lavoro si focalizza sui meccanismi molecolari con cui<br />
piccole variazioni nello stato <strong>di</strong> redox possono influenzare proteine <strong>di</strong> vario genere, e in<br />
particolare su mo<strong>di</strong>ficazioni transitorie <strong>di</strong> cisteine all’interno <strong>di</strong> proteine a formare ponti<br />
<strong>di</strong>sulfuro con altre catene proteine o con piccole molecole tioliche come il glutatione.<br />
Recentemente abbiamo inoltre rivolto la nostra attenzione all'identificazione dello stato <strong>di</strong> redox<br />
delle proteine poste sulla superficie della membrana cellulare in quanto queste hanno spesso<br />
funzioni importanti (es: trasportatori, recettori) e sono il primo bersaglio <strong>di</strong> ossidanti<br />
141<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
extracellulari.<br />
IRFMN<br />
Neuroprotezione<br />
Le patologie del sistema nervoso, centrale e periferico, stu<strong>di</strong>ate in laboratorio sono l’ischemia<br />
cerebrale, l’encefalomielite autoimmune e la neuropatia <strong>di</strong>abetica. Utilizzando modelli animali e<br />
culture in vitro cerchiamo <strong>di</strong> descrivere le interazioni tra morte neuronale e infiammazione e <strong>di</strong><br />
intervenire con strategie protettive. Tra queste ultime, stiamo in particolare stu<strong>di</strong>ando molecole<br />
endogene che hanno mostrato inattese attività antiapoptotiche su cellule neuronali (in particolare<br />
l’eritropoietina) e farmaci antiinfiammatori.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia Molecolare<br />
Nuovi retinoi<strong>di</strong> ad attività antileucemica<br />
I derivati sia naturali che sintetici dell’acido retinoico (retinoi<strong>di</strong>) sono composti molto<br />
promettenti in ambito oncologico. Tali composti svolgono il loro effetto anti-leucemico e antitumorale<br />
attraverso tre <strong>di</strong>versi meccanismi: cito-<strong>di</strong>fferenziazione, arresto della crescita cellulare<br />
e apoptosi (morte cellulare programmata). Tali meccanismi sono parzialmente <strong>di</strong>ssociabili.<br />
Esistono, infatti, retinoi<strong>di</strong> <strong>di</strong> sintesi a forte effetto anti-proliferativo e/o cito-<strong>di</strong>fferenziante.<br />
Recentemente, abbiamo identificato e caratterizzato una nuova serie <strong>di</strong> retinoi<strong>di</strong> dotati <strong>di</strong> forte e<br />
selettivo effetto apoptotico nei confronti della cellula neoplastica. Tali derivati (adamantilretinoi<strong>di</strong>),<br />
originariamente sviluppati come agonisti specifici dei recettori nucleari per l’acido<br />
retinoico <strong>di</strong> tipo gamma (RAR-gamma) inducono apoptosi in <strong>di</strong>versi tipi <strong>di</strong> cellule leucemiche e<br />
carcinomatose attraverso un meccanismo ancora largamente sconosciuto, che peraltro non<br />
prevede la me<strong>di</strong>azione da parte <strong>di</strong> alcuno dei recettori nucleari per l’acido retinoico conosciuti.<br />
Gli adamantil-retinoi<strong>di</strong> agiscono attraverso l’attivazione <strong>di</strong> determinanti molecolari totalmente<br />
<strong>di</strong>fferenti da quelli <strong>di</strong> altri agenti chemioterapici e sono attivi non solo in vitro ma anche in vivo<br />
su <strong>di</strong>versi modelli sperimentali <strong>di</strong> leucemia acuta mieloide. Alcune <strong>di</strong> queste molecole<br />
innovative sono in fase avanzata <strong>di</strong> sviluppo pre-clinico.<br />
Nuove combinazioni farmacologiche a base <strong>di</strong> retinoi<strong>di</strong> in ambito <strong>di</strong><br />
terapia antileucemica<br />
Uno degli effetti clinici più significativi dell’acido retinoico è rappresentato dalla capacità <strong>di</strong><br />
questo composto <strong>di</strong> favorire la maturazione del blasto leucemico verso un fenotipo più simile a<br />
quello della cellula normale. L’utilizzo clinico dell’acido retinoico per il trattamento della<br />
leucemia acuta promielocitica, rappresenta, al momento, il primo e unico esempio <strong>di</strong> terapia<br />
<strong>di</strong>fferenziante in ambito oncologico. Questo tipo <strong>di</strong> strategia terapeutica ha il vantaggio <strong>di</strong> essere<br />
più facilmente accettata dal paziente oncologico in quanto associata a minore tossicità rispetto ai<br />
classici trattamenti chemioterapici a base <strong>di</strong> farmaci cito-tossici. Nonostante gli eccellenti<br />
risultati ottenuti nel caso della leucemia acuta promielocitica, l’utilizzo clinico dell’acido<br />
retinoico è ancora limitato a causa <strong>di</strong> una serie <strong>di</strong> problemi, tra i quali, la resistenza naturale ed<br />
indotta e la tossicità sistemica e locale hanno particolare rilevanza. Una delle possibili strategie<br />
perseguibili al fine <strong>di</strong> aumentare l’in<strong>di</strong>ce terapeutico dell’acido retinoico si basa sulla<br />
identificazione e l’utilizzo <strong>di</strong> farmaci in grado <strong>di</strong> potenziare significativamente l’attività cito<strong>di</strong>fferenziante<br />
del retinoide. Abbiamo recentemente <strong>di</strong>mostrato che una serie <strong>di</strong> agenti quali il<br />
G-CSF, gli interferoni, i derivati del cAMP, gli inibitori della fosfo-<strong>di</strong>esterasi IV e una serie <strong>di</strong><br />
altre molecole a meccanismo d’azione ignoto sono in grado <strong>di</strong> sensibilizzare la cellula<br />
neoplastica all’effetto farmacologico dell’acido retinoico. Ci poniamo come obiettivo a lungo<br />
termine <strong>di</strong> valutare la possibilità <strong>di</strong> utilizzare in ambito clinico le combinazioni <strong>di</strong> cui sopra. Ci<br />
proponiamo, inoltre, <strong>di</strong> utilizzare tali combinazioni per meglio comprendere i meccanismi<br />
molecolari alla base del processo <strong>di</strong> <strong>di</strong>fferenziazione del blasto leucemico indotto dall’acido<br />
retinoico e dai suoi derivati.<br />
142<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
La famiglia delle molibdo-flavoproteine<br />
I molibdo-flavoenzimi sono proteine <strong>di</strong> interesse sia me<strong>di</strong>co che industriale. Essi sono gli unici<br />
enzimi che richiedono molibdeno, sotto forma del cofattore molibdenico, per la loro attività<br />
catalitica. Da tempo il laboratorio <strong>di</strong> Biologia Molecolare si occupa della biochimica e della<br />
biologia dei molibdo-flavoenzimi nell’uomo e nel mammifero più in generale. In passato,<br />
abbiamo contribuito alla identificazione ed alla caratterizzazione strutturale <strong>di</strong> due molibdoflavoproteine,<br />
l’aldeide ossidasi (AOX1) e la xantina ossidoreduttasi (XOR). Negli ultimi due<br />
anni, abbiamo identificato e clonato i cDNA e i geni <strong>di</strong> tre nuovi molibdo-flavoenzimi (AOH1,<br />
AOH2 ed AOH3) nel topo. A lungo termine, i nostri obiettivi principali sono la<br />
caratterizzazione strutturale, la definizione della specificità <strong>di</strong> substrato, la delucidazione del<br />
meccanismo <strong>di</strong> catalisi e della funzione fisio-patologica delle tre nuove proteine. Ci proponiamo<br />
inoltre <strong>di</strong> continuare gli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> caratterizzazione biochimica e funzionale <strong>di</strong> AOX1 ed XOR sia<br />
<strong>di</strong> origine umana che murina. Allo scopo <strong>di</strong> perseguire questi obiettivi, abbiamo recentemente<br />
sviluppato linee cellulari in grado <strong>di</strong> esprimere XOR in maniera con<strong>di</strong>zionale. Abbiamo, infine<br />
generato un topo knock-out per il gene co<strong>di</strong>ficante AOH2.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biochimica e Chimica delle Proteine<br />
Metabolismo lipi<strong>di</strong>co e proteina prionica<br />
E’ stata recentemente suggerita l'esistenza <strong>di</strong> una relazione tra livelli <strong>di</strong> colesterolo e proteina<br />
prionica, sebbene il meccanismo cellulare e molecolare che ne è alla base non sia chiaro.<br />
L’inibizione della sintesi <strong>di</strong> colesterolo da parte delle statine, inibitori selettivi dell’enzima 3idrossi-3-metilglutaril<br />
coenzima A (HMG-CoA) reduttasi, provoca la riduzione della<br />
produzione delle molecole derivate dal mevalonato con il conseguente aumento della<br />
produzione <strong>di</strong> citochine anti-infiammatorie in modelli in vitro e in vivo. La biosintesi e l’uptake<br />
del colesterolo è regolato da due fattori <strong>di</strong> trascrizione, noti come sterol regulatory element<br />
bin<strong>di</strong>ng protein (SREBP-1 e SREBP-2), che promuovono l’attivazione dei geni che co<strong>di</strong>ficano<br />
per enzimi chiave, come per esempio l’HMG-CoA sintetasi, l’HMG-CoA reduttasi, il farnesil<br />
<strong>di</strong>fosfato sintetasi e la squalene sintetasi. Negli stu<strong>di</strong> condotti quest'anno abbiamo <strong>di</strong>mostrato<br />
che la riduzione dei livelli cellulari <strong>di</strong> colesterolo riduce la produzione <strong>di</strong> proteina prionica.<br />
Stress ossidativo e sclerosi laterale amiotrofica: un approccio proteomico<br />
I meccanismi molecolari alla base <strong>di</strong> malattie neurodegenerative con origine genetica come la<br />
sclerosi laterale amiotrofica (SLA) familiare, sono ancora sconosciuti. Ci sono in<strong>di</strong>cazioni che<br />
lo stress ossidativo abbia un ruolo importante nella patogenesi <strong>di</strong> queste malattie. L'Unità <strong>di</strong><br />
Proteomica dell'<strong>Istituto</strong> Telethon Dulbecco si propone <strong>di</strong> affrontare il problema me<strong>di</strong>ante<br />
l'analisi proteomica <strong>di</strong> modelli animali e cellulari <strong>di</strong> patologia con particolare riguardo alle<br />
mo<strong>di</strong>fiche ossidative delle proteine. In particolare, il gruppo in collaborazione con il laboratorio<br />
<strong>di</strong> Neurobiologia Molecolare si è concentrato sull'analisi dei cambiamenti <strong>di</strong> espressione<br />
proteica e <strong>di</strong> mo<strong>di</strong>fiche ossidative, come la nitrazione della tirosina, in topi trangenici (Tg) che<br />
sovraesprimono la superossido <strong>di</strong>smutasi (SOD1) mutata (G93A) umana, che costituiscono un<br />
modello <strong>di</strong> SLA familiare. Le proteine estratte dai midolli spinali <strong>di</strong> topi Tg SOD1 G93A a<br />
<strong>di</strong>versi sta<strong>di</strong> della malattia e i relativi controlli sani, topi Tg che overesprimono SOD1 umana<br />
wild-type (WT), sono state separate con elettroforesi bi<strong>di</strong>mensionale su gel. Le mappe proteiche<br />
ottenute nelle <strong>di</strong>verse con<strong>di</strong>zioni sono state paragonate con software <strong>di</strong> analisi <strong>di</strong> immagini e<br />
caratterizzate con analisi Western blot e spettrometria <strong>di</strong> massa. Recentemente, sono stati<br />
ottenuti i primi risultati che evidenziano interessanti alterazioni del proteoma nei topi Tg che<br />
contraggono la SLA, ma che sono ancora in una fase presintomatica. Infatti, è stato <strong>di</strong>mostrato<br />
che alcune proteine come l’ATP sintetasi, enolasi alfa, enolasi gamma, creatina chinasi e<br />
fosfoglicerato mutasi sono maggiormente nitrate nel topo Tg recante la SOD1 mutata rispetto al<br />
topo Tg recante SOD1 WT. Questi sono tutti enzimi che, <strong>di</strong>rettamente o in<strong>di</strong>rettamente, sono<br />
143<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
coinvolti nella sintesi <strong>di</strong> ATP e un loro eventuale malfunzionamento potrebbe causare un grave<br />
deficit energetico per la cellula. Sono ora in corso stu<strong>di</strong> funzionali per determinare se<br />
effettivamente le mo<strong>di</strong>fiche ossidative a carico <strong>di</strong> queste proteine contribuiscano alla<br />
progressione della malattia.<br />
Caratterizzazione <strong>di</strong> <strong>di</strong>fferenti isoforme della proteina SMN<br />
L’atrofia muscolare spinale (SMA) è una malattia autosomica recessiva che, nell’ambito delle<br />
malattie ere<strong>di</strong>tarie, rappresenta la maggior causa <strong>di</strong> mortalità infantile. La SMA è caratterizzata<br />
dalla degenerazione dei motoneuroni delle corna anteriori del midollo spinale con conseguente<br />
rigi<strong>di</strong>tà e paralisi amiotrofica della muscolatura scheletrica. La SMA è associata a delezioni o<br />
mutazioni del gene SMN e la copia telomerica del gene SMN (SMN1) presenta delezioni o<br />
mutazioni in più del 98% dei pazienti affetti da SMA. La proteina SMN è espressa in tutti i<br />
tessuti dei mammiferi, ma livelli particolarmente alti sono presenti solo nei motoneuroni.<br />
Recentemente, per mezzo <strong>di</strong> esperimenti <strong>di</strong> Western blot, sono state identificate <strong>di</strong>fferenti<br />
isoforme della proteina SMN e stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> ontogenesi hanno mostrato la presenza <strong>di</strong> un’espressione<br />
progressivamente maggiore <strong>di</strong> queste isoforme a partire dalla nascita. Queste osservazioni<br />
suggeriscono che le <strong>di</strong>fferenti isoforme <strong>di</strong> SMN possano svolgere un importante ruolo<br />
nell’omeostasi e nella funzione dei motoneuroni. Nel nostro laboratorio abbiamo sviluppato una<br />
strategia per la purificazione e la caratterizzazione delle isoforme <strong>di</strong> SMN attraverso l’uso della<br />
cromatografia multi<strong>di</strong>mensionale associata all’elettroforesi bi<strong>di</strong>mensionale e alla spettrometria<br />
<strong>di</strong> massa. Siamo riusciti ad identificare le isoforme <strong>di</strong> SMN nei gel bi<strong>di</strong>mensionali per mezzo <strong>di</strong><br />
Western blot ma non è stato possibile identificarne la sequenza primaria attraverso la<br />
spettrometria <strong>di</strong> massa. E’ probabile che le isoforme <strong>di</strong> SMN siano troppo poco espresse per<br />
poter essere identificate con le tecniche <strong>di</strong> proteomica nonostante l’arricchimento ottenuto<br />
grazie alla cromatografia multi<strong>di</strong>mensionale. Stiamo cercando <strong>di</strong> ottenere degli anticorpi che<br />
siano in grado <strong>di</strong> immunoprecipitare le proteine correlate ad SMN per poter ottenere delle<br />
quantità sufficienti da analizzare con la spettrometria <strong>di</strong> massa. L'identificazione delle isoforme<br />
<strong>di</strong> SMN verrà inoltre effettuata attraverso tecniche <strong>di</strong> genomica.<br />
Stu<strong>di</strong> sulla conformazione della proteina prionica e dei pepti<strong>di</strong> dedotti<br />
dalla sua sequenza primaria<br />
Nelle malattie da prioni esiste una relazione tra la formazione <strong>di</strong> fibrille della Proteina Prionica<br />
(PrP) e la citotossicità o le risposte reattive astrogliali. La formazione <strong>di</strong> fibrille è la<br />
conseguenza <strong>di</strong> un cambiamento conformazionale della proteina nativa che porta alla proteina<br />
patologica. Ciò è ritenuto essere <strong>di</strong> grande importanza nella comparsa e nella progressione delle<br />
malattie da prione. La comprensione dei determinanti strutturali alla base <strong>di</strong> questa<br />
trasformazione conformazionale è molto importante per la delucidazione del processo<br />
patogenetico. Sorge quin<strong>di</strong> la necessità <strong>di</strong> sviluppare dei modelli semplificati in grado <strong>di</strong><br />
approssimare al meglio la <strong>di</strong>namica <strong>di</strong> questa transizione. A questo proposito abbiamo<br />
sviluppato dei pepti<strong>di</strong> sintetici che rappresentano l’essenza dei domini fibrillogenici della PrP.<br />
Utilizzando <strong>di</strong>verse tecniche chimico-fisiche e biochimiche, conduciamo stu<strong>di</strong> in vitro per<br />
determinare le proprietà conformazionali <strong>di</strong> questi pepti<strong>di</strong>, e ne valutiamo la struttura<br />
secondaria, lo scambio idrogeno-deuterio, la resistenza alla <strong>di</strong>gestione con proteasi, la capacità<br />
<strong>di</strong> aggregazione e le proprietà amiloidogeniche. Questo lavoro fornisce in<strong>di</strong>cazioni qualitative e<br />
quantitative sulla plasticità conformazionale dei frammenti <strong>di</strong> PrP.<br />
Meccanismi biochimici e molecolari coinvolti nella tossicità della proteina<br />
prionica<br />
Lo scopo <strong>di</strong> questa attività <strong>di</strong> ricerca è quello <strong>di</strong> comprendere i meccanismi biochimici e<br />
molecolari che determinano la citotossicità o la risposta reattiva astrogliale della Proteina<br />
Prionica (PrP). Questo stu<strong>di</strong>o prevede l’utilizzo <strong>di</strong> pepti<strong>di</strong> sintetici che le sequenze dei domini<br />
144<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
fibrillogenici della PrP e <strong>di</strong> alcuni modelli cellulari al fine <strong>di</strong> stabilire una relazione tra le<br />
proprietà chimico-fisiche dei vari pepti<strong>di</strong> ed i loro effetti biologici. Utilizzando tecniche <strong>di</strong><br />
proteomica, stiamo valutando il pannello <strong>di</strong> espressione proteica in <strong>di</strong>versi modelli cellulari<br />
dopo trattamento con i pepti<strong>di</strong> neurotossici. Il riconoscimento e la caratterizzazione delle<br />
proteine <strong>di</strong>fferenzialmente espresse sono potenzialmente in grado <strong>di</strong> fornire delle in<strong>di</strong>cazioni<br />
sulle vie biochimiche coinvolte nei meccanismi <strong>di</strong> neurodegenerazione e determinare dei marker<br />
biochimici e dei possibili target farmacologici. L’attività, svolta in collaborazione con il<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia delle Malattie Neurodegenerative, è volta inoltre ad analizzare la<br />
<strong>di</strong>stribuzione sub-cellulare dei pepti<strong>di</strong> e ad identificare i bersagli biologici molecolari<br />
intracellulari.<br />
Sviluppo <strong>di</strong> strategie terapeutiche per la cura delle malattie da prione<br />
Attualmente non esistono opzioni terapeutiche per il trattamento delle malattie da prione.<br />
Pertanto composti in grado <strong>di</strong> interferire con la formazione delle fibrille possono costituire degli<br />
utili can<strong>di</strong>dati terapeutici. Questa attività <strong>di</strong> ricerca, condotta in collaborazione con il<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia delle Malattie Neurodegenerative, ha avuto lo scopo <strong>di</strong> identificare delle<br />
molecole che siano in grado <strong>di</strong> contrastare la capacità della PrP <strong>di</strong> formare fibrille. Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong><br />
fibrillogenesi sono stati compiuti utilizzando i pepti<strong>di</strong> sintetici, PrP106-126 e PrP82-146 che<br />
sono stati da noi stu<strong>di</strong>ati in passato per la loro peculiarità <strong>di</strong> avere un alto contenuto <strong>di</strong> ß-sheet e<br />
la capacità <strong>di</strong> formare delle fibrille amiloi<strong>di</strong>. Le molecole che sono risultate più promettenti<br />
sono state stu<strong>di</strong>ate in modelli in vivo della malattia da prioni nel criceto e nel topo.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Patologia Molecolare<br />
Citocromo P-450<br />
Nella vasta superfamiglia del citocromo P-450 vi sono proteine enzimatiche con enormi<br />
<strong>di</strong>versità rispetto alla specificità del substrato utilizzato e ai prodotti formati. La maggioranza<br />
dei farmaci esistenti <strong>di</strong>pende dal sistema del citocromo P-450 per porre termine agli effetti<br />
biologici o per gli effetti collaterali o per lo scatenamento <strong>di</strong> reazioni avverse. Il laboratorio da<br />
tempo si occupa dei meccanismi <strong>di</strong> induzione/degradazione <strong>di</strong> specifici citocromo P-450 che<br />
avvengono in seguito all'assunzione <strong>di</strong> farmaci o per malattie. Recentemente è stato stu<strong>di</strong>ato<br />
l'effetto induttivo degli estratti <strong>di</strong> Hypericum perforatum (erba <strong>di</strong> San Giovanni), utilizzati nella<br />
cura <strong>di</strong> forme lievi e moderate <strong>di</strong> depressione ed implicati in <strong>di</strong>verse interazioni sfavorevoli con<br />
altri farmaci.<br />
Ruolo degli enzimi della via metabolica <strong>di</strong> degradazione dell’eme (isozimi<br />
dell’eme ossigenasi e della biliver<strong>di</strong>na reduttasi)<br />
Il sistema enzimatico dell’eme ossigenasi (HO) provvede alla degradazione delle molecole<br />
contenenti eme (ad esempio citocromi ed emoglobina) e al riciclo del ferro. Recentemente è<br />
stato però evidenziato che i prodotti <strong>di</strong> questa attività catalitica come il monossido <strong>di</strong> carbonio e<br />
i pigmenti biliari hanno importanti funzioni regolatorie all’interno della cellula. Un aumento<br />
della attività enzimatica dell’HO (<strong>di</strong> solito dovuta all’attivazione dell’isoforma inducibile HO-1)<br />
è attualmente considerato un meccanismo protettivo <strong>di</strong> risposta cellulare a stimoli nocivi <strong>di</strong>versi,<br />
soprattutto quando vi sono evidenze <strong>di</strong> stress ossidativo. In passato il laboratorio ha identificato<br />
le citochine come induttori dell'attività dell'HO e come attivatori trascrizionali del gene dell'HO-<br />
1. Attualmente il laboratorio è impegnato nello stu<strong>di</strong>o del significato funzionale dell'attivazione<br />
dell'HO-1 in con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> epatotossicità e <strong>di</strong> neurodegenerazione.<br />
145<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Nuovi modelli in vitro per lo stu<strong>di</strong>o delle patologie del motoneurone<br />
Forme mutate <strong>di</strong> proteine specifiche svolgono un ruolo preminente in molte patologie<br />
neurodegenerative. E’ quin<strong>di</strong> importante poter riprodurre nei modelli sperimentali l’espressione<br />
<strong>di</strong> queste proteine tossiche. Recentemente è stato ideato un nuovo sistema - noto come pTet-<br />
On/pTet-Off - che permette <strong>di</strong> modulare l’espressione <strong>di</strong> geni <strong>di</strong> interesse tramite la presenza <strong>di</strong><br />
tetracicline.<br />
Nel laboratorio questo sistema è stato applicato a una linea cellulare murina motoneurone-simile<br />
(NSC-34) ottenendo nuove linee (chiamate NSC-34 tTA) che esprimono stabilmente la proteina<br />
transattivatrice tTA in modo regolato dalla presenza <strong>di</strong> doxiciclina nel me<strong>di</strong>um <strong>di</strong> coltura.<br />
Queste linee saranno utili per lo stu<strong>di</strong>o dei meccanismi patogenetici delle malattie del<br />
motoneurone dopo trasfezione transiente/stabile <strong>di</strong> geni <strong>di</strong> interesse per queste patologie.<br />
Nel laboratorio questo approccio è stato subito applicato per ottenere <strong>di</strong>verse linee NSC-34 tTA<br />
che esprimono in modo regolabile dalla doxiciclina la forma nativa o mutata in G93A della<br />
superossido <strong>di</strong>smutasi 1 umana (SOD1). La mutazione G93A è una delle più <strong>di</strong> 100 mutazioni<br />
identificate nella SOD1 del 20% dei pazienti con forme familiari <strong>di</strong> sclerosi laterale amiotrofica<br />
(SLA). Questo nuovo modello rende possibile mettere in relazione il fenotipo tossico con<br />
l'espressione della proteina tossica G93ASOD1 e sarà utile negli stu<strong>di</strong> futuri sulla SLA.<br />
Stu<strong>di</strong>o dei meccanismi della degenerazione selettiva del motoneurone<br />
nella sclerosi laterale amiotrofica<br />
Il fenotipo patologico e clinico delle forme familiari (10% dei casi totali) <strong>di</strong> sclerosi laterale<br />
amiotrofica (SLA) è in<strong>di</strong>stinguibile da quello dei pazienti con forma spora<strong>di</strong>ca e questo<br />
suggerisce che cause <strong>di</strong>verse portino a una comune cascata <strong>di</strong> eventi neuropatologici. Nel<br />
laboratorio è stata stu<strong>di</strong>ata la tossicità della mutazione G93A della superossido <strong>di</strong>smutasi 1, (che<br />
è stata identificata in alcuni pazienti con la forma familiare <strong>di</strong> SLA), sulla morfologia<br />
mitocondriale e sulla attività del poro che regola la transizione <strong>di</strong> permeabilità del mitocondrio.<br />
Ambedue i sistemi presiedono all’integrità del mitocondrio e della cellula. I risultati ottenuti<br />
hanno evidenziato che la proteina mutata altera la morfologia e <strong>di</strong>sturba l’equilibrio elettrico dei<br />
mitocondri. Inoltre la G93ASOD1 rende i motoneuroni più vulnerabili agli effetti tossici <strong>di</strong><br />
inibitori della catena <strong>di</strong> trasporto degli elettroni (ETC) suggerendo che un malfunzionamento dei<br />
mitocondri contenenti la proteina mutata potrebbe essere amplificato in presenza <strong>di</strong> elevate<br />
necessità energetiche o <strong>di</strong> sostanze esogene che <strong>di</strong> per sé alterino il funzionamento della ETC.<br />
Questi effetti aberranti della G93ASOD1 sono rilevanti per la comprensione dei meccanismi<br />
patogenetici della SLA in quanto possono contribuire a spiegare sia le alterazioni della<br />
morfologia mitocondriale osservate a sta<strong>di</strong> precoci della malattia nei terminali dei nervi motori<br />
<strong>di</strong> pazienti SLA e nei motoneuroni <strong>di</strong> topi transgenici per G93ASOD1 sia la morte dei<br />
motoneuroni.<br />
146<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
LABORATORIO POLITICHE<br />
REGOLATORIE DEL FARMACO<br />
PERSONALE<br />
IRFMN<br />
Capo Laboratorio Vittorio BERTELE’, Dr. Med. Chir.<br />
147<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL LABORATORIO<br />
IRFMN<br />
Valutazione <strong>di</strong> dossier registrativi <strong>di</strong> farmaci sottoposti all’autorità regolatoria centrale europea<br />
(EMEA) per l’autorizzazione al commercio e successive variazioni dei termini<br />
dell’autorizzazione originale (estensione dell’in<strong>di</strong>cazione, nuove informazioni sulla sicurezza<br />
dei farmaci, etc).<br />
Formazioni <strong>di</strong> esperti nella valutazione critica <strong>di</strong> dossier <strong>di</strong> farmaci<br />
Attività <strong>di</strong> farmacovigilanza attraverso la valutazione <strong>di</strong> Perio<strong>di</strong>c Safety Update Reports (PSUR)<br />
su farmaci approvati dall’EMEA.<br />
Valutazione <strong>di</strong> dossier registrativi <strong>di</strong> farmaci sottoposti all’autorità regolatoria nazionale per<br />
l’ammisssione al regime <strong>di</strong> rimborsabilità e per la contrattazione del prezzo.<br />
Valutazione dell’adeguatezza della legislazione, delle istituzioni e delle procedure regolatorie ai<br />
fini della salute pubblica.<br />
Cooperazione allo sviluppo e alla soluzione <strong>di</strong> problematiche regolatorie in Paesi in via <strong>di</strong><br />
sviluppo.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Pubblicizzazione delle deficienze della legislazione europea sul farmaco e delle proposte per<br />
adeguarle alle esigenze <strong>di</strong> salute pubblica.<br />
Valutazione critica della documentazione alla base delle autorizzazioni al commercio dei<br />
me<strong>di</strong>cinali.<br />
Definizione dei criteri <strong>di</strong> qualità per farmaci antiretrovirali in assenza <strong>di</strong> autorità regolatorie.<br />
National Emergency Response Council on HIV/AIDS (Swaziland) tramite la Cooperazione<br />
Italiana (Direttorato Generale Cooperazione e Sviluppo del Ministero degli Affari Esteri).<br />
"REGIONAL TRAINING WORKSHOP ON ACTD/ACTR" tenutosi a Kuala Lumpur,<br />
Malaysia, l'11-15 Ottoobre <strong>2004</strong>, sotto l’egida dell'Association of South East Asian Nations<br />
(ASEAN), in collaborazione con la Organizzazione Mon<strong>di</strong>ale della Sanità (Dipartimento dei<br />
Farmaci Essenziali e della Politica Farmaceutica, Ginevra), la Comunità Europea e l'<strong>Istituto</strong><br />
<strong>Mario</strong> Negri, Milano.<br />
Ministero della Salute<br />
Agenzia Italiana del Farmaco (AIFA)<br />
<strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità<br />
Ministero per gli Affari Esteri<br />
Assessorato alla Sanità Regione Lombar<strong>di</strong>a<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
148<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
European Me<strong>di</strong>cine Agency (EMEA)<br />
Organizzazione Mon<strong>di</strong>ale della Sanità (Dipartimento dei Farmaci Essenziali e della Politica<br />
Farmaceutica)<br />
Association of South East Asian Nations (ASEAN)<br />
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Ricerca & Pratica (Vittorio Bertelè)<br />
Dialogo sui Farmaci (Vittorio Bertelè)<br />
Servizio <strong>di</strong> Informazione e Documentazione Clinica DOCTORline (Alessandro Nobili)<br />
Banca dati “Drugdex” <strong>di</strong> Micromedex ® Thompson Health Care (Alessandro Nobili)<br />
The Annals of Pharmacotherapy (Alessandro Nobili)<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
The Annals of Pharmacotherapy (Alessandro Nobili)<br />
Eurpean Journal of Clinical Pharmacology (Vittorio Bertelè, Luca Li Bassi)<br />
Dialogo sui Farmaci (Alessandro Nobili)<br />
IRFMN<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
Associazione per lo Sviluppo della ricerca in FarmacoEpidemiologia (ASFE)<br />
Committee for Proprietary Me<strong>di</strong>cinal Products (CPMP) presso l’EMEA (in qualità <strong>di</strong> esperti)<br />
Gruppo <strong>di</strong> Lavoro per la negoziazione del prezzo dei farmaci e la loro adozione in regime <strong>di</strong><br />
rimborsabilità presso il Ministero della Salute<br />
Commissione Tecnico Scientifica presso l'Agenzia Italiana del Farmaco (AIFA)<br />
Sottocommissione Procedure Comunitarie presso l'Agenzia Italiana del Farmaco (AIFA)<br />
Federazione Alzheimer Italia, Progetto CARER<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
European Me<strong>di</strong>cine Evaluation Agency (EMEA)<br />
149<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Garattini S, Bertelè V. Risk: benefit assessment of old me<strong>di</strong>cines. Br J Clin Pharmacol, 58: 581-586 (<strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
Garattini S, Bertelè V. The case against pharmaceutical user fees. Regulatory Affairs Journal Pharma, 15: 402 (<strong>2004</strong>)<br />
Bertelè V, Li Bassi L. A critique to the European Regulatory System. J Ambul Care Manage, 27: 98-104 (<strong>2004</strong>)<br />
Zhang X L, Reggi V, Bertelè V, Bonati M. Regulatory evaluation of efficacy and safety of new drugs in China. Chin<br />
Med J (Engl), 117 (2): 320 (<strong>2004</strong>)<br />
ALTRE PRODUZIONI EDITORIALI PUBBLICATE NEL CORSO DEL<br />
<strong>2004</strong><br />
Garattini S, Bertelè V. The role of the EMEA in regulating pharmaceutical produtcs. In: Regulating pharmaceuticals<br />
in Europe: Striving for efficiency, equity and quality. Open University Press, Maidenhead, Berkshire, UK; <strong>2004</strong>: 80-<br />
96<br />
Garattini S, Nobili A. Interazioni tra farmaci: il CD-ROM. Selecta Me<strong>di</strong>ca E<strong>di</strong>tore. Pavia <strong>2004</strong><br />
150<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
IRFMN<br />
Contributo alla revisione della legislazione europea sui me<strong>di</strong>cinali<br />
Pubblicizzazione delle deficienze della legislazione europea sul farmaco e delle proposte per<br />
adeguarle alle esigenze <strong>di</strong> salute pubblica.<br />
Valutazione della documentazione a supporto <strong>di</strong> procedure registrative<br />
dei me<strong>di</strong>cinali<br />
Attività <strong>di</strong> rapporteur per tre domande <strong>di</strong> ammissione al commercio <strong>di</strong> nuovi me<strong>di</strong>cinali.<br />
Attività <strong>di</strong> rapporteur per una revisione dell'ammissione al commercio <strong>di</strong> nuovi me<strong>di</strong>cinali.<br />
Attività <strong>di</strong> rapporteur per tre variazioni cliniche alle con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> autorizzazione al mercato.<br />
Attività <strong>di</strong> rapporteur per una serie <strong>di</strong> Perio<strong>di</strong>c Safety Update Report, stu<strong>di</strong> postmarketing<br />
richiesti dall'autorità regolatoria europea e variazioni farmaceutiche alle con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong><br />
autorizzazione al mercato.<br />
Attività <strong>di</strong> supporto all’autorità regolatoria nazionale<br />
Valutazione <strong>di</strong> dossier registrativi <strong>di</strong> farmaci sottoposti all’autorità regolatoria nazionale per<br />
l’ammisssione al regime <strong>di</strong> rimborsabilità e per la contrattazione del prezzo.<br />
Attività per la Commissione Tecnico-scientifica dell'AIFA<br />
Attività <strong>di</strong> consulenza per le funzioni dell'Agenzia Italiane del Farmaco (AIFA) in campo<br />
regolatorio per quanto attiene alla qualità, alla sicurezza, all'efficacia e al costo dei farmaci.<br />
Attività per la Sottocommissione per le Procedure Europee presso l'AIFA<br />
Valutazione dei dossier in appoggio alle richieste <strong>di</strong> autorizzazione al commercio attraverso<br />
procedure <strong>di</strong> mutuo riconoscimento con l'Italia come Reference o Concerned Member State.<br />
Drug Evaluation School (DESch)<br />
La Drug Evaluation School, per conto dell’Agenzia Italiana del farmaco (AIFA). Il corso<br />
triennale mira a formare esperti in grado <strong>di</strong> valutare le domande <strong>di</strong> autorizzazione al commercio<br />
dei farmaci, in particolare nell’ambito dell’Unione Europea, fornendo loro competenze<br />
scientifico-metodologiche e conoscenze sulle normative in campo regolatorio.<br />
151<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
152<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
LABORATORIO PER LA SALUTE<br />
MATERNO INFANTILE<br />
PERSONALE<br />
Capo Laboratorio Maurizio BONATI, Dr.Med.Chir.<br />
IRFMN<br />
153<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL LABORATORIO<br />
IRFMN<br />
La ricerca, intesa come approccio multi<strong>di</strong>sciplinare per produrre conoscenza, caratterizza<br />
l'attività del Laboratorio che si esplica per la partecipazione <strong>di</strong> operatori sanitari e sociali, madri,<br />
bambini e genitori.<br />
Il principale obiettivo delle attività svolte dal Laboratorio per la Salute Materno Infantile è<br />
quello <strong>di</strong> contribuire al miglioramento del benessere della madre e del bambino me<strong>di</strong>ante un<br />
lavoro inter<strong>di</strong>sciplinare e collettivo nell'ambito della Salute Pubblica.<br />
Quattro sono le aree <strong>di</strong> ricerca:<br />
- il monitoraggio e la valutazione epidemiologica dell’uso razionale dei farmaci e dei vaccini;<br />
- la ricerca nella pratica ospedaliera e nelle cure primarie;<br />
- lo stu<strong>di</strong>o delle variabili socio-sanitarie associate alle con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> salute dei bambini;<br />
- il trasferimento dell’informazione alla comunità.<br />
Uno sguardo particolare nello svolgimento delle attività è anche rivolto ai Paesi del Sud del<br />
Mondo, attraverso la collaborazione nella stesura e valutazione <strong>di</strong> progetti <strong>di</strong> cooperazione in<br />
ambito <strong>di</strong> Salute Pubblica e della ricerca epidemiologica.<br />
Oltre all’attività <strong>di</strong> ricerca formale il Laboratorio è attivo nella partecipazione e organizzazione<br />
<strong>di</strong> iniziative <strong>di</strong> informazione, formazione e <strong>di</strong>battito rivolte sia agli operatori sanitari e sociali<br />
che alla popolazione, attinenti alla cura e al prendersi cura della madre e del bambino.<br />
Il trasferimento critico e partecipato delle conoscenze scientifiche è stimolo continuo e<br />
quoti<strong>di</strong>ano al lavoro che il Laboratorio svolge.<br />
Il Centro <strong>di</strong> Informazione sul Farmaco, la cui attività principale è finalizzata all’uso razionale<br />
dei farmaci durante l’allattamento e in età pe<strong>di</strong>atrica, è parte del Laboratorio. Nato negli anni<br />
‘70 con lo scopo <strong>di</strong> promuovere l’attività dei prontuari terapeutici ospedalieri, si è sempre più<br />
caratterizzato per l'interesse verso i pazienti/utenti e tutti gli operatori sanitari.<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
Associazione Culturale Pe<strong>di</strong>atri<br />
AIFA, Agenzia Italiana del Farmaco<br />
Centro Antiveleni-Unità <strong>di</strong> Tossicologia Clinica-Ospedali Riuniti <strong>di</strong> Bergamo<br />
Centro per la Salute del Bambino<br />
CINECA, Consorzio Interuniversitario<br />
ISS, <strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità<br />
Il Pensiero Scientifico E<strong>di</strong>tore<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano-Facoltà <strong>di</strong> Scienze Politiche<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano, Bicocca-Facoltà <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina-Clinica Pe<strong>di</strong>atrica<br />
154<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
Agenzia Europea per i Me<strong>di</strong>cinali (EMEA)<br />
Centro de Epidemiologia Comunitaria y Me<strong>di</strong>cina Tropical (CECOMET), Ecuador<br />
Colsubsi<strong>di</strong>o, Colombia<br />
European Network Drug Investigation Children (ENDIC)<br />
European Society for Developmental Perinatal & Pae<strong>di</strong>atric Pharmacology (ESDPPP)<br />
Fundacio Institut Catala de Farmacologia, Barcellona, Spagna<br />
Hôpital Robert Debré, Parigi, Francia<br />
International Society of Drug Bulletins (ISDB)<br />
Organizzazione Mon<strong>di</strong>ale della Sanità (OMS)<br />
Unione Europea (UE)<br />
Università <strong>di</strong> Nottingham - Derbyshire Children's Hospital<br />
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
IRFMN<br />
Il Responsabile <strong>di</strong> Laboratorio, dott. Maurizio Bonati, è presente nei seguenti Comitati<br />
E<strong>di</strong>toriali: European Journal of Clinical Pharmacology, Pae<strong>di</strong>atric & Perinatal Drug Therapy,<br />
Pe<strong>di</strong>atria (Sao Paulo), Quaderni ACP, Ricerca & Pratica, Saludarte.<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
Archives of Disease in Childhood, Drug Safety, Expert Opinion on Pharmacotherapy, European<br />
Journal of Clinical Pharmacology, Major Drug Safety Information on the Internet, Pe<strong>di</strong>atric<br />
Drugs, Pe<strong>di</strong>atric and Perinatal Drug Therapy, Pe<strong>di</strong>atrics, Prescrire, The Italian Journal of<br />
Pe<strong>di</strong>atrics.<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
Comitato scientifico ADHD - ISS<br />
Commissione tecnica per l'elaborazione, gestione ed aggiornamento del Prontuario Terapeutico<br />
Regionale (P.T.R.) - Regione Autonoma Valle d'Aosta<br />
Gruppo <strong>di</strong> lavoro Network Italiano Promozione Acido Folico - ISS<br />
Gruppo <strong>di</strong> Lavoro Pe<strong>di</strong>atrico - AIFA<br />
Gruppo <strong>di</strong> Lavoro "Promozione allattamento al seno" - Regione Lombar<strong>di</strong>a<br />
Pae<strong>di</strong>atric Expert Group (P.E.G.)- EMEA<br />
155<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
IRFMN<br />
Corso interuniversitario finalizzato alla creazione <strong>di</strong> specialisti in pianificazione e gestione <strong>di</strong><br />
progetti <strong>di</strong> cooperazione allo sviluppo "Master in Analisi e Gestione <strong>di</strong> Progetti <strong>di</strong> Sviluppo"<br />
(www.eco-<strong>di</strong>p.unimi.it), svoltosi dal 5 al 16 Luglio <strong>2004</strong> presso l'<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri <strong>di</strong><br />
Milano.<br />
Il 30 Novembre a Roma presso la Sala Cenacolo della Camera dei Deputati è stato presentato il<br />
“Terzo rapporto Arno” sulle prescrizioni dei farmaci rimborsabili dal SSN ai bambini italiani<br />
non ricoverati in ospedale.<br />
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
LABORATORIO<br />
Gennaio - Febbraio<br />
Farmaci utili e farmaci inutili. Centro Anziani Comune <strong>di</strong> Milano; Milano.<br />
Impact of compliance in children, the role of proper information to children and parents.<br />
Secondo Corso “Evaluation of me<strong>di</strong>cinal products in children”. European Society for<br />
Developmental Perinatal & Pae<strong>di</strong>atric Pharmacology - ESDPPP e Eu<strong>di</strong>pharm; Brussel, Belgio.<br />
A European clinical trials registry for trial registration – vision and reality. Convegno “Evidence<br />
based health care and the Cochrane Collaboration”. Centro Cochrane Italiano; <strong>Istituto</strong> “<strong>Mario</strong><br />
Negri”, Milano.<br />
Farmaci anticolesterolo. Centro Anziani Comune <strong>di</strong> Milano; Milano.<br />
Marzo<br />
Allergie e vaccini: quali prevenzioni sono veramente efficaci? Movimento Consumatori e il<br />
Comune <strong>di</strong> Borgo San Dalmazzo; Sala Consigliare <strong>di</strong> Borgo S. D. (CN).<br />
Diarree batteriche. Corso residenziale “Sfide della me<strong>di</strong>cina Tropicale nel Terzo Millennio”.<br />
Univ. Politecnica delle Marche, Fondazione Ivo de Carnerie e A.O. Univ. Ospedali Riuniti<br />
Umberto I - G.M. Lancisi - G. Salesi; Università Politecnica delle Marche, Ancona.<br />
La patologia iatrogena. Master “Farmacovigilanza”. SEFAP (Servizio <strong>di</strong> Epidemiologia e<br />
Farmacologia Preventiva) e Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano, Dipartimento <strong>di</strong> Scienze<br />
<strong>Farmacologiche</strong>; Milano.<br />
Aprile<br />
Lettura critica della letteratura scientifica. Banche dati bibliografiche – percorsi <strong>di</strong> ricerca. I<br />
database delle agenzie internazionali: il gioco degli in<strong>di</strong>catori. Corso <strong>di</strong> perfezionamento in<br />
Me<strong>di</strong>cina Tropicale e Salute Internazionale. <strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Malattie Infettive Tropicali; Brescia.<br />
Maggio<br />
Saper prescrivere un farmaco. Convegno “Saper comunicare”. Associazione Culturale Pe<strong>di</strong>atri<br />
ACP; Napoli (NA).<br />
156<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Giugno<br />
The evolution of the European pae<strong>di</strong>atric clinical trial register: DEC-NET.<br />
Use of psychotropic me<strong>di</strong>cations in children and adolescents: a study from Italy.<br />
Are off-label drug prescriptions by pae<strong>di</strong>atricians loyal to regulatory or guideline standards?<br />
Safety of psychotropic drug use during breast fee<strong>di</strong>ng: lack of evidence despite a lot of doubts.<br />
“9th Biennial Congress”. European Society for Developmental Perinatal & Pae<strong>di</strong>atric<br />
Pharmacology - ESDPPP; Marburg, Germania.<br />
Informazione in pe<strong>di</strong>atria, l’esperienza <strong>di</strong> un centro <strong>di</strong> informazione sul farmaco. Corso<br />
“Farmacovigilanza e informazione in pe<strong>di</strong>atria”. Società Italiana <strong>di</strong> farmacia Ospedaliera -<br />
SIFO, <strong>Istituto</strong> G. Gaslini; Genova.<br />
La ricerca in pe<strong>di</strong>atria <strong>di</strong> libera scelta, potenzialità e praticabilità. Corso <strong>di</strong> formazione per<br />
me<strong>di</strong>ci sperimentatori. Regione Veneto; Bassano del Grappa (VI).<br />
Settembre<br />
Phone counselling on breast feeling. Corso “Farmaci ed allattamento al seno: farmacologia<br />
clinica, raccomandazioni ed esperienze”. Neonatologia e Terapia Intensiva Neonatale - Burlo<br />
Garofolo, Trieste.<br />
Terapie farmacologiche. Corso teorico - pratico <strong>di</strong> aggiornamento “Il Disturbo da deficit<br />
attentivo con iperattività (ADHD): valutazione <strong>di</strong>agnostica e strategie <strong>di</strong> investimento”. Società<br />
Italiana <strong>di</strong> Neuropsichiatria dell’Infanzia e dell’Adolescenza - S.I.N.P.I.A., Dipartimento <strong>di</strong><br />
Neuroscienze - Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Cagliari; Tramariglio, Alghero (SS).<br />
I bambini, la povertà, la guerra. III Corso DI Laboratorio per Giornalisti Scientifici “Cellule e<br />
Genomi”. Open Lab (Laboratorio <strong>di</strong> Biologia dello Sviluppo), Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Pavia;<br />
Pavia.<br />
La proposta del registro europeo degli stu<strong>di</strong> clinici pe<strong>di</strong>atrici. Seminario <strong>di</strong> aggiornamento<br />
“Confidenzialità e trasparenza nei processi decisionali dei comitati etici”. Comitato Etico<br />
dell’Azienda Ospedaliera “Ospedale <strong>di</strong> Circolo” <strong>di</strong> Busto Arsizio, Research Group on<br />
Rights/Ethics in Me<strong>di</strong>cine - R2EM, Società Italiana <strong>di</strong> Farmacisti Ospedalieri - SIFO. Busto<br />
Arsizio (VA).<br />
Ottobre<br />
Uso off-label dei farmaci per i bambini. Le preparazioni galeniche in pe<strong>di</strong>atria. II Congresso<br />
Nazionale “La preparazione in farmacia: Realtà e Prospettive”. Società Italiana Farmacisti<br />
Preparatori - SIFAP; Roma.<br />
Adolescenti. Progetto ARNO “Donne e Farmaci”. Consorzio <strong>Mario</strong> Negri Sud, Consorzio<br />
Interuniversitario CINECA; Roma.<br />
Saper prescrivere un farmaco. Convegno “Saper Comunicare in pe<strong>di</strong>atria” Associazione<br />
Culturale Pe<strong>di</strong>atri - ACP; Napoli.<br />
Le <strong>di</strong>suguaglianze nella cura del bambino. Protezione o prevenzione? XVI Congresso Nazionale<br />
ACP. Associazione Culturale Pe<strong>di</strong>atri - ACP; Montesilvano (PE).<br />
Novembre<br />
Nuove conoscenze in psicofarmacologia dell’età evolutiva. Congresso Nazionale SINPIA e<br />
Corso ECM <strong>di</strong> psicofarmacologia pe<strong>di</strong>atrica. S.I.N.P.I.A. (Società Italiana <strong>di</strong> Neuropsichiatria<br />
157<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
dell’Infanzia e dell’Adolescenza) e Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Modena e Reggio Emilia; Modena .<br />
Gli stu<strong>di</strong> pe<strong>di</strong>atrici. Convegno: “Ricercatori e Comitati Etici”. IRFMN (<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong><br />
<strong>Farmacologiche</strong> <strong>Mario</strong> Negri <strong>di</strong> Milano), Centro Stu<strong>di</strong> ANMCO (Associazione Italiana Me<strong>di</strong>ci<br />
Car<strong>di</strong>ologi Ospedalieri <strong>di</strong> Firenze), Policlinico S. Matteo - IRCCS <strong>di</strong> Pavia e il Consorzio <strong>Mario</strong><br />
Negri Sud <strong>di</strong> Santa Maria Imbaro a Chieti; Milano.<br />
Dicembre<br />
Gli “esclusi” dal trial…i bambini. III Congresso: “Decidere in me<strong>di</strong>cina”. Firenze.<br />
Bambini, <strong>di</strong>ritti e salute. Incontro: “Befana sul fiume Lambro”. Commissione Cultura<br />
Alternativa (CCA) <strong>di</strong> Carate Brianza e il Comitato per il <strong>di</strong>ritto al Mito-Festa dei bambini;<br />
Carate Brianza (MI).<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
Boehringer Ingelheim<br />
CINECA, Consorzio Interuniversitario<br />
Unione Europea<br />
Fondazione Monzino<br />
Il Pensiero Scientifico E<strong>di</strong>tore<br />
Ministero Salute<br />
Regione Lombar<strong>di</strong>a - Assessorato alla Sanità<br />
Regione Valle d'Aosta - Assessorato alla Sanità, Salute e Politiche Sociali<br />
158<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Bonati M, Campi R. Regional inequalities in health for Italian children. Global Health Watch Webside<br />
<strong>2004</strong>;http://www.ghwatch.org/english/casestu<strong>di</strong>es/ghw_italy.pdf.<br />
Bonati M, Pandolfini C. Children need international formulary to guarantee rational<br />
use of drugs. BMJ <strong>2004</strong>;328:227.<br />
IRFMN<br />
Bonati M, Pandolfini C. Is it time for an European Formulary of Pae<strong>di</strong>atric Me<strong>di</strong>cines? Arch Dis Child <strong>2004</strong>;89:890-<br />
891.<br />
Bonati M, Pandolfini C, Clavenna A. Disclosure of Clinical Trials in Children. Science <strong>2004</strong>;305:1401.<br />
Bonati M, Pandolfini C, Rossi V, Santoro E, Arnau De Bolos JM, Carreras ID, Camps IF, Castel Llobet JM, Jacqz-<br />
Aigrain E, Zarrabian S, Choonara I, Sammons H, Steingo J. Launch of a European pae<strong>di</strong>atric clinical trials register.<br />
Paed Perin Drug Ther <strong>2004</strong>;6:38-39.<br />
Bonati M, Pandolfini C, Rossi V, Santoro E, Arnau JM, Fuentes I, Castel Llobet JM, Jacqz-Aigrain E, Zarrabian S,<br />
Choonara I, Sammons H, Steingo J. Public <strong>di</strong>sclosure of clinical trials. BMJ(e-letter)<br />
<strong>2004</strong>;bmj.bmjjournals.conm/cgi/eletters/329/7457/64#69125.<br />
Bonati M, Pandolfini C, Rossi V, Santoro E, Arnau JM, Fuentes I, Carreras ID, Camps IF, Castel Llobet JM, Jacqz-<br />
Aigrain E, Zarrabian S, Choonara I, Sammons H, Steingo J, Naylor C. A complete clinica trial register is already a<br />
reality for the pae<strong>di</strong>atric field. BMJ (e-letter) <strong>2004</strong>; http://bmj.bmjjournals.com/cgi/eletters/329/7467/637#90155.<br />
Clavenna A, Bonati M, Rossi E, De Rosa M. Increase in non-evidence based use of antidepressants in children is<br />
cause for concern. BMJ <strong>2004</strong>;328:711-12.<br />
Hutangkabodee S, Krisanaphan C, Reggi V, Figueras A, Bonati M. Regulatory evaluation of efficacy and safety of<br />
new drugs in China. J Med Assoc Thai <strong>2004</strong>;87:1135.<br />
Marchetti F, Ronfani L, Conti Nibali S, Bonati M, Tamburlini G, for Italian Study Group on Acute Otitis Me<strong>di</strong>a<br />
Restricted in<strong>di</strong>cations for the use of antibiotics in acute otitis me<strong>di</strong>a. Eur J Clin Pharmacol <strong>2004</strong>;60:293-294.<br />
Panei P, Arcieri R, Vella S, Bonati M, Martini N, Zuddas A. Italian Attention-Deficit/Hiperactivity Disorder<br />
Registry. Pe<strong>di</strong>atrics <strong>2004</strong>;114:514.<br />
Schiavetti B, Clavenna A, Campi R, Bonati M. NSAIDs during pregnancy and risk of miscarriage: true risks or only<br />
suspicions?. BMJ <strong>2004</strong>;328:108-9.<br />
Xianglin Z, Bertelé V, Reggi V, Bonati M. Regulatory evaluation of efficacy and safety of new drugs in China.<br />
Chinese Me<strong>di</strong>cal Journal <strong>2004</strong>;117:320.<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI DIVULGATIVE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Bonati M. Perchè i <strong>di</strong>versi prezzi del latte artificiale in Europa non sembrano mai equilibrarsi? MAMI Notizie<br />
<strong>2004</strong>;7:2.<br />
Bonati M. Capitani della spiaggia. Quaderni acp <strong>2004</strong>;11:117.<br />
Bonati M. Gli alberghi infantili <strong>di</strong> mama' Yolanda. Quaderni acp <strong>2004</strong>;11:170-71.<br />
Bonati M. Aprire le porte: per affacciarsi al mondo e guardare. Quaderni acp <strong>2004</strong>; 11: 207.<br />
159<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Bonati M. Cantando a la salud <strong>di</strong> mamma e bambino. Viator <strong>2004</strong>;7-8:14-16.<br />
Bonati M. I bambini e le guerre. In: Cellule e genomi. Ibis ed. <strong>2004</strong>;95-111.<br />
Bonati M. Il burattino ribelle e i bambini mancati. FuoriLUOGO <strong>2004</strong>;11:8-9.<br />
Bonati M. Aprire occhi e porte. Viator <strong>2004</strong>;11: 20-21.<br />
Bonati M, Pandolfini C. DEC-net: il primo registro <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> clinici pe<strong>di</strong>atrici. Me<strong>di</strong>co e Bambino <strong>2004</strong>;23:281.<br />
IRFMN<br />
Bonati M, Pandolfini C, Rossi V, Santoro E. Un registro degli stu<strong>di</strong> clinici pe<strong>di</strong>atrici: uno strumento dalla parte dei<br />
bambini. GIFC <strong>2004</strong>;18:1-5.<br />
Bonati M, Pandolfini C, Rossi V, Santoro E, Arnau JM, Carreras ID, Fuentes Camps I, Jacqz-Aigrain E, Choonara I,<br />
Sammons H, Steingo J. Il primo registro <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> clinici pe<strong>di</strong>atrici europeo: DEC-net. Assistenza Infermieristica e<br />
Ricerca <strong>2004</strong>;23:91-2.<br />
Campi R. Il test <strong>di</strong> ipotesi. R&P <strong>2004</strong>;20:64-69.<br />
Campi R. Il test <strong>di</strong> ipotesi (parte II: i test non parametrici). R&P <strong>2004</strong>;20:167-173.<br />
Clavenna A, Bonati M. Antidepressivi in età pe<strong>di</strong>atrica: molte ombre, poche evidenze. In: Rivista Sperimentale <strong>di</strong><br />
Freniatria. Psicofarmaci. <strong>2004</strong>;CXXVIII(3):81-94.<br />
Col M, Malguzzi S, Ghitti C, Clavenna A. Utilizzare l'adrenalina nella bronchiolite? Quaderni ACP <strong>2004</strong>;11: 218-<br />
220.<br />
Danés Carrera I, Fuentes Camps I, Arnau de Bolós JM, Pandolfini C, Bonati M, Sammons H, Choonara I, Jacqz-<br />
Aigrain E. Un registro europeo de ensayos clínicas en niños. An Pe<strong>di</strong>atr (Barc) <strong>2004</strong>;60:212-4.<br />
Marsico G, Bonati M, Romero M, Tognoni G, Gruppo Lavoro R2EM Epidemiologia qualitativa delle pratiche dei<br />
Comitati Etici-Progetto Trasparenza. GIFC <strong>2004</strong>;<br />
18:95-101.<br />
Pandolfini C. EpiCentro. R&P <strong>2004</strong>;20:175.<br />
Pandolfini C. The Brighton Collaboration. R&P <strong>2004</strong>;20:63.<br />
Schiavetti B. A Milano, Sanità come riflessione culturale. Quaderni acp <strong>2004</strong>;11:54.<br />
Zuddas A, Bonati M. ADHD: qualcosa si muove. Me<strong>di</strong>co e Bambino <strong>2004</strong>;23:156.<br />
ALTRE PRODUZIONI EDITORIALI PUBBLICATE NEL CORSO DEL<br />
<strong>2004</strong><br />
CD - Stage in Cooperazione e Salute Pubblica<br />
CD - Raccolta <strong>di</strong> lavori sulla "Salute dell'infanzia nei Paesi Poveri" della Classe V B dell'<strong>Istituto</strong> Comprensivo <strong>di</strong> Via<br />
Trilussa Milano<br />
160<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
IRFMN<br />
Indagine conoscitiva sul gra<strong>di</strong>mento, uso e miglioramento della Guida<br />
all'uso dei farmaci per bambini<br />
(In collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Informatica Me<strong>di</strong>ca)<br />
La Guida all’uso dei farmaci per i bambini è il primo prontuario terapeutico pe<strong>di</strong>atrico nazionale<br />
in Italia e il secondo a livello europeo, dopo la versione britannica. Lo scopo principale <strong>di</strong> un<br />
prontuario non è semplicemente quello <strong>di</strong> elencare dei farmaci e il loro profilo terapeutico, ma<br />
<strong>di</strong> rappresentare uno strumento essenziale per l’uso razionale dei farmaci. Deve essere una fonte<br />
<strong>di</strong> informazioni aggiornata e basata sulle evidenze sia per i singoli farmaci che per le terapie (e<br />
in particolare per i problemi più frequenti) sia in ospedale che nella comunità. Solo<br />
recentemente è stata compresa la necessità <strong>di</strong> un prontuario pe<strong>di</strong>atrico collaborativo e nazionale.<br />
Nonostante gli in<strong>di</strong>scutibili obiettivi che hanno motivato e animato l’iniziativa ministeriale si è<br />
ritenuto in<strong>di</strong>spensabile verificare con i <strong>di</strong>retti destinatari (me<strong>di</strong>ci, infermieri e farmacisti) quanto<br />
la Guida risponda a dei bisogni informativi nella pratica assistenziale attraverso il giu<strong>di</strong>zio<br />
critico degli operatori-lettori-utilizzatori in termini <strong>di</strong> vali<strong>di</strong>tà, rilevanza, chiarezza, pertinenza,<br />
etc.<br />
Una ”indagine conoscitiva” all’insegna della partecipazione, dell’informazione attiva e per<br />
ottenere in<strong>di</strong>cazioni e <strong>di</strong>sponibilità per future migliorie. A tale scopo è stato pre<strong>di</strong>sposto un<br />
questionario composto <strong>di</strong> due sezioni: una prima parte per la raccolta dei dati personali (con<br />
possibilità <strong>di</strong> anonimia) e una seconda per la valutazione specifica della Guida. La compilazione<br />
è stata possibile utilizzando la versione elettronica del questionario <strong>di</strong>sponibile in Internet.<br />
Registro Europeo degli stu<strong>di</strong> clinici pe<strong>di</strong>atrici<br />
(In collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Informatica Me<strong>di</strong>ca)<br />
Nell’ambito del Fifth Framework Programme, l’Unione Europea ha affidato al Laboratorio per<br />
la Salute Materno-Infantile la progettazione e il coor<strong>di</strong>namento del Registro Europeo degli Stu<strong>di</strong><br />
Clinici Pe<strong>di</strong>atrici. Partecipano alla prima fase <strong>di</strong> attuazione, oltre all’Italia, Francia, Regno Unito<br />
e Spagna.<br />
Il Registro internazionale rappresenta una risposta alla riconosciuta carenza <strong>di</strong> appropriati stu<strong>di</strong><br />
volti a produrre evidenze circa l’efficacia e la sicurezza delle terapie pe<strong>di</strong>atriche. Sebbene gli<br />
stu<strong>di</strong> clinici, ben pianificati e condotti, in particolare se controllati e randomizzati, rivestano un<br />
ruolo fondamentale per la produzione <strong>di</strong> evidenze, i risultati prodotti sono spesso <strong>di</strong> <strong>di</strong>fficile<br />
reperimento o limitati, per qualità/quantità e temporalità, alla loro pubblicazione. Inoltre, alcuni<br />
stu<strong>di</strong> una volta intrapresi vengono sospesi, quelli con risultati negativi non vengono pubblicati o<br />
