Faglig rapport 2010 - Helse Vest

303Forskerutdanning - postdoc 911458Line WergelandFunction of Flt3 signalling in a murine bone marrow transplantmodelProsjektansvarlig: Line Wergeland (line.wergeland@med.uib.no), Helse Bergen HFProsjektet er tilknyttet Flerregional behandlingstjeneste: Standard allogen benmargstransplantasjon.Flt3-signallering i en murin beinmargstransplantasjonsmodellVi har funnet en sammenheng mellom mutasjoner i genet til reseptor tyrosin kinasen Flt3 ogHdm2, en regulator av anti-onkogenet p53 hos en undergruppe av pasienter med akuttmyelogen leukemi (AML). Dette tyder på at Hdm2 kan knytte sammen to viktige signalveier iAML. Målet med studien er å utvikle en in vivo modell som kan øke forståelsen for AML.Genet som koder for tyrosin kinasen Flt3 er det hyppigst muterte genet i AML. Dette gir en konstitutivtaktiv signalering fra reseptoren og er assosiert med dårlig prognose. Et annet karaktertrekk ved AMLer at anti-onkogenet p53 kun er mutert i under 10 % av tilfellene, i sterk kontrast til andre kreftformerhvor inaktivering av p53 er en hovedårsak til kreftutviklingen. Vi har nylig vist at Hdm2 og Flt3 blirresiprokt regulert i AML-celler som utsettes for DNA-skade. I tillegg har vi funnet en undergruppe avAML pasienter med en spesiell type intern tandem duplikasjon (ITD). Denne ITDen inneholder enduplikasjon av et ubiquitin assosiert domene og pasienter med denne typen ITD ser ut til å ha lavereoverlevelse sammenlignet med andre ITD varianter. En annen svært interessant observasjon er atnivået av Flt3 i AML pasienter med denne ITD-varianten positivt korrelerer med nivået av p53regulatoren Hdm2. Vår hypotese er derfor at Hdm2 knytter sammen Flt3 og p53 signalveiene i AML ogytterligere molekylærbiologiske, cellebiologiske og til slutt ulike dyremodeller vil være viktig forforståelsen av sykdomsutviklingen i AML og for utvikling av nye målrettede terapiregimer.Prosjektansvarlig gikk ut i svangerskapspermisjon i august 2010, derfor har deler av prosjektet blittutsatt. Imidlertid fungerer avlen av p53-/-, mdm2-/- mus bra og vi har startet medbeinmargstransplantasjoner av stamceller som er genetisk manipulert. Resultatene fra disseforsøkene er lovende og mer vil komme tidlig i 2011. Vi har også laget et panel med Ba/F3 celler somuttrykker ulike former for Flt3, disse har vi nå begynt å bruke in vitro, og planlegger in vivo forsøk i2011 (når permisjonen er over).Sekvenseringen av Flt3 i materialet fra Nederland er godt i gang, dette er svært tidkrevende arbeid ogvi nyter godt av den ekspertisen vår samarbeidspartner Randi Hovland på Senter for medisinskgenetikk og molekylærmedisin har opparbeidet seg på dette feltet. Vi nærmer oss nå 100 sekvenserteITDer til sammen, så store datasett er aldri tidligere publisert for Flt3.I 2011 vil undertegnede ha et 6 måneders forskningsopphold på MD Andreson Cancer Center ilaboratoriet til Professor Guillermina Lozano. Denne gruppen har laget p53-/-, mdm2-/- musene, derforvil et opphold der være svært viktig for å bedre forstå genetikken til disse musene. Målet medoppholdet er å studere ulike Flt3 varianter i et system uten mdm2.Detection and Diagnosis - Blood