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Manual de Técnicas.DOC - USP

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1. FIXAÇÃO<br />

HISTORES 3<br />

Uma das dimensões do material a ser fixado <strong>de</strong>verá medir no<br />

máximo 1 a 2 mm para que o fixador penetre bem. A fixação<br />

<strong>de</strong>verá ser feita em solução <strong>de</strong> paraformal<strong>de</strong>ído a 4% em PBS<br />

neutro ou solução <strong>de</strong> glutaral<strong>de</strong>ído a 2% isotônica e<br />

neutra. O tempo <strong>de</strong> fixação <strong>de</strong>verá ser <strong>de</strong> 6 a 12 horas<br />

(i<strong>de</strong>al é 8 horas).<br />

2. DESIDRATAÇÃO<br />

Álcool 70°, por uma noite (no mínimo por 2 horas);<br />

Deixar em acetona pura, por 2 a 3 dias, trocando-a<br />

diariamente.<br />

A <strong>de</strong>sidratação po<strong>de</strong>rá ser feita também da seguinte maneira:<br />

Desidratar em álcool 70°, por uma noite;<br />

2 banhos em álcool 95°, <strong>de</strong> 30 minutos cada<br />

4 banhos em álcool absoluto (total <strong>de</strong> 2 a 3 horas)<br />

Órgãos que contenham ar, como o pulmão, <strong>de</strong>vem ser<br />

colocados no vácuo por aproximadamente 30 minutos, durante<br />

a passagem no álcool 70°.<br />

3. INCLUSÃO<br />

O material po<strong>de</strong> ser incluído em cápsulas <strong>de</strong> gelatina<br />

(formato <strong>de</strong> cápsulas <strong>de</strong> remédio) ou em forminhas<br />

retangulares <strong>de</strong> plástico, que se prestam mais pelo próprio<br />

formato e por permitirem mudar o plano <strong>de</strong> corte.

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