<strong>di</strong>vulgati, altri rappresentano duplicati o ripetizioni <strong>di</strong> sperimentazioni già effettuate, il tutto con<br />
uno spreco <strong>di</strong> risorse e violazioni etiche (il coinvolgimento <strong>di</strong> pazienti in sperimentazioni non<br />
essenziali). La creazione <strong>di</strong> un unico e specifico Registro delle sperimentazioni cliniche<br />
pe<strong>di</strong>atriche rappresenta quin<strong>di</strong> un potenziale mezzo per ridurre tali “<strong>di</strong>storsioni”. Il Registro è<br />
anche un utile strumento per: la pianificazione <strong>di</strong> nuove ricerche (in termini <strong>di</strong> appropriatezza e<br />
necessità); promuovere la collaborazione e la comunicazione tra ricercatori (sia a livello<br />
nazionale che internazionale); facilitare l’accesso all’informazione anche da parte dei pazienti e<br />
il loro reclutamento più “partecipato”; evitare duplicazioni e ripetizioni <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>; consentire una<br />
<strong>di</strong>stribuzione più oculata e appropriata dei fon<strong>di</strong> per la ricerca clinica; identificare i bisogni<br />
terapeutici ancora inevasi. Il Registro consente anche il monitoraggio attivo degli stu<strong>di</strong> in corso<br />
(il loro procedere e il loro esito). Dei numerosi registri <strong>di</strong>sponibili nessuno, a tutt’oggi, sod<strong>di</strong>sfa<br />
queste finalità. Il Registro è operativo ed è possibile segnalare da parte degli operatori sanitari le<br />
sperimentazioni cliniche pe<strong>di</strong>atriche in corso o pianificate.<br />
www.dec-net.org<br />
161<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Progetto ARNO-Pe<strong>di</strong>atria. Terzo <strong>Rapporto</strong> ARNO<br />
Da oltre cinque anni un milione <strong>di</strong> bambini e adolescenti, e le rispettive famiglie, costituiscono<br />
la popolazione del Progetto ARNO-Pe<strong>di</strong>atria (unico, per <strong>di</strong>mensioni e durata, a livello nazionale<br />
e internazionale), nato grazie alla collaborazione tra l’<strong>Istituto</strong> “<strong>Mario</strong> Negri” <strong>di</strong> Milano e il<br />
CINECA <strong>di</strong> Bologna.<br />
L’iniziativa rientra nel più ampio Progetto ARNO <strong>di</strong> monitoraggio delle prescrizioni<br />
farmaceutiche, attivo presso il CINECA dal 1986 a cui partecipano alcune decine <strong>di</strong> ASL del<br />
territorio Nazionale.<br />
Ricerca & Pratica<br />
R&P è nata nel gennaio del 1985, come espressione dell'<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> <strong>Farmacologiche</strong><br />
"<strong>Mario</strong> Negri". La rivista è oggi arricchita dalla collaborazione delle più avanzate équipe <strong>di</strong><br />
ricerca clinica italiana e delle riviste in<strong>di</strong>pendenti nazionali afferenti all'International Society of<br />
Drug Bulletins. Come leggere un trial clinico? Come <strong>di</strong>stinguere una vera da una falsa novità<br />
nel mercato dei farmaci? Come valutare la qualità degli interventi sanitari? Da 20 anni, R&P<br />
contribuisce ad aiutare il lettore a rispondere a questi come ad altri interrogativi, approfondendo<br />
argomenti <strong>di</strong> epidemiologia clinica, statistica me<strong>di</strong>ca, farmacocinetica clinica, interazioni tra<br />
farmaci, osservazioni <strong>di</strong> economia, organizzazione ed epidemiologia sanitaria. Gli aspetti più<br />
apprezzati sono l'in<strong>di</strong>pendenza della rivista e dei suoi autori, l'offerta <strong>di</strong> un palcoscenico per tutti<br />
coloro che nell’ambito delle cure primarie raccolgono dati e producono stu<strong>di</strong> con il sincero<br />
intento <strong>di</strong> capire e <strong>di</strong> migliorarsi, lo sforzo <strong>di</strong> guardare al <strong>di</strong> là dei soli aspetti clinici della<br />
me<strong>di</strong>cina, senza però mai <strong>di</strong>menticare che è alla clinica che i lettori de<strong>di</strong>cano la maggior parte<br />
del proprio tempo e dei propri sforzi. L’impegno <strong>di</strong> R&P è quello <strong>di</strong> continuare in questa<br />
<strong>di</strong>rezione, allargando ulteriormente gli spazi <strong>di</strong> attenzione alla me<strong>di</strong>cina e pe<strong>di</strong>atria <strong>di</strong> famiglia e<br />
ai problemi della salute e della sanità pubblica; il tutto con uno sguardo all'Europa. Un<br />
osservatorio esclusivo e autonomo che è anche un laboratorio <strong>di</strong> riflessione, valutazione e<br />
informazione attraverso strumenti come l'affidabilità e la rilevanza dei dati, l'equilibrio tra<br />
benefici e rischi e tra benefici e costi, l'in<strong>di</strong>pendenza da conflitti <strong>di</strong> interesse, l'obiettivo reale <strong>di</strong><br />
contribuire ad un miglioramento, progressivo ed equamente <strong>di</strong>stribuito, del livello <strong>di</strong> salute della<br />
popolazione.<br />
Cure efficaci per l'ADHD<br />
Dopo la Conferenza Nazionale <strong>di</strong> Consenso sull’ADHD, una patologia <strong>di</strong>ffusa tra bambini e<br />
adolescenti (prevalenza stimata tra 1-4% della popolazione in età scolare) nota come <strong>di</strong>sturbo da<br />
deficit attenzione con iperattività, qualcosa sembra attuarsi.<br />
La Conferenza tenutasi a Cagliari il 6-7 marzo 2003 e organizzata dall’Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong><br />
Cagliari e dall’<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> <strong>Farmacologiche</strong> “<strong>Mario</strong> Negri” <strong>di</strong> Milano, aveva proposto<br />
alcune in<strong>di</strong>cazioni, riassumibili in quanto segue:<br />
- la <strong>di</strong>agnosi <strong>di</strong> ADHD, e degli altri <strong>di</strong>sturbi con sintomi simili, deve essere effettuata da<br />
operatori della salute mentale dell’età evolutiva e deve coinvolgere, sempre e sin dall’inizio,<br />
oltre al bambino, i suoi genitori, gli insegnanti e il pe<strong>di</strong>atra <strong>di</strong> famiglia;<br />
- il programma <strong>di</strong> trattamento deve prevedere consigli e supporto per i genitori e gli insegnanti,<br />
oltre a interventi psicologici specifici. La terapia con farmaci dovrebbe essere intrapresa solo se<br />
in<strong>di</strong>cata da un neuropsichiatra infantile, in accordo con le evidenze riconosciute dalla comunità<br />
internazionale. Il neuropsichiatra infantile deve anche coor<strong>di</strong>nare e monitorare con gli altri<br />
operatori e la famiglia il percorso assistenziale del bambino;<br />
- occorre pre<strong>di</strong>sporre un piano nazionale (con un’articolazione a livello regionale) specifico<br />
riguardo a questa patologia, per una <strong>di</strong>agnosi che valuti in modo accurato il <strong>di</strong>sturbo e per<br />
fornire un’assistenza adeguata al bambino malato e alla sua famiglia.<br />
Le in<strong>di</strong>cazioni espresse dalla Conferenza sono state recepite dal Ministero della Salute che<br />
tramite l’AIFA (Agenzia Italiana del Farmaco) ha espresso parere favorevole alla registrazione e<br />
162<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
alla rimborsabilità del metilfenidato, farmaco attualmente <strong>di</strong> prima scelta per il trattamento<br />
dell’ADHD, e semplificato le procedure <strong>di</strong> prescrizione. E’ stata inoltre affidata all’<strong>Istituto</strong><br />
Superiore <strong>di</strong> Sanità l’attivazione <strong>di</strong> un Registro Nazionale dei bambini e adolescenti con ADHD<br />
al fine <strong>di</strong> monitorare che i percorsi <strong>di</strong>agnostici e terapeutici siano appropriati, efficaci e<br />
con<strong>di</strong>visi a livello nazionale. Nella realizzazione, controllo e implementazione <strong>di</strong> tali attività il<br />
Laboratorio partecipa attivamente.<br />
La sod<strong>di</strong>sfazione per il positivo contributo della Conferenza sarà ovviamente completa solo<br />
quando i bambini e gli adolescenti con ADHD, e le loro famiglie, potranno beneficiare <strong>di</strong> quelle<br />
cure efficaci che ancora oggi attendono.<br />
Centro <strong>di</strong> Informazione sul Farmaco<br />
Il Centro <strong>di</strong> Informazione sul Farmaco, nato con lo scopo <strong>di</strong> promuovere l’attività dei prontuari<br />
terapeutici ospedalieri, si è sempre più caratterizzato per l'interesse verso i pazienti/utenti e gli<br />
operatori sanitari in ambito extra-ospedaliero.<br />
Il cuore dell’attività del Centro è rappresentato dal servizio quoti<strong>di</strong>ano <strong>di</strong> consulenza telefonica,<br />
garantita anche ai non specialisti, per ciò che riguarda la terapia farmacologica e bisogni <strong>di</strong><br />
salute durante l’allattamento e l’età pe<strong>di</strong>atrica; mentre l’attività <strong>di</strong> informazione sull’uso <strong>di</strong><br />
farmaci in gravidanza, dal gennaio <strong>2004</strong>, viene svolta dal Centro Antiveleni - Unità <strong>di</strong><br />
Tossicologia Clinica - Ospedali Riuniti <strong>di</strong> Bergamo che con il Laboratorio è parte del<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Farmacia Clinica e Farmacologia.<br />
Tutte le richieste, e le relative risposte, vengono inserite in una banca-dati, così da permettere il<br />
monitoraggio dell’attività, sia in termini <strong>di</strong> rilevazione farmaco-epidemiologica, che <strong>di</strong> followup<br />
dei problemi.<br />
163<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
164<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
LABORATORIO<br />
EPIDEMIOLOGIA GENERALE<br />
PERSONALE<br />
Capo Laboratorio Carlo LA VECCHIA, Dr.Med.Chir.<br />
Unità delle Malattie Croniche<br />
Capo Unità Alessandra TAVANI, Dr.Sci.Biol.<br />
Unità <strong>di</strong> Metodologia Epidemiologica<br />
Capo Unità Eva NEGRI, Dr.Mat.<br />
IRFMN<br />
165<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL LABORATORIO<br />
IRFMN<br />
Il laboratorio <strong>di</strong> Epidemiologia si occupa principalmente <strong>di</strong> epidemiologia <strong>di</strong> <strong>di</strong>verse comuni<br />
neoplasie (tra cui tumori del seno, del tratto genitale femminile, del tratto respiratorio e<br />
<strong>di</strong>gestivo, della prostata e delle vie urinarie, neoplasie linfoi<strong>di</strong>, melanomi, etc.) e delle malattie<br />
car<strong>di</strong>ovascolari, attraverso un approccio sia descrittivo, che analitico. Tra le attività <strong>di</strong><br />
epidemiologia descrittiva vi sono l'analisi degli andamenti temporali e della <strong>di</strong>stribuzione<br />
geografica della mortalità per tumore, malattie car<strong>di</strong>ovascolari, e altre con<strong>di</strong>zioni selezionate, in<br />
Italia e Europa; inoltre l'analisi degli andamenti nel consumo del fumo <strong>di</strong> tabacco nella<br />
popolazione italiana e dei corrispondenti effetti sull'incidenza e la mortalità per tumore del<br />
polmone ed altre neoplasie tabacco-relate. Per ciò che riguarda l'epidemiologia analitica, il<br />
Laboratorio si occupa della conduzione e analisi <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> osservazionali <strong>di</strong> tipo caso-controllo su<br />
vari tumori o patologie car<strong>di</strong>ovascolari, con la finalità <strong>di</strong> identificare e quantificare le relazioni<br />
tra aspetti genetici e vari fattori legati allo stile <strong>di</strong> vita (<strong>di</strong>eta, fumo, alcool, etc.), all'utilizzo <strong>di</strong><br />
ormoni esogeni e all'esposizione a varie sostanze. In particolare, si occupa dell'analisi dei<br />
correlati <strong>di</strong>etetici <strong>di</strong> tumori e malattie car<strong>di</strong>ovascolari; della quantificazione degli effetti sulla<br />
salute del fumo <strong>di</strong> tabacco, consumo <strong>di</strong> alcool e implicazioni per la prevenzione; dell'analisi del<br />
rischio <strong>di</strong> vari tumori associato all'utilizzo <strong>di</strong> contraccettivi orali e terapie sostitutive in<br />
menopausa; della valutazione dell'impatto dello screening nella <strong>di</strong>agnosi precoce e nella<br />
prevenzione del cancro. Altre attività in cui il Laboratorio è coinvolto riguardano la conduzione<br />
<strong>di</strong> meta-analisi e ri-analisi <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> epidemiologici pubblicati sulla tiroide, l'ovaio e la<br />
mammella, e l'analisi <strong>di</strong> coorti storiche <strong>di</strong> esposizioni occupazionali ad amine aromatiche,<br />
asbesto, erbici<strong>di</strong> e altri potenziali sostanze cancerogene.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Non esistono forti associazioni tra gruppi <strong>di</strong> cibi e tumore della prostata, a parte un aumento <strong>di</strong><br />
rischio legato al consumo <strong>di</strong> latte e latticini e un possibile effetto protettivo dei vegetali.<br />
Il rischio <strong>di</strong> tumore della prostata si riduce all’aumentare dell’assunzione <strong>di</strong> carotene, β-carotene<br />
e fibre alimentari, mentre non è risultata alcuna associazione con il licopene.<br />
Un elevato in<strong>di</strong>ce <strong>di</strong> massa corporea tra i 30 e i 39 anni <strong>di</strong> età è <strong>di</strong>rettamente associato al rischio<br />
<strong>di</strong> tumore prostatico.<br />
Il consumo <strong>di</strong> alcool non è associato al rischio <strong>di</strong> tumore della prostata.<br />
Non sono state rilevate associazioni consistenti tra ingestione <strong>di</strong> acrilamide nella <strong>di</strong>eta e rischio<br />
<strong>di</strong> tumori della mammella, del colonretto e <strong>di</strong> vari altri siti.<br />
E' stata osservata una forte relazione inversa tra livelli serici <strong>di</strong> a<strong>di</strong>ponectina e rischio <strong>di</strong> tumore<br />
dell’endometrio. Inoltre, in<strong>di</strong>ce <strong>di</strong> massa corporea e a<strong>di</strong>ponectina sembrano avere effetti<br />
in<strong>di</strong>pendenti sul rischio <strong>di</strong> tumore dell’endometrio.<br />
La familiarità al tumore del colonretto interagisce con i fattori <strong>di</strong> rischio ambientali del tumore<br />
del colon.<br />
Un nuovo polimorfismo identificato sul gene L-myc non è risultato associato al rischio o alla<br />
prognosi del carcinoma polmonare.<br />
166<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
La percentuale <strong>di</strong> casi <strong>di</strong> linfomi non-Hodgkin attribuibili all’infezione da epatite C è del 10%<br />
circa nei paesi con alta prevalenza <strong>di</strong> HCV, ed estremamente bassa negli altri paesi.<br />
I dati sul tumore della mammella sono stati inclusi in una ri-analisi collaborativa a livello<br />
mon<strong>di</strong>ale, che ha escluso ogni associazione tra aborti e rischio <strong>di</strong> tumore della mammella.<br />
Il sistema dei fattori <strong>di</strong> crescita insulino-relati (IGF) è risultato associato al rischio <strong>di</strong> tumori<br />
dell’ovaio e dell’endometrio.<br />
Il consumo <strong>di</strong> alcol durante i pasti riduce il rischio <strong>di</strong> infarto miocar<strong>di</strong>co <strong>di</strong> più che se bevuto<br />
durante e fuori i pasti.<br />
Il rischio <strong>di</strong> infarto miocar<strong>di</strong>co è <strong>di</strong>minuito in soggetti con alto consumo <strong>di</strong> pizza, folati e<br />
vitamina B6 e in quelli con maggiore attività fisica, mentre è raddoppiato nei soggetti con<br />
familiarità per la malattia.<br />
I fattori <strong>di</strong> rischio <strong>di</strong> infarto miocar<strong>di</strong>co nelle donne sono simili a quelli negli uomini.<br />
La <strong>di</strong>minuzione della mortalità per tutti i tumori nell’Unione Europea è continuata negli ultimi<br />
anni 1990, con una corrispondente riduzione <strong>di</strong> 90.000 morti per anno, rispetto ai tassi della fine<br />
degli anni 1980.<br />
Per la prima volta, verso la fine degli anni ’90, si è osservato un livellamento della mortalità per<br />
tumori nella Federazione Russa, la Repubblica Ceca, la Polonia, l’Ungheria e altri Paesi dell’Est<br />
Europeo. In quei paesi i tassi restano comunque estremamente elevati, principalmente a causa <strong>di</strong><br />
fattori riconosciuti – e potenzialmente evitabili - il più importante dei quali resta il tabacco.<br />
Nel <strong>2004</strong>, il 26.2% della popolazione italiana ha riportato <strong>di</strong> essere attuale fumatore <strong>di</strong> sigarette<br />
(30.0% degli uomini e 22.5% delle donne).<br />
Più <strong>di</strong> un terzo della popolazione Italiana ha percepito come me<strong>di</strong>a/alta l’influenza del prezzo<br />
delle sigarette sul consumo nei giovani, mentre il contrabbando <strong>di</strong> sigarette si è ora<br />
probabilmente ridotto.<br />
La prevalenza della cheratosi attinica, stimata su <strong>di</strong> un campione rappresentativo della<br />
popolazione Italiana <strong>di</strong> 45 anni o più (N=12,483 in<strong>di</strong>vidui), è pari a 1.4%.<br />
La prevalenza della cheratosi attinica aumenta all’aumentare dell’età ed è più alta tra gli uomini.<br />
Sia l’avere un fenotipo chiaro rispetto a uno più scuro, sia l’esporsi intensamente ai raggi solari<br />
aumenta il rischio <strong>di</strong> sviluppare delle cheratosi attiniche.<br />
167<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
IRFMN<br />
Centro Car<strong>di</strong>ologico Monzino, IRCCS, Milano<br />
Centro <strong>di</strong> Riferimento Oncologico, Servizio <strong>di</strong> Epidemiologia, Aviano (PN)<br />
Gruppo Italiano Stu<strong>di</strong> Epidemiologici in Dermatologia GISED, Bergamo<br />
<strong>Istituto</strong> Auxologico Italiano, Divisione Malattie Metaboliche III, IRCCS, Piancavallo (VB)<br />
<strong>Istituto</strong> Auxologico Italiano, Laboratorio Sperimentale <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> Endocrinologiche (LSRE),<br />
IRCCS, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Fisiologia Clinica CNR, Sezione <strong>di</strong> Milano, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina del Lavoro, CTO, Torino<br />
<strong>Istituto</strong> Europeo <strong>di</strong> Oncologia, Divisione <strong>di</strong> Epidemiologia e Biostatistica, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> Nazionale Neurologico "Carlo Besta", Milano<br />
<strong>Istituto</strong> Nazionale <strong>di</strong> Ricerca per gli Alimenti e la Nutrizione (INRAN), Roma<br />
<strong>Istituto</strong> Nazionale per la Ricerca sul Cancro, Genova<br />
<strong>Istituto</strong> Nazionale per lo Stu<strong>di</strong>o e la Cura dei Tumori, Oncologia Sperimentale, Unità <strong>di</strong> Ere<strong>di</strong>tà<br />
Poligenetica, Milano<br />
<strong>Istituto</strong> Tumori “Fondazione Pascale”, Servizio <strong>di</strong> Epidemiologia, Napoli<br />
Ospedale Niguarda, Dipartimento Car<strong>di</strong>ologico “A. De Gasperis”, Milano<br />
Prima Clinica Ostetrico Ginecologia, Mangiagalli, Milano<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano - Bicocca, Dipartimento <strong>di</strong> Statistica, Milano<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano, Milano<br />
Università <strong>di</strong> Milano, Clinica Pe<strong>di</strong>atrica De Marchi, Milano<br />
Università <strong>di</strong> Milano, <strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Statistica Me<strong>di</strong>ca e Biometria, Milano<br />
Università <strong>di</strong> Milano, Prima Clinica Ostetrico Ginecologica, Milano<br />
Università <strong>di</strong> Verona, Clinica Ostetrico Ginecologica, Verona<br />
International Centre for Pesticides and Health Risk Prevention, Busto Garolfo, Milano<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
Harvard School of Public Health, Department of Epidemiology, Boston, USA<br />
Hôpital Necker - Enfants Malades, Centre of the Association Claude Bernard on Auto-immunes<br />
<strong>di</strong>seases, Paris, France<br />
International Agency for Research on Cancer, Unit of Field and Intervention Stu<strong>di</strong>es, Lyon,<br />
France<br />
International Epidemiology Institute, Rockville, USA<br />
MRC Biostatistics Unit, Cambridge, UK<br />
National Cancer Institute, Environmental Stu<strong>di</strong>es Section, Bethesda, USA<br />
National Cancer Institute, Ra<strong>di</strong>ation Epidemiology Branch, Bethesda, USA<br />
National Institute of Public Health and the Environment. Laboratory for Pathology and<br />
Immunobiology Bilthoven, the Netherlands<br />
National School of Public Health, WHO, Athens, Greece<br />
National University of Ireland, Department of Psychology, Galway, Ireland<br />
Organizing Committee – Center of Oncology, Dept. of Epidemiology and Cancer Prevention,<br />
Warsaw, Poland<br />
Registre Vaudois des Tumeurs, Institut Universitaire de Médecine Sociale et Préventive,<br />
Lausanne, Switzerland<br />
University of Kuopio. Department of Pharmacology and Toxicology. Kuopio, Finland.<br />
University of Maastricht (UNIMAAS), Department of Epidemiology, Maastricht, the<br />
168<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Netherlands<br />
University of Toronto and the Clinical Nutrition and Risk Factor Mo<strong>di</strong>fication Centre,<br />
Department of Nutritional Sciences, Faculty of Me<strong>di</strong>cine, St Michael’s Hospital, Toronto,<br />
Canada<br />
Vanderbilt University, Department of Me<strong>di</strong>cine, School of Me<strong>di</strong>cine, Nashville, USA<br />
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Advances in Therapy (Eva Negri)<br />
Alimentazione e Prevenzione (Carlo La Vecchia)<br />
American Journal of Epidemiology (Carlo La Vecchia)<br />
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention (Carlo La Vecchia, Associate E<strong>di</strong>tor)<br />
Cancer Causes and Control (Eva Negri)<br />
Digestive and Liver Disease (Carlo La Vecchia)<br />
European Journal of Cancer (Carlo La Vecchia)<br />
European Journal of Cancer Prevention (Carlo La Vecchia, Associate E<strong>di</strong>tor)<br />
European Journal of Clinical Nutrition (Carlo La Vecchia)<br />
European Journal of Nutrition (Carlo La Vecchia)<br />
European Journal of Public Health (Carlo La Vecchia, E<strong>di</strong>tor)<br />
Evidence Based Dermatology (Carlo La Vecchia, Liliane Chatenoud)<br />
International Journal of Cancer (Carlo La Vecchia)<br />
Italian Journal of Obstetric and Gynecology (Fabio Parazzini)<br />
Journal of Epidemiology and Biostatistics (Eva Negri)<br />
Journal of Epidemiology and Biostatistics (Carlo La Vecchia, E<strong>di</strong>tor)<br />
Journal of Epidemiology and Biostatistics (Fabio Parazzini)<br />
Journal of Nephrology (Carlo La Vecchia)<br />
Nutrition and Cancer (Carlo La Vecchia)<br />
Oncology (Carlo La Vecchia)<br />
Revisiones en Ginecologìa y Obstetricia (Carlo La Vecchia)<br />
Revista Española de Nutriciò Comunitaria (Carlo La Vecchia)<br />
Revue d'Epidémiologie et de Santé Publique (Carlo La Vecchia)<br />
Sozial und Praeventivme<strong>di</strong>zin (Carlo La Vecchia)<br />
The Lancet, e<strong>di</strong>zione italiana (Carlo La Vecchia)<br />
Tumori (Carlo La Vecchia)<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
IRFMN<br />
Acta Psychiatrica Scan<strong>di</strong>navica, American Journal of Epidemiology, British Journal of Cancer,<br />
British Me<strong>di</strong>cal Journal, Cancer, Cancer Causes and Control, Cancer Epidemiology Biomarkers<br />
and Prevention, Digestive Liver Disease, Epidemiology, Epidemiology & Biostatistic, European<br />
Journal of Cancer, European Journal of Cancer Prevention, European Journal of Clinical<br />
Nutrition, European Journal of Epidemiology, European Journal of Public Health,<br />
Gynecological Endocrinology, Hepatology, Human Reproduction, International Journal of<br />
Cancer, International Journal of Epidemiology, International Journal of Obesity, Journal of<br />
Clinical Endocrinology and Metabolism, Journal of Epidemiology and Community Health,<br />
Journal of the National Cancer Institute, Maturitas, Nutrition and Cancer, Obstetric and<br />
Gynecology, Oncology, Preventive Me<strong>di</strong>cine, Ra<strong>di</strong>ation Research, Revue d’Epidèmiologie et de<br />
Santé Publique, The Cancer Journal, The Lancet, Tumori.<br />
169<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
Advisory Committee of the Oxford Collaborative group on Aetiological Factors in Cancers of<br />
the Female Genital Tract<br />
Board of Trustees, International Health Foundation, Utrecht<br />
Comitato Scientifico del Gruppo Italiano Stu<strong>di</strong> Epidemiologici in Dermatologia<br />
Comitato Scientifico della Società Italiana <strong>di</strong> Colposcopia e Patologia Cervico Vaginale<br />
Data and Safety Monitoring Board of the “Phase II therapeutic trial with a humanized nonmitogenic<br />
CD3 (ChAgly CD3) monoclonal antibody in recently <strong>di</strong>agnosed type I <strong>di</strong>abetic<br />
patients”<br />
IARC/OMS <strong>di</strong> Lione e OMS <strong>di</strong> Ginevra<br />
Istituti Clinici <strong>di</strong> Perfezionamento, Milano<br />
Progetto Menopausa Italia, Associazione Ostetrici Ginecologi Italiani<br />
Scientific Review Committee del UND/WHO/World Bank Human Reproduction Programme<br />
Società Italiana della Riproduzione<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
Convegno su: "Caffè e patologie <strong>di</strong>gerenti". 20 Novembre <strong>2004</strong>, <strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong><br />
<strong>Farmacologiche</strong> "<strong>Mario</strong> Negri", Milano<br />
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
LABORATORIO<br />
V Barcelona International Congress Me<strong>di</strong>terranean Diet. “Recent pooled analysis of stu<strong>di</strong>es on<br />
cancer”. 9-11 Marzo <strong>2004</strong>. Barcellona<br />
5th International Symposium on: Women’s Health and Menopause. “Menopause, hormone<br />
therapy and breast cancer risk”. 21-24 Aprile <strong>2004</strong>. Firenze.<br />
II Congresso S.I.d.R. “Inaugurazione” 25-27 Aprile <strong>2004</strong>. Napoli.<br />
Conferenza presso l’Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano. Dipartimento Scienze Cliniche L. Sacco.<br />
“Dieta e tumori <strong>di</strong>gestivi”. 5 Maggio <strong>2004</strong>. Milano<br />
CHS International Educational Conference on Cancer Prevention. “Dietary prevention of cancer<br />
with focus on <strong>di</strong>gestive tract neoplasms”. 6-8 Maggio <strong>2004</strong>. Dead Sea, Israel.<br />
79° Congresso Nazionale SIDeMast. Uno stu<strong>di</strong>o randomizzato per l'educazione dei bambini ad<br />
una corretta esposizione solare. Stu<strong>di</strong>o SoleSI-SoleNO. GISED. 26-29 Maggio <strong>2004</strong>.<br />
Castellaneta Marina (TA).<br />
Seminario <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o. Cancro e famiglia. “Le cifre, i dati. Il quadro epidemiologico”. 27 Maggio<br />
<strong>2004</strong>. Milano<br />
VI Convegno Nazionale Tabagismo e servizio sanitario nazionale. “Il tumore del polmone nelle<br />
donne nell’Unione Europea”. 31 Maggio <strong>2004</strong>. Roma<br />
8th Congress of the European Society of Contraception. “Breast cancer & hormones, current<br />
advise”. 23-26 Giugno <strong>2004</strong>. E<strong>di</strong>nburgh, Scotland, UK.<br />
Seminari <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina del Lavoro. Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Padova. Scuola <strong>di</strong> Specializzazione<br />
in Me<strong>di</strong>cina del Lavoro. “La mortalità per tumori in Europa”. 20 Luglio <strong>2004</strong>. Padova.<br />
Seminar IARC – CIRC. “Menopause, hormone replacement and breast cancer risk”. 23 Luglio<br />
170<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
<strong>2004</strong>. Lyon. Francia.<br />
Convegno su Ra<strong>di</strong>cali liberi, stress ossidativo e salute. “Licopene, altri antiossidanti e rischio <strong>di</strong><br />
cancro”. 8 Settembre <strong>2004</strong>. <strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità. Roma.<br />
Convegno su: Perspectives in Gastroenterology. Chairman della sessione. “H. Pylori and gastric<br />
cancer”. 10-11 Settembre <strong>2004</strong>. Polo Universitario L. Sacco, Milano.<br />
Panel monotematico multi<strong>di</strong>sciplinare. “Epidemiologia del Melanoma”. 16 Settembre <strong>2004</strong>,<br />
Roma.<br />
XIX Meeting <strong>annuale</strong> GISED. Ricerca e pratica clinica in dermatologia. “Educazione alla salute<br />
e valutazione degli interventi” - “Nuove proposte <strong>di</strong> ricerca nell’ambito del GISED”. 17-18<br />
Settembre <strong>2004</strong>, Benevento.<br />
VI Congresso Nazionale <strong>di</strong> Oncologia Me<strong>di</strong>ca. AIOM. “Bilancio energetico e nutrizionale”. 21-<br />
24 Settembre <strong>2004</strong>, Bologna.<br />
Il futuro della ricerca in Italia. Comitato promotore del gruppo 2003. 30 Settembre <strong>2004</strong>,<br />
Milano.<br />
Aspirina. Scientific Workshop. “Aspirina e cancro”. Centro Congressi Bayer. 1 Ottobre <strong>2004</strong>,<br />
Milano.<br />
Convegno: Ambiente e Tumori. “Nutrizione e tumori”. 2 Ottobre <strong>2004</strong>, Penne (PE).<br />
Riunione monotematica A.I.S.F. Evidence-based hepatology. “Epidemiologia e fattori <strong>di</strong><br />
rischio”. 8 Ottobre <strong>2004</strong>, Milano.<br />
4th the Eden – Idea Congress. “Mortality from Cutaneous Malignant Melanoma in Europe. Has<br />
the epidemic levelled off?" 10-12 Ottobre <strong>2004</strong>, Venezia.<br />
Convegno: Mamme e bimbi liberi dal fumo. “Donne, mamme, famiglie che fumano”. 13<br />
Ottobre <strong>2004</strong>, Milano.<br />
Convegno: Il fumo in Italia. “Fumo <strong>di</strong> sigarette: l’epidemiologia <strong>di</strong> una <strong>di</strong>pendenza”, “Efficacia<br />
delle terapie per la <strong>di</strong>pendenza”; “Effetti nocivi del Fumo sulla salute della donna”; “Smoking in<br />
Italy”. 28 Ottobre <strong>2004</strong>, Bergamo.<br />
Convegno: <strong>2004</strong> Pan-European Forum. Perceptions and realities in fun<strong>di</strong>ng health research<br />
related to lifestyle factors underlying human <strong>di</strong>sease in the 21st century. “Introduction and casestudy<br />
presentations”. 4-5 Novembre <strong>2004</strong>, Praga.<br />
1° Convegno Nazionale Nutrizione e Tumori. “Dieta e rischio <strong>di</strong> tumori, con riferimento<br />
all’apparato <strong>di</strong>gerente”. 5-6 Novembre <strong>2004</strong>, Lucca<br />
Convegno: Sapori in Autunno. “Una mela al giorno …. con la <strong>di</strong>eta si possono evitare i tumori”.<br />
13-14 Novembre <strong>2004</strong>, Nave San Rocco (Tn).<br />
Associazione Italiana per la Ricerca sul Cancro<br />
Lega Italiana Lotta contro i Tumori<br />
European Commission<br />
L’Oreal<br />
Ministero della Sanità<br />
OM Pharma<br />
Weber Shandwick Italia<br />
3M Italia<br />
ERAB<br />
<strong>Istituto</strong> Nazionale Neurologico “Carlo Besta”<br />
Saint-Gobain Vetrotex<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
171<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
Parazzini F., Chiaffarino F., Negri E., Surace M., Benzi G., Franceschi S., Fedele S, La Vecchia C. Risk factors for<br />
<strong>di</strong>fferent histological types of ovarian cancer. Int. J. Gynecol. Cancer., 14: 431-436 (<strong>2004</strong>).<br />
Parazzini F., Chiaffarino F., Polverino G., Chiantera V., Surace M., La Vecchia C. Uterine fibroids risk and history of<br />
selected me<strong>di</strong>cal con<strong>di</strong>tions linked with female hormones. Eur. J. Epidemiol., 19: 249-253 (<strong>2004</strong>).<br />
Boyle P., Mezzetti M., La Vecchia C., Franceschi S., Decarli A, Robertson C. Contribution of three components to<br />
in<strong>di</strong>vidual cancer risk pre<strong>di</strong>cting breast cancer risk in Italy. Eur. J. Cancer Prev., 13: 183-191 (<strong>2004</strong>).<br />
Ferraroni M, Tavani A, Decarli A, Franceschi S, Parpinel M, Negri E, La Vecchia C. Reproducibility and vali<strong>di</strong>ty of<br />
coffee and tea consumption in Italy. Eur. J. Clin. Nutr., 58: 674-680 (<strong>2004</strong>).<br />
Gallus S, La Vecchia C. A population-based estimate of tobacco dependence. Eur. J. Publ. Health, 14: 93-94 (<strong>2004</strong>).<br />
La Vecchia C. Oral contraceptives, menopause hormonal replacement therapy, and risk of stroke. Maturitas, 47: 265-<br />
268 (<strong>2004</strong>).<br />
Corrao G, Bagnar<strong>di</strong> V, Zambon A, La Vecchia C. A meta-analysis of alcohol consumption and the risk of 15<br />
<strong>di</strong>seases. Prev. Med., 38: 613-619 (<strong>2004</strong>).<br />
Tavani A, Augustin L, Bosetti C, Giordano L, Gallus S, Jenkins DJA, La Vecchia C. Influence of selected lifestyle<br />
factors on risk of acute myocar<strong>di</strong>al infarction in subjects with family pre<strong>di</strong>sposition for the <strong>di</strong>sease. Prev. Med., 38:<br />
468-472 (<strong>2004</strong>).<br />
Tavani A, Bertuzzi M, Gallus S, Negri E, La Vecchia C. Risk factors for non-fatal acute myocar<strong>di</strong>al infarction in<br />
Italian women. Prev. Med., 39: 128-134 (<strong>2004</strong>).<br />
Altieri A, Tavani A, Gallus S, La Vecchia C. Occupational and leisure time physical activity and the risk of nonfatal<br />
acute myocar<strong>di</strong>al infarction in Italy. Ann Epidemiol., 14: 461-466 (<strong>2004</strong>).<br />
Augustin LSA, Gallus S, Tavani A, Bosetti C, Negri E, La Vecchia C. Alcohol consumption and acute myocar<strong>di</strong>al<br />
infarction: A benefit of alcohol Consumed with meals? Epidemiology, 15: 767-769 (<strong>2004</strong>).<br />
Levi F, Lucchini F, Gonzalez JR, Fernandez E, Negri E, La Vecchia C. Monitoring falls in gastric cancer mortality in<br />
Europe. Ann: Oncol:, 15: 338-345 (<strong>2004</strong>).<br />
Cesario A, Margaritora S, Paro<strong>di</strong> S, Russo P, La Vecchia C, Apolone G, Galetta D, Pezzella F, Granone P.<br />
Networking for excellence in lung paper: paper vs. research work. Lung Cancer, 43; 363-365 (<strong>2004</strong>).<br />
Altieri A, Pelucchi C, Talamini R, Bosetti C, Franceschi S, La Vecchia C. Cholecystectomy and the risk of colorectal<br />
cancer in Italy. Br. J Cancer, 90:1753-1755 (<strong>2004</strong>).<br />
Bosetti C, Talamini R, Franceschi S, Negri E, Giacosa A, La Vecchia C. Allergy and the risk of selected <strong>di</strong>gestive<br />
and laryngeal neoplasms. Eur. J. Cancer Prev., 13: 173-176 (<strong>2004</strong>).<br />
Nal<strong>di</strong> L, Gallus S, Tavani A, Imberti GL, La Vecchia C on behalf of the Oncology Study Group of the Italian Group<br />
of the Italian Group for Epidemiologic Research in Dermatology (GISED). Risk of melanoma and vitamin A, coffee<br />
and alcohol: a case-control study from Italy. Eur. J. Cancer Prev., 13: 503-508 (<strong>2004</strong>).<br />
Altieri A, Gallus S, Franceschi S, Fernandez E, Talamini R, La Vecchia C. Hormone replacement therapy and risk of<br />
lymphomas and myelomas. Eur. J. Cancer Prev., 13: 349-351 (<strong>2004</strong>).<br />
Ran<strong>di</strong> G, Altieri A, Gallus S, Chatenoud L, Montella M, Franceschi S, Negri E, Talamini R, La Vecchia C. Marital<br />
status and cancer risk in Italy. Prev. Med., 38: 523-528 (<strong>2004</strong>).<br />
Bosetti C, La Vecchia C, Nal<strong>di</strong> L, Lucchini F, Negri E, Levi F. Mortality from cutaneous malignant melanoma in<br />
Europe. Has the epidemics levelled off? Melanoma Res., 14: 301-309 (<strong>2004</strong>).<br />
172<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Tavani A, Bosetti C, Dal Maso L, Giordano L, Franceschi S, La Vecchia C. Influence of selected hormonal and<br />
lifestyle factors on familial propensity to ovarian cancer. Gynecol. Oncol., 92: 922-926 (<strong>2004</strong>).<br />
IRFMN<br />
Gallus S, Giordano L, Altieri A, Talamini R, La Vecchia C. Cigarette smoking and risk of Hodgkin’s <strong>di</strong>sease. Eur. J.<br />
Cancer Prev., 13: 143-144 (<strong>2004</strong>).<br />
Augustin LSA, Gallus S, Negri E, La Vecchia C. Glycemic index, glycemic load and risk of gastric cancer. Int. J.<br />
Cancer, 15: 581-584 (<strong>2004</strong>).<br />
Fernandez E, Gallus S, La Vecchia C, Talamini R, Negri E, Franceschi S. Family history and environmental risk<br />
factors for colon cancer. Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev., 13: 658-666 (<strong>2004</strong>).<br />
Pelucchi C, Talamini R, Galeone C, Negri E, Franceschi S, Dal Maso L, Montella M, Conti E, La Vecchia C. Fibre<br />
intake and prostate cancer risk. Int. J. Cancer, 109: 278-280 (<strong>2004</strong>).<br />
Pelucchi C, La Vecchia C, Franceschi S, Levi F. Fried potatoes and human cancer. Int. J. Cancer, 108: 636-637<br />
(<strong>2004</strong>).<br />
Tavani A, Pelucchi C, Parpinel M, Negri E, La Vecchia C. Folate and vitamin B6 intake and risk of acute myoca<strong>di</strong>al<br />
infarction in Italy. Eur. J. Clin. Nutr., 58: 1266-1272 (<strong>2004</strong>).<br />
Dal Maso L, Augustin LSA, Karalis A, Talamini R, Franceschi S, Trichopoulos D, Mantzoros CS, La Vecchia C.<br />
Circulating a<strong>di</strong>ponectin and endometrial cancer risk. J. Clin. Endocrinol. Metab., 89: 1160-1163 (<strong>2004</strong>).<br />
Rodriguez T, Altieri A, Chatenoud L, Gallus S, Bosetti C, Negri E, Franceschi S, Levi F, Talamini R, La Vecchia C<br />
Risk factors for oral and pharyngeal cancers in young adults. Oral Oncology, 40: 207-213 (<strong>2004</strong>).<br />
Negri E, D’Anna Little, Boiocchi M, La Vecchia C, Franceschi S. B-cell non-Hodgkin’s lymphoma and hepatitis C<br />
virus infection: a systematic review. Int. J. Cancer, 111: 1-8 (<strong>2004</strong>).<br />
Gallus S, Pacifici R, Colombo P, Scarpino V, Zuccaro P, Bosetti C, Apolone G, La Vecchia C. Smoking in Italy<br />
2003, with a focus on the young. Tumori, 90: 171-174 (<strong>2004</strong>).<br />
Pacifici R, Zuccaro PG, Gallus S, Colombo P, La Vecchia C. Use of cigarette ven<strong>di</strong>ng machines by minors in Italy.<br />
Int. J. Epidemiol., 33: 432 (<strong>2004</strong>).<br />
Augustin LSA, La Vecchia C, Brighenti F. Letter, RE: Nutrition pyramid. Eur. J. Clin. Nutr., 58: 559-560 (<strong>2004</strong>)<br />
Pelucchi C, Malvezzi M, La Vecchia C, Levi F, Decarli A, Negri E. The mesothelioma epidemic in western Europe:<br />
an update. Br. J. Cancer, 90: 1022-4 (<strong>2004</strong>).<br />
Levi F, Lucchini F, Negri E, La Vecchia C. Suicide mortality in adolescents and young adults, 1980-1999. Rev.<br />
Epidémiol. Santé Publ., 52: 590-595 (<strong>2004</strong>).<br />
Bosetti C, Micelotta S, Dal Maso L, Talamini R, Montella M, Negri E, Conti E, Franceschi S, La Vecchia C. Food<br />
groups and the risk of prostate cancer in Italy. Int. J. Cancer, 110: 424-428 (<strong>2004</strong>).<br />
Levi F, Pasche C, Lucchini F, Bosetti C, La Vecchia C. Processed meat and the risk of selected <strong>di</strong>gestive tract and<br />
laryngeal neoplasms in Switzerland. Ann. Oncol., 15: 346-349 (<strong>2004</strong>).<br />
Levi F, Te, V-C, Ran<strong>di</strong>mbison L, La Vecchia C. Trends in survival for both histologic types of esophageal cancer in<br />
Switzerland. Int. J. Cancer, 108: 638-639 (<strong>2004</strong>)<br />
La Vecchia C, Lucchini F, Negri E, Levi F. Trends in oral cancer mortality in Europe. Oral Oncol., 40: 433-439<br />
(<strong>2004</strong>).<br />
Augustin LSA, Dal Maso L, Franceschi S, Talamini R, Kendall CWC, Jenkins DJA, Vidgen E, La Vecchia C.<br />
Association between components of the insulin-like growth factor system and endometrial cancer risk. Oncology, 67:<br />
54-59 (<strong>2004</strong>).<br />
Gallus S, Tavani A, La Vecchia C. Pizza and risk of acute myocar<strong>di</strong>al infarction. Eur. J. Clin. Nutr., 58: 1543-1546<br />
(<strong>2004</strong>).<br />
173<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Malvezzi M, Rodriguez T, Chatenoud L, Bosetti C, Levi F, Negri E, La Vecchia C. Trends in cancer mortality in<br />
Mexico, 1970-1999. Ann. Oncol, 15: 1712-1718 (<strong>2004</strong>).<br />
IRFMN<br />
Ran<strong>di</strong> G, Altieri A, Chatenoud L, Chiaffarino F, La Vecchia C. Infections and atopy: an exploratory study for a metaanalysis<br />
on the “hygiene hypothesis”. Rev. Epidemiol. Santé Publique, 52: 565-574 (<strong>2004</strong>).<br />
Gallus S, Bosetti C, La Vecchia C. Me<strong>di</strong>terranean <strong>di</strong>et and cancer risk. Eur. J. Cancer Prev., 13: 447-452 (<strong>2004</strong>).<br />
Dal Maso L, Zucchetto A, La Vecchia C, Montella M, Conti E, Canzonieri V, Talamini R, Tavani A, Negri E,<br />
Garbeglio A, Franceschi S. Prostate cancer and body size at <strong>di</strong>fferent ages: an Italian multicentre case-control study.<br />
Br. J. Cancer, 90: 2176-2180 (<strong>2004</strong>).<br />
Levi F, Lucchini F, Negri E, Boyle P, La Vecchia C. The leveling of prostate cancer mortality in Western Europe.<br />
The Prostate, 60: 46-52 (<strong>2004</strong>).<br />
Crispo A, Talamini R, Gallus S, Negri E, Gallo A, Bosetti C, La Vecchia C, Dal Maso L, Montella M. Alcohol and<br />
the risk of prostate cancer and benign prostatic hyperplasia. Urology, 64: 717-722 (<strong>2004</strong>).<br />
Nal<strong>di</strong> L, Colombo P, Benedetti Placchesi E, Piccitto R, Chatenoud L, La Vecchia C and the PraKtis Study Centers.<br />
Study design and preliminary results from the pilot phase of the PraKtis Study: self-reported <strong>di</strong>agnoses of selected<br />
skin <strong>di</strong>seases in a representative sample of the Italian population. Dermatology, 208: 38-42 (<strong>2004</strong>).<br />
La Vecchia C, Bosetti C. Priorities for control of malignant melanoma in Europe. Eur. J. Cancer Prev., 13: 93-95<br />
(<strong>2004</strong>).<br />
Levi F, Lucchini F, Negri E, Boyle P, La Vecchia C. Cancer mortality in Europe, 1995-1999, and an overview of<br />
trends since 1960. Int. J. Cancer, 110: 155-169 (<strong>2004</strong>).<br />
Altieri A, Bosetti C, Gallus S, Franceschi S, Dal Maso L, Talamini R, Levi F, Negri E, Rodriguez T, La Vecchia C.<br />
Wine, beer and spirits and risk of oral and pharyngeal cancer: a case-control study from Italy and Switzerland. Oral<br />
Oncol, 40: 904-909 (<strong>2004</strong>).<br />
Dal Maso L, Augustin LSA, Franceschi S, Talamini R, Polesel J, Kendall CWC, Jenkins DJA, Vidgen E, La Vecchia<br />
C. Association between components of the insulin-like growth factor system and epithelial ovarian cancer risk.<br />
Oncology, 67: 225-230 (<strong>2004</strong>).<br />
Augustin LSA, Galeone C, Dal Maso L, Pelucchi C, Ramazzotti V, Jenkins DJA, Montella M, Talamini R, Negri E,<br />
Franceschi S, La Vecchia C. Glycemic index, glycemic load and the risk of prostate cancer.Int. J. Cancer, 112: 446-<br />
450 (<strong>2004</strong>).<br />
Spinola M, Conti B, Ravagnani F, Fabbri A, Incarbone M,Cataldo I, Pira E, Pelucchi C, La Vecchia C, Dragani TA.<br />
A new polymorphism (Ser362Thr) of the L-myc gene is not associated with lung adenocarcinoma risk and prognosis.<br />
Eur. J. Cancer Prev., 13: 87-89 (<strong>2004</strong>).<br />
Levi F, Ran<strong>di</strong>mbison L, Te V.C, Franceschi S, La Vecchia C. Kaposi’s sarcoma in Vaud and Neuchatel, Switzerland,<br />
1978-2002. Eur. J. Cancer, 40: 1630-1633 (<strong>2004</strong>).<br />
Collaborative Group on Hormonal Factors in Breast Cancer, La Vecchia C., Negri E. Breast cancer and abortion.<br />
Collaborative reanalysis of data from 53 epidemiological stu<strong>di</strong>es, inclu<strong>di</strong>ng 83 000 women with breast cancer from<br />
16 countries. Lancet, 363: 1007-1116 (<strong>2004</strong>).<br />
Tubaro A, La Vecchia C, for Uroscreening Study Group.The relation of lower urinary tract symptoms with life-style<br />
factors and objective measures of benign prostatic enlargement and obstruction – An Italian survey. Eur. Urol., 45:<br />
767-772 (<strong>2004</strong>).<br />
La Vecchia C, Corrao G. Wine, alcohol and <strong>di</strong>sease: less car<strong>di</strong>ovascular <strong>di</strong>sease, more cancer? J. Thromb. Haemost.,<br />
2: 2045-2046 (<strong>2004</strong>).<br />
Bosetti C, Talamini R, Montella M, Negri E, Conti E, Franceschi S, La Vecchia C. Retinol, carotenoids and the risk<br />
of prostate cancer: a case-control study from Italy. Int. J. Cancer, 112: 689-692 (<strong>2004</strong>).<br />
La Vecchia C. Estrogen and combined estrogen-progestogen therapy in the menopause and breast cancer. The Breast,<br />
13: 515-518 (<strong>2004</strong>).<br />
174<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Tavani A., La Vecchia C. Coffee, decaffeinated coffee, tea and cancer of the colon and rectum. A review of<br />
epidemiological stu<strong>di</strong>es, 1990-2003. Cancer Causes Control, 15: 743-757 (<strong>2004</strong>).<br />
IRFMN<br />
Levi F, Lucchini F, Negri E, La Vecchia C. Trends in mortality from major cancers in the European Union inclu<strong>di</strong>ng<br />
acce<strong>di</strong>ng Countries, <strong>2004</strong>. Cancer, 101: 2843-2850 (<strong>2004</strong>).<br />
Levi F, Lucchini F, Negri E, Zatonski W, Boyle P, La Vecchia C. Trends in cancer mortality in the EU and accession<br />
countries, 1980-2000. Ann. Oncol., 15: 1425-1431 (<strong>2004</strong>).<br />
Fernandez E, Gallus S, Schiaffino A, Lopez-Nicolas A, La Vecchia C, Barros H, Townsend J, Price and consumption<br />
of tobacco in Spain over the period 1965-2000. Eur. J. Cancer Prev., 13: 207-211 (<strong>2004</strong>).<br />
Levi F, Lucchini F, Negri E, La Vecchia C. Declining mortality from kidney cancer in Europe. Ann. Oncol., 15:<br />
1130-1135 (<strong>2004</strong>).<br />
La Vecchia C, Bosetti C. Benefits and risks of oral contraceptives on cancer. Eur. J. Cancer Prev., 13: 467-470<br />
(<strong>2004</strong>).<br />
Levi F, Te V-C, Ran<strong>di</strong>mbison L, La Vecchia C. Incidence of anal carcinoma in Vaud, Switzerland, 1979-2001. Eur.<br />
J. Cancer Prev., 13: 213-215 (<strong>2004</strong>).<br />
La Vecchia C. Me<strong>di</strong>terranean <strong>di</strong>et and cancer. Publ. Health Nutr., 7: 965-968 (<strong>2004</strong>).<br />
Bidoli E, Talamini R, Bosetti C, Negri E, Maruzzi D, Montella M, Franceschi S, La Vecchia C. Macronutrients, fatty<br />
acids, cholesterol and prostate cancer risk. Ann. Oncol., 16: 152-157 (<strong>2004</strong>).<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI DIVULGATIVE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
La Vecchia C. Il cancro in Italia e in Europa. Famiglia Oggi, no. 5, 8-13 (<strong>2004</strong>).<br />
La Vecchia C. L’Italia in fumo. Me<strong>di</strong>ci Oggi, no. 3, 54-57 (<strong>2004</strong>).<br />
Apolone G, La Vecchia C. L’epoetina in oncologia: spunti per la ricerca traslazionale. Ricerca & Pratica, 20: 102-106<br />
(<strong>2004</strong>).<br />
La Vecchia C. Smettere <strong>di</strong> fumare conviene! CARE, 6: 19 (<strong>2004</strong>).<br />
La Vecchia C, Lucchini F, Levi F, Fernandez E, Gonzalez JR, Negri E. Diminuzione del tumore dello stomaco in<br />
Europa. Aggiornamento Me<strong>di</strong>co, 28: 223-229 (<strong>2004</strong>).<br />
ALTRE PRODUZIONI EDITORIALI PUBBLICATE NEL CORSO DEL<br />
<strong>2004</strong><br />
Fernandez E, Gallus S, La Vecchia C. Colorectal cancer. The Year in Post-Menopausal Health, Rees M, Keith L, eds.<br />
CRC Press, Boca Raton, <strong>2004</strong>, pp.121-133.<br />
Levi F., La Vecchia C. Cancer of the prostate. In: “Tobacco and public health: science and policy”, Boyle P, Gray N,<br />
Henningfield J, Seffrin J, Zatonski W, eds. Oxford University Press, Oxford, Ch. 20: 355-366 (<strong>2004</strong>).<br />
La Vecchia C, Lucchini F, Negri E, Levi F. Cancer mortality in the elderly, 1960-98: A worldwide approach. In:<br />
Comprehensive Geriatric Oncology, 2nd. Ed., Balducci L, Lyman GH, Ershler WB, Extermann M, eds. London,<br />
Taylor & Francis Group, UK, pp. 29-37 (<strong>2004</strong>).<br />
175<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Tavani A., La Vecchia C. Coffee consumption and risk of cancer and coronary heart <strong>di</strong>sease. In: "Beverages in<br />
Nutrition and Health", Wilson T, Temple NJ, Jacobs DR Jr, eds. Humana Press Inc., Totowa, NJ, <strong>2004</strong>, pp.127-142.<br />
La Vecchia C. Bilancio energetico, nutrizione e rischio <strong>di</strong> cancro. In: VI Congresso Nazionale <strong>di</strong> Oncologia Me<strong>di</strong>ca,<br />
Volume Educazionale. Roma, CEOI, <strong>2004</strong>, p. 111-112.<br />
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
Raccolta e organizzazione dei dati<br />
La raccolta dei dati epidemiologici è proseguita come previsto, così come la loro immissione e<br />
verifica. Ad oggi, l’insieme dei dati include circa 1200 casi <strong>di</strong> tumore del cavo orale e faringe,<br />
700 dell’esofago, 1100 dello stomaco, 6500 del colonretto, 500 del fegato, 120 della colecisti e<br />
del tratto biliare, 600 del pancreas, 800 della laringe, 7000 della mammella, 1000 della cervice e<br />
1000 dell’endometrio, 200 <strong>di</strong> patologia del trofoblasto, 200 della vulva, 2000 dell’ovaio, 1300<br />
della prostata, 600 della vescica, 800 del rene e della pelvi renale, 600 della tiroide, 400 linfomi<br />
<strong>di</strong> Hodgkin e <strong>di</strong> altro tipo, 150 sarcomi, 300 mielomi e circa 18000 controlli. Inoltre sono stati<br />
raccolti circa 800 casi <strong>di</strong> infarto miocar<strong>di</strong>co acuto (IMA) e 700 relativi controlli.<br />
I dati <strong>di</strong> circa 8000 casi e controlli sono stati legati ai dati dei registri sanitari e inseriti nel<br />
database per le analisi della coorte <strong>di</strong> tutti i soggetti arruolati nei nostri stu<strong>di</strong>. Una fase pilota<br />
dello stu<strong>di</strong>o è stata completata definendo la fattibilità dell’approccio <strong>di</strong> coorte.<br />
Per un numero <strong>di</strong> casi <strong>di</strong> cancro dell’alto tratto <strong>di</strong>gerente e respiratorio, del polmone e della<br />
vescica abbiamo raccolto campioni biologici dei soggetti per stu<strong>di</strong>are i polimorfismi genetici, e<br />
per i tumori dell’ovaio e dell’endometrio per stu<strong>di</strong>are i fattori <strong>di</strong> crescita insulino-relati (IGF),<br />
l’a<strong>di</strong>ponectina e altre correlate ormonali.<br />
Dieta e rischio <strong>di</strong> tumore della prostata<br />
I dati raccolti sul tumore della prostata (1291 casi e 1451 controlli) sono stati analizzati in<br />
relazione a vari aspetti della <strong>di</strong>eta e della nutrizione. Per quanto riguarda i gruppi <strong>di</strong> cibi, tra i 19<br />
gruppi considerati solo 4 hanno mostrato un’associazione significativa con il rischio <strong>di</strong> tumore<br />
della prostata. Un significativo aumento <strong>di</strong> rischio è stato osservato per un più frequente<br />
consumo <strong>di</strong> latte e latticini (OR=1.2 per il quintile <strong>di</strong> consumo più alto, verso il più basso) e <strong>di</strong><br />
pane (OR=1.4), mentre un’associazione inversa è stata osservata per le zuppe (OR=0.8) e i<br />
vegetali cotti (OR=0.7). Questo stu<strong>di</strong>o sul tumore della prostata e la <strong>di</strong>eta in una popolazione del<br />
sud Europa – uno tra i più ampi ad oggi esistenti – conferma che non esiste alcuna forte<br />
associazione tra alcun cibo e il tumore della prostata, a parte un aumento <strong>di</strong> rischio per il latte e<br />
latticini e un possibile effetto protettivo per i vegetali.<br />
Nello stesso gruppo <strong>di</strong> dati abbiamo considerato l’associazione con i micronutrienti, per i quali<br />
l’evidenza è piuttosto inconsistente. Il rischio <strong>di</strong> tumore della prostata tendeva a ridursi con<br />
l’aumento <strong>di</strong> assunzione <strong>di</strong> retinolo (OR=0.79 per il quintile <strong>di</strong> consumo più alto, rispetto al più<br />
basso), carotene (OR=0.70), α-carotene (OR=0.85), e β-carotene (OR=0.72), sebbene le stime<br />
fossero significative solo per carotene e β-carotene. Nessuna associazione significativa è stata<br />
osservata per carotenoi<strong>di</strong> non pro-vitamina A, quali il licopene (OR=0.94) e la<br />
luteina/zeaxantina (OR=0.91).<br />
Nello stesso insieme <strong>di</strong> dati, abbiamo trovato una relazione inversa tra consumo <strong>di</strong> fibre<br />
alimentari e rischio <strong>di</strong> cancro della prostata. Ciò è legato anche ai <strong>di</strong>fferenti in<strong>di</strong>ci glicemici e<br />
insulinici <strong>di</strong>pendenti dal tipo <strong>di</strong> carboidrati consumati, e conseguentemente al ruolo dei fattori <strong>di</strong><br />
crescita insulino-relati (IGF) sulla cancerogenesi prostatica.<br />
Sebbene il rischio <strong>di</strong> cancro della prostata non fosse correlato all’in<strong>di</strong>ce <strong>di</strong> massa corporea<br />
(BMI) corrente, un elevato BMI nel periodo tra i 30 e i 39 anni era <strong>di</strong>rettamente associato al<br />
tumore prostatico.<br />
176<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Il consumo <strong>di</strong> alcool è stato indagato in relazione al rischio <strong>di</strong> tumore della prostata, ma non è<br />
emersa alcuna associazione significativa. Semmai, il consumo <strong>di</strong> alcool sembrava essere<br />
inversamente legato all’iperplasia prostatica benigna.<br />
Acrilamide nell’alimentazione e rischio <strong>di</strong> cancro<br />
Alcuni cibi cotti a temperature elevate presentano tracce <strong>di</strong> acrilamide, una sostanza considerata<br />
probabilmente cancerogena per l’uomo sulla base <strong>di</strong> alcuni stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> laboratorio. Tuttavia, gli<br />
stu<strong>di</strong> epidemiologici condotti sull’argomento sono pochi e limitati solo ad alcuni tumori.<br />
Abbiamo quin<strong>di</strong> analizzato i dati dei nostri più recenti stu<strong>di</strong> caso-controllo, che includono<br />
informazioni dettagliate sulle abitu<strong>di</strong>ni alimentari, stimando l’assunzione <strong>di</strong> acrilamide nella<br />
<strong>di</strong>eta in relazione al rischio <strong>di</strong> tumore della mammella (sulla base <strong>di</strong> 2.900 casi e 3.122<br />
controlli), del colonretto (1.394 casi <strong>di</strong> cancro del colon e 886 del retto, 4.765 controlli),<br />
dell’alto apparato <strong>di</strong>gerente e respiratorio (749 casi <strong>di</strong> cancro <strong>di</strong> cavo orale/faringe, 1.772<br />
controlli; 395 casi <strong>di</strong> cancro dell’esofago, 1.066 controlli; 527 casi <strong>di</strong> cancro della laringe, 1.297<br />
controlli), dell’ovaio (1.031 casi, 2.411 controlli) e della prostata (1.294 casi, 1.451 controlli).<br />
Sulla base delle nostre stime, l’assunzione me<strong>di</strong>a <strong>di</strong> acrilamide nei gruppi <strong>di</strong> controllo variava<br />
tra 23,3 e 29,2 µg/giorno. Per un aumento <strong>di</strong> 10 µg/giorno <strong>di</strong> acrilamide nella <strong>di</strong>eta, l’OR <strong>di</strong><br />
tumore era 0,94 per l’ovaio, 0,97 per mammella e prostata, 0,99 per il colonretto, 1,00 per cavo<br />
orale/faringe, 1,06 per l’esofago e 1,07 per la laringe. In conclusione, questo stu<strong>di</strong>o non ha<br />
rilevato associazioni consistenti tra assunzione <strong>di</strong> acrilamide nella <strong>di</strong>eta e rischio <strong>di</strong> tumori della<br />
mammella, del colonretto e <strong>di</strong> vari altri siti.<br />
A<strong>di</strong>ponectina e rischio <strong>di</strong> tumore dell’endometrio<br />
L’a<strong>di</strong>ponectina è una proteina recentemente scoperta e secreta dagli a<strong>di</strong>pociti, che è ridotta in<br />
con<strong>di</strong>zioni associate all’obesità e all’iperinsulinemia, fattori <strong>di</strong> rischio noti per il tumore<br />
dell’endometrio. Abbiamo intervistato e raccolto campioni biologici <strong>di</strong> 87 casi con tumore<br />
dell’endometrio incidente e confermato istologicamente e 132 controlli ricoverati per malattie<br />
acute non neoplastiche. Vi era una forte relazione inversa tra livelli serici <strong>di</strong> a<strong>di</strong>ponectina e<br />
rischio <strong>di</strong> tumore dell’endometrio (OR=0,42). BMI e a<strong>di</strong>ponectina mostravano <strong>di</strong> avere effetti<br />
in<strong>di</strong>pendenti sul rischio <strong>di</strong> tumore dell’endometrio, compatibili con un modello moltiplicativo<br />
(OR=6,45 per i soggetti con il più alto livello <strong>di</strong> BMI e il più basso livello <strong>di</strong> a<strong>di</strong>ponectina).<br />
Fattori genetici e ambientali e rischio <strong>di</strong> cancro<br />
Per quanto riguarda i tumori intestinali, è stato analizzato l’effetto combinato dei fattori <strong>di</strong><br />
rischio ambientali e <strong>di</strong> familiarità utilizzando i dati del nostro stu<strong>di</strong>o sul cancro colorettale.<br />
Rispetto ai soggetti senza familiarità e nel più basso terzile dello score <strong>di</strong> fattori <strong>di</strong> rischio, l’OR<br />
<strong>di</strong> tumore del colon era 2,27 per i soggetti senza familiarità e con alto score, 3,20 per quelli con<br />
familiarità e basso score, e 7,08 per quelli con familiarità e alto score <strong>di</strong> fattori <strong>di</strong> rischio. Questi<br />
risultati suggeriscono che la familiarità <strong>di</strong> tumore del colonretto interagisca con i fattori <strong>di</strong><br />
rischio ambientali del tumore del colon.<br />
In riferimento agli aspetti genetici del tumore del polmone, un nuovo polimorfismo del gene Lmyc<br />
non è risultato associato al rischio o alla prognosi del carcinoma polmonare in uno stu<strong>di</strong>o<br />
caso-controllo condotto su 220 casi e 210 controlli.<br />
Epatite C e rischio <strong>di</strong> linfomi non-Hodgkin<br />
