Manual de Técnicas.DOC - USP

2. MICROSCOPIA ELETRÔNICA
PROTOCOL 2
O material deverá ser fixado em glutaraldeído a 2% em
tampão fosfato 0,15M em dois frascos, sendo que, em um
deles, deve-se dissolver ácido tânico 0,1% no
glutaraldeído.
O glutaraldeído deve ser guardado congelado até a hora da
cirurgia. Na hora de usar, em um dos frascos colocar o
ácido tânico pesado na quantidade apropriada e, antes de
colocar o glutaraldeído, etiquetar os frascos
GLUTARALDEÍDO e GLUTARALDEÍDO COM ÁCIDO TÂNICO.
Pouco antes de usar, descongelar o glutaraldeído apenas
com o calor da mão e colocá-lo, na quantidade apropriada
nos frascos.
O material deve ter, pelo menos um dos lados, com, no
máximo, 1 mm de espessura. Aconselha-se a fazer com forma
de um paralelepípedo de 10 mm x 1 mm x 1 mm.
A fixação deve durar 2 horas. Deve-se anotar a hora em que
o material foi colocado no fixador e entregá-lo no
Laboratório de Biologia Celular antes de completar o tempo
de fixação; se isto não for possível, deixar o material na
geladeira (não no congelador) e entregá-lo ao Laboratório
o quanto antes. Isto é essencial, pois cada minuto a mais
no fixador contribui para piorar a qualidade do material.
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