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Manual de Técnicas.DOC - USP

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7.6. PICROSSÍRIUS - HEMATOXILINA<br />

FIBRMATR 7<br />

Sírius Red..............................0,2 g<br />

Solução saturada <strong>de</strong> ácido pícrico.......100 ml<br />

Misturar e colocar um pouco <strong>de</strong> ácido pícrico (em pó) para<br />

que apareça um precipitado no fundo do frasco.<br />

Procedimento:<br />

Desparafinar e levar as lâminas até água.<br />

Corar durante 1 hora no Picrossírius à temperatura<br />

ambiente.<br />

Lavar em água corrente por 5 minutos.<br />

Corar pela Hematoxilina <strong>de</strong> Harris por 6 minutos (ou menos,<br />

se a hematoxilina for nova).<br />

Lavar por 10 minutos em água corrente.<br />

Montar.<br />

Observações:<br />

a) Trocar o corante uma vez por mês se este for muito<br />

utilizado.<br />

b) A solução <strong>de</strong>verá estar sempre saturada.<br />

c) Especificação do Sirius Red: F 3 B 200 (Mobay Chemical<br />

Co., Union, NJ).<br />

d) Para experimentos quantitativos <strong>de</strong>ve-se omitir a<br />

contracoloração pela hematoxilina.<br />

e) Ler sobre o método do Picrossírius associado à digestão<br />

pela papaína em DIGESTÃO ENZIMÁTICA.<br />

7.7. RESORCINA-FUCSINA DE WEIGERT COM E SEM OXIDAÇÃO<br />

Solução corante: Resorcina-Fucsina<br />

Solução oxidante: Oxona 10% em água <strong>de</strong>stilada<br />

Preparo da Solução corante:<br />

Água <strong>de</strong>stilada ..............200 ml<br />

Fucsina básica ................2 g<br />

Resorcina .....................4 g<br />

Cloreto férrico a 30%..........50 ml<br />

Álcool 95.....................200 ml<br />

HCl concentrado ................2 ml<br />

Adicionar a fucsina e a resorcina na água <strong>de</strong>stilada.<br />

Colocar esta solução em ebulição. Adicionar o cloreto<br />

férrico. Continuar em ebulição por 4 minutos. Esperar<br />

esfriar e filtrar. Descartar o filtrado e <strong>de</strong>ixar secar o<br />

<strong>de</strong>pósito retido no papel <strong>de</strong> filtro. Dissolver este

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