Per quanto riguarda la relazione tra virus e tumori, abbiamo condotto una revisione sistematica<br />
della letteratura sul ruolo delle infezioni da virus dell’epatite C (HCV) rispetto al rischio <strong>di</strong><br />
linfoma non-Hodgkin (NHL). Un’alta prevalenza <strong>di</strong> infezione da HCV nei pazienti affetti da B-<br />
NHL è stata riscontrata in stu<strong>di</strong> condotti nel sud ed est Europa, Giappone e nel Sud degli Stati<br />
Uniti, ma non nel centro e nord Europa, Canada, nord degli Stati Uniti e alcuni paesi asiatici.<br />
Gli OR <strong>di</strong> B-NHL associati a infezione da HCV erano moderati, oscillando tra 2 e 4 nella<br />
177<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
maggior parte degli stu<strong>di</strong>. Di conseguenza, anche se l’associazione osservata fosse causale, la<br />
percentuale <strong>di</strong> casi attribuibili all’infezione da HCV sarebbe attorno al 10% nei Paesi con alta<br />
prevalenza <strong>di</strong> infezione da HCV nella popolazione generale, ed estremamente bassa negli altri<br />
Paesi.<br />
Altri fattori considerati in vari stu<strong>di</strong> sui tumori<br />
Altri aspetti esaminati nell’insieme dei dati relativi a vari tumori sono stati i fattori sociali, come<br />
lo stato civile, la ri-analisi <strong>di</strong> alcool e caffè, il ruolo della <strong>di</strong>eta me<strong>di</strong>terranea (valutato<br />
utilizzando un punteggio sviluppato ad hoc), alcuni aspetti selezionati della storia patologica<br />
(allergie), e gli ormoni femminili (contraccettivi orali e terapia ormonale sostitutiva in<br />
menopausa) rispetto al rischio <strong>di</strong> cancro. Attraverso l’analisi <strong>di</strong> misurazioni del siero, il sistema<br />
degli IGF è risultato associato al rischio <strong>di</strong> cancro dell’ovaio e dell’endometrio. I nuovi dati sul<br />
tumore della mammella sono stati inclusi in una ri-analisi collaborativa <strong>di</strong> dati a livello<br />
mon<strong>di</strong>ale, che ha consentito <strong>di</strong> escludere ogni associazione <strong>di</strong> rilievo pratico tra aborti e rischio<br />
<strong>di</strong> tumore della mammella.<br />
Fattori <strong>di</strong> rischio per l’infarto miocar<strong>di</strong>co acuto (IMA)<br />
Nell’ambito <strong>di</strong> uno stu<strong>di</strong>o caso-controllo per stabilire i fattori <strong>di</strong> rischio <strong>di</strong> IMA nella<br />
popolazione italiana, nel <strong>2004</strong> abbiamo analizzato il ruolo <strong>di</strong> variabili selezionate: il consumo <strong>di</strong><br />
alcol durante i pasti era inversamente correlato al rischio <strong>di</strong> IMA (OR=0,50, significativo, per<br />
≥3 bicchieri al giorno), mentre nessuna associazione è emersa per soggetti che bevevano alcol<br />
anche fuori pasto (OR=0,98).<br />
Abbiamo stu<strong>di</strong>ato il ruolo della pizza sul rischio <strong>di</strong> IMA e abbiamo trovato un’associazione<br />
inversa, essendo l’OR=0,78 per un consumo occasionale, 0,62 per un consumo regolare e 0,44<br />
per un consumo frequente.<br />
I folati e la vitamina B6 erano inversamente correlati al rischio <strong>di</strong> IMA. Rispetto ai pazienti nel<br />
più basso terzile <strong>di</strong> consumo, l’OR per quelli nel più alto terzile era 0,56 per i folati e 0,34 per la<br />
vitamina B6. Rispetto ai soggetti con un basso consumo <strong>di</strong> entrambi i micronutrienti, l’OR era<br />
0,29 per quelli con un alto consumo <strong>di</strong> entrambi. Rispetto ai soggetti che riportavano nessun<br />
consumo o un consumo occasionale <strong>di</strong> alcol e un basso consumo <strong>di</strong> metionina e folati, l’OR era<br />
0,28 nei bevitori regolari <strong>di</strong> alcol con un alto consumo <strong>di</strong> metionina e <strong>di</strong> folati. Il valore<br />
corrispondente per la vitamina B6 era 0,25.<br />
Abbiamo stu<strong>di</strong>ato la relazione tra attività fisica sul lavoro e nel tempo libero a <strong>di</strong>verse età e il<br />
rischio <strong>di</strong> IMA non fatale. Rispetto al più basso livello <strong>di</strong> attività fisica sul lavoro, gli OR per il<br />
livello più alto erano 0,63, 0,56 e 0,57 rispettivamente a 15-19, 30-39 e 50-59 anni. I valori<br />
corrispondenti per l’attività fisica nel tempo libero erano 0,54, 0,81 e 0,84, suggerendo<br />
un’associazione inversa.<br />
L’OR complessivo per i soggetti che avevano ≥ 1 parente <strong>di</strong> primo grado con IMA era 2,1 e 3,8<br />
per ≥ 2 parenti. Il rischio <strong>di</strong> IMA potrebbe essere ridotto in modo sostanziale da interventi volti<br />
a migliorare stili <strong>di</strong> vita che sono fattori <strong>di</strong> rischio per l’IMA in modo più efficace in soggetti<br />
con una storia familiare che nei soggetti senza familiarità.<br />
Il maggior fattore <strong>di</strong> rischio per l’IMA nelle donne era il fumo, essendo l’OR=4,0 nelle<br />
fumatrici correnti e 11,6 per ≥ 25 sigarette al giorno; il fumo era responsabile <strong>di</strong> circa il 37% dei<br />
casi <strong>di</strong> IMA. Altri fattori <strong>di</strong> rischio nelle donne erano <strong>di</strong>abete (OR=4,4), ipertensione (OR=3,3),<br />
iperlipidemia (OR=1,6) e storia familiare <strong>di</strong> IMA (OR=2,1). L’assunzione moderata <strong>di</strong> alcol era<br />
protettiva (OR=0,8 per 3 tazze al giorno). E’ stata trovata<br />
un’associazione inversa con pesce (OR=0,7 per >1 porzione alla settimana), vegetali (OR=0,7<br />
per ≥ 10 porzioni alla settimana) e frutta (OR=0,6 per ≥ 14 porzioni alla settimana), mentre la<br />
carne, i cibi integrali e i prodotti caseari non erano associati. L’effetto del fumo era maggiore in<br />
combinazione con <strong>di</strong>abete (OR=27,7), ipertensione (OR=15,7), iperlipidemia (OR=6,3), storia<br />
178<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
familiare <strong>di</strong> IMA (OR=8,7) e forte consumo <strong>di</strong> caffè (OR=5,7). L’evitare il fumo e un aumento<br />
<strong>di</strong> consumo <strong>di</strong> pesce, vegetali e frutta ridurrebbe il rischio <strong>di</strong> infarto <strong>di</strong> circa il 50%.<br />
Monitoraggio e indagine della mortalità per tumori in Europa<br />
Dai primi anni 1990, il nostro gruppo ha costruito una banca dati contenente, in un formato<br />
standar<strong>di</strong>zzato, dati <strong>di</strong> mortalità per i principali tumori e altre cause <strong>di</strong> morte, per i Paesi Europei<br />
ed alcuni Paesi extra-Europei, basata sui dati grezzi <strong>di</strong> mortalità e popolazione <strong>di</strong>sponibili<br />
presso l’Organizzazione Mon<strong>di</strong>ale della Sanità. L’obiettivo principale del progetto è <strong>di</strong><br />
mantenere e migliorare il sistema integrato <strong>di</strong> analisi e valutazione delle statistiche <strong>di</strong> mortalità<br />
in Europa e altre aree geografiche creato dal nostro gruppo. Nel <strong>2004</strong> sono stati investigati<br />
<strong>di</strong>versi aspetti della mortalità per tumori: è stata presentata una analisi sistematica dei tassi <strong>di</strong><br />
mortalità per alcuni tumori selezionati e per tutti i tumori in Europa nel quinquennio 1995-1999,<br />
insieme agli andamenti dal 1960 al 1999; i tassi e gli andamenti sono stati analizzati<br />
separatamente per l’Unione Europea, con particolare attenzione ai Paesi che sono entrati<br />
nell’Unione Europea nel <strong>2004</strong>; gli andamenti della mortalità per tumori negli anziani sono stati<br />
aggiornati; sono stati analizzati gli andamenti della mortalità per tumori in Messico; analisi<br />
dettagliate sono state condotte per alcune se<strong>di</strong> specifiche, tra cui i tumori del cavo orale e dello<br />
stomaco, il mesotelioma pleurico, il melanoma cutaneo e i tumori della prostata e del rene.<br />
Inoltre, la banca dati è stata aggiornata perio<strong>di</strong>camente con i nuovi dati che si rendono<br />
<strong>di</strong>sponibili presso l’Organizzazione Mon<strong>di</strong>ale della Sanità, e la banca dati è stata ristrutturata,<br />
con l’obiettivo finale <strong>di</strong> rendere <strong>di</strong>sponibile una versione online della stessa.<br />
Prevalenza del fumo in Italia<br />
Nel corso del <strong>2004</strong>, abbiamo condotto in collaborazione con la DOXA una nuova indagine<br />
comparativa sulla prevalenza del fumo nella popolazione italiana. Tale indagine includeva un<br />
campione <strong>di</strong> 3050 in<strong>di</strong>vidui (1509 uomini e 1541 donne) sopra i 15 anni <strong>di</strong> età, rappresentativo<br />
dell’intera popolazione italiana. Tra le informazioni raccolte da intervistatori opportunamente<br />
formati, è stata chiesta la percezione del potenziale effetto dell’aumento del prezzo delle<br />
sigarette sul consumo nei giovani, e la frequenza d’uso dei vari canali <strong>di</strong> <strong>di</strong>stribuzione del<br />
tabacco. Complessivamente nel <strong>2004</strong> il 26,2% della popolazione italiana ha riportato <strong>di</strong> essere<br />
attuale fumatore <strong>di</strong> sigarette (30% degli uomini e 23% delle donne). Gli ex-fumatori erano il<br />
17,9% dei soggetti, il 24,8% degli uomini e l’11,2% delle donne.<br />
Il 35,9% della popolazione (37,9% uomini e 32,8% donne) ha percepito come me<strong>di</strong>a/alta<br />
l’influenza del prezzo delle sigarette sul consumo nei giovani. Nei giovani tra i 15 e i 24 anni,<br />
tale percentuale era del 32,1%. I fumatori del nord Italia davano più importanza al prezzo del<br />
tabacco (41,2%) rispetto a coloro che vivevano al centro (32,4%) o sud Italia (31,2%). Tra gli<br />
attuali fumatori, l’85,6% ha riportato <strong>di</strong> comprare le sigarette principalmente da tabaccai legali,<br />
il 7,5% da <strong>di</strong>stributori automatici, il 6,9% da altri canali <strong>di</strong> <strong>di</strong>stribuzione, tra cui il contrabbando.<br />
Questi risultati sottolineano come gli aspetti economici possano avere importanti effetti <strong>di</strong> sanità<br />
pubblica sul controllo del tabacco. Inoltre in<strong>di</strong>cano che il contrabbando <strong>di</strong> sigarette, molto<br />
frequente negli anni ‘80, si è ora probabilmente ridotto.<br />
In un’altra indagine condotta in collaborazione con la DOXA, da un campione rappresentativo<br />
della popolazione italiana sono stati selezionati 498 adolescenti (13-17 anni). Nei 60 fumatori<br />
adolescenti (12%), i <strong>di</strong>stributori automatici <strong>di</strong> sigarette rappresentavano il 15% <strong>di</strong> tutte le<br />
ven<strong>di</strong>te <strong>di</strong> tabacco in Italia.<br />
179<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Valutazione tossicologica della funzione immunitaria <strong>di</strong> lavoratori <strong>di</strong><br />
pestici<strong>di</strong> (progetto EUROPIT)<br />
Questo progetto, condotto in collaborazione con altri quattro Paesi Europei, consiste in uno<br />
stu<strong>di</strong>o epidemiologico “cross-sectional” su soggetti occupazionalmente esposti a pestici<strong>di</strong><br />
(composti organofosforici e <strong>di</strong>tiocarbamati) e su un gruppo adeguato <strong>di</strong> controlli, condotto al<br />
fine <strong>di</strong> stimare gli effetti immunitari conseguenti a un’esposizione cronica a questi composti.<br />
Tra gli obiettivi del progetto vi è la misurazione dell’esposizione dei lavoratori in <strong>di</strong>verse<br />
con<strong>di</strong>zioni occupazionali utilizzando in<strong>di</strong>catori biologici e analisi chimiche dei pestici<strong>di</strong> e/o dei<br />
loro metaboliti; la valutazione dell’effetto dei <strong>di</strong>tiocarbamati e dei pestici<strong>di</strong> organofosforici e<br />
dell’esposizione a un mix <strong>di</strong> composti organofosforici e <strong>di</strong> <strong>di</strong>tiocarbamati, sul sistema<br />
immunitario umano, tra cui la risposta immunitaria agli antigeni; la determinazione <strong>di</strong> una<br />
relazione dose/risposta degli effetti osservati; e la valutazione dei polimorfismi genetici per<br />
alcuni enzimi <strong>di</strong> detossificazione e per i fattori immunologici, e il loro effetto sui marcatori<br />
biologici <strong>di</strong> esposizione e i parametri del sistema immunitario. Al fine <strong>di</strong> stimare l’effetto dei<br />
pestici<strong>di</strong> sul sistema immunitario, i dati immunitari dei soggetti esposti saranno comparati con<br />
quelli ottenuti nei controlli. Ulteriori confronti saranno fatti con i risultati immunologici ottenuti<br />
dagli stessi soggetti esposti prima dell’esposizione, e dopo un appropriato periodo senza alcuna<br />
esposizione al composto stu<strong>di</strong>ato.<br />
Dermato-epidemiologia: il progetto "Sole sì / Sole no - GISED"<br />
La dermato-epidemiologia è presente nel nostro laboratorio dall’inizio degli anni 90, frutto<br />
principalmente <strong>di</strong> un’intensa e proficua collaborazione con il “Gruppo Italiano per gli Stu<strong>di</strong><br />
Epidemiologici in Dermatologia” (GISED, <strong>di</strong>retto dal Dr. Luigi Nal<strong>di</strong>).<br />
Nel corso dell’anno 2003-<strong>2004</strong> si è concluso lo stu<strong>di</strong>o “Sole Sì/Sole No GISED” iniziato nel<br />
2001-2002. Il progetto “Sole Sì/Sole No GISED” aveva per scopo la valutazione dell’efficacia<br />
<strong>di</strong> un intervento educativo <strong>di</strong> prevenzione primaria del tumore cutaneo me<strong>di</strong>ante l’educazione ad<br />
una corretta esposizione al sole. Hanno partecipato allo stu<strong>di</strong>o 18 centri GISED <strong>di</strong> varie aree<br />
geografiche coinvolgendo un campione <strong>di</strong> circa 100 scuole elementari Italiane (classi <strong>di</strong> II e III),<br />
per un totale <strong>di</strong> più <strong>di</strong> 11000 bambini. Le scuole sono state randomizzate a ricevere o meno un<br />
intervento educativo strutturato (50% dei bambini in ogni braccio <strong>di</strong> randomizzazione). Tale<br />
intervento, condotto da insegnanti opportunamente formati, si è svolto con il supporto <strong>di</strong><br />
materiale sviluppato ad hoc. Nelle scuole randomizzate al gruppo <strong>di</strong> controllo, non è stato<br />
condotto alcun intervento specifico. Una prima valutazione <strong>di</strong> efficacia dell’intervento riguarda<br />
la misura delle abitu<strong>di</strong>ni <strong>di</strong> esposizione solare degli alunni e del grado <strong>di</strong> conoscenza circa gli<br />
effetti del sole sulla pelle effettuata tramite un questionario compilato dalle famiglie. Questa<br />
prima valutazione è stata effettuata al basale (precedente l’intervento per le scuole randomizzate<br />
ad intervento attivo) ed è stata ripetuta a fine dell’anno scolastico successivo. Una seconda<br />
valutazione <strong>di</strong> efficacia si focalizza su <strong>di</strong> un sotto-gruppo <strong>di</strong> classi in numero comparabile per<br />
ogni braccio <strong>di</strong> randomizzazione. Nelle classi selezionate è stata eseguita un’esercitazione<br />
guidata da un dermatologo, nel corso della quale si è valutato il fenotipo dei bambini e si è<br />
proceduto alla conta dei nevi melanocitici sugli arti superiori. La rispondenza generale dello<br />
stu<strong>di</strong>o è stata buona, circa 80%. In generale, al basale non sono state riscontrate <strong>di</strong>fferenze<br />
significative tra i due gruppi <strong>di</strong> randomizzazione, il 12% del campione, <strong>di</strong>chiara <strong>di</strong> aver avuto<br />
almeno un arrossamento con bruciore lo scorso anno, ma solo il 42% <strong>di</strong> questi bambini ha<br />
riportato un’intensa esposizione solare e il 79% circa usava regolarmente creme schermanti o<br />
maglietta. I risultati finali dello stu<strong>di</strong>o saranno analizzati e oggetto <strong>di</strong> pubblicazione nel corso<br />
del 2005.<br />
180<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Dermato-epidemiologia: il progetto PRAKTIS<br />
Sempre in collaborazione con il GISED, nel corso del <strong>2004</strong> si è conclusa la raccolta dati dello<br />
stu<strong>di</strong>o PRAKTIS sulla cheratosi attinica, patologia che oltre ad essere associata ad una<br />
considerevole morbi<strong>di</strong>tà, è fortemente associata al rischio <strong>di</strong> basaliomi e <strong>di</strong> carcinoma squamocellulare<br />
della pelle. Scopo principale dello stu<strong>di</strong>o PRAKTIS è stata la valutazione della<br />
prevalenza della cheratosi attinica nella popolazione italiana, ad oggi sconosciuta. La stima <strong>di</strong><br />
prevalenza <strong>di</strong> cheratosi attinica, effettuata su <strong>di</strong> un campione rappresentativo della popolazione<br />
italiana <strong>di</strong> 45 anni o più (12.483 in<strong>di</strong>vidui), risulta essere <strong>di</strong> 1.4% (intervallo <strong>di</strong> confidenza al<br />
95%: 1,2%-1,8%). La prevalenza aumenta all’aumentare dell’età ed è più alta tra gli uomini.<br />
Come atteso, sia l’avere un fenotipo chiaro rispetto ad uno scuro che l’esporsi intensamente ai<br />
raggi solari, aumenta il rischio <strong>di</strong> sviluppare delle cheratosi attiniche. La prevalenza riscontrata<br />
in questo stu<strong>di</strong>o risulta essere nettamente inferiore a quanto riportato in altre nazioni. I risultati<br />
<strong>di</strong> questo stu<strong>di</strong>o potranno essere utili qualora si vogliano valutare nuove strategie <strong>di</strong> prevenzione<br />
dei tumori della pelle (non-melanocitici). Lo stu<strong>di</strong>o PRAKTIS prevede inoltre la validazione <strong>di</strong><br />
uno strumento <strong>di</strong>agnostico sufficientemente sensibile e specifico per la <strong>di</strong>agnosi <strong>di</strong>fferenziale<br />
della cheratosi attinica rispetto ad altre patologie dermatologiche partendo da 10 criteri<br />
selezionati da un gruppo <strong>di</strong> esperti. I dati <strong>di</strong> questa fase dello stu<strong>di</strong>o sono ad oggi in fase <strong>di</strong><br />
elaborazione.<br />
Epidemiologia delle patologie auto-immuni<br />
Nel corso dell’anno <strong>2004</strong>, è continuata la collaborazione con il Prof. Jean-François Bach,<br />
dell’<strong>Istituto</strong> Nazionale per la Salute e la Ricerca Me<strong>di</strong>ca francese (INSERM) presso l’Ospedale<br />
“Necker-Enfants Malades” <strong>di</strong> Parigi. Il Prof. Bach è uno dei più importanti referenti<br />
internazionali per quanto riguarda l’immunologia clinica, con un ampio spettro <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> clinici<br />
controllati e non, condotti da più <strong>di</strong> quin<strong>di</strong>ci anni nel settore della patologia auto-immune. La<br />
collaborazione si basa sulla possibilità <strong>di</strong> vagliare un’ipotesi sperimentale (immunologica)<br />
attraverso stu<strong>di</strong> epidemiologici.<br />
L’ipotesi che si vorrebbe vagliare porta il nome <strong>di</strong> “Ipotesi Igienista”, e nasce dalla<br />
constatazione che al generale declino delle infezioni nei Paesi sviluppati, dovuto all’aumento<br />
degli standard igienici, corrisponde un aumento <strong>di</strong> certe patologie immuno-<strong>di</strong>pendenti quali il<br />
<strong>di</strong>abete e le patologie associate all’espressione dell’atopia (asma, rinite e dermatite atopica). La<br />
fase pilota <strong>di</strong> una meta-analisi <strong>di</strong> dati pubblicati identifica nella dermatite atopica la patologia<br />
con stime <strong>di</strong> associazione più stabili rispetto a quanto ottenuto per rinite ed asma allergiche. In<br />
generale, l’associazione inversa tra in<strong>di</strong>catori in<strong>di</strong>retti <strong>di</strong> infezioni (numero <strong>di</strong> fratelli, vita in<br />
comunità precoce, ecc.) e malattia allergica è del 20% per la dermatite atopica, del 30% per la<br />
rinite e del 40% per l’asma allergica. Queste associazioni sono puramente in<strong>di</strong>cative, dovranno<br />
in futuro essere verificate tenendo conto in particolare del tipo <strong>di</strong> agente infettivo (batteri, virus,<br />
parassiti) considerato e del tempo <strong>di</strong> latenza tra l’infezione e l’insorgenza della patologia<br />
allergica.<br />
Prevenzione e informazione a livello <strong>di</strong> salute pubblica<br />
E’ continuata l’attività <strong>di</strong> <strong>di</strong>vulgazione scientifica e <strong>di</strong> prevenzione rivolta all’opinione pubblica<br />
generale, in particolare in merito a <strong>di</strong>eta, fumo e alcool, onde <strong>di</strong>ffondere informazione<br />
quantitativa e favorire concreti atteggiamenti <strong>di</strong> riduzione <strong>di</strong> rischio, attraverso articoli e altre<br />
pubblicazioni <strong>di</strong>vulgative.<br />
181<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
182<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
LABORATORIO DI<br />
INFORMATICA MEDICA<br />
PERSONALE<br />
IRFMN<br />
Capo Laboratorio Eugenio SANTORO, Dr. Sci. Informaz.<br />
183<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL LABORATORIO<br />
Il laboratorio <strong>di</strong> Informatica Me<strong>di</strong>ca è coinvolto nelle seguenti attività:<br />
IRFMN<br />
- gestione degli aspetti informatici dell’<strong>Istituto</strong>;<br />
- sviluppo <strong>di</strong> siti web a carattere me<strong>di</strong>co;<br />
- gestione del sito web dell’<strong>Istituto</strong>;<br />
- attività <strong>di</strong> formazione su argomenti legati a "Internet e me<strong>di</strong>cina" e all’informatica me<strong>di</strong>ca;<br />
- analisi statistica <strong>di</strong> sperimentazioni cliniche.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Sviluppo <strong>di</strong> un registro europeo per le sperimentazioni cliniche in pe<strong>di</strong>atria WWW.DEC-<br />
NET.ORG<br />
Sviluppo del sito web per la sperimentazione clinica RISCHIO&PREVENZIONE<br />
Sviluppo del sito web TROMBOSI.CARE<br />
Mantenimento del sito web dell’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri<br />
Mantenimento dei siti web CARDIO.CARE, ONCO.CARE, NEURO.CARE, GASTRO.CARE,<br />
PNEUMO.CARE e DERMA.CARE<br />
Mantenimento del sito web Minosse<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
Associazione Italiana <strong>di</strong> Oncologia Me<strong>di</strong>ca (AIOM)<br />
Associazione Nazionale dei Me<strong>di</strong>ci Car<strong>di</strong>ologi Ospedalieri (ANMCO)<br />
Società Italiana <strong>di</strong> Ematologia (SIE)<br />
Società Italiana <strong>di</strong> Malattie Infettive e Tropicali (SIMIT)<br />
CNR Milano<br />
Gruppo Italiano Stu<strong>di</strong> Epidemiologici in Dermatologia (GISED)<br />
Gruppo Italiano per lo Stu<strong>di</strong>o della Sopravivenza nell'Infarto miocar<strong>di</strong>co (GISSI)<br />
Ministero dell'Ambiente e della Tutela del Territorio<br />
Ministero della Salute<br />
Società Italiana Attività Regolatorie<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Ricerca Car<strong>di</strong>ovascolare – <strong>Istituto</strong> “<strong>Mario</strong> Negri”<br />
Dipartimento Ambiente e Salute – <strong>Istituto</strong> “<strong>Mario</strong> Negri”<br />
Laboratorio per la Salute Materno Infantile - <strong>Istituto</strong> “<strong>Mario</strong> Negri”<br />
Servizio Biblioteca - <strong>Istituto</strong> “<strong>Mario</strong> Negri”<br />
Society for Internet in Me<strong>di</strong>cine<br />
Senologic International Society<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
184<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Portale Partecipasalute.it – http://www.partecipasalute.it (Eugenio Santoro)<br />
Società Italiana Attività Regolatorie News, SIARNews (Eugenio Santoro)<br />
Journal of Me<strong>di</strong>cal Internet Research<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
IRFMN<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
Consorzio Italiano per la Ricerca Me<strong>di</strong>ca<br />
Society for Clinical Trials<br />
Society for Internet in Me<strong>di</strong>cine<br />
Senologic International Society<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
Corso II e<strong>di</strong>zione, Internet e Me<strong>di</strong>cina: fonti, insi<strong>di</strong>e, opportunità; organizzato da UNAMSI-<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri. Milano 19 giugno <strong>2004</strong>, Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano, Polo Vialba,<br />
Ospedale Luigi Sacco<br />
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
LABORATORIO<br />
Corso "Internet e Me<strong>di</strong>cina: fonti, insi<strong>di</strong>e, opportunità" rivolto ai giornalisti scientifici della<br />
UNAMSI (Unione Nazione Me<strong>di</strong>co Scientifica d’Informazione), Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong><br />
Milano, Polo Vialba, Ospedale Luigi Sacco , Milano 19 giugno <strong>2004</strong>. "www.clinicaltrials.gov:<br />
la guida in internet agli stu<strong>di</strong> clinici".<br />
5 Congresso Nazionale dell’Associazione Italiana <strong>di</strong> Teleme<strong>di</strong>cina e Informatica Me<strong>di</strong>ca.<br />
Genova 18-21 novembre <strong>2004</strong>. "DEC-NET: lo sviluppo del registro europeo delle<br />
sperimentazioni cliniche in ambito pe<strong>di</strong>atrico".<br />
AstraZeneca Italia<br />
Unione Europea Fifth Framework Programme<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
185<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Bonati M, Pandolfini C, Rossi Valentina, Santoro E, Carreras I D, Castel Llobet J M. Launch of a European<br />
pae<strong>di</strong>atric clinical trials register. Pae<strong>di</strong>atric Perinatal Drug Therapy <strong>2004</strong>; 6: 38-39<br />
Bonati M, Pandolfini C, Rossi Valentina, Santoro E, Arnau de Bolos J M, Carreras I D, Fuentes Camps I, Castel<br />
Llobet J M, Jacqz-Aigrain E, Zarrabian S, Choonara I, Sammons H, Steingo J.<br />
Public <strong>di</strong>sclosure of clinical trials. BMJ <strong>2004</strong>.<br />
http://bmj.bmjjournals.com/cgi/eletters/329/7457/64#69125<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI DIVULGATIVE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
Bonati M, Pandolfini C, Rossi Valentina, Santoro E. Un registro degli stu<strong>di</strong> clinici pe<strong>di</strong>atrici: uno strumento dalla<br />
parte dei bambini. Giornale Italiano Farmacia Clinica <strong>2004</strong>; 18: 1-5<br />
Santoro E. Trial clinici, passo dopo passo. Giornale Italiano Me<strong>di</strong>co <strong>di</strong> Famiglia <strong>2004</strong>; n.2: 44-45<br />
Santoro E. Internet per il me<strong>di</strong>co <strong>di</strong> famiglia. Me<strong>di</strong>ci Oggi <strong>2004</strong>; 8: 32-35<br />
Santoro E, Garattini S. Un modello <strong>di</strong> integrazione delle informazioni per la ricerca biome<strong>di</strong>ca. Recenti Prog Med<br />
<strong>2004</strong>; 95: 207-209<br />
Santoro E. AMEDEO: uno strumento per la segnalazione <strong>di</strong> articoli scientifici <strong>di</strong> recente pubblicazione. In: L'Agora'.<br />
Car<strong>di</strong>ologia e metabolismo. Evidenze ed opinioni. Momento Me<strong>di</strong>co, Salerno; <strong>2004</strong> : 53-59<br />
Santoro E. Internet e gli e-trials: come gestire, condurre e partecipare a sperimentazioni cliniche sul web. Parte 1. In:<br />
L'Agora'. Car<strong>di</strong>ologia e metabolismo. Evidenze ed opinioni. Momento Me<strong>di</strong>co, Salerno; <strong>2004</strong> : 45-52<br />
Santoro E. Internet e gli e-trials: come gestire, condurre e partecipare a sperimentazioni cliniche sul web. Parte 2. In:<br />
L'Agora'. Car<strong>di</strong>ologia e metabolismo. Evidenze ed opinioni. Momento Me<strong>di</strong>co, Salerno; <strong>2004</strong> : 49-54<br />
Santoro E, Bazzi D. Antivirus e spamming. Ricerca & Pratica <strong>2004</strong>; n. 117: 109-111<br />
Rossi Lorenzo, Santoro E. Gli scanner. Ricerca & Pratica <strong>2004</strong>; n. 115: 31-32<br />
Santoro E, Bazzi D. Spamming e posta indesiderata. SIAR News <strong>2004</strong>; n. 45: 28-29<br />
ALTRE PRODUZIONI EDITORIALI PUBBLICATE NEL CORSO DEL<br />
<strong>2004</strong><br />
Santoro E, Paraninfo G. Internet e ricerca clinica in infettivologia. Giunti Interactive Labs. <strong>2004</strong>. (CD-ROM)<br />
186<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
IRFMN<br />
Sviluppo del sito web per lo stu<strong>di</strong>o RISCHIO&PREVENZIONE<br />
In collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca in Me<strong>di</strong>cina Generale del Dipartimento <strong>di</strong><br />
Ricerca Car<strong>di</strong>ovascolare è stato realizzato il sito web della sperimentazione clinica<br />
RISCHIO&PREVENZIONE. Attraverso questo sito (http://www.rischioeprevenzione.it) i 370<br />
me<strong>di</strong>ci partecipanti hanno l’opportunità <strong>di</strong> seguire lo stato <strong>di</strong> avanzamento della<br />
sperimentazione, ottenere informazioni pratiche sull’applicazione del protocollo <strong>di</strong> ricerca e<br />
aggiornarsi su problematiche relative alla patologia in stu<strong>di</strong>o.<br />
Sviluppo del sito web TROMBOSI.CARE<br />
Questo sito (http://www.trombosicare.it) è stato realizzato dal Laboratorio <strong>di</strong> Informatica<br />
Me<strong>di</strong>ca in collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca in Me<strong>di</strong>cina Generale del Dipartimento<br />
<strong>di</strong> Ricerca Car<strong>di</strong>ovascolare per raccogliere, classificare e commentare i migliori siti web<br />
<strong>di</strong>sponibili sulla rete nel campo delle malattie trombotiche. E’ il progetto più recente<br />
appartenente alla famiglia degli X.CARE.<br />
Progetto DEC-NET: Drug Evaluation in Children – Clinical Trials in Europe<br />
In collaborazione con il Laboratorio per la Salute Materno Infantile dell’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri, il<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Informatica Me<strong>di</strong>ca è stato impegnato nel corso del 2003 nello sviluppo <strong>di</strong> un<br />
registro <strong>di</strong> sperimentazioni cliniche in pe<strong>di</strong>atria basato sul web. Il progetto, finanziato<br />
dall’Unione Europea nell’ambito del Fifth Framework Programme, vede coinvolti 4 partner<br />
internazionali al fine <strong>di</strong> sviluppare uno strumento (accessibile a chiunque attraverso Internet) per<br />
reperire informazioni sulle sperimentazioni cliniche in pe<strong>di</strong>atria condotte a livello nazionale e<br />
internazionale. Il progetto, della durata <strong>di</strong> tre anni, ha visto nel corso del 2003 la pubblicazione<br />
del sito http://www.dec-net.org su cui sono <strong>di</strong>sponibili i primi protocolli <strong>di</strong> ricerca.<br />
Nel corso del <strong>2004</strong> il sito web è stato ulteriormente ampliato dotandolo <strong>di</strong> strumenti per la<br />
raccolta delle informazioni da parte dei partner e per la ricerca delle sperimentazioni da parte<br />
dei me<strong>di</strong>ci e dei citta<strong>di</strong>ni.<br />
Indagine conoscitiva sul gra<strong>di</strong>mento, uso e miglioramento della Guida<br />
all'uso dei farmaci per bambini<br />
La Guida all’uso dei farmaci per i bambini è il primo prontuario terapeutico pe<strong>di</strong>atrico nazionale<br />
in Italia e il secondo a livello europeo, dopo la versione britannica. Lo scopo principale <strong>di</strong> un<br />
prontuario non è semplicemente quello <strong>di</strong> elencare dei farmaci e il loro profilo terapeutico, ma<br />
<strong>di</strong> rappresentare uno strumento essenziale per l’uso razionale dei farmaci. Deve essere una fonte<br />
<strong>di</strong> informazioni aggiornata e basata sulle evidenze sia per i singoli farmaci che per le terapie (e<br />
in particolare per i problemi più frequenti) sia in ospedale che nella comunità. Nonostante gli<br />
in<strong>di</strong>scutibili obiettivi che hanno motivato e animato l’iniziativa ministeriale si è ritenuto<br />
in<strong>di</strong>spensabile verificare con i <strong>di</strong>retti destinatari (me<strong>di</strong>ci, infermieri e farmacisti) quanto la<br />
Guida risponda a dei bisogni informativi nella pratica assistenziale attraverso il giu<strong>di</strong>zio critico<br />
degli operatori-lettori-utilizzatori in termini <strong>di</strong> vali<strong>di</strong>tà, rilevanza, chiarezza, pertinenza, etc.<br />
In collaborazione con il Laboratorio per la Salute Materno Infantile e il Ministero della Salute<br />
nel corso del <strong>2004</strong> è stata condotta un’indagine conoscitiva all’insegna della partecipazione,<br />
dell’informazione attiva e per ottenere in<strong>di</strong>cazioni e <strong>di</strong>sponibilità per future migliorie. A tale<br />
scopo è stato pre<strong>di</strong>sposto un apposito questionario accessibile attraverso il web<br />
(http://www.marionegri.it/guida ) per la valutazione specifica della Guida.<br />
187<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Mantenimento del sito web dell’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri<br />
Nel corso del 2003 è stato pubblicato il nuovo sito web dell’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri<br />
(http://www.marionegri.it). L’interfaccia è stata ra<strong>di</strong>calmente mo<strong>di</strong>ficata e i contenuti<br />
riorganizzati per venire incontro alla nuova struttura “<strong>di</strong>namica” del sito web. Sono stati<br />
aggiunti anche nuovi contenuti e nuovi servizi tra cui una sezione interamente de<strong>di</strong>cata ai<br />
citta<strong>di</strong>ni e agli operatori sanitari. Nel corso del <strong>2004</strong> è stata pubblicata la versione inglese del<br />
sito web. Inoltre è continuata l’attività <strong>di</strong> mantenimento grazie anche allo sviluppo <strong>di</strong> ulteriori<br />
funzioni e applicazioni, al potenziamento della sezione intranet e all’implementazione <strong>di</strong> un<br />
servizio <strong>di</strong> webmail.<br />
Mantenimento dei siti web CARDIO.CARE, ONCO.CARE, GASTRO.CARE,<br />
NEURO.CARE, PNEUMO.CARE e DERMA.CARE<br />
Questi in<strong>di</strong>ci sono stati realizzati dal Laboratorio <strong>di</strong> Informatica Me<strong>di</strong>ca per raccogliere,<br />
classificare e commentare i migliori siti web <strong>di</strong>sponibili sulla rete, fornendo agli utenti <strong>di</strong><br />
Internet uno strumento efficace <strong>di</strong> ricerca sulla rete. Il progetto copre <strong>di</strong>verse aree me<strong>di</strong>che tra<br />
cui la car<strong>di</strong>ologia (http://www.car<strong>di</strong>ocare.it), la neurologia (http://www.neurocare.it),<br />
l’oncologia (http://www.oncocare.it), la gastroenterologia (http://www.gastrocare.it), la<br />
pneumologia (http://www.pneumocare.it) e la dermatologia (http://www.dermacare.it) e ha visto<br />
la collaborazione <strong>di</strong> alcuni <strong>di</strong>partimenti dell’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri (Dipartimento <strong>di</strong> Ricerca<br />
Car<strong>di</strong>ovascolare, Laboratorio delle Malattie Neurologiche e Dipartimento <strong>di</strong> Oncologia) e <strong>di</strong><br />
gruppi <strong>di</strong> ricerca esterni (Gruppo Italiano Stu<strong>di</strong> Epidemiologici in Dermatologia – GISED).<br />
Mantenimento del sito web Minosse<br />
Il sito web Minosse (http://www.marionegri.it/minosse) è stato sviluppato in collaborazione con<br />
il Dipartimento Ambiente e Salute dell’<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri e con il Ministero dell’Ambiente<br />
della Tutela del Territorio. Il sito web consente <strong>di</strong> creare e gestire un database della normativa<br />
nazionale e internazionale relativa a problematiche legate all’ambiente. Il sito offre anche un<br />
sistema <strong>di</strong> interrogazione <strong>di</strong> nuova generazione che consente <strong>di</strong> raggiungere in pochi passi i<br />
documenti desiderati. L’attività, iniziata nel 2001, è continuata anche nel <strong>2004</strong>.<br />
Gestione degli aspetti informatici dell’<strong>Istituto</strong><br />
Una delle attività del Laboratorio <strong>di</strong> Informatica Me<strong>di</strong>ca è la gestione dell’informatica<br />
dell’istituto. Tra i compiti ad essa assegnati: l’assistenza hardware e software dei client e dei<br />
server installati in istituto, la gestione della posta elettronica, la gestione del collegamento<br />
Internet, la gestione della rete interna, la gestione del sito web dell’<strong>Istituto</strong>.<br />
Attività <strong>di</strong> formazione<br />
Nel corso del <strong>2004</strong> è proseguita l’attività <strong>di</strong> formazione su tematiche legate a “Internet e<br />
Me<strong>di</strong>cina” attraverso lo svolgimento <strong>di</strong> corsi e workshop (sia interni all’istituto, sia esterni) a<br />
cui ha partecipato il personale del laboratorio con ruoli <strong>di</strong> docenza.<br />
188<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
CENTRO COCHRANE ITALIANO<br />
PERSONALE<br />
IRFMN<br />
Direttore del Centro Alessandro LIBERATI, Dr. Med. Chir.<br />
189<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL CENTRO<br />
IRFMN<br />
Il Centro Cochrane Italiano (CCI) è attivo dal 1994 ed è affiliato alla Cochrane Collaboration<br />
(CC), un'organizzazione no-profit che ha lo scopo <strong>di</strong> produrre, mantenere aggiornati e<br />
<strong>di</strong>ffondere i risultati <strong>di</strong> sintesi (revisioni sistematiche) degli effetti degli interventi sanitari. Il<br />
principale prodotto della Cochrane Collaboration è la Cochrane Library, una pubblicazione<br />
trimestrale che contiene le revisioni sistematiche prodotte dai gruppi collaborativi della CC e<br />
altri database relativi a revisioni sistematiche pubblicate su riviste internazionali e prodotte da<br />
gruppi non Cochrane e la sintesi dei migliori rapporti <strong>di</strong> Technology Assessment.<br />
Gli obiettivi del CCI sono centrati sul supporto alle <strong>di</strong>verse attività della Cochrane<br />
Collaboration in Italia, con particolare riferimento a:<br />
a) far crescere la conoscenza delle attività della CC in Italia;<br />
b) fornire supporto metodologico e pratico a tutti gli in<strong>di</strong>vidui e gruppi che vogliono collaborare<br />
alle attività della CC;<br />
c) contribuire all'adozione e <strong>di</strong>sseminazione della pratica della Evidence-based Me<strong>di</strong>cine (EBM)<br />
in Italia, sia a livello accademico sia nella pratica dei servizi sanitari.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Creazione <strong>di</strong> una rete nazionale <strong>di</strong> ricercatori e operatori sanitari che producono revisioni<br />
sistematiche <strong>di</strong> letteratura per la Cochrane Collaboration.<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
<strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità<br />
Ministero della Salute<br />
Ce.V.E.A.S.<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Epidemiologia della ASL Roma E<br />
<strong>Istituto</strong> Neurologico "Carlo Besta"<br />
Agenzia Sanitaria Regionale, Regione Emilia Romagna<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano<br />
Università <strong>di</strong> Modena e Reggio Emilia<br />
Azienda Sanitaria Locale 20, Alessandria<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
Centre for Reviews and Dissemination, University of York, York, UK<br />
British Me<strong>di</strong>cal Journal Group<br />
The Cochrane Collaboration<br />
The Campbell Collaboration<br />
190<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Annals of Internal Me<strong>di</strong>cine (Alessandro Liberati)<br />
Clinical Evidence (Alessandro Liberati)<br />
Evidence Based Health Policy and Research (Alessandro Liberati)<br />
Journal of Health Services Research (Alessandro Liberati)<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
Annals of Internal Me<strong>di</strong>cine (Alessandro Liberati)<br />
British Me<strong>di</strong>cal Journal (Alessandro Liberati)<br />
JAMA (Alessandro Liberati)<br />
Evidence Based Health Policy and Research (Alessandro Liberati)<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
IRFMN<br />
Master "Evidence Based Me<strong>di</strong>cine e metodologia della ricerca sanitaria", Febbraio-Settembre<br />
<strong>2004</strong>, Università <strong>di</strong> Modena e Reggio Emilia<br />
Master "Metodologia delle revisioni sistematiche in capo me<strong>di</strong>co e sanitario", Novembre 2003-<br />
Dicembre <strong>2004</strong>, Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano.<br />
IX Riunione Annuale Network Cochrane Italiano "Coinvolgere i pazienti nelle scelte della<br />
ricerca: obiettivo giusto e possibile?", 5-6 Novembre <strong>2004</strong>, Firenze<br />
1° Workshop "Le revisioni sistematiche in campo <strong>di</strong>agnostico", 4 Novembre <strong>2004</strong>, Firenze<br />
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL CENTRO<br />
Master "Evidence Based Me<strong>di</strong>cine e metodologia della ricerca sanitaria", Febbraio-Settembre<br />
<strong>2004</strong>, Università <strong>di</strong> Modena e Reggio Emilia.<br />
Master "Metodologia delle revisioni sistematiche in capo me<strong>di</strong>co e sanitario", Novembre 2003-<br />
Dicembre <strong>2004</strong>, Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano.<br />
XII International Cochrane Colloquium, 2-6 Ottobre <strong>2004</strong>, Ottawa, Canada.<br />
191<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> <strong>Farmacologiche</strong> <strong>Mario</strong> Negri<br />
Ministero della Salute<br />
Fondazione Telethon<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Rojas M P, Telaro E, Russo A, Fossati R, Confalonieri C, Liberati A<br />
Follow-up strategies for women treated for early breast cancer<br />
In: The Cochrane Library. Wiley, Chichester; <strong>2004</strong> : issue 2<br />
Rojas M P, Telaro E, Russo A, Fossati R, Confalonieri C, Liberati A<br />
Antibiotic prophylaxis to reduce respiratory tract infections and mortality in adults receiving intensive care<br />
In: The Cochrane Library. Wiley, Chichester; <strong>2004</strong> : Issue 2<br />
Liberati A<br />
Research Ethics Committees: can they contribute to the improvement of clinical research in Europe?<br />
J Ambul Care Manage <strong>2004</strong>; 27: 154-165<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI DIVULGATIVE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Liberati A<br />
Una flebo <strong>di</strong> trasparenza per i Comitati<br />
Ricerca & Pratica <strong>2004</strong>; n. 117: 89-90<br />
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
IRFMN<br />
Attività <strong>di</strong> formazione<br />
A partire dall'anno accademico 1999-2000 il CCI ha contribuito all'organizzazione del Master in<br />
"Metodologia delle Revisioni Sistematiche in Campo Me<strong>di</strong>co e Sanitario" in collaborazione con<br />
la Facoltà <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina e Chirurgia dell'Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano. Il master è giunto nel<br />
<strong>2004</strong> alla sua terza<br />
e<strong>di</strong>zione e ha coinvolto 18 studenti. I docenti del Master sono ricercatori dei Centri Cochrane<br />
europei ed esperti italiani provenienti sia da università sia da centri <strong>di</strong> ricerca italiani. Gli<br />
studenti che frequentano il Master hanno tra i propri obiettivi <strong>di</strong>dattici la preparazione <strong>di</strong> una<br />
revisione sistematica svolta secondo i requisiti metodologici della Cochrane Collaboration.<br />
Nell'anno <strong>2004</strong> il Centro Cochrane Italiano ha contribuito all'organizzazione del "Master in<br />
Evidence-based me<strong>di</strong>cine e Metodologia della Ricerca Sanitaria" presso l'Università <strong>di</strong> Modena<br />
e Reggio Emilia che ha coinvolto, nella seconda e<strong>di</strong>zione, 15 studenti.<br />
192<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Il Centro ha anche avviato la fase pilota per la messa a punto del progetto "ECCE" (Educazione<br />
Continua Clinical Evidence), che verrà attivato nel 2005 nell'ambito del programma nazionale<br />
<strong>di</strong> Educazione Continua in Me<strong>di</strong>cina (ECM).<br />
Attività <strong>di</strong> <strong>di</strong>sseminazione<br />
Nel <strong>2004</strong> il CCI ha lavorato alla preparazione della terza e<strong>di</strong>zione <strong>di</strong> "Clinical Evidence", il<br />
compen<strong>di</strong>o delle migliori prove <strong>di</strong> efficacia prodotto dal BMJ Publishing Group, largamente<br />
basato sulle revisioni sistematiche della Cochrane Collaboration.<br />
Questa nuova e<strong>di</strong>zione sarà <strong>di</strong>stribuita, in formato cartaceo, a 45.000 me<strong>di</strong>ci <strong>di</strong> me<strong>di</strong>cina<br />
generale italiani e sarà <strong>di</strong>sponibile, in formato elettronico, sul sito web del Ministero della<br />
Salute.<br />
Il CCI e i ricercatori a esso afferenti hanno collaborato alla produzione <strong>di</strong> <strong>di</strong>verse revisioni<br />
sistematiche Cochrane. Al Dicembre <strong>2004</strong> erano <strong>di</strong>sponibili nella Cochrane Library oltre 50<br />
revisioni complete e oltre 60 protocolli che avevano un ricercatore italiano come autore<br />
principale o co-autore.<br />
Lo staff del CCI è anche attivamente coinvolto in progetti <strong>di</strong> approfon<strong>di</strong>mento metodologico<br />
mirati a identificare strumenti vali<strong>di</strong> e riproducibili per misurare la qualità delle revisioni<br />
sistematiche.<br />
Nel <strong>2004</strong> il Centro Cochrane Italiano ha collaborato con la Fondazione Telethon per un<br />
programma <strong>di</strong> miglioramento della qualità della ricerca nel campo delle malattie neuromuscolari<br />
e la valutazione della variabilità degli approcci assistenziali ai pazienti affetti da <strong>di</strong>strofia<br />
muscolare <strong>di</strong> Duchenne.<br />
Progetto per un "Alleanza tra associazioni <strong>di</strong> pazienti e citta<strong>di</strong>ni e comunità me<strong>di</strong>co-scientifica"<br />
Nel <strong>2004</strong> il CCI ha collaborato con Il Laboratorio <strong>di</strong> Ricerca Translazionale e <strong>di</strong> Outcome in<br />
Oncologia e con l' agenzia <strong>di</strong> giornalismo scientifico Za<strong>di</strong>g a un programma <strong>di</strong> ricerca che<br />
coinvolge i pazienti e le loro associazioni.<br />
Gli obiettivi del progetto sono:<br />
- orientare pazienti, citta<strong>di</strong>ni e loro associazioni a una partecipazione attiva nell'ambito<br />
dell'assistenza sanitaria e delle scelte in me<strong>di</strong>cina;<br />
- orientare le organizzazioni professionali e scientifiche a un rapporto <strong>di</strong> confronto<br />
costruttivo con pazienti e citta<strong>di</strong>ni;<br />
- avviare una partnership trasparente tra il paziente e il citta<strong>di</strong>no e i servizi sanitari.<br />
Il progetto prevedeva anche la costruzione del sito web “Partecipasalute”, un portale rivolto a<br />
pazienti, citta<strong>di</strong>ni e loro associazioni per fornire gli strumenti critici che consentano una più<br />
attiva partecipazione e una più corretta informazione sui temi della salute e delle scelte in<br />
me<strong>di</strong>cina.<br />
Il CCI ha partecipato attivamente alla costruzione <strong>di</strong> questo sito.<br />
A questi temi il CCI ha anche de<strong>di</strong>cato la propria riunione <strong>annuale</strong> <strong>2004</strong> tenutasi in Novembre a<br />
Firenze.<br />
193<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
194<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
CENTRO CATULLO E DANIELA<br />
BORGOMAINERIO<br />
IRFMN<br />
Il centro de<strong>di</strong>cato a “Catullo e Daniela Borgomainerio” è sorto nel 1987, grazie al contributo<br />
della Signora Angela Marchegiano Borgomainerio.<br />
L’e<strong>di</strong>ficio è nato come centro per lo stu<strong>di</strong>o delle malattie rare del bambino e a tutt’oggi alcuni<br />
dei laboratori ospitati conducono ricerche in questo senso. Ad esempio, si occupano dello<br />
stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> nuove opzioni terapeutiche da applicare al trattamento <strong>di</strong> una forma molto rara <strong>di</strong><br />
leucemia acuta mieloide, nota come leucemia acuta promielocitica e sono in corso numerosi<br />
stu<strong>di</strong> per identificare nuovi farmaci dotati <strong>di</strong> meccanismi <strong>di</strong>versi capaci <strong>di</strong> sinergizzare con<br />
l’acido trans-retinoico.<br />
Nel Centro Borgomainerio si svolgono inoltre ricerche epidemiologiche sulle leucemie infantili<br />
e sui tumori del testicolo negli adolescenti e giovani adulti.<br />
Le attività svolte presso il Centro Borgomainerio afferenti all'area pe<strong>di</strong>atrica sono condotte in<br />
collaborazione anche con gruppi dell'<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong>slocati in altre se<strong>di</strong>, quali: il Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong><br />
Cliniche per le Malattie Rare Aldo e Cele Daccò (Ranica, BG), il Centro <strong>di</strong> informazione sul<br />
farmaco (Crif) e il Laboratorio per la Salute Materno Infantile, che hanno entrambi sede a<br />
Milano.<br />
Oggi l’e<strong>di</strong>ficio ospita: il Laboratorio <strong>di</strong> Biologia Molecolare, il Laboratorio <strong>di</strong> Epidemiologia<br />
Generale, il Laboratorio <strong>di</strong> ricerca Translazionale e <strong>di</strong> Outcome in Oncologia, il Laboratorio <strong>di</strong><br />
Ricerca Clinica Oncologica, l’Ufficio stu<strong>di</strong> Oncologici e Documentazione, il Laboratorio <strong>di</strong><br />
Malattie Neurologiche, il Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia Cellulare e il Centro Cochrane Italiano.<br />
Per maggiori informazioni sulle attività del Centro si rimanda ai rapporti <strong>di</strong> attività dei singoli<br />
laboratori.<br />
195<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
196<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
G.A. PFEIFFER MEMORIAL LIBRARY<br />
PERSONALE<br />
Capo Bibliotecaria Vanna Pistotti<br />
197<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
La Biblioteca, specializzata nel campo della farmacologia ed epidemiologia clinica, è stata<br />
fondata nel 1963 grazie ad una donazione della Gustavus and Louise Pfeiffer Research<br />
Foundation con sede a Denville, New Jersey, USA.<br />
Enti pubblici e privati contribuiscono al suo funzionamento me<strong>di</strong>ante donazioni, offerte <strong>di</strong><br />
materiale e <strong>di</strong> abbonamenti a perio<strong>di</strong>ci.<br />
PERSONALE<br />
IRFMN<br />
Il personale della Biblioteca è composto da una responsabile, due assistenti e un incaricato al<br />
servizio fotocopie.<br />
LA COLLEZIONE<br />
La biblioteca possiede 5000 volumi tra libri <strong>di</strong> testo, monografie e atti <strong>di</strong> convegno e 250<br />
abbonamenti a perio<strong>di</strong>ci. I libri vengono classificati secondo la US National Library of<br />
Me<strong>di</strong>cine Classification, quinta e<strong>di</strong>zione e il Me<strong>di</strong>cal Subject Hea<strong>di</strong>ngs <strong>di</strong> Medline (MeSH).<br />
Oltre alla collezione interna la Biblioteca accede al Catalogo Nazionale dei Perio<strong>di</strong>ci , al<br />
Catalogo delle biblioteche appartenenti al Sistema Bibliotecario Biome<strong>di</strong>co Lombardo e a<br />
quello del GIDIF, RBM.<br />
BANCHE DATI E RIVISTE ELETTRONICHE<br />
Da ogni postazione interna all’<strong>Istituto</strong> è possibile accedere a più <strong>di</strong> 2000 riviste elettroniche e a<br />
cinque tra le banche dati più importanti al mondo: Medline, Cinhal, La Cochrane Library,<br />
Embase.<br />
PROGETTI<br />
La biblioteca partecipa alla realizzazione del Catalogo dei Perio<strong>di</strong>ci dell’Associazione Italiana<br />
dei Documentalisti GIDIF, RBM .<br />
Collabora attivamente al sito web dell’<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> cui in particolare cura la parte delle<br />
Pubblicazioni, sia scientifiche sia <strong>di</strong>vulgative.<br />
Ogni anno vengono svolti corsi al personale scientifico dell’<strong>Istituto</strong> sull’uso delle banche dati e<br />
delle riviste elettroniche.<br />
198<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Pistotti V, Tei L<br />
Le banche dati bibliografiche in me<strong>di</strong>cina<br />
Me<strong>di</strong>ci Oggi <strong>2004</strong>; 8: 26-27<br />
2 Pistotti V, Tei L<br />
E' efficace e sicuro garantisce Mr. Cochrane<br />
Me<strong>di</strong>ci Oggi <strong>2004</strong>; 8: 30-31<br />
PUBBLICAZIONI <strong>2004</strong><br />
3 Fossati R, Confalonieri C, Mosconi P, Pistotti V, Apolone G Quality of life in randomized<br />
trials of cytotoxic or hormonal treatment of advanced breast cancer. Is there added value?<br />
Breast Cancer Res Treat <strong>2004</strong>; 87: 233-243<br />
CONTRATTI PIU’ SIGNIFICATIVI<br />
IRFMN<br />
Dal 1994 aderisce al progetto SBBL Sistema Bibliotecario Biome<strong>di</strong>co Lombardo della Regione<br />
Lombar<strong>di</strong>a, cui partecipano se<strong>di</strong>ci biblioteche lombarde come Poli primari e che offre banche<br />
dati, riviste elettroniche e articoli a più <strong>di</strong> 140 strutture in Regione.<br />
199<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
200<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Laboratori Negri Bergamo<br />
RAPPORTI<br />
ATTIVITA’ <strong>2004</strong><br />
<strong>di</strong>partimenti e laboratori<br />
201<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
202<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
DIPARTIMENTO<br />
DI MEDICINA MOLECOLARE<br />
PERSONALE<br />
IRFMN<br />
Capo Dipartimento Ariela BENIGNI, Dr. Sci. Biol. Ph. D.<br />
Unità <strong>di</strong> Terapia Genica<br />
Capo Unità Susanna TOMASONI, Dr. Sci. Biol. Ph. D.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia Cellulare e Xenotrapianto<br />
Capo Laboratorio Marina MORIGI, Dr. Sci. Biol.<br />
Unità dell’Interazione Piastrine-Endotelio Vascolare<br />
Capo Unità Miriam GALBUSERA, Dr. Sci. Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia e Genetica del Trapianto e Malattie Rare<br />
Capo Laboratorio Marina NORIS, Dr. Chim. Farm.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Modelli Sperimentali <strong>di</strong> Malattie Renali<br />
Capo Laboratorio Carla ZOJA, Dr. Sci. Biol. Ph. D.<br />
Unità <strong>di</strong> Patologia e Immunopatologia<br />
Capo Unità Mauro ABBATE,.Dr. Med.<br />
203<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
Il Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Molecolare è stato istituito nel 1999 presso i laboratori del <strong>Mario</strong><br />
Negri <strong>di</strong> Bergamo con lo scopo <strong>di</strong> coor<strong>di</strong>nare il lavoro <strong>di</strong> tre laboratori e tre unità.<br />
L’attività del Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Molecolare è strettamente collegata a quella del<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Renale del Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> Cliniche per le Malattie Rare “Aldo e<br />
Cele Daccò”.<br />
Questi i principali obiettivi del Dipartimento:<br />
1) Identificazione <strong>di</strong> me<strong>di</strong>atori e <strong>di</strong> meccanismi d’azione responsabili della per<strong>di</strong>ta irreversibile<br />
<strong>di</strong> funzionalità renale nelle malattie renali; sviluppo <strong>di</strong> strategie terapeutiche volte a rallentare o<br />
bloccare la progressione della malattia renale verso l’insufficienza renale terminale.<br />
2) Analisi dei processi responsabili del danno della cellula endoteliale nelle microangiopatie<br />
trombotiche e nel rigetto iperacuto dei trapianti allogenici.<br />
3) Sviluppo <strong>di</strong> nuove strategie, tra cui la terapia genica, per modulare la risposta immunitaria<br />
post-trapianto e per prevenire il rigetto acuto e cronico del trapianto d’organo; stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> possibili<br />
vie immunologiche che portino alla tolleranza dell’organo trapiantato.<br />
4) Stu<strong>di</strong>o delle basi molecolari e genetiche <strong>di</strong> malattie rare come la sindrome emolitico uremica/<br />
porpora trombotica trombocitopenica e la preeclampsia; valutazione <strong>di</strong> alterazioni genetiche<br />
responsabili dello sviluppo <strong>di</strong> malattie rare e caratterizzazione <strong>di</strong> polimorfismi genetici che<br />
pre<strong>di</strong>cono la risposta dei pazienti alla terapie farmacologiche per malattie mono- e poligeniche.<br />
Questi obiettivi sono perseguiti grazie all’impiego <strong>di</strong> svariati approcci metodologici:<br />
1) modelli sperimentali <strong>di</strong> malattie renali, <strong>di</strong> tipo immunologico e non, rappresentativi <strong>di</strong><br />
malattie umane, per stu<strong>di</strong>are i me<strong>di</strong>atori vasoattivi e infiammatori e per testare nuovi farmaci<br />
che riducano la proteinuria e conferiscano renoprotezione.<br />
2) Valutazione “in vitro” dell’effetto tossico <strong>di</strong> un sovraccarico proteico su colture <strong>di</strong> cellule<br />
renali.<br />
3) Modelli “in vitro” per stu<strong>di</strong>are l’interazione delle cellule dell’endotelio vascolare con<br />
leucociti e piastrine in con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> flusso controllato.<br />
4) Modelli sperimentali <strong>di</strong> allotrapianto <strong>di</strong> rene per stu<strong>di</strong>are i processi immunologici<br />
