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Manual de Técnicas.DOC - USP

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Solução metiladora:<br />

HCl 1N...................0,8 ml<br />

álcool metílico...........100 ml<br />

RADQUIM 3<br />

Procedimento:<br />

Desparafinar, levar até álcool absoluto e colodionar os<br />

cortes.<br />

Metilar o tecido, à 60°, por cerca <strong>de</strong> 3 horas.<br />

Lavar em álcool e levar até a água.<br />

Imergir os cortes na solução corante durante 20 minutos.<br />

Lavar em dois banhos <strong>de</strong> ácido acético 0,1%, durante 1<br />

minuto cada banho.<br />

Desidratar diretamente em álcool butílico terciário,<br />

diafanizar e montar.<br />

Resultado: locais ricos em proteínas básicas aparecem<br />

corados <strong>de</strong> amarelo vivo.<br />

2.5. DETECÇÃO DE HISTIDINA<br />

Solução corante:<br />

naphtol yellow S...............1 g<br />

ácido acético..................1 ml<br />

água <strong>de</strong>stilada...............100 ml<br />

Solução metiladora:<br />

HCl 1N....................0,8 ml<br />

álcool metílico...........100 ml<br />

Solução acetiladora:<br />

Anidro acético.............40 ml<br />

Piridina...................60 ml<br />

Procedimento:<br />

Desparafinar, levar até o álcool e colodionar os cortes.<br />

Metilar o material por 3 horas.<br />

Lavar em álcool absoluto.<br />

Recolodionar.<br />

Deixar na solução acetiladora, por 24 horas.<br />

Lavar em piridina por 2 minutos.<br />

Lavar em álcool absoluto e levar até a água.<br />

Corar pela solução corante por 20 minutos.<br />

Lavar em dois banhos <strong>de</strong> ácido acético 0,1%, durante 1<br />

minuto cada banho.<br />

Desidratar diretamente em álcool butílico terciário,<br />

diafanizar e montar.

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