Manual de Técnicas.DOC - USP

FIBRMATR 8
depósito em 200 ml de etanol 95° aquecido. Deixar esfriar
e adicionar o HCl.
Guardar a solução na geladeira. Dura um ano ou mais.
A) Procedimento para os cortes que não serão oxidados:
Desparafinar e hidratar até álcool 95°.
Corar pela Resorcina-fucsina, por 1 hora, à temperatura
ambiente. A Resorcina-fucsina deve estar à temperatura
ambiente antes de colocar os cortes para corar.
Lavar na água corrente durante 5 minutos.
Colocar em duas trocas de álcool 70°durante 10 minutos no
total. Nesta etapa vai ocorrer a diferenciação.
Desidratar, diafanizar e montar.
Se necessário, depois do álcool 70°,remover a coloração de
fundo passando em uma solução de álcool-ácido a 1% (1 ml
de HCl concentrado em 99 ml de álcool 70). Controlar ao ao
microscópio tendo o cuidado de preservar a coloração das
fibras mais finas; após a diferenciação em álcool-ácido
lavar em água corrente.
B) Procedimento para cortes que serão oxidados:
Desparafinar e hidratar até água.
Pingar sobre os cortes a solução aquosa de OXONA 10% e
deixar oxidando durante 40 minutos (ver observação b.).
Lavar em água corrente por 5 minutos.
Passar pelo álcool 70°.
Passar pelo álcool 95°.
Corar pela Resorcina-fucsina durante 1 hora, à temperatura
ambiente.
Lavar na água corrente durante 5 minutos.
Colocar em duas trocas de álcool 70°durante 10 minutos no
total. Nesta etapa vai ocorrer a diferenciação.
Desidratar, diafanizar e montar.
Se necessário, depois do álcool 70°,remover a coloração de
fundo passando em uma solução de álcool-ácido a 1% (1 ml
de HCl concentrado em 99 ml de álcool 70°). Controlar ao
ao microscópio tendo o cuidado de preservar a coloração
das fibras mais finas; após a diferenciação em álcoolácido
lavar em água corrente.
Resultado: nos cortes que não foram submetidos à oxidação
coram-se fibras elásticas e elaunínicas; nos cortes
submetidos à oxidação coram-se fibras elásticas,
elaunínicas e oxitalânicas.