responsabili del rigetto acuto e cronico, la tossicità renale <strong>di</strong> farmaci immunosoppressori e per<br />
identificare strategie <strong>di</strong> induzione della tolleranza.<br />
5) Trasferimento genico <strong>di</strong> costrutti virali contenenti geni per molecole immunomodulatorie<br />
come strategia per impe<strong>di</strong>re il rigetto acuto del trapianto e ridurre o evitare la terapia<br />
immunosoppressiva.<br />
6) Analisi <strong>di</strong> linkage, ricerca <strong>di</strong> mutazioni e stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> polimorfismi genetici per identificare i<br />
geni responsabili o pre<strong>di</strong>sponenti allo sviluppo <strong>di</strong> malattie genetiche rare.<br />
204<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
La tossina batterica Shigatoxin-2 contribuisce alla lesione endoteliale del microcircolo<br />
stimolando la produzione <strong>di</strong> una chemochina, la fractalkine, che induce l’adesione <strong>di</strong> cellule<br />
infiammatorie.<br />
Il Rituximab è efficace come profilassi per evitare le ricadute nella TTP che resiste ad altri<br />
trattamenti.<br />
IRFMN<br />
Ottenuta una prolungata sopravvivenza in topi affetti da nefrite lupica grazie a un inibitore <strong>di</strong><br />
una chinasi ciclina-<strong>di</strong>pendente che modula il danno indotto dai linfociti B e T.<br />
La progressione delle nefropatie proteinuriche croniche è rallentata da inibitori del<br />
complemento in combinazione con farmaci antiproteinurici.<br />
La delezione del recettore AT1A per l’angiotensina non previene la progressione della malattia<br />
renale in<strong>di</strong>cando che l’eccessivo traffico intrarenale <strong>di</strong> proteine ha effetti tossici non<br />
necessariamente <strong>di</strong>pendenti dall’angiotensina II.<br />
Una nuova classe <strong>di</strong> farmaci contraccettivi possiede effetti immunomodulatori che prolungano<br />
la sopravvivenza dell’allotrapianto renale nel ratto.<br />
L’attivazione dei leucociti polimorfonucleati indotta dal complemento unita al danno endoteliale<br />
svolgono ruoli cruciali nella trombosi microvascolare della TMA associata a deficienza <strong>di</strong><br />
ADAMTS13.<br />
La combinazione <strong>di</strong> AdTGF-beta3 e AdCTLA4Ig prolunga la sopravvivenza dell’allotrapianto<br />
renale nel ratto inducendo occasionalmente sopravvivenza indefinita.<br />
L’antagonista del recettore CXCR2 previene il danno da ischemia/riperfusione in ratti sottoposti<br />
a trapianto <strong>di</strong> rene.<br />
Cellule dendritiche rese immature dopo manipolazione genetica per bloccare l’NF-kB inducono<br />
la formazione <strong>di</strong> cellule T con potente attività regolatoria.<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
International Centre for Genetic Engineering and Biotechnology, Molecular Me<strong>di</strong>cine Group,<br />
Trieste<br />
<strong>Istituto</strong> Dermopatico dell'Immacolata, Roma<br />
U.O. <strong>di</strong> Ostetricia e Ginecologia, Ospedale San Gerardo <strong>di</strong> Monza<br />
U.O. <strong>di</strong> Ostetricia e Ginecologia, Azienda Ospedaliera -Ospedali Riuniti <strong>di</strong> Bergamo<br />
I.R.C.C.S. Ospedale Pe<strong>di</strong>atrico Bambino Gesù, Roma<br />
I.R.C.C.S. Policlinico San Matteo, Pavia<br />
Azienda Sanitaria Ospedaliera O.I.R.M. - S. Anna, Torino<br />
205<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
Academisch Ziekenhuis Maastricht, Interne Geneeskunde, Maastricht, The Netherlands<br />
Albert Einstein College of Me<strong>di</strong>cine, New York, USA<br />
Beth Israel Deaconess Me<strong>di</strong>cal Center and Harvard Me<strong>di</strong>cal School, Boston, USA<br />
Children's Hospital and Regional Me<strong>di</strong>cal Center, University of Washington, Seattle, USA<br />
Erasmus University of Rotterdam, The Netherlands<br />
Hans-Knoll Institute for Natural Products Research, Jena, Germany<br />
Inselspital, University of Bern, Switzerland<br />
INSERM, Paris, France<br />
Max Delbruck Center for Molecular Me<strong>di</strong>cine, Berlin, Germany<br />
Monash Me<strong>di</strong>cal Center, Melbourne, Australia<br />
National Institute of Health, Bethesda, USA<br />
Osaka University School of Me<strong>di</strong>cine, Osaka, Japan<br />
Pe<strong>di</strong>atric Nephrology and Hypertension, University of Utah, USA<br />
Rosalind Franklin University of Me<strong>di</strong>cine and Science, Chicago, USA<br />
The Scripps Research Institute, La Jolla, USA<br />
University of Colorado Car<strong>di</strong>ovascular Institute, Denver, USA<br />
University of Groningen, The Netherlands<br />
University of Pittsburgh School of Me<strong>di</strong>cine, Pittsburgh, USA<br />
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Kidney International (Ariela Benigni)<br />
Journal of American Society of Nephrology (Carla Zoja)<br />
American Journal of Nephrology<br />
American Journal of Pathology<br />
Blood<br />
Diabetologia<br />
Endocrinology<br />
Gene Therapy<br />
Kidney International<br />
Journal of American Society of Nephrology<br />
Journal of Clinical Investigation<br />
Nephrology, Dialysis and Transplantation<br />
New England Journal of Me<strong>di</strong>cine<br />
Physic Genomics<br />
The Lancet<br />
Thrombosis and Haemostasis<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
IRFMN<br />
206<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
DIPARTIMENTO<br />
5th Japanese-European Nephrology Forum, "Stem cells of the kidney". 5-7 Marzo <strong>2004</strong>,<br />
Hakone, Giappone.<br />
IRFMN<br />
Top Seminars in Nephrology, "La proteinuria come fattore patogenetico e prognostico <strong>di</strong> danno<br />
renale". 7 Maggio <strong>2004</strong>, Reggello (Firenze).<br />
45° Congresso Nazionale della Società Italiana <strong>di</strong> Nefrologia, "Alterazioni strutturali e<br />
funzionali indotte nei podociti dalle proteine plasmatiche". 27-30 Giugno <strong>2004</strong>, Torino.<br />
XX International Congress of the Transplantation Society, “Dendritic cells genetically<br />
engineered to block NF-kB pathway induce the formation of potent type-1-like T regulatory<br />
cells”. 5-10 Settembre <strong>2004</strong>, Vienna, Austria.<br />
XX International Congress of the Transplantation Society, “Donor PBMC induced tolerance is<br />
associated with the emergence of anergic T cells the thymus followed by generation of<br />
regulatory T cells in the graft”. 5-10 Settembre <strong>2004</strong>, Vienna, Austria.<br />
XX International Congress of the Transplantation Society, “Inhibition of Interleukin 8 activity<br />
prevents renal function deterioration due to ischemia/reperfusion in syngeneic and allogeneic rat<br />
kidney transplantation”. 5-10 Settembre <strong>2004</strong>, Vienna, Austria.<br />
XX International Congress of the Transplantation Society, “Effect of a novel<br />
immunosuppressant, ST 1959, on allogeneic immune response and renal allograft survival in<br />
rats”. 5-10 Settembre <strong>2004</strong>, Vienna, Austria.<br />
Mini-Symposium: Future strategies in renoprotection, "Stem cells: clue to renoprotection?". 15<br />
Settembre <strong>2004</strong>, Groningen, Olanda.<br />
VII Congresso Società Italiana Genetica me<strong>di</strong>ca (SIGU). “Outcome of kidney transplantation in<br />
<strong>di</strong>arrhoea negative<br />
Hemolytic uremic syndrome (D-HUS)”. 13-15 Ottobre <strong>2004</strong>, Pisa.<br />
VII Congresso Società Italiana Genetica me<strong>di</strong>ca (SIGU). “Mutations in membrane cofactor<br />
protein in atypical<br />
Hemolytic Uremic Sindrome”. 13-15 Ottobre <strong>2004</strong>, Pisa.<br />
VII Congresso Società Italiana Genetica me<strong>di</strong>ca (SIGU). “Mutations in ADAMTS13 gene in<br />
thrombotic<br />
thrombocytopenic purpura (TTP)”. 13-15 Ottobre <strong>2004</strong>, Pisa<br />
The American Society of Nephrology 37th Annual Meeting, "R-Roscovitine (CYC202), a<br />
cyclin dependent kinase (CDK) inhibitor, reduces autoimmune renal injury and prolongs life in<br />
murine lupus nephritis". 27 Ottobre - 1 Novembre <strong>2004</strong>, St. Louis, USA.<br />
Cyclacel Meeting, "R-Roscovitine (CYC202), a cyclin dependent kinase (CDK) inhibitor,<br />
reduces autoimmune renal injury and prolongs life in murine lupus nephritis". 31 Ottobre <strong>2004</strong>,<br />
St. Louis, Missouri, USA.<br />
207<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Genzyme Renal Innovations Program Meeting, "Gene delivery by second generation<br />
adenovirus". 1-2 Novembre <strong>2004</strong>, St. Louis, USA.<br />
IRFMN<br />
Genzyme Renal Innovations Program Meeting, "Role of complement in tubulo interstitial injury<br />
of proteinuric nephropathy". 1-2 Novembre <strong>2004</strong>, St. Louis, Missouri, USA.<br />
Genzyme Renal Innovation Program Meeting. “Donor engineered dendritic cells to generate<br />
tolerogenic regulatory T cells for renal transplantation. 1-2 Novembre <strong>2004</strong>, St.Louis, USA .<br />
Corso <strong>di</strong> formazione avanzata "Cellule staminali da adulto nella me<strong>di</strong>cina rigenerativa" -<br />
"Utilizzo <strong>di</strong> cellule staminali mesenchimali come terapia dell'insufficienza renale acuta". 8-12<br />
Novembre <strong>2004</strong>, Pavia.<br />
Vicenza International Course on Kidney Transplantation: Prevention of graft rejection, "The<br />
goal of intragraft gene therapy". 11-12 Novembre <strong>2004</strong>, Vicenza.<br />
Vicenza International Course on Kidney Transplantation. Prevention of graft rejection. “Natural<br />
versus adaptive regulatory T cells”. 11-12 Novembre <strong>2004</strong>, Vicenza.<br />
American Society of Hematology 46th annual Meeting "Diverse functional implications of<br />
ADAMTS13 gene mutations in patients with TTP and congenital deficiency". 4-7 Dicembre<br />
<strong>2004</strong>, San Diego, USA.<br />
American Society of Hematology 46th annual Meeting "Regulation of high shear stress rate<br />
induced von Willebrand Factor me<strong>di</strong>ated platelet thrombi by ADAMTS13". 4-7 Dicembre <strong>2004</strong>,<br />
San Diego, USA.<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
Associazione Ricerca Trapianti<br />
Comitato Telethon Fondazione ONLUS<br />
Fondazione Aiuti per la Ricerca sulle Malattie Rare<br />
Fondazione Cariplo<br />
Fondazione Italo Monzino<br />
Foundation for Children with Atypical HUS<br />
Roche Organ Transplantation Research Foundation<br />
The Nando Peretti Foundation<br />
Amgen Inc<br />
AstraZeneca Ltd<br />
Cyclacel Ltd<br />
Dompè SpA<br />
Genzyme Corporation<br />
Novartis Farma SpA<br />
SPA - Società Prodotti Antibiotici SpA<br />
Takeda Italia Farmaceutici SpA<br />
208<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
M. Noris, M. Todeschini, P. Cassis, F. Pasta, A. Cappellini, S. Bonazzola, D. Macconi, R. Maucci, F. Porrati, A.<br />
Benigni, C. Picciolo, G. Remuzzi. L-Arginine Depletion in Preeclampsia Orients Nitric Oxide Synthase Toward<br />
Oxidant Species. Hypertension <strong>2004</strong>;43:614-622.<br />
IRFMN<br />
C.H. Beerenhaut, M. Noris, J.P. Koomen, F. Porrati, E. Binda, M. Morigi, O. Bekers, F.M. van der Sande, M.<br />
Todeschini, D. Maconi, K.M.L. Leunissen, G. Remuzzi. Nitritic Oxide Synthetic Capacity in Relation to Dialysate<br />
Temperature. Blood Purif <strong>2004</strong>;22:203-209.<br />
S. Tomasoni, L. Longaretti, N. Azzolini, E. Gagliar<strong>di</strong>ni, M. Mister, T. Buehler, G. Remuzzi, A. Benigni. Favourable<br />
Effect of Contransfection with TGF-ß and CTLA4lg of the Donor Kidney on Allograft Survival. Am J Nephrol<br />
<strong>2004</strong>;24:275-283.<br />
A. Benigni, E. Gagliar<strong>di</strong>ni, S. Tomasoni, M. Abbate, P. Ruggenenti, R. Kalluri, G. Remuzzi. Selective impairment of<br />
gene expression and assembly of nephrin in human <strong>di</strong>abetic nephropathy. Kidney International <strong>2004</strong>; 65: 2193-2200.<br />
M. Morigi, B. Imberti, C. Zoja, D. Corna, S. Tomasoni, M. Abbate, D. Rottoli, S. Angioletti, A. Benigni, N. Perico,<br />
M. Alison, G. Remuzzi. Mesenchymal Stem Cells Are Renotropic, Helping to Repair the Kidney and Improuve<br />
Function in Acute Renal Failure. J Am Soc Nephrol <strong>2004</strong>;15:1794-1804.<br />
A. Benigni, D. Corna, C. Zoja, L. Longaretti, E. Gagliar<strong>di</strong>ni, N. Perico, T.M. Coffman, G. Remuzzi. Targeted<br />
deletion of angiotensin II type 1A receptor does not protect mice from progressive nephropathy of overload<br />
proteinuria. J Am Soc Nephrol <strong>2004</strong>;15:2666-2674.<br />
C. Zoja, A. Benigni, G. Remuzzi. Cellular responses to protein overload: key event in renal <strong>di</strong>sease progression.<br />
Current Opinion in Nephrology and Hypertension <strong>2004</strong>;13:31-37.<br />
C. Zoja, M. Morigi, A. Benigni, G. Remuzzi. Genetics of rare <strong>di</strong>seases of the kidney: learning from mouse models.<br />
Cytogenet Genome Research <strong>2004</strong>;105:479-484.<br />
A. Benigni, N. Perico, G. Remuzzi. The potential of endothelin antagonism as a therapeutic approach. Expert Opin<br />
Investig Drugs <strong>2004</strong>;13:1419-1435.<br />
A. Benigni, E. Gagliar<strong>di</strong>ni, G. Remuzzi. Changes in Glomerular Perm-Selectivity Induced by Angiotensin II Imply<br />
Podocyte Dysfunction and Slit Diaphragm Protein Rearrangement. Seminars in Nephrology <strong>2004</strong>; 24:131-140.<br />
209<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biologia Cellulare e Xenotrapianto<br />
IRFMN<br />
In risposta alle proteine plasmatiche i podociti inducono una<br />
riorganizzazione del citoscheletro e modulano l’espressione<br />
dell’endotelina: implicazioni nella <strong>di</strong>sfunzione della permeselettività<br />
glomerulare nelle nefropatie croniche.<br />
“In collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Modelli Sperimentali <strong>di</strong> Malattie Renali e con l’Unità<br />
<strong>di</strong> Terapia Genica”<br />
La fusione dei pe<strong>di</strong>celli dei podociti, è un’alterazione caratteristica <strong>di</strong> molte nefropatie associate<br />
a proteinuria e si accompagna al riarrangiamento della F-actina, proteina che costituisce il<br />
citoscheletro dei podociti. Abbiamo continuato stu<strong>di</strong> avviati in precedenza per valutare in vitro<br />
in una linea murina <strong>di</strong> podociti se l’esposizione a proteine plasmatiche potesse attivare<br />
meccanismi intracellulari controllati dal citoscheletro in grado <strong>di</strong> portare alla<br />
attivazione/<strong>di</strong>sfunzione dei podociti.<br />
Inizialmente abbiamo <strong>di</strong>mostrato che albumina (Alb) e immunoglobuline G (IgG) erano in<br />
grado <strong>di</strong> legarsi alla superficie dei podociti murini e <strong>di</strong> essere internalizzate per endocitosi<br />
me<strong>di</strong>ante un meccanismo recettoriale specifico. L’esposizione dei podociti alle proteine<br />
plasmatiche determinava una precoce e persistente ri<strong>di</strong>stribuzione della F-actina alla periferia<br />
delle cellule, fenomeno accompagnato a un incremento nel tempo dell’espressione genica e<br />
produzione del peptide vasoattivo preproendotelina (ET)-1. Un rapido aumento dell’attività <strong>di</strong><br />
AP-1 e NF-kB, fattori trascrizionali noti regolare ET-1, è stata inoltre misurata in estratti<br />
nucleari <strong>di</strong> podociti esposti alle proteine plasmatiche. Gli inibitori del citoscheletro Y27632 -<br />
inibitore della famiglia delle Rho chinasi, cruciali per la formazione <strong>di</strong> stress fiber <strong>di</strong> F-actina- e<br />
Jasplakinolide -stabilizzatore dell’actina - erano in grado <strong>di</strong> inibire l’attivazione <strong>di</strong> entrambi i<br />
fattori trascrizionali e <strong>di</strong>minuire l’espressione e la produzione <strong>di</strong> ET-1 indotta da albumina,<br />
suggerendo che il citoscheletro regola la sintesi <strong>di</strong> questo peptide me<strong>di</strong>ante il coinvolgimento e<br />
l’attivazione delle Rho chinasi.<br />
Le focal adhesion kinase (FAK), tirosin-chinasi non recettoriali associate alle integrine <strong>di</strong><br />
membrana e all’actina, erano fosforilate dall’albumina attraverso l’attivazione delle Rho chinasi<br />
e del citoscheletro. Le FAK così attivate determinavano un aumento dell’espressione genica <strong>di</strong><br />
ET-1 attraverso l’attivazione <strong>di</strong> AP-1 e NF-kB. Questi dati suggeriscono che le proteine<br />
plasmatiche mo<strong>di</strong>ficano l’architettura del citoscheletro nei podociti e che tale fenomeno è<br />
implicato nella modulazione del gene per ET-1 attraverso l’attivazione dei fattori trascrizionali<br />
AP-1 e NF-kB e il coinvolgimento delle proteine chinasi Rho e FAK. L’aumentata produzione<br />
<strong>di</strong> ET-1 potrebbe alterare la permeabilità glomerulare alle proteine plasmatiche, amplificandone<br />
l’effetto tossico sui podociti.<br />
La Shigatoxin-2 regola l’espressione della chemochina fractalkine in<br />
cellule endoteliali umane.<br />
“In collaborazione con il laboratorio <strong>di</strong> Modelli Sperimentali <strong>di</strong> Malattie Renali e con l’Unità <strong>di</strong><br />
Terapia Genica”<br />
La tossina batterica Shigatoxin-2 (Stx-2), prodotta da un particolare ceppo <strong>di</strong> Escherichia coli, è<br />
il principale agente infettivo nella forma epidemica della Sindrome Emolitico Uremica (SEU),<br />
la più comune causa d’insufficienza renale acuta nei bambini. Il danno endoteliale e<br />
l’attivazione dei leucociti sono determinanti nello sviluppo delle lesioni microangiopatiche. Per<br />
chiarire i meccanismi attraverso i quali la tossina favorisce le interazioni tra l’endotelio e i<br />
210<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
leucociti, abbiamo valutato in cellule endoteliali umane in coltura l’effetto <strong>di</strong> Stx-2<br />
sull’espressione <strong>di</strong> fractalkine (FKN),una chemochina che oltre ad esercitare attività<br />
chemotattica ha la proprietà <strong>di</strong> indurre adesione stabile dei monociti, linfociti T e cellule natural<br />
killer. Il ruolo funzionale <strong>di</strong> questa chemochina è stato stu<strong>di</strong>ato nei fenomeni <strong>di</strong> adesione in<br />
con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> flusso. Inoltre abbiamo cercato <strong>di</strong> identificare i possibili segnali intracellulari<br />
attivati da Stx-2, coinvolti nell’espressione genica della chemochina. I risultati mostrano che in<br />
cellule endoteliali umane la Stx-2 induceva un aumento significativo dei livelli <strong>di</strong> RNA<br />
messaggero per FKN dopo 3 o 6 ore <strong>di</strong> stimolazione rispetto a cellule <strong>di</strong> controllo. Tale aumento<br />
era associato ad un incremento dei livelli della proteina associata alla superficie cellulare. La<br />
tossina inoltre aumentava significativamente il numero <strong>di</strong> leucociti che aderivano e che<br />
successivamente migravano attraverso l'endotelio. Il blocco funzionale della FKN presente<br />
sull’endotelio portava ad una <strong>di</strong>minuzione significativa dell’adesione e della migrazione dei<br />
leucociti all’endotelio indotte da Stx-2, suggerendo che la FKN è coinvolta nell’adesione dei<br />
leucociti in una fase più precoce rispetto ad altre proteine chemotattiche quali IL-8 e MCP-1,<br />
indotte da Stx-2 e precedentemente stu<strong>di</strong>ate dal nostro gruppo. L’espressione <strong>di</strong> FKN era<br />
regolata dall’attivazione dei fattori trascrizionali NF-kB e Ap-1. Infatti l’incubazione delle<br />
cellule endoteliali con una forma ciclica permeabile <strong>di</strong> SN50, inibitore della traslocazione<br />
nucleare <strong>di</strong> NF-kB, oppure con oligonucleoti<strong>di</strong> specifici per Ap-1, determinava una riduzione<br />
sia dell’espressione genica <strong>di</strong> FKN che dell’adesione dei leucociti. Inibitori delle MAP chinasi<br />
p38 e p42/44 e della famiglia delle Src, che regolano l’attività trascrizionale <strong>di</strong> NF-kB, erano in<br />
grado <strong>di</strong> ridurre in cellule esposte a Stx-2, la trascrizione del gene della luciferase sotto il<br />
controllo del promotore contenente siti <strong>di</strong> legame per NF-kB e inoltre <strong>di</strong>minuiva in modo<br />
significativo anche l’adesione dei leucociti.<br />
I nostri risultati in<strong>di</strong>cano che la Stx-2, attraverso un meccanismo <strong>di</strong> attivazione trascrizionale<br />
me<strong>di</strong>ato da NF-kB e Ap-1, promuove un aumento dei livelli <strong>di</strong> fractalkine, un importante<br />
modulatore dell’adesione e della trasmigrazione dei leucociti in con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> flusso. Questo<br />
stu<strong>di</strong>o aiuta a comprendere meglio la natura delle lesioni microvascolari nella SEU e apre nuove<br />
prospettive per il trattamento delle lesioni microvascolari.<br />
Porpora trombotica trombocitopenica ricorrente: uso preventivo del<br />
rituximab.<br />
“In collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia e Genetica delle Malattie Rare e Trapianti<br />
e con il Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> Cliniche per le Malattie Rare”<br />
La porpora trombotica trombocitopenica (PTT) è una malattia rara dei piccoli vasi associata a<br />
un deficit della proteasi ADAMTS13 che taglia il fattore <strong>di</strong> von Willebrand (VWF). La presenza<br />
<strong>di</strong> autoanticorpi <strong>di</strong>retti contro ADAMTS13 è considerata un fattore pre<strong>di</strong>sponente alle reci<strong>di</strong>ve.<br />
In questi pazienti, nonostante uno stretto monitoraggio e un trattamento intensivo con plasma,<br />
gli episo<strong>di</strong> acuti sono ancora associati ad una sostanziale morbilità e mortalità e il trattamento<br />
terapeutico ottimale dovrebbe essere la prevenzione delle reci<strong>di</strong>ve.<br />
Il rituximab è un anticorpo monoclonale umanizzato <strong>di</strong>retto contro l’antigene CD20 dei B<br />
linfociti e viene largamente usato per il trattamento delle malattie linfoproliferative da linfociti<br />
B. Recentemente in alcuni pazienti con PTT cronica refrattaria ad altre terapie si è ottenuta una<br />
remissione della malattia dopo il trattamento con rituximab, fornendo quin<strong>di</strong> il razionale per<br />
l’uso <strong>di</strong> questo farmaco nelle PTT associate ad anticorpi anti-ADAMTS13. Questi pazienti<br />
hanno però ricevuto altri trattamenti oltre il rituximab ed è perciò <strong>di</strong>fficile <strong>di</strong>scriminare l’effetto<br />
specifico dei vari farmaci sull’attività <strong>di</strong> ADAMTS13 e sui suoi inibitori. Inoltre non ci sono<br />
dati sul possible effetto del rituximab dato in remissione per prevenire le reci<strong>di</strong>ve.<br />
Abbiamo comparato il trattamento standard con plasmaferesi a quello con rituximab in un<br />
paziente con PTT ricorrente dovuta ad un alto titolo <strong>di</strong> inibitori anti-ADAMTS13 che aveva<br />
circa due reci<strong>di</strong>ve l’anno. Abbiamo visto che la plasmaferesi aveva solo un modesto effetto<br />
transitorio sugli inibitori <strong>di</strong> ADAMTS13 e non mo<strong>di</strong>ficava le anomalie nella struttura<br />
211<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
multimerica del VWF suggerendo che il plasma non è il trattamento ideale per prevenire le<br />
reci<strong>di</strong>ve in questi pazienti. Al contrario, il trattamento con rituximab portava ad una progressiva<br />
scomparsa degli inibitori e ad un incremento dell’attività proteasica associato alla<br />
normalizzazione dei multimeri del VWF. Dopo 16 mesi si sono riscontrate una <strong>di</strong>minuzione<br />
dell’attività <strong>di</strong> ADAMTS13 e la ricomparsa <strong>di</strong> inibitori. Un secondo trattamento con rituximab,<br />
dato come unica terapia, ha indotto un pronto recupero dell’attività <strong>di</strong> ADAMTS13 e una<br />
scomparsa degli inibitori permettendo al paziente <strong>di</strong> rimanere in uno stato <strong>di</strong> remissione da più<br />
<strong>di</strong> due anni.<br />
La profilassi con rituximab può essere efficace nel mantenere uno stato <strong>di</strong> remissione in pazienti<br />
con una <strong>di</strong>agnosi <strong>di</strong> PTT ricorrente e anticorpi anti-ADAMTS13 nei quali altri trattamenti non<br />
sono riusciti a mantenere una remissione a lungo termine.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Modelli Sperimentali <strong>di</strong> Malattie Renali<br />
Un inibitore delle cicline riduce il danno renale autoimmune e prolunga la<br />
sopravvivenza in un modello murino <strong>di</strong> nefrite lupica.<br />
I topi ibri<strong>di</strong> NZB/W sviluppano spontaneamente una severa malattia autoimmune simile al<br />
lupus eritematoso sistemico dell’uomo (LES). La malattia è caratterizzata dalla formazione<br />
precoce <strong>di</strong> autoanticorpi e dallo sviluppo <strong>di</strong> una glomerulonefrite da immunocomplessi, con<br />
proteinuria e progressione verso l’insufficienza renale, causa della morte prematura <strong>di</strong> questi<br />
animali. La malattia è strettamente legata a una <strong>di</strong>sfunzione dei linfociti T e B con la<br />
conseguente produzione <strong>di</strong> autoanticorpi <strong>di</strong>retti verso antigeni nucleari ed endogeni, tra i quali<br />
sembrano essere prominenti i nucleosomi, DNA complessato agli istoni. A livello glomerulare<br />
gli immunocomplessi promuovono una reazione infiammatoria amplificata da citochine e fattori<br />
chemotattici generati in quantità eccessiva da cellule renali residenti e cellule infiltranti. La<br />
terapia più comunemente impiegata nel trattamento della nefrite lupica si basa principalmente su<br />
immunosoppressori per ridurre la formazione <strong>di</strong> immunocomplessi, in associazione con<br />
antiinfiammatori come gli steroi<strong>di</strong>. Nonostante la loro indubbia efficacia, entrambe le categorie<br />
<strong>di</strong> farmaci provocano nel tempo gravi effetti collaterali.<br />
Una serie <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> ha evidenziato come le proteine regolatrici del ciclo cellulare, positive (cicline<br />
e chinasi – cicline <strong>di</strong>pendenti, CDK) e negative (inibitori delle CDK) abbiano un ruolo<br />
importante nel regolare la risposta cellulare a forme <strong>di</strong> danno <strong>di</strong> natura immune e non-immune,<br />
incluse la proliferazione cellulare e l’apoptosi.<br />
Dato il ruolo delle cellule T nella nefrite lupica e considerando che inibitori del complesso<br />
ciclina/CDK controllano la proliferazione delle cellule T e la tolleranza agli antigeni nucleari,<br />
abbiamo stu<strong>di</strong>ato gli effetti <strong>di</strong> R-roscovitina (CYC202, seliciclib) - un inibitore <strong>di</strong> CDK2,<br />
CDK7, CDK9 – sulla progressione della malattia in topi lupus. CYC202 (100 o 200 mg/kg) o<br />
veicolo sono stati somministrati a topi NZB/W per via orale come terapia preventiva da 2 a 8<br />
mesi <strong>di</strong> età. Abbiamo osservato che CYC202 ritardava la comparsa della proteinuria in maniera<br />
dose-<strong>di</strong>pendente e limitava la per<strong>di</strong>ta della funzione renale. Il farmaco riduceva l’ipercellularità<br />
glomerulare, gli immunodepositi e il danno interstiziale, con un effetto più marcato con la dose<br />
più alta. Anche i depositi glomerulari <strong>di</strong> IgG e C3 erano ridotti significativamente.<br />
Un’osservazione interessante era la riduzione dei livelli <strong>di</strong> anticorpi anti-DNA, probabilmente<br />
dovuta agli effetti inibitori <strong>di</strong> CYC202 sulle cellule T e <strong>di</strong> conseguenza, sulle cellule B. La<br />
sopravvivenza dei topi lupus era prolungata da entrambe le dosi <strong>di</strong> CYC202.<br />
In una serie successiva <strong>di</strong> esperimenti, CYC202 (200mg/kg) è stato somministrato in<br />
combinazione con una bassa dose <strong>di</strong> metilprednisolone a topi affetti da nefrite lupica in una fase<br />
avanzata della malattia (stu<strong>di</strong>o terapeutico). Il trattamento, infatti, iniziava a 5 mesi <strong>di</strong> età dopo<br />
la comparsa dei depositi <strong>di</strong> immunocomplessi. I risultati hanno mostrato che la terapia<br />
combinata migliorava la sopravvivenza e ritardava la comparsa della proteinuria in misura<br />
maggiore rispetto ai singoli farmaci. Danno glomerulare e tubulointerstiziale ed infiammazione<br />
212<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
interstiziale erano anche limitati in maniera significativa dall’associazione dei farmaci. Questi<br />
risultati potrebbero rappresentare la base per un nuovo approccio terapeutico per la nefrite<br />
lupica. Stiamo attualmente stu<strong>di</strong>ando i meccanismi attraverso cui CYC202 modula nel lupus il<br />
danno me<strong>di</strong>ato da cellule T e B.<br />
Ruolo del complemento nell’indurre danno tubulointerstiziale in corso <strong>di</strong><br />
malattie renali proteinuriche croniche<br />
Nel corso <strong>di</strong> nefropatie progressive le proteine plasmatiche filtrate in eccesso a livello<br />
glomerulare inducono una risposta infiammatoria tubulointerstiziale e contribuiscono a<br />
innescare il processo <strong>di</strong> fibrosi renale. Tra le proteine ultrafiltrate i fattori del complemento<br />
attivati localmente nel fluido tubulare e dalle cellule tubulari possono indurre effetti<br />
chemiotattici, proinfiammatori e citotossici. Recenti stu<strong>di</strong> hanno suggerito che la sintesi locale<br />
<strong>di</strong> fattore C3 del complemento da parte delle cellule epiteliali tubulari possa avere un ruolo nel<br />
promuovere danno renale. Per chiarire il ruolo funzionale <strong>di</strong> C3 nell’indurre danno<br />
tubulointerstiziale in con<strong>di</strong>zioni proteinuriche, abbiamo valutato gli effetti del sovraccarico<br />
proteico in topi C57BL6.129- C3 tm1Crr incapaci <strong>di</strong> sintetizzare C3. I topi hanno ricevuto<br />
iniezioni intraperitoneali ripetute <strong>di</strong> albumina serica bovina (BSA) per 4 settimane a partire dal<br />
5° giorno successivo a nefrectomia monolaterale. Per confronto abbiamo stu<strong>di</strong>ato topi<br />
C57BL6.129 ‘wild type’con C3 normale (WT). Topi WT sottoposti a sovraccarico <strong>di</strong> BSA<br />
hanno sviluppato proteinuria e lesioni renali che consistono in accumuli ialini e depositi <strong>di</strong><br />
proteine nelle cellule epiteliali del tubulo prossimale e aree segmentali <strong>di</strong> glomerulosclerosi. La<br />
<strong>di</strong>stribuzione <strong>di</strong> C3 che è periferica nel tubulo in topi normali in assenza <strong>di</strong> IgG e albumina,<br />
presenta accumulo in granuli intracellulari nel citoplasma delle cellule prossimali tubulari e in<br />
depositi focali sull’orletto a spazzola in topi C3 -/-. Anche per IgG e albumina endogena si è<br />
osservata una localizzazione granulare intracitoplasmatica nelle cellule tubulari prossimali in<br />
seguito a sovraccarico <strong>di</strong> BSA. Alle lesioni tubulari si associavano l’accumulo <strong>di</strong><br />
monociti/macrofagi F4/80-positivi nell’interstizio peritubulare e periglomerulare. Rispetto agli<br />
animali WT, i topi C3 -/- hanno mostrato livelli modesti <strong>di</strong> proteinuria e meno severe lesioni<br />
tubulointerstiziali e glomerulari dopo il sovraccarico <strong>di</strong> BSA. Il grado <strong>di</strong> accumulo <strong>di</strong> IgG nelle<br />
cellule tubulari ha mostrato una tendenza a <strong>di</strong>minuire e il numero <strong>di</strong> monociti/macrofagi<br />
interstiziali F4/80 positivi è stato significativamente inferiore nei topi C3 -/- rispetto ai topi WT<br />
con sovraccarico proteico. Questi effetti protettivi suggeriscono un ruolo patogenetico del<br />
fattore C3 del complemento nell’indurre non solo il danno tubulointerstiziale, ma anche<br />
proteinuria e danno glomerulare progressivo. Analisi condotte me<strong>di</strong>ante tecnica <strong>di</strong> RT-PCR ci<br />
hanno permesso <strong>di</strong> documentare che il sovraccarico <strong>di</strong> BSA causa un aumento nell’espressione<br />
<strong>di</strong> mRNA per il C3 in reni WT, risposta che in con<strong>di</strong>zioni proteinuriche contribuisce<br />
probabilmente al processo <strong>di</strong> reclutamento e attivazione dei monociti nell’interstizio. Questi dati<br />
suggeriscono che molecole che inibiscono il complemento, se somministrate in associazione<br />
con farmaci antiproteinurici, possano rappresentare una strategia efficace per rallentare la<br />
velocità <strong>di</strong> progressione <strong>di</strong> nefropatie proteinuriche croniche.<br />
La mancanza del recettore <strong>di</strong> tipo 1A per l'angiotensina non protegge<br />
dallo sviluppo <strong>di</strong> nefropatia da carico proteico<br />
Le malattie renali croniche rappresentano oggi un grande problema <strong>di</strong> salute pubblica, sia per<br />
l'aumentare del numero <strong>di</strong> pazienti che sviluppano un danno renale grave sia per il conseguente<br />
aumentare dei costi per la sanità che potrebbero <strong>di</strong>fficilmente essere affrontabili anche dai Paesi<br />
industrializzati. La ricerca delle cause della nefropatia è stata oggetto <strong>di</strong> molti stu<strong>di</strong> sperimentali<br />
e clinici, parte dei quali concordano nell’in<strong>di</strong>care la proteinuria come il maggiore determinante.<br />
In <strong>di</strong>versi modelli sperimentali, l’escrezione urinaria <strong>di</strong> proteine correla con l'entità del danno<br />
renale e la riduzione della proteinuria con farmaci che inibiscono la sintesi o l’attività biologica<br />
dell’angiotensina II, si accompagna ad una riduzione della glomerulosclerosi e del danno tubulo<br />
213<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
interstiziale. Evidenze sperimentali in<strong>di</strong>cano che l'angiotensina II, che è il maggiore attore del<br />
sistema renina-angiotensina, oltre ad alterare la perm-selettività della membrana glomerulare,<br />
stimola la sintesi <strong>di</strong> proteine della matrice extracellulare, <strong>di</strong> citochine infiammatorie e fattori <strong>di</strong><br />
crescita dalle cellule tubulari renali contribuendo al danno glomerulare e tubulo interstiziale. E’<br />
<strong>di</strong>fficile quin<strong>di</strong> <strong>di</strong>scriminare se l’effetto renoprotettivo dei farmaci che bloccano l’angiotensina<br />
II sia attribuibile alla peculiare proprietà <strong>di</strong> ridurre la proteinuria o sia dovuto alla riduzione<br />
degli effetti proinfiammatori e profibrotici dell'angiotensina II.<br />
Per valutare il contributo relativo dell'angiotensina II e della proteinuria nella progressione della<br />
malattia renale, abbiamo stu<strong>di</strong>ato l'effetto del sovraccarico proteico in topi geneticamente<br />
mo<strong>di</strong>ficati, privati dell'isoforma A del recettore per l'angiotensina II, AT1A. Nei topi AT1A+/+<br />
e AT1A-/- sottoposti a nefrectomia monolaterale, è stata iniettata quoti<strong>di</strong>anamente albumina<br />
serica bovina (BSA) o salina per 4 settimane o 11 settimane. Il carico proteico induceva<br />
proteinuria e danno renale sia in animali AT1A+/+ che AT1A-/-. La pressione sanguigna<br />
influenzava solo parzialmente il fenotipo renale. Infatti, riducendo la pressione nei topi<br />
AT1A+/+ a valori paragonabili a quelli dei topi AT1A-/- con un bloccante dei canali del calcio,<br />
la laci<strong>di</strong>pina, si osservava ancora proteinuria e danno tubulo interstiziale dopo BSA con valori<br />
paragonabili ai topi AT1A-/-. Questi risultati suggeriscono che l’eccessivo traffico <strong>di</strong> proteine<br />
sia responsabile del danno renale che non è necessariamente <strong>di</strong>pendente dall'angiotensina II<br />
poiché la delezione <strong>di</strong> AT1A non previene la progressione della malattia.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia e Genetica del Trapianto e Malattie<br />
Rare<br />
Associazione tra la Sindrome Emolitico Uremica e le mutazioni del gene<br />
del fattore H: i polimorfismi C-257T, A2089G e G2881T sono fortemente<br />
associati alla malattia<br />
La Sindrome Emolitico Uremica, nella forma non causata da infezioni da ceppi <strong>di</strong> E.coli che<br />
producono Shiga like toxin (non-Stx-HUS), è associata in alcuni pazienti a mutazioni nel<br />
Fattore H (HF1), un gene co<strong>di</strong>ficante per una proteina coinvolta nella via alternativa del sistema<br />
del complemento. In questo stu<strong>di</strong>o il gene HF1 é stato analizzato in 101 pazienti con non-Stx-<br />
HUS, in 32 pazienti con Porpora Trombotica Trombocitopenica (TTP) e in 106 controlli sani<br />
per valutare la frequenza delle mutazioni nel gene HF1, per stabilire se vi siano <strong>di</strong>fferenze tra le<br />
caratteristiche cliniche dei portatori <strong>di</strong> una mutazione rispetto ai non portatori e per stabilire se i<br />
polimorfismi del Fattore H abbiano un ruolo nella pre<strong>di</strong>sposizione alla malattia.<br />
Abbiamo trovato 17 <strong>di</strong>verse mutazioni (16 eterozigoti, 1 omozigote) nel gene HF1 in 33<br />
pazienti con non-Stx-HUS. 13 mutazioni sono localizzate negli esoni XXII e XXIII. Nessun<br />
paziente con TTP è stato trovato portatore <strong>di</strong> mutazione.<br />
Abbiamo visto che nei pazienti portatori <strong>di</strong> mutazione rispetto ai non mutati la malattia insorge<br />
precocemente e il grado <strong>di</strong> mortalità è più alto. Il trapianto <strong>di</strong> rene fallisce inevitabilmente per la<br />
ricorrenza della malattia nei pazienti mutati, mentre nei pazienti non mutati circa la metà degli<br />
organi trapiantati è funzionante a un anno dal trapianto.<br />
Tre varianti polimorfiche del gene HF1 rispettivamente in posizione -257T nella regione del<br />
promotore, 2089G nell’esone XIV (silente) e 2881T nell’SCR16 (936Asp), sono fortemente<br />
associate con non-Stx-HUS; l’associazione è più forte nei pazienti senza mutazioni nel gene<br />
HF1 rispetto ai pazienti con mutazione. Pazienti portatori <strong>di</strong> due o tre varianti hanno un rischio<br />
più alto <strong>di</strong> sviluppare la malattia rispetto ai portatori <strong>di</strong> un’unica variante.<br />
L’analisi <strong>di</strong> alcuni familiari dei pazienti mutati rivela una penetranza del 50%. In cinque<br />
famiglie su nove il paziente ere<strong>di</strong>ta la mutazione da un genitore e due delle tre varianti<br />
polimorfiche dall’altro, mentre i portatori sani ere<strong>di</strong>tano la variante protettiva.<br />
In conclusione, il 24% dei pazienti con HUS è mutato sul gene del Fattore H e alcuni<br />
polimorfismi, comunemente presenti in questo gene, possono contribuire al manifestarsi<br />
214<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
dell’HUS sia nei pazienti con la mutazione sia nei pazienti non mutati.<br />
IRFMN<br />
Cellule dendritiche (DCs) geneticamente mo<strong>di</strong>ficate per impe<strong>di</strong>re l’attività<br />
del sistema NF-kB inducono la formazione <strong>di</strong> linfociti T regolatori (Treg)<br />
estremamente potenti<br />
“In collaborazione con l’Unità <strong>di</strong> Terapia Genica”<br />
Per verificare se le cellule dendritiche (DCs) immature fossero in grado <strong>di</strong> trasformare dei<br />
linfociti T naïve allogenici in linfociti T regolatori (Treg), abbiamo utilizzato DCs (ottenute da<br />
ratti BN) ingegnerizzate con AdV-dnIKK2 come cellule stimolatrici (dnIKK2-DCs) in una<br />
reazione leucocitaria mista (MLR primaria) con linfociti T <strong>di</strong> ratto LW come cellule<br />
“responder”. DCs infettate con AdV0 sono state utilizzate come controllo (AdV0-DCs). A<br />
<strong>di</strong>fferenza dell’MLR primaria eseguita con AdV0-DCs, i linfociti T non proliferano in MLR<br />
primaria con dnIKK2-DCs. Al termine dell’MLR primaria con dnIKK2-DCs i linfociti T hanno<br />
acquisito un fenotipo CD4+CD25-/<strong>di</strong>m. Analizzando l’espressione dell’RNA nessaggero<br />
abbiamo trovato livelli alti <strong>di</strong> espressione <strong>di</strong> IL-10 e TGF-beta, livelli interme<strong>di</strong> <strong>di</strong> INF-gamma<br />
e IL-2 e non rilevabili <strong>di</strong> IL-4. Se i linfociti T che sono stati pre-esposti ad AdV0-DCs<br />
proliferano vigorosamente ad uno stimolo secondario con AdV0-DCs, i linfociti T pre-esposti a<br />
dnIKK2-DCs esibiscono una scarsa proliferazione allo stimolo secondario delle AdV0-DCs<br />
anche in presenza <strong>di</strong> IL-2. Per verificare se i linfociti T pre-esposti a dnIKK2-DCs avessero<br />
acquisito capacità regolatrici, sono stati allestiti esperimenti <strong>di</strong> co-coltura (linfociti T pre-esposti<br />
a dnIKK2-DCs aggiunti ad una MLR composta da linfociti T naive <strong>di</strong> ratto LW e splenociti <strong>di</strong><br />
ratto BN). Messi in co-coltura i linfociti T pre-esposti a dnIKK2-DCs riescono ad inibire la<br />
proliferazione dei linfociti T naïve fino ad un rapporto Treg/T naïve <strong>di</strong> 1/1000. Il fatto che la<br />
proliferazione dei linfociti T naïve non venga ripristinata neanche con l’aggiunta <strong>di</strong> IL-2 ci ha<br />
permesso <strong>di</strong> concludere che la soppressione dei Treg non avvenga me<strong>di</strong>ante induzione <strong>di</strong><br />
anergia nelle cellule bersaglio. L’inibizione rimane anche se i Treg vengono separati dai<br />
linfociti T naïve me<strong>di</strong>ante una membrana permeabile ai soluti ma non alle cellule, <strong>di</strong>mostrando<br />
che la regolazione è legata alla produzione <strong>di</strong> fattori immunosoppressori solubili e non al<br />
contatto con le cellule bersaglio. Il fatto che l’aggiunta <strong>di</strong> anticorpi in grado <strong>di</strong> neutralizzare IL-<br />
10 e TGF-beta ripristini solo parzialmente la proliferazione dei linfociti T naïve, messi in cocoltura<br />
con i Treg, ci ha portato a concludere che i fattori solubili responsabili dell’azione<br />
immunosoppressiva dei Treg non sono IL-10 e TGF-beta. Questi risultati potrebbero essere<br />
rilevanti per il controllo dell’attività dei linfociti T nella terapia delle patologie autoimmuni e<br />
nella prevenzione del rigetto al trapianto d’organo.<br />
Effetto <strong>di</strong> un nuovo immunosoppressore, ST1959, sul sistema immunitario<br />
e sulla sopravvivenza <strong>di</strong> un trapianto renale allogenico nel ratto<br />
ST1959 è un 3,5-<strong>di</strong>aril-s –triazolo appartenente ad una nuova classe <strong>di</strong> agenti contraccettivi con<br />
attività immunosoppressiva. Nel presente stu<strong>di</strong>o abbiamo valutato, con esperimenti ex-vivo ed<br />
in-vivo, gli effetti immunosoppressori <strong>di</strong> questo farmaco nel contesto della risposta immune<br />
rispetto ad antigeni allogenici nel ratto.<br />
Nella prima fase abbiamo stu<strong>di</strong>ato 4 gruppi <strong>di</strong> ratti Lewis: un gruppo <strong>di</strong> animali naive ed uno <strong>di</strong><br />
ratti allosensibilizzati me<strong>di</strong>ante l’infusione <strong>di</strong> splenociti <strong>di</strong> ratto Brown Norway entrambi trattati<br />
con ST1959 per sei giorni, oltre ai due rispettivi gruppi <strong>di</strong> controllo che hanno ricevuto solo il<br />
veicolo. Al termine del trattamento tutti gli animali sono stati sacrificati e sono stati valutati il<br />
numero <strong>di</strong> cellule e le sottopopolazioni linfocitarie a livello del timo, milza, linfono<strong>di</strong>, midollo<br />
osseo, sangue e, infine, l’alloreattività delle cellule T linfonodali. Abbiamo aggiunto in seguito<br />
altri tre gruppi <strong>di</strong> ratti Lewis riceventi un trapianto allogenico <strong>di</strong> rene (da ratti BN): due gruppi<br />
trattati con ST1959 (tutti i giorni o per sei giorni e successivamente solo due volte la settimana),<br />
mentre il terzo solamente con il veicolo.<br />
Nei ratti naive trattati con ST1959 si verificava una riduzione del peso e della cellularità del<br />
215<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
timo, con una riduzione della percentuale <strong>di</strong> cellule CD4+CD8+ ed un aumento <strong>di</strong> quella <strong>di</strong><br />
cellule CD4-CD8-. In ratti sensibilizzati con splenociti allogenici, ST1959 preveniva<br />
l’attivazione delle cellule T CD4+ (CD4+CD25+) nei linfono<strong>di</strong>. Inoltre, l’alloreattività delle<br />
cellule T (valutata con esperimenti <strong>di</strong> reazione leucocitaria mista) era significativamente più<br />
bassa negli animali allosensibilizzati e trattati con il farmaco rispetto agli animali <strong>di</strong> controllo.<br />
Infine, nel modello <strong>di</strong> trapianto allogenico <strong>di</strong> rene, ST1959, in entrambi i regimi <strong>di</strong><br />
somministrazione, aumentava significativamente la sopravvivenza rispetto al veicolo (12,0 ± 1,0<br />
vs. 7,4 ± 0,5 giorni; p < 0.001).<br />
In conclusione, ST1959 possiede un effetto immunomodulatorio e aumenta significativamente<br />
la sopravvivenza <strong>di</strong> un trapianto renale allogenico nel ratto.<br />
L’inibizione del recettore CXCR2 previene il danno da ischemia<br />
/riperfusione in un modello <strong>di</strong> trapianto <strong>di</strong> rene nel ratto<br />
Il danno da ischemia e riperfusione secondario alla procedura <strong>di</strong> espianto, alla conservazione<br />
dell'organo e alla chirurgia porta ad un deterioramento dell’organo stesso. E' stato osservato che<br />
esiste un'apparente sinergia tra il danno iniziale conseguente all’ischemia e riperfusione e il<br />
rigetto acuto dell'organo. Entrambi gli eventi, in combinazione o da soli, <strong>di</strong>minuiscono<br />
significativamente la sopravvivenza a lungo termine dell'organo trapiantato. E' noto che la<br />
patogenesi del danno da ischemia e riperfusione coinvolge alcune citochine chemotattiche, la<br />
cui espressione induce l’accumulo <strong>di</strong> cellule infiammatorie. L'interleuchina-8 (IL-8), citochina<br />
con potente effetto chemotattico per le cellule polimorfonucleate, può essere prodotta da cellule<br />
endoteliali attivate a seguito della riperfusione.<br />
In un modello <strong>di</strong> trapianto <strong>di</strong> rene nel ratto, in cui l’organo viene pre-esposto ad ischemia a<br />
freddo per 4 ore, abbiamo stu<strong>di</strong>ato il coinvolgimento delle cellule infiammatorie attirate da IL-8<br />
nel rene. Abbiamo analizzato i reni 16 e 24 ore dopo il trapianto: la cinetica <strong>di</strong> espressione <strong>di</strong><br />
CINC-1/IL-8 correlava con l’accumulo <strong>di</strong> cellule infiammatorie (granulociti) nel rene. Un<br />
nuovo composto, Repertaxin, che inibisce il recettore <strong>di</strong> CINC-1/IL-8, CXCR2, e’ stato<br />
somministrato agli animali riceventi prima del trapianto (24, 8 o 2 ore prima), imme<strong>di</strong>atamente<br />
prima della riperfusione e 2 ore piu’ tar<strong>di</strong>. Nel trapianto singenico abbiamo osservato che ratti<br />
Lewis, trattati con 15 mg/kg <strong>di</strong> Repertaxin 24 ore prima del trapianto, avevano un minor numero<br />
<strong>di</strong> granulociti infiltranti il rene e livelli <strong>di</strong> creatinina ridotti rispetto agli animali trattati con<br />
soluzione salina. Effetti interme<strong>di</strong> sono stati osservati con 5 mg/kg, mentre la dose <strong>di</strong> 30 mg/kg<br />
aveva effetti tossici. La riduzione del tempo <strong>di</strong> pretrattamento da 24 a 8 ore prima del trapianto<br />
si e’<strong>di</strong>mostrata altrettanto efficace. Risultati analoghi sono stati osservati nella combinazione<br />
allogenica, trattando con 15 mg/kg <strong>di</strong> Repertaxin ratti Brown Norway riceventi reni <strong>di</strong> ceppo<br />
Lewis. I nostri risultati in<strong>di</strong>cano che ridurre il reclutamento delle cellule infiammatorie tramite il<br />
blocco <strong>di</strong> CXCR2 e’ efficace nel modulare il danno dovuto all’ischemia/riperfusione. Questi<br />
risultati, ottenuti in un modello animale, aprono nuove prospettive <strong>di</strong> applicazione nell’uomo.<br />
Attivazione del complemento: il legame mancante tra il deficit <strong>di</strong> ADAMTS-<br />
13 e la trombosi microvascolare delle microangiopatie trombotiche.<br />
La sindrome emolitica uremica e la porpora trombotica trombocitopenica sono malattie<br />
caratterizzate da anemia emolitica microangiopatica, piastrinopenia e danno al rene ed al<br />
cervello. La microangiopatia trombotica (TMA) è la lesione caratteristica <strong>di</strong> questa malattia e<br />
consiste nell’ispessimento della parete dei piccoli vasi (capillari e arteriole), con rigonfiamento<br />
e <strong>di</strong>stacco delle cellule endoteliali dalla membrana basale e formazione <strong>di</strong> trombi piastrinici nel<br />
lume vascolare. La forma classica <strong>di</strong> TMA che colpisce prevalentemente i bambini, ha una<br />
buona prognosi e generalmente si risolve spontaneamente, mentre le forma atipiche, che<br />
colpiscono gli adulti, hanno un esito negativo con danno renale o cerebrale grave e morte nel<br />
50% dei casi. Recenti stu<strong>di</strong> hanno <strong>di</strong>mostrato una associazione tra alcune <strong>di</strong> queste forme<br />
atipiche e alterazioni genetiche <strong>di</strong> proteine regolatrici del complemento: il fattore H e il MCP<br />
216<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
(Membrane Cofactor Protein). Altre forme atipiche <strong>di</strong> TMA sono invece associate al deficit<br />
(costitutivo o acquisito) <strong>di</strong> ADAMTS-13, una metalloproteasi plasmatica che taglia i multimeri<br />
del fattore <strong>di</strong> von Willebrand responsabili della attivazione piastrinica e della formazione <strong>di</strong><br />
trombi.<br />
L’alterata funzionalità dell’endotelio è importante nella sequenza <strong>di</strong> eventi che conducono al<br />
processo microangiopatico, tuttavia i meccanismi coinvolti non sono completamente chiari. In<br />
questo lavoro abbiamo stu<strong>di</strong>ato il ruolo dei leucociti polimorfonucleati (PMN) e dell’<br />
attivazione del complemento nell’indurre il danno microvascolare e della per<strong>di</strong>ta della<br />
tromboresistenza nella TMA associata a deficit <strong>di</strong> ADAMTS-13. I PMN isolati da pazienti con<br />
TMA durante la fase acuta, rilasciano elevate quantità <strong>di</strong> specie reattive dell’ossigeno e dell’<br />
azoto ed elevate quantità <strong>di</strong> proteinasi. Attraverso il rilascio <strong>di</strong> queste sostanze tossiche, i PMN<br />
inducono citotossicità e per<strong>di</strong>ta della tromboresistenza in una linea <strong>di</strong> cellule endoteliali<br />
microvascolari umane (HMEC-1). Anche il siero <strong>di</strong> questi pazienti, raccolto durante la fase<br />
acuta della malattia, è in grado per se <strong>di</strong> indurre citotossicità e per<strong>di</strong>ta della tromboresistenza<br />
nelle HMEC-1 e i prodotti della attivazione del complemento sono responsabili <strong>di</strong> questi effetti.<br />
Infatti il siero induce un aumento della deposizione della frazione 3 del complemento (C3) e del<br />
Complesso <strong>di</strong> Attacco alla Membrana (MAC) sulle HMEC-1 e questi processi sono aboliti<br />
dall’inibizione del complemento. Il siero <strong>di</strong> questi pazienti inoltre causa sulle cellule endoteliali,<br />
l’espressione della P-selectin, molecola in grado <strong>di</strong> promuovere l’adesione e l’attivazione dei<br />
PMN, in<strong>di</strong>cando che l’attivazione del complemento ha un ruolo anche nella attivazione <strong>di</strong><br />
queste cellule. Abbiamo infatti <strong>di</strong>mostrato che il siero dei pazienti con TMA è in grado <strong>di</strong><br />
attivare PMN isolati da sangue <strong>di</strong> soggetti sani e <strong>di</strong> conferire loro la capacità <strong>di</strong> indurre danno<br />
alle cellule endoteliali. L’inibizione del complemento abolisce questi effetti. Questo stu<strong>di</strong>o<br />
<strong>di</strong>mostra quin<strong>di</strong> che l’attivazione dei PMN indotta dal complemento e il conseguente danno<br />
endoteliale giocano un ruolo cruciale nella trombosi microvascolare nella TMA associata a<br />
deficit <strong>di</strong> ADAMTS-13 e apre nuove prospettive terapeutiche per il trattamento <strong>di</strong> questa<br />
patologia. L’associazione della terapia con plasma con inibitori del complemento, ora<br />
<strong>di</strong>sponibili in clinica, potrebbe prevenire o limitare la trombosi microvascolare della TMA<br />
associata a deficit <strong>di</strong> ADAMTS-13.<br />
Unità <strong>di</strong> Terapia Genica<br />
Cellule dendritiche geneticamente mo<strong>di</strong>ficate con l’adenovirus co<strong>di</strong>ficante<br />
per dnIKK2 non sono in grado <strong>di</strong> far proliferare cellule T allogeniche<br />
“In collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia e Genetica <strong>di</strong> Malattie Rare e Trapianto”<br />
La capacità delle cellule dendritiche (DCs) <strong>di</strong> modulare la risposta immune <strong>di</strong>pende dal loro<br />
stato <strong>di</strong> maturazione e numerosi stu<strong>di</strong> hanno evidenziato che DCs immature, caratterizzate da<br />
una bassa espressione sia degli antigeni MHC <strong>di</strong> classe II che delle molecole <strong>di</strong> costimolazione,<br />
possono essere un valido strumento per indurre uno stato <strong>di</strong> tolleranza periferica. Poiché l’NFkB<br />
gioca un ruolo essenziale nella maturazione delle cellule dendritiche, abbiamo<br />
ingegnerizzato le cellule con un adenovirus co<strong>di</strong>ficante per la forma dominante negativa della<br />
chinasi IKK2 chiamato AdV-dnIKK2, in grado <strong>di</strong> bloccare l’attivazione dell’NF-kB e inibire la<br />
maturazione delle cellule dendritiche. Le DCs sono state infettate con 50 MOI <strong>di</strong> AdV-dnIKK2<br />
(dnIKK2-DCs). DCs infettate con AdV0 sono state utilizzate come controllo (AdV0-DCs). Sia<br />
AdV0-DCs che dnIKK2-DCs esprimevano CD11c ed erano negative per marker tipici dei<br />
linfociti e dei macrofagi (CD45RA, CD3, ED1 e ED3). Al contrario, le dnIKK2-DCs<br />
esprimevano bassi livelli <strong>di</strong> MHC <strong>di</strong> classe II e B7-2 rispetto alle AdV0-DCs, in<strong>di</strong>cando che le<br />
dnIKK2-DCs avevano acquisito un fenotipo immaturo. L’espressione genica <strong>di</strong> dnIKK2 è stata<br />
valutata me<strong>di</strong>ante RT-PCR e ha rivelato la presenza del trascritto solo nelle dnIKK2-DCs e non<br />
nelle AdV0-DCs. La quantificazione dell’espressione <strong>di</strong> dnIKK2 umano è stata ottenuta<br />
me<strong>di</strong>ante real-time RT-PCR. Mentre l’espressione non era misurabile in AdV0-DCs, nelle<br />
217<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
dnIKK2-DCs l’espressione era 1.562 volte maggiore rispetto al calibratore. Esperimenti <strong>di</strong><br />
EMSA condotti sugli estratti nucleari ottenuti da dnIKK2-DCs mostravano un’attività <strong>di</strong> NF-kB<br />
ridotta del 70% rispetto alle AdV0-DCs. In una reazione leucocitaria mista primaria, le dnIKK2-<br />
DCs risultavano incapaci <strong>di</strong> stimolare cellule T naïve allogeniche sia in un rapporto DC/T <strong>di</strong><br />
1/100 che <strong>di</strong> 1/1000.<br />
La cotrasfezione <strong>di</strong> TGF-beta e CTLA4Ig nel rene donatore ha un effetto<br />
positivo sulla sopravvivenza dell’allotrapianto<br />
Stu<strong>di</strong> in letteratura hanno <strong>di</strong>mostrato che il trasferimento genico <strong>di</strong> interleuchina 10 virale<br />
(vIL10) o <strong>di</strong> TGF-beta prolungano la sopravvivenza <strong>di</strong> un allotrapianto <strong>di</strong> fegato o <strong>di</strong> cuore.<br />
Abbiamo voluto valutare se l’iniezione nel rene del ratto donatore <strong>di</strong> costrutti adenovirali<br />
co<strong>di</strong>ficanti per vIL-10 o TGF-beta prolungasse la sopravvivenza dell'allotrapianto in assenza <strong>di</strong><br />
una terapia immunosoppressiva. Poiché avevamo precedentemente <strong>di</strong>mostrato che la trasfezione<br />
del rene donatore con CTLA4Ig prolungava significativamente la sopravvivenza, abbiamo<br />
inoltre valutato l’effetto <strong>di</strong> un trattamento combinato <strong>di</strong> AdvIL-10 o AdTGF-beta con<br />
l’adenovirus co<strong>di</strong>ficante per CTLA4Ig. Allotrapianti iniettati con salina o con un adenovirus <strong>di</strong><br />
controllo (Adbeta-gal) venivano rigettati pochi giorni dopo il trapianto. L’iniezione <strong>di</strong> AdvIL-10<br />
prolungava la sopravvivenza solo in 2 animali su 9 e l’espressione del transgene si osservava<br />
fino a 4 giorni dal trapianto. Risultati simili sono stati ottenuti con AdTGF-beta, nonostante<br />
l’espressione del transgene fosse rilevabile almeno fino a 14 giorni dal trapianto. Mentre la<br />
combinazione <strong>di</strong> AdvIL-10 e AdCTLA4Ig non proteggeva il rene trapiantato dal rigetto, la<br />
combinazione <strong>di</strong> AdTGF-beta e AdCTLA4Ig prolungava significativamente la sopravvivenza<br />
dell’allotrapianto in tutti gli animali del gruppo, uno dei quali è sopravvissuto indefinitamente<br />
mostrando una persistente espressione genica dei transgeni oltre ad uno stato <strong>di</strong> ridotta risposta<br />
delle cellule T verso stimoli allogenici.<br />
218<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
DIPARTIMENTO DI BIOINGEGNERIA<br />
PERSONALE<br />
