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PROTOCOL 1<br />
PROTOCOLO PARA OBTENÇÃO E FIXAÇÃO DE MATERIAL A SER<br />
CUIDADOS:<br />
PROCESSADO NO LABORATÓRIO DE BIOLOGIA CELULAR<br />
Tanto para microscopia <strong>de</strong> luz quanto para microscopia<br />
eletrônica, <strong>de</strong>ve-se tomar cuidado com:<br />
1) não <strong>de</strong>ixar o material secar enquanto está sendo<br />
recortado.<br />
2) usar sempre uma gilete nova para recortar o material.<br />
3) o volume do fixador <strong>de</strong>ve ser, pelo menos, 20 vezes<br />
maior que o volume do fragmento a ser fixado.<br />
1. MICROSCOPIA DE LUZ<br />
O material <strong>de</strong>verá ser fixado em paraformal<strong>de</strong>ído a 4% em<br />
tampão fosfato. Este fixador po<strong>de</strong>rá ser obtido no<br />
Laboratório <strong>de</strong> Biologia Celular.<br />
O material <strong>de</strong>verá ter, pelo menos um dos lados, com, no<br />
máximo, 3 mm <strong>de</strong> espessura, po<strong>de</strong>ndo ter a forma <strong>de</strong> um<br />
paralelepípedo. Assim, o fixador po<strong>de</strong>rá penetrar no<br />
interior do fragmento.<br />
O material <strong>de</strong>ve ser <strong>de</strong>ixado no fixador por, no mínimo, 24<br />
horas e, no máximo, 48 horas, <strong>de</strong>vendo ser então colocado<br />
no álcool 70 ou ser trazido para o Laboratório <strong>de</strong> Biologia<br />
Celular para ser processado.
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