Capo Dipartimento Andrea REMUZZI, Dr.Ing.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biofisica Renale<br />
Capo Laboratorio Daniela MACCONI, Dr.Sci.Biol.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Tecnologie Biome<strong>di</strong>che<br />
Capo Laboratorio Bogdan ENE IORDACHE, Dr.Bio.Ing.<br />
Unità <strong>di</strong> Ingegneria dei Tessuti<br />
Capo Unità Marina FIGLIUZZI, Dr.Sci.Biol.<br />
219<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
L’attività <strong>di</strong> ricerca del Dipartimento <strong>di</strong> Bioingegneria si basa sull’impiego <strong>di</strong> tecniche<br />
ingegneristiche per lo stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> processi fisiopatologici e lo sviluppo <strong>di</strong> strategie terapeutiche<br />
innovative. Sono attualmente attive all'interno del Dipartimento <strong>di</strong>verse linee <strong>di</strong> ricerca, sia a<br />
livello <strong>di</strong> base che applicative. I principali strumenti utilizzati per queste ricerche consistono in<br />
modelli teorici per l’analisi <strong>di</strong> fenomeni biologici, immagini <strong>di</strong>agnostiche o ottenute al<br />
microscopio per quantificare macro e micro strutture oggetto <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o, misure <strong>di</strong>rette <strong>di</strong><br />
parametri fisico-chimici sia a livello sperimentale che clinico, tecniche <strong>di</strong> coltura cellulare e<br />
tecnologie informatiche per l’archiviazione e l’analisi dei dati. Gli stu<strong>di</strong> in corso afferiscono a<br />
quattro settori della ricerca biome<strong>di</strong>ca: lo stu<strong>di</strong>o dei meccanismi coinvolti nella progressione del<br />
danno renale nelle nefropatie croniche, stu<strong>di</strong> sull’emo<strong>di</strong>namica in campo vascolare, lo sviluppo<br />
<strong>di</strong> tecniche <strong>di</strong> laboratorio per l'ingegneria dei tessuti, e lo sviluppo <strong>di</strong> sistemi informativi<br />
de<strong>di</strong>cati alla gestione <strong>di</strong> dati clinici generati sia nell’ambito dei trias clinici che nella pratica<br />
clinica convenzionale.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Messa a punto <strong>di</strong> meto<strong>di</strong> <strong>di</strong> calcolo automatico per la localizzazione tri<strong>di</strong>mensionale <strong>di</strong> placche<br />
aterosclerotiche me<strong>di</strong>ante indagini TAC o RM e valutata la precisione del metodo con il<br />
confronto <strong>di</strong> un modello fisico.<br />
Sviluppo, validazione e impiego <strong>di</strong> un metodo semi-automatico per la valutazione del volume<br />
del parenchima renale e delle cisti che si sviluppano nei pazienti affetti da rene policistico<br />
Sviluppo <strong>di</strong> una tecnica innovativa per la ricostruzione non invasiva basata su immagini in RM<br />
dei vasi del braccio in cui viene realizzata la fistola arterovenosa per l’accesso vascolare<br />
impiegato durante la seduta <strong>di</strong>alitica.<br />
Dimostrazione dell’effetto dell’antagonismo dell’angiotensina II nel far regre<strong>di</strong>re le lesioni<br />
glomerulari in un modello <strong>di</strong> nefropatia cronica progressiva.<br />
Dimostrazione del ruolo delle cellule epiteliali glomerulari nella per<strong>di</strong>ta <strong>di</strong> funzione in un<br />
modello <strong>di</strong> danno renale spontaneo.<br />
Messo a punto della meto<strong>di</strong>ca per la separazione <strong>di</strong> isole da pancreas umani in con<strong>di</strong>zioni<br />
controllate <strong>di</strong> sterilità finalizzata ad un programma <strong>di</strong> trapianto nel paziente insulino-<strong>di</strong>pendente.<br />
220<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
Dr. Caverni, Prof. Cornalba, Unità <strong>di</strong> Ra<strong>di</strong>ologia, Ospedale San Paolo, Milano<br />
Prof. Pietrabissa, Dr. Sara Mantero, Dr. Manuela Raimon<strong>di</strong>, Dipartimento <strong>di</strong> Bioingegneria,<br />
Politecnico <strong>di</strong> Milano, Milano<br />
Dr. Alessandra Pavesio, Dr. Clau<strong>di</strong>o de Luca, Fi<strong>di</strong>a Advanced Biopolymers, Abano Terme,<br />
Padova<br />
Dr. Giorgio Soldani, Instituto <strong>di</strong> Fisiologia Clinica CNR, Pisa<br />
Dr. Corrado Piconi, Tecnobiome<strong>di</strong>ca, Roma<br />
Dr. Gaziano Serrao, Unità <strong>di</strong> Anatomia Patologica, Ospedale San Paolo, Milano<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
Prof. R. M. Nerem, Institute for Bioengineering and Bioscience, Georgia Institute of<br />
Technology, Atlanta GA , USA.<br />
Prof. W. M. Deen, Massachussets Institute of Technology, Cambridge MA, USA.<br />
Prof. P. So, Massachussets Institute of Technology, Cambridge MA, USA.<br />
Prof. P. Neuenschwander, Politecnico Federale <strong>di</strong> Zurigo, Dept. of Material Science, Zurich<br />
IRFMN<br />
Prof. H. Kawachi, Institute of Nephrology,Dept. of Cell Biology, Niigata University Graduate<br />
School of Me<strong>di</strong>cal and Dental Sciences<br />
Prof. D. Steinman, Robarts Research Institute, London, Ontario<br />
Prof. J Tordoir, University Hospital, Maastricht, The Netherlands<br />
Drugs of Today, (Andrea Remuzzi)<br />
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
International Journal of Artificial Organs, (Andrea Remuzzi)<br />
221<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
Kidney International,<br />
Journal of the American Society of Nephrology,<br />
Me<strong>di</strong>cal & Biological Engineering & Computing,<br />
IEEE Transactions in Me<strong>di</strong>cal Imaging,<br />
IEEE Transactions on Biome<strong>di</strong>cal Engineering<br />
Artificial Organs,<br />
International Journal of Artificial Organs.<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
IRFMN<br />
Seminario, Luca Antiga, "Recenti sviluppi nella caratterizzazione geometrica e fluido<strong>di</strong>namica<br />
delle gran<strong>di</strong> arterie", Marzo 30, Ranica, Bergamo<br />
Invited Lecture, Dr. Diego Mantovani, PhD, Laboratory of Biomaterials and Bioengineering<br />
Quebec City Laval University<br />
"Mo<strong>di</strong>fiche superficiali e biomateriali per la sostituzione e rigenerazine del tessuto<br />
car<strong>di</strong>ovascolare", Giugno 23, Ranica, Bergamo<br />
Seminario, Dr. Ing. Navneeta Rajan, "Stu<strong>di</strong>o della permeabilità <strong>di</strong> membrane per lo sviluppo <strong>di</strong><br />
un <strong>di</strong>spositivo <strong>di</strong> immunoisolamento per il trapianto <strong>di</strong> isole pancreatiche", Luglio 13, Ranica,<br />
Bergamo<br />
Seminario, Dr. Ing. Roberto Muzzi, "Quantificazione automatica dei volumi cerebrali tramite<br />
immagini <strong>di</strong> risonanza magnetica inversion recovery" Ottobre 10, Ranica, Bergamo<br />
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
DIPARTIMENTO<br />
Symposium on Computer Methods in Biomechanics & Biome<strong>di</strong>cal Engineering, "Validation of<br />
a 3D reconstruction method for carotid bifurcation models starting from angio CT images",<br />
Febbraio 25-28, <strong>2004</strong>, Madrid.<br />
Convegno, Nefropatie croniche e complicanze car<strong>di</strong>ovascolari: epidemiologia, patogenesi,<br />
prevenzione e trattamento, "Remission Clinic", Giugno 4 e 5, Ranica, Bergamo<br />
International Congress on Strategies in Tissue Engineering, "So<strong>di</strong>um ascorbate ameliorates<br />
mechanical properties of vascular constructs" Giugno 17–19, Wurzburg, Germania<br />
International Congress on Strategies in Tissue Engineering, "Pancreatic stem cells from<br />
exocrine tissue" Giugno 17–19, Wurzburg, Germania<br />
Seminario Zeiss, Microscopia Confocale e Tecniche Correlate, Coor<strong>di</strong>namento, Giugno 30,<br />
Bergamo<br />
222<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
16th Annual International Workshop On Magnetic Resonance Angiography, " Effect of slice<br />
resolution and orientation on 3D reconstruction of artery wall thickness", Ottobre 6-8, London,<br />
Ontario.<br />
International Symposium, "Progress in bioengineering and the vascular endothelium", Ottobre<br />
13-14, Pisa<br />
Convegno, Le banche dei tessuti: Recenti sviluppi e nuove prospettive, "Ingegneria dei tessuti",<br />
Ottobre 25, Torino<br />
Bioflumen III, <strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanita', "Imaging and numerical fluid dynamics for the<br />
study of the car<strong>di</strong>ovascular system", Novembre 15, Roma<br />
International Congress of the Cell Transplantation Society, "A new device for subcutaneous<br />
xenotransplantation of bovine pancreatic islets", Novembre 17-20, Boston, US<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
Progetto <strong>di</strong> Ricerca finanziato dal MIUR "FIRB-Ingegneria del Tessuto Vascolare" PNR<br />
2002/05<br />
Progetto <strong>di</strong> Ricerca Finanziato dalla Fondazione CARIPLO "Generazione in vitro <strong>di</strong> isole<br />
pancreatiche a partire da cellule staminali pluripotenti del pancreas"<br />
Progetto <strong>di</strong> Ricerca Finanziato dalla Fondazione SAN PAOLO "Trapianto <strong>di</strong> isole pancreatiche<br />
me<strong>di</strong>ante un <strong>di</strong>spositivo per immunoisolamento"<br />
Progetti <strong>di</strong> Ricerca - 6PQ Unione Europea - "BARP+ - Development of a bioartificial pancreas<br />
for type I <strong>di</strong>abetic patients"<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Remuzzi A., Mantero S., Colombo M., Morigi M., Binda E., Camozzi D., Imberti B. Vascular smooth muscle cells<br />
on hyaluronic acid: culture and mechanical characterization of an engineered vascular construct. Tissue Eng 10:699-<br />
710, <strong>2004</strong>.<br />
Raimon<strong>di</strong> M.T., Falcone L. Colombo M., Remuzzi A., Marinoni E., Marazzi M., Rapisarda V., Pietrabissa R. A<br />
comparative evaluation of chondrocyte/scaffold constructs for cartilage tissue engineering. J Appl Biomat &<br />
Biomech <strong>2004</strong> 2:55-64.<br />
Raimon<strong>di</strong> M.T., Boschetti F., Falcone L., Migliavacca F., Remuzzi A., Dubini G. The effect of me<strong>di</strong>a perfusion on<br />
three-<strong>di</strong>mensional cultures of human chondrocytes: Integration of experimental and computational approaches.<br />
Biorheol 41:401-410, <strong>2004</strong>.<br />
Antiga L, Steinman DA. Robust and objective decomposition and mapping of bifurcating vessels. IEEE Trans Med<br />
Imaging. <strong>2004</strong> 23:704-13.<br />
223<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Ruggenenti P, Fassi A, Ilieva AP, Bruno S, Iliev IP, Brusegan V, Rubis N, Gherar<strong>di</strong> G, Arnol<strong>di</strong> F, Ganeva M, Ene-<br />
Iordache B, Gaspari F, Perna A, Bossi A, Trevisan R, Dodesini AR, Remuzzi G. Preventing microalbuminuria in type<br />
2 <strong>di</strong>abetes. N Engl J Med. <strong>2004</strong> 351:1941-51.<br />
Remuzzi G, Lesti M, Gotti E, Ganeva M, Dimitrov BD, Ene-Iordache B, Gherar<strong>di</strong> G, Donati D, Salvadori M,<br />
Sandrini S, Valente U, Segoloni G, Mourad G, Federico S, Rigotti P, Sparacino V, Bosmans JL, Perico N,<br />
Ruggenenti P. Mycophenolate mofetil versus azathioprine for prevention of acute rejection in renal transplantation<br />
(MYSS): a randomised trial. Lancet. <strong>2004</strong> 364:503-512.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biofisica Renale<br />
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
Ruolo patofisiologico del podocita nella progressione delle malattie renali<br />
proteinuriche.<br />
La proteinuria origina da alterazioni della membrana capillare glomerulare che perde le sue<br />
proprietà selettive nel regolare la composizione dell’ultrafiltrato. Tra i componenti della<br />
membrana, i podociti hanno un ruolo chiave nel mantenere la selettività della barriera <strong>di</strong><br />
filtrazione. Stu<strong>di</strong> recenti hanno suggerito che la riduzione del numero <strong>di</strong> podociti per singolo<br />
glomerulo possa essere un fattore <strong>di</strong> rischio per lo sviluppo della proteinuria e la progressione<br />
della malattia renale. Utilizzando tecniche <strong>di</strong> immunoistochimica e morfometria abbiamo<br />
stu<strong>di</strong>ato la relazione temporale tra il numero <strong>di</strong> podociti per glomerulo e lo sviluppo della<br />
proteinuria e della glomerulosclerosi in un modello sperimentale <strong>di</strong> danno glomerulare<br />
spontaneo nel ratto (ratti MWF). Abbiamo valutato inoltre se eventuali cambiamenti nella<br />
densità dei podociti fossero associati ad alterazione della nefrina, un componente della barriera<br />
<strong>di</strong> filtrazione fondamentale per la sua corretta funzione. Il nostro stu<strong>di</strong>o ha permesso <strong>di</strong><br />
documentare che in con<strong>di</strong>zioni normali, con la crescita dell’animale, si ha un aumento<br />
fisiologico del volume glomerulare che però non si mo<strong>di</strong>fica ulteriormente con l’avanzare<br />
dell’età. Non si osserva un parallelo aumento nel numero dei podociti che rimane costante con<br />
l’età. Questo è da attribuirsi al fatto che il podocita maturo è una cellula <strong>di</strong>fferenziata che non è<br />
in grado <strong>di</strong> proliferare. Tuttavia il podocita si adatta a questa nuova con<strong>di</strong>zione e modula<br />
l’espressione <strong>di</strong> una proteina che ha un effetto inibitorio sui fattori <strong>di</strong> crescita e attiva invece la<br />
trascrizione del gene che co<strong>di</strong>fica per la nefrina. In questo modo esso contiene il volume<br />
glomerulare entro certi limiti e preserva le proprietà selettive della barriera glomerulare evitando<br />
una per<strong>di</strong>ta consistente <strong>di</strong> proteine nell’urina. Al contrario i ratti MWF hanno il duplice<br />
svantaggio <strong>di</strong> aver in giovane età la matassa glomerulare già marcatamente espansa rispetto al<br />
normale ed un ridotto numero <strong>di</strong> podociti per glomerulo che <strong>di</strong>minuisce ulteriormente con<br />
l’avanzare dell’età. Con l’aumento del volume della matassa glomerulare la superficie filtrante<br />
che deve essere coperta dai singoli podociti è sempre più ampia. Il podocita subisce <strong>di</strong><br />
conseguenza delle sollecitazioni meccaniche che potrebbero essere responsabili dell'alterazione<br />
dell’espressione della nefrina provocando una per<strong>di</strong>ta progressiva della funzione del podocita<br />
con sviluppo della proteinuria e successivamente della glomerulosclerosi.<br />
Trattamenti farmacologici in grado <strong>di</strong> indurre la regressione delle malattie<br />
renali<br />
E' stato <strong>di</strong>mostrato che i farmaci che antagonizzano l'azione dell'angiotensina II non solo<br />
riducono la pressione arteriosa sistemica ma sono anche efficaci nel ridurre la velocità <strong>di</strong><br />
progressione del danno renale verso l'insufficienza terminale. Recentemente abbiamo osservato<br />
che un trattamento intensivo con inibitori dell'enzima <strong>di</strong> conversione dell'angiotensina II nel<br />
ratto ha fatto regre<strong>di</strong>re il danno renale strutturale e funzionale. Questa prospettiva pare dare<br />
224<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
nuove possibilità nella cura delle nefropatie progressive, non solo <strong>di</strong> arrestarne l’evoluzione ma<br />
anche <strong>di</strong> farle regre<strong>di</strong>re. Per <strong>di</strong>mostrare se effettivamente è possibile raggiungere questo<br />
risultato abbiamo valutato se un trattamento con ACE inibitori può far regre<strong>di</strong>re la sclerosi<br />
glomerulare che si osserva in un modello sperimentale spontaneo <strong>di</strong> danno renale. L’analisi<br />
morfologica e il processamento <strong>di</strong>gitale delle immagini microscopiche ha permesso <strong>di</strong><br />
quantificare l’effettiva regressione del danno glomerulare. Questi stu<strong>di</strong> aprono la strada<br />
all’induzione farmacologica della regressione del danno renale.<br />
Applicazione della microscopia confocale allo stu<strong>di</strong>o della rete capillare<br />
glomerulare<br />
La struttura del capillare glomerulare permette <strong>di</strong> concentrare in un piccolo spazio una rete<br />
capillare in grado <strong>di</strong> filtrare efficacemente l’acqua plasmatica e trattenere le proteine circolanti.<br />
La valutazione delle alterazioni strutturali del capillare viene effettuata convenzionalmente<br />
me<strong>di</strong>ante sezioni osservate al microscopio ottico o elettronico. Alterazioni della struttura<br />
tri<strong>di</strong>mensionale della rete capillare possono influenzare in modo importante la funzione del<br />
capillare e il flusso ematico nei segmenti del capillare. Per stu<strong>di</strong>are nel dettaglio la struttura <strong>di</strong><br />
questo tessuto stiamo impiegando la tecnica della microscopia confocale me<strong>di</strong>ante uno<br />
strumento <strong>di</strong> ultima generazione. L’obiettivo è quello <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>are i meccanismi responsabili delle<br />
alterazioni strutturali del capillare e l’effetto <strong>di</strong> potenziali farmaci in grado <strong>di</strong> prevenire o <strong>di</strong> far<br />
regre<strong>di</strong>re il danno glomerulare.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Tecnologie Biome<strong>di</strong>che<br />
Sviluppo <strong>di</strong> sistemi computerizzati per la realizzazione <strong>di</strong> Stu<strong>di</strong> Clinici<br />
Controllati<br />
Numerosi stu<strong>di</strong> clinici sono in corso al Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> Cliniche per le Malattie Rare “Aldo e<br />
Cele Daccò”, in collaborazione con altri gruppi <strong>di</strong> ricerca nazionali o internazionali. Questi trial<br />
devono essere svolti secondo le linee guida <strong>di</strong> Good Clinical Practice (GCP) e richiedono<br />
un’alta qualità nella raccolta e nella gestione dei dati clinici. Ogni trial clinico richiede dei case<br />
report form (CRF) cartacei per la registrazione dei dati. Tali dati devono essere poi archiviati in<br />
maniera elettronica in database appositamente pre<strong>di</strong>sposti. Nel nostro laboratorio abbiamo<br />
realizzato sistemi informatici <strong>di</strong> raccolta dati per gli stu<strong>di</strong> clinici, utilizzando database<br />
tra<strong>di</strong>zionali <strong>di</strong> tipo relazionale (RDBMS) e sviluppato programmi finalizzati all’elaborazione,<br />
validazione ed all’estrazione dei dati per l’analisi statistica. Nell’ambito dello stu<strong>di</strong>o DEMAND<br />
è stato sviluppato un sistema innovativo <strong>di</strong> raccolta dati usando CRF elettronici anziché<br />
cartacei. Il sistema è basato sull’utilizzo <strong>di</strong> computer portatili in dotazione agli investigatori e<br />
permette <strong>di</strong> evitare completamente l’uso della modulistica cartacea. Recentemente abbiamo<br />
messo in funzione un sistema Web-based <strong>di</strong> supporto per il personale coinvolto nel processo <strong>di</strong><br />
isolamento <strong>di</strong> isole pancreatiche ed il susseguente trapianto nel paziente <strong>di</strong>abetico.<br />
Ricostruzione tri<strong>di</strong>mensionale e simulazione emo<strong>di</strong>namica <strong>di</strong> segmenti<br />
vascolari da indagini CT e MR<br />
L'evidenza che le placche aterosclerotiche si formano principalmente nelle ramificazioni del<br />
circolo arterioso ha portato a ipotizzare che con<strong>di</strong>zioni emo<strong>di</strong>namiche "<strong>di</strong>sturbate" favoriscano<br />
l'insorgenza dell'aterosclerosi. Inoltre, è stato evidenziato come anche l'iperplasia intimale,<br />
causa <strong>di</strong> fallimento <strong>di</strong> graft e fistole arterovenose, sia localizzata in corrispondenza <strong>di</strong> zone con<br />
emo<strong>di</strong>namica complessa. Data l'influenza della forma del vaso sull'emo<strong>di</strong>namica, è importante<br />
<strong>di</strong>sporre <strong>di</strong> meto<strong>di</strong> accurati e veloci <strong>di</strong> ricostruzione geometrica. Le tecniche angiografiche<br />
moderne, come la tomografia assiale computerizzata (CT) e la risonanza magnetica (MR),<br />
permettono <strong>di</strong> ottenere informazioni dettagliate sulla struttura dei vasi. Nel nostro laboratorio<br />
abbiamo sviluppato tecniche per la ricostruzione tri<strong>di</strong>mensionale, l'analisi geometrica, la<br />
225<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
generazione <strong>di</strong> griglie computazionali e la simulazione fluido<strong>di</strong>namica <strong>di</strong> tratti vascolari da<br />
angiografie CT e MR. Le immagini CT e MR, trasferite dalle apparecchiature <strong>di</strong> acquisizione su<br />
calcolatore, vengono processate con algoritmi <strong>di</strong> modellazione per generare superfici<br />
tri<strong>di</strong>mensionali che riproducono l'interfaccia tra parete vascolare e lume del vaso. L'accuratezza<br />
della ricostruzione e' stata validata sperimentalmente. Sul modello generato vengono poi<br />
effettuate misure accurate utilizzando algoritmi <strong>di</strong> geometria computazionale. Tecniche<br />
numeriche sono impiegate anche per la generazione <strong>di</strong> mesh per il calcolo fluido<strong>di</strong>namico agli<br />
elementi finiti. Tutte le procedure sono state sviluppate con l'obiettivo <strong>di</strong> minimizzare<br />
l'intervento dell'operatore e massimizzare l'accuratezza dei risultati. Per le simulazioni<br />
numeriche vengono usate come con<strong>di</strong>zioni al contorno le velocita' del sangue misurate me<strong>di</strong>ante<br />
echocolor-Doppler del paziente. I segmenti vascolari stu<strong>di</strong>ati hanno riguardato la biforcazione<br />
carotidea, l'aorta addominale, le arterie renali, fistole arterovenose ra<strong>di</strong>o-cefaliche e loop graft<br />
brachio-cefalici per emo<strong>di</strong>alisi. Le patologie indagate sono state l'aterosclerosi, l'iperplasia<br />
intimale e l'arterite <strong>di</strong> Takayasu, una malattia rara a carico del sistema vascolare.<br />
Quantificazione <strong>di</strong> strutture anatomiche da indagini CT e MR<br />
L'introduzione nella clinica <strong>di</strong> tecniche <strong>di</strong> imaging non invasive e tri<strong>di</strong>mensionali, come la<br />
tomografia assiale computerizzata (CT) e la risonanza magnetica (MR), ha fornito la possibilita'<br />
<strong>di</strong> analizzare la struttura anatomica <strong>di</strong> organi con elevato dettaglio. La non-invasivita' <strong>di</strong> tali<br />
tecniche permette <strong>di</strong> estendere l'osservazione a popolazioni <strong>di</strong> pazienti seguiti nel tempo. La<br />
valutazione dell'evolvere <strong>di</strong> patologie o dell'efficacia <strong>di</strong> trattamenti richiede spesso una<br />
quantificazione della morfologia delle strutture indagate che non puo' essere svolta unicamente<br />
a livello visivo. Abbiamo quin<strong>di</strong> sviluppato tecniche <strong>di</strong> quantificazione basate su immagini<br />
dotate <strong>di</strong> alta accuratezza e riproducibilita'. Esse sono state applicate ad uno stu<strong>di</strong>o su pazienti<br />
affetti da rene policistico (autosomal dominant polycystic kidney <strong>di</strong>sease, ADPKD) volto a<br />
testare l'efficacia e la sicurezza del trattamento con somatostatina. I volumi del rene e delle sue<br />
principali componenti tessutali (cisti e parenchima) sono stati quantificati a partire da immagini<br />
CT. Oltre a <strong>di</strong>mostrare l'effetto del trattamento, lo stu<strong>di</strong>o ha rivelato nuovi dettagli sulla naturale<br />
evoluzione della patologia. Una simile tecnica e' stata utilizzata per uno stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong><br />
quantificazione della <strong>di</strong>stribuzione dei volumi cerebrali (materia bianca, materia grigia e fluido<br />
cerebro-spinale) in soggetti normali <strong>di</strong> eta' compresa tra i 20 e i 30 anni. Lo stu<strong>di</strong>o ha costituito<br />
un primo passo verso la caratterizzazione <strong>di</strong> malattie degenerative del sistema nervoso centrale,<br />
attraverso l'osservazione <strong>di</strong> <strong>di</strong>verse classi <strong>di</strong> soggetti per eta', sesso e patologie.<br />
Sviluppo <strong>di</strong> un <strong>di</strong>spositivo per il trapianto <strong>di</strong> isole pancreatiche<br />
immunoisolate<br />
Il trapianto <strong>di</strong> isole pancreatiche immunoisolate è una valida strategia per il trattamento del<br />
<strong>di</strong>abete insulino-<strong>di</strong>pendente perché le isole possono garantire un’appropriata produzione <strong>di</strong><br />
insulina e i sistemi <strong>di</strong> immunoisolamento sono in grado <strong>di</strong> prevenire il rigetto perché<br />
impermeabili alle cellule del sistema immunitario dell’ospite. Nei nostri laboratori abbiamo<br />
sviluppato un <strong>di</strong>spositivo <strong>di</strong> immunoisolamento per il trapianto <strong>di</strong> isole pancreatiche sottocute in<br />
ratti <strong>di</strong>abetici. Il <strong>di</strong>spositivo è costituito da fibre cave affiancate parallelamente con una<br />
geometria piana che ne facilita l’impianto e il recupero dal dorso. Nei <strong>di</strong>spositivi abbiamo<br />
valutato l’ultrastruttura della parete della membrana, la permeabilità al glucosio e la funzionalità<br />
in ratti <strong>di</strong>abetici. I risultati hanno <strong>di</strong>mostrato che le isole contenute nel <strong>di</strong>spositivo sono vitali e<br />
funzionanti, i metaboliti <strong>di</strong>ffondono attraverso la parete delle fibre e la membrana garantisce<br />
un’immunoprotezione alle isole bovine. L’obiettivo che ci proponiamo è quello <strong>di</strong> ottenere una<br />
maggiore durata dei <strong>di</strong>spositivi impiantati tramite una prevascolarizzazione del sito sottocutaneo<br />
che renda più favorevole l’ambiente dell’impianto.<br />
226<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Programma <strong>di</strong> trapianto <strong>di</strong> isole pancreatiche nel paziente <strong>di</strong>abetico<br />
insulino-<strong>di</strong>pendente<br />
Recenti stu<strong>di</strong> clinici hanno <strong>di</strong>mostrato che il trapianto <strong>di</strong> isole pancreatiche in pazienti <strong>di</strong>abetici<br />
può indurre la normoglicemia evitando la somministrazione <strong>di</strong> insulina e i frequenti controlli<br />
della glicemia richiesti dal trattamento convenzionale. Questo tipo <strong>di</strong> trapianto è molto efficace<br />
se viene impiantato un numero sufficiente <strong>di</strong> isole pancreatiche. Un numero <strong>di</strong> circa 5000-6000<br />
isole equivalenti/Kg del ricevente è necessario per raggiungere l’in<strong>di</strong>pendenza dall’insulina. La<br />
nostra ricerca è stata quin<strong>di</strong> finalizzata al miglioramento delle tecniche <strong>di</strong> isolamento e<br />
purificazione per ottenere il maggior numero <strong>di</strong> isole da un solo pancreas umano. A questo<br />
scopo abbiamo sviluppato un metodo automatico per il processo <strong>di</strong> <strong>di</strong>gestione e il metodo <strong>di</strong><br />
purificazione su larga scala utilizzando il gra<strong>di</strong>ente <strong>di</strong> densità con un processore cellulare, il<br />
COBE 2991. Queste tecniche permettono <strong>di</strong> ottenere un numero elevato <strong>di</strong> isole pure<br />
prevenendo la per<strong>di</strong>ta delle isole durante la fase <strong>di</strong> purificazione Per i prossimi mesi è in<br />
programma un processo <strong>di</strong> certificazione del sistema <strong>di</strong> isolamento e coltura del materiale<br />
cellulare per uso clinico.<br />
Differenziazione <strong>di</strong> cellule del pancreas precursori delle cellule beta<br />
Il <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo I è caratterizzato da <strong>di</strong>struzione autoimmnune delle cellule beta delle isole<br />
pancreatiche, con conseguente deficit <strong>di</strong> insulina e completa <strong>di</strong>pendenza dalla somministrazione<br />
<strong>di</strong> insulina esogena. La cura per il <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo I viene dal trapianto <strong>di</strong> nuove cellule beta, ma<br />
questa procedura risente della scarsità <strong>di</strong> donazioni <strong>di</strong> pancreas rispetto ai potenziali riceventi.<br />
Nei nostri laboratori abbiamo stu<strong>di</strong>ato la meto<strong>di</strong>ca per sviluppare beta-cellule sostitutive a<br />
partire da cellule progenitrici contenute nel tessuto esocrino o da cellule progenitrici presenti<br />
nelle isole pancreatiche. Dal pancreas <strong>di</strong> bovino adulto abbiamo separato isole pancreatiche<br />
bovine o tessuto esocrino che sono stati indotti a proliferare e <strong>di</strong>fferenziare con l’aggiunta al<br />
terreno <strong>di</strong> coltura <strong>di</strong> idonei fattori <strong>di</strong> crescita. L’analisi immunoistochimica e un’analisi <strong>di</strong> RT-<br />
PCR hanno evidenziato che le cellule <strong>di</strong>fferenziate contengono insulina anche se in quantità<br />
minore rispetto alle isole pancreatiche contenute in un pancreas. Questi risultati in<strong>di</strong>cano che<br />
cellule progenitrici presenti nel pancreas adulto possono essere fonte <strong>di</strong> cellule beta. L’obiettivo<br />
che ci proponiamo è quello <strong>di</strong> sviluppare nuove strategie per caratterizare e selezionare cellule<br />
progenitrici del pancreas con l’obiettivo <strong>di</strong> aumentare la quantità <strong>di</strong> cellule <strong>di</strong>fferenziate.<br />
Ingegneria del tessuto vascolare<br />
Le protesi vascolari artificiali possono essere impiegate nei pazienti solo se <strong>di</strong> calibro superiore<br />
a cinque millimetri. Protesi artificiali <strong>di</strong> calibro inferiore sono soggette ad elevato rischio<br />
trombotico. Per questo<br />
motivo si sta cercando <strong>di</strong> sviluppare in laboratorio un sostituto vascolare biologico con capacità<br />
<strong>di</strong> risposta funzionale agli stimoli che derivano dalle variazioni <strong>di</strong> portata e <strong>di</strong> sostanze<br />
circolanti. Queste proprietà possono essere ottenute con una protesi realizzata con la tecnica<br />
dell'ingegneria dei tessuti. Le ricerche in corso nei nostri laboratori sono basate sull’utilizzo <strong>di</strong><br />
una matrice <strong>di</strong> acido ialuronico esterificato come materiale biodegradabile per la generazione <strong>di</strong><br />
costrutti vascolari. Abbiamo definito le con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> coltura e <strong>di</strong> semina sia <strong>di</strong> cellule muscolari<br />
lisce che <strong>di</strong> cellule mesenchimali del midollo. Per ottenere un adeguato con<strong>di</strong>zionamento del<br />
costrutto tubolare abbiamo realizzato un bioreattore che permette <strong>di</strong> perfondere la protesi<br />
bioartificiali con flussi e pressioni <strong>di</strong> perfusione controllati, e adatti a simulare la con<strong>di</strong>zione<br />
fisiologica. Abbiamo anche messo a punto prove meccaniche <strong>di</strong> resistenza per valutare le<br />
proprieta' meccaniche della parete attenuta con la crescita in vitro.<br />
227<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
228<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> Cliniche<br />
per le Malattie Rare<br />
IRFMN<br />
Aldo e Cele Daccò Ranica (Bg)<br />
RAPPORTI<br />
ATTIVITA’ <strong>2004</strong><br />
<strong>di</strong>partimenti<br />
229<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
230<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
DIPARTIMENTO DI<br />
MEDICINA RENALE<br />
PERSONALE<br />
IRFMN<br />
Capo Dipartimento Piero RUGGENENTI, Dr.Med.Chir.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biostatistica<br />
Capo Laboratorio Annalisa PERNA, Dr.Sci.Stat.<br />
Unità <strong>di</strong> Monitoraggio dei Farmaci<br />
Capo Unità Giulia GHERARDI, Dipl.Liceo Scientifico<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Farmacocinetica e Chimica Clinica<br />
Capo Laboratorio Flavio GASPARI, Dr.Chim.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Fasi Avanzate dello Sviluppo dei Farmaci nell’Uomo<br />
Capo Laboratorio Norberto PERICO, Dr.Med.Chir.<br />
Unità <strong>di</strong> Fasi Precoci dell’Utilizzo dei Farmaci nell’Uomo<br />
Capo Unità Aneliya PARVANOVA, Dr.Med.Chir.<br />
231<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
Il Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Renale è stato istituito nel 1999 presso il Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong><br />
Cliniche per le Malattie Rare “Aldo e Cele Daccò” – Villa Camozzi, Ranica per coor<strong>di</strong>nare le<br />
attività <strong>di</strong> tre laboratori e due unità.<br />
Il Dipartimento si de<strong>di</strong>ca in principal modo allo stu<strong>di</strong>o dei meccanismi <strong>di</strong> progressione delle<br />
nefropatie croniche e alla definizione <strong>di</strong> nuove strategie <strong>di</strong> prevenzione/trattamento della<br />
nefropatia <strong>di</strong>abetica, delle nefropatie croniche non <strong>di</strong>abetiche, della nefropatia cronica del<br />
trapianto, delle complicanze car<strong>di</strong>ovascolari del paziente <strong>di</strong>abetico, nefropatico, <strong>di</strong>alizzato o<br />
trapiantato e delle microangiopatie trombotiche.<br />
Gli obiettivi principali <strong>di</strong> queste attività sono:<br />
1. Identificare strategie <strong>di</strong> screening e intervento atte a prevenire l’insorgenza della nefropatia e<br />
<strong>di</strong> altre complicanze croniche nel paziente <strong>di</strong>abetico e/o iperteso<br />
2. Definire strategie <strong>di</strong> intervento per prevenire o rallentare la progressione delle nefropatie<br />
croniche ed eventualmente ottenere una remissione/regressione del danno renale<br />
3. Ottimizzare i protocolli <strong>di</strong> terapia immunosoppressiva nel trapianto col fine ultimo <strong>di</strong> ottenere<br />
la tolleranza dell’organo trapiantato e identificare nuovi criteri <strong>di</strong> selezione dei donatori per<br />
aumentare il pool <strong>di</strong> organi <strong>di</strong>sponibili.<br />
Questi obiettivi vengono perseguiti attraverso le seguenti modalità operative principali:<br />
1. stu<strong>di</strong> pilota <strong>di</strong> fisiopatologia e farmacologia clinica realizzati interamente presso il Centro <strong>di</strong><br />
<strong>Ricerche</strong> Cliniche per testare nuove ipotesi patogenetiche e nuove modalità <strong>di</strong> intervento;<br />
2. realizzazione <strong>di</strong> network e coor<strong>di</strong>namento <strong>di</strong> trial multicentrici nazionali e internazionali per<br />
verificare l’efficacia <strong>di</strong> nuovi trattamenti identificati nelle fasi <strong>di</strong> cui in a.<br />
3. metanalisi e sviluppo <strong>di</strong> modelli probabilistici per testare fattori <strong>di</strong> rischio e trattamenti su<br />
gran<strong>di</strong> campioni <strong>di</strong> pazienti e verificarne il valore pre<strong>di</strong>ttivo e l’efficacia a livello in<strong>di</strong>viduale.<br />
Molte <strong>di</strong> queste attività si avvalgono <strong>di</strong> una stretta collaborazione con il Dipartimento <strong>di</strong><br />
Me<strong>di</strong>cina Molecolare, il Dipartimento <strong>di</strong> Bioingegneria e il Dipartimento Pubblico-Privato <strong>di</strong><br />
Me<strong>di</strong>cina Specialistica e dei Trapianti col fine ultimo <strong>di</strong> programmare le attività <strong>di</strong> ricerca<br />
clinica del Dipartimento alla luce delle conoscenze che derivano dalla ricerca <strong>di</strong> base e delle<br />
problematiche che emergono dalla attività clinica <strong>di</strong> routine.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Definizione e validazione <strong>di</strong> trattamenti specifici atti a prevenire l'insorgenza delle nefropatie in<br />
pazienti affetti da <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2;<br />
Definizione e validazione <strong>di</strong> nuovi protocolli integrati <strong>di</strong> trattamento atti a rallentare la<br />
progressione e/o ottenere la remissione/regressione delle nefropatie croniche <strong>di</strong>abetiche e non<br />
<strong>di</strong>abetiche;<br />
Caratterizzazione dell’effetto antiproteinurico, nefroprotettivo e car<strong>di</strong>oprotettivo dell’inibizione<br />
massimale e polifarmacologica del sistema renina angiotensina;<br />
Identificazione <strong>di</strong> fattori <strong>di</strong> rischio acquisiti o congeniti per lo sviluppo <strong>di</strong> complicanze croniche<br />
del <strong>di</strong>abete;<br />
Definizione e validazione <strong>di</strong> trattamenti specifici per la nefropatia membranosa i<strong>di</strong>opatica e la<br />
sindrome emolitico uremica associata a deficit <strong>di</strong> fattore H;<br />
232<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Definizione e validazione <strong>di</strong> nuove meto<strong>di</strong>che <strong>di</strong> laboratorio e <strong>di</strong> modelli pre<strong>di</strong>ttivi per il<br />
monitoraggio e ottimizzazione della terapia immunosoppressiva nel trapianto;<br />
Ottimizzazione <strong>di</strong> procedure <strong>di</strong> <strong>di</strong>agnostica e monitoraggio ecodoppler delle complicanze<br />
vascolari del paziente trapiantato ed emo<strong>di</strong>alizzato;<br />
Finalizzazione ed avvio <strong>di</strong> trials clinicici multicentrici finalizzati alla prevenzione della<br />
nefropatia <strong>di</strong>abetica, della progressione delle nefropatie croniche proteinuriche e del rigetto<br />
acuto e cronico del trapianto e alla identificazione <strong>di</strong> fattori <strong>di</strong> rischio e promotori <strong>di</strong> danno<br />
d’organo;<br />
IRFMN<br />
Computerizzazione delle procedure <strong>di</strong> acquisizione e monitoraggio dei dati nella conduzione <strong>di</strong><br />
trials clinici controllati.<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
Lombar<strong>di</strong>a<br />
- Ospedale Fenaroli, Alzano Lombardo (BG)<br />
- Azienda Ospedaliera OO.RR., Bergamo<br />
- Ospedale Caduti Bollatesi, Bollate (MI)<br />
- Azienda Ospedaliera Spedali Civili, Brescia<br />
- Ospedale San Biagio, Clusone (BG)<br />
- Ospedale S. Anna, Como<br />
- Ospedale <strong>di</strong> Desio (MI)<br />
- Ospedale Briolini, Gazzaniga (BG)<br />
- Azienda Ospedaliera <strong>di</strong> Melegnano, Melegnano – Vizzolo Predabissi (MI)<br />
- Ospedale San Leopoldo Man<strong>di</strong>c, Merate (LC)<br />
- Ospedale Maggiore Policlinico, Milano<br />
- Ospedale Provinciale San Carlo Borromeo, Milano<br />
- Azienda Ospedaliera - Polo Universitario L. Sacco, Milano<br />
- Ospedale Fatebenefratelli, Milano<br />
- Ospedale Niguarda Ca' Granda, Milano<br />
- Clinica Pe<strong>di</strong>atrica “G. e D. De Marchi’, Milano<br />
- Ospedale San Raffaele, Milano<br />
- Ospedale Pe<strong>di</strong>atrico <strong>di</strong> Montichiari, Montichiari (BS)<br />
- Ospedale San Gerardo, Monza (MI)<br />
- Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Pavia, Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Interna e Terapia Me<strong>di</strong>ca, Pavia<br />
- Centro Anti<strong>di</strong>abetico, Ponte San Pietro (BG)<br />
- Azienda Ospedaliera Ospedale Treviglio Caravaggio, Romano <strong>di</strong> Lombar<strong>di</strong>a (BG)<br />
- <strong>Istituto</strong> clinico Humanitas, Rozzano (MI)<br />
- Ospedale Bolognini, Seriate (BG)<br />
- Azienda Ospedaliera Ospedale Treviglio Caravaggio, Treviglio (BG)<br />
- Ospedale Regionale <strong>di</strong> Circolo Fondazione Macchi, Varese<br />
- USL 60, Unità Operativa <strong>di</strong> Nefrologia e Dialisi, Vimercate (LC)<br />
Piemonte<br />
- Azienda Ospedaliera Santa Croce e Carli, Cuneo<br />
- Ospedale Civile, Ivrea (TO)<br />
233<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
- Azienda Ospedaliera San Giovanni Battista, Torino<br />
- Ospedale Mauriziano Umberto I, Torino<br />
- Ospedale Regina Margherita, Torino<br />
- Ospedale Martini, Torino<br />
- Ospedale Luigi Einau<strong>di</strong>, Torino<br />
Veneto, Trentino Alto-A<strong>di</strong>ge e Friuli Venezia Giulia<br />
- Ospedale Civile, Belluno<br />
- Ospedale S. Giacomo Apostolo, Castelfranco Veneto, Treviso<br />
- Ospedale Provinciale Umberto I, Mestre (VE)<br />
- Ospedale Giustinianeo, Padova<br />
- Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Padova, <strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Anatomia Patologica, Padova<br />
- Ospedale Civile, Padova<br />
- Ospedale S. Camillo dé Lellis, Schio (VI)<br />
- Ospedale Regionale Santa Maria dei Battuti, Treviso<br />
- Ospedale Civile Maggiore Borgo Trento, Verona<br />
- Ospedale Policlinico Borgo Roma, Verona<br />
- Ospedale Civile San Bortolo, Vicenza<br />
- Ospedale Santa Chiara, Trento<br />
- <strong>Istituto</strong> Scientifico per l'infanzia Burlo Garofalo, Trieste<br />
- Ospedale S. Antonio, S. Daniele del Friuli, U<strong>di</strong>ne<br />
- Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> U<strong>di</strong>ne, Centro Trapianti Fegato-Rene-Pancreas, U<strong>di</strong>ne<br />
Liguria, Emilia Romagna e Toscana<br />
- Azienda Ospedaliera San Martino, Genova<br />
- <strong>Istituto</strong> “G. Gaslini”, Genova<br />
- Ospedale S. Orsola Malpighi, Bologna<br />
- Ospedale Policlinico, Modena<br />
- <strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Clinica Me<strong>di</strong>ca e Nefrologia, Parma<br />
- Ospedale Santa Maria delle Croci, Ravenna<br />
- Arcispedale Santa Maria Nuova, Reggio Emilia<br />
- Ospedale Santa Maria Annunziata, Bagno a Ripoli, Firenze<br />
- Azienda Ospedaliera Careggi-Monna Tessa, Firenze<br />
- Ospedale Nuovo “S. Giovanni <strong>di</strong> Dio”, Firenze<br />
- Azienda Ospedaliera Meyer, Firenze<br />
- Ospedale <strong>di</strong> S. Miniato, S. Miniato (FI)<br />
Marche<br />
- Ospedale Regionale Torrette, Torrette <strong>di</strong> Ancona, Ancona<br />
- Azienda Ospedaliera S. Salvatore, Pesaro<br />
Lazio, Basilicata e Campania<br />
- Ospedale Polispecializzato, Anzio, Roma<br />
- Ospedale Fatebenefratelli, Roma<br />
- Ospedale Pe<strong>di</strong>atrico Bambino Gesù, Roma<br />
- Policlinico Gemelli, Roma<br />
- Ospedale Policlinico Umberto I, Roma<br />
- Ospedale San Camillo Forlanini, Roma<br />
- Università Cattolica del Sacro Cuore, Roma<br />
- Dipartimento <strong>di</strong> Biopatologia Umana, Università La Sapienza, Roma<br />
- Ospedale Grande degli Infermi, Viterbo<br />
- Ospedale Riuniti, Matera<br />
IRFMN<br />
234<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
- Azienda Ospedaliera Ospedale Civile, Caserta (NA)<br />
- Università Federico II <strong>di</strong> Napoli, Cattedra <strong>di</strong> Nefrologia, Napoli<br />
- Azienda Ospedaliera “S. G. <strong>di</strong> Dio e Ruggi d’Aragona”, Salerno<br />
Abruzzo<br />
- Ospedale G. Bernabeo, Ortona, Chieti<br />
- Presi<strong>di</strong>o Ospedaliero “San Massimo”, Penne (PE)<br />
- Presi<strong>di</strong>o Ospedaliero "G.Mazzini", Teramo<br />
Puglia, Calabria, Sicilia e Sardegna<br />
- Ospedale Regionale “Miulli”, Acquaviva delle Fonti, Bari<br />
- Ospedale Pe<strong>di</strong>atrico “Giovanni XXIII”, Bari<br />
- Ospedale Policlinico, Bari<br />
- Azienda Ospedaliera V.Fazzi, Lecce<br />
- Ospedale Casa Sollievo dalla Sofferenza, S.Giovanni Rotondo (FG)<br />
- Presi<strong>di</strong>o Ospedaliero <strong>di</strong> Martina Franca, Martina Franca, Taranto<br />
- A.U.S.L. TA/1 - Presi<strong>di</strong>o Ospedaliero, Taranto<br />
- Azienda Ospedaliera Ospedale Pugliese Ciaccio, Catanzaro<br />
- Ospedale dell'Annunziata, Cosenza<br />
- Centro <strong>di</strong> Fisiologia Clinica del CNR, Divisione <strong>di</strong> Nefrologia, Reggio Calabria<br />
- Azienda Ospedaliera “Bianchi-Melacrino-Morelli”, Reggio Calabria<br />
- Ospedale “N. Giannettasio”, Rossano Calabro, Cosenza<br />
- Nuovo Presi<strong>di</strong>o Ospedaliero, Acireale, Catania<br />
- Azienda Ospedaliera "Ferrarotto", Catania<br />
- Ospedale Zonale Maggiore, Mo<strong>di</strong>ca (RG)<br />
- Ospedale Civico, Palermo<br />
- Ospedale “V. Cervello”, Palermo<br />
- Azienda Ospedaliera "Umberto I", Siracusa<br />
- Azienda Sanitaria G. Brotzu, Ospedale San Michele, Cagliari<br />
- <strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> Clinica e Biologia dell’Età Evolutiva, Cagliari<br />
- Ospedale A. Segni, Ozieri, Sassari<br />
- Ospedale SS. Annunziata, Sassari<br />
- Ospedale Policlinico, Sassari<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
- University Hospital Ziekenhuius, Edegem Antwerpen, Belgio<br />
- Clinique de Nephrologie-Dialyse Chu Brugmann, Bruxelles, Belgio<br />
- University Ziekenhuius Gent, Gent, Belgio<br />
- U.Z. Gasthuisberg, Leuven, Belgio<br />
- General Hospital Maria Middelares, Sint Niklaas, Belgio<br />
- University of Groningen, AV Groningen, Olanda<br />
- Academisch Ziekenhuis, Maastricht, Olanda<br />
- Thracian University, Stara Zagora, Bulgaria<br />
- The Birmingham Children's Hospital, Birmingham, Inghilterra<br />
- Guy’s Hospital, London, Inghilterra<br />
- Manchester Children's Hospital, Manchester, Inghilterra<br />
IRFMN<br />
235<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
- Nottingham City Hospital, Nottingham, Inghilterra<br />
- Aalborg Hospital, Aalborg, Denmark<br />
- Nephrological Department, University of Copenaghen, Copenaghen, Danimarca<br />
- Steno Diabetes Center, Gentofte, Danimarca<br />
- Department of Nephrology, Odense University Hospital, Odense, Danimarca<br />
- Department of Nephrology, Sahlgrenska University Hospital, Goteborg, Svezia<br />
- Ospedale San Giovanni, Bellinzona Svizzera<br />
- Department of Nephrology, University of Wien, Wien, Austria<br />
- Carl Thiem Klinikum, Cottbus, Germania<br />
- Klinikum der Johann Wolfgang, Frankfurt am Main, Germania<br />
- Arbeitsgruppe fyr Biomolekulare Me<strong>di</strong>zin, Hamburg, Germania<br />
- Univeristatklinik Heidelberg, Heidelberg, Germania<br />
- Me<strong>di</strong>zinische Klinik, Mannheim, Germania<br />
- Luitpold Krankenhaus Med. Universitatklinik/Dialyse, Wurzburg, Germania<br />
- Hospital Ntra Sra. de Sonsoles, Avila, Spagna<br />
- Hospitalet de Llobregat, Institut Català de la Salut, Barcellona, Spagna<br />
- Fundacion Jimenez Diaz, Madrid, Spagna<br />
- Hospital Clinico Martin Logas, Madrid, Spagna<br />
- Hospital 12 de Octubre, Madrid, Spagna<br />
- Hospital Gregorio Maranon, Madrid, Spagna<br />
- Hospital La Paz, Madrid, Spagna<br />
- Hospital Puerta de Hierro, Madrid, Spagna<br />
- Hospital Ramon y Cajal, Madrid, Spagna<br />
- Hospital Severo Ochoa, Leganes, Madrid, Spagna<br />
- Hospital Universitario de Tarragona Joan XXIII, Tarragona, Spagna<br />
- Hospital Garcia de Orta, Almada, Portugal<br />
- Brigham & Women's Hospital, Boston, USA<br />
- Hennepin County Me<strong>di</strong>cal Center, Minneapolis, USA<br />
- SIU School of Me<strong>di</strong>cine, Springfield, USA<br />
- The Toronto Hospital, Toronto, Canada<br />
- INCUCAI, Buenos Aires, Argentina<br />
- Hospital Italiano de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina<br />
- Hospital Regional de Val<strong>di</strong>via, Val<strong>di</strong>via, Cile<br />
- Soroka Me<strong>di</strong>cal Center, Beer Sheva, Israele<br />
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Journal of the American Society of Nephrology (Piero Ruggenenti)<br />
Journal of Nephrology (Piero Ruggenenti)<br />
IRFMN<br />
236<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
American Journal of Kidney Disease<br />
American Journal of Pathology<br />
American Journal of Transplantation<br />
Blood Purification<br />
Diabetes Care<br />
Experimental opinion on pharmacotherapy<br />
Journal of American Society of Nephrology<br />
Journal of Hypertension<br />
Journal of Internal Me<strong>di</strong>cine<br />
Journal of Nephrology<br />
Kidney International<br />
Nature Me<strong>di</strong>cine<br />
Nephrology<br />
Nephrology Dialysis and Transplantation<br />
Pe<strong>di</strong>atric Nephrology<br />
Pharmacogenomics<br />
The Lancet<br />
The New England Journal of Me<strong>di</strong>cine<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
DIPARTIMENTO<br />
IRFMN<br />
3rd European Renal Genome Network (ReGeNet). “Progressive Renal Disease”. 23 Gennaio<br />
<strong>2004</strong>, Naarden, Netherlands<br />
Convegno. Infermieri e sperimentazione clinica. “L’infermiere e il monitoraggio degli stu<strong>di</strong><br />
clinici”. 28 Gennaio <strong>2004</strong>, Milano<br />
3rd Genoa Meeting on Hypertension Diabetes and Renal Diseases. “ACE-I and renal protection<br />
in non <strong>di</strong>abetic patients: the trialistmetanalysis”. 27 Febbraio <strong>2004</strong>, Genova<br />
Lezione. Master in Me<strong>di</strong>cina del Trapianto, Università degli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Milano-Bicocca.<br />
“Farmacogenetica e farmacogenomica”. 8 Marzo <strong>2004</strong>, Bergamo<br />
Corso <strong>di</strong> ecografia ed ecocolor doppler renale. Sessione <strong>di</strong> Prima Formazione. “Principi fisici<br />
degli ultrasuoni artefatti”. 22-25 Marzo <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
Lezione. Master in Me<strong>di</strong>cina del Trapianto, Università degli Stu<strong>di</strong> Milano-Bicocca. “Past,<br />
present and future of xenotransplantation”. 16 Aprile <strong>2004</strong>, Bergamo<br />
XIII Congreso Latinoamericano de nefrologia e hipertension – SLANH <strong>2004</strong>. “Mycophenolate<br />
mofetil in organ transplantation”. 21-24 Aprile <strong>2004</strong>, Punta del Este, Uruguay<br />
XIII Congreso Latinoamericano de nefrologia e hipertension – SLANH <strong>2004</strong>. “Steroid<br />
<strong>di</strong>scontinuation after renal transplant”. 21-24 Aprile <strong>2004</strong>, Punta del Este, Uruguay<br />
237<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
XIII Congreso Latinoamericano de nefrologia e hipertension – SLANH <strong>2004</strong>. “Treatment of the<br />
progression of renal <strong>di</strong>sease”. 21-24 Aprile <strong>2004</strong>, Punta del Este, Uruguay<br />
XIII Congreso Latinoamericano de nefrologia e hipertension – SLANH <strong>2004</strong>.<br />
“Microalbuminuria as a renal and car<strong>di</strong>ovascular risk factor in type 2 <strong>di</strong>abetes”. 21-24 Aprile<br />
<strong>2004</strong>, Punta del Este, Uruguay<br />
Giornata <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o. Prelievo e trapianto <strong>di</strong> organi. “Storia e valenza del trapianto”. 5 Maggio<br />
<strong>2004</strong>, Bergamo<br />
17th AGM of the EDNSG. “Insulin resistance in <strong>di</strong>abetic nephropathy: a cross-sectional, case-<br />
control study of 158 type 2 <strong>di</strong>abetic patients with <strong>di</strong>fference degrees of albuminuria”. 7-8<br />
Maggio <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
17th AGM of the EDNSG. “Session 5 – Clinical Observations II. Chairmen Piero Ruggenenti”.<br />
7-8 Maggio <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
Advanced Heart Failure and Acute Heart Failure. “Treatment of renal failure”. 14-15 Maggio<br />
<strong>2004</strong>, Bergamo<br />
Corso <strong>di</strong> Aggiornamento Multi<strong>di</strong>sciplinare. Advanced Clinical Evidence <strong>2004</strong>. “Aspetti<br />
terapeutici”. 14-15 Maggio <strong>2004</strong>, Foggia<br />
Seminario <strong>di</strong> Aggiornamento per Me<strong>di</strong>ci <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Generale. “Il trattamento intensivo del<br />
paziente <strong>di</strong>abetico nefropatico. La terapia farmacologica della nefropatia <strong>di</strong>abetica”. 19 Maggio<br />
<strong>2004</strong>, Misano Gera D’Adda, Bergamo<br />
Convegno. La nefropatia ischemica aterosclerotica. “Le statine nelle patologie aterovascolari”.<br />
21 Maggio <strong>2004</strong>, Piacenza.<br />
XXXV Congresso Nazionale <strong>di</strong> Car<strong>di</strong>ologia dell’ANMCO. Simposio Satellitare. Dibattito<br />
aperto sulla terapia del rischio car<strong>di</strong>ovascolare. “Vale la pena nelle nefropatie <strong>di</strong> associare ACEinibitori<br />
e sartani?”. 25 Maggio <strong>2004</strong>, Firenze<br />
Congresso Nazionale del Gruppo <strong>di</strong> Reumatologia Pe<strong>di</strong>atrica della SIP. “La nefropatia lupica”.<br />
27-29 Maggio <strong>2004</strong>, Trieste<br />
Convegno. Nefropatie croniche e complicanze car<strong>di</strong>ovascolari: epidemiologia, patogenesi,<br />
prevenzione e trattamento. Corso rivolto a car<strong>di</strong>ologi <strong>di</strong>abetologi e nefrologici. “Implicazioni<br />
cliniche, sociali ed economiche” 4-5 Giugno <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
Convegno. Nefropatie croniche e complicanze car<strong>di</strong>ovascolari: epidemiologia, patogenesi,<br />
prevenzione e trattamento. Corso rivolto a car<strong>di</strong>ologi <strong>di</strong>abetologi e nefrologici. “Pre<strong>di</strong>ttori <strong>di</strong><br />
progressione e prevenzione del rischio in<strong>di</strong>viduale”. 4-5 Giugno <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
Convegno. Nefropatie croniche e complicanze car<strong>di</strong>ovascolari: epidemiologia, patogenesi,<br />
prevenzione e trattamento. Corso rivolto a car<strong>di</strong>ologi <strong>di</strong>abetologi e nefrologici. “Disegno <strong>di</strong><br />
trials clinici e modelli <strong>di</strong> quantificazione dell’end-point”. 4-5 Giugno <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
Convegno. Nefropatie croniche e complicanze car<strong>di</strong>ovascolari: epidemiologia, patogenesi,<br />
prevenzione e trattamento. Corso rivolto a car<strong>di</strong>ologi <strong>di</strong>abetologi e nefrologici. “Statine:<br />
trattamento delle <strong>di</strong>slipidemie ed effetto renoprotettivo”. 4-5 Giugno <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
238<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Convegno. Nefropatie croniche e complicanze car<strong>di</strong>ovascolari: epidemiologia, patogenesi,<br />
prevenzione e trattamento. Corso rivolto a car<strong>di</strong>ologi <strong>di</strong>abetologi e nefrologici. “La <strong>di</strong>agnostica<br />
eco-Doppler”. 4-5 Giugno <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
Convegno. Nefropatie croniche e complicanze car<strong>di</strong>ovascolari: epidemiologia, patogenesi,<br />
prevenzione e trattamento. Corso rivolto a car<strong>di</strong>ologi <strong>di</strong>abetologi e nefrologici. “Prevenzione e<br />
trattamento delle nefropatia <strong>di</strong>abetica e delle complicanze car<strong>di</strong>ovascolari: ACE inibitori o<br />
antagonisti dell’angiotensina?”. 4-5 Giugno <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
Convegno. Nefropatie croniche e complicanze car<strong>di</strong>ovascolari: epidemiologia, patogenesi,<br />
prevenzione e trattamento. Corso rivolto a car<strong>di</strong>ologi <strong>di</strong>abetologi e nefrologici. “Farmaci attivi<br />
sul sistema renina-angiotensina: aumento delle dosi o associazione <strong>di</strong> principi attivi <strong>di</strong>versi?”. 4-<br />
5 Giugno <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
Convegno. Nefropatie croniche e complicanze car<strong>di</strong>ovascolari: epidemiologia, patogenesi,<br />
prevenzione e trattamento. Corso rivolto a car<strong>di</strong>ologi <strong>di</strong>abetologi e nefrologici: “Tavola<br />
Rotonda: Come tratterei il mio paziente”. 4-5 Giugno <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
Convegno. 1st European workshop on the assessment of <strong>di</strong>agnostic performance. “Novel<br />
genetic and <strong>di</strong>agnostic tools for renal <strong>di</strong>seases”. 7-9 Luglio <strong>2004</strong>, Milano<br />
Convegno. Attualità in tema <strong>di</strong> prevenzione dell’uremia. “Nefroprotezione farmacologica”. 2<br />
Ottobre <strong>2004</strong>, U<strong>di</strong>ne<br />
XXXIV Spanish National Congress of Nephrology. “Calcium channel blockers and RAS<br />
inhibitors for nephroprotection”. 3 Ottobre <strong>2004</strong>, Tenerife, Spain<br />
Meeting. Il rene nelle emopatie. “Sindrome emolitico-uremica”. 8 Ottobre <strong>2004</strong>, Catania<br />
Corso <strong>di</strong> ecografia ed ecocolor doppler renale. Sessione <strong>di</strong> Perfezionamento “Le complicanze<br />
del trapianto renale”. 11-14 Ottobre <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
Progress in Bioengineering and the vascular endothelium basic and clinical aspects. Advances<br />
in management of malignancies. Fifth International Congress. “Systemic endothelial<br />
activation”. 14-15 Ottobre <strong>2004</strong>, Pisa<br />
Renoprotection, atherosclerosis and the treatment of proteinuria. “ The toxic effects of<br />
proteinuria”. 20 Ottobre <strong>2004</strong>, Aarhus, Denmark<br />
American Society of Nephrology 37th Annual Meeting and Scientific Exposition. ISN<br />
COMGAN Research Committee Meeting. “Early detection and intervention program for<br />
chronic renal and car<strong>di</strong>ovascular <strong>di</strong>sease in the Republic of Moldova”. 29 Ottobre – 1<br />
Novembre <strong>2004</strong>, St. Louis, Missouri, USA<br />
American Society of Nephrology 37th Annual Meeting and Scientific Exposition. ISN<br />
COMGAN Research Committee Meeting. “A community based screening and intervention<br />
program for chronic renal <strong>di</strong>seases in China”. 29 Ottobre – 1 Novembre <strong>2004</strong>, St. Louis,<br />
Missouri, USA<br />
ASN. “Mechanism of Action: Animal Stu<strong>di</strong>es”. 31 Ottobre <strong>2004</strong>. St. Louis, Missouri, USA<br />
239<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ASN BASIC and Clinical Science Symposium. “BENEDICT trial”. 1 Novembre <strong>2004</strong>, St.<br />
Louis, Missouri, USA<br />
IRFMN<br />
XXII Congresso Interregionale <strong>2004</strong> della Società Italiana <strong>di</strong> Nefrologia – Sezione Piemonte e<br />
Valle D’Aosta. “L’insufficienza renale cronica”. 6 Novembre <strong>2004</strong>, Alba<br />
Convegno. Infezioni e trapiano d’organo. “Farmaci antibatterici, antifungini e antivirali e terapia<br />
antirigetto: interazioni farmacocinetiche”. 9 Novembre <strong>2004</strong>, Ranica, Bergamo<br />
Vicenza International Course on Kidney Transplantation: Prevention of graft rejection.<br />
“Chronic allograft nephropathy: a multiple approach to target non-immunologic factors”. 12<br />
Novembre <strong>2004</strong>, Vicenza<br />
Symposium <strong>2004</strong> Amsterdam. Prevention of progressive renal failure: its global impact. “Early<br />
detection and intervention program for chronic renal and car<strong>di</strong>ovascular <strong>di</strong>sease in the Republic<br />
of Moldova”. 13-15 Novembre <strong>2004</strong>, Amsterdam, Netherlands<br />
SLANT-ISN-COMGAN Nephrology Update. “Pathophysiology of progression in proteinuric<br />
nephropathies”. 22 Novembre <strong>2004</strong>, Colombo, Sri Lanka<br />
SLANT-ISN-COMGAN Nephrology Update. “Preventing <strong>di</strong>sease progression in your<br />
practice”. November 22, <strong>2004</strong>, Colombo, Sri Lanka<br />
35th Annual Conference of In<strong>di</strong>an Society of Nephrology. “A preventing recipe of kidney<br />
<strong>di</strong>sease progression for your office”. 18-20 Novembre <strong>2004</strong>, Varanasi, In<strong>di</strong>a<br />
35th Annual Conference of In<strong>di</strong>an Society of Nephrology. “Pathophysiology of progressive<br />
<strong>di</strong>sease in proteinuric nephropathies”. 18-20 Novembre <strong>2004</strong>, Varanasi, In<strong>di</strong>a<br />
Convegno. Appropriatezza nell’utilizzo clinico delle statine. “In<strong>di</strong>cazioni e impiego clinico<br />
delle statine”. 11 Dicembre <strong>2004</strong>, Aosta<br />
3rd ISN –Update Course in Nephrology. “Pathophysiology and mechanisms of progression of<br />
renal <strong>di</strong>sease”. 11 Dicembre <strong>2004</strong>, Dubai, Emirati Arabi<br />
3rd ISN –Update Course in Nephrology. “Prevention of progression and remission/regression<br />
strategies: can we do better now than 5 years ago?”. 11 Dicembre <strong>2004</strong>, Dubai, Emirati Arabi<br />
SIHTA Symposium – Abbott. “Treatment and prevention of <strong>di</strong>abetic nephropathy”. 17<br />
Dicembre <strong>2004</strong>, Paris, Francia<br />
240<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Abbott GmbH & Co.<br />
Aventis Pharma SA<br />
Chiesi Farmaceutici SpA<br />
Farmaceutici Damor SpA<br />
Glaxo SmithKline<br />
Merck Sharp & Dohme Italia SpA<br />
Nicox SA<br />
Novartis Farma<br />
Roche SpA<br />
Sangstat<br />
Schering<br />
Wyeth Lederle<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
N. Perico, P. Ruggenenti, E. Gotti, F. Gaspari, D. Cattaneo, U. Valente, M. Salvadori, G. Segoloni, D.Donati, S.<br />
Sandrini, M. Ganeva, B. D. Dimitrov, G. Remuzzi on behalf of the MY.S.S. Study Investigators. In renal<br />
transplantation blood cyclosporine levels soon after surgery act as a major determinant of rejection: Insights from the<br />
MY.S.S. Trial. Kidney International <strong>2004</strong>;65:1084-1090<br />
A. Benigni, E. Gagliar<strong>di</strong>ni, S. Tomasoni, M. Abbate, P. Ruggenenti, R. Kalluri, G. Remuzzi. Selective impairment of<br />
gene expression and assembly of nephrin in human <strong>di</strong>abetic nephropathy. Kidney International <strong>2004</strong>;65:2193-2200.<br />
G. Remuzzi, M.D. Lesti, E. Gotti, M. Ganeva, B. Dimitrov, B. Ene-Iordache, G, Gherar<strong>di</strong>, D. Donati, M. Salvadori,<br />
S. Sandrini, U. Valente, G. Segoloni, G. Mourad, S. Federico, P. Rigotti, V. Sparacino, J. Bosmans, N. Perico, P.<br />
Ruggenenti, for the MYSS Study Group. Mycophenolate mofetil versus azathioprine for prevention of acute rejection<br />
in renal transplantation (MYSS): a randomized trial. The Lancet <strong>2004</strong>;364:503-512.<br />
A. Parvanova, I. Iliev, M. Filipponi, B.D. Dimitrov, M. Vedovato, A. Tiengo, R. Trevisan, G. Remuzzi, P.<br />
Ruggenenti. Insulin resistance and proliferative retinopathy: a cross-sectional, case control study in 115 patients with<br />
type 2 <strong>di</strong>abetes. The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism <strong>2004</strong>;89:4371-4376<br />
P. Ruggenenti, A. Fassi, A. Parvanova, S. Bruno, I. Iliev, V. Brusegan, N. Rubis, G. Gherar<strong>di</strong>, F. Arnol<strong>di</strong>, M.<br />
Ganeva, B. Ene-Iordache, F. Gaspari, A. Perna, A. Bossi, R. Trevisan, A.R. Dodesini, G. Remuzzi for the Bergamo<br />
Nephrologic Diabetes Complications Trial (BENEDICT) Investigators. Preventing microalbuminuria in type 2<br />
<strong>di</strong>abetes. N Engl J Med <strong>2004</strong>;351:1941-1951.<br />
G.D. Laverman, G. Remuzzi, P. Ruggenenti. Ace Inhibition versus Angiotensin Receptor VBlockade: WhichIs Better<br />
for Renal and Car<strong>di</strong>ovascular Protection?. J Am Soc Nephrol <strong>2004</strong>, 15: S64-S70.<br />
S. Bruno, G. Remuzzi, P. Ruggenenti. Transplant Renal Artery Stenosis. J Am Soc Nephrol <strong>2004</strong>; 15: 134-141.<br />
P. Ruggenenti. Angiotensin-Converting Enzyme Inhibition and Angiotensin II Antaginism in Non<strong>di</strong>abetic Chronic<br />
nephropathies. Seminars in Nephrology <strong>2004</strong>; 24: 158-167.<br />
P. Ruggenenti, G. Remuzzi. Introduction. Seminars in Nephrology <strong>2004</strong>; 24: 91-92.<br />
N. Perico, P. Ruggenenti, G. Remuzzi. Losartan in <strong>di</strong>abetic nephropathy. Expert Rev. Car<strong>di</strong>ovasc. Ther. <strong>2004</strong>; 2(4):<br />
473-483.<br />
Codreanu, P. Crave<strong>di</strong>, G. Remuzzi, P. Ruggenenti. Dual Kidney Transplantation. Transplantationsme<strong>di</strong>zin <strong>2004</strong>; 16:<br />
241<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
13-18.<br />
IRFMN<br />
G. Remuzzi, C. Chiurchiu, P. Ruggenenti. Proteinuria pre<strong>di</strong>cting outcome in renal <strong>di</strong>sease: non<strong>di</strong>abetic nephropathies<br />
(REIN). Kidney Int <strong>2004</strong>;66:S90-S96.<br />
Schieppati A, Perna A, Zamora J, Giuliano AG, Braun N, Remuzzi G. Immunosuppressive treatment for i<strong>di</strong>opathic<br />
membranous nephropathy in adults with nephrotic syndrome. Cochrane Database Syst Rev. Oct 18(4):CD004293,<br />
<strong>2004</strong><br />
Perna A, Schieppati A, Zamora J, Giuliano AG, Braun N, Remuzzi G. Immunosuppressive treatment for i<strong>di</strong>opathic<br />
membranous nephropathy: a systematic review. Am J Kidney Dis. 44(3): 385-401, <strong>2004</strong><br />
Remuzzi G, Ruggenenti P, Perna A, Dimitrov BD, de Zeeuw D, Hille DA, Shahinfar S, Carides GW, Brenner BM for<br />
the RENAAL Study Group. Continuum of renoprotection with losartan at all stages of type 2 <strong>di</strong>abetic nephropathy: a<br />
post hoc analysis of the RENAAL trial results. J Am Soc Nephrol 15(12):3117-25, <strong>2004</strong><br />
Ruggenenti P, Lesti M, Ganeva M, Dimitrov BD, Remuzzi For The Myss Study Group G. MYSS: should we alter<br />
clinical practice? Lancet <strong>2004</strong>;364(9450): 2017-8<br />
Lanterna LA, Tre<strong>di</strong>ci G, Dimitrov BD, Biroli F. Treatment of Unruptured Cerebral Aneurysms by Embolization with<br />
Guglielmi Detachable Coils: Case-fatality, Morbi<strong>di</strong>ty, and Effectiveness in Preventing Blee<strong>di</strong>ng-A Systematic<br />
Review of the Literature. Neurosurgery <strong>2004</strong> Oct;55(4):767-78.<br />
Dimitrov BD, Markova S, Peeva KG, Dimitrova SM. Regional patterns of most frequent malignant tumours over the<br />
period 1982-1990 (Oncologic Dispensary, Stara Zagora, Bulgaria). Archives of the Balkan Me<strong>di</strong>cal Union <strong>2004</strong>; (1).<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Biostatistica<br />
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
Lo stu<strong>di</strong>o clinico ‘BErgamo NEphrologic Diabetes Complications Trial’<br />
(BENEDICT): analisi finali della Fase A.<br />
Dopo il ‘blind review meeting’ dello Steering Committee tenutosi il 26 Maggio <strong>2004</strong>, è stato<br />
chiuso il database dello stu<strong>di</strong>o BENEDICT (Fase A) e sono state eseguite le analisi finali,<br />
secondo il protocollo. L’analisi della variabile principale <strong>di</strong> efficacia si è basata su 1204 soggetti<br />
normoalbuminurici con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2 e ipertensione. L’analisi ha evidenziato che lo sviluppo<br />
<strong>di</strong> albuminuria persistente - definita come escrezione urinaria dell’albumina ‘overnight’ (durante<br />
la notte) > 20 microgrammi/min in due visite successive- è stato raggiunto nel 5.7% dei soggetti<br />
che avevano ricevuto la combinazione <strong>di</strong> Trandolapril e Verapamil, nel 6.0% dei soggetti<br />
randomizzati al Trandolapril, nell’11.9% <strong>di</strong> coloro che avevano ricevuto Verapamil e nel 10.0%<br />
dei randomizzati a placebo. La combinazione <strong>di</strong> Trandolapril e Verapamil e il Trandolapril da<br />
solo hanno significativamente rallentato la progressione verso la microalbuminuria <strong>di</strong> un fattore<br />
pari a 2.6 e 2.1, rispettivamente, in confronto al placebo. Al contrario, il Verapamil non è<br />
risultato essere <strong>di</strong>verso dal placebo. Non sono emerse <strong>di</strong>fferenze apprezzabili negli eventi<br />
avversi seri nei quattro gruppi <strong>di</strong> trattamento. In sintesi, quin<strong>di</strong>, questo stu<strong>di</strong>o ha <strong>di</strong>mostrato che<br />
in soggetti con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2 e ipertensione arteriosa, ma senza evidenza <strong>di</strong> danno renale il<br />
trattamento con un ACE inibitore <strong>di</strong>mezza il rischio <strong>di</strong> sviluppare microalbuminuria. Le<br />
implicazioni pratiche <strong>di</strong> questi risultati sono notevoli., in quanto la nefropatia <strong>di</strong>abetica è la<br />
causa più frequente <strong>di</strong> uremia terminale nel mondo e si associa ad un rischio estremamente<br />
aumentato <strong>di</strong> morbilità e mortalità car<strong>di</strong>ovascolare. Prevenire la nefropatia vuol <strong>di</strong>re quin<strong>di</strong> non<br />
solo prevenire il rischio che i <strong>di</strong>abetici (nel 2030 ce ne saranno almeno 300 milioni) vadano in<br />
<strong>di</strong>alisi o muoiano <strong>di</strong> insufficienza renale laddove questa non sia <strong>di</strong>sponibile (è cioè nella<br />
stragrande maggioranza dei paesi del mondo): vuol <strong>di</strong>re anche ridurre il rischio <strong>di</strong> infarti, ictus<br />
242<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
ed altre complicanze car<strong>di</strong>ovascolari che rappresentano la causa principale <strong>di</strong> morte nei soggetti<br />
<strong>di</strong>abetici.<br />
Lo stu<strong>di</strong>o clinico ‘Mycophenolate Steroid Sparing Study’ (MYSS): analisi<br />
finali della Fase A e della Fase B<br />
Lo stu<strong>di</strong>o MYSS, eseguito in pazienti che hanno ricevuto un trapianto <strong>di</strong> rene da donatore<br />
cadavere, ha comparato i rigetti acuti e gli eventi avversi intercorsi durante sei mesi <strong>di</strong> terapia<br />
(Fase A) con Micofenolato Mofetil (MMF) o Azatioprina (AZA) combinati a Ciclosporina<br />
Neoral e steroi<strong>di</strong> e durante altri ulteriori 15 mesi durante i quali gli steroi<strong>di</strong> erano stati sospesi<br />
(Fase B).<br />
Nella Fase A sono entrati 168 pazienti per gruppo. Si è potuto osservare che l’insorgenza <strong>di</strong><br />
episo<strong>di</strong> <strong>di</strong> rigetto acuto, che rappresentava la variabile principale <strong>di</strong> efficacia, era comparabile<br />
nei due gruppi <strong>di</strong> trattamento: il 34% dei pazienti che avevano ricevuto MMF ed il 35% <strong>di</strong><br />
coloro che erano stati randomizzati ad AZA aveva avuto rigetti acuti definiti su base clinica.<br />
Successivamente 88 pazienti trattati con MMF e 89 trattati con AZA sono entrati nella Fase B.<br />
Di nuovo, l’insorgenza <strong>di</strong> rigetto acuto era comparabile nei due gruppi: 16% nel gruppo trattato<br />
con MMF and 12% nel gruppo trattato con AZA. Non si sono rilevate <strong>di</strong>fferenze significative<br />
nella mortalità e nell’incidenza <strong>di</strong> leucopenia, trombocitopenia e <strong>di</strong> altre complicazioni<br />
possibilmente associate al trattamento immunosoppressivo nei due gruppi durante lo stu<strong>di</strong>o. I<br />
costi me<strong>di</strong> per paziente della terapia con MMF erano <strong>di</strong> circa 15 volte più elevati rispetto a<br />
quelli della terapia con AZA<br />
In sostanza, questi risultati <strong>di</strong>mostrano che l’azatioprina, il primo farmaco dopo il cortisone,<br />
utilizzato per prevenire il rigetto, ha la stessa efficacia del micofenolato mofetil e costa 15 volte<br />
<strong>di</strong> meno. E’ interessante notare che prima <strong>di</strong> questo stu<strong>di</strong>o in<strong>di</strong>pendente, tre trials multicentrici –<br />
uno europeo, uno americano ed uno ad<strong>di</strong>rittura mon<strong>di</strong>ale – avevano tutti <strong>di</strong>mostrato che il<br />
micofenolato mofetil era più efficace dell’azatioprina (o del placebo in un caso). In questi stu<strong>di</strong><br />
però l’efficacia <strong>di</strong> MMF e AZA era valutata in pazienti trattati con vecchie formulazioni <strong>di</strong><br />
ciclosporina, che in tutto il mondo sono state ormai rimpiazzate da una nuova formulazione<br />
molto più efficace. Il nostro è quin<strong>di</strong> il primo stu<strong>di</strong>o a confrontare questi farmaci in pazienti<br />
trattati con questa nuova formulazione. E i risultati <strong>di</strong>mostrano che dal punto <strong>di</strong> vista clinico non<br />
c’è più motivo per preferire il MMF ad AZA.<br />
Una revisione sistematica dei trattamenti immunosoppressivi nella<br />
nefropatia membranosa i<strong>di</strong>opatica.<br />
In questa revisione sistematica abbiamo valutato gli stu<strong>di</strong> clinici randomizzati eseguiti in<br />
pazienti adulti con sindrome nefrosica e nefropatia membranosa i<strong>di</strong>opatica, <strong>di</strong>agnosticata su<br />
base istologica, che includessero almeno un gruppo <strong>di</strong> trattamento con terapia<br />
immunosoppressiva ed identificati attraverso una ricerca bibliografica condotta seguendo le<br />
linee guida della ‘Cochrane Collaboration’. Abbiamo identificato quattro tipologie <strong>di</strong><br />
trattamento immunosoppressivo: steroi<strong>di</strong>, agenti alchilanti da soli o in combinazione con<br />
steroi<strong>di</strong>, Ciclosporina da sola o in combinazione con steroi<strong>di</strong> e Azatioprina. L’analisi, che<br />
includeva 18 stu<strong>di</strong> randomizzati, che hanno coinvolto 1025 pazienti non ha evidenziato<br />
<strong>di</strong>fferenze clinicamente rilevanti tra i pazienti con o senza trattamento immunosoppressivo. La<br />
terapia steroidea non offriva alcun beneficio apprezzabile. La terapia con agenti alchilanti<br />
riduceva la proteinuria più del placebo e degli steroi<strong>di</strong>. Questo però non si rifletteva in un<br />
miglioramento dell’andamento della malattia verso l’uremia terminale ed, inoltre, si associava<br />
ad un rischio <strong>di</strong> gravi effetti collaterali, in particolar modo quando si usava il Chlorambucil. In<br />
sintesi questa analisi suggerisce che la terapia immunosoppressiva <strong>di</strong>sponibile non migliora<br />
l’andamento della malattia, ma anzi può aumentare il rischio <strong>di</strong> complicanze anche gravi. Il<br />
nefrologo, quin<strong>di</strong>, dovrebbe evitare l’impiego <strong>di</strong> questi farmaci cosi tossici.<br />
243<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Mappe <strong>di</strong> uremia terminale in coorti casuali <strong>di</strong> pazienti con nefropatia<br />
<strong>di</strong>abetica, arruolati nello stu<strong>di</strong>o ‘Reduction of Endpoints in NIDDM with the<br />
Angiotensin II Antagonist Losartan’ (RENAAL).<br />
Gli stu<strong>di</strong> clinici randomizzati rappresentano l’approccio più adeguato per valutare l’efficacia e<br />
la tollerabilità dei trattamenti, ed, in particolare, per verificare se l’aggiunta <strong>di</strong> un nuovo<br />
farmaco alla terapia standard può essere <strong>di</strong> ulteriore beneficio per il paziente. Tuttavia per tali<br />
analisi comparative è necessario ricorrere a <strong>di</strong>mensioni del campione particolarmente elevate.<br />
Ciò si applica anche agli stu<strong>di</strong> clinici eseguiti nell’ambito delle malattie renali croniche dove<br />
end point “hard” (quali la <strong>di</strong>alisi, eventi car<strong>di</strong>ovascolari o la morte) possono essere almeno in<br />
parte prevenuti attraverso l’uso <strong>di</strong> terapie trovate efficaci.<br />
Lo stu<strong>di</strong>o RENAAL ha valutato l’efficacia e sicurezza del Losartan in 1513 pazienti con <strong>di</strong>abete<br />
<strong>di</strong> tipo 2 e nefropatia cronica. Senza dubbio stu<strong>di</strong> ulteriori sulla possibilità <strong>di</strong> fornire ulteriore<br />
nefroprotezione attraverso l’aggiunta <strong>di</strong> altri farmaci al losartan richiederebbero <strong>di</strong>verse migliaia<br />
<strong>di</strong> pazienti. Tale problema può essere risolto almeno in parte identificando tra i pazienti<br />
nefropatici coloro a più elevato rischio <strong>di</strong> sviluppare eventi. La selezione <strong>di</strong> tale tipologia <strong>di</strong><br />
pazienti permetterebbe <strong>di</strong> pianificare stu<strong>di</strong> con sufficiente potere statistico <strong>di</strong> osservare, se<br />
presente, un dato effetto, anche con una numerosità “ragionevole”. A questo scopo si è<br />
determinato un rischio renale in<strong>di</strong>viduale (RRI) <strong>di</strong> sviluppare uremia terminale in un<br />
sottoinsieme <strong>di</strong> pazienti estratti a caso dal database dello stu<strong>di</strong>o RENAAL. Si è potuto osservare<br />
che la costruzione <strong>di</strong> modelli e la simulazione del rischio <strong>di</strong> sviluppare uremia terminale in<br />
sottogruppi relativamente piccoli <strong>di</strong> pazienti con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2 e nefropatia cronica attraverso<br />
l’uso <strong>di</strong> RRI e la costruzione <strong>di</strong> mappe <strong>di</strong> superficie può consentire una miglior definizione dei<br />
criteri <strong>di</strong> screening e <strong>di</strong> randomizzazione. In particolare l’associazione <strong>di</strong> più fattori <strong>di</strong> rischio<br />
permette <strong>di</strong> identificare non solo i pazienti più a rischio, ma anche coloro che possono trarre il<br />
maggior beneficio da trattamenti trovati efficaci. Con questo approccio è possibile pianificare<br />
uno stu<strong>di</strong>o efficiente anche dal punto <strong>di</strong> vista dei costi, laddove si intendano stu<strong>di</strong>are patologie a<br />
bassa frequenza oppure ci si debba riferire a esigue popolazioni <strong>di</strong> pazienti, anche per restrizioni<br />
del budget. Inoltre è possibile applicare i suddetti modelli anche nella pratica clinica, allo scopo<br />
<strong>di</strong> identificare i pazienti che possono avere i maggiori benefici dai regimi terapeutici applicati<br />
nel modo più efficiente dal punto <strong>di</strong> vista economico e dal punto <strong>di</strong> vista della sicurezza. In<br />
conclusione l’approccio analitico sopra descritto può aiutare a migliorare le cure e può<br />
permettere <strong>di</strong> ridurre i costi non solo nella gestione dei pazienti con <strong>di</strong>abete o malattie renali, ma<br />
anche in soggetti affetti da altre patologie croniche.<br />
Laboratorio <strong>di</strong> Farmacocinetica e Chimica Clinica<br />
Ottimizzazione dell’uso <strong>di</strong> ciclosporina (Neoral) me<strong>di</strong>ante monitoraggio<br />
farmacocinetico: confronto tra <strong>di</strong>verse strategie <strong>di</strong> campionamento<br />
La ciclosporina è il farmaco <strong>di</strong> riferimento nella terapia immunosoppressiva per la prevenzione<br />
del rigetto dell’organo trapiantato. È tuttavia caratterizzata da un in<strong>di</strong>ce terapeutico ristretto e da<br />
significative variazioni interin<strong>di</strong>viduali nei livelli ematici. Per questi motivi è necessario<br />
monitorare l’esposizione del singolo paziente al farmaco (definita dall’area sotto la curva<br />
concentrazione-tempo, AUC) come guida all’ottimizzazione della terapia con CsA, per<br />
potenziarne l’efficacia anti-rigetto e minimizzarne la tossicità a carico del rene. Questa strategia<br />
è, tuttavia, costosa e laboriosa. Abbiamo stu<strong>di</strong>ato il profilo farmacocinetico completo in 58<br />
pazienti con trapianto <strong>di</strong> rene da almeno un anno con l’obiettivo <strong>di</strong> valutare se l’AUC potesse<br />
essere predetta dalla misura <strong>di</strong> singoli campioni ematici <strong>di</strong> CsA. Lo stu<strong>di</strong>o ha <strong>di</strong>mostrato che la<br />
concentrazione a 2 ore dalla somministrazione <strong>di</strong> CsA (C2) correla meglio con l’esposizione<br />
giornaliera al farmaco. Peggiori sono i risultati utilizzando la concentrazione <strong>di</strong> CsA in<br />
campioni ematici raccolti prima della somministrazione del farmaco (C0). L’errore <strong>di</strong><br />
pre<strong>di</strong>zione dell’AUC associato al C2 è tuttavia inaccettabile per il 35% delle valutazioni.<br />
244<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Inoltre, l’analisi multivariata ha <strong>di</strong>mostrato che i livelli <strong>di</strong> C0, e non quelli <strong>di</strong> C2, sono pre<strong>di</strong>ttori<br />
significativi <strong>di</strong> deterioramento della funzione del rene trapiantato nel tempo. Questi risultati<br />
suggeriscono che il campionamento basato sui livelli C2 non può essere utilizzato come<br />
pre<strong>di</strong>ttore universale <strong>di</strong> esposizione a CsA e <strong>di</strong> outcome del rene trapiantato.<br />
Confronto tra i livelli ematici <strong>di</strong> ciclosporina misurati con <strong>di</strong>verse<br />
meto<strong>di</strong>che immunoenzimatiche e con una meto<strong>di</strong>ca in HPLC-UV in<br />
pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene.<br />
Il monitoraggio terapeutico dei livelli <strong>di</strong> ciclosporina (CsA) viene eseguito solitamente<br />
utilizzando meto<strong>di</strong>che immunoenzimatiche oppure sfruttando la cromatografia liquida ad<br />
elevate prestazioni (HPLC), come nel nostro centro. L’HPLC viene solitamente considerato il<br />
metodo <strong>di</strong> riferimento, essendo in grado <strong>di</strong> determinare selettivamente la ciclosporina<br />
<strong>di</strong>scriminandola dai suoi metaboliti. Tuttavia questa meto<strong>di</strong>ca è piuttosto laboriosa e quin<strong>di</strong> <strong>di</strong><br />
<strong>di</strong>fficile applicazione nelle analisi cliniche <strong>di</strong> routine. Sebbene i saggi immunoenzimatici più<br />
comuni hanno una buona specificità in vitro per la CsA, questi tests possono dare risultati errati<br />
in campioni biologici, specialmente in presenza <strong>di</strong> concentrazioni elevate <strong>di</strong> metaboliti <strong>di</strong> CsA,<br />
per reattività crociata con gli anticorpi utilizzati nelle <strong>di</strong>verse meto<strong>di</strong>che immunoenzimatiche. In<br />
collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Analisi Cliniche degli Ospedali Riuniti <strong>di</strong> Bergamo,<br />
abbiamo eseguito una comparazione formale tra l’HPLC e 3 meto<strong>di</strong>che immunoenzimatiche<br />
(ACMIA, EMIT-VIVA e CEDIA-PLUS) misurando i livelli <strong>di</strong> CsA in 150 campioni ematici.<br />
Nonostante una buona correlazione tra le <strong>di</strong>verse serie <strong>di</strong> dati, nessuna delle meto<strong>di</strong>che testate<br />
rientrava nelle specifiche dettate dalle linee guida internazionali.. I risultati <strong>di</strong> questo lavoro,<br />
attualmente in corso <strong>di</strong> pubblicazione su riviste internazionali, potrebbero avere importanti<br />
ripercussioni nel monitoraggio dei livelli <strong>di</strong> farmaco nella comune pratica clinica.<br />
Misura dei livelli ematici <strong>di</strong> everolimus: sviluppo <strong>di</strong> tecniche analitiche e<br />
applicazioni cliniche<br />
Alcuni stu<strong>di</strong> hanno evidenziato la stretta relazione tra concentrazioni <strong>di</strong> RAD nel sangue ed<br />
efficacia immunosoppressiva o tossicità del farmaco. Data la finestra terapeutica ristretta del<br />
farmaco, è necessario il monitoraggio accurato della bio<strong>di</strong>sponibilità <strong>di</strong> RAD per ottimizzare il<br />
rapporto rischio/beneficio della terapia con RAD. Tutte le meto<strong>di</strong>che oggi <strong>di</strong>sponibili in<br />
letteratura prevedono l’utilizzo della spettrofotometria <strong>di</strong> massa, una strumentazione spesso non<br />
<strong>di</strong>sponibile nei comuni laboratori clinici, e quin<strong>di</strong> <strong>di</strong> limitato utilizzo nella pratica clinica. Per<br />
questi motivi abbiamo sviluppato una meto<strong>di</strong>ca in cromatografia liquida ad elevate prestazioni<br />
(HPLC) che potesse sfruttare un detector con lampada a luce ultravioletta (facilmente reperibile<br />
nei <strong>di</strong>versi laboratori). Il campione ematico viene purificato precipitando la matrice biologica<br />
con zinco solfato, mentre RAD viene estratto con acetone e ulteriormente purificato sfruttando<br />
un estrazione <strong>di</strong> tipo solido-liquido. Questa meto<strong>di</strong>ca non è influenzata da picchi interferenti<br />
derivanti da farmaci <strong>di</strong> solito utilizzati nei pazienti sottoposti a trapianto, inoltre il range <strong>di</strong><br />
linearità è ampio, e con livelli <strong>di</strong> riproducibilità e sensibilità adeguati. Questa procedura <strong>di</strong><br />
estrazione semplificata permette <strong>di</strong> analizzare almeno 60-70 campioni per ogni singola analisi.<br />
La meto<strong>di</strong>ca è stata utilizzata con successo nella determinazione dei livelli ematici <strong>di</strong> RAD in<br />
pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> cuore che hanno fatto parte <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> registrativi del farmaco. Lo<br />
step successivo <strong>di</strong> questo progetto prevedrà la determinazione perio<strong>di</strong>ca dei livelli <strong>di</strong> RAD in un<br />
numero elevato <strong>di</strong> pazienti al fine <strong>di</strong> definire finestre terapeutiche entro cui mantenere i livelli <strong>di</strong><br />
farmaco.<br />
245<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Effetto <strong>di</strong> sirolimus sul profilo farmacocinetico <strong>di</strong> acido micofenolico in<br />
pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene.<br />
Stu<strong>di</strong> precedenti hanno <strong>di</strong>mostrato che la bio<strong>di</strong>sponibilità <strong>di</strong> acido micofenolico (MPA), il<br />
metabolita attivo del micofenolato mofetil, può essere significativamente influenzata dalla<br />
concomitante assunzione <strong>di</strong> altri farmaci antirigetto (ciclosporina, tacrolimus o steroi<strong>di</strong>).<br />
Tuttavia, non ci sono dati relativi alle possibili interazioni farmacocinetiche tra MPA e<br />
sirolimus, un nuovo farmaco immunosoppressore introdotto recentemente nella pratica clinica.<br />
Per stu<strong>di</strong>are questo fenomeno abbiamo seguito prospetticamente un gruppo <strong>di</strong> pazienti<br />
sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene e trattati con micofenolato mofetil e steroi<strong>di</strong> in associazione con<br />
ciclosporina o sirolimus. I livelli plasmatici basali <strong>di</strong> MPA sono stati misurati perio<strong>di</strong>camente<br />
nei primi sei mesi dal trapianto. Inoltre al termine del sesto mese i pazienti sono stati sottoposti<br />
ad una valutazione giornaliera del profilo farmacocinetico <strong>di</strong> MPA. Nonostante tutti i pazienti<br />
avessero ricevuto una dose fissa <strong>di</strong> micofenolato mofetil, i livelli plasmatici <strong>di</strong> MPA erano<br />
significativamente più alti nel gruppo <strong>di</strong> pazienti trattati con sirolimus rispetto a quelli trattati<br />
con ciclosporina. La stessa tendenza è stata confermata in occasione dello stu<strong>di</strong>o del profilo<br />
cinetico giornaliero del farmaco, dove tutti i parametri farmacocinetici erano significativamente<br />
più elevati nel gruppo <strong>di</strong> pazienti trattati con micofenolato mofetil e sirolimus. Considerato che<br />
nella pratica clinica il micofenolato mofetil viene somministrato solitamente in dose fissa, i<br />
risultati <strong>di</strong> questo stu<strong>di</strong>o possono avere importanti ripercussioni nell’ottimizzazione della terapia<br />
antirigetto in pazienti sottoposti a trapianto d’organo, per migliorarne il profilo <strong>di</strong> efficacia e <strong>di</strong><br />
sicurezza.<br />
Approccio farmacogenomico per pre<strong>di</strong>re l’esposizione giornaliera a<br />
ciclosporina e outcome clinico in pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene<br />
L’introduzione <strong>di</strong> ciclosporina (CsA) - il farmaco antirigetto più utilizzato nella prevenzione del<br />
rigetto d’organo – nella pratica clinica ha migliorato la sopravvivenza del paziente dopo<br />
trapianto d’organo. Tuttavia questo farmaco è caratterizzato da un in<strong>di</strong>ce terapeutico ristretto, un<br />
assorbimento irregolare e una serie <strong>di</strong> effetti collaterali gravi. Data la notevole variabilità nei<br />
livelli ematici e nella risposta clinica dopo assunzione <strong>di</strong> dosi fisse <strong>di</strong> CsA, negli ultimi anni<br />
sono stati eseguiti molti stu<strong>di</strong> per trovare la dose ottimale <strong>di</strong> CsA che permettesse <strong>di</strong><br />
minimizzare la tossicità da farmaco con conseguente miglioramento del rapporto<br />
rischio/beneficio. In passato <strong>di</strong>versi Autori, ma non tutti, hanno <strong>di</strong>mostrato una stretta<br />
correlazione tra parametri farmacocinetici <strong>di</strong> CsA e outcome clinico. Oggi, nonostante oltre<br />
vent’anni <strong>di</strong> utilizzo del farmaco nella pratica clinica, c’è ancora notevole <strong>di</strong>saccordo su quale<br />
sia il modo migliore <strong>di</strong> utilizzare CsA. L’avvento dell’era genomica ha determinato la nascita <strong>di</strong><br />
nuove aree <strong>di</strong> ricerca tra cui la farmacogenomica, una scienza che stu<strong>di</strong>a il legame tra la<br />
farmacologia e il patrimonio genetico <strong>di</strong> ogni in<strong>di</strong>viduo. La farmacogenomica si occupa dello<br />
stu<strong>di</strong>o delle <strong>di</strong>fferenze genetiche ere<strong>di</strong>tarie che possono influenzare la risposta ad un dato<br />
farmaco (assorbimento, <strong>di</strong>stribuzione, metabolismo e bersaglio farmacologico). CsA viene<br />
metabolizzata dai sistemi citocromiali CYP3A4 e CYP3A5, due famiglie <strong>di</strong> enzimi<br />
caratterizzati da un’attività globale complementare. Recentemente sono state scoperte varianti<br />
geniche in entrambi gli enzimi, spesso associate ad una ridotta attività metabolizzante. Per<br />
questo motivo, lo screening alle ricerca <strong>di</strong> queste mutazioni in soggetti sottoposti a trapianto<br />
d’organo e in terapia con CsA, potrebbe essere estremamente importante nel pre<strong>di</strong>rre<br />
l’esposizione al farmaco. La <strong>di</strong>sponibilità <strong>di</strong> CsA dopo somministrazione orale può essere<br />
influenzata anche dalla glicoproteina P (P-gp), una proteina prodotta dal gene MDR1. Questa<br />
proteina funziona da pompa <strong>di</strong> efflusso in grado <strong>di</strong> rimuovere molecole lipofile come CsA dallo<br />
spazio intracellulare. Attualmente solo pochi gruppi <strong>di</strong> ricerca hanno stu<strong>di</strong>ato l’impatto<br />
potenziale <strong>di</strong> queste varianti geniche sulla bio<strong>di</strong>sponibilità dei <strong>di</strong>versi farmaci antirigetto.<br />
Inoltre, la maggior parte <strong>di</strong> questi stu<strong>di</strong> sono stati effettuati in un numero ridotto <strong>di</strong> pazienti con<br />
risultati spesso contrastanti. In particolare dati relativi a stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> farmacogenomica in pazienti<br />
246<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
trattati con ciclosporina sono scarsi. Per verificare questa ipotesi, abbiamo deciso <strong>di</strong><br />
caratterizzare, un ampio numero <strong>di</strong> pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene e trattati con CsA.<br />
Attraverso l’utilizzo <strong>di</strong> specifiche banche dati sono state identificate <strong>di</strong>verse mutazioni<br />
potenzialmente coinvolte nel pre<strong>di</strong>re la risposta a ciclosporina. Inizialmente abbiamo<br />
ottimizzato le con<strong>di</strong>zioni operative per identificare 2 mutazioni presenti sul gene MDR1 e<br />
attualmente si stanno caratterizzando altre mutazioni. I risultati preliminari <strong>di</strong>mostrano che la<br />
presenza <strong>di</strong> polimorfismi sull’esone 26 del gene MDR1 è associata a livelli ematici più elevati<br />
<strong>di</strong> CsA. Questo progetto permetterà <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>are la frequenza <strong>di</strong> <strong>di</strong>stribuzione <strong>di</strong> tutte le varianti<br />
genetiche menzionate in precedenza, con lo scopo <strong>di</strong> verificare se queste mutazioni siano<br />
associate ad un <strong>di</strong>verso profilo <strong>di</strong> esposizione giornaliera a ciclosporina e possano<br />
eventualmente pre<strong>di</strong>re l’outcome clinico in ogni paziente sottoposto a trapianto.<br />
Mycophenolate mofetil o azatioprina nella prevenzione dei rigetti acuti in<br />
pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene: risultati del trial Mycophenolate<br />
Steroid Sparing (MYSS)<br />
Globalmente il micofenolato mofetil (MMF) sembra aver sostituito l’azatioprina nelle <strong>di</strong>verse<br />
combinazioni <strong>di</strong> farmaci antirigetto utilizzate per prevenire il rigetto d’organo. Tuttavia<br />
l’efficacia <strong>di</strong> MMF rispetto ad azatioprina è stata <strong>di</strong>mostrata solo in trials registrativi in cui<br />
questi farmaci venivano utilizzati in associazione con la vecchia formulazione <strong>di</strong> ciclosporina<br />
(CsA) e steroi<strong>di</strong>. Lo stu<strong>di</strong>o MYSS - un trial multicentrico, prospettico, randomizzato – ha preso<br />
in considerazione gli episo<strong>di</strong> <strong>di</strong> rigetto acuto e gli eventi avversi nei primi 6 mesi dal trapianto<br />
in soggetti trattati con MMF o azatioprina in associazione con la nuova formulazione in<br />
microemulsione <strong>di</strong> CsA e steroi<strong>di</strong> (fase A). La fase successiva dello stu<strong>di</strong>o (fase B) ha preso in<br />
considerazione un periodo ad<strong>di</strong>zionale <strong>di</strong> 15 mesi dopo la completa sospensione <strong>di</strong> steroi<strong>di</strong> in<br />
entrambi i gruppi <strong>di</strong> trattamento. Nel corso della fase A l’incidenza <strong>di</strong> rigetto acuto nei 336<br />
pazienti è stata del 34% nel gruppo MMF e 35% nel gruppo azatioprina, <strong>di</strong> cui il 18% è stato<br />
confermato dalla biopsia nel gruppo MMF e il 23% nel gruppo azatioprina. L’incidenza <strong>di</strong><br />
rigetto nella fase B è stata del 16% nel gruppo MMF e 12% nel gruppo azatioprina, mentre<br />
l’incidenza <strong>di</strong> rigetti verificati con biopsia renale è stata il 7% in entrambi i gruppi. Anche<br />
l’incidenza <strong>di</strong> tossicità da farmaco è risultata comparabile nei due gruppi per tutta la durata dello<br />
stu<strong>di</strong>o. Questo stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong>mostra che in pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene e trattati con la<br />
formulazione in microemulsione <strong>di</strong> CsA, MMF non offre vantaggi sostanziali rispetto ad<br />
azatioprina nel prevenire gli episo<strong>di</strong> <strong>di</strong> rigetto acuto.<br />
Due protocolli finalizzati alla prevenzione del rigetto acuto e cronico nel<br />
trapianto renale<br />
Il rigetto acuto e quello cronico continuano a rappresentare i principali ostacoli per la<br />
sopravvivenza e breve e lungo termine del trapianto renale. La terapia immunosoppressiva<br />
attuale è infatti in grado <strong>di</strong> limitare solo parzialmente il rischio <strong>di</strong> entrambe le forme <strong>di</strong> rigetto,<br />
esponendo inoltre il paziente a pesanti effetti collaterali. Nuove strategie sono state proposte per<br />
prevenire il rigetto acuto e cronico; al fine <strong>di</strong> testarne il bilancio rischio/beneficio, abbiamo<br />
<strong>di</strong>segnato due trials prospettici. Il primo è uno stu<strong>di</strong>o monocentrico finalizzato alla valutazione<br />
della possibilità <strong>di</strong> indurre tolleranza attraverso l’infusione pre-trapianto <strong>di</strong> un anticorpo anti-<br />
CD52. Il secondo è invece un trial multicentrico randomizzato che valuta la possibilità <strong>di</strong><br />
prevenire il rigetto cronico attraverso un trattamento non-immunosoppressivo finalizzato al<br />
controllo dei fattori <strong>di</strong> rischio per la progressione delle nefropatie croniche, come ipertensione,<br />
l’iperfiltrazione glomerulare, la proteinuria e la <strong>di</strong>slipidemia. i due stu<strong>di</strong> interesseranno,<br />
rispettivamente, 20 e 120 pazienti. La fase <strong>di</strong> reclutamento <strong>di</strong> entrambi gli stu<strong>di</strong> è già iniziata e<br />
terminerà entro il <strong>2004</strong>. Quando saranno completati, questi stu<strong>di</strong> potranno avere importanti<br />
ripercussioni nella scelta della terapia farmacologica più adatta per ogni paziente.<br />
247<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Ruolo delle formulazioni farmaceutiche <strong>di</strong> ciclosporina in pazienti<br />
sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene<br />
L’utilizzo cronico <strong>di</strong> farmaci antirigetto espone i pazienti sottoposti a trapianto ad un aumento<br />
rischio <strong>di</strong> sviluppare neoplasie. In particolare, <strong>di</strong>versi stu<strong>di</strong> hanno <strong>di</strong>mostrato che la terapia<br />
immunosoppressiva, ed in particolare la ciclosporina, aumenta significativamente il rischio <strong>di</strong><br />
sviluppare sarcoma <strong>di</strong> Kaposi, un tumore cutaneo relativamente frequente nei pazienti<br />
trapiantati.<br />
Attualmente stiamo analizzando i dati relativi a tutti i pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene e<br />
seguiti nell’Unità <strong>di</strong> Nefrologia degli Ospedali Riuniti <strong>di</strong> Bergamo dal 1970 al 2003 per stu<strong>di</strong>are<br />
se l’introduzione nella pratica clinica <strong>di</strong> Neoral, una nuova microemulsione <strong>di</strong> ciclosporina,<br />
possa aver determinato un aumento nel rischio <strong>di</strong> sviluppare sarcoma <strong>di</strong> Kaposi. I risultati<br />
preliminari sembrano suggerire che nei pazienti trattati con Neoral il rischio <strong>di</strong> sviluppare<br />
questo tumore raddoppia rispetto al gruppo <strong>di</strong> pazienti trattati con San<strong>di</strong>mmune. Se confermati,<br />
questi risultati avranno importanti ripercussioni nel trattamento delle complicanze a lungo<br />
termine dei pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene.<br />
Determinazione della concentrazione <strong>di</strong> albumina intatta in campioni <strong>di</strong><br />
urine<br />
La microalbuminuria, definita come velocità <strong>di</strong> escrezione urinaria <strong>di</strong> albumina compresa tra 20<br />
e 200 microgrammi/min, è un in<strong>di</strong>ce <strong>di</strong> danno renale ed è comunemente riconosciuta come un<br />
parametro efficace per la <strong>di</strong>agnosi precoce <strong>di</strong> nefropatia in pazienti <strong>di</strong>abetici. La<br />
microalbuminuria ha anche implicazioni <strong>di</strong>agnostiche per identificare soggetti ad alto rischio <strong>di</strong><br />
eventi car<strong>di</strong>ovascolari anche fra pazienti non <strong>di</strong>abetici. La nefropatia <strong>di</strong>abetica è una<br />
complicanza importante del <strong>di</strong>abete che colpisce tra il 30% e il 40% dei pazienti affetti da tale<br />
malattia. La valutazione della concentrazione <strong>di</strong> albumina nelle urine con meto<strong>di</strong><br />
immunochimici è il parametro utilizzato per valutare un’incipiente nefropatia <strong>di</strong>abetica. Di<br />
cruciale importanza è determinare la transizione da normoalbuminuria a microalbuminuria,<br />
ovvero il passaggio ad un’escrezione urinaria <strong>di</strong> albumina superiore a 20 microgrammi/min.<br />
Sebbene i meto<strong>di</strong> immunochimici siano le tecniche <strong>di</strong> dosaggio più comunemente utilizzate per<br />
la valutazione dell’albumina urinaria, alcuni stu<strong>di</strong> hanno messo in relazione risultati ottenuti con<br />
meto<strong>di</strong>che ra<strong>di</strong>oimmunologiche, immunonefelometriche e immunoturbi<strong>di</strong>metriche, e <strong>di</strong>mostrato<br />
che un’aliquota della molecola intatta <strong>di</strong> albumina non viene rilevata da questi meto<strong>di</strong> in quanto<br />
essa può essere presente nelle urine in due forme <strong>di</strong>stinte, una definita immunoreattiva e l’altra<br />
non-immunoreattiva. Poiché solo la forma immunoreattiva viene determinata dai meto<strong>di</strong><br />
convenzionali, per ovviare a questo problema analitico abbiamo sviluppato una meto<strong>di</strong>ca HPLC<br />
utilizzando una colonna ad esclusione sterica al fine <strong>di</strong> determinare entrambe le forme<br />
contemporaneamente. Questa nuova procedura analitica può ridurre la quota <strong>di</strong> falsi negativi<br />
dovuti all’incapacità da parte delle meto<strong>di</strong>che convenzionali <strong>di</strong> misurare tutta l’albumina<br />
presente nelle urine. La meto<strong>di</strong>ca cromatografica potrebbe essere in grado <strong>di</strong> valutare la<br />
presenza <strong>di</strong> microalbuminuria nei pazienti anche <strong>di</strong>versi anni prima <strong>di</strong> quanto è possibile oggi<br />
con altri meto<strong>di</strong> <strong>di</strong> dosaggio. Ciò può permettere <strong>di</strong> iniziare per tempo il trattamento per evitare<br />
la progressione della malattia fino alla per<strong>di</strong>ta completa della funzione renale. Sono in corso<br />
stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> confronto tra i dati ottenuti dalla misurazione della concentrazione dell’albumina<br />
urinaria con <strong>di</strong>fferenti meto<strong>di</strong> immunochimici e quelli ottenuti con l’HPLC analizzando urine <strong>di</strong><br />
pazienti con nefropatia incipiente o conclamata.<br />
248<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Sviluppo <strong>di</strong> una nuova meto<strong>di</strong>ca HPLC per la determinazione <strong>di</strong> markers <strong>di</strong><br />
funzionalità renale<br />
La determinazione della velocità <strong>di</strong> filtrazione glomerulare (GFR) e del flusso plasmatico renale<br />
effettivo (ERPF) è fondamentale per lo stu<strong>di</strong>o dell’emo<strong>di</strong>namica renale. Il GFR fornisce la<br />
misura della capacità <strong>di</strong> filtrazione del rene ed è considerato il miglior in<strong>di</strong>ce <strong>di</strong> funzionalità<br />
renale comunemente utilizzato per determinare l’efficacia <strong>di</strong> terapie <strong>di</strong>segnate per rallentare la<br />
progressione delle malattie croniche renali. Il GFR non può essere misurato in modo <strong>di</strong>retto ed i<br />
dati <strong>di</strong> creatinina sierica e <strong>di</strong> clearance della creatinina non sono markers ottimali <strong>di</strong> funzionalità<br />
renale in quanto possono essere influenzati dall’assunzione <strong>di</strong> farmaci o dalla presenza <strong>di</strong><br />
malattie glomerulari. La determinazione <strong>di</strong> questo parametro deve essere effettuata valutando la<br />
clearance renale <strong>di</strong> composti esogeni che sod<strong>di</strong>sfano i requisiti <strong>di</strong> marker ideale <strong>di</strong> filtrazione<br />
glomerulare. La clearance renale dell’inulina rappresenta lo standard per la misurazione del<br />
GFR, essendo un composto liberamente filtrato a livello glomerulare, non secreto né riassorbito<br />
e non sintetizzato o metabolizzato dall’organismo. Per la valutazione del flusso renale<br />
plasmatico effettivo, è l’acido p-amminoippurico che costituisce il marker ideale essendo quasi<br />
completamente estratto dal plasma durante il transito nel rene. La determinazione <strong>di</strong> questi due<br />
composti ha rappresentato per molto tempo un problema analitico molto serio a causa della<br />
mancanza <strong>di</strong> meto<strong>di</strong> <strong>di</strong> dosaggio sod<strong>di</strong>sfacenti. Per questa ragione abbiamo ottimizzato una<br />
meto<strong>di</strong>ca HPLC semplice e veloce che consente la contemporanea determinazione dei due<br />
composti in un’unica corsa cromatografica dopo aver effettuato una semplice idrolisi acida del<br />
campione biologico. Il metodo che abbiamo sviluppato è rapido (la corsa cromatografica è<br />
completata in meno <strong>di</strong> 12 minuti), accurato, riproducibile e richiede l’utilizzo <strong>di</strong> soli 200<br />
microlitri <strong>di</strong> plasma o urina. Questa meto<strong>di</strong>ca cromatografica è stata utilizzata con successo per<br />
la valutazione simultanea <strong>di</strong> GFR e <strong>di</strong> ERPF in pazienti con <strong>di</strong>verso grado <strong>di</strong> insufficienza<br />
renale arruolati negli stu<strong>di</strong> clinici condotti presso il nostro centro<br />
Analisi <strong>di</strong> Ficoll per la determinazione della clearance frazionata: sviluppo<br />
<strong>di</strong> una meto<strong>di</strong>ca HPLC rapida e sensibile<br />
Per valutare le proprietà <strong>di</strong> selettività della barriera capillare glomerulare in modelli animali,<br />
solitamente viene determinata la clearance frazionata del Ficoll, un polimero che ha le proprietà<br />
e le caratteristiche ideali per la valutazione <strong>di</strong> tale parametro. La procedura prevede che, dopo<br />
un tempo variabile tra i 40 e i 50 minuti dall’inizio dell’infusione costante <strong>di</strong> Ficoll, vengano<br />
eseguiti prelievi seriati <strong>di</strong> sangue e raccolte urinarie <strong>di</strong> circa 30 minuti ciascuna. Sui campioni<br />
plasmatici e sull’urina raccolta durante l’esecuzione della prima clearance viene effettuata una<br />
separazione cromatografica me<strong>di</strong>ante tecnica <strong>di</strong> gel-permeazione e durante la corsa<br />
cromatografica vengono raccolte frazioni <strong>di</strong> 2 ml. Queste frazioni sono analizzate con meto<strong>di</strong>ca<br />
colorimetrica utilizzando il metodo dell’antrone per determinare la concentrazione <strong>di</strong> Ficoll.<br />
Sebbene questa procedura si sia <strong>di</strong>mostrata affidabile ed accurata, la sua esecuzione è molto<br />
laboriosa e richiede un tempo estremamente lungo. Per ovviare a questi problemi analitici<br />
abbiamo pensato <strong>di</strong> apportare alcune mo<strong>di</strong>fiche alla procedura <strong>di</strong> esecuzione della clearance<br />
frazionata <strong>di</strong> Ficoll. A tal fine si è sostituito il Ficoll con Ficoll derivatizzato con FITC al fine <strong>di</strong><br />
rendere la molecola del composto fluorescente senza alterarne le proprietà e le caratteristiche. In<br />
seguito è stato sviluppato un metodo cromatografico in HPLC che prevede l’iniezione <strong>di</strong> soli 5<br />
microlitri <strong>di</strong> matrice biologica (plasma o urina) in una colonna ad esclusione sterica TSK G4000<br />
PWXL e la quantificazione <strong>di</strong> FITC-Ficoll me<strong>di</strong>ante rivelatore a fluorescenza. La semplicità e la<br />
velocità <strong>di</strong> manipolazione del campione e la specificità del dosaggio fanno sì che questa<br />
meto<strong>di</strong>ca cromatografica possa <strong>di</strong>venire il metodo <strong>di</strong> riferimento per le determinazioni <strong>di</strong> routine<br />
della selettività della parete capillare glomerulare. Questa procedura viene attualmente utilizzata<br />
in uno stu<strong>di</strong>o che ha lo scopo <strong>di</strong> determinare l’effetto <strong>di</strong> statine sull’emo<strong>di</strong>namica renale, sulle<br />
proprietà <strong>di</strong> permselettività della parete capillare glomerulare e sulla funzione tubulare in ratti<br />
sottoposti a riduzione chirurgica della massa renale. Questo modello sperimentale simula le<br />
249<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
con<strong>di</strong>zione che si verifica nell’uomo quando si ha per<strong>di</strong>ta <strong>di</strong> nefroni ed è caratterizzata dalla<br />
presenza <strong>di</strong> ipertensione, proteinuria, deterioramento progressivo della funzione renale, danno<br />
glomerulare e tubulo-interstiziale.<br />
Vali<strong>di</strong>tà <strong>di</strong> modelli <strong>di</strong> pre<strong>di</strong>zione della funzione renale (GFR) in pazienti con<br />
<strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2<br />
Recentemente abbiamo identificato la migliore formula per stimare la funzione renale in<br />
pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene utilizzando semplici parametri biochimici o dati<br />
demografici e antropometrici. Tuttavia non è stata ancora valutata la bontà <strong>di</strong> tali formule in<br />
pazienti con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2. A tal fine abbiamo comparato con il nostro standard <strong>di</strong><br />
riferimento - la misura della clearance plasmatica dello ioexolo - i valori ottenuti con <strong>di</strong>verse<br />
equazioni pre<strong>di</strong>ttive <strong>di</strong> GFR in 279 pazienti normoalbuminurici e in 134 soggetti<br />
microalbuminurici arruolati nello stu<strong>di</strong>o BENEDICT e nello stu<strong>di</strong>o DEMAND. L’analisi dei<br />
dati ha mostrato che le equazioni prese in esame sottostimano la velocità <strong>di</strong> filtrazione<br />
glomerulare (GFR) in entrambi i gruppi <strong>di</strong> pazienti. Solo una formula recentemente pubblicata<br />
in letteratura dal gruppo <strong>di</strong> Rule è apparentemente superiore alle altre in quanto circa il 50% dei<br />
valori <strong>di</strong> GFR si stimano con un errore che varia tra -10% e 10% rispetto a quanto misurato con<br />
lo ioexolo. Tuttavia, i valori <strong>di</strong> GFR stimati sono significativamente <strong>di</strong>versi da quelli misurati.<br />
Risulta evidente che questa formula determina una sovrastima a valori bassi <strong>di</strong> funzione renale e<br />
una sottostima importante a valori elevati, in<strong>di</strong>pendentemente dal valore <strong>di</strong> escrezione renale <strong>di</strong><br />
albumina. Questi risultati in<strong>di</strong>cano chiaramente che in pazienti con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2 tutte le<br />
formule prese in considerazione sono poco affidabili poiché tendono a sottostimare il valore<br />
reale <strong>di</strong> GFR. Anche se l’equazione <strong>di</strong> Rule ha mostrato una performance globalmente superiore<br />
agli altri modelli, nessuna <strong>di</strong> queste equazioni può essere considerata una valida alternativa alla<br />
misura del GFR con meto<strong>di</strong> quali la determinazione della clearance plasmatica dello ioexolo. E’<br />
auspicabile lo sviluppo <strong>di</strong> una nuova formula per la stima del GFR da utilizzare in soggetti<br />
<strong>di</strong>abetici partendo dall’elaborazione <strong>di</strong> dati ottenuti in questa popolazione <strong>di</strong> pazienti<br />
Vali<strong>di</strong>tà <strong>di</strong> modelli <strong>di</strong> pre<strong>di</strong>zione della funzione renale (GFR) in pazienti con<br />
<strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2<br />
Recentemente abbiamo identificato la migliore formula per stimare la funzione renale in<br />
pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene utilizzando semplici parametri biochimici o dati<br />
demografici e antropometrici. Tuttavia non è stata ancora valutata la bontà <strong>di</strong> tali formule in<br />
pazienti con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2. A tal fine abbiamo comparato con il nostro standard <strong>di</strong><br />
riferimento - la misura della clearance plasmatica dello ioexolo - i valori ottenuti con <strong>di</strong>verse<br />
equazioni pre<strong>di</strong>ttive <strong>di</strong> GFR in 279 pazienti normoalbuminurici e in 134 soggetti<br />
microalbuminurici arruolati nello stu<strong>di</strong>o BENEDICT e nello stu<strong>di</strong>o DEMAND. L’analisi dei<br />
dati ha mostrato che le equazioni prese in esame sottostimano la velocità <strong>di</strong> filtrazione<br />
glomerulare (GFR) in entrambi i gruppi <strong>di</strong> pazienti. Solo una formula recentemente pubblicata<br />
in letteratura dal gruppo <strong>di</strong> Rule è apparentemente superiore alle altre in quanto circa il 50% dei<br />
valori <strong>di</strong> GFR si stimano con un errore che varia tra -10% e 10% rispetto a quanto misurato con<br />
lo ioexolo. Tuttavia, i valori <strong>di</strong> GFR stimati sono significativamente <strong>di</strong>versi da quelli misurati.<br />
Risulta evidente che questa formula determina una sovrastima a valori bassi <strong>di</strong> funzione renale e<br />
una sottostima importante a valori elevati, in<strong>di</strong>pendentemente dal valore <strong>di</strong> escrezione renale <strong>di</strong><br />
albumina. Questi risultati in<strong>di</strong>cano chiaramente che in pazienti con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2 tutte le<br />
formule prese in considerazione sono poco affidabili poiché tendono a sottostimare il valore<br />
reale <strong>di</strong> GFR. Anche se l’equazione <strong>di</strong> Rule ha mostrato una performance globalmente superiore<br />
agli altri modelli, nessuna <strong>di</strong> queste equazioni può essere considerata una valida alternativa alla<br />
misura del GFR con meto<strong>di</strong> quali la determinazione della clearance plasmatica dello ioexolo. E’<br />
auspicabile lo sviluppo <strong>di</strong> una nuova formula per la stima del GFR da utilizzare in soggetti<br />
<strong>di</strong>abetici partendo dall’elaborazione <strong>di</strong> dati ottenuti in questa popolazione <strong>di</strong> pazienti.<br />
250<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Laboratorio <strong>di</strong> Fasi Avanzate dello Sviluppo dei Farmaci<br />
nell'Uomo<br />
IRFMN<br />
Affidabilità della tecnica eco-doppler nel monitorare l’efficacia della<br />
rivascolarizzazione nella stenosi dell’arteria renale<br />
La stenosi dell’arteria renale ad eziologia aterosclerotica è presente nell’1-2% della popolazione<br />
generale degli ipertesi, nel 5% degli ospedalizzati, e nel 40% dei pazienti che hanno fatto<br />
riferimento ad un Centro specializzato per l’ipertensione.<br />
L’angioplastica associata o meno al posizionamento <strong>di</strong> uno stent rappresenta solitamente il<br />
trattamento d’elezione. Tuttavia, l'effetto reale delle procedure <strong>di</strong> rivascolarizzazione sul<br />
recupero <strong>di</strong> funzione renale non è mai stato quantificato in modo preciso fino ad ora.<br />
Stiamo svolgendo uno stu<strong>di</strong>o finalizzato al confronto tra le variazioni dell’emo<strong>di</strong>namica renale<br />
conseguenti alla procedura <strong>di</strong> angioplastica e stenting valutate me<strong>di</strong>ante clearances plasmatiche<br />
renali, e le variazioni flussimetriche intra- ed extra-renali valutate me<strong>di</strong>ante ecocolorDoppler.<br />
Ciò è utile per valutare se l’ultrasonografia Doppler è una meto<strong>di</strong>ca<br />
sicura e riproducibile per monitorare la risposta funzionale renale alle procedure <strong>di</strong> riperfusione<br />
secondarie alla presenza <strong>di</strong> stenosi arteriosa renale.<br />
Infatti, la <strong>di</strong>sponibilità <strong>di</strong> una meto<strong>di</strong>ca atten<strong>di</strong>bile, riproducibile, non-invasiva e relativamente<br />
poco costosa contribuirà a caratterizzare meglio la malattia, e sarà utile per identificare i<br />
pazienti che possono trarre benefici dalle procedure <strong>di</strong> rivascolarizzazione<br />
Effetti car<strong>di</strong>aci secondari al confezionamento <strong>di</strong> una fistola arterovenosa<br />
per emo<strong>di</strong>alisi<br />
Lo scompenso car<strong>di</strong>aco è considerato una controin<strong>di</strong>cazione al confezionamento <strong>di</strong> una fistola<br />
arterovenosa (FAV) per emo<strong>di</strong>alisi. Questo, ovviamente, preclude la possibilità <strong>di</strong> intraprendere<br />
un trattamento <strong>di</strong>alitico sostitutivo in quei pazienti in cui l’uremia terminale si accompagni ad<br />
uno scompenso car<strong>di</strong>aco. La controin<strong>di</strong>cazione alla istituzione <strong>di</strong> una FAV si basa sul fatto che<br />
lo shunt artero-venoso risulta in una aumentata gittata car<strong>di</strong>aca che aumenta cronicamente il<br />
carico del lavoro car<strong>di</strong>aco e che a lungo termine porterebbe ad un ulteriore peggioramento della<br />
funzione car<strong>di</strong>aca. Per verificare che questo corrisponda effettivamente a realtà abbiamo<br />
valutato la risposta emo<strong>di</strong>namica e car<strong>di</strong>aca all’istituzione dello shunt in due gruppi <strong>di</strong> pazienti<br />
uremici con o senza evidenza <strong>di</strong> scompenso car<strong>di</strong>aco. In questi pazienti abbiamo valutato in<br />
con<strong>di</strong>zioni basali – prima del confezionamento della FAV – e a 30 e a 90 giorni dopo che la<br />
fistola era stata completata, i seguenti parametri: flusso dell’arteria ra<strong>di</strong>ale, volumi telesistolici e<br />
tele<strong>di</strong>astolici, frazione d’eiezione, gittata sistolica ed in<strong>di</strong>ce car<strong>di</strong>aco. Le analisi hanno mostrato<br />
che nei pazienti che iniziano la terapia emo<strong>di</strong>alitica sostitutiva per uremia terminale, lo shunt<br />
artero-venoso non ha effetti negativi sulla performance car<strong>di</strong>aca. Inoltre, la risposta<br />
emo<strong>di</strong>namica al confezionamento della fistola sembra <strong>di</strong>versa in relazione alla presenza o meno<br />
<strong>di</strong> insufficienza ventricolare sinistra. E’ interessante notare che, nei pazienti con funzione<br />
ventricolare sinistra conservata, la performance car<strong>di</strong>aca non viene significativamente alterata<br />
dallo shunt, mentre in quelli con insufficienza ventricolare sinistra la performance car<strong>di</strong>aca<br />
tende a migliorare me<strong>di</strong>ante meccanismi che sembrano non essere correlati alla rimozione delle<br />
tossine uremiche e alla correzione dell’anemia secondaria all’insufficienza renale.<br />
Complessivamente, questi risultati mostrano che, <strong>di</strong>versamente da quanto si crede, la fistola per<br />
emo<strong>di</strong>alisi non contribuisce al progressivo deterioramento della funzione car<strong>di</strong>aca ma anzi, nei<br />
pazienti con scompenso car<strong>di</strong>aco può persino associarsi ad un progressivo miglioramento del<br />
quadro emo<strong>di</strong>namico.<br />
251<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Stu<strong>di</strong>o per valutare gli effetti ipolipemizzanti <strong>di</strong> Valsartan, Fluvastatina e la<br />
loro combinazione in pazienti con trapianto <strong>di</strong> rene e funzione renale<br />
stabile<br />
Nei pazienti con trapianto <strong>di</strong> rene possono coesistere molteplici fattori <strong>di</strong> rischio car<strong>di</strong>ovascolare<br />
tra i quali la presenza <strong>di</strong> albuminuria o proteinuria. Il rischio poi aumenta ulteriormente e si<br />
associa, come spesso succede alla <strong>di</strong>slipidemia. Infatti, entrambi i fattori non solo accelerano il<br />
processo aterosclerotico ma possono avere anche un effetto nefrotossico <strong>di</strong>retto, contribuendo<br />
alla progressione del danno glomerulare e tubulo-interstiziale, portando ad una progressiva<br />
per<strong>di</strong>ta della funzionalità renale. Per questo motivo abbiamo <strong>di</strong>segnato uno stu<strong>di</strong>o atto a valutare<br />
se la proteinuria e la <strong>di</strong>slipidemia possono essere migliorate da un trattamento con un<br />
antagonista recettoriale della angiotensina II e con una statina e se i due trattamenti in<br />
associazione possono avere un effetto sinergico. I pazienti sono stati trattati con dosi crescenti <strong>di</strong><br />
un Antagonista recettoriale dell’Angiotensina II e <strong>di</strong> una statina, somministrati singolarmente o<br />
in associazione con inibitori del sistema renina angiotensina o satine.seguendo una sequenza<br />
randomizzata.<br />
I risultati preliminari hanno mostrato che il trattamento con Valsartan 160 mg/<strong>di</strong>e si associava<br />
ad un’importante anemizzazione dei pazienti. Sei degli otto pazienti randomizzati hanno dovuto<br />
interrompere prematuramente il loro periodo <strong>di</strong> trattamento con Valsartan da solo o associato<br />
con la fluvastatina a causa <strong>di</strong> una riduzione dell’emoglobina <strong>di</strong> 2 g/dl o più. Abbiamo quin<strong>di</strong><br />
interrotto lo stu<strong>di</strong>o e deciso <strong>di</strong> pubblicare i risultati per evidenziare che gli antagonisti<br />
recettoriali possono avere effetti collaterali importanti che possono limitarne l’impiego in questa<br />
tipologia <strong>di</strong> pazienti. Allo stesso tempo si <strong>di</strong>segnerà un nuovo trial atto a valutare se dosi ridotte<br />
<strong>di</strong> questi farmaci possono avere effetti benefici senza indurre anemizzazione.<br />
Effetti a lungo termine sulla funzione renale dell’associazione <strong>di</strong> un ACE<br />
inibitore con un antagonista recettoriale nelle nefropatie croniche<br />
proteinuriche<br />
L’entità della proteinuria pre<strong>di</strong>ce la progressione della malattia renale e la sua riduzione tramite<br />
gli inibitori dell’enzima <strong>di</strong> conversione dell’angiotensina (ACEi) o gli antagonisti recettoriali<br />
dell’angiotensina II (ARA) ha un effetto renoprotettivo. L’associazione dei suddetti farmaci a<br />
breve termine si è <strong>di</strong>mostrato più efficace nel ridurre la proteinuria rispetto ai farmaci usati<br />
singolarmente. Ulteriori analisi eseguite a posteriori avevano inoltre suggerito che il superiore<br />
effetto antiproteinurico della associazzione potesse essere me<strong>di</strong>ato da un miglioramento<br />
dell’emo<strong>di</strong>namica renale (Kidney Int. 2003 Mar;63(3):1094-103). Abbiamo quin<strong>di</strong> intrapreso<br />
uno stu<strong>di</strong>o osservazionale, prospettico e aperto, per valutare se il trattamento con l’associazione<br />
ACEi ed ARA potesse risultare in un effetto renoprotettivo a lungo termine. A questo fine<br />
abbiamo valutato la velocità <strong>di</strong> filtrazione glomerulare, <strong>di</strong>versi parametri emo<strong>di</strong>namici renali<br />
(flusso plasmatico renale, frazione <strong>di</strong> filtrazione e resistenze vascolari renali) e la selettività<br />
delle parete glomerulare alle macromolecole negli stessi pazienti in cui avevamo documentati<br />
l’effetto antiproteinurico a breve termine. Durante il <strong>2004</strong> sono state effettuate visite trimestrali<br />
in modo che tutti i pazienti avessero un follow-up <strong>di</strong> almeno 3 anni. Le analisi preliminari<br />
<strong>di</strong>mostrano che la riduzione della proteinuria si mantiene durante tutto il periodo <strong>di</strong><br />
osservazione e che la funzione renale è rimasta stabile nella maggior parte dei pazienti ed in<br />
qualche caso è perfino migliorata. Per testare l’ipotesi del superiore effetto renoprotettivo<br />
dell’associazione stiamo confrontando l’andamento <strong>di</strong> questi pazienti (casi) con pazienti con<br />
caratteristiche simili (controlli) che avevano partecipato allo stu<strong>di</strong>o REIN. I risultati <strong>di</strong> questa<br />
analisi saranno <strong>di</strong>sponibili nel 2005. L’evidenza che i casi hanno una evoluzione migliore dei<br />
controlli fornirebbe la prova che potenziare l’inibizione del sistema Renina-Angiotensina<br />
tramite l’associazione <strong>di</strong> ACEi e ARA consente <strong>di</strong> aumentare l’effetto renoprotettivo, dei due<br />
farmaci usati singolarmente. Questa osservazione avrebbe importanti implicazioni cliniche nel<br />
trattamento <strong>di</strong> pazienti con malattia renale cronica.<br />
252<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Il rituximab nella nefropatia membranosa i<strong>di</strong>opatica<br />
La nefropatia membranosa i<strong>di</strong>opatica rappresenta la più frequente causa <strong>di</strong> sindrome nefrosica e<br />
può progre<strong>di</strong>re verso l’insufficienza renale terminale nel 30-40% dei casi. Il trattamento con<br />
steroi<strong>di</strong> e farmaci immunosoppressivi è poco efficace e notevolmente tossico. Vista la<br />
potenziale implicazione nella patogenesi <strong>di</strong> questa malattia <strong>di</strong> immunoglobuline anomale<br />
prodotte da una linea <strong>di</strong> linfociti B attivati in modo incontrollato (CD20), ci siamo proposti <strong>di</strong><br />
stu<strong>di</strong>are se l’inibizione <strong>di</strong> queste cellule attraverso il trattamento con rituximab, un anticorpo<br />
monoclonale sviluppato per la cura <strong>di</strong> certe leucemie ed in grado <strong>di</strong> <strong>di</strong>struggere specificamente<br />
le cellule B attivate potesse indurre una remissione della malattia. Il farmaco è stato<br />
somministrato una volte la settimana per quattro settimane consecutive a otto pazienti affetti da<br />
nefropatia membranosa i<strong>di</strong>opatica con proteinuria persistentemente in range nefrosico. Lo<br />
stu<strong>di</strong>o ha mostrato che alla quarta e alla ventesima settimana <strong>di</strong> follow-up, la proteinuria si<br />
riduceva <strong>di</strong> circa il 60%. Il fatto che la clearance frazionata dell’albumina si riducesse <strong>di</strong> pari<br />
passo <strong>di</strong>mostrava che questo effetto fosse me<strong>di</strong>ato da un miglioramento della selettività<br />
glomerulare alle macromolecole. Degno <strong>di</strong> nota è inoltre il fatto che alle ridotta per<strong>di</strong>ta <strong>di</strong><br />
proteine nelle urine si associasse un aumento dell’albumina del sangue, e questo è molto<br />
importante perché rappresenta il primo segno <strong>di</strong> una progressiva remissione della sindrome<br />
nefrosica e delle alterazioni ad essa associate quali edemi, <strong>di</strong>slipidemia e alterazioni della<br />
coagulazione. Questi incoraggianti risultati sono stati confermati durante un periodo <strong>di</strong><br />
osservazione <strong>di</strong> 1 anno (J. Am Soc Nephrol 14: 1851-1857, 2003). Il fatto che l’effetto clinico si<br />
manifestasse in parallelo alla scomparsa dei CD20 dalla circolazione e che la risoluzione della<br />
proteinuria si mantenesse durante il periodo <strong>di</strong> deplezione <strong>di</strong>mostrava inoltre il ruolo degli<br />
anticorpi anomali prodotti da cloni attivati <strong>di</strong> CD20 nella patogenesi della malattia.<br />
L’effetto clinico si verificava però solo in una parte dei pazienti. Per capire perché alcuni non<br />
traessero beneficio dal trattamento abbiamo valutato in un campione più numeroso <strong>di</strong> pazienti,<br />
quali fattori influenzassero l’andamento della malattia ed abbiamo osservato che la cronicità<br />
delle lesioni renali (quantificata sulla base <strong>di</strong> uno score istologico) era il fattore che influiva in<br />
modo più importante sulla risposta alla terapia con rituximab. Sulla base <strong>di</strong> questo abbiamo<br />
ristretto l’in<strong>di</strong>cazione al trattamento con rituximab ai pazienti con score istologico al <strong>di</strong> sotto <strong>di</strong><br />
un valore critico definito a priori ed abbiamo iniziato un nuovo stu<strong>di</strong>o volto a verificare<br />
prospetticamente se la selezione dei pazienti in base alle lesioni istologiche consente<br />
effettivamente <strong>di</strong> identificare coloro che possono beneficiare <strong>di</strong> questa cura. Nei pazienti<br />
selezionati verranno eseguite prima del trattamento e nei sei mesi dopo una biopsia renale<br />
transcutanea, ed una misurazione della velocità <strong>di</strong> filtrazione glomerulare, dei parametri<br />
emo<strong>di</strong>namici renali quali flusso plasmatico renale, frazione <strong>di</strong> filtrazione e resistenze vascolari<br />
renali e della selettività della parete glomerulare.<br />
Lo stu<strong>di</strong>o, i cui risultati conclusivi saranno <strong>di</strong>sponibili durante il 2005, permetterà <strong>di</strong> valutare le<br />
relazione esistente tra gli effetti morfologici e funzionali del trattamento fornendo informazione<br />
molto utili a capire sempre meglio i meccanismi della malattia al fine ultimo <strong>di</strong> mettere a punto<br />
terapie sempre più efficaci.<br />
Stu<strong>di</strong>o clinico volto a valutare gli effetti renali e metabolici <strong>di</strong> un<br />
tiazoli<strong>di</strong>ne<strong>di</strong>one (rosiglitazone) in pazienti con trapianto renale e<br />
proteinuria<br />
Nei pazienti sottoposti a trapianto <strong>di</strong> rene, in terapia immunosoppressiva con steroi<strong>di</strong> e inibitori<br />
della calcineurina come ciclosporina A e tacrolimus, molto spesso si osservano una ridotta<br />
sensibilità all’insulina (insulino-resistenza), alterata tolleranza al glucosio e <strong>di</strong>slipidemia. Queste<br />
anomalie metaboliche, associandosi ad altri ben noti fattori <strong>di</strong> rischio car<strong>di</strong>ovascolare quali<br />
ipertensione e albuminuria, possono favorire la riduzione della funzione renale accelerando il<br />
processo che porta all’insufficienza renale terminale e possono anche aumentare il rischio <strong>di</strong><br />
morbi<strong>di</strong>tà car<strong>di</strong>ovascolare e morte prematura.<br />
253<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
I tiazoli<strong>di</strong>ne<strong>di</strong>oni (glitazoni) sono una nuova classe <strong>di</strong> agenti anti<strong>di</strong>abetici orali che potrebbero<br />
aumentare la sensibilità all’insulina. Questi farmaci inoltre, migliorando la sensibilità<br />
all’insulina, potrebbero anche migliorare la tolleranza al glucosio e la <strong>di</strong>slipidemia. In<br />
particolare, uno <strong>di</strong> questi farmaci, il rosiglitazone, è in grado <strong>di</strong> ridurre la pressione e<br />
l’albuminuria in pazienti con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2 e nefropatia e questo ha portato a formulare<br />
l’ipotesi che questo farmaco possa avere specifici effetti reno- e car<strong>di</strong>o-protettivi. Il<br />
rosiglitazone potrebbe esercitare tale effetto anche in pazienti con trapianto <strong>di</strong> rene e<br />
<strong>di</strong>sfunzione cronica dell’organo trapiantato nei quali quin<strong>di</strong> i glitazoni, oltre a determinare un<br />
miglioramento dell’insulino-resistenza, della tolleranza al glucosio e della <strong>di</strong>slipidemia,<br />
potrebbero ridurre l’albuminuria e migliorare il controllo pressorio. La recente osservazione che<br />
i glitazoni migliorano lo stato <strong>di</strong> insulino-resistenza indotta dagli steroi<strong>di</strong> in soggetti sani,<br />
fornisce un ulteriore razionale per stu<strong>di</strong>are gli effetti metabolici e renali dei glitazoni in pazienti<br />
con trapianto <strong>di</strong> rene e in terapia steroidea cronica. Abbiamo quin<strong>di</strong> <strong>di</strong>segnato e programmato<br />
uno stu<strong>di</strong>o pilota volto a valutare il profilo rischio/beneficio a breve termine del rosiglitazone in<br />
pazienti con trapianto renale e <strong>di</strong>sfunzione cronica dell’organo trapiantato. Lo stu<strong>di</strong>o includerà<br />
<strong>di</strong>eci pazienti nei quali valuteremo la sensibilità all'insulina, la tolleranza al glucosio, il profilo<br />
lipi<strong>di</strong>co, l’emo<strong>di</strong>namica renale e l’albuminuria in con<strong>di</strong>zioni basali, alla fine del trattamento (2<br />
mesi <strong>di</strong> terapia con rosiglitazone 8 mg/<strong>di</strong>e) e due mesi dopo la sospensione. Il protocollo <strong>di</strong><br />
stu<strong>di</strong>o è stato sottoposto alla autorità regolatrice ed è stato approvato dai Comitati Etici nel<br />
<strong>2004</strong>. Lo screening inizierà a Gennaio 2005. Se questo stu<strong>di</strong>o pilota mostrerà un effetto<br />
benefico del rosiglitazone, verrà <strong>di</strong>segnato un trial prospettico e randomizzato al fine <strong>di</strong><br />
verificare gli effetti car<strong>di</strong>o- e renoprotettivi a lungo termine <strong>di</strong> questa terapia innovativa in<br />
pazienti con trapianto renale e <strong>di</strong>sfunzione dell’organo trapiantato.<br />
Stu<strong>di</strong>o randomizzato, multicentrico, in doppio cieco, in cross-over, con<br />
impiego <strong>di</strong> placebo, <strong>di</strong> fase IIa per valutare l'effetto <strong>di</strong> un antagonista<br />
dell’urotensina (ACT-058362) sull’ albuminuria e la pressione arteriosa in<br />
pazienti con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2, ipertesi, nefropatici, in terapia cronica con<br />
un antagonista recettoriale dell'angiotensina II o con un inibitore<br />
dell'enzima <strong>di</strong> conversione dell'angiotensina<br />
La malattia renale cronica (CRF) determina una progressiva per<strong>di</strong>ta della funzionalità renale<br />
fino ad uno sta<strong>di</strong>o terminale (ESRD) nel quale si può intervenire solo con la <strong>di</strong>alisi e il<br />
trapianto. Il <strong>di</strong>abete è <strong>di</strong>ventato la principale causa <strong>di</strong> ESRD nel mondo, in quanto i pazienti<br />
affetti da <strong>di</strong>abete, soprattutto <strong>di</strong> tipo 2, sono sempre più numerosi e vivendo più a lungo, hanno<br />
maggiori probabilità <strong>di</strong> evolvere verso l’insufficienza renale terminale. La più precoce evidenza<br />
clinica <strong>di</strong> danno renale nel <strong>di</strong>abete è rappresentata dalla microalbuminuria, cioè dalla comparsa<br />
<strong>di</strong> piccole, ma significative, quantità <strong>di</strong> albumina nelle urine. Farmaci che inibiscono il sistema<br />
renina-angiotensina, gli ACE-inibitori (ACEi) e gli antagonisti recettoriali dell’angiotensina<br />
(ARA), sono in grado, non solo <strong>di</strong> ridurre la pressione arteriosa, ma anche la proteinuria in<br />
pazienti con nefropatia conclamata, e sono efficaci nel prevenire lo sviluppo <strong>di</strong><br />
macroalbuminuria e normalizzare l’escrezione urinaria <strong>di</strong> proteine in pazienti<br />
microalbuminurici, riducendo in modo significativo la morbi<strong>di</strong>tà e la mortalità in questi<br />
soggetti. L’urotensina e il suo recettore sono up-regolati in vari modelli sperimentali e in alcune<br />
patologie nell’uomo, suggerendo che il sistema U-II svolge un ruolo in queste patologie. Lo<br />
sviluppo <strong>di</strong> un programma clinico per l’impiego <strong>di</strong> un antagonista dell’urotensina quale ACT-<br />
058 362 nell’insufficienza renale è supportato da dati clinici e pre-clinici. I livelli <strong>di</strong> U-II sono<br />
elevati nei pazienti con insufficienza renale. In modelli sperimentali <strong>di</strong> ratto con insufficienza<br />
renale acuta o cronica ACT-058362 previene lo sviluppo dell’insufficienza renale migliorando<br />
l’emo<strong>di</strong>namica renale e la funzione glomerulare senza mo<strong>di</strong>ficare la frazione <strong>di</strong> filtrazione, la<br />
pressione sistemica o la frequenza car<strong>di</strong>aca.<br />
Si tratta <strong>di</strong> uno stu<strong>di</strong>o completamente realizzato presso il Nostro Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> Cliniche<br />
254<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
nell’ambito <strong>di</strong> uno stu<strong>di</strong>o più grande e più semplice cui collaborano altri Centri europei. In<br />
questo stu<strong>di</strong>o randomizzato, in doppio cieco, con <strong>di</strong>segno cross-over, l’effetto del farmaco sarà<br />
confrontato con quello del placebo. Lo scopo dello stu<strong>di</strong>o è <strong>di</strong>mostrare che ACT-058 362 riduce<br />
l’albuminuria in pazienti con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2, ipertensione e nefropatia, in terapia cronica con<br />
un antagonista recettoriale dell'angiotensina II (ARA) o con un inibitore dell'enzima <strong>di</strong><br />
conversione dell'angiotensina (ACEi). Lo stu<strong>di</strong>o si articola in 6 fasi: Screening 2 settimane;<br />
Periodo <strong>di</strong> run-in: 4 settimane; Trattamento 1: 4 settimane;≤ Periodo <strong>di</strong> wash-out: 6 settimane;<br />
Trattamento 2: 4 settimane; Follow-up: 4 settimane. Durante il <strong>2004</strong> sono stati arruolati i 22<br />
pazienti previsti dal protocollo, e l’ultima visita è programmata per il Marzo 2005. Finora non si<br />
sono verificati effetti indesiderati attribuibili al trattamento.<br />
I primi risultati dovrebbero aversi per la metà del 2005. Se verrà <strong>di</strong>mostrato un effetto<br />
antiproteinurico <strong>di</strong> ACT 058 362, si potrà <strong>di</strong>segnare uno stu<strong>di</strong>o a lungo termine atto a valutare<br />
se una terapia cronica con antagonisti dell’urotensina può migliorare l’evoluzione della<br />
nefropatia in pazienti affetti da <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2.<br />
Stu<strong>di</strong>o randomizzato, in doppio cieco, volto a valutare gli effetti renali e<br />
sistemici <strong>di</strong> NCX4016, comparato con aspirina, in pazienti affetti da<br />
<strong>di</strong>abete tipo 2 e nefropatia <strong>di</strong>abetica incipiente.<br />
L’aspirina è un farmaco comunemente utilizzato, non solo nel trattamento degli stati dolorosi e<br />
infiammatori, ma anche nella prevenzione <strong>di</strong> complicanze car<strong>di</strong>ovascolari. Il suo impiego è però<br />
limitato dagli effetti gastrolesivi. Recenti ricerche evidenziano che l’aggiunta <strong>di</strong> un derivato<br />
dell’ossido nitrico (NO) alla molecola dell’aspirina permette <strong>di</strong> mantenere gli effetti terapeutici<br />
e limitare gli effetti indesiderati dell’aspirina a livello gasrtointestinale. L’ossido nitrico è infatti<br />
in grado <strong>di</strong> aumentare le <strong>di</strong>fese della mucosa gastrica migliorando la perfusione ematica e la<br />
secrezione <strong>di</strong> muco e favorendo la riparazione epiteliale. L’associazione <strong>di</strong> NO all’acido<br />
acetilsalicilico ne mantiene le proprietà analgesiche, antinfiammatorie e antitrombotiche<br />
riducendone però la gastrolesività. Dati sperimentali mostrano inoltre che questa associazione<br />
migliora la sensibilità all’insulina in topi con compromissione della produzione endoteliale <strong>di</strong><br />
NO.<br />
Nel corso del <strong>2004</strong> abbiamo quin<strong>di</strong> progettato e realizzato uno stu<strong>di</strong>o in cross-over con lo scopo<br />
<strong>di</strong> valutare l’attività dell’associazione (nitroaspirina o NCX4016) in rapporto all’aspirina, sulla<br />
sensibilità all’insulina, l’albuminuria (presa come marker <strong>di</strong> <strong>di</strong>sfunzione endoteliale) e sulla<br />
emo<strong>di</strong>namica car<strong>di</strong>aca e renale in pazienti affetti da <strong>di</strong>abete mellito <strong>di</strong> tipo 2.<br />
Tre<strong>di</strong>ci pazienti, dopo aver assunto per un mese un placebo, sono stati sottoposti a due perio<strong>di</strong><br />
<strong>di</strong> trattamento, della durata <strong>di</strong> un mese ciascuno, con nitroaspirina e aspirina somministrati a<br />
dosi equiattive (800 mg <strong>di</strong> nitroaspirina e 325 mg <strong>di</strong> aspirina). Al termine <strong>di</strong> ogni periodo <strong>di</strong><br />
trattamento abbiamo valutato la sensibilità all’insulina, l’albuminuria e l’emo<strong>di</strong>namica car<strong>di</strong>aca<br />
e renale. Lo stu<strong>di</strong>o si è concluso nel settembre <strong>2004</strong> e attualmente sono in corso le analisi. I<br />
risultati, se incoraggianti, potrebbero rappresentare il presupposto <strong>di</strong> un trial prospettico per<br />
verificare se un trattamento prolungato con nitroaspirina sia in grado <strong>di</strong> rallentare l’evoluzione<br />
del danno renale ed eventualmente ridurre l’incidenza <strong>di</strong> eventi car<strong>di</strong>ovascolari in pazienti<br />
affetti da <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2 e nefropatia <strong>di</strong>abetica.<br />
255<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Uno stu<strong>di</strong>o prospettico, randomizzato, multicentrico, volto a valutare<br />
l'effetto antiproteinurico delle Statine in associazione a terapia combinata<br />
con ACE-inhibitori e Antagonisti Recettoriali dell’Angiotensina nelle<br />
nefropatie croniche proteinuriche: Lo stu<strong>di</strong>o europeo <strong>di</strong> prevenzione della<br />
insufficienza renale terminale tramite agenti ipolipemizzanti e ACE<br />
inibitori: Lo stu<strong>di</strong>o ESPLANADE<br />
L’insufficienza renale terminale è in progressivo aumento nel mondo. I pazienti con uremia<br />
terminale presentano inoltre elevata morbi<strong>di</strong>tà e mortalità, principalmente dovuta ad un’elevata<br />
incidenza <strong>di</strong> patologie car<strong>di</strong>ovascolari. Quin<strong>di</strong> impe<strong>di</strong>re o limitare la progressione delle<br />
nefropatie croniche, oltre a limitare l'incidenza della uremia terminale, può anche portare a un<br />
prolungamento della sopravvivenza <strong>di</strong> questi pazienti. A lungo termine i farmaci che inibiscono<br />
il sistema renina-angiotensina, quali gli Inibitori dell’enzima <strong>di</strong> conversione (ACEi) e gli<br />
antagonisti recettoriali dell’Angiotensina II (ATA), hanno un chiaro effetto reno- e car<strong>di</strong>oprotettivo.<br />
Ci sono inoltre alcune evidenze che anche le statine, <strong>di</strong> cui è già noto l’effetto<br />
car<strong>di</strong>oprotettivo, possono avere proprietà reno-protettive specifiche.<br />
Abbiamo quin<strong>di</strong> <strong>di</strong>segnato uno stu<strong>di</strong>o al fine <strong>di</strong> valutare se la terapia con statine, oltre a limitare<br />
la morbi<strong>di</strong>tà e la mortalità car<strong>di</strong>ovascolare, è anche in grado <strong>di</strong> esercitare ulteriori effetti renoprotettivi<br />
in pazienti già in trattamento con ACEi ed ATA.<br />
ESPLANADE è uno stu<strong>di</strong>o multicentrico (cui aderiscono venti Centri Italiani <strong>di</strong> Nefrologia<br />
coor<strong>di</strong>nati dal nostro Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> Cliniche), prospettico, a gruppi paralleli nel quale dopo<br />
due mesi <strong>di</strong> trattamento con ACEi ed ATA, due gruppi <strong>di</strong> 90 pazienti, con o senza <strong>di</strong>abete tipo<br />
2, vengono sottoposti o meno a terapia con Fluvastatina (40 o 80 mg/<strong>di</strong>e) per 6 mesi. Nel corso<br />
dello stu<strong>di</strong>o abbiamo valutato l’andamento della proteinuria e del filtrato glomerulare. Nel corso<br />
<strong>di</strong> quest’anno alcuni pazienti hanno completato lo stu<strong>di</strong>o. Il reclutamento è iniziato il<br />
01/01/2003 e si dovrebbe completare a inizio 2005. Attualmente i pazienti randomizzati sono<br />
63, <strong>di</strong> cui 39 hanno già completato lo stu<strong>di</strong>o. Ẻ preve<strong>di</strong>bile che i risultati finali saranno<br />
<strong>di</strong>sponibili entro la fine del 2005.<br />
Effetti a breve e a lungo termine del controllo pressorio intensificato in<br />
pazienti con nefropatie croniche proteinuriche: L'efficacia del Ramipril<br />
nelle Nefropatie non-<strong>di</strong>abetiche 2: Lo stu<strong>di</strong>o REIN 2<br />
Lo stu<strong>di</strong>o REIN, che valutava l’efficacia del Ramipril nelle nefropatie croniche progressive, ha<br />
mostrato che a livelli paragonabili <strong>di</strong> controllo pressorio, gli inibitori dell’enzima <strong>di</strong> conversione<br />
dell'Angiotensina (ACEi) sono più efficaci <strong>di</strong> altri agenti antipertensivi nel rallentare la<br />
progressione delle nefropatie croniche verso l’uremia terminale. Un altro grande stu<strong>di</strong>o<br />
realizzato negli Stati Uniti finalizzato a valutare il ruolo della <strong>di</strong>eta e del controllo pressorio<br />
nella evoluzione delle nefropatie croniche ha mostrato inoltre che anche un controllo<br />
intensificato della pressione arteriosa può avere un effetto reno-protettivo. Nello stu<strong>di</strong>o REIN 2<br />
abbiamo quin<strong>di</strong> voluto verificare se un controllo intensificato della pressione arteriosa, ottenuto<br />
tramite l’utilizzo <strong>di</strong> Calcio antagonisti in associazione con ACE inibitori, è in grado <strong>di</strong><br />
incrementare l’effetto reno-protettivo attribuibile all’ACE inibitore. Il REIN 2 è uno stu<strong>di</strong>o<br />
multicentrico, randomizzato al quale hanno partecipano trenta centri <strong>di</strong> Nefrologia Italiani,<br />
Spagnoli, Svizzeri e Bulgari. In totale 338 pazienti sono stati randomizzati ad un trattamento<br />
con ACE inibitore (ramipril 5 mg/<strong>di</strong>e) da solo o in associazione ad un Calcio antagonista<br />
(felo<strong>di</strong>pina 10 mg/<strong>di</strong>e) al fine <strong>di</strong> ottenere due <strong>di</strong>fferenti target <strong>di</strong> controllo pressorio,<br />
convenzionale (pressione <strong>di</strong>astolica
IRFMN<br />
da dover sospendere lo stu<strong>di</strong>o. Attualmente è in corso la prima analisi ad interim (prevista al<br />
completamento dei primi sei mesi <strong>di</strong> follow-up da parte dell’ultimo paziente randomizzato)<br />
finalizzata a verificare se esiste un trend a favore o meno <strong>di</strong> uno dei due trattamenti. Sulla base<br />
<strong>di</strong> questa analisi, il comitato etico dovrà decidere se lo stu<strong>di</strong>o dovrà proseguire come da<br />
protocollo oppure dovrà essere interrotto prematuramente per l’evidenza che il trattamento non<br />
offre benefici aggiuntivi e/o aumenta il rischio <strong>di</strong> effetti collaterali.<br />
Stu<strong>di</strong>o pilota volto a valutare gli effetti a breve termine dell’acetilcarnitina<br />
sulla resistenza all’insulina e sulla sindrome metabolica in pazienti con<br />
elevato rischio <strong>di</strong> <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2: Acetilcarnitina nell’insulino resistenza<br />
La riduzione della sensibilità all’insulina (insulino resistenza) rappresenta un fattore <strong>di</strong> primaria<br />
importanza nella patogenesi del <strong>di</strong>abete mellito <strong>di</strong> tipo 2. Spesso precede o accompagna il<br />
<strong>di</strong>abete nell’ambito <strong>di</strong> una sindrome metabolica nella quale ipertensione arteriosa, obesità,<br />
alterata tolleranza ai carboidrati, <strong>di</strong>slipidemia, anomalie della coagulazione e albuminuria<br />
compartecipano, incrementando il rischio <strong>di</strong> malattie car<strong>di</strong>ovascolari. Il miglioramento della<br />
sindrome metabolica, tramite l’aumento della sensibilità all’insulina e la correzione delle<br />
alterazioni metaboliche ad essa legate, può avere un ruolo primario nella prevenzione del<br />
<strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2 e, a lungo termine, ridurre il rischio <strong>di</strong> importanti complicanze micro- e macrovascolari.<br />
L’Acetilcarnitina, un carrier intramitocondriale <strong>di</strong> gruppi acilici, può essere<br />
considerata un modulatore dell’utilizzazione dei substrati nelle cellule, con implicazioni nel<br />
metabolismo sia dei lipi<strong>di</strong> che dei carboidrati. Differenti stu<strong>di</strong> hanno mostrato che la carnitina<br />
contribuisce al miglioramento della sensibilità all’insulina e dell’utilizzazione del glucosio in<br />
soggetti sani e in pazienti affetti da <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2. Un recente stu<strong>di</strong>o ha anche <strong>di</strong>mostrato che<br />
un’infusione costante <strong>di</strong> Acetil-L-carnitina può aumentare l’utilizzazione del glucosio in<br />
paziente con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2, ristabilendo la glicogenosintesi.<br />
Abbiamo quin<strong>di</strong> progettato lo stu<strong>di</strong>o Acetilcarnitina nella insulino resistenza, uno stu<strong>di</strong>o pilota,<br />
sequenziale e longitu<strong>di</strong>nale volto a valutare se l’Acetilcarnitina riduce la resistenza all’insulina e<br />
migliora il profilo lipi<strong>di</strong>co in soggetti ad elevato rischio <strong>di</strong> <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2. Dieci pazienti sono<br />
stati trattati per sei mesi con Acetil-L-carnitina (2000 mg al giorno). L’insulino resistenza è stata<br />
valutata in con<strong>di</strong>zioni basali, a tre mesi e alla fine del trattamento. Una ulteriore valutazione è<br />
prevista dopo due mesi dalla sospensione del farmaco ed è attualmente in corso. In tutti il<br />
trattamento è stato ben tollerato. I risultati preliminari in<strong>di</strong>cano un possibile effetto benefico<br />
dell’Acetil-L-carnitina non solo sull’attività insulinica ma anche sulla sindrome metabolica ad<br />
essa associata. Tale effetto sarebbe più evidente in quei pazienti nei quali l’attività insulinica è<br />
alterata rispetto a quelli nei quali non è presente insulino resistenza. Per tale motivo è in<br />
programma l’ampliamento del campione in stu<strong>di</strong>o al fine <strong>di</strong> definire meglio se e in quali<br />
pazienti l’Acetil-L-carnitina è in grado <strong>di</strong> influenzare lo stato <strong>di</strong> alterata funzione insulinica. Se<br />
tale effetto verrà confermato, seguirà un trial <strong>di</strong> prevenzione primaria a lungo termine al fine <strong>di</strong><br />
valutare se la terapia con Acetil-L-carnitina, migliorando la sindrome metabolica, può evitare o<br />
ritardare l’esor<strong>di</strong>o del <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2 in pazienti ad elevato rischio a causa della ridotta<br />
funzione insulinica.<br />
Un trial randomizzato per valutare l’effetto <strong>di</strong> Ezetimibe e Simvastatina<br />
nella Dislipidemia del Diabete (ESD)<br />
E’ noto che le statine sono altamente efficaci nel ridurre i valori sierici delle lipoproteine a bassa<br />
densità (LDL) e costituiscono la terapia <strong>di</strong> prima scelta nei pazienti <strong>di</strong>abetici con <strong>di</strong>slipidemia.<br />
Queste molecole hanno un ottimo profilo <strong>di</strong> sicurezza che anche a lungo termine è decisamente<br />
migliore rispetto a quello <strong>di</strong> altri trattamenti ipolipemizzanti.<br />
Non sempre però questi farmaci riescono da soli ad ottenere i livelli <strong>di</strong> colesterolo desiderati e<br />
non sempre sono ben tollerati. In questi casi possono rendersi necessari altri farmaci da<br />
impiegarsi in associazione o in alternativa alle statine. Tra questi meritano particolare attenzione<br />
257<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
farmaci <strong>di</strong> recente sviluppo, quali l’ezetimibe, in grado <strong>di</strong> interferire con l’assorbimento<br />
gastrointestinale del colesterolo. In questo senso l’ezetimibe è una molecola interessante in<br />
quanto è particolarmente efficace nel ridurre l’assorbimento <strong>di</strong> colesterolo, è ben tollerata e ha<br />
un profilo <strong>di</strong> sicurezza eccellente.<br />
Lo stu<strong>di</strong>o ESD è randomizzato, prospettico, in doppio cieco e mira a valutare gli effetti<br />
dell’associazione ezetimibe-simvastatina (10-40 mg al giorno) con simvastatina da sola (40 mg<br />
al giorno) sul profilo lipi<strong>di</strong>co in una popolazione <strong>di</strong> soggetti <strong>di</strong>abetici <strong>di</strong> tipo 2 con una<br />
colesterolemia totale basale >135 mg/dl. I pazienti che non tollerano la cura con simvastatina<br />
saranno arruolati in un sottostu<strong>di</strong>o in cui verranno trattati con sola ezetimibe. Verrà anche<br />
indagata l’ipotesi che il miglioramento della <strong>di</strong>slipidemia possa associarsi ad una riduzione<br />
dell’albuminuria. Si prevede l’arruolamento <strong>di</strong> 108 pazienti <strong>di</strong>abetici <strong>di</strong> tipo 2 con albuminuria<br />
normale-alta (> 10 µg/min), ipertensione arteriosa e <strong>di</strong>slipidemia.<br />
Il protocollo <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o principale e il sottoprogetto sono stati sottoposti alle autorità regolatrici e<br />
sono stati approvati dai Comitati Etici nel novembre <strong>2004</strong>. Lo screening inizierà a Gennaio<br />
2005 e si prevede <strong>di</strong> avere i risultati conclusivi nell’arco <strong>di</strong> 1 anno.<br />
Stu<strong>di</strong>o randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo, crossover,<br />
a due trattamenti e in due perio<strong>di</strong>, monocentrico, volto a stabilire<br />
l’efficacia e la sicurezza <strong>di</strong> 300 mg <strong>di</strong> daglutril una volta al giorno rispetto<br />
al placebo in aggiunta a losartan, in soggetti <strong>di</strong>abetici <strong>di</strong> tipo 2 i quali<br />
evidenziano nefropatia manifesta e buon controllo dell’ipertensione.<br />
La terapia con bloccanti recettoriali dell’angiotensina II è ormai considerata un trattamento<br />
standard per i pazienti con <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 2 e nefropatia conclamata. Nonostante questo<br />
trattamento però il 20% <strong>di</strong> questi pazienti continua a progre<strong>di</strong>re verso l’insufficienza renale<br />
terminale. La terapia con bloccanti recettoriali dell’angiotensina II in questa popolazione riduce<br />
il rischio, nel migliore dei casi, del 20 %. E’ quin<strong>di</strong> necessaria una terapia renoprotettiva più<br />
efficace.<br />
KC12615, il principale metabolita del Daglutril, ha una potente azione inibitoria sulle<br />
endopeptidasi neutre e possiede anche attività inibitoria sull’enzima <strong>di</strong> conversione<br />
dell’endotelina. Sulla base <strong>di</strong> questa doppia azione inibitoria Daglutril trova in<strong>di</strong>cazione nel<br />
trattamento dell’ipertensione arteriosa essenziale, dell’ipertensione polmonare e dello<br />
scompenso car<strong>di</strong>aco. Inoltre il Daglutril, come gli ACE-inibitori, si è <strong>di</strong>mostrato efficace nel<br />
ridurre la proteinuria e l’albuminuria nei topi con <strong>di</strong>abete in<strong>di</strong>pendentemente dai suoi effetti<br />
sulla pressione arteriosa. A questo si associa una quasi completa prevenzione della fibrosi<br />
interstiziale. Per tale motivo nei pazienti con nefropatia conclamata in trattamento con bloccanti<br />
recettoriali dell’angiotensina II, l’aggiunta <strong>di</strong> Daglutril oltre a migliorare il controllo della<br />
pressione arteriosa potrebbe indurre una riduzione della proteinuria e quin<strong>di</strong> conferire<br />
un’ulteriore effetto renoprotettivo.<br />
Per questo motivo abbiamo <strong>di</strong>segnato uno stu<strong>di</strong>o randomizzato, in doppio cieco, controllato con<br />
placebo, con due perio<strong>di</strong> <strong>di</strong> trattamento in sequenza incrociata volto a confrontare l’escrezione<br />
urinaria <strong>di</strong> albumina nelle 24 ore durante trattamento con Daglutril 300 mg al giorno o placebo.<br />
Tutti i pazienti sono <strong>di</strong>abetici <strong>di</strong> tipo 2, con un’escrezione urinaria <strong>di</strong> albumina ≥ 20 e ≤ 1000<br />
microgrammi/min e pressione arteriosa sistolica/<strong>di</strong>astolica < 140/90 mmHg, già in trattamento<br />
con dosi piene <strong>di</strong> Losartan. Oltre alla proteinuria saranno valutati anche gli effetti del<br />
trattamento sulla pressione arteriosa manifestata nell’arco delle 24 ore, sull’emo<strong>di</strong>namica renale,<br />
la permeselettività glomerulare, il controllo metabolico ed una serie <strong>di</strong> parametri neuroormonali.<br />
Gli effetti del trattamento verranno valutati alla luce dei livelli ematici <strong>di</strong> Daglutril e del suo<br />
metabolita attivo ottenuti durante lo stu<strong>di</strong>o.<br />
Il protocollo è stato finalizzato nel <strong>2004</strong> e lo stu<strong>di</strong>o dovrebbe entrare nella fase operativa nei<br />
primi del 2005 e si dovrebbe completare nell’arco <strong>di</strong> 12 mesi.<br />
258<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Effetto antiproteinurico relativo <strong>di</strong> antagonisti recettoriali<br />
dell’angiotensina II (ATA) e inibitori dell’enzima <strong>di</strong> conversione (ACEi) da<br />
soli e in combinazione e <strong>di</strong> calcio antagonisti <strong>di</strong>idropiri<strong>di</strong>nici (dCCBs)<br />
nella nefropatia conclamata del <strong>di</strong>abete mellito <strong>di</strong> tipo 2<br />
I farmaci che inibiscono il Sistema Renina Angiotensina (RAS), come gli inibitori dell’enzima<br />
<strong>di</strong> conversione (ACEi) e gli antagonisti recettoriali dell’angiotensina (ATA) – <strong>di</strong>minuiscono<br />
efficacemente l’escrezione urinaria delle proteine e rallentano la progressione della nefropatia<br />
<strong>di</strong>abetica sia nell’animale che nell’uomo. Stu<strong>di</strong> recenti hanno <strong>di</strong>mostrato che gli inibitori delle<br />
recettori dell’angiotensina II, che bloccano i recettori <strong>di</strong> tipo 1 (AT-R1) ma non quelli <strong>di</strong> tipo 2<br />
(AT-R2), chiaramente riducono il rischio <strong>di</strong> malattia renale terminale in pazienti con <strong>di</strong>abete<br />
tipo 2 e nefropatia conclamata. Hanno anche <strong>di</strong>mostrato che AT1-inibitori hanno un effetto<br />
renoprotettivo che è analogo a quello osservato con gli inibitori dell’enzima <strong>di</strong> conversione<br />
(ACEi) nel <strong>di</strong>abete <strong>di</strong> tipo 1. Sfortunatamente, perchè gli inibitori dell’enzima <strong>di</strong> conversione<br />
(ACEi) non sono stati usati in questi stu<strong>di</strong>, un paragone <strong>di</strong>retto delle due classi <strong>di</strong> farmaci è<br />
impossibile. Per stu<strong>di</strong>are i loro effetti abbiamo compiuto uno stu<strong>di</strong>o prospettico, randomizzato,<br />
in gruppi paralleli mirato a comparare l'effetto antiproteinurico <strong>di</strong> due trattamenti della durata <strong>di</strong><br />
due mesi con ATA losartan (100 mg/giorno) da solo ACEi Enalapril 20 mg/giorno da solo o la<br />
loro combinazione, o il farmaco antipertensivo in uso che non interferisce <strong>di</strong>rettamente con<br />
l’attività del RAS come un calcio antagonista <strong>di</strong>idropiri<strong>di</strong>nico (dCCB) Felo<strong>di</strong>pina (10<br />
mg/giorno) in 39 pazienti con <strong>di</strong>abete mellito <strong>di</strong> tipo 2 e nefropatia conclamata.<br />
Per evitare l'effetto confondente <strong>di</strong> una maggiore riduzione della pressione arteriosa, il dosaggio<br />
dell’ACEi e dell’ATA è stato <strong>di</strong>mezzato nei pazienti con terapia combinata. Alla fine del<br />
periodo del trattamento la proteinuria si è ridotta più efficacemente con Enalapril da solo<br />
(54.5%) che con Losartan da solo (25.8%) o Felo<strong>di</strong>pina (37.1%) da sola. Il trattamento<br />
combinato non ha <strong>di</strong>mostrato un effetto antiproteinurico ad<strong>di</strong>tivo (33%). Tutti i trattamenti sono<br />
stati ben tollerati. Pertanto, nella nefropatia <strong>di</strong>abetica conclamata, gli ACE inibitotri hanno un<br />
effetto antiproteinurico maggiore rispetto ad ATA e dCCBs. Questo effetto non è mo<strong>di</strong>ficato<br />
significativamente dall’aggiunta degli ATA. Nel <strong>2004</strong> abbiamo completato le analisi della<br />
funzione della parete glomerulare (atraverso lo stu<strong>di</strong>o delle clearance frazionate <strong>di</strong> polisaccari<strong>di</strong><br />
<strong>di</strong> vario peso moleculare) ed abbiamo preparato il manoscritto. Questi risultati aprono una linea<br />
nuova <strong>di</strong> ricerca finalizzata a verificare se il superiore effetto antiproteinurico degli ACEi<br />
rispetto a quello degli ATA o <strong>di</strong> altri farmaci antiipertensivi che non interferiscono <strong>di</strong>rettamente<br />
con l’attività <strong>di</strong> RAS, si traduce anche in un superiore effetto renoprottetivo a lungo termine.<br />
Insulino sensibilità come marker <strong>di</strong> nefropatia nel <strong>di</strong>abete mellito tipo 2:<br />
uno stu<strong>di</strong>o trasversale su 173 pazienti con <strong>di</strong>abete mellito tipo 2<br />
La nefropatia <strong>di</strong>abetica è la principale causa <strong>di</strong> insufficienza renale terminale nei Paesi<br />
Occidentali, dove contribuisce per più <strong>di</strong> un terzo del totale dei pazienti in terapia sostitutiva.<br />
Perchè la nefropatia <strong>di</strong>abetica colpisca solo un sottogruppo <strong>di</strong> pazienti (quasi il 25% <strong>di</strong> loro),<br />
rimane comunque sconosciuto. Una pre<strong>di</strong>sposizione genetica potrebbe spiegare un aumentato<br />
rischio <strong>di</strong> nefropatia in questo sottogruppo, e una <strong>di</strong>minuita sensibilità all'azione dell’insulina<br />
(insulino resistenza) potrebbe essere un marker <strong>di</strong> tale pre<strong>di</strong>sposizione. Per testare questa ipotesi<br />
abbiamo stu<strong>di</strong>ato in maniera trasversale, la relazione tra sensibilità all’insulina, misurata con<br />
clamp iperinsulinemico euglicemico, e nefropatia <strong>di</strong>abetica in un grande gruppo <strong>di</strong> pazienti<br />
<strong>di</strong>abetici <strong>di</strong> tipo 2 con livelli <strong>di</strong>versi <strong>di</strong> coinvolgimento renale, corretto per età, sesso, body-mass<br />
index e la presenza o assenza dell’ipertensione arteriosa. Lo stu<strong>di</strong>o ha mostrato che la <strong>di</strong>minuita<br />
sensibilità all’insulina si associa in<strong>di</strong>pendentemente con l’incremento dell’albuminuria<br />
(considerata come marcatore <strong>di</strong> nefropatia <strong>di</strong>abetica) ed è relativamente in<strong>di</strong>pendente dal grado<br />
<strong>di</strong> insufficienza renale. E’ interessante notare che la <strong>di</strong>minuita sensibilità all'insulina si associa<br />
anche con l’ipertrigliceridemia, un altro componente della sindrome metabolica e noto fattore <strong>di</strong><br />
rischio car<strong>di</strong>ovascolare. I nostri risultati recenti hanno suggerito che una più severa resistenza<br />
259<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
all’insulina nei pazienti con <strong>di</strong>abete mellito <strong>di</strong> tipo 2 e albuminuria anormale non è un<br />
epifenomeno della nefropatia <strong>di</strong>abetica, ma può essere correlata alla patogenesi e alla<br />
progressione della malattia. Il peggioramento della funzionalità renale può inoltre aumentare la<br />
resistenza all’insulina, che può alimentare un circolo viziozo che alla fine accelera la<br />
progressione della malattia. Nel <strong>2004</strong> abbiamo completato le analisi ed abbiamo preparato il<br />
manoscritto. La conclusione del lavoro è che lo screening precoce della funzione insulinica può<br />
servire ad identificare dei pazienti ad alto-rischio che possono trarre il massimo beneficio dagli<br />
interventi <strong>di</strong> già provata efficacia e da eventuali trattamenti sperimentali in grado <strong>di</strong> migliorare<br />
la sensibilità all’insulina.<br />
260<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
LABORATORIO DI<br />
EPIDEMIOLOGIA CLINICA<br />
PERSONALE<br />
IRFMN<br />
Capo Laboratorio Guido BERTOLINI, Dr.Med.Chir.<br />
261<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL LABORATORIO<br />
IRFMN<br />
L’obiettivo generale delle attività del Laboratorio <strong>di</strong> Epidemiologia Clinica è quello <strong>di</strong><br />
contribuire al miglioramento dell’assistenza sanitaria in <strong>di</strong>versi ambiti <strong>di</strong>sciplinari. Due sono le<br />
principali <strong>di</strong>rettrici seguite: aiutare gli operatori ad utilizzare al meglio le conoscenze e le risorse<br />
<strong>di</strong>sponibili; contribuire alla produzione <strong>di</strong> nuove conoscenze utili alla pratica clinica. Gli ambiti<br />
assistenziali in cui il Laboratorio è particolarmente attivo sono quello della terapia intensiva e<br />
quello delle malattie rare.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Il progetto Margherita sulla valutazione della qualità dell’assistenza in Terapia Intensiva, al suo<br />
terzo anno <strong>di</strong> attività, ha visto un ulteriore aumento delle TI partecipanti, che sono passate da<br />
122 a 138. I pazienti reclutati nel <strong>2004</strong> sono stati complessivamente più <strong>di</strong> 40.000. Questo ha<br />
permesso <strong>di</strong> sviluppare un modello <strong>di</strong> pre<strong>di</strong>zione della mortalità del paziente critico, ancora più<br />
valido. Ogni TI partecipante ha ricevuto un rapporto generale e uno personalizzato. In quest<br />
ultimo, oltre a una dettagliata descrizione della casistica, abbiamo fornito alla singola TI il<br />
confronto della sua performance clinica con quella <strong>di</strong> tutte le altre, rese confrontabili proprio a<br />
partite dal modello <strong>di</strong> pre<strong>di</strong>zione della mortalità.<br />
Abbiamo monitorato, per conto del Ministero della Salute, l’utilizzo del farmaco Drotrecogin<br />
alfa (attivato) in TI. Si tratta <strong>di</strong> un farmaco appena approvato per il trattamento della sepsi<br />
severa e dello shock settico nel paziente critico. Nel contesto <strong>di</strong> un utilizzo sostanzialmente<br />
corretto, abbiamo in<strong>di</strong>viduato alcuni problemi e i relativi ambiti <strong>di</strong> miglioramento e abbiamo<br />
prodotto un rapporto dettagliato alle TI.<br />
E’ stato realizzato uno dei più gran<strong>di</strong> stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> sorveglianza delle infezioni in TI, che ha coinvolto<br />
71 reparti e reclutato più <strong>di</strong> 5800 pazienti. Nel contesto <strong>di</strong> questo stu<strong>di</strong>o, per ciascuna delle TI<br />
partecipanti si sono stati in<strong>di</strong>viduati i maggiori problemi nella <strong>di</strong>agnosi e trattamento delle<br />
infezioni.<br />
Abbiamo ulteriormente sviluppato un sistema esperto per assistere il me<strong>di</strong>co nella <strong>di</strong>fficile<br />
<strong>di</strong>agnosi <strong>di</strong> embolia polmonare, che ha <strong>di</strong>mostrato ottime caratteristiche <strong>di</strong> vali<strong>di</strong>tà.<br />
Abbiamo contribuito alla realizzazione <strong>di</strong> una rete europea per lo stu<strong>di</strong>o dei pazienti con<br />
sindromi paraneoplastiche.<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
Dipartimento <strong>di</strong> Neurologia, Clinica Me<strong>di</strong>ca II, Azienda ULSS 16, Università <strong>di</strong> Padova<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
Bloomsbury Institute of Intensive Care Me<strong>di</strong>cine, Institute of Biome<strong>di</strong>cal Research, University<br />
College London, UK<br />
262<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Ricerca & Pratica (Guido Bertolini)<br />
Dedalo. Gestire i sistemi complessi in sanità (Guido Bertolini)<br />
British Me<strong>di</strong>cal Journal<br />
Critical Care Me<strong>di</strong>cine<br />
Intensive Care Me<strong>di</strong>cine<br />
Lancet<br />
Health Policy<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
IRFMN<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
Research Group on Cost-Effectiveness, European Society of Intensive Care Me<strong>di</strong>cine<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
Corso residenziale “Statistica applicata alla ricerca biome<strong>di</strong>ca”.<br />
Corso residenziale “La statistica multivariata per la ricerca biome<strong>di</strong>ca”.<br />
Meeting residenziale GiViTI – Valutazione degli interventi in Terapia Intensiva.<br />
Corso <strong>di</strong> formazione “La strategia <strong>di</strong>agnostica in caso <strong>di</strong> trombo-embolismo venoso”.<br />
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
LABORATORIO<br />
41° Congresso Nazionale SIRM (Società Italiana <strong>di</strong> Ra<strong>di</strong>ologia Me<strong>di</strong>ca) - Palermo.<br />
58° Congresso Nazionale SIAARTI – Genova<br />
Seminario internazionale monotematico SINPE – Palermo.<br />
Convegno “Attività a confronto <strong>di</strong> sette TI toscane iscritte al GiViTI” – Livorno.<br />
15° Congresso Nazionale SMART – Milano<br />
Meeting BayPAD – Ro<strong>di</strong> (Greece)<br />
PNS EuroNetwork – Venezia<br />
Convegno "Etica e sperimentazioni cliniche in Terapia Intensiva" – Torino, Ospedale "Le<br />
Molinette"<br />
Convegno "Risk Management in sanità" . Milano, Ospedale San Raffaele<br />
Convegno "Aggiornamenti sull'ECM" - Genova<br />
263<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
AstraZeneca Italia<br />
SEVIT S.p.A.<br />
Azienda ULSS 16, Padova - Italia<br />
Sanofi-Synthelabo Italia<br />
Ministero della Salute<br />
Dasit S.p.A.<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
Brun-Buisson C, Minelli C, Bertolini G, Brazzi L, Pimentel J, Lewandowski K, Bion J, Romand JA, Villar J,<br />
Thorsteinsson A, Damas P, Armagani<strong>di</strong>s A, Lemaire F. Epidemiology and outcome of acute lung injury in European<br />
intensive care units. Results from the ALIVE study. Intensive Care Med <strong>2004</strong>; 30:51-61.<br />
Iapichino G, Gattinoni L, Radrizzani D, Simini B, Bertolini G, Ferla L, Mistraletti G, Porta F, Miranda DR. Volume<br />
of activity and occupancy rate in intensive care units. Association with mortality Intensive Care Med <strong>2004</strong>; 30:290-<br />
297.<br />
Bertolini G, Luciani D, Gridelli B. Day surgery: where do our efforts need to be focused? Results of a review and<br />
simulation on administrative data. Ambulatory Surg <strong>2004</strong>; 10: 211-216.<br />
Iapichino G, Rossi C, Radrizzani D, Simini B, Albicini M, Ferla L, Bassi G, Bertolini G. Nutrition given to critically<br />
ill patients during high level/complex care (on Italian ICUs). Clin Nutr <strong>2004</strong>; 23: 409-416.<br />
Malacarne P, Rossi C, Bertolini G. Antibiotic usage in intensive care units: a pharmaco-epidemiological multicentre<br />
study. J Antimicrob Chemother. <strong>2004</strong>; 54:221-224.<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI DIVULGATIVE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Malacarne P, Stella A, Giu<strong>di</strong>ci D, Bertolini G. La sorveglianza delle infezioni in terapia intensiva. Risultati<br />
preliminari <strong>di</strong> uno stu<strong>di</strong>o multicentrico GiViTI su 71 TI. Minerva Anestesiologica <strong>2004</strong>; 70: 321-328.<br />
Bertolini G. Accre<strong>di</strong>tamento formativo dei progetti <strong>di</strong> ricerca. Ricerca & Pratica <strong>2004</strong>; 20:85-86.<br />
ALTRE PRODUZIONI EDITORIALI PUBBLICATE NEL CORSO DEL<br />
<strong>2004</strong><br />
Rossi C, Bertolini G. Progetto Margherita. Promuovere la ricerca e la valutazione in Terapia Intensiva. <strong>Rapporto</strong><br />
2003. Bergamo: Ed. Sestante, <strong>2004</strong><br />
264<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
IRFMN<br />
Appropriatezza in Terapia Intensiva<br />
Questa linea <strong>di</strong> ricerca è orientata a valutare l'appropriatezza dell’assistenza fornita dalle<br />
Terapie Intensive (TI) italiane.<br />
Si tratta <strong>di</strong> un progetto pluriennale promosso all'interno del gruppo collaborativo GiViTI<br />
(Gruppo italiano per la Valutazione degli interventi in Terapia Intensiva), coor<strong>di</strong>nato dal<br />
Laboratorio. Fulcro <strong>di</strong> queste attività è il Progetto Margherita. Si tratta <strong>di</strong> un progetto <strong>di</strong><br />
valutazione continua della qualità dell’assistenza, basato su un software <strong>di</strong> raccolta dati prodotto<br />
e sviluppato all’interno del Laboratorio e <strong>di</strong>stribuito gratuitamente a tutte le TI iscritte. Il<br />
software è stato realizzato con una struttura modulare, che permette <strong>di</strong> integrare facilmente la<br />
raccolta dati <strong>di</strong> base (il "core" della Margherita) con raccolte dati relative a progetti <strong>di</strong> ricerca<br />
specifici (i "petali" della Margherita).<br />
Epidemiologia clinica delle malattie rare e della me<strong>di</strong>cina orfana<br />
Gli obiettivi <strong>di</strong> questo ambito <strong>di</strong> attività sono quelli <strong>di</strong> in<strong>di</strong>viduare e descrivere i problemi aperti<br />
per la ricerca e la clinica, nonché i bisogni assistenziali dei pazienti, relativamente a patologie<br />
rare o ad aspetti trascurati <strong>di</strong> malattie più comuni.<br />
Di questa linea <strong>di</strong> ricerca fa parte il progetto "PNS - Euronetwork". Si tratta <strong>di</strong> un progetto<br />
europeo, finanziato nel contesto del quinto programma quadro della Comunità Europea, che ha<br />
gli obiettivi <strong>di</strong>: realizzare una rete <strong>di</strong> centri <strong>di</strong> riferimento per queste patologie con un database<br />
comune; organizzare una banca dati <strong>di</strong> siero e <strong>di</strong> liquido cerebrospinale per mettere a punto i<br />
migliori in<strong>di</strong>catori anticorpali per la <strong>di</strong>agnosi e la prognosi <strong>di</strong> questi pazienti; realizzare progetti<br />
<strong>di</strong> ricerca sul trattamento <strong>di</strong> questa sindrome.<br />
265<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
266<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
COORDINAMENTO, INFORMAZIONE<br />
E DIAGNOSI DELLE MALATTIE RARE<br />
PERSONALE<br />
Capo Laboratorio Arrigo SCHIEPPATI, Dr.Med.<br />
Centro <strong>di</strong> Informazione per le Malattie Rare<br />
Capo Unita’ Erica DAINA, Dr.Med.<br />
267<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL LABORATORIO<br />
IRFMN<br />
Le malattie rare possono essere definite come con<strong>di</strong>zioni patologiche a bassa prevalenza e<br />
incidenza.<br />
Con l’obiettivo <strong>di</strong> introdurre un criterio rigoroso, il Working Group on Rare Diseases - istituito<br />
dalla Comunità Europea - ha stabilito si possa considerare rara una malattia con prevalenza<br />
inferiore a 5 casi per 10.000 abitanti. Per la maggior parte delle malattie rare mancano peraltro<br />
dati epidemiologici; per pochissime <strong>di</strong> esse esiste infatti un sistema <strong>di</strong> notifica dei casi a livello<br />
nazionale o internazionale. Pur interessando ciascuna un piccolo numero <strong>di</strong> in<strong>di</strong>vidui, solo<br />
apparentemente le malattie rare sono un problema <strong>di</strong> pochi: l’Organizzazione Mon<strong>di</strong>ale della<br />
Sanità stima ve ne siano almeno 5.000 e nel loro insieme rappresenterebbero il 10% della<br />
patologia umana.<br />
Uno dei primi problemi che una persona colpita da malattia rara si trova ad affrontare è che la<br />
sua con<strong>di</strong>zione venga riconosciuta; spesso la <strong>di</strong>agnosi giunge con notevole ritardo. Anche<br />
quando la <strong>di</strong>agnosi è tempestiva, i pazienti - o i loro familiari - incontrano molte <strong>di</strong>fficoltà<br />
nell’ottenere esaurienti informazioni. Anche i ricercatori e i clinici interessati allo stu<strong>di</strong>o delle<br />
malattie rare incontrano obiettive <strong>di</strong>fficoltà; fra esse la scarsa probabilità <strong>di</strong> ricevere<br />
finanziamenti. Non è tuttavia solo un problema <strong>di</strong> risorse. Spesso mancano adeguati modelli<br />
animali; per definizione infine le malattie rare colpiscono pochi in<strong>di</strong>vidui in una popolazione; è<br />
dunque verosimile che i pazienti siano <strong>di</strong>spersi su un'ampia area, a <strong>di</strong>mensione nazionale o<br />
ad<strong>di</strong>rittura sovranazionale. E’ complesso realizzare un progetto <strong>di</strong> ricerca anche perchè è<br />
<strong>di</strong>fficile localizzare i pazienti da stu<strong>di</strong>are.<br />
Le malattie rare comprendono patologie molto eterogenee e coinvolgono praticamente tutte le<br />
aree <strong>di</strong> interesse me<strong>di</strong>co. Un programma <strong>di</strong> ricerca clinica sulle malattie rare <strong>di</strong> livello adeguato<br />
presuppone pertanto un approccio molto articolato, multi<strong>di</strong>sciplinare.<br />
Dal 1992 è iniziato un progetto pilota che ha l'obiettivo <strong>di</strong> contribuire ad aumentare le<br />
conoscenze e le possibilità <strong>di</strong> cura delle malattie rare.<br />
Il Laboratorio ha costituito un Centro <strong>di</strong> Informazione per pazienti e operatori sanitari, svolge<br />
progetti <strong>di</strong> ricerca mirati per alcune malattie rare ed è attivo nel campo della <strong>di</strong>vulgazione e<br />
della formazione.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Nel Database del Centro <strong>di</strong> Informazione sono contenuti i dati relativi a oltre 9.020 pazienti<br />
affetti da 697 <strong>di</strong>verse malattie rare. Ciò rende possibile, per alcune delle malattie segnalate, la<br />
realizzazione <strong>di</strong> progetti <strong>di</strong> ricerca clinica.<br />
Nella Banca <strong>di</strong> materiale biologico sono raccolti e conservati campioni relativi a 774 pazienti<br />
con malattie rare e loro familiari.<br />
Il Centro ha stabilito contatti con oltre 282 Associazioni Italiane <strong>di</strong> pazienti e loro familiari.<br />
I pazienti affetti da 79 malattie rare per le quali non esiste ancora un' Associazione de<strong>di</strong>cata,<br />
hanno potuto incontrarsi tra loro.<br />
Dal Luglio 2000 la Commissione Europea ha riconosciuto al Laboratorio ruolo <strong>di</strong> "Postgraduate<br />
training on rare <strong>di</strong>seases" (contratto No. QLK4-1999-50547).<br />
Dal Dicembre 2001, con Delibera della Giunta Lombarda N.7328, il Centro è stato in<strong>di</strong>viduato<br />
quale sede del "Coor<strong>di</strong>namento della Rete Regionale per le Malattie Rare".<br />
268<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
IRFMN<br />
<strong>Istituto</strong> Superiore <strong>di</strong> Sanità<br />
Azienda Ospedaliera Ospedali Riuniti <strong>di</strong> Bergamo<br />
CMID, Ospedale G. Bosco, ASL 4, Torino - Centro <strong>di</strong> Coor<strong>di</strong>namento Regionale delle Malattie<br />
Rare per il Piemonte<br />
Italian Takayasu's Arteritis Study Group - ITAKA Group<br />
Laboratori <strong>di</strong> Biotecnologie, IRCCS Policlinico San Matteo, Pavia<br />
Regione Lombar<strong>di</strong>a, Assessorato alla Sanità<br />
Stu<strong>di</strong>o Multicentrico Italiano sulla Malattia <strong>di</strong> Anderson-Fabry, SMIMAF<br />
Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Torino, Scuola <strong>di</strong> Specializzazione in Patologia Clinica, Facoltà <strong>di</strong><br />
Me<strong>di</strong>cina e Chirurgia<br />
Network Italiano Promozione Acido Folico per la Prevenzione Primaria <strong>di</strong> Difetti Congeniti<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
Comunità Europea<br />
International Registry for Hemolytic Uremic Syndrome and Thrombotic Thrombocytopenic<br />
Purpura<br />
PRESENZA IN COMMISSIONI NAZIONALI E INTERNAZIONALI<br />
Commissione per gli Interventi Urgenti a Sostegno delle Persone Affette da Malattie Rare<br />
(Decreto Ministeriale 6/6/2002).<br />
Gruppo <strong>di</strong> Lavoro con funzioni <strong>di</strong> coor<strong>di</strong>namento operativo e <strong>di</strong> con<strong>di</strong>visione <strong>di</strong> strategie<br />
comuni per la prevenzione, la sorveglianza, la <strong>di</strong>agnosi, la terapia delle malattie rare, ai sensi del<br />
D.M. 18/5/2001, N°279, istituito dalla Regione Lombar<strong>di</strong>a (Delibera Regione Lombar<strong>di</strong>a<br />
N°7328, 11/12/2001).<br />
Task Force on Rare Diseases (established by DG Health and Consumer Protection on 21<br />
January <strong>2004</strong>).<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
Convegno “La malattia <strong>di</strong> Gaucher: <strong>di</strong>agnosi, terapia, follow-up”<br />
Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> Cliniche per le Malattie Rare Aldo e Cele Daccò – <strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri,<br />
Ranica (Bergamo), 16 Gennaio <strong>2004</strong><br />
269<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL<br />
LABORATORIO<br />
Meeting “La malattia <strong>di</strong> Gaucher: <strong>di</strong>agnosi, terapia, follow-up”<br />
Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> Cliniche per le Malattie Rare Aldo e Cele Daccò – <strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri,<br />
Ranica (Bergamo), 16 Gennaio <strong>2004</strong><br />
7° Convegno “Patologia Immune e Malattie Orfane”<br />
“Nuove strategie terapeutiche in immunopatologia: i farmaci biologici”<br />
Torino, 23-24 Gennaio <strong>2004</strong><br />
Seminario “Infermieri e sperimentazione clinica”<br />
<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> <strong>Farmacologiche</strong> <strong>Mario</strong> Negri<br />
Milano, 28 Gennaio <strong>2004</strong><br />
Convegno “Percorsi <strong>di</strong> ricerca dalla conoscenza al cambiamento”<br />
Centro Congressi Giovanni XXIII<br />
Bergamo, 23 febbraio <strong>2004</strong><br />
III° International Conference “Prospects in the treatment of rare <strong>di</strong>seases”<br />
Trieste, 19-22 Maggio <strong>2004</strong><br />
Corso Itinerante SIN “Approccio al neonato con sospetta sindrome malformativa”<br />
Centro Stu<strong>di</strong> Humana<br />
Milano, 3-4 Giugno <strong>2004</strong><br />
Corso <strong>di</strong> aggiornamento “Malattie Rare…ma non troppo”<br />
Sala Alessandrini<br />
Crema, 24-25 Settembre <strong>2004</strong><br />
XI Convegno Nazionale “Sindrome crioglobulinemica: i problemi, le soluzioni <strong>di</strong> oggi”<br />
Centro Congressi Giovanni XXIII<br />
Bergamo, 1-2 Ottobre <strong>2004</strong><br />
VII Congresso e Corsi SIGU “Consulenza Genetica Prenatale”<br />
Palazzo dei Congressi<br />
Pisa, 13-16 Ottobre <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
Incontro Scientifico “Patologie rare e farmaci orfani: ruolo e funzione dei tutor nella formazione<br />
integrata” Convention Well Europe<br />
Milano, 20 Novembre <strong>2004</strong><br />
270<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
Commissione Europea<br />
"Associazione Ricerca Malattie Rare", Bergamo<br />
Ministero della Salute<br />
Regione Lombar<strong>di</strong>a<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Remuzzi G., Schieppati A., Boissel J. P., Garattini S., Horton R.<br />
Independent clinical research in Europe<br />
Lancet. <strong>2004</strong>; 364, pp. 1723-26<br />
Schieppati A. ,Remuzzi G.<br />
Fighting renal <strong>di</strong>seases in poor countries: buil<strong>di</strong>ng a global fund with the help of the pharmaceutical industry<br />
J. Am. Soc. Nephrol. <strong>2004</strong>; 15, pp. 704-707<br />
Krulichova I., Gamba S., Ricci E., Garattini L.<br />
Direct me<strong>di</strong>cal costs of monitoring and treating patients with Takayasu arteritis in Italy<br />
European Journal Health Economics <strong>2004</strong>; No. 49, pp. 330-4<br />
Perna A., Schieppati A., Zamora J., Giuliano G. A., Braun N., Remuzzi G.<br />
Immunosoppressive treatment of i<strong>di</strong>opathic membranous nephropathy: a systematic review<br />
American Journal of Kidney Disease. <strong>2004</strong>; 44, pp. 358-401<br />
IRFMN<br />
Pescucci C, Mari F, Longo I, Vogiatzi P, Caselli R, Scala E, Abaterusso C, Gusmano R, Seri M, Miglietti N, Bresin<br />
E, Renieri A.<br />
Autosomal-dominant Alport sindrome: Natural history of a <strong>di</strong>sease due to COL4A3 or COL4A4 gene<br />
Kidney International. <strong>2004</strong>; 65(5), pp. 1598-603<br />
Matteucci M. L. S., Iascone M., Gamba A., Daina E., Rescigno G., Senni M., Terrazzi P.<br />
Left main stem patch plasty and aortic root homograft in Takayasu’s <strong>di</strong>sease.<br />
Annals of Thoracic Surgeons. <strong>2004</strong>, 77, pp. 314-7<br />
Somaschini M., Bellan C., Campana A., Casnaghi D., Colnaghi M. R., S. Ferrari, C. Gilar<strong>di</strong>, G. Perotti, A. Serra, L.<br />
Ventura, C. Zambelloni, R. Cesiano, E. Daina<br />
Proposta <strong>di</strong> classificazione delle malformazioni e delle malattie respiratorie rare del neonato.<br />
Pneumologia Pe<strong>di</strong>atrica. <strong>2004</strong>, No. 14, pp. 12-19<br />
271<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
IRFMN<br />
Centro <strong>di</strong> Informazione per le Malattie Rare<br />
Nel 1992 presso il Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> Cliniche per le Malattie Rare Aldo e Cele Daccò, è stato<br />
istituito il Centro <strong>di</strong> Informazione per le Malattie Rare.<br />
Il Centro è a <strong>di</strong>sposizione dei pazienti affetti da malattie rare, dei loro familiari e dei loro<br />
me<strong>di</strong>ci. Fornisce gratuitamente informazioni, aggiornamenti e in<strong>di</strong>rizzi utili per cercare <strong>di</strong><br />
risolvere almeno in parte alcuni dei problemi che chi è colpito da una malattia rara si trova ad<br />
affrontare.<br />
Nel corso degli anni la fisionomia dell'attività del Centro si è venuta gradualmente<br />
trasformando: da punto <strong>di</strong> smistamento <strong>di</strong> notizie aggiornate sulle malattie rare, a vero e proprio<br />
Centro <strong>di</strong> documentazione e <strong>di</strong> cultura su tutti i problemi relativi a queste malattie. La banca dati<br />
contenente notizie relative a numerose malattie rare è andata configurandosi come un vero e<br />
proprio patrimonio <strong>di</strong> dati che possono e potranno <strong>di</strong>ventare utilissimi nella programmazione<br />
degli stu<strong>di</strong> clinici.<br />
Sebbene la natura delle malattie rare non consenta - per definizione - l'accumularsi <strong>di</strong> numeri<br />
rilevanti <strong>di</strong> casi, si è verificata già per oltre 170 patologie la possibilità <strong>di</strong> <strong>di</strong>sporre <strong>di</strong> piccole<br />
coorti <strong>di</strong> pazienti con la stessa <strong>di</strong>agnosi.<br />
Banca <strong>di</strong> materiale biologico e caratterizzazione delle nefropatie ere<strong>di</strong>tarie<br />
L’obiettivo del progetto è quello <strong>di</strong> raccogliere dati clinici e campioni <strong>di</strong> materiale biologico<br />
relativi a pazienti affetti da alcune malattie genetiche rare e ai rispettivi familiari. Per realizzarlo<br />
sono stati creati un Archivio informatizzato dei casi segnalati e una Banca per la raccolta e la<br />
conservazione dei campioni biologici. La <strong>di</strong>sponibilità dei dati clinici e dei campioni biologici<br />
relativi ai casi raccolti, consente <strong>di</strong> eseguire test biochimici e genetici nell’ambito <strong>di</strong> progetti <strong>di</strong><br />
ricerca finalizzati a comprendere sempre meglio la patogenesi delle malattie e a definire i<br />
trattamenti che più efficacemente potrebbero prevenirle o curarle.<br />
L’attenzione è focalizzata in particolare sulle malattie genetiche rare del rene. Al paziente<br />
affetto da nefropatia ere<strong>di</strong>taria (es. sindrome <strong>di</strong> Alport, malattia <strong>di</strong> Fabry, Glomerulosclerosi<br />
focale familiare, malattia cistica della midollare) che si rivolga al Centro viene offerta una<br />
valutazione clinica comprendente raccolta dei dati anamnestici, visita me<strong>di</strong>ca, ecografia renale,<br />
esami <strong>di</strong> laboratorio (del sangue e delle urine). In tale occasione viene inoltre offerta una<br />
consulenza genetica, e ricostruita la storia familiare nonchè l’albero genealogico. Previo<br />
consenso informato scritto sono infine raccolti campioni <strong>di</strong> sangue, dai pazienti e familiari, che<br />
vengono etichettati con appositi co<strong>di</strong>ci e conservati nella Banca <strong>di</strong> materiale biologico. Per le<br />
nefropatie ere<strong>di</strong>tarie <strong>di</strong> cui sono noti i geni responsabili (sindrome <strong>di</strong> Alport, malattia <strong>di</strong> Fabry),<br />
i campioni <strong>di</strong> sangue vengono inviati ai Laboratori <strong>di</strong> riferimento. Per le altre nefropatie, <strong>di</strong> cui è<br />
recente o ancora in corso l’identificazione dei geni implicati, i campioni <strong>di</strong> sangue vengono<br />
conservati con l’obiettivo <strong>di</strong> utilizzarli nell’ambito <strong>di</strong> progetti <strong>di</strong> ricerca.<br />
Proposta <strong>di</strong> impiego <strong>di</strong> MMF, da confrontare con la terapia convenzionale,<br />
in pazienti con nefrite secondaria a LES<br />
La nefrite lupica è la più comune complicanza viscerale del Lupus Eritematoso Sistemico (LES)<br />
e rappresenta una delle maggiori cause <strong>di</strong> morbi<strong>di</strong>tà e mortalità. I pazienti con glomerulonefrite<br />
proliferativa <strong>di</strong>ffusa sono can<strong>di</strong>dati ad una pesante terapia immunosoppressiva avente l’obiettivo<br />
<strong>di</strong> controllare l’infiammazione intrarenale. Essi ricevono alte dosi <strong>di</strong> cortisonici con effetti<br />
collaterali <strong>di</strong> rilievo. I protocolli <strong>di</strong> trattamento che prevedono l’associazione <strong>di</strong> farmaci<br />
citotossici sono più efficaci rispetto al solo cortisonico nel controllare la nefrite e nel ridurre il<br />
rischio <strong>di</strong> insufficienza renale terminale, tuttavia non si sono <strong>di</strong>mostrati in grado <strong>di</strong> migliorare la<br />
sopravvivenza dei pazienti. Tra i trattamenti con farmaci citotossici, quello basato sull’impiego<br />
272<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
della ciclofosfamide presenta l’in<strong>di</strong>ce terapeutico più favorevole. I pazienti trattati con<br />
citotossici possono tuttavia sviluppare importanti effetti collaterali. Lo stu<strong>di</strong>o (aperto,<br />
multicentrico, randomizzato) mira a verificare i possibili vantaggi offerti dalla terapia con un<br />
farmaco immunosoppressore <strong>di</strong> recente introduzione, il micofenolato mofetile (MMF) nei<br />
pazienti con nefrite lupica proliferativa <strong>di</strong>ffusa.<br />
Valutazione dell'efficacia della terapia enzimatica sostitutiva nella malattia<br />
<strong>di</strong> Fabry<br />
La malattia <strong>di</strong> Fabry è una rara malattia metabolica legata al cromosoma X, causata dal deficit<br />
dell’enzima lisosomiale alfa-galattosidasi A, e caratterizzata dall’accumulo progressivo e<br />
<strong>di</strong>sseminato <strong>di</strong> glicosfingolipi<strong>di</strong> in vari organi e tessuti.<br />
Si manifesta prevalentemente ed in modo più grave nei maschi emizigoti e le manifestazioni<br />
cliniche principali sono a carico <strong>di</strong> cute, reni, cuore, occhi, sistema nervoso.<br />
Attualmente è <strong>di</strong>sponibile una terapia enzimatica sostitutiva per la malattia <strong>di</strong> Fabry. I risultati<br />
preliminari sono incoraggianti, sia in termini <strong>di</strong> tollerabilità che <strong>di</strong> efficacia. Lo scopo <strong>di</strong> questo<br />
stu<strong>di</strong>o è valutare l’efficacia a lungo termine della terapia enzimatica sostitutiva nei pazienti con<br />
malattia <strong>di</strong> Fabry e coinvolgimento renale.<br />
Si prevede <strong>di</strong> arruolare 20 pazienti (uomini e donne) afferenti al Registro dello Stu<strong>di</strong>o<br />
Multicentrico Italiano sulla Malattia <strong>di</strong> Anderson-Fabry (SMIMAF).<br />
Proposta <strong>di</strong> impiego <strong>di</strong> MMF in pazienti con Arterite <strong>di</strong> Takayasu resistente<br />
al trattamento con cortisone<br />
La malattia <strong>di</strong> Takayasu è una rara infiammazione delle arterie, le cui cause sono ancora<br />
sconosciute. I vasi maggiormente colpiti sono l’aorta e i suoi rami principali che, proprio a<br />
causa della malattia, possono restringersi fino all’occlusione completa o <strong>di</strong>latarsi in più punti.<br />
Ad ammalarsi sono più spesso donne giovani, tra i 20 e i 30 anni. L’obiettivo del trattamento è<br />
quello <strong>di</strong> fermare l’infiammazione delle arterie e nel 50% dei casi è possibile utilizzando alte<br />
dosi <strong>di</strong> cortisone. Il restante 50% non trova beneficio dalla terapia, presenta ricadute della<br />
malattia o non può mai sospendere il trattamento con cortisone. E' stato <strong>di</strong>mostrato che<br />
l’aggiunta <strong>di</strong> altri farmaci come la ciclofosfamide e il methotrexate alla terapia con cortisone,<br />
può facilitare la remissione della malattia. Il rischio <strong>di</strong> tossicità per l’uso prolungato <strong>di</strong><br />
ciclofosfamide o metotrexate è però ben noto. E' quin<strong>di</strong> necessario stu<strong>di</strong>are nuove strategie<br />
terapeutiche che offrano un equivalente se non un migliore effetto sul controllo della malattia,<br />
ma che siano meno tossici per i pazienti. Il micofenolato mofetile (MMF) potrebbe avere queste<br />
caratteristiche e l'obiettivo dello stu<strong>di</strong>o è valutarne l'utilità <strong>di</strong> impiego in pazienti con Arterite <strong>di</strong><br />
Takayasu resistente al trattamento con cortisone.<br />
Registro Internazionale per la Sindrome Emolitico Uremica e la Porpora<br />
Trombotica Trombocitopenica<br />
La Sindrome Emolitico Uremica (SEU) è una malattia rara caratterizzata da anemia emolitica e<br />
<strong>di</strong>minuzione del numero delle piastrine, con prevalente coinvolgimento dei reni. Nella sua<br />
forma tipica si manifesta con un evento acuto seguito da una guarigione senza conseguenze<br />
nell’80-90% dei casi; ciò può avvenire spontaneamente (come in molti casi <strong>di</strong> SEU infantile)<br />
oppure dopo infusione <strong>di</strong> plasma o plasmaferesi. Alcuni pazienti vanno invece incontro a una<br />
remissione transitoria, seguita da ricadute che comportano lo sviluppo <strong>di</strong> danni neurologici o<br />
renali permanenti. In queste forme, chiamate ricorrenti, si ipotizza l’esistenza <strong>di</strong> un fattore<br />
genetico che pre<strong>di</strong>sponga allo sviluppo della malattia. Esistono inoltre varianti estremamente<br />
rare <strong>di</strong> SEU, quelle denominate familiari in cui sono colpiti almeno due soggetti nella stessa<br />
famiglia.<br />
Il Laboratorio coor<strong>di</strong>na il Registro Internazionale per la Sindrome Emolitico Uremica e la<br />
Porpora Trombotica Trombocitopenica. Tale iniziativa ha permesso <strong>di</strong> raccogliere un rilevante<br />
273<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
numero <strong>di</strong> casi segnalati da 72 Centri Italiani e da 39 Centri stranieri (Europei ed extra Europei)<br />
e <strong>di</strong> impostare specifici progetti <strong>di</strong> ricerca in collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia e<br />
Genetica del Trapianto e Malattie Rare.<br />
Analisi <strong>di</strong> linkage della malattia policistica renale autosomica dominante<br />
La malattia policistica renale autosomica dominante (ADPKD) é una malattia geneticamente<br />
eterogenea, che può essere causata da mutazioni <strong>di</strong> geni <strong>di</strong>versi. Finora sono stati identificati<br />
due geni responsabili della malattia: il gene PKD1, localizzato sul cromosoma 16, mutato<br />
nell’85% dei pazienti, e il gene PKD2, localizzato sul cromosoma 4, mutato nel 10% circa dei<br />
pazienti. La principale manifestazione renale é rappresentata dalla formazione bilaterale <strong>di</strong> cisti,<br />
che aumentano <strong>di</strong> numero e <strong>di</strong>mensioni con l’età causando una progressiva per<strong>di</strong>ta della<br />
funzione renale. Nei pazienti PKD1 la malattia é più severa con un esor<strong>di</strong>o più precoce e un'età<br />
me<strong>di</strong>a <strong>di</strong> sopravvivenza renale <strong>di</strong> 54 anni, comparata ai 73 anni nei pazienti PKD2. L’ecografia<br />
renale, che è certamente l’esame <strong>di</strong>agnostico <strong>di</strong> scelta per riconoscere i soggetti a rischio<br />
(familiari <strong>di</strong> un soggetto affetto), è ritenuta atten<strong>di</strong>bile solo dopo i 20 o 30 anni. L’introduzione<br />
della <strong>di</strong>agnostica molecolare ha migliorato l’identificazione presintomatica delle persone affette.<br />
Il Laboratorio ha attivato un progetto <strong>di</strong> screening dei pazienti con ADPKD afferenti all'Unità <strong>di</strong><br />
Nefrologia e Dialisi degli Ospedali Riuniti <strong>di</strong> Bergamo. Nelle famiglie ADPKD verrà effettuata<br />
l’analisi <strong>di</strong> linkage, in collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia e Genetica del<br />
trapianto e malattie rare, allo scopo <strong>di</strong> <strong>di</strong>stinguere le famiglie PKD1 dalle famiglie PKD2 e <strong>di</strong><br />
in<strong>di</strong>viduare all'interno <strong>di</strong> ciascuna famiglia i soggetti a rischio (<strong>di</strong>agnosi presintomatica).<br />
Modello per il coor<strong>di</strong>namento regionale per la <strong>di</strong>agnosi delle malattie<br />
genetiche rare e lo sviluppo <strong>di</strong> progetti <strong>di</strong> ricerca<br />
Scopo del presente progetto è quello <strong>di</strong> affiancare ai compiti <strong>di</strong> sorveglianza epidemiologica<br />
previsti dalla attuale normativa in tema <strong>di</strong> malattie rare (Decreto Ministeriale n.279 18/05/2001),<br />
un’attività coor<strong>di</strong>nata <strong>di</strong> raccolta <strong>di</strong> dati e campioni biologici che consenta lo svolgimento <strong>di</strong><br />
progetti <strong>di</strong> ricerca mirati sulle malattie genetiche rare. Al lavoro partecipano: Regione<br />
Lombar<strong>di</strong>a Sanità; Istituti Clinici <strong>di</strong> Perfezionamento, Milano; Spedali Civili, Brescia; <strong>Istituto</strong><br />
Neurologico C. Besta, Milano; Ospedale San Raffaele, Milano; <strong>Istituto</strong> Neurologico C.<br />
Mon<strong>di</strong>no, Pavia; Policlinico San Matteo, Pavia.<br />
Tra i risultati del progetto:<br />
- Censimento a livello regionale <strong>di</strong> tutti i Servizi per la <strong>di</strong>agnostica delle malattie genetiche rare;<br />
- Pre<strong>di</strong>sposizione del sito Internet de<strong>di</strong>cato http://malattierare.marionegri.it/, accessibile dalla<br />
home page della Regione Lombar<strong>di</strong>a Sanità http://www.sanita.regione.lombar<strong>di</strong>a.it/ alla voce<br />
“Rete Regionale Malattie Rare”;<br />
- Database contenente informazioni relative a Registri <strong>di</strong> Malattia e Archivi <strong>di</strong> materiale<br />
biologico;<br />
- Proposta per uniformare il sistema <strong>di</strong> archiviazione <strong>di</strong> dati clinici e campioni biologici;<br />
- Revisione dell’attuale elenco ministeriale delle malattie rare esentate dalla partecipazione alla<br />
spesa sanitaria.<br />
Sviluppo <strong>di</strong> un modello <strong>di</strong> consulenza genetica integrata per le malattie<br />
ere<strong>di</strong>tarie a esor<strong>di</strong>o tar<strong>di</strong>vo<br />
Le malattie ere<strong>di</strong>tarie ad esor<strong>di</strong>o tar<strong>di</strong>vo, poichè compatibili con il raggiungimento dell’età<br />
adulta e quin<strong>di</strong> con il pieno sviluppo delle facoltà critiche e con la possibilità <strong>di</strong> riproduzione<br />
biologica, pongono molti problemi <strong>di</strong> carattere clinico-biologico, esistenziale ed etico, sia a chi<br />
ne è affetto sia a chi le cura.<br />
L'obiettivo che il progetto <strong>di</strong> ricerca (multicentrico) persegue è la elaborazione e la validazione<br />
<strong>di</strong> un modello <strong>di</strong> consulenza genetica per patologie ere<strong>di</strong>tarie a esor<strong>di</strong>o tar<strong>di</strong>vo basato su un<br />
approccio multi<strong>di</strong>sciplinare integrato (genetista/clinico con supporto psicologico/psichiatrico),<br />
274<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
che:<br />
1) consenta <strong>di</strong> sostenere/aiutare il soggetto a rischio nell'elaborazione cognitiva ed emotiva delle<br />
informazioni trasmesse nel corso del processo che accompagna l'esecuzione del test pre<strong>di</strong>ttivo;<br />
2) accresca e valorizzi le competenze professionali e le motivazioni del gruppo curante al fine <strong>di</strong><br />
migliorare la qualità del servizio reso.<br />
Il Laboratorio partecipa al progetto <strong>di</strong> ricerca, coor<strong>di</strong>nato dai Laboratori <strong>di</strong> Biotecnologie –<br />
IRCCS Policlinico San Matteo – Pavia, con l’obiettivo <strong>di</strong> elaborare un modello <strong>di</strong> consulenza<br />
genetica specifico per la malattia <strong>di</strong> Fabry. Si tratta <strong>di</strong> una rara malattia metabolica X-linked,<br />
causata dal deficit dell’enzima alfa-galattosidasi A, e caratterizzata dal progressivo accumulo <strong>di</strong><br />
glicosfingolipi<strong>di</strong> in vari organi e tessuti. La recente introduzione della <strong>di</strong>agnosi molecolare<br />
permette l’identificazione, tra i familiari <strong>di</strong> ogni paziente, <strong>di</strong> soggetti in fase presintomatica<br />
destinati a sviluppare la malattia e <strong>di</strong> donne che possano trasmetterla.<br />
Valutazione dell’efficacia <strong>di</strong> un trattamento intensivo combinato<br />
antiproteinurico nella sindrome <strong>di</strong> Alport<br />
La Sindrome <strong>di</strong> Alport è una rara forma <strong>di</strong> nefrite ere<strong>di</strong>taria progressiva causata da deficit <strong>di</strong><br />
sintesi <strong>di</strong> una delle subunità del collagene <strong>di</strong> tipo IV, costituente predominante delle membrane<br />
basali dei glomeruli renali. I segni principali <strong>di</strong> interessamento renale sono rappresentati dalla<br />
ematuria e dalla proteinuria con possibile evoluzione verso l’insufficienza renale terminale. Le<br />
altre manifestazioni comprendono alterazioni oculari e sor<strong>di</strong>tà neurosensoriale che colpisce la<br />
metà dei pazienti. Non esiste ancora un trattamento <strong>di</strong> <strong>di</strong>mostrata efficacia nel rallentare la<br />
progressione del danno renale in pazienti con Sindrome <strong>di</strong> Alport. I farmaci inibitori<br />
dell’enzima <strong>di</strong> conversione dell’angiotensina (ACE-inibitori) sono in grado <strong>di</strong> ridurre il declino<br />
della funzionalità renale in molte nefropatie croniche caratterizzate da per<strong>di</strong>ta <strong>di</strong> proteine. E’<br />
stato inoltre <strong>di</strong>mostrato che anche altri tipi <strong>di</strong> trattamenti possono ridurre ancora più<br />
efficacemente la proteinuria se associati agli ACE-inibitori. Lo scopo <strong>di</strong> questo stu<strong>di</strong>o è quello<br />
<strong>di</strong> valutare l’efficacia <strong>di</strong> un trattamento multimodale comprendente l’uso integrato <strong>di</strong> ACE<br />
inibitori, antagonisti recettoriali dell’angiotensina II, calcioantagonisti non <strong>di</strong>idropiri<strong>di</strong>nici e<br />
statine nella Sindrome <strong>di</strong> Alport con coinvolgimento renale. Saranno arruolati nello stu<strong>di</strong>o 9<br />
pazienti (maschi e femmine) con Sindrome <strong>di</strong> Alport e coinvolgimento renale<br />
(macroalbuminurici) ed un numero <strong>di</strong> pazienti definiti dal termine dell’arruolamento dei<br />
pazienti macroalbuminurici con coinvolgimento renale <strong>di</strong> grado minore (microalbuminurici).<br />
Rete regionale informatizzata per l'ottimizzazione della <strong>di</strong>agnosi, cura e<br />
analisi epidemiologica delle malattie rare<br />
Il progetto è coor<strong>di</strong>nato dal Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> <strong>di</strong> Immunopatologia e Documentazione su<br />
Malattie Rare della ASL 4 <strong>di</strong> Torino. Gli obiettivi che si propone sono i seguenti:<br />
1) creazione <strong>di</strong> un registro attivo a carattere prospettico per una migliore conoscenza<br />
dell'epidemiologia delle patologie rare in Piemonte nel contesto nazionale;<br />
2) Definizione <strong>di</strong> protocolli per l'analisi <strong>di</strong> mutazioni e <strong>di</strong> percorsi <strong>di</strong>agnostici;<br />
3) Sviluppo <strong>di</strong> protocolli <strong>di</strong>agnostico terapeutici che permettano, almeno per alcune patologie<br />
rare, una gestione più razionale ed economica dei pazienti colpiti;<br />
4) Realizzazione <strong>di</strong> una rete informatica <strong>di</strong> gestione delle informazioni che permetta una<br />
capillare <strong>di</strong>ffusione delle conoscenze relative alle malattie rare a livello degli operatori del SSN.<br />
Il Laboratorio partecipa al progetto <strong>di</strong> ricerca con il compito <strong>di</strong> creare un database accessibile<br />
on-line, ad accesso gratuito, de<strong>di</strong>cato agli stu<strong>di</strong> in corso sulle patologie rare.<br />
275<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
276<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
CESAV<br />
Centro <strong>di</strong> Economia Sanitaria A. e A. Valenti<br />
PERSONALE<br />
IRFMN<br />
Capo Laboratorio Livio GARATTINI, Dott. Economia<br />
277<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
INTRODUZIONE ALLE ATTIVITA' DEL CENTRO<br />
IRFMN<br />
Il CESAV, Centro <strong>di</strong> Economia Sanitaria Angelo e Angela Valenti, esistente dal 1992 e<br />
localizzato a Ranica (BG) presso la Villa Camozzi, svolge attività <strong>di</strong> ricerca nel settore sanitario,<br />
al cui sviluppo offre il proprio contributo in materia <strong>di</strong> economia e <strong>di</strong> management. In<br />
particolare, la ricerca verte sulla valutazione economica, consistente nell'analisi dei costi e dei<br />
benefici <strong>di</strong> possibili alternative in sanità, e sull' analisi comparativa, basata principalmente sullo<br />
stu<strong>di</strong>o <strong>di</strong> sistemi sanitari esteri, al fine <strong>di</strong> in<strong>di</strong>viduare eventuali innovazioni da proporre al SSN e<br />
da estendere, più in generale, ai Paesi dell'Unione Europea.<br />
SCOPERTE/RISULTATI PRINCIPALI<br />
Nel <strong>2004</strong>, gli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> valutazione economica hanno riguardato stime sui costi sanitari del<br />
glaucoma, della BroncoPneumopatia Cronica Ostruttiva (BPCO) e del dolore cronico/ricorrente,<br />
mentre gli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> analisi comparativa, in cui sono stati coinvolti Paesi dell’Unione Europea in<br />
vista <strong>di</strong> una maggiore integrazione futura anche in campo sanitario, si sono concentrati<br />
sull'analisi degli schemi <strong>di</strong> prezzi e rimborsabilità dei farmaci a contenuto innovativo.<br />
COLLABORAZIONI NAZIONALI<br />
AIES (Associazione Italiana <strong>di</strong> Economia Sanitaria).<br />
Enti pubblici nazionali (Ministero della Sanità, Assessorati Regionali, Aziende Sanitarie Locali,<br />
Aziende Ospedaliere).<br />
Collaborazioni con enti privati (aziende del settore e associazioni <strong>di</strong> categoria).<br />
COLLABORAZIONI INTERNAZIONALI<br />
CES (Collège des Economistes de la Santé)<br />
<strong>Istituto</strong> WidO <strong>di</strong> Bonn<br />
Università Carlos III <strong>di</strong> Madrid<br />
Università <strong>di</strong> Hannover<br />
Università <strong>di</strong> York<br />
Università Pompeu Fabra <strong>di</strong> Barcellona<br />
Università Erasmus <strong>di</strong> Rotterdam<br />
278<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
PRESENZA IN COMITATI EDITORIALI<br />
Applied Health Economics and Health Policy (Livio Garattini)<br />
Economia e Politica del Farmaco (Livio Garattini)<br />
Eurohealth (Livio Garattini)<br />
FarmacoEconomia News (Livio Garattini)<br />
Farmeconomia e Percorsi Terapeutici (Livio Garattini)<br />
Journal of Me<strong>di</strong>cal Economics (Livio Garattini)<br />
PharmacoEconomics Italian Research Articles (Livio Garattini)<br />
The European Journal of Health Economics (Livio Garattini)<br />
View & Review (Livio Garattini)<br />
Applied Health Economics and Health Policy<br />
The European Journal of Public Health<br />
PharmacoEconomics<br />
PharmacoEconomics Italian Research Articles<br />
The European Journal of Health Economics<br />
Value in Health<br />
ATTIVITA' DI REVISIONE<br />
ORGANIZZAZIONE DI EVENTI<br />
Workshop <strong>di</strong> Economia Sanitaria,19 Maggio, Ranica (BG).<br />
-Modeling in economic evaluations: an unavoidable fact of life?<br />
-The NICE experience: still a long way?<br />
-Economic evaluation: the challenge of non pharmaceutical interventions.<br />
IRFMN<br />
PARTECIPAZIONE AD EVENTI CON CONTRIBUTI DEL CENTRO<br />
Convegno:"Pratica assistenziale: fra evidenze scientifiche e vincoli economici".<br />
Relazione: "Concetti base <strong>di</strong> economia sanitaria".<br />
6 Febbraio, Mozzo (BG).<br />
Congresso: "A year in review and the implications for the future" (Local Experts Meeting<br />
<strong>2004</strong>).<br />
26 Febbraio, Londra.<br />
Convegno: "I farmaci generici: problemi e prospettive future del settore farmaceutico in Italia".<br />
Relazione: "La prescrizione del farmaco generico in Italia: problemi e prospettive".<br />
20 Marzo, Atripalda (AV).<br />
Congresso:"Opportunities in <strong>2004</strong> and beyond-Cambridge Pharma Consultancy"<br />
13-14 Maggio, Cambridge, Regno Unito.<br />
279<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
Convegno: "3° Convegno Nazionale <strong>di</strong> Farmacoeconomia"<br />
Relazioni:" Una revisione sistematica degli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> farmacoeconomia in Italia: aspetti<br />
economici e clinici"; "La farmacoeconomia applicata alle patologie"; "La politica del farmaco<br />
fra Stato e Regioni: considerazioni introduttive"; "Stato <strong>di</strong> salute e costi del paziente <strong>di</strong>stimico<br />
in me<strong>di</strong>cina generale: il progetto DYSCO"; "I costi sanitari del glaucoma: il progetto<br />
GLAUCO".<br />
17-18 Maggio, Ranica (BG).<br />
Convegno: "I farmaci generici in Italia: problemi e prospettive".<br />
Relazione: "Il prezzo <strong>di</strong> riferimento: riflessioni sul caso italiano".<br />
8 Giugno, Roma.<br />
Workshop: "European Workshop- The assessment of me<strong>di</strong>cinal products".<br />
10 Giugno, Anversa, Belgio.<br />
Corso: "Corso interattivo <strong>di</strong> epidemiologia e statistica sanitaria applicata per me<strong>di</strong>ci con<br />
particolare interesse in uro<strong>di</strong>namica".<br />
"Statistica e Farmacoeconomia".<br />
8 Ottobre, Padova.<br />
Corso: "Appropriatezza prescrittiva e me<strong>di</strong>cinali a brevetto scaduto: integrazioni fra specialista<br />
e MMG".<br />
"Concetti base <strong>di</strong> economia sanitaria: la peculiarità del settore farmaceutico sotto il profilo<br />
economico"; "Il ruolo dei farmaci a brevetto scaduto nelle scelte <strong>di</strong> politica sanitaria".<br />
9 Ottobre, Ranica (BG).<br />
Corso: "I principi e gli strumenti della valutazione economica in ambito sanitario".<br />
"Le ragioni della valutazione economica in sanità"; "Metodologia degli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> valutazione<br />
economica"; "Gli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> farmacoeconomia in Italia: una revisione della letteratura".<br />
19 Ottobre, Parma.<br />
Corso: "I principi e gli strumenti della valutazione economica in ambito sanitario".ECM.<br />
"Le ragioni della valutazione economica in sanità"; "Metodologia degli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> valutazione<br />
economica"; "Gli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> farmacoeconomia in Italia: una revisione della letteratura".<br />
21 Ottobre, Napoli.<br />
Convegno: "E<strong>di</strong>torial Board Meeting of "the European Journal of Health Economics".<br />
25 Ottobre, Amburgo, Germania.<br />
Convegno: "I livelli <strong>di</strong> governo della sanità-Finanziamento, assetti istituzionali e management".<br />
4-5 Novembre, Milano.<br />
Convegno: "Bergamo e la Lombar<strong>di</strong>a: Società, Economia, Sviluppo".<br />
13 Novembre, Bergamo.<br />
Convegno: "Il glaucoma: impatto sanitario ed economico. Lo stu<strong>di</strong>o GLAUCO".<br />
25-27 Novembre, Roma.<br />
Convegno: "La terapia del tumore del colon retto: aspetti clinici, farmacologici e<br />
farmacoeconomici".<br />
Relazione: "Aspetti organizzativi, farmacoeconomici e <strong>di</strong> politica sanitaria in un <strong>di</strong>partimento<br />
280<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
oncologico".<br />
11 Dicembre, Roma.<br />
Convegno: "I farmaci generici in Italia: problemi e prospettive".<br />
13 Dicembre, Monza (MI).<br />
Abbott<br />
Consorzio CEO<br />
DOC<br />
Dorom<br />
EG<br />
Erasmus University Rotterdam<br />
Jannsen Cilag<br />
Novartis<br />
Ratiopharm<br />
Sanofi-Synthélabo<br />
Vivisol<br />
Unione Europea<br />
CONTRIBUTI E CONTRATTI<br />
SELEZIONE PUBBLICAZIONI SCIENTIFICHE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
IRFMN<br />
Garattini L, Chiaffarino F, Cornago D, Coscelli C, Parazzini F and on behalf of the Study Group RECORD “Direct<br />
me<strong>di</strong>cal costs unequivocally related to <strong>di</strong>abetes in Italian specialized centers” The European Journal of Health<br />
Economics 1: 15-21.<br />
Garattini L, Castelnuovo E, Lanzetta P, Viscarra C, Parazzini F and on behalf of the CARMA Study Group “Direct<br />
Me<strong>di</strong>cal Costs of Age-related Macular Degeneration in Italian Hospital Departments of Ophthalmology: a<br />
multicentre, prospective 1-year study” The European Journal of Health Economics 1: 22-27.<br />
Beghi E, Garattini L, Ricci E, Cornago D, Parazzini F on behalf of the EPICOS Group “Direct Cost of Me<strong>di</strong>cal<br />
Management of Epilepsy among Adults in Italy: A Prospective Cost-of-Illness Study (EPICOS)” Epilepsia 45(2):<br />
171-178.<br />
Barbui C, Garattini L, Krulichova I, Apolone G, on behalf of the DYSCO Group “Health Status Resource<br />
Consumption, and Costs of Dysthymic Patients in Italian Primary Care” Epidemiologia e Psichiatria Sociale 13(2):<br />
120-125.<br />
Garattini L, Barbui C, Clemente R, Cornago D, Parazzini F on behalf of the Study Group SCORE “Direct Costs of<br />
Schizophrenia and Related Disorders in Italian Community Mental Health Services: A Multicenter, Prospective 1-<br />
Year Follow up Study” Schizophrenia Bulletin 30(2): 295-302.<br />
Krulichova I, Gamba S, Ricci E, Garattini L “ Direct me<strong>di</strong>cal costs of monitoring and treating patients with Takayasu<br />
arteritis in Italy” The European Journal of Health Economics 5(4):330-334.<br />
281<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
SELEZIONE PUBBLICAZIONI DIVULGATIVE APPARSE<br />
NELL'ANNO <strong>2004</strong><br />
Garattini L, Caimi V, Cipriani S, Roggeri D, Lanzeni D, Viscarra C e Gruppo <strong>di</strong> Stu<strong>di</strong>o Pa.Co.“I costi del dolore<br />
cronico/ricorrente in me<strong>di</strong>cina generale” PharmacoEconomics Italian Research Articles 6(1): 39-46.<br />
IRFMN<br />
De Compadri P, Schiavone M “I costi del glaucoma: una rassegna della letteratura più recente” FarmacoEconomia<br />
News 1: 3-10.<br />
Garattini L, Li Bassi L, Ghislan<strong>di</strong> S, Bon A, De Compadri P “Gli stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> farmacoeconomia in Italia: una rassegna<br />
della letteratura esistente” Economia & Politica del Farmaco 1:28-37.<br />
Ghislan<strong>di</strong> S, Krulichova I, Garattini L “ La politica dei farmaci “genericabili” in Italia” Economia & Politica del<br />
Farmaco 2: 17-25.<br />
Garattini L, Cornago D “Ossigenoterapia a lungo termine: modalità <strong>di</strong> acquisto e <strong>di</strong>stribuzione in Italia” Economia &<br />
Politica del Farmaco 2: 29-36.<br />
Cornago D, Motterlini N, Garattini L “I costi in <strong>di</strong>abetologia pe<strong>di</strong>atrica” Economia & Politica del Farmaco 2: 43-50.<br />
Koleva D, Motterlini N, Schiavone M, Garattini L “I costi del glaucoma in Italia: l’analisi retrospettiva dello stu<strong>di</strong>o<br />
GLAUCO” Economia & Politica del Farmaco 3: 34-41.<br />
De Compadri P, Galli M “Mieloma multiplo: une revisione selettiva delle analisi dei costi esistenti in letteratura”<br />
FarmacoEconomia News 4:3-12.<br />
Garattini S, Garattini L “Il mercato dei farmaci (me<strong>di</strong>cinali) in quattro paesi europei è tuttora <strong>di</strong>verso” Ricerca &<br />
Pratica 20:1-2.<br />
282<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ATTIVITA' DI RICERCA<br />
IRFMN<br />
Attività <strong>di</strong> formazione<br />
Il CESAV svolge attività <strong>di</strong> formazione prevalentemente collegata ai progetti <strong>di</strong> ricerca, al fine<br />
<strong>di</strong> offrire contributi formativi originali che si alimentino dei contenuti dell'attività primaria del<br />
centro.<br />
Valutazione Economica<br />
L'obiettivo <strong>di</strong> questa linea <strong>di</strong> ricerca è valutare i costi delle patologie e i rapporti costo-efficacia<br />
delle alternative <strong>di</strong>agnostico-terapeutiche <strong>di</strong>sponibili. I tipi <strong>di</strong> analisi si <strong>di</strong>fferenziano a seconda<br />
che si tratti <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> osservazionali <strong>di</strong> costi della patologia, oppure <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> valutazione<br />
economica in senso completo(tipicamente analisi costo-efficacia). Nel primo caso, il metodo<br />
utilizzato è quello <strong>di</strong> seguire coorti <strong>di</strong> pazienti affetti dalla stessa patologia per un periodo<br />
significativo <strong>di</strong> tempo, al fine <strong>di</strong> verificare i relativi consumi <strong>di</strong> risorse sanitarie, da monetizzare<br />
poi attraverso l'in<strong>di</strong>viduazione dei costi unitari delle singole prestazioni. In particolare a livello<br />
ospedaliero, l'obiettivo è quello <strong>di</strong> stimarne i costi unitari attraverso i dati <strong>di</strong> contabilità per<br />
centri <strong>di</strong> costo, laddove <strong>di</strong>sponibili.<br />
Nel secondo caso, all'analisi dei costi si aggiunge la valutazione dell'efficacia delle alternative<br />
prese in esame(si raccolgono, quin<strong>di</strong>, informazioni anche <strong>di</strong> carattere clinico sulle terapie<br />
analizzate).<br />
Analisi Comparativa<br />
L'obiettivo <strong>di</strong> questa linea <strong>di</strong> ricerca è stu<strong>di</strong>are l'organizzazione dei sistemi sanitari per trarre<br />
delle in<strong>di</strong>cazioni dai confronti sistematici fra gli stessi. Le scelte dei legislatori nazionali, a<br />
fronte <strong>di</strong> problemi comuni in ogni Paese, variano molto da una nazione all'altra. L'intervento<br />
pubblico è presente in ogni nazione, poiché il servizio sanitario non possiede meccanismi<br />
regolatori <strong>di</strong> mercato collegati alle leggi economiche della domanda e dell'offerta; pertanto,<br />
l'analisi comparativa a livello internazionale <strong>di</strong> tali scelte è utile per verificare il livello <strong>di</strong><br />
razionalità perseguito da ogni politica sanitaria nazionale.<br />
Lo schema d'indagine del CESAV prevede un approfon<strong>di</strong>mento dell'assetto istituzionale, dei<br />
principali servizi erogati e della gestione finanziaria del sistema indagato per ricostruirne una<br />
monografia il più possibile esaustiva traendo, in ultima analisi, in<strong>di</strong>cazioni sia positive che<br />
negative del relativo funzionamento.<br />
283<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
284<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Centro <strong>Ricerche</strong> Trapianti<br />
Chiara Cucchi De Alessandri e<br />
Gilberto Crespi<br />
IRFMN<br />
Il Centro <strong>Ricerche</strong> Trapianti (CRT) è nato nel 2002 per sostenere e promuovere il lavoro dei<br />
migliori ricercatori <strong>di</strong> tutto il mondo e per portare a termine importanti programmi <strong>di</strong> ricerca<br />
nell'ambito della trapiantologia.<br />
Il Centro ha sede a Villa Camozzi (Ranica), presso l'<strong>Istituto</strong> <strong>Mario</strong> Negri <strong>di</strong> Bergamo ed è<br />
gestito in collaborazione con l'<strong>Istituto</strong> stesso.<br />
Lo staff del CRT è composto prevalentemente da ricercatori senior e junior che si sono formati<br />
nei Laboratori dell'lstituto <strong>Mario</strong> Negri <strong>di</strong> Bergamo nell'ambito dell'immunologia del trapianto,<br />
della ricerca <strong>di</strong> farmaci immunosoppressori meno tossici e <strong>di</strong> nuove tecniche <strong>di</strong> terapia genica<br />
per prevenire il rigetto acuto del trapianto d'organo.<br />
Informazioni sulle attività <strong>di</strong> ricerca del Centro sono presenti nelle attività dei Dipartimenti <strong>di</strong><br />
Me<strong>di</strong>cina Molecolare (Laboratorio <strong>di</strong> Immunologia e Genetica del Trapianto e Malattie Rare) e<br />
<strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Molecolare (Laboratorio <strong>di</strong> Farmacocinetica e Chimica Clinica).<br />
285<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
286<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
L’ATTIVITA’ DIDATTICA<br />
Direttore della Scuola - <strong>Mario</strong> Salmona<br />
IRFMN<br />
L’attività <strong>di</strong>dattica dell’<strong>Istituto</strong> si svolge nel campo delle scienze biome<strong>di</strong>che, è inserita<br />
nell’ambito dei programmi <strong>di</strong> formazione professionale della Regione Lombar<strong>di</strong>a ed è costituita<br />
da un percorso formativo per la specializzazione <strong>di</strong> tecnici <strong>di</strong> laboratorio, per la specializzazione<br />
post-dottorale <strong>di</strong> laureati che intendono de<strong>di</strong>carsi alla ricerca e per il <strong>di</strong>ploma <strong>di</strong> Infermiere<br />
professionale in ricerca clinica (presso il Centro <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> Cliniche per le Malattie Rare “Aldo<br />
e Cele Daccò” <strong>di</strong> Ranica, Bg). Dal 1999 l’<strong>Istituto</strong> ha anche attivato un corso <strong>di</strong> Ph.D (Dottorato<br />
<strong>di</strong> Ricerca) in collaborazione con la Open University <strong>di</strong> Londra. Il <strong>di</strong>ploma rilasciato ha valore<br />
legale in tutta Europa e Stati Uniti.<br />
Tutti gli allievi dei corsi dopo tre mesi <strong>di</strong> preparazione fruiscono <strong>di</strong> borse <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o dell’<strong>Istituto</strong>,<br />
che dal 1963 al <strong>2004</strong> ne ha erogate 5.875 <strong>di</strong> cui 647 a ricercatori stranieri. L’<strong>Istituto</strong> favorisce<br />
l’inserimento nel mondo del lavoro degli allievi dopo il conseguimento del <strong>di</strong>ploma.<br />
La caratteristica metodologica essenziale dei corsi consiste nel fatto che tecnici e ricercatori si<br />
formano "sul campo". Essi partecipano infatti, a tempo pieno, a programmi <strong>di</strong> ricerca <strong>di</strong> alto<br />
livello scientifico, impiegando strumenti e tecnologie avanzati e collaborando con ricercatori <strong>di</strong><br />
vari Paesi: praticano cioè una ricerca altamente formativa anche a livello <strong>di</strong> rapporti personali.<br />
Gli allievi svolgono la loro attività <strong>di</strong> specializzazione prevalentemente in un determinato<br />
laboratorio dell’<strong>Istituto</strong> e sono progressivamente inseriti nei programmi <strong>di</strong> ricerca in corso. Essi<br />
sono tenuti a frequentare lezioni, seminari, corsi e convegni e a utilizzare la biblioteca interna.<br />
L’<strong>Istituto</strong> fornisce a tutti gli allievi la possibilità <strong>di</strong> utilizzare Internet per l’accesso alle basi <strong>di</strong><br />
dati <strong>di</strong> biome<strong>di</strong>cina e stampare in linea gli articoli delle principali riviste scientifiche. Gli allievi<br />
devono essere <strong>di</strong>sponibili a recarsi all’estero per partecipare a corsi e congressi.<br />
I <strong>di</strong>plomi <strong>di</strong> “Specialista in Ricerca Farmacologica” e <strong>di</strong> “Tecnico in Ricerca Biochimica” sono<br />
rilasciati ufficialmente dalla Regione Lombar<strong>di</strong>a e dall’<strong>Istituto</strong> <strong>di</strong> <strong>Ricerche</strong> <strong>Farmacologiche</strong><br />
“<strong>Mario</strong> Negri” e hanno valore legale in tutto il territorio della Repubblica Italiana. Essi possono<br />
essere riconosciuti nei concorsi pubblici e contribuire alla formazione dei relativi punteggi.<br />
Infine, i <strong>di</strong>plomi rilasciati dall’<strong>Istituto</strong> “<strong>Mario</strong> Negri” vengono unanimamente considerati una<br />
garanzia <strong>di</strong> ottima formazione teorica e pratica.<br />
Il titolo <strong>di</strong> Ph.D ha valore legale in tutta Europa e USA ed è equivalente al titolo <strong>di</strong> Dottorato <strong>di</strong><br />
Ricerca. Una volta ottenuto il Diploma regionale oppure il titolo <strong>di</strong> Ph.D gli allievi che vogliono<br />
proseguire la loro attività nella ricerca possono ottenere delle borse <strong>di</strong> stu<strong>di</strong>o per trascorrere<br />
all’estero uno o due anni <strong>di</strong> ulteriore specilizzazione presso rinomati istituti stranieri.<br />
287<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
I corsi attualmente tenuti sono:<br />
• Corso triennale per laureati, che porta al conseguimento del <strong>di</strong>ploma <strong>di</strong> “SPECIALISTA IN<br />
RICERCA FARMACOLOGICA”.<br />
• Corso triennale per <strong>di</strong>plomati, che porta al conseguimento del <strong>di</strong>ploma <strong>di</strong> “TECNICO IN<br />
RICERCA BIOCHIMICA”.<br />
• Corso <strong>di</strong> Ph.D. (Dottorato <strong>di</strong> Ricerca) nell’ambito <strong>di</strong> un accordo siglato con la Open University<br />
<strong>di</strong> Londra.<br />
• Corso biennale per infermieri professionali che porta al conseguimento del <strong>di</strong>ploma <strong>di</strong><br />
“INFERMIERE PROFESSIONALE IN RICERCA CLINICA” (presso il Centro Daccò <strong>di</strong><br />
Ranica, Bg).<br />
Altre attività formative<br />
• TESI DI LAUREA<br />
E’ possibile preparare la tesi <strong>di</strong> laurea in materie scientifiche presso l’<strong>Istituto</strong> previa<br />
approvazione delle rispettive Facoltà. E’ necessario frequentare l’<strong>Istituto</strong> per almeno 2 anni.<br />
• SUMMER STUDENTS<br />
L’<strong>Istituto</strong> accoglie, nei mesi <strong>di</strong> giugno e luglio, un certo numero <strong>di</strong> studenti degli ultimi due anni<br />
delle scuole superiori nell’ambito degli stage formativi “scuola-lavoro”.<br />
288<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
ORGANIGRAMMA<br />
IRFMN<br />
Unità organizzative<br />
Uffici e Servizi<br />
289<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
IRFMN<br />
290<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
<strong>Mario</strong> Negri Milano<br />
Direzione<br />
Direttore Prof. Silvio GARATTINI, Dr. Med.<br />
Amministrazione<br />
Maria Grazia PEZZONI, Capo Servizio Amministrativo<br />
Ufficio Stu<strong>di</strong><br />
Armanda JORI, Dr. Farm.<br />
Ufficio Stampa<br />
Isabella BORDOGNA, Dr. Filosofia<br />
Ufficio Relazioni Esterne<br />
Clau<strong>di</strong>o PANTAROTTO, Comm., Chim.<br />
Servizio Prevenzione e Protezione<br />
Emilio BENFENATI, Dr. Chim.<br />
Annamaria SEGALINI, Dr. Fisica, Responsabile<br />
English Style E<strong>di</strong>tor<br />
Judy BAGGOTT<br />
Manutenzione Generale<br />
Alessandro CAMPOSARCONE<br />
Servizio Fotografico<br />
Felice DE CEGLIE<br />
Ufficio Acquisti<br />
Eufrasia COVIELLO<br />
Segreteria <strong>di</strong> Direzione<br />
Rosanna MAPELLI, Capo Segreteria<br />
Segreteria Generale<br />
Fiorella GIUSSANI, Capo Segreteria<br />
Custo<strong>di</strong><br />
Elisabetta e Romano BERTOLI<br />
IRFMN<br />
291<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Laboratori Negri Bergamo<br />
Direzione<br />
Direttore Prof. Silvio GARATTINI, Dr. Med.<br />
Coord. <strong>Ricerche</strong> Giuseppe REMUZZI, Dr. Med.<br />
Segretario Scientifico Ariela BENIGNI, Dr. Sci. Biol., Ph. D.<br />
Progetti <strong>di</strong> Ricerca/Assistenza Amministrazione<br />
Daniela MELACINI, Dr. Sci. Biol.<br />
Servizio Grafico Scientifico<br />
Antonella PICCINELLI, Dr. Sci. Biol.<br />
Servizio Prevenzione e Protezione<br />
Responsabile Annamaria SEGALINI, Dr. Fisica,<br />
Flavio GASPARI, Dr. Chim.<br />
Biblioteca<br />
Responsabile Anna BOZZALE<br />
Valeria MIGLIOLI<br />
Manutenzione Generale<br />
Giancarlo GASPARI<br />
Ufficio Acquisti<br />
Luciana PROMETTI<br />
Segreteria <strong>di</strong> Direzione<br />
Antoinette van ENGELEN, Capo Segreteria<br />
IRFMN<br />
292<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Centro Aldo e Cele Daccò Ranica (Bg)<br />
Direzione<br />
Direttore Prof. Silvio GARATTINI, Dr. Med.<br />
Coord. <strong>Ricerche</strong> Giuseppe REMUZZI, Dr. Med.<br />
Segretario Scientifico Ariela BENIGNI, Dr. Sci. Biol., Ph. D.<br />
Direttore Sanitario Norberto PERICO, Dr. Med.<br />
Servizio Prevenzione e Protezione<br />
Responsabile Annamaria SEGALINI, Dr. Fisica,<br />
Paola BOCCARDO, Dr. Sci. Biol.<br />
Biblioteca ‘Mansueto Astori’<br />
Responsabile Anna BOZZALE<br />
Monica MINALI<br />
Ufficio Acquisti<br />
Monica MINALI<br />
Affari Regolatori<br />
Paola BOCCARDO, Dr. Sci. Biol.<br />
Segreteria <strong>di</strong> Direzione<br />
Daniela RICEPUTI, Capo Segreteria<br />
Segreteria Stu<strong>di</strong> Clinici<br />
Sara PERACCHI, Assitente Stu<strong>di</strong> Clinici<br />
Laura ARIOLI, Assitente Stu<strong>di</strong> Clinici<br />
Manutenzione Generale/Custode<br />
Giovanni GERVASONI<br />
IRFMN<br />
293<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2004</strong>